СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ДЕСТРУКТИВНО-ДИСТРОФИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ В СУСТАВАХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2005 года по МПК A61K31/70 A61P19/02 

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной клинической травматологии и хирургии и может быть использовано при коррекции деструктивно-дистрофических изменений в суставах животных.

В настоящее время в литературе описаны способы коррекции, при которых используют три группы фармакологических средств: стероидные противовоспалительные средства, нестероидные противовоспалительные средства и хондропротекторные препараты [1-6].

Однако исследования, предпринятые с целью выявить влияние на суставной хрящ стероидных и нестероидных препаратов, свидетельствуют о том, что коррекция деструктивно-дистрофических изменений в суставах ухудшает состояние из-за ущерба, наносимого суставному хрящу: ингибирование обменных процессов в хондроцитах, влекущее за собой нарушение организации матрикса, что значительно снижает способность хрящей к нагрузкам. Таким образом, в условиях применения этих препаратов неадекватные нагрузки приводят к дополнительной травматизации суставного хряща.

Указанные способы коррекции деструктивно-дистрофических изменений в суставах животных стероидными и нестероидными противовоспалительными препаратами не являются оптимальными с точки зрения эффективности, так как приводят к нарушению организации структуры хряща.

Наиболее близким к заявляемому является способ, обеспечивающий восстановление видоспецифического расположения зон хрящевого покрытия [7], однако он предусматривает использование глюкозамина гидрохлорида, в том числе в комплексе с другими препаратами, только для человека в дозе 400 мг.

Задача предлагаемого изобретения - повысить эффективность коррекции деструктивно-дистрофических изменений суставов животных и разработать схему коррекции глюкозамином гидрохлоридом деструктивно-дистрофических поражений в суставном хряще животных в условиях экспериментального моделирования дистрофического процесса.

Поставленная задача достигается тем, что половозрелым животным вводят внутрикостно глюкозамина гидрохлорид в дозе 15-25 мг/кг 1-2 раза в неделю в течение месяца, при этом вещество немедленно поступает в кровеносное русло, минуя барьер печени, и тем самым более активно проявляет свое действие, что является важным условием при лечении животных, находящихся в тяжелом состоянии и с ослабленной сердечной деятельностью, благодаря значительному расстоянию места инъекции от сердца и дополнительным путям по многочисленным как интра-, так и экстраорганным венам кости поступление лекарственной жидкости в сосудистую систему замедляется, в результате нагрузка на ослабленное сердце не сразу возрастает, а постепенно, это дает возможность увеличить разовую дозу лекарственной жидкости, что особенно имеет важное значение при явлениях дегидратации организма, фиксация иглы в кости позволяет вводить лекарственный раствор дробными дозами, сокращаются количество инъекций и доза препарата в целом.

Глюкозамина гидрохлорид является препаратом хондропротекторного действия, ингибирующим деструктивно-дистрофические поражения в суставах животных на стадии их воспроизведения.

Пример. Предлагаемый способ был воспроизведен в серии экспериментов: первая - интактные животные (половозрелые собаки); вторая - моделирование деструктивно-дистрофических поражений путем введения в коленный сустав преднизолона в дозе 15-25 мл 1-2 раза в две недели в течение месяца; третья - моделирование деструктивно-дистрофических поражений путем введения в коленный сустав преднизолона в дозе 15-25 мл 1-2 раза в две недели в течение месяца, введение буфера; четвертая - моделирование деструктивно-дистрофических поражений путем введения в коленный сустав преднизолона в дозе 15-25 мл 1-2 раза в две недели в течение месяца+глюкозамина гидрохлорид в дозе 15-25 мг/кг внутрикостно 1-2 раза в неделю в течение месяца. Животных выводили из эксперимента путем передозировки тиопентала натрия с соблюдением правил проведения работ с использованием экспериментальных животных и требований Министерства здравоохранения Союза Советских Социалистических Республик №12000-496 от 2 апреля 1980 г.

Контроль за состоянием суставов включал в себя комплекс методов, в том числе тонкое анатомическое препарирование, с последующим описанием и функциональным анализом их структур.

Микроморфологическим исследованиям подвергали свежеизвлеченные образцы суставного хряща и субхондральной кости мыщелков бедренной кости и боковых связок коленного сустава от 32 половозрелых собак.

Изучение общей морфологической картины в световом микроскопе (Jenamed-2, Каrl-С, Jеnа) проводили после окраски срезов гематоксилином и эозином, фуксилином по Харту для оценки эластических волокон. Морфометрию структур осуществляли под микроскопом "МБИ-6" (окуляр (ок.) 10, объектив (об.) 8, 10) с использованием окулярмикрометра 1*16.

Изучение ориентационной упорядоченности основных макромолекул матрикса проводили в поляризованном свете под микроскопом "Роlmy-А" (Польша) путем количественной оценки (с помощью компенсатора λ/4 по Senarmont) величины рефракции макромолекул, выявленных в гистологических реакциях: для коллагена - феноловая и с пикроcириусом красным, с толуидиновым синим для гликозаминогликанов (ГАГ) при рН 1,5; 2,5; 3,5.

Исследование трибомеханичеcких свойств суставного хряща мыщелков бедренной и большеберцовой костей выполняли на вибротрибометре "Орtimol-SRV" (Германия-Швейцария) с автоматической регистрацией силовой нагрузки.

Весь цифровой материал подвергали математической обработке по программе "Интегрированный статистический пакет Statgraf, версия 2-6" для IВМ РС/АТ.

Применение глюкозамина гидрохлорида в поврежденном суставе вызывает комплекс структурных преобразований адаптационного генеза, который приводит в конечном итоге к полному или частичному восстановлению его функциональной пригодности (фиг.1-8).

Морфологическую манифестацию коррекции деструктивно-дистрофических изменений в суставах животных можно охарактеризовать следующим образом.

Деструкция суставного хряща после инъекции преднизолона. Инвазия сосудов в глубокую зону хряща после инъекции преднизолона. Гематоксилин и эозин. Ок. 10, об. 8 (фиг.1).

Деструкция субхондральной кости и хондроидный пролиферат в ней после инъекции преднизолона. Гематоксилин и эозин. Ок. 10, об. 8 (фиг.2).

Субхондральный остеосклероз в области повреждения суставного хряща после инъекции преднизолона. Эбнер. Ок. 10, об. 8 (фиг.3, 4).

Замещение дефекта волокнистым хрящом после использования глюкозамина гидрохлорида. Гематоксилин и эозин. Ок. 10, об. 10 (фиг.5, 6).

Стадийность формирования поверхностной зоны хряща при использовании глюкозамина гидрохлорида. Гематоксилин и эозин. Стадия волокнистого хряща. Об. 10, ок. 10 (фиг.7). Стадия гиалинового хряща. Ок. 10, ок. 8 (фиг.8).

Через месяц после первой инъекции препарата подвижность сустава была восстановлена. Суставной хрящ на значительном протяжении сохранял блеск, а его тусклость отмечалась лишь вблизи от зоны дефекта.

Зона дефекта суставного хряща была заполнена хондроидным пролифератом, характер которого имел специфику структурного проявления, обусловленную размерами поврежденного участка. Клеточная популяция регенерата представлена в основном гипертрофированными хондроцитами, что может определять их оксифильные свойства. При значительном диастазе начальным этапом репаративного хондрогенеза являлось образование соединительно-тканного регенерата, как бы связывающего между собой неповрежденные участки суставных поверхностей, субрегенераторно дифференцировался волокнистый хрящ.

Результатом репаративных реактивных преобразований со стороны хряща явилось постепенное выравнивание нарушенных контуров суставной поверхности и образование целостного хрящевого покрытия. Однако новообразованный суставной хрящ имел тканеспецифические особенности, отличающие его от таковых у интактных особей, при сохранении структурных зон, что и у контрольных животных.

При анализе степени ориентационной упорядоченности макромолекул межклеточного вещества показано, что регенерат в суставном хряще представлен ориентированными коллагеновыми структурами, соответствующими контрольным особям: тангенциальными в поверхностной и вертикальными в промежуточной и глубокой зонах. Вместе с тем на гистологических срезах рефракция этого фибриллярного белка гетерогенна, что может быть связано с неполным завершением процессов внутритканевой дифференцировки вновь образованного хряща. В суставном хряще повышенное содержание высокосульфатированных фракций гликозаминогликанов (ГАГ), что указывает на его биомеханическое совершенство.

Проведенные исследования позволяют заключить, что источником образования хрящевого регенерата после использования глюкозамина гидрохлорида может являться синовиальный паннус суставной капсулы, инициирующий последовательность в репаративной регенерации суставного хряща (стадии волокнистого и гиалинового хрящей). Глюкозамина гидрохлорид стимулирует также внутритканевую дифференцировку регенерата в сторону хондрогенеза.

В субхондральной кости выявлены репаративные преобразования, заключающиеся в стазе и запустевании инвазированных сосудов, увеличении количественного представительства остеобластов и остеоцитов. В глубоких отделах сохранялись очаги деструкции кости, однако вблизи них активно протекали процессы регенерации. Кроме того, обнаруживались обширные зоны хондроидного пролиферата, состоящие из одиночных хондроцитов, изогенных групп, гипертрофированных форм и значительных по площади участков разрушенного хряща.

Таким образом, внутрикостное использование глюкозамина гидрохлорида индуцирует репаративные процессы в суставном хряще, оказывая хондропротекторный эффект, и при данном способе вещество немедленно поступает в кровеносное русло, минуя барьер печени, и тем самым более активно проявляет свое действие, что является важным условием при лечении животных, находящихся в тяжелом состоянии и с ослабленной сердечной деятельностью, благодаря значительному расстоянию места инъекции от сердца и дополнительным путям по многочисленным как интра-, так и экстраорганным венам кости поступление лекарственной жидкости в сосудистую систему замедляется, в результате нагрузка на ослабленное сердце не сразу возрастает, а постепенно, это дает возможность увеличить разовую дозу лекарственной жидкости, что особенно имеет важное значение при явлениях дегидратации организма, фиксация иглы в кости позволяет вводить лекарственный раствор дробными дозами, сокращаются количество инъекций и доза препарата в целом, которая является наиболее эффективной.

Использованные источники:

1. Liposomeincorporated corticosteroids I. The interaction of liposomal cortisol palmitate with inflammatory sinovial membrane / I.H.Shaw, C.G.Khight, T.D.P. Page et al. // Br. J. Exper. Patolog. - 1979. - Vol. 60. - P.142.

2. Intraarticular therapy with liposomal steroids. A comparative study in rabbits / D.L.Smith, J.Kappes, P.Bentley, R.Bennety // Arthritis Rheum. - 1980. - №6. - P.748.

3. Gray R.G. Intraarticular corticosteroides / R.G.Gray, N.L.Gottlieb // Clin. Orthopaedics and Releated Research. - 1983. - №177. - Р.235-264.

4. Лепахин В.К. Клиническая фармакология с международной номенклатурой лекарств / В.К.Лепахин, Ю.Б.Белоусов, В.С.Моисеев. - М.: Изд-во Ун-та дружбы народов им. П.Лумумбы, 1988. - 288 с.

5. Hess E.V. Cartilage metabolism and antiinflammatory drungs in osteoarthritis / E.V.Hess, J.H.Herman // Amer. J. of Med. - 1986. - Vol. 81, Supl. 5B. - P.36-43.

6. Pat. 2101585, GB, INT CL CO7H 5/06, A 61K 31/70. Stable compound of glucosamine sulfate, a process for its preparation and pharmaceutical compositions containing this compound / P. Senin, F. Macovec, L. Rovati (Italy). Appl. Publ. 19.01.83, №8211996.

7. Остеоартрозы. Пути фармакологической коррекции. / Н.В.Дедух, И.А.Зупанец, В.Ф.Черных, С.М.Дроговоз. - Харьков: Основа, 1992. - С.136-137.

Изобретение относится к ветеринарии и касается коррекции деструктивно-дистрофических изменений в суставах животных. Способ осуществляют в условиях экспериментального моделирования дистрофического процесса путем внутрикостного введения глюкозамина гидрохлорида в дозе 15-25 мг/кг 1-2 раза в неделю в течение месяца. Способ обеспечивает высокие местные концентрации лекарственного средства при его постепенном поступлении в кровеносное русло, минуя барьер печени, и, как следствие, оптимизацию хондропротекторного действия глюкозамина гидрохлорида и эффекта лечения, индуцированного в эксперименте у животного изменения в суставах. 8 ил.

Способ коррекции деструктивно-дистрофических изменений в суставах животных, включающий использование глюкозамина гидрохлорида, отличающийся тем, что в условиях экспериментального моделирования дистрофического процесса препарат вводят животным внутрикостно в дозе 15-25 мг/кг 1-2 раза в неделю в течение месяца.