СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА Российский патент 2005 года по МПК G01N33/49 G01N33/576 G01N33/92 

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии. В настоящее время основным способом определения активности хронического гепатита (ХГ) является морфологическое исследование биоптата печени (Майер К.П. Гепатит и последствия гепатита. Пер. с нем. - М.: ГЭОТАР Медицина, 1999. - 424 с.). Однако выполнить биопсию печени в поликлинических условиях не всегда представляется возможным как из-за наличия тех или иных противопоказаний, так и из-за отказа больного. Следует принимать во внимание то обстоятельство, что по биоптату печени мы можем оценить лишь 1/50000 ее часть, которая далеко не всегда адекватно отражает состояние целого органа. Во многом результат морфологического исследования зависит от индивидуальных качеств морфолога (его опыта, квалификации и т.д.).

Известен способ определения степени активности хронического гепатита путем исследования в сыворотке крови активности аланинаминотрансферазы (АЛТ). Если активность АЛТ в сыворотке крови менее 3 норм, то говорят о неактивной степени хронического гепатита, от 3 до 10 норм - умеренной степени активности и более 10 норм - высокой активности (Радченко В.Г., Шабро А.В., Нечаев В.В. Хронические заболевания печени. - СПб.: Лань, 2000. - 30 с.).

Недостатками данного метода является высокая стоимость, сложность исследования, при этом от лаборанта требуется высокая квалификация, а также тот факт, что АЛТ является неспецифичным показателем, он повышается при инфаркте миокарда, миокардиодистрофии и т.д.

Целью является повысить эффективность диагностики степени активности хронического гепатита путем изучения уровня перекисей липидов и суммарной антиокислительной активности в сыворотке крови у данных больных.

Сущность изобретения состоит в том, что в сыворотке крови определяют уровень перекисей липидов (ПЛ) и суммарную антиокислительную активность (АОА), и при значении ПЛ 83,9 отн.ед. и выше, АОА 15,5 отн.ед. и ниже диагностируют высокую активность ХГ при значении ПЛ в пределах 83,8-74,5 отн.ед., АОА - 24,3-15,6 отн.ед. - умеренную степень активности, при ПЛ в пределах 74,4-66,0 отн.ед., АОА - 24,4-33,5 отн.ед. - неактивную степень.

Доказано, что целостность клеточных мембран определяется соотношением показателей свободнорадикального окисления липидов (СРОЛ) и антиоксидантной системой. Процессы СРОЛ плазмы крови отражают таковые в гепатоцитах и по изменению показателей СРОЛ плазмы можно судить о состоянии этих процессов в ткани печени. Рост активности показателей СРОЛ и снижение антиоксидантной активности в сыворотке крови однозначно свидетельствует о дестабилизации клеточных структур, т.е. в нашем случае о деструкции мембран гепатоцитов.

Способ осуществляется следующим образом: в сыворотке крови определяют уровень ПЛ и АОА с помощью регистрации активированной родамином Ж хемилюминесценции в присутствии двухвалентного железа (Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Азимбаев Т.К. Оценка антиокислительной и антирадикальной активности веществ и биологических объектов с помощью железоинициированной хелмилюминесценции // Биофизика. - 1992. - №37. - С.1041-1047) на хемилюминометре ИРА-03 с использованием ФЭУ-127.

В норме АОА составила 33,6 отн.ед. и выше, уровень ПЛ - 65,9 отн.ед. и ниже в сыворотке крови.

Высокую активность ХГ диагностируют при величине ПЛ 83,9 отн.ед. и выше, АОА 15,5 отн.ед. и ниже, умеренная степень активности при значение ПЛ в пределах 83,8-74,5 отн.ед. и АОА - 24,3-15,6 отн.ед. и неактивная степень при ПЛ - 74,4-66,0 отн.ед., АОА - 24,4-33, 5 отн.ед.

Пример 1. Больной К., 32 года. Поступил с жалобами на боль в правом подреберье, резкую слабость, снижение работоспособности, повышенную сонливость, периодически носовые кровотечения, тошноту, снижение аппетита. Болен в течение 2 лет, отмечает в анамнезе 3-кратное переливание крови. При объективном исследовании выявляется умеренная болезненность в правом подреберье. Печень выступает из под края реберной дуги на 4 см. Размеры 10-15-13 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови - гипохромная анемия, мочи - без особенностей. Получена сыворотка крови и проведено определение уровня ПЛ. Он составил 84,2 отн. ед., АОА - 14,1 отн.ед. На основании того, что значения находятся в пределах: ПЛ 83,9 отн.ед. и выше, АОА 15,5 отн.ед. и ниже диагностирована высокая активность ХГ. Это подтверждалось при биохимическом анализе крови (об. белок - 72, альбумины - 55, глобулины - 46 (α₁ - 3, α₂ - 11, β - 12, γ - 20), АЛТ - 854, ACT – 379, ГГТ - 124, Щ.Ф. 138, тимоловая проба - 8,5). Вирусологические тесты: HBs - Ag - положительный. При ультразвуковом исследовании: печень значительно увеличена, отражение от паренхимы усиленное, крупнозернистое, внутрипеченочные вены не расширены, селезенка не увеличена. Рекомендовано проводить комплексное лечение ХГ с использованием антиоксидантных препаратов.

Пример 2. Больная М., 45 лет. Поступила с жалобами на слабость, повышенную утомляемость, аппетит снижен. Больна в течение 5 лет. При объективном исследовании: печень выступает из под края реберной дуги на 2 см. Размеры на 10-12-11 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови, мочи в пределах нормы. Проведено биохимическое исследование крови и исследование параметров СРОЛ. Уровень ПЛ составил 79,3 отн. ед., АОА - 21,5 отн.ед.. На основании того, что значения находятся в пределах: ПЛ 83,8-74,5 отн.ед., АОА 24,3-15,6 отн. ед. диагностирована умеренная степень активности ХГ. Это подтверждалось при биохимическом анализе крови (об. белок - 72, альбумины - 58, глобулины - 39 (α₁ - 3, α₂ - 11, β - 10, γ - 15), АЛТ - 231, ACT - 174, ГГТ - 90, Щ.Ф. - 107, тимоловая проба - 4,5). Вирусологические тесты: HBs -Ag - положительный. При ультразвуковом исследовании: печень увеличена, отражение от паренхимы усиленное, среднезернистое, внутрипеченочные вены не расширены, селезенка не увеличена.

Пример 3. Больная А., 38 лет. Страдает хроническим вирусным гепатитом С в течение 3 лет. Жалоб не предъявляет. При объективном исследовании: печень по краю реберной дуги. Размеры на 8-9-10 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови, мочи в пределах нормы. Проведено биохимическое исследование крови и исследование параметров СРОЛ. Уровень ПЛ составил 71,1 отн.ед., АОА - 25,2 отн.ед. На основании того, что значения находятся в пределах: ПЛ 74,4-66,0 отн.ед., АОА 24,4-33,5 отн.ед. диагностирована неактивная степень ХГ. При биохимическом анализе крови (об. белок - 80, альбумины - 53, глобулины - 46,9 (α₁ - 4,2,02-10,5, β - 16,2, γ - 16), АЛТ-80, ACT-54, ГГТ - 20, Щ.Ф. - 127, тимоловая проба - 4,0) определена неактивная степень ХГ. Вирусологические тесты: антиHCV - положительный. При ультразвуковом исследовании: печень не увеличена, отражение от паренхимы усиленное, мелкозернистое, внутрипеченочные вены не расширены, селезенка не увеличена. Показано динамическое наблюдение, при ухудшении показателей показано комплексное лечение с использованием антиоксидантов.

Всего предлагаемым способом обследовано 79 человек. Из них 18 с высокой активностью ХГ, 20 - с умеренной степенью активности, 18 – с неактивной степенью и 23 практически здоровых людей. Данные сведены в таблицы, где представлены значения АОА (отн.ед.) сыворотки крови у больных хроническим гепатитом при различной степени активности заболевания (табл. 1) и уровень ПЛ (отн.ед.) сыворотки крови у больных хроническим гепатитом при различной степени активности (табл. 2). В норме АОА составила 33,6 отн.ед. и выше, уровень ПЛ - 65,9 отн.ед. и ниже в сыворотке крови. У всех обследуемых больных (табл.1, 2) регистрируется повышение уровня ПЛ и снижение АОА в сыворотке крови независимо от степени активности ХГ по отношению к контрольной группе (Р_3-4<0,05). При сопоставлении изменения степени активности заболевания и уровня ПЛ и АОА в сыворотке крови у пациентов с ХГ отмечается, что увеличению степени активности заболевания соответствует повышение уровня ПЛ и снижение АОА. Так, высокой активности ХГ соответствует наибольший уровень ПЛ и наименьшая АОА в сыворотке крови (P_1-2<0,05, P_1-3<05).

Предлагаемый способ достаточно информативен. Он наиболее полно отражает состояние биомембран гепатоцитов, обеспечивает высокую точность в сочетании с простотой и доступностью, исключает влияние субъективных факторов и может использоваться как экспресс-метод диагностики степени активности хронического гепатита в поликлинических условиях. Все это позволяет ускорить и упростить обследование данных больных с минимальными затратами средств, определяет показание для назначения антиоксидантных препаратов, а также для оценки эффективности проводимой терапии.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА.

 Высокая активностьУмеренная степень активностиНеактивная степеньЗдоровыеN18201823M±m (отн.ед)10,56±2,2820,45±1,8228,31±2,5238,82±1,95А (отн.ед)15,5 и ниже24,3-15,624,4-33,533,6 и вышеРР_1-2<P_2-3<Р_1-3<Р_3-4<Табл.1. Высокая активностьУмеренная степень активностиНеактивная степеньЗдоровыеN18201823M±m (отн.ед)89,25±3,5078,62±1,5170,43±2,6161,62±2,15А (отн.ед)83,9 и выше83,8-74,574,4-66,065,9 и нижеРP_l-2<Р_2-3<Р_1-3<Р_3-4<Табл. 2.

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии. Способ заключается в том, что в сыворотке крови определяют уровень перекисей липидов (ПЛ) и суммарную антиокислительную активность (АОА) и при значении ПЛ 83,9 и выше, АОА 15,5 и ниже определяют высокую активность хронического гепатита, при ПЛ в пределах 83,8-74,5, АОА 24,3-15,6 умеренную степень активности, при ПЛ в пределах 74,4-66,0, АОА - 24,4-33,5 отн.ед. - неактивную степень. Технический результат - повышение информативности способа, точности в сочетании с его простотой и доступностью, что позволяет ускорить и упростить обследование больных, определить показание для лечения и оценить эффективность проводимой терапии. 2 табл.

Способ определения активности хронического гепатита путем биохимического исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что определяют уровень перекисей липидов (ПЛ) и суммарную антиокислительную активность (АОА) и при значении ПЛ 83,9 и выше, АОА 15,5 и ниже определяют высокую активность хронического гепатита, при ПЛ в пределах 83,8-74,5, АОА 24,3-15,6 умеренную степень активности, при ПЛ в пределах 74,4-66,0, АОА 24,4-33,5 отн.ед - неактивную степень.