НОВЫЕ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ БЕЛКИ Aequorea coerulscens И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2008 года по МПК C12N15/12 C12N15/63 C12N15/62 C12N5/10 C07K14/435 A01K67/00 

Описание патента на изобретение RU2330886C2

Текст описания приведен в факсимильном виде.

Похожие патенты RU2330886C2

название год авторы номер документа
ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ БЕЛКИ И ХРОМОПРОТЕИНЫ ИЗ ВИДОВ HYDROZOA, НЕ ОТНОСЯЩИХСЯ К AEQUOREA, И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ 2003
  • Лукьянов Сергей Анатольевич
  • Шагин Дмитрий Алексеевич
  • Янушевич Юрий Григорьевич
RU2338785C2
МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ЗЕЛЕНЫЕ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ БЕЛКИ И СПОСОБЫ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ 2006
  • Лукьянов Сергей Анатольевич
RU2412250C2
НОВЫЕ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ БЕЛКИ ИЗ ENTACMAEA QUADRICOLOR И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ 2007
  • Лукьянов Сергей Анатольевич
  • Чудаков Дмитрий Михайлович
RU2395581C2
ВЫДЕЛЕННАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, КОДИРУЮЩАЯ ОПЕРАТИВНО СЛИТЫЙ ИНТРАМОЛЕКУЛЯРНЫЙ ДИМЕР БЕЛКА KillerRed, КАССЕТА ЭКСПРЕССИИ, КЛЕТКА, ПРОДУЦИРУЮЩАЯ ХИМЕРНЫЙ БЕЛОК И СОДЕРЖАЩАЯ КАССЕТУ ЭКСПРЕССИИ, ВЫДЕЛЕННЫЙ ХИМЕРНЫЙ БЕЛОК 2011
  • Лукьянов Константин Анатольевич
  • Серебровская Екатерина Олеговна
  • Лукьянов Сергей Анатольевич
RU2491342C1
ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ БЕЛКИ ИЗ ВЕСЛОНОГИХ РАКООБРАЗНЫХ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ 2003
  • Барсова Екатерина Владимировна
  • Лукьянов Сергей Анатольевич
RU2345137C2
ВЫДЕЛЕННАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, КОДИРУЮЩАЯ БЕЛОК KillerRed (ВАРИАНТЫ), ВЫДЕЛЕННЫЙ БЕЛОК (ВАРИАНТЫ), КАССЕТА ЭКСПРЕССИИ, КЛЕТКА, СОДЕРЖАЩАЯ КАССЕТУ ЭКСПРЕССИИ 2011
  • Лукьянов Константин Анатольевич
  • Серебровская Екатерина Олеговна
  • Лукьянов Сергей Анатольевич
RU2458129C1
ВЫДЕЛЕННАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, КОДИРУЮЩАЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БИОСЕНСОР ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ ПЕРОКСИДА ВОДОРОДА, КАССЕТА ЭКСПРЕССИИ, КЛЕТКА, ПРОДУЦИРУЮЩАЯ БИОСЕНСОР, ВЫДЕЛЕННЫЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БИОСЕНСОР ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ ПЕРОКСИДА ВОДОРОДА, ВЫДЕЛЕННАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, КОДИРУЮЩАЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БИОСЕНСОР, ОПЕРАТИВНО СЛИТАЯ С НУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТОЙ, КОДИРУЮЩЕЙ СИГНАЛ ВНУТРИКЛЕТОЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ 2011
  • Билан Дмитрий Сергеевич
  • Белоусов Всеволод Вадимович
  • Лукьянов Сергей Анатольевич
RU2493260C2
КРАСНЫЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БИОСЕНСОР ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ ПЕРОКСИДА ВОДОРОДА В ЖИВЫХ КЛЕТКАХ 2013
  • Белоусов Всеволод Вадимович
  • Ермакова Юлия Геннадиевна
  • Ениколопов Григорий Николаевич
RU2535336C1
ХИМЕРНЫЙ БЕЛОК, ЯВЛЯЮЩИЙСЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ БИОСЕНСОРОМ ДЛЯ ОДНОВРЕМЕННОЙ ДЕТЕКЦИИ ПЕРОКСИДА ВОДОРОДА И ФОСФАТИДИЛИНОЗИТОЛ-3,4,5-ТРИФОСФАТА, НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, КОДИРУЮЩАЯ ТАКОЙ БЕЛОК, КАССЕТА ЭКСПРЕССИИ И ЭУКАРИОТИЧЕСКАЯ КЛЕТКА-ХОЗЯИН 2012
  • Белоусов Всеволод Вадимович
  • Мишина Наталия Михайловна
  • Чудаков Дмитрий Михайлович
RU2498996C1
ВЫДЕЛЕННАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, КОДИРУЮЩАЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БИОСЕНСОР, КАССЕТА ЭКСПРЕССИИ, КЛЕТКА ПРОДУЦИРУЮЩАЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БИОСЕНСОР, ВЫДЕЛЕННЫЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ БИОСЕНСОР 2012
  • Билан Дмитрий Сергеевич
  • Белоусов Всеволод Вадимович
  • Лукьянов Сергей Анатольевич
RU2515903C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 330 886 C2

Реферат патента 2008 года НОВЫЕ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ БЕЛКИ Aequorea coerulscens И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

Изобретение относится к области генной инженерии и биотехнологии и может быть использовано для мечения белков, клеток и организмов. Путем введения замен в нуклеиновую кислоту Aequorea coerulescens, кодирующую бесцветный GFP-подобный белок acGFP, получена нуклеиновая кислота, кодирующая флуоресцентный белок. Кассета экспрессии, содержащая данную нуклеиновую кислоту под контролем регуляторных элементов, обеспечивает биосинтез флуоресцентного белка в клетке. С помощью данной генетической конструкции получены трансгенный организм и клетка, продуцирующие флуоресцентный белок, кодируемый указанной нуклеиновой кислотой. Данный флуоресцентный белок используют в способах мечения клетки, внутриклеточной структуры и белка, а также для регистрации транскрипционной активности промотора. Применение изобретения позволяет расширить арсенал маркировочных средств, используемых в биохимии, молекулярной биологии и медицинской диагностике. 10 н. и 1 з.п. ф-лы, 25 ил.

Формула изобретения RU 2 330 886 C2

1. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая флуоресцентный полипептид, имеющая нуклеотидную последовательность, по существу, соответствующую открытой рамке считывания аминокислотной последовательности кодируемого флуоресцентного полипептида, где указанная выделенная нуклеиновая кислота выбрана из группы, состоящей из:

(a) нуклеиновой кислоты, полученной из нуклеиновой кислоты, которая кодирует белок Aequorea coerulescens acGFP, характеризующийся аминокислотной последовательностью, показанной на фиг. 1, путем введения замен в положения нуклеиновой кислоты Aequorea coerulescens, приводящих к по меньшей мере одной из замен E222G, Y220L, Н148Т или H148S и необязательно к одной или более заменам, выбранным из группы, состоящей из V111, N19D, Т62А, F64L, К101Е, Е115К, N121S, F165L, Е172К, Е172А, Т206А, F221L, Y237I, K238Q в указанной аминокислотной последовательности кодируемого полипептида, и к возникновению у кодируемого полипептида способности к флуоресценции;

(b) нуклеиновой кислоты, кодирующей аминокислотную последовательность, выбранную из группы аминокислотных последовательностей, показанных на фиг. 3, 5, 6, 7, 9, 12, 15, 17, 19 и 21.

2. Выделенная нуклеиновая кислота по п.1, содержащая нуклеотидную последовательность, выбранную из группы нуклеотидных последовательностей, показанных на фиг. 3, 5, 6, 7, 9, 12, 15, 17, 19, 21 и 23, или нуклеотидную последовательность, отличающуюся от указанной вследствие вырожденности генетического кода.3. Кассета экспрессии, содержащая нуклеиновую кислоту по п.1 под контролем регуляторных элементов, необходимых для экспрессии нуклеиновой кислоты в клетке-хозяине, которая будучи интегрированной в геном клетки или при введении в клетку в виде внехромосомного элемента, способна обеспечить экспрессию флуоресцентного полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой по п.1.4. Клетка, продуцирующая флуоресцентный полипептид, кодируемый нуклеиновой кислотой по п.3, содержащая кассету экспрессии по п.3 в виде внехромосомного элемента или элемента, интегрированного в геном этой клетки.5. Выделенный полипептид, способный к флуоресценции и кодируемый нуклеиновой кислотой по п.1.6. Слитый полипептид, способный к флуоресценции, состоящий из полипептида по п.5 и партнера слияния, представляющего собой направляющий к мишени пептид или сигнальный пептид.7. Трансгенный организм, содержащий кассету экспрессии по п.3 в виде внехромосомного элемента или интегрированную в геном и способный экспрессировать флуоресцентный полипептид по п.5.8. Способ мечения белка, включающий связывание указанного белка с полипептидом по п.5 путем создания нуклеиновой кислоты, кодирующей пептид по п.5, оперативно связанной с нуклеиновой кислотой, кодирующей указанный белок, и получение флуоресцентного слитого белка по п.6.9. Способ мечения клетки, включающей трансфекцию клетки кассетой по п.3 и продуцирование клеткой флуоресцентного пептида по п.5.10. Способ мечения внутриклеточной структуры, включающий (а) трансфекцию клетки экспрессионной кассетой, содержащей нуклеиновую кислоту по п.1, слитую с нуклеиновой кислотой, кодирующей сигнал клеточной локализации, специфичный в отношении клеточной структуры, подлежащей мечению, под контролем регуляторных элементов, обеспечивающих продуцирование флуоресцентного полипептида по п.5, слитого с сигналом клеточной локализации, и (b) экспрессию флуоресцентного слитого пептида в клетке.11. Способ регистрации транскрипционной активности промотора, включающий (а) продуцирование пептида по п.5 в клетке путем ее трансфекции экспрессирующей кассетой по п.3, содержащей промотор, ответственный в природе за экспрессию изучаемого гена; (b) регистрацию клеточной флуоресценции.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2008 года RU2330886C2

US 6096865 А, 01.08.2000
Устройство для поворачивания автомобильных прожекторов 1933
  • Михальский А.М.
SU34326A1
GREEN-FLUORESCENT PROTEIN
Радиотелефонный передатчик 1928
  • Малинин Р.М.
SU27722A1
US 5968750, 19.10.1999
US 5625048, 29.04.1997
US 5777079, 07.07.1998
Proteins
ЩИТОВОЙ ДЛЯ ВОДОЕМОВ ЗАТВОР 1922
  • Гебель В.Г.
SU2000A1
FEBS Lett
Топка с качающимися колосниковыми элементами 1921
  • Фюнер М.И.
SU1995A1
Nat Biotechnol
Металлический водоудерживающий щит висячей системы 1922
  • Гебель В.Г.
SU1999A1
ЩИТОВОЙ ДЛЯ ВОДОЕМОВ ЗАТВОР 1922
  • Гебель В.Г.
SU2000A1
RU 98115766 C1, 20.08.2000.

RU 2 330 886 C2

Авторы

Гурская Надежда Георгиевна

Фрадков Аркадий Федорович

Лукьянов Сергей Анатольевич

Пунькова Наталия Игоревна

Даты

2008-08-10Публикация

2003-01-17Подача