СПОСОБ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ АКТИВНОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА Российский патент 2007 года по МПК G01N33/50 

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии.

В настоящее время для оценки степени активности хронического гепатита (ХГ) рекомендуется использовать гистологический индекс степени активности (Радченко В.Г., Шабро А.В., Нечаев В.В. Хронические заболевания печени. - СПб.: Лань, 2000. - 53 с.).

Однако следует принимать во внимание то обстоятельство, что по морфологическому исследованию биоптата печени мы можем оценить лишь 1/50000 ее часть, которая далеко не всегда адекватно отражает состояние целого органа. Во многом результат морфологического исследования зависит от опыта и квалификации морфолога. Кроме этого, выполнить биопсию печени в амбулаторных условиях не всегда представляется возможным как из-за наличия тех или иных противопоказаний, так и из-за отказа больного.

Известен способ определения степени активности хронического гепатита путем исследования в сыворотке крови активности аланинаминотрансферазы (АЛТ). Если активность АЛТ в сыворотке крови менее 3 норм, то говорят о неактивной степени хронического гепатита, от 3 до 10 норм - умеренная степень активности и более 10 норм высокая активность (Подымова С.Д. Болезни печени. - М.: Медицина, 1998. - 321 с.).

Недостатками данного метода является высокая стоимость, сложность исследования, при этом от лаборанта требуется высокая квалификация, а также тот факт, что АЛТ является неспецифичным показателем, он повышается при инфаркте миокарда, миокардиодистрофии и т.д.

Целью изобретения является повышение эффективности и надежности диагностики степени активности хронического гепатита путем изучения уровня генерации активных форм кислорода в цельной крови у данных больных.

Сущность изобретения состоит в том, что в цельной крови определяют уровень генерации активных форм кислорода (АФК) и при значении генерации АФК 43,7×10⁵ квант/с 4π и выше диагностируют высокую степень активности хронического гепатита, при значении АФК в пределах 43,6×10⁵ квант/с 4π - 37,6×10⁵ квант/с 4π - умеренную степень активности, при АФК в пределах 37,5×10⁵ квант/с 4π - 30,1×10⁵ квант/с 4π - неактивную степень.

Доказано, что АФК является мощным инициатором свободнорадикального окисления липидов, оказывающего альтерирующее действие на структуру клеточных мембран. Цитотоксическое действие АФК определяется как "автоокислительное повреждение" клеточных мембран. Цитотоксичность АФК и продуктов СРОЛ взаимосвязана, носит синергический характер и проявляется на уровне мембранных структур клетки.

Избыточная генерация АФК однозначно свидетельствует о дестабилизации клеточных структур, т.е. в нашем случае деструкции мембран гепатоцитов.

Способ осуществляется следующим образом: в цельной крови определяют уровень генерации АФК с помощью люминолзависимой хемилюминесценции лейкоцитов цельной крови, стимулированной кристаллами сульфата бария (Шерстнев М.П. Методика регистрации люминолзависимой хемилюминесценции лейкоцитов цельной крови стимулированной кристаллами сульфата бария // Вопр. хемилюминесценции. - 1991. - №2. - С.20-22) на хемилюминометре ИРА-03 с использованием ФЭУ-127.

В норме генерация АФК составляет 30,0×10⁵ квант/с 4π и ниже в цельной крови.

Высокую степень активности ХГ диагностируют при величине генерации АФК 43,7×10⁵ квант/с 4π и выше, умеренную степень активности при значение генерации АФК в пределах 43,6×10⁵ квант/с 4π - 37,6×10⁵ квант/с 4π и неактивную степень при генерации АФК - 37,5×10⁵ квант/с 4π - 30,1×10⁵ квант/с 4π.

Пример 1. Больной М., 28 года. Поступил с жалобами на боль в правом подреберье, резкую слабость, снижение работоспособности, повышенная утомляемость, сонливость, периодически носовые кровотечения, тошноту, снижение аппетита. Болен в течение 3 лет, отмечает в анамнезе 2-кратное переливание крови. При объективном исследовании выявляется умеренная болезненность в правом подреберье. Печень выступает из-под края реберной дуги на 3 см. Размеры 10-15-13 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови - гипохромная анемия, мочи - без особенностей.

Получена кровь из концевой фаланги четвертого пальца левой руки и проведено определения уровня генерации АФК, он составил 44,8×10⁵ квант/с 4π. На основании того, что значение генерации АФК находится в пределах 43,7×10⁵ квант/с 4π и выше, диагностирована высокая степень активности ХГ. Это подтверждалось при биохимическом анализе крови (об. белок - 72, альбумины - 54, глобулины - 46 (α₁ - 3, α₂ - 11, β - 12, γ - 20), АЛТ - 964, ACT - 489, ГГТ - 214, Щ.Ф. 158, тимоловая проба - 7,3). Вирусологические тесты: HBs - Ag - положительный. При ультразвуковом исследовании; печени - значительно увеличена, отражение от паренхимы усиленное, крупнозернистое, внутрипеченочные вены не расширены: селезенка не увеличена. Рекомендовано проводить комплексное лечение ХГ с использованием антиоксидантных препаратов.

Пример 2. Больная М. 35 лет. Поступила с жалобами на слабость, повышенную утомляемость, сонливость, аппетит снижен. Больна в течение 6 лет. При объективном исследовании: печень выступает из - под края реберной дуги 2 см. Размеры на 10-12-11 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови, мочи в пределах нормы.

Проведено исследование генерации АФК в крови. Уровень генерации АФК составил 39,3×10⁵ квант/с 4π. На основании того, что значение АФК находится в пределах 43,6-37,6×10⁵ квант/с 4π, диагностирована умеренная степень активности ХГ. Это подтверждалось при биохимическом исследовании крови (об. белок - 70, альбумины - 59, глобулины - 39 (α₁ - 3, α₂ - 11, β - 10, γ - 15), АЛТ - 243, ACT - 154, ГГТ - 90, Щ.Ф. - 105, тимоловая проба - 4,5). Вирусологические тесты: HBs - Ag - положительный. При ультразвуковом исследовании печени - увеличена, отражение от паренхимы усиленное, среднезернистое, внутрипеченочные вены не расширены: селезенка не увеличена.

Пример 3. Больная А. 34 лет. Жалоб не предъявляет. Страдает хроническим вирусным гепатитом С в течение 4 лет. При объективном исследовании: печень по краю реберной дуги. Размеры на 8-9-10 см. Селезенка не пальпируется. Размеры 6-8 см. Общий анализ крови, мочи в пределах нормы.

Проведено исследование генерации АФК и биохимическое исследование крови. Уровень генерации АФК в крови составил 33,2×10⁵ квант/с 4π. На основании того, что значение АФК находится в пределах 37,5-30,1×10⁵ квант/с 4π диагностирована неактивная степень ХГ. При биохимическом анализе крови (об. белок - 80, альбумины - 53, глобулины - 46,9 (α₁ - 4,2, α₂ - 10,5, β - 16,2, γ - 16), АЛТ - 82, ACT - 53, ГГТ - 24, Щ.Ф. - 117, тимоловая проба - 4,0) определена неактивная степень XT. Вирусологические тесты: анти - HCV - положительный. При ультразвуковом исследовании; печени - не увеличена, отражение от паренхимы усиленное, мелкозернистое, внутрипеченочные вены не расширены: селезенка не увеличена. Показано динамическое наблюдение, при ухудшении показателей показано комплексное лечение с использованием антиоксидантов.

Всего предлагаемым способом обследовано 77 человек. Из них 17 с высокой активностью ХГ, 22 - с умеренной степенью активности, 18 - с неактивной степенью и 20 практически здоровых людей. Данные сведены в таблицу, где представлены значения генерации АФК (×10⁵ квант/с 4π) цельной крови у больных ХГ при различной степени активности заболевания. В норме генерация АФК составила 30,0×10⁵ квант/с 4π и ниже в цельной крови.

У всех обследуемых больных (табл.) регистрируется повышение уровня генерации АФК в крови независимо от степени активности ХГ по отношению к контрольной группе (Р_3-4<0,05). При сопоставлении изменения степени активности заболевания и уровня генерации АФК в крови у пациентов с ХГ отмечается, что увеличению степени активности заболевания соответствует повышение уровня генерации АФК. Так, высокой степени активности ХГ соответствует наибольший уровень генерации АФК в цельной крови (P_1-2<0,05, P_1-3<0,05).

Предлагаемый способ оценки степени активности патологического процесса в печени наиболее информативен, точен и надежен, не инвазивин, исключает влияние субъективных факторов и в сочетании с доступностью и простотой может использоваться как экспресс-метод диагностики степени активности хронического гепатита в поликлинических условиях. Вышеперечисленное позволяет упростить и ускорить обследование данных больных с минимальными затратами сил и средств, определяет показание для назначения антиоксидантных препаратов, а также для оценки эффективности проводимой терапии.

Табл.СПОСОБ ОЦЕНКИСТЕПЕНИ АКТИВНОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА Высокая активностьУмеренная степень активностиНеактивная степеньЗдоровыеN17221820М±m
(×10⁵ квант/с 4π)46,28±1,1840,13±1,2334,18±1,1526,15±1,41А
(×10⁵ квант/с 4π)43,7 и выше43,6-37,637,5-30,130,0 и нижеРP_1-2<Р_2-3<P_1-3<Р_3-4<

Изобретение относится к области медицины, а именно к гастроэнтерологии. Сущность способа диагностики степени активности хронического гепатита: в цельной крови исследуют уровень генерации активных форм кислорода (АФК) и при значении генерации АФК 43,7×10⁵ квант/с 4π и выше диагностируют высокую степень активности хронического гепатита, при значении АФК в пределах 43,6×10⁵ квант/с 4π - 37,6×10⁵ квант/с 4π - умеренную степень активности, при АФК в пределах 37,5×10⁵ квант/с 4π - 30,1×10⁵ квант/с 4π - неактивную степень. Использование способа повышает точность и объективность диагностики, при неинвазивности способа, что дает возможность ускорить и упростить обследование больных и определить показания для назначения антиоксидантных препаратов, а также для оценки эффективности проводимой терапии. 1 табл.

Способ оценки степени активности хронического гепатита путем исследования цельной крови, отличающийся тем, что определяют уровень генерации активных форм кислорода (АФК), и при значении генерации АФК 43,7×10⁵ квант/с 4π и выше диагностируют высокую степень активности хронического гепатита, при значении АФК в пределах 43,6×10⁵ квант/с 4π - 37,6×10⁵ квант/с 4π - умеренную степень активности, при АФК в пределах 37,5×10⁵ квант/с 4π - 30,1×10⁵ квант/с 4π - неактивную степень.