СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ГЕМОФИЛЕЗА И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА СВИНЕЙ Российский патент 2008 года по МПК A61K39/395 

Описание патента на изобретение RU2333771C2

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения гипериммунной сыворотки для лечения и профилактики гемофилеза и пастереллеза свиней. Известен способ изготовления гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней, получаемой от продуцентов свиней (RU 2118169 А61К 39/02, 39/09, 39/102 - прототип).

Однако данный способ экономически нецелесообразен: во-первых, не всегда в хозяйстве имеют место три вида инфекции: гемофилез, стрептококкоз и пастереллез; во-вторых, срок эксплуатации свиней составляет 5-6 месяцев (в зависимости от длины хвоста и клинического состояния продуцентов). Напротив, срок эксплуатации волов не менее 5 лет.

Технический результат заявляемого изобретения состоит в повышении выхода целевого продукта и упрощении способа.

Указанный технический результат предлагаемого способа достигается тем, что для создания грундиммунитета волам (не более одного раза в пять лет) двукратно подкожно в разные участки тела вводят инактивированные и концентрированные гемофилезный и пастереллезный антигены: сначала по 10-15 миллиардов микробных тел (млрд м.т), а через 14 дней - по 20-25 млрд м.т. с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия.

Гипериммунизацию волов проводят 7-10 внутримышечными инъекциями в возрастающих дозах инактивированных и концентрированных антигенов, очищенных от культуральной жидкости в общей дозе каждого антигена 1800-2400 млрд м.т. с интервалом 2-3 дня.

В процессе эксплуатации после каждого взятия крови (16-17 см3 крови на 1 кг массы тела) через 1-2 дня проводят очередные внутримышечные инъекции инактивированного концентрированного гемофилезного и пастереллезного антигенов в дозе по 400-500 млрд м.т. каждого, а через 8-10 дней после этого от продуцентов снова берут кровь.

Примеры выполнения грундиммунизации.

Пример 1. Для создания грундиммунитета волам двукратно подкожно в разные участки тела вводили инактивированные и концентрированные гемофилезные и пастереллезные антигены: сначала по 10 млрд м.т., а через 14 дней - по 20 млрд м.т. с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия.

Результаты определения активности.

Титры сыворотки после грундирования составили:

контроль (прототип)к Pasteurella multocidaA 1:21:2реакция пассивнойВ 1:41:4гемагглютинации (РПГА)D 1:21:2Haemophilus pleuropneumoniae 58701:81:8Реакция агглютинации (РА) ГУ-191:161:16

Пример 2. В сравнении с примером 1 увеличили дозы антигенов при грундиммунизации:

Вводили антигены: сначала по 15 млрд м.т., а через 14 дней - по 25 млрд м.т. с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия.

Результаты определения активности.

Титры сыворотки после грундирования составили:

контроль (прототип)к Pasteurella multocidaA 1:21:2реакция пассивнойВ 1:41:4гемагглютинации (РПГА)D 1:21:2Haemophilus pleuropneumoniae 58701:81:8Реакция агглютинации (РА) ГУ-191:161:16

Увеличение дозы антигенов при грундиммунизации сначала до 15 млрд м.т., а через 14 дней до 25 млрд м.т. не привело к повышению титра антител после грундирования.

Пример 3. Увеличили дозы антигенов при грундиммунизации:

Вводили антигены: сначала по 16 млрд м.т., а через 14 дней - по 26 млрд м.т. с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия.

Результаты определения активности.

Титры сыворотки после грундирования составили:

контроль (прототип)к Pasteurella multocidaA 1:21:2реакция пассивнойВ 1:41:4гемагглютинации (РПГА)D 1:21:2Haemophilus pleuropneumoniae 58701:81:8Реакция агглютинации (РА) ГУ-191:161:16

Увеличение дозы антигенов при грундиммунизации свыше сначала 15 млрд м.т., а через 14 дней - свыше 25 млрд м.т. не привело к повышению титра антител после грундирования.

Увеличение дозы антигенов не выгодно с экономической точки зрения.

Пример 4. Уменьшили дозы антигенов при грундиммунизации:

Вводили антигены: сначала по 9 млрд м.т., а через 14 дней - по 19 млрд м.т. с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия.

Результаты определения активности.

Титры сыворотки после грундирования составили:

контроль (прототип)к Pasteurella multocidaА нет антител1:2реакция пассивнойВ 1:21:4гемагглютинации (РПГА)D нет антител1:2Haemophilus pleuropneumoniae 58701:21:8Реакция агглютинации (РА) ГУ-191:21:16

Уменьшение дозы антигенов меньше сначала 10 млрд м.т., а через 14 дней - меньше 20 млрд м.т. привело к снижению титра антител после грундирования.

Таблица 1ПримерыIIIIIIIVКонтроль(прототип свиньи)Доза антигеновI инъекция10151691-2 (пастерелла)(млрд м.т.)2-3 (гемофилы)II инъекция202526192-4 (пастерелла)6-8(гемофилы)АктивностьP.multocidaсывороткиРПГА А1:21:21:201:2В1:41:41:41:21:4D1:21:21:201:2H.pleuropneum.РА 58701:81:81:81:21:8ГУ-191:161:161:161:21:16

Способ осуществляют следующим образом.

Пример 1. Грундиммунизацию осуществляли подкожно в разные участки тела двукратно сначала по 10-15 млрд м.т., а через 14 дней - по 20-25 млрд м.т. с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия.

Гипериммунизацию волов проводили путем 10 внутримышечных инъекций в возрастающих дозах инактивированного и концентрированного гемофилезного и пастереллезного антигенов, очищенных от культуральной жидкости в общем количестве 2400 млрд м.т. каждого антигена с интервалом 2-3 дня по схеме:

40-60-100-150-250-350-450 - 2-недельный перерыв - 200-300-500 млрд м.т.

Результаты определения активности.

Титры полученной сыворотки составили:

контроль (прототип)к Pasteurella multocidaA 1:1281:128реакция пассивнойВ 1:5121:512гемагглютинации (РПГА)D 1:1281:128Haemophilus pleuropneumoniae 58701:3201:320Реакция агглютинации (РА) ГУ-191:6401:640

Пример 2. Грундирование проводили так, как это описано в примере 1. В сравнении с примером 1 увеличено количество инъекций и дозы антигенов при гипериммунизации. Проводят 11 инъекций в общем количестве 3000 млрд м.т. каждого антигена по схеме: 40-60-100-150-250-350-450 - 2-х недельный перерыв - 200-300-500-600 млрд м.т.

Результаты определения активности.

Титры получаемой сыворотки составили:

Контроль (прототип)к P.multocidaA 1:1281:128РПГАВ 1:5121:512D 1:1281:128H.pleuropneumoniae 58701:3201:320PA ГУ-191:6401:640

Увеличение числа инъекций больше 10 и общего количества антигенов больше 2400 млрд м.т. не привело к дальнейшему повышению титра антител сыворотки. Увеличение количества антигенов и числа инъекций нецелесообразно, так как оказывает дополнительную нагрузку на иммунную систему продуцентов и не выгодно с экономической точки зрения.

Пример 3. Грундирование проводили так, как это описано в примере 1. Уменьшили количество инъекций при гипериммунизации до 7 при уменьшении общего количества вводимых микробных тел до 1800 миллиардов:

40-60-100-200-300-500-600 млрд м.т.

Титры полученной сыворотки составили:

Контроль (прототип)к P.multocidaA1:1281:128РПГАВ1:5121:512D1:1281:128H.pleuropneumoniae 58701:3201:320PA ГУ-191:6401:640

Уменьшение числа инъекций до 7 при уменьшении общего количества антигенов до 1800 млрд м.т.не привело к снижению титра антител в сыворотке.

Пример 4. Грундирование проводили так, как это описано в примере 1. Уменьшили количество инъекций при гипериммунизации до 6 при уменьшении общего количества вводимых микробных тел до 1300 каждого антигена по схеме:

40-60-150-250-350-450 млрд м.т.

Титры полученной сыворотки составили:

Контроль (прототип)к P.multocidaA1:641:128РПГАВ1:2561:512D1:641:128H.pleuropneumoniae 58701:1601:320PA ГУ-191:3201:640

Уменьшение числа инъекций до 6 при уменьшении общего количества вводимых антигенов до 1300 млрд м.т. каждого антигена привело к снижению титров антител в полученной сыворотке.

Таблица 2ПримерыIIIIIIIVКонтроль(прототип свиньи)Количество инъекций
антиген
10117610
Кол-во микробных тел (млрд)P.multocida H.pleuropneum.2400 24003000 30001800 18001300 13001000 1000АктивностьP.multocidaсывороткиРПГА А1:1281:1281 1281:641:128В1:5121:5121 5121:2561:512D1:1281:1281 1281:641:128H.pleuropneum.PA 58701:3201:3201:3201:1601:320ГУ-191:6401:6401:6401:3201:640

Предложенный способ апробирован с положительными результатами в лабораторных и производственных условиях.

Предложенный способ в отличие от известного обладает следующими преимуществами:

1/ увеличивается выход сыворотки в 3,2-3,5 раза (табл.3).

Таблица 3Вид продуцентаВес (кг)Кол-во крови с 1 кг живого веса животного (мл)Выход (мл)свиньи
волы
150-160
400-450
13
16
1950-2080
6400-7200

2/ более прост в исполнении и менее трудоемок.

Срок эксплуатации свиней 5-6 месяцев (в зависимости от длины хвоста и клинического состояния продуцентов). Процесс иммунизации и крововзятий у этого вида животных крайне трудоемок. Напротив, срок эксплуатации волов - не менее 5 лет.

Отсюда вытекает, что грунд- и гипериммунизация свиней проводится раз в 5-6 месяцев, в то время, как волов - раз в 5 лет.

3/ более экономически целесообразен, что вытекает из пунктов 1 и 2. Кроме того, данная сыворотка может использоваться для лечения и профилактики гемофилеза и пастереллеза в хозяйствах, в которых отсутствует стрептококковая инфекция.

Источник информации

RU 2118169 А61К 39/02, 39/09, 39/102 - прототип.

Похожие патенты RU2333771C2

название год авторы номер документа
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ГЕМОФИЛЕЗА, СТРЕПТОКОККОЗА И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА СВИНЕЙ 2007
  • Школьников Ефим Эмануилович
  • Коломнина Галина Федоровна
  • Самуйленко Анатолий Яковлевич
  • Гринь Светлана Анатольевна
  • Шегидевич Эдуард Алиевич
  • Ставцева Лилия Яковлевна
  • Сидоров Михаил Анисимович
  • Скородумов Дмитрий Иванович
  • Панин Александр Николаевич
  • Малик Евгений Васильевич
  • Крыжановская Елена Викторовна
  • Чулков Алексей Константинович
RU2357756C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ГЕМОФИЛЕЗА, СТРЕПТОКОККОЗА И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА СВИНЕЙ 1996
  • Школьников Е.Э.
  • Коломнина Г.Ф.
  • Белоусов В.И.
  • Лукьянова Е.М.
  • Сидоров М.А.
  • Скородумов Д.И.
  • Панин А.Н.
  • Малик Е.В.
  • Гараев И.М.
  • Шегидевич Э.А.
  • Федотов В.Б.
  • Ставцева Л.Я.
RU2118169C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ РОЖИ СВИНЕЙ 1999
  • Школьников Е.Э.
  • Коломнина Г.Ф.
  • Лукьянова Е.М.
  • Самуйленко А.Я.
  • Меньшенин В.В.
  • Галенский А.Г.
  • Шеин В.В.
RU2169582C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЫВОРОТКИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ (ВАРИАНТЫ) 2006
  • Ставцева Лилия Яковлевна
  • Соловьев Борис Васильевич
  • Спиридонов Александр Витальевич
RU2304442C1
Способ получения сыворотки для лечения и профилактики пастереллеза сельскохозяйственных животных, преимущественно свиней, пушных зверей и кроликов 1990
  • Шегидевич Эдуард Алиевич
  • Юдин Алексей Иванович
  • Федотов Владислав Борисович
  • Фоменко Галина Алексеевна
  • Коломнина Галина Федоровна
  • Антонова Наталья Ивановна
  • Бушуева Наталья Борисовна
  • Рогожин Сергей Павлович
  • Лукьянова Екатерина Михайловна
  • Душук Ростислав Владимирович
  • Шапошникова Елена Константиновна
  • Мазур Татьяна Васильевна
  • Нецепляева Людмила Ивановна
SU1792708A1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ЦИРКОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ, РЕПРОДУКТИВНО-РЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА И ГЕМОФИЛЕЗА СВИНЕЙ 2012
  • Любимов Александр Иванович
  • Крысенко Юрий Гаврилович
  • Трошин Евгений Иванович
  • Капачинских Надежда Анатольевна
RU2494760C1
ВАКЦИНА АССОЦИИРОВАННАЯ ИНАКТИВИРОВАННАЯ ГИДРООКИСЬАЛЮМИНИЕВАЯ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОЙ ПНЕВМОНИИ И САЛЬМОНЕЛЛЕЗА СВИНЕЙ И СПОСОБ ЕЕ ИЗГОТОВЛЕНИЯ 2003
  • Сидоров М.А.
  • Раевский А.А.
  • Самуйленко А.Я.
  • Субботин В.В.
  • Анисимова Л.В.
  • Кудрявцев В.В.
  • Бушуева Н.Б.
  • Скородумов Д.И.
  • Шегидевич Э.А.
  • Малик Е.В.
  • Коротеева Л.А.
RU2246316C1
ШТАММ HAEMOPHILUS PARASUIS ИЛ-1 - ВОЗБУДИТЕЛЬ ГЕМОФИЛЕЗНОГО ПОЛИСЕРОЗИТА СВИНЕЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ И ВАКЦИННЫХ ПРЕПАРАТОВ 2004
  • Русалеев Владимир Сергеевич
  • Прунтова Ольга Владиславовна
  • Гневашев Валентин Михайлович
  • Потехин Андрей Владимирович
  • Ручнова Ольга Ивановна
  • Щербаков Алексей Владимирович
RU2269570C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИВАЛЕНТНОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ПСЕВДОМОНОЗА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ 2008
  • Антипов Валерий Александрович
  • Болоцкий Иван Александрович
  • Пруцаков Сергей Владимирович
  • Васильев Александр Климентьевич
  • Семенцов Владимир Иванович
  • Ярцев Сергей Николаевич
  • Сусский Евгений Владимирович
  • Дубровин Иван Игоревич
RU2376034C1
ШТАММ Haemophilus parasuis СК-1 - ВОЗБУДИТЕЛЬ ГЕМОФИЛЕЗНОГО ПОЛИСЕРОЗИТА СВИНЕЙ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ И ВАКЦИННЫХ ПРЕПАРАТОВ 2004
  • Русалеев Владимир Сергеевич
  • Прунтова Ольга Владиславовна
  • Гневашев Валентин Михайлович
  • Потехин Андрей Владимирович
  • Ручнова Ольга Ивановна
  • Щербаков Алексей Владимирович
RU2268933C1

Реферат патента 2008 года СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ГЕМОФИЛЕЗА И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА СВИНЕЙ

Изобретение относится к области биотехнологии. Способ включает приготовление антигена из инактивированных и концентрированных культур Pasterella multocida сероваров A, B и D и Haemophilus pleuropneumoniae сероваров 1 и П, грундиммунизацию и гипериммунизацию возрастающими дозами антигена с последующим крововзятием и выделением целевого продукта. При этом в качестве продуцентов используют волов. Гипериммунизацию продуцентов проводят 7-10 - кратными внутримышечными инъекциями в общей дозе каждого антигена 1800-2400 миллиардов микробных клеток с интервалом 2-3 дня. А грундиммунизацию осуществляют подкожно в разные участки тела двукратно сначала по 10-15 миллиардов микробных клеток, а через 14 дней по 20-25 миллиардов микробных клеток с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия. Способ нетрудоемок, прост в исполнении, позволяет увеличить выход сыворотки в 3,2-3,5 раза. 3 табл.

Формула изобретения RU 2 333 771 C2

Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза и пастереллеза свиней, включающий приготовление антигена из инактивированных и концентрированных культур Pasterella multocida сероваров А, В и Д и Haemophilus pleuropneumoniae сероваров 1 и П, грундиммунизацию и гипериммунизацию возрастающими дозами антигена с последующим крововзятием и выделением целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве продуцентов используют волов, при этом гипериммунизацию проводят 7-10-кратными внутримышечными инъекциями в общей дозе каждого антигена 1800-2400 миллиардов микробных клеток с интервалом 2-3 дня, а грундиммунизацию осуществляют подкожно в разные участки тела двукратно сначала по 10-15 миллиардов микробных клеток, а через 14 дней по 20-25 миллиардов микробных клеток с добавлением 10 см3 гидроокиси алюминия.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2008 года RU2333771C2

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ГЕМОФИЛЕЗА, СТРЕПТОКОККОЗА И ПАСТЕРЕЛЛЕЗА СВИНЕЙ 1996
  • Школьников Е.Э.
  • Коломнина Г.Ф.
  • Белоусов В.И.
  • Лукьянова Е.М.
  • Сидоров М.А.
  • Скородумов Д.И.
  • Панин А.Н.
  • Малик Е.В.
  • Гараев И.М.
  • Шегидевич Э.А.
  • Федотов В.Б.
  • Ставцева Л.Я.
RU2118169C1
Способ получения сыворотки для лечения и профилактики пастереллеза сельскохозяйственных животных, преимущественно свиней, пушных зверей и кроликов 1990
  • Шегидевич Эдуард Алиевич
  • Юдин Алексей Иванович
  • Федотов Владислав Борисович
  • Фоменко Галина Алексеевна
  • Коломнина Галина Федоровна
  • Антонова Наталья Ивановна
  • Бушуева Наталья Борисовна
  • Рогожин Сергей Павлович
  • Лукьянова Екатерина Михайловна
  • Душук Ростислав Владимирович
  • Шапошникова Елена Константиновна
  • Мазур Татьяна Васильевна
  • Нецепляева Людмила Ивановна
SU1792708A1
US 5059419 А, 22.10.1991
US 5332572 А, 26.07.1994.

RU 2 333 771 C2

Авторы

Школьников Ефим Эмануилович

Коломнина Галина Федоровна

Гринь Светлана Анатольевна

Самуйленко Анатолий Яковлевич

Шегидевич Эдуард Алиевич

Ставцева Лилия Яковлевна

Сидоров Михаил Анисимович

Скородумов Дмитрий Иванович

Крыжановская Елена Викторовна

Даты

2008-09-20Публикация

2006-09-01Подача