СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ФОРМ ГЕМОРРАГИЧЕСКОГО ВАСКУЛИТА Российский патент 2005 года по МПК G01N33/49 

Изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням, и может быть использовано для дифференциальной диагностики форм геморрагического васкулита (ГВ), оценки вероятности развития осложненных форм ГВ и дифференцированного подхода к назначению лекарственной терапии на ранних этапах заболевания.

ГВ относится к системным васкулитам, в основе которого лежит иммунокомплексное воспаление сосудов микроциркуляторного русла, приводящее к нарушению кровотока, повреждению кожи, суставов, желудочно-кишечного тракта и почек.

Существуют различные мнения по поводу причины развития и прогрессирования иммунопатологического процесса, однако все аспекты поражения сосудистой стенки и воздействия на него лекарственных препаратов до сих пор окончательно не выяснены.

В последние годы, в патогенезе многих патологических состояний большую роль отводят нарушениям свободно-радикальных процессов, при этом в организме образуются токсические продукты - активные формы кислорода (АФК) (Фархутдинов P.P. Хемилюминесценция крови и мочи при типовых патологических процессах: Автореф. дис... д-ра мед. наук. - Уфа, 1988. - 44 с.). Согласно современным представлениям АФК играют активную роль в иммунном ответе и механизмах воспаления. Лейкоциты, привлеченные в очаг поражения, генерируют большое количество АФК, агрессивных к мембранным структурам организма, которые дают начало другим активным токсическим метаболитам (гипохлориту и др.).

Одним из методов изучения СРО является регистрация сверхслабого свечения - хемилюминесценции, которая возникает при образовании свободных радикалов (Фархутдинов P.P., Лиховских В.А. Хемилюминесцентные методы исследования. - Уфа, 1995. - 90 с.).

Прототипом изобретения является способ дифференциальной диагностики форм ГВ, основанный на совокупности клинических и лабораторных показателей, таких как геморрагические проявления, выраженность протеинурии и гематурии, показатели СОЭ, лейкоцитоза, уровень СРБ, ЦИК, IgA, фактора Виллебранда, данные ультразвукового и функционального (проба Реберга, радиоизотопное исследование) методов обследования, результаты гистологического исследования (Е.Л.Насонов, А.А.Баранов, Н.П.Шилкина. Васкулиты и васкулопатии. - Ярославль: Верхняя Волга, 1999. - 616 с.).

Однако эти критерии не унифицированы, не позволяют быстро оценить состояние больного, обследование проводится врачом-лаборантом, врачом функциональной диагностики, ряд исследований является трудоемким и дорогостоящим. От обоснованной диагностики формы заболевания во многом зависят адекватность проводимой терапии, сроки лечения больного и возможность прогнозирования вовлечения в патологический процесс почек.

Предлагаемый способ экономичен, не требует специальной подготовки больного и высокой квалификации персонала; время, затрачиваемое на анализ, - 10-15 мин.

Технический результат - повышение точности и оперативности способа. Данный технический результат достигается за счет измерения спонтанной люминол-зависимой хемилюминесценции цельной венозной крови.

Способ осуществляется следующим образом. Исследуют спонтанную люминол-зависимую хемилюминесценцию цельной венозной крови у больных ГВ прибором “Хемилюминомер-003”. Кровь на исследование забирают утром натощак в количестве 2 мл в пластиковую пробирку с гепарином из расчета 50 ед. гепарина на 1 мл крови. Регистрируют спонтанную светимость, максимальную светимость и светосумму свечения. Полученные результаты выражают в условных единицах по отношению к эталону свечения СФХМ - 1 ГОСТ 9411-81, суммарный световой поток которого составляет 5,1×10°5 квант/сек.

С применением предложенного способа обследовано 85 больных геморрагическим васкулитом в возрасте 16-65 лет (средний возраст 34±12,4 года), из них 32 - мужчин, 53 - женщины. Все пациенты обследованы в активный период болезни. Результаты показали увеличение показателей хемилюминесценции цельной крови (светосуммы свечения и максимальной светимости), что отражает интенсивность генерации нейтрофилами АФК, их функциональную активность и активность воспалительного процесса. Повышение показателей ЛЗ ХЛ цельной крови отмечается у всех больных ГВ. Средний уровень светосуммы свечения при кожно-суставной форме ГВ составил 13,29±1,80 усл. ед., при смешанной форме, рецидивирующем течении заболевания - 24,53±4,52 усл. ед., при почечной форме - 32,09±5,49 усл. ед., т.е. в 1,93 (р<0,001); 3,56 (р<0,001) и 4,65 (р<0,001) раза больше, чем в контрольной группе. Средний уровень максимальной светимости составил соответственно: 2,31±0,54 усл. ед., 4,54±1,09 усл. ед., 4,22±0,65 усл. ед., что в 1,88 (р<0,001); 3,69 (р<0,001); 3,43 (р<0,001) раза больше, чем в контрольной группе.

Пример 1. Больная 3., 16 лет, поступила на стационарное лечение с диагнозом: Геморрагический васкулит. При поступлении наблюдались: боль в коленных, голеностопных суставах, отеки на ногах, мелкоточечная геморрагическая, местами сливная, сыпь на ногах. В анализе крови - лейкоцитоз до 11,2·10⁹ /л, СОЭ - 24 мм/ч; СРБ ++, ЦИК 118, IgG 27,2 г/л, IgA 3,2 г/л, IgM 4,6 г/л. В анализе мочи - лейкоциты, эпителий плоский единичные в поле зрения. УЗИ органов брюшной полости, почек: без очаговой патологии. При поступлении проводилось хемилюминесцентное исследование крови. Для этого забирают 1 мл цельной крови, смешанной с 1 мл гепаринового буфера. ХЛ клеток крови измеряют при добавлении 0,02 мл люминола в концентрации 10^-5 М.

Результаты исследования: светосумма свечения - 12,81 усл. ед., максимальная светимость - 2,70 усл. ед.

Клинический диагноз: Геморрагический васкулит, кожно-суставная форма, активность II степени.

Пример 2. Больная П., 43 лет, поступила на стационарное лечение с диагнозом: Геморрагический васкулит, кожно-суставная форма. Больна ГВ в течение 5-6 лет. При поступлении наблюдались: боль и ограничение движений в суставах конечностей, мелкоточечная геморрагическая сыпь на ногах. В анализе крови - лейкоцитоз до 11·10⁹/л, СОЭ - 67 мм/ч; СРБ +++, ЦИК 358, IgG 39,6 г/л, IgA 3,6 г/л, IgM 5,2 г/л. В анализе мочи - эпителий плоский - в большом количестве. УЗИ органов брюшной полости, почек: без патологии. При поступлении проводилось хемилюминесцентное исследование крови. Для этого забирают 1 мл цельной крови, смешанной с 1 мл гепаринового буфера. ХЛ клеток крови определяют при добавлении 0,02 мл люминола в концентрации 10^-5 М.

Результаты исследования: светосумма свечения - 25,19 усл. ед., максимальная светимость - 4,75 усл. ед.

Клинический диагноз: Геморрагический васкулит, смешанная форма (с поражением кожи, суставов), рецидивирующее течение, активность III степени.

Пример 3. Больной Ж., 32 лет, поступил на стационарное лечение с диагнозом: Геморрагический васкулит. При поступлении наблюдались: повышение температуры тела до 38,5°С, боль в левой подвздошной, околопупочной области, общая слабость, мелкоточечная геморрагическая сыпь на руках и ногах. В анализе крови - лейкоцитоз до 9,9·10⁹ /л, СОЭ - 62 мм/ч, анемия - гемоглобин 48 г/л; СРБ ++, ЦИК 209, IgG 30,6 г/л, IgA 7,4 г/л, IgM 0,8 г/л. В анализе мочи - белок 33⁰/₀₀, эритроциты - сплошь, лейкоциты - в большом количестве. Изотопная ренография: снижена

функция обеих почек. УЗИ органов брюшной полости, почек: органы брюшной полости без очаговой патологии. Почки с ровными контурами: правая - 120×52×58 мм, левая - 119×53×55 мм, паренхима 21 мм, повышена эхогенность коркового слоя. При поступлении проводилось хемилюминесцентное исследование крови. Для этого забирают 1 мл цельной крови, смешанной с 1 мл гепаринового буфера. ХЛ клеток крови измеряют при добавлении 0,02 мл люминола в концентрации 10^-5 М.

Результаты исследования: светосумма свечения - 37,38 усл. ед., максимальная светимость - 4,93 усл. ед.

Клинический диагноз: Геморрагический васкулит, почечная форма, активность III степени.

Эффективность предлагаемого способа состоит в том, что с помощью метода регистрации хемилюминесценции цельной крови возможно объективно установить форму заболевания с целью назначения более интенсивной агрессивной терапии на ранних этапах диагностики и лечения (см. таблицу).

Таблица
Способ дифференциальной диагностики форм геморрагического васкулита Контрольная группа доноров (n=20)Кожно-суставная форма (n=35)Смешанная форма, рецидивирующее течение (n=35)Почечная форма (n=15)Светосумма свечения крови за 10 мин измерения в усл.ед.6,90±1,6313,29±1,80*24,53±4,52*32,09±5,49*Максимальная светимость, в усл.ед.1,23±0,362,31±0,54*4,54±1,09*4,22±0,65** - достоверность различий при р<0,01.

Изобретение относится к области медицины, в частности к способу дифференциальной диагностики форм геморрагического васкулита. Сущность изобретения: дополнительно исследуют спонтанную люминолзависимую хемилюминисценцию цельной венозной крови пациента, при этом определяют максимальную светимость и светосумму свечения. По увеличенному значению этих показателей относительно нормы диагностируют кожно-суставную, смешанную или почечную форму заболевания. Технический результат - способ повышает точность и оперативность диагностики. 1 табл.

Способ дифференциальной диагностики форы геморрагического васкулита, включающий исследование крови в активный период заболевания, отличающийся тем, что дополнительно исследуют уровень спонтанной люминолзависимой хемилюминисценции цельной венозной крови пациента и по увеличенному значению светосуммы свечения и максимальной светимости относительно нормы определяют кожно-суставную, смешанную или почечную форму заболевания.