ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕИНФЕКЦИОННЫХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ БОЛЕЗНЕЙ КИШЕЧНИКА Российский патент 2007 года по МПК A61K31/635 A61K31/606 A61P1/00 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для лечения неинфекционных воспалительных болезней кишечника.

Неинфекционные воспалительные болезни кишечника, к которым относятся язвенный колит и болезнь Крона, были и остаются одной из наиболее серьезных проблем современной гастроэнтерологии. Заболеваемость язвенным колитом и болезнью Крона во всем мире возрастает с каждым годом, причем преимущественно среди трудоспособного контингента населения, что делает их социально значимыми заболеваниями.

Сходство этих поражений пищеварительного тракта заключается в том, что в их основе лежит хроническое разрушение слизистой оболочки; течение заболеваний носит фазный характер с периодами обострения и стадиями ремиссии. До настоящего времени истинная этиопатогенетическая причина возникновения обоих воспалительных процессов и их перехода в хроническую форму не выяснена. В то же время эти болезни существенно различаются по макроскопической, гистологической картине, а также по месту локализации в пищеварительном тракте.

При язвенном колите воспаление захватывает исключительно слизистую оболочку толстой кишки, последовательно распространяясь от ее дистальной к проксимальной части, в тяжелых случаях охватывая весь толстый кишечник, включая прямую кишку.

При болезни Крона воспалительный процесс может поражать любые отделы, начиная от рта и кончая задним проходом. Наиболее часто при этом заболевании отмечается комбинированное поражение нижних отделов тонкого кишечника и толстой кишки, с сегментированной локализацией поражений, когда рядом с пораженным участком обнаруживаются места с неизмененной слизистой.

Для лечения неинфекционных воспалительных болезней кишечника используют препараты 5-аминосалициловой кислоты - сульфасалазин и месалазин.

Известен препарат сульфасалазин (Энциклопедия лекарств. Регистр лекарственных средств России РЛС, Москва, ООО РЛС-2005, 2004, 12-й выпуск, с.826-827), обладающий противобактериальным и противовоспалительным действием. В соединительной ткани кишки распадается на 5-аминосалициловую кислоту (5-АСК), обуславливающую противовоспалительные свойства сульфасалазина, и сульфапиридин - конкурентный антагонист парааминобензойной кислоты, прекращающий синтез фолатов в клетках микроорганизмов и обуславливающий антибактериальную активность. Недостатками препарата при лечении язвенного колита и болезни Крона являются сильная зависимость от состояния нормофлоры кишечника, которая участвует в биотрансформации сульфасалазина и высвобождении активного компонента - 5-АСК, при этом второй компонент препарата сульфапиридин угнетает бактерии, фактически тормозит и останавливает специфическую активность препарата. Возможно, в связи с этим резко усиливаются аллергические проявления, дискинетические расстройства и нарушается функция печени.

Известен препарат салофальк - таблетки, покрытые оболочкой, растворимой в кишечнике, содержащие месалазин - 5-аминосалициловую кислоту (Энциклопедия лекарств. Регистр лекарственных средств России РЛС, Москва, ООО РЛС-2005, 2004, 12-й выпуск, с.780-781). Препарат является противовоспалительным средством, ингибирует синтез метаболитов арахидоновой кислоты, активность нейтрофильной липооксигеназы, тормозит миграцию, дегрануляцию и фагоцитоз нейтрофилов, секрецию иммуноглобулинов лимфоцитами, связывает и разрушает свободные радикалы кислорода. Показан для лечения язвенного колита и болезни Крона. К недостатком препарата можно отнести наряду с резко выраженными аллергическими проявлениями, расстройства функции кишечника, нервной, сердечно-сосудистой и мочевыделительной систем, заявленных в качестве побочных действий. Отсюда рекомендации применения препарата только под контролем врача и регулярных анализов крови и мочи.

Известна фармацевтическая композиция для орального введения, содержащая в качестве активного ингредиента 5-аминосалициловую кислоту (5-АСК), адаптированная для модифицированного высвобождения из оболочки с целью получения клинически важного локализованного эффективного профиля 5-АСК посредством высвобождения соответствующего количества 5-АСК в тонкой кишке и в толстой кишке (патент РФ №2181043 С2, МПК7 А61К 9/22, А61К 9/16, А61К 1/606, А61Р 1/00, опубликован 10.04.2002). К недостаткам можно отнести следующие. Для проявления фармакологической активности 5-АСК требуется достаточно активное состояние нормофлоры, которая наряду с общим детоксицирующим действием принимает участие в реакции ацетилирования 5-АСК и его выведении из кишечника. Однако общее состояние нормофлоры при язвенном колите и болезни Крона и особенно ее анаэробного звена (бифидо- и лактобактерии) сильно угнетено еще до начала специфического лечения и требует обязательной коррекции, особенно в периоды обострения заболеваний.

Задачей изобретения является создание препарата для лечения воспалительных заболеваний кишечника, не имеющего указанных недостатков, а также содержащего бактерии, являющиеся характерными для нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта.

Технический результат изобретения заключается в повышении эффективности лечения неинфекционных воспалительных болезней кишечника, сокращении сроков лечения.

Технический результат достигается за счет того, что препарат для лечения воспалительных заболеваний кишечника, содержащий 5-аминосалициловую кислоту или вещество, распадающееся в организме с образованием 5-аминосалициловой кислоты, дополнительно содержит лиофильно высушенную микробную массу живых бифидобактерий или лактобактерий или их смесь, при следующем соотношении компонентов, г:

5-аминосалициловая кислота или вещество, распадающееся в организме с образованием 5-аминосалициловой кислоты0,05-1,00лиофильно высушенную микробную массу живых бактерий10⁵-10¹⁰ КОЕ

Препарат содержит бифидобактерии или бифидобактерии, иммобилизованные на сорбенте.

Препарат содержит лактобактерии или лактобактерии, иммобилизованные на сорбенте.

Препарат содержит смесь бифидобактерий и лактобактерий или смесь бифидобактерий и лактобактерий, иммобилизованных на сорбенте.

В качестве 5-аминосалициловой кислоты или вещества, распадающегося в организме с образованием 5-аминосалициловой кислоты, препарат содержит месалазин или сульфасалазин соответственно.

Месалазин или сульфасалазин содержатся в виде порошка или гранул.

Компоненты препарата сгруппированы в две капсулы, составляющие вместе одноразовую дозу, при этом одна капсула содержит микробную массу живых бактерий, а другая - месалазин или сульфасалазин.

Или компоненты сгруппированы в две капсулы, при этом одна капсула содержит микробную массу живых бактерий, и размещена в другой капсуле, содержащей месалазин или сульфасалазин.

Сущность изобретения состоит в следующем.

Существует множество теорий и предположений о причинах возникновения неинфекционных воспалительных болезней кишечника, в частности, нарушение регуляции внутрикишечной иммунной системы; аутоиммунные процессы; генетическая предрасположенность к воздействию микробных токсинов или к неадекватному иммунному ответу и т.д.

Данные последних лет, а также проведенные нами исследования, свидетельствуют о наличии у больных язвенным колитом и болезнью Крона глубоких микроэкологических нарушений в пищеварительном тракте, что позволяет предполагать, что в основе этих заболеваний кишечника лежит дисбаланс в экологической системе «хозяин - его микрофлора». Подтверждением этому могут также явиться наблюдения о значительном улучшении состояния больных при назначении им специально подобранных пробиотиков, нормализующих состав микрофлоры кишечника.

Микроэкологический анализ содержимого нижнего отдела тонкого кишечника при хронических воспалительных поражениях пищеварительного тракта обнаруживает увеличение в нем пропорции потенциально патогенных аэробных энтеробактерий, бактероидов и других анаэробных грамотрицательных бактерий, грамположительных аэробных и анаэробных кокков; схожая картина имеет место и при исследовании содержимого толстой кишки.

Принципиально важным показателем сниженной колонизационной резистентности пищеварительного тракта при хронических воспалениях кишечника является резкое уменьшение в его содержимом бифидофлоры и лактобацилл - естественных антагонистов потенциально патогенных микроорганизмов и увеличение пропорции бактероидов, анаэробных грамположительных коккопалочек и аэробных энтеробактерий. Отношение числа анаэробов к аэробам в пристеночной микрофлоре резко снижается, достигая 25:1.

Количественное содержание в фекалиях бактероидов, бифидобактерий, эубактерий, пептококков, стрептококков и энтеробактерий, а также органических кислот у лиц, страдающих язвенным колитом, значительно отличается у больных и здоровых людей.

Сравнительное изучение содержания лактобацилл, бифидобактерий и бактероидов в фекалиях здоровых людей и лиц, страдающих болезнью Крона в стадии обострения, показало резкое уменьшение количества бифидобактерий у больных. Снижение числа бифидобактерий шло параллельно со значительным падением активности суммарной фекальной β-галактозидазы.

Проведенные исследования показали, что препараты, содержащие 5-АСК или вещество, распадающееся в организме с образованием 5-АСК, проявляет свою противовоспалительную активность после микробной трансформации в толстой кишке. При этом только в результате бактериального расщепления высвободившаяся 5-АСК становится активной.

Кроме этого, в патогенезе неспецифического язвенного колита и болезни Крона важную роль играет нарушение микрофлоры в толстой кишке, доказана роль иммунных нарушений при данных заболеваниях.

Используемые бифидо- и лактобактерии, естественные и обязательные обитатели кишечника, нетоксичны, невирулентны, нетоксигенны для человека и животных, обладают высокой антагонистической активностью к патогенным и условнопатогенным микроорганизмам, препятствуют их адгезии к слизистой оболочке кишечника, способствуют нормализации деятельности желудочно-кишечного тракта и повышению неспецифической резистентности организма, активизируют пристеночное пищеварение, синтезируют аминокислоты, витамины, обладают иммуномодулирующим действием.

По данным клинических испытаний высокие дозы бифидобактерий (в частности, препараты пробифор, бифидумбактерин), а также лактобактерий или их смеси оказывают выраженное действие на процессы репарации в слизистой оболочке толстой кишки, способствуют выраженному угасанию в ней воспаления. Применение указанных бактерий способствует быстрому восстановлению микробиоценоза кишечника, улучшению вследствие этого процессов пристеночного пищеварения и всасывания, улучшает функции иммунной системы.

Совместное применение нормофлоры и 5-АСК позволяет существенно уменьшить общетоксические и аллергические проявления, способствует стабилизации и восстановлению естественной микрофлоры кишечника, что в свою очередь ведет к повышению эффективности 5-АСК за счет синхронной микробной трансформации (ацетилирования) последней.

Содержание 5-АСК или вещества, распадающегося в организме с образованием 5-АСК в пределах 0,05-1,00 г, соответствует терапевтической дозе, обычно назначаемой больным для лечения язвенного колита или болезни Крона.

Содержание лиофильно высушенной микробной массы живых бактерий менее 10⁵ КОЕ не дает лечебного эффекта, так как при нарушенной микроэкологии кишечника не обеспечивает должную колонизационную активность и антагонистическую эффективность.

Содержание лиофильно высушенной микробной массы живых бактерий более 10¹⁰ КОЕ нецелесообразно, поскольку приведет к неоправданному ее перерасходу и увеличит стоимость лечения.

Использование бактерий, иммобилизованных на сорбенте, обеспечивает высокую локальную колонизацию слизистых оболочек кишечника, усиливают в них восстановительные процессы. В качестве сорбента могут быть использованы, в частности, мелкодисперсные активированный уголь или диоксид кремния.

В качестве 5-АСК или вещества, распадающегося в организме с образованием 5-АСК, могут использоваться препараты, преимущественно содержащие месалазин или сульфасалазин. Однако успешно могут быть использованы и другие аминосалицилаты, близкие к 5-АСК по химической структуре и аналогичные по механизму действия, в частности, олсалазин, балсалазид и другие.

Месалазин или сульфасалазин в виде порошка целесообразно использовать для приготовления лечебных микроклизм и ректального применения, в виде гранул - для перорального применения.

Для удобства приема, а также обеспечения возможности растворения компонентов препарата в определенных отделах желудочно-кишечного тракта, компоненты можно сгруппировать в две капсулы, составляющие вместе одноразовую дозу, при этом одна капсула содержит микробную массу живых бактерий, а другая - месалазин или сульфасалазин.

Или же компоненты можно сгруппировать в две капсулы, при этом одна капсула содержит микробную массу живых бактерий и размещена в другой капсуле, содержащей месалазин или сульфасалазин.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Примеры 1-6 характеризуют состав заявленного препарата.

Пример 1 5-АСК, порошок, г0,05лиофилизированная масса живых бифидобактерий, КОЕ5×10⁸Пример 2 5-АСК, порошок, г0,10лиофилизированная масса живых бифидо- и лактобактерий, КОЕ10⁸Пример.3 5-АСК, порошок, г0,25лиофилизированная масса живых сорбированных лактобактерий, КОЕ10⁶Пример 4 5-АСК, гранулы, г0,50лиофилизированная масса живых сорбированных бифидобактерий, КОЕ5×10⁷Пример 5 сульфасалазин, гранулы, г0,75лиофилизированная масса живых лактобактерий, КОЕ10⁸Пример 6 5-АСК, гранулы, г1,00лиофилизированная масса живых сорбированных бифидо- и лактобактерий, КОЕ5×10⁹

Пример 7. Оценка безвредности препарата в опытах на животных.

На этапе доклинических исследований проведена оценка безвредности предлагаемой рецептуры и отдельных ее компонентов в опытах на белых мышах. Для этой цели избран метод, применяющийся для медицинских иммунобиологических препаратов. Исследование проводят на мышах массой не более 15 г, отличающихся от взрослых мышей повышенной чувствительностью к действию алиментарных факторов. В течение 5 суток наблюдения регистрируют изменения массы тела и любые признаки заболевания. Уменьшение массы тела, появление признаков заболевания или гибель животных свидетельствуют о вредности воздействия для организма мышей.

Оценке по показателю «безвредность» подвергнуты: пробиотический компонент препарата, содержащий бифидо- и лактобактерии в количестве не менее 10⁸ КОЕ и смесь пробиотического компонента с сульфасалазином в дозах 50, 100 и 150 мг/кг массы тела животного. Результаты исследований показали, что взятый отдельно пробиотический компонент безвреден при введении непосредственно в желудок белым мышам; добавка к пробиотику сульфасалазина в дозе 50 и 100 мг/кг не повлияла на безвредность; увеличение дозы сульфасалазина до 150 мг/кг позволила выявить признаки вредности (уменьшение массы тела мышей на 10%).

Таким образом, доза препарата, содержащая 100 мг 5-АСК и не менее 10⁸ КОЕ пробиотика на кг тела животного, превышающая терапевтическую суточную дозу для человека, хорошо переносится животными.

Примеры 8-10 характеризуют эффективность препарата при лечении язвенного колита и болезни Крона.

Пример 8.

Больной С, 28 лет.

Клинический диагноз: Неспецифический язвенный колит, тотальное поражение, высокой активности, рецидивирующая форма.

В анамнезе: длительность заболевания 5 лет. Госпитализации в период обострения в течение 40-60 дней.

При осмотре выявлено обострение неспецифического язвенного колита средней тяжести. Клинически: частота стула 4-6 раз в сутки, примесь крови умеренная, температура субфибрильная, патологии со стороны сердечно-сосудистой системы не выявлено, частота сердечных сокращений до 90 ударов в минуту, СОЭ - 30 мм/ч, лейкоцитоз умеренный, мальабсорбция незначительна, боли в кишечнике в покое и при пальпации.

При эндоскопии: гиперемия диффузная, отмечается зернистость и отек слизистой, сосудистый рисунок отсутствует, кровоточивость умеренно выражена, множественные эрозии, язвы единичные, наличие фибрина, гноя нет.

По данным микробиологического исследования фекалий - нарушение микробиоценоза: снижение содержания бифидобактерий до 10⁷ КОЕ/г, снижение содержания лактобактерий до 10⁵ КОЕ/г, снижение количества кишечной палочки до 7×10⁶ КОЕ/г, увеличение кокковых форм в общей сумме микроорганизмов до 95% (при норме до 25%).

В комплексном лечении получал препарат, содержащий 4 г/сут 5-АСК и 5×10⁸ КОЕ бифидобактерий на сорбенте, соответствующий примеру 4, в течение 21 дня.

Перед выпиской после проведенной терапии отмечена положительная динамика - ремиссия неспецифического язвенного колита. Клинически: частота стула соответствует норме, стул без патологических примесей, температура тела нормальная, тахикардия отсутствует, болей со стороны кишечника нет. Положительная динамика эндоскопической картины: незначительная эритема слизистой оболочки, рыхлость, смазанность сосудистого рисунка. С-реактивный белок - отрицательный, содержание гемоглобина и СОЭ в пределах нормы.

Выраженная положительная динамика по данным микробиологического исследования фекалий: нормальное содержание бифидобактерий (10⁸ КОЕ/г), нормальное содержание лактобактерий (10⁶ КОЕ/г), повышение по отношению к данным до лечения содержания кишечной палочки (10⁷ КОЕ/г), снижение количества кокковых форм в общей сумме микроорганизмов (50%).

Таким образом, обострение язвенного колита купировано за 21 день. Больной выписан в удовлетворительном состоянии.

Рекомендовано: принимать препарат, содержащий 5-АСК, уменьшив суточную дозу до 1 г, одновременно с сорбированным пробиотиком.

Пример 9.

Больной Л., 58 лет.

Клинический диагноз: неспецифический язвенный колит, дистальная форма (язвенный хронический проктит), среднетяжелое течение.

Из анамнеза: болен в течение 28 лет с периодами обострения и ремиссии, при обострении всегда госпитализировался, среднее пребывание в стационаре до 40 дней. Гемоколит купируется обычно на 2-3 недели лечения.

При осмотре выявлено обострение неспецифического язвенного колита средней тяжести.

Клинически: Частота стула до 6 раз в сутки со слизью и кровью. Прожилки крови в кале. Лихорадка субфибрильная, боли в животе, боли при дефекации, умеренно выраженные изменения на электрокардиограмме, тахикардия до 85 ударов в минуту. Отмечается похудание на 4 кг за последние 6 месяцев. СОЭ 43 мм/час, лейкоцитоз умеренный, мальабсорбция умеренно выражена.

При эндоскопии: гиперемия диффузная, выражены зернистость и отек слизистой, сосудистый рисунок отсутствует, кровоточивость умеренно выражена, эрозии множественные, язвы единичные, фибрин есть, гной - незначительное количество.

По данным микробиологического исследования фекалий - нарушение микробиоценоза: снижение содержания бифидобактерий до 10⁷ КОЕ/г, снижение содержания лактобактерий до 10⁵ КОЕ/г.

В комплексном лечении получал препарат, соответствующий примеру 5, содержащий 5-АСК в количестве 4 г/сутки и лактобактерий в количестве 10⁸КОЕ.

Особенностью схемы лечения данного больного является то, что препарат 5-АСК дается одномоментно с лактобактериями.

Курс лечения 25 дней. Гемоколит купировался на 6-е сутки лечения.

После проведенного курса боли со стороны кишечника отсутствуют, частота стула в пределах нормы, стул без патологических примесей, температура тела нормальная, тахикардии нет.

При эндоскопии: незначительная эритема слизистой оболочки, смазанность сосудистого рисунка. СОЭ снизилась до 18 мм/час. По данным микробиологического исследования фекалий признаков нарушения микробиоценоза кишечника нет: содержание бифидобактерий 10⁷ КОЕ/г, содержание лактобактерий 10⁷ КОЕ/г.

Выписался в удовлетворительном состоянии с рекомендациями продолжить амбулаторное лечение в течение 4 месяцев с приемом 5-АСК-содержащего препарата в дозе 1 г/сут и сорбированных бифидобактерий.

Пример 10.

Больной Р., 30 лет.

Диагноз при поступлении: болезнь Крона.

Поступил в стационар с температурой тела до 37,5° с жалобами на резкую слабость, нарушение мышечного тонуса, боли в мышцах, животе и суставах, с диареей, потерей веса.

В анамнезе: заболеваний пищеварительного тракта не отмечалось, однако есть подозрение на перенесенный иерсиниоз, в связи с чем прошел полное обследование на антитела к разным бактериальным и вирусным возбудителям инфекции, в том числе к иерсиниям, кампилобактерам, к кандидам. Заболевания пищеварительного тракта исключены.

При колоноскопии и гастроскопии выявлены гастрит, дуоденит, очаговый катаральный колит, дисбактериоз.

При обследовании в стационаре: кожа и слизистые бледные, увеличена частота пульса, температура тела повышена, живот вздут, умеренно болезненный в левой подвздошной области, при глубокой пальпации живота сигмовидная кишка спазмирована. Диарея 4-5 раз в день, стул неоформленный с примесью крови, слизи, гноя. Отмечается лейкоцитоз, повышенная СОЭ. При биохимическом исследовании регистрируется сниженная концентрация в сыворотке крови калия, натрия, магния, повышение креатинфосфокиназы, процента насыщения железом, альфа- и гамма-глобулинов, бета-2-микроглобулинов. Низкое содержание в крови альбумина.

При бактериологическом исследовании кала на дисбактериоз выявлено снижение количества кишечной палочки с нормальной функциональной активностью, энтерококков, бифидо- и лактобактерий.

Назначено комплексное лечение с использованием препарата, соответствующего примеру 6, содержащего 5-АСК в количестве 4 г/сут и 10⁸ КОЕ смеси сорбированных бифидо- и лактобактерий по 1 пакету 3 раза в день. Курс лечения 21 день.

После проведенного лечения состояние больного значительно улучшилось. Частота стула - 1 раз в день без патологических примесей, исчезли боли в животе. При бактериологическом исследовании кала на дисбактериоз выявлена выраженная положительная динамика. Увеличилось количество бифидо- и лактобактерий, нормальной кишечной палочки и энтерококков.

Таким образом, заявленный препарат эффективен при лечении неинфекционных воспалительных заболеваний кишечника и позволяет сократить сроки лечения.

Пример 11 характеризует изменение активности живой микробной массы в заявленном препарате.

Для оценки изменения активности микробной массы в препарате в пакетах из многослойного металлополимерного материала, герметизированных термошвом, на хранение сроком на один год при температуре 2-8°С были заложены:

- препарат по примеру 1;

- препарат по примеру 5;

- лиофилизированная масса живых бифидобактерий;

- лиофилизированная масса живых лактобактерий.

Изменения активности живой микробной массы в препарате и отдельно хранимой биомассы сопоставимы, расхождение не превышает 5%.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для лечения неинфекционных воспалительных болезней кишечника. Препарат содержит 5-аминосалициловую кислоту (5-АСК) или вещество, распадающееся в организме с образованием 5-АСК и лиофильно высушенную микробную массу живых бифидобактерий или лактобактерий или их смесь, где бактерии могут быть иммобилизованы на сорбенте. Компоненты препарата сгруппированы в две капсулы, при этом одна капсула содержит микробную массу живых бактерий, а другая - месалазин или сульфасалазин. Данное изобретение обеспечивает повышеную эффективность лечения неинфекционных воспалительных болезней кишечника и сокращение сроков лечения препаратом, 2 н. и 7 з.п. ф-лы.

1. Препарат для лечения неинфекционных воспалительных болезней кишечника, содержащий 5-аминосалициловую кислоту или вещество, распадающееся в организме с образованием 5-аминосалициловой кислоты, и лиофильно высушенную микробную массу живых бифидобактерий или лактобактерий или их смесь при следующем соотношении компонентов, г:

5-Аминосалициловая кислота или вещество, распадающееся в организме с образованием 5-аминосалициловой кислоты0,05-1,00Лиофильно высушенная микробная масса живых бактерий10⁵-10¹⁰ КОЕ