СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ГЕСТОЗА Российский патент 2005 года по МПК G01N33/49 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования развития гестоза в 3 триместре беременности у женщин при обследовании в 6-13 недель гестации.

Гестоз остается одной из самых актуальных проблем современного акушерства ввиду широкой распространенности (до 42%), сложности этиопатогенеза, недостаточной эффективности лечебно-профилактических мероприятий (9). За последние годы отмечается рост тяжелых форм гестоза, являющихся причиной увеличения перинатальных потерь и высоких показателей материнской смертности. Актуальность проблемы обусловлена также серьезными последствиями гестоза. У большинства женщин, перенесших это осложнение, формируются хроническая патология почек, гипертоническая болезнь, эндокринные нарушения (4).

Патогенетические механизмы данной патологии закладываются уже на ранних сроках беременности и только родоразрешение является эффективным методом лечения (10). Прогнозирование гестоза позволяет определить наиболее рациональную тактику ведения таких беременных, использовать все возможные профилактические и лечебные мероприятия. В связи с этим разработка методов прогнозирования и профилактики гестоза представляет собой сложную клиническую проблему.

Известен способ прогнозирования позднего токсикоза путем определения уровня липидов и фосфолипидов в моче при сроке беременности 8-12 и 20-24 недели (5). При уровнях липидов 513,1±65,8 и 706,4±84,7 ед. оптической плотности и фосфолипидов 5,74±1,7 и 16,5±6,1 мг/л прогнозируется гестоз. Точность способа - 64.5%.

Способ имеет недостатки:

- необходимость двухкратного обследования беременной женщины в 8-12 и 20-24 недели беременности;

- неудачный выбор субстрата исследования, поскольку появление липидов и фосфолипидов в моче характерно для хронических заболеваний мочевыделительной системы (нефритов и пиелонефритов) и другой соматической патологии, которая может сочетаться с гестозом, а может быть самостоятельным заболеванием;

- невысокая точность;

- в настоящее время в современном акушерстве не существует такого понятия, как «поздний токсикоз», так как этиологические и патогенетические механизмы развития гестоза формируются с ранних сроков гестации (8).

Также известен способ прогнозирования гестоза путем определения мембрано-клеточного показателя (2). В качестве мембраноклеточного показателя используют время устойчивости эритроцитов к перекисному гемолизу и при его значении менее 150 с прогнозируют развитие гестоза.

Способ имеет недостатки:

- проводить исследование и срок гестации, в котором прогнозируется развитие гестоза;

- не указана точность способа;

- возможность изменения мембраноклеточного показателя эритроцитов не только при гестозе, но и при наличии у женщины гематологических заболеваний (гемолитические анемии, в том числе наследственного и аутоиммунного генеза) при отсутствии гестоза;

- в изобретении не указывается срок беременности, в котором следует проводить обследование.

Наиболее близким к заявленному способу по техническому решению является способ прогнозирования позднего токсикоза беременных по определению в сыворотки крови активности супероксиддисмутазы. При величине активности более 5,1 Е/мл прогнозируют развитие позднего токсикоза (1).

Указанный способ выбран в качестве прототипа.

Недостатками способа-прототипа являются:

- в настоящее время в современном акушерстве не существует такого понятия, как «поздний токсикоз», так как этиологические и патогенетические механизмы развития гестоза формируются с ранних сроков гестации (8);

- в изобретении не указывается срок беременности, в котором следует проводить исследование, и срок гестации, в котором прогнозируется развитие токсикоза;

- способ не является специфичным для прогнозирования гестоза, так как активность супероксиддисмутазы в сыворотке крови повышается и при других патологических процессах, связанных с усилением свободнорадикального окисления, например, при гипертонической болезни, неспецифическом аортоартериите и др. (7);

- определение фермента супероксиддисмутазы представляет определенные трудности в связи с его малым периодом полужизни.

Указанные недостатки могут быть устранены в предлагаемом способе.

Заявляемый технический результат достигается тем, что в 6-13 недель гестации в периферической венозной крови беременных женщин определяют активность катепсина D и при значениях этого показателя, равных или более 0,021 Ед.акт.ф./ч (единиц активности фермента в час), прогнозируют развитие гестоза в 3 триместре беременности с точностью 80,64%, чувствительностью 84,44% и специфичностью 70,58%.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается использовать определение активности катепсина D в периферической венозной крови беременных женщин в сроке гестации 6-13 недель с целью прогнозирования развития гестоза в 3 триместре беременности. Катепсин D является лизосомальным ферментом класса эндопептидаз (3). Активность катепсина D, как и других лизосомальных ферментов, является отражением процессов свободнорадикального окисления в организме, патологическая активация которого является одним из пусковых механизмов развития гестоза (1, 6). Также на сегодняшний день доказано участие катепсина D в процессах апоптоза и плацентации (11, 12). Ранее исследования активности катепсина D у беременных женщин с гестозом не проводилось. Предполагается, что изменение активности катепсина D в ранние сроки беременности отражает развитие патологических процессов, которые в дальнейшем способствуют развитию гестоза.

Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом.

В 0,5 мл периферической венозной крови добавляют 0,25 мл ацетатного буфера рН 3,3 и 0,25 мл раствора субстрата (1% гемоглобина). Инкубацию проводят при 45°С в течение 60 мин. Реакцию останавливают добавлением 5,0 мл 3%-ной трихлоруксусной кислоты. Через 5 мин смесь фильтруют через бумажный фильтр (ватман №1 или №3) и измеряют Е 280 прозрачного фильтра на спекторофотометре. В контрольных вариантах кровь смешивают с инкубируемым раствором субстрата и буфера непосредственно перед добавлением трихлоруксусной кислоты. Ферментную активность рассчитывают по разнице Е 280 между опытным и контрольным вариантами. Величина в единицах оптической плотности (ед.оп.пл.) при длине волны спекторофотометра 280 равна единице активности фермента в час (ЕД.акт.ф./ч) (3).

Существенными отличиями заявленного способа являются:

- предложен новый прогностический параметр активности катепсина D в периферической венозной крови беременных женщин, равный или более 0,021 Ед.акт.ф./ч (единиц активности фермента в час), для прогнозирования развития гестоза в 3 триместре, начиная с 6 до 13 недель беременности.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Беременная А., 28 лет. Настоящая беременность первая. В 1 триместре беременности женщина находилась на стационарном лечении по поводу раннего гестоза легкой степени тяжести. При обследовании заявленным способом в сроке беременности 7 недель: активность катепсина D в периферической венозной крови - 0,021 Ед.акт.ф./ч, что равно прогностическому уровню на развитие гестоза, прогнозируется развитие гестоза. При наблюдении за время беременности АД у женщины оставалось в пределах 100/60-120/80 мм рт.ст., общая прибавка массы тела составила 15,7 кг, с 24 недель отмечались неравномерные прибавки массы тела - до 1 кг в неделю. Из экстрагенитальной патологии во время беременности выявлена вегетососудистая дистония по гипотоническому типу, миопия высокой степени. С 35 недель беременности у женщины появились отеки нижних конечностей. В 37 недель госпитализирована в стационар с диагнозом: Беременность 37 недель. Гестоз легкой степени тяжести. Тазовое предлежание плода. В стационаре в анализах крови и мочи патологии не выявлено. Балльная оценка степени тяжести гестоза по Г.М.Савельевой составила 5 баллов, что соответствует гестозу легкой степени (10). Беременность закончилась своевременными оперативными родами (по поводу тазового предлежания плода у первородящей женщины) и рождением живого доношенного ребенка массой 3600 г, ростом 51 см и оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. Заключение: прогноз по заявленному способу подтвердился.

Пример 2 Беременная К., 23 лет. Настоящая беременность 3. В анамнезе 2 медицинских аборта по желанию женщины. При обследовании заявленным способом в амбулаторных условиях в сроке беременности 11 недель: активность катепсина D в периферической венозной крови - 0,049 Ед.акт.ф./ч, что соответствует прогностическому уровню на развитие гестоза, прогнозируется развитие гестоза. При наблюдении за время беременности общая прибавка массы тела составила 14,7 кг, с 27 недель беременности отмечаются патологические прибавки массы - до 2 кг в неделю. Из экстрагенитальной патологии во время беременности выявлена вегетососудистая дистония, диффузное увеличение щитовидной железы 1 степени, эутиреоз. С 30 недель беременности у женщины отмечается появление отеков голеней, периодическое повышение АД до 130/80 мм рт.ст. Проводится терапия гестоза в амбулаторных условиях без значительного эффекта. С 34 недель беременности присоединяются отеки передней брюшной стенки. В 37 недель госпитализирована в стационар с диагнозом: Беременность 37 недель. Гестоз средней степени тяжести. Фетоплацентарная недостаточность. Синдром задержки развития плода 1 степени. Хроническая внутриутробная гипоксия плода. В стационаре отмечается повышение АД до 145/100 мм рт.ст. В анализах мочи выявлена протеинурия до 0,132 г/л. По данным ультрозвукового исследования выявлен синдром задержки развития плода 1 степени. Балльная оценка степени тяжести гестоза по Г.М.Савельевой составила 10 баллов, что соответствует гестозу средней степени тяжести (10). Беременность закончилась своевременными родами и рождением живого доношенного ребенка массой 2900 г, ростом 52 см и оценкой по шкале Апгар 7/8 баллов. Заключение: прогноз по заявляемому способу подтвердился.

Пример 3. Беременная М., 24 лет. Настоящая беременность 1. В сроке 9-10 недель находилась на стационарном лечении по поводу раннего гестоза легкой степени тяжести. При обследовании заявленным способом в сроке беременности 10 недель: активность катепсина D в периферической венозной крови - 0,007 Ед.акт.ф./ч, что меньше прогностического уровня на развитие гестоза, развитие гестоза не прогнозируется. За время наблюдения из экстрагенитальной патологии выявлена вегетососудистая дистония по гипотоническому типу. Развития гестоза у женщины за время беременности, родов и послеродового периода выявлено не было.

Беременность закончилась своевременными оперативными родами (по поводу тазового предлежания плода у первородящей женщины) и рождением живого доношенного новорожденного массой 3400 г, ростом 54 см и оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. Заключение: прогноз по заявленному способу подтвердился.

Указанным способом обследовано 62 женщины в 6-13 недель гестации.

Результаты исследований сведены в таблицу 1.

Таблица 1ПоказательКоличество обследованныхВсего женщин62истинно положительный результат38ложноположительный результат5истинно отрицательный результат12ложноотрицательный результат7Итого:
точность заявленного способа - 80,64%
чувствительность заявленного способа - 84,44%
специфичность заявленного способа - 70,58%

Преимущества заявляемого способа

1. Исследование периферической венозной крови у женщины проводится в сроке 6-13 недель беременности, что позволяет прогнозировать развитие гестоза в 3 триместре до его клинических проявлений и своевременно провести комплекс профилактических мероприятий.

2. Определено активности катепсина D в периферической венозной крови беременных женщин в 1 триместре, равное или более 0,021 Ед.акт.ф./ч (единиц активности фермента в час), при котором прогнозируется развитие гестоза в 3 триместре.

3. Высокая точность 80,64%, чувствительность 84,44% и специфичность 70,58% способа.

Таким образом, заявленный способ технически не сложен, не требует дорогостоящего оборудования и реактивов, может выполняться лаборантом без высшего медицинского образования, не только в стационарных, но и в амбулаторных условиях и позволяет с высокой точностью прогнозировать с ранних сроков беременности (с 6 до 13 недель) развитие гестоза у женщин. Проведение исследований по данному способу позволит выявить женщин с высоким риском развития гестоза и своевременно провести им необходимый комплекс лечебно-профилактических мероприятий, что будет способствовать снижению частоты данного осложнения беременности, особенно его тяжелых форм, риска развития патологии плода и новорожденного и уменьшению экономических затрат на лечение.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Бонаренко С.А., Бурлев В.А., Гребенников Е.П. Способ прогнозирования позднего токсикоза беременных. Авторское свидетельство №1612265.

2. Валеева P.M., Гайсин И.Р., Лещинский И.А., Кочергин Е.В. Способ прогнозирования гестоза. Авторское свидетельство №2191384.

3. Дингл Дж. Лизосомы. Методы исследования. Издательство «Мир», Москва 1980; с.342.

4. Кулаков В.И., Мурашко Л.Е. Новые подходы к терминологии, профилактике и лечению гесоза/УАкушерство и гинекология. - 1998. - №5. - С.3-6

5. Муратова P.M., Краснопольский В.И., Юрьева Э.А., Алексеева Н.В., Воздвиженская Е.С. Способ прогнозирования позднего токсикоза беременных. Авторское свидетельство №1572534.

6. Пасечник И.Н. Механизм повреждающего действия активных форм кислорода на биологические структуры у больных в критических состояниях// Вестник интенсивной терапии. - 2001. - №4. - С.3-8.

7. Праскурничий Е.А., Шалаев Б.А., Андреева О.А. Свободнорадикальное окисление липидов и уровень R-белков при неспецифическом аортоартериите и гипертонической болезни// Клиническая и лабораторная диагностика. - 2001. - №4. - С.50-51.

8. Савельева Г.Н., Шалина Р.И Современные проблемы этиологии, патогенеза, терапии и профилактики гестозов//Акушерство и гинекология. - 1998. - №5. - С.6-9.

9. Серов В.Н., Пасман Н.М., Бородин М.Ю., Барухина А.Н. Гестоз - болезнь адаптации. Новосибирск: РИПЭЛ плюс, 2001. - 208 с.

10. Сидорова И.С. Поздний гестоз. М. 1996; 236 с.

11. Kagedal К, Johansson U, Ollinger K. The lysosomal protease cathepsin D mediates apoptosis induced by oxidative stress// FASEB J. - 2001. - Jul; 15 (9): 1592-4.

12. Moses E.K., Freed K.A., Higgins J.R. Alternative forms of a novel aspartil protease gene are differentially expressed in human gestational tissues//Med Hum Reprod.-1999. - Oct; 5 (10): 893-9.

Изобретение относится к лабораторной диагностике и может быть использовано для прогнозирования развития гестоза в 3 триместре беременности. Сущность изобретения состоит в том, что в сроке 6-13 недель гестации в переферической венозной крови определяют активность катепсина D и при его значении, равном или более 0,021 Ед.акт.ф/ч, прогнозируют развитие гестоза в 3 триместре. Техническим результатом является прогнозирование с высокой точностью развитие гестоза с ранних сроков беременности. 1 табл.

Способ прогнозирования гестоза путем исследования периферической венозной крови женщин, отличающийся тем, что в сроке 6-13 недель гестации определяют активность катепсина D и при его значении, равном или более 0,021 Ед.акт.ф/ч, прогнозируют развитие гестоза в 3 триместре.