ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА ДОБРОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ ГРУДИ 4-ГИДРОКСИТАМОКСИФЕНОМ Российский патент 2009 года по МПК A61K31/135 A61K9/06 A61P35/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к лечению и профилактике доброкачественных опухолей груди 4-гидрокситамоксифеном (4-ОНТ).

Уровень техники

Доброкачественные опухоли груди относятся к созвездию распространенных незлокачественных изменений ткани груди. Эти изменения включают многочисленные повреждения, которые имеют хорошо выраженные гистологические характеристики и могут быть классифицированы как пролиферативные и непролиферативные. Известные примеры включают аденоз, кисты, эктазию протока, фиброаденому, фиброкистозную болезнь, фиброз, гиперплазию и метаплазию. Поскольку доброкачественные опухоли груди являются экстроген-зависимыми, подверженная заболеваниям популяция представляет собой в основном взрослых женщин в период до менопаузы. В этой популяции опухоли могут пересекаться с рождением ребенка и контрацепцией, и варианты современного лечения могут неблагоприятно влиять на качество жизни пациента.

Хотя доброкачественные опухоли груди редко представляют собой непосредственную угрозу здоровью пациента, они часто вызывают устойчивую эмоциональную тревогу и физическую боль. В частности, для того, чтобы отличить доброкачественные опухоли от рака груди, их необходимо оценить гистологически. Такая оценка является дорогой, требующей времени, часто инвазивной (например, повторяющиеся аспирации с помощью иглы, биопсия и лаваж протока) и болезненной и подвергает пациента высокому эмоциональному стрессу.

Кроме того, многочисленные исследования продемонстрировали, что женщина с историей доброкачественной опухоли груди имеет повышенный риск рака груди (Dupont, 1985; Fitzgibbons, 1998; Carter, 1988 and Krieger, 1992). Уровень риска варьирует в зависимости от типа доброкачественной опухоли. Например, фиброаденома увеличивает риск инвазивного рака груди в 2,2 раза, аденоз увеличивает риск в 3,7 раза, атипия протока увеличивает риск в 3,9 раза и атипичная гиперплазия увеличивает его в 5,3 раза (Dupont, 1985; Bodian, 1993; Dupont, 1994). Риск развития рака груди дополнительно возрастает, когда присутствие доброкачественной опухоли груди сочетается с семейной историей рака груди. Например, атипия в сочетании с семейной историей рака груди увеличивает риск развития рака груди у пациента в 11 раз (Dupont, 1985).

Введение тамоксифена, лекарства против рака груди, значительно снижает риск того, что у пациента разовьется доброкачественная опухоль груди (Tan-Chiu, 2003). В этом отношении тамоксифен работает за счет конкурентного связывания с рецепторами для эстрогенов, блокируя таким образом эффекты эстрогенов на клетки груди. В целом тамоксифен снижает риск развития доброкачественной опухоли груди на 28%, но снижение риска варьирует в соответствии с типом заболевания. Одно недавнее исследование сообщило о статистически значимом 41% снижении для аденоза, 34% для кисты, 28% для эктазии протока, 33% для фиброкистозной болезни, 40% для гиперплазии и 49% для метаплазии. Для женщин моложе 50 лет введение тамоксифена на 41% снижает необходимость проведения биопсии груди. Психологические и экономические последствия такого снижения являются огромными.

Вопреки этим преимуществам тамоксифен имеет значительные недостатки. Потенциально он оказывает сильное воздействие на каждую клетку тела, несущую рецепторы для эстрогенов, и как антагонист и агонист, тамоксифен вызывает широкий ряд системных эффектов. Эти эффекты увеличивают риск возникновения рака эндометрия и саркомы, гиперплазии эндометрия и возникновения полипов, кист яичника, глубокого тромбоза вен и легочной эмболии, изменения в уровне печеночных ферментов и печеночного стеатоза, гиперлипидемии и глазных заболеваний, включая катаракты (Shushan, 1996; Nashino, 2003; Hoxumi, 1988.) Принятие тамоксифена орально препятствует возникновению беременности даже через два месяца после прекращения лечения и препятствует применению гормональной контрацепции. Кроме того, пациенты, получавшие тамоксифен орально, сообщают о появлении приливов, вагинальных нарушениях, депрессии, аменореи и тошноты (Ibis, 2002; Fentiman 1986, 1988, 1989).

Таким образом, по-прежнему существует значительная потребность в способах лечения и профилактики доброкачественных опухолей груди без провоцирования значительных неблагоприятных системных эффектов, в частности, у популяции женщин, не достигших менопаузы.

Раскрытие изобретения

Настоящее изобретение включает способ лечения доброкачественных опухолей груди путем введения 4-гидрокситамоксифена. Это способ лечения осуществляется путем локального введения, что приводит к более низким уровням лекарства в плазме крови, чем таковые, наблюдаемые при оральном введения тамоксифена.

Настоящее изобретение включает также способ профилактики доброкачественных опухолей груди путем введения 4-гидрокситамоксифена. Как и в случае лечебного подхода, профилактический подход также воплощается предпочтительно путем локального введения.

Для целей профилактики или лечения 4-гидрокситамоксифен может быть введен любым способом, который обеспечивает его доставку к клеткам, несущим рецепторы для эстрогенов in vivo. Как отмечалось, предпочтительно, чтобы введение было сделано подкожно (локально), чтобы устранить эффект первого прохождения и относящийся к этому метаболизм 4-гидрокситамоксифена в печени. При подкожном введении 4-гидрокситамоксифен может быть применен на любой поверхности кожи. Применение на груди является предпочтительным, поскольку при подкожном введении 4-гидрокситамоксифен имеет тенденцию концентрироваться в локальных подкожных тканях, имеющих рецепторы для эстрогенов.

Для осуществления изобретения подходит широкий ряд локальных композиций, но гидроалкогольные растворы и гидроалкогольные гели являются предпочтительными. Концентрация 4-гидрокситамоксифена в этих композициях может изменяться, но дозировка должна приводить к локальным концентрациям 4-гидрокситамоксифена в тканях, которые эффективно противопоставляются эффектам, вызываемым эстрогенами.

Краткое описание фигур

Фигура 1 показывает метаболизм тамоксифена.

Фигура 2 демонстрирует концентрации 4-гидрокситамоксифена в плазме крови у здоровой женщины после введения под кожу.

Осуществление изобретения

Предпочтительные воплощения изобретения

Важным аспектом настоящего изобретения является удивительное открытие, что при введении под кожу 4-гидрокситамоксифен эффективен как для лечения, так и для профилактики доброкачественных опухолей груди. Более того, подкожно введенный 4-гидрокситамоксифен приводит к более низким уровням лекарства (4-ОНТ) в плазме, чем стандартная доза орально введенного тамоксифена, и почти к полному отсутствию других метаболитов, обнаруженных после орального введения тамоксифена, что должно объяснять незначительные неблагоприятные побочные эффекты (Lee, 2003). Соответственно подкожное введение 4-гидрокситамоксифена является альтернативой тамоксифену как для лечения, так и для профилактики доброкачественных опухолей.

Соединение 4-гидрокситамоксифен или 1-[4-(2-N-диметиламиноэтокси)фенил]-1-(4-гидроксифенил)-2-фенилбут-1-ен представляет собой активный метаболит хорошо охарактеризованного анти-эстрогенового соединения тамоксифена. Благодаря присутствию двойной связи между двумя атомами углерода 4-гидрокситамоксифен существует в двух стереоизомерных формах. В соответствии с медицинской и биохимической литературой изомерные формы 4-гидрокситамоксифена обычно обозначаются как цис и транс изомеры. Однако из чисто химических перспектив это обозначение не является достаточно аккуратным, поскольку каждый связанный двойной связью атом углерода не содержит идентичную химическую группу. Таким образом, более подходящим является обозначение изомеров как Е (так называемая цис-форма) и Z (так называемая транс-форма) конфигурации. Оба Е и Z изомера 4-гидрокситамоксифена, одни или в сочетании являются полезными в соответствии с настоящим изобретением. Однако Z-изомер является предпочтительным, поскольку он более активен, чем Е-изомер.

4-гидрокситамоксифен действует как селективный модулятор рецептора эстрогенов, который проявляет тканеспецифичность по отношению к чувствительным к эстрогенам тканям. В ткани груди он функционирует как антагонист эстрогенов. Исследования показали, что 4-гидрокситамоксифен может регулировать транскрипционную активность эстрогеновых рецепторов, что может вносить вклад в его тканеспецифичную активность. In vitro 4-гидрокситамоксифен проявляет большую эффективность, чем тамоксифен, что было измерено путем определения сродства к эстрогеновым рецепторам при связывании или ERs, и сродство было подобно сродству эстрадиола к эстрогеновым рецепторам (Robertson et al., 1982; Kuiper et al., 1997). Z-4-гидрокситамоксифен ингибирует в культуре рост нормальных эпителиальных клеток груди человека в 100 раз больше, чем Z-тамоксифен (Malet et al., 1988).

Хотя 4-гидрокситамоксифен является метаболитом тамоксифена, его пригодность для лечения злокачественных опухолей груди не предсказывается предварительными экспериментами с самим тамоксифеном. У людей тамоксифен интенсивно метаболизируется, как показано на фигуре 1. Таким образом, его эффект in vivo является суммарным результатом индивидуального действия родительского соединения и действия метаболитов, конкурирующих за связывание с рецепторами в тканях-мишенях. Например, смотри Jordan, 1982. Каждое из этих соединений проявляет различные и непредсказуемые биологические активности в различных клетках, определяемые, в частности, индивидуальным эффектом каждого соединения на конформацию рецептора эстрогенов. Это означает, что связывание каждого соединения с эстрогеновым рецептором генерирует уникальную конформацию лиганд-рецептор, которая мобилизует различные кофакторы и приводит к различным фармакологическим эффектам различных соединений (Wijayaratne et al., 1999; Giambiagi et al., 1988).

Было описано несколько примеров этих различных эффектов. Например, тамоксифен, но не 4-гидрокситамоксифен, является сильным карциногеном в печени крысы (Carthew et al., 2001; Sauvez et al, 1999). Кроме того, тамоксифен, но не 4-гидрокситамоксифен, по сообщениям иницирует апоптоз в р53 (-) нормальных эпителиальных клетках молочных желез человека (Dietze et al., 2001). По контрасту, 4-гидрокситамоксифен проявляет значительный ингибиторный эффект на активность эстрогенсульфатазы в линиях раковых клеток молочных желез, в то время как тамоксифен оказывает незначительное или вообще не оказывает действия в этом отношении (Chetrite et al., 1993).

Способы приготовления 4-гидрокситамоксифена хорошо известны. Например, патент США №4919937 описывает синтез, введенный Робертсоном и Катценелленбогеном (Robertson and Katzenellenbogen, 1982), который происходит по стадиям:

Стадия 1 - Реакция между 4-(β-диметиламиноэтокси)-α-этилдезоксибензоином и пара-(2-тетрагидропиранилокси)фенилмагний бромидом.

Стадия 2 - Отдельно от стадии 1 образование 1-(4-гидроксифенил)-2-фенил-1-бутанона путем гидроксилирования 1,2-дифенил-1-бутанона.

Стадия 3 - Реакция между продуктами стадии 1 и стадии 2 с образованием 1-(4-диметиламиноэтоксифенил)-1-[пара-2-тетрагидропиранилокси)фенил]-2-фенилбутан-1-ола.

Стадия 4 - Дегидратация с метанолом/соляной кислотой дает 1-[пара-(β-диметиламиноэтокси)фенил-Z-1-(р-гидроксифенил)-2-фенил-1-бут-1-ен = 4-ОН-тамоксифен, смесь Е и Z изомеров.

Стадия 5 - Разделение Е и Z изомеров хроматографически и путем кристаллизации для получения постоянной специфической активности.

В соответствии с настоящим изобретением 4-гидрокситамоксифен может быть введен пациенту, который в соответствии с диагнозом имеет доброкачественную опухоль груди. Как это применяется здесь, термин «доброкачественная опухоль груди» относится к созвездию не-злокачественных изменений ткани груди. Предпочтительно, они будут включать эстроген-зависимый компонент, поскольку предполагается, что 4-гидрокситамоксифен первоначально проявляет свой эффект благодаря действию на рецепторы для эстрогенов. Примеры доброкачественных опухолей груди, которые лечат с применением настоящего способа, включают аденоз, кисты, эктазию протока, фиброаденому, фиброкистозную болезнь, фиброз, гиперплазию и метаплазию, а также другие фиброзо-кистозные изменения. Каждое из этих заболеваний, часто называемых «изменения» или «состояния», что обусловлено их широкой распространенностью, имеет хорошо определенные гистологические и клинические характеристики.

Термин «аденоз» относится к генерализованному заболеванию желез груди. Обычно это заболевание сопровождается увеличением долек груди, которые включают больше желез, чем обычно. При «склерозном аденозе» или «фиброзном аденозе» увеличенные дольки деформируются фиброзной тканью, похожей на шрамы.

«Кисты» являются аномальными мешками, заполненными жидкостью или полужидким материалом и наполненными эпителиальными клетками груди, развивающимися из структур долек железы. Они возникают как избыток жидкости внутри грудных желез, но могут расти до пропорций, которые растягивают окружающую ткань груди, вызывая боль. «Фиброкисты» являются кистозными повреждениями, ограниченным или расположенным в пределах заметного количества фиброзной соединительной ткани.

«Эктазия протока» относится к расширению молочного протока за счет липидных или клеточных остатков. Разрыв протоков вызывает инфильтрацию гранулоцитами и плазматическими клетками.

«Фиброаденома» относится к доброкачественным опухолям, которые происходят из железистого эпителия и включают видимую строму пролиферирующих фибробластов и соединительную ткань.

«Фиброз» относится просто к выдающейся части фиброзной ткани груди.

«Гиперплазия» относится к чрезмерному разрастанию клеток, где несколько слоев клеток выстилают базальную мембрану без образования ткани опухоли. Гиперплазия увеличивает массу молочной железы. В «эпителиальную гиперплазию» вовлечены клетки, выстилающие протоки грудной железы и долек, что дает начало терминам «гиперплазия протока» и «гиперплазия долек». На основе гистологических определений гиперплазия может быть охарактеризована как «обычная» или «атипичная».

«Метаплазия» относится к феномену, при котором дифференцированная ткань одного типа трансформируется в дифференцированную ткань другого типа. Метаплазия часто возникает вследствие изменения условий окружающей среды и обеспечивает способность клеток лучше противостоять изменениям.

Настоящее изобретение также рассматривает введение 4-гидрокитамоксифена для профилактики. В частности, профилактическое введение полезно у пациентов с увеличенным риском развития рака груди. Многие факторы риска для рака груди хорошо установлены. Например, семейная история рака груди, персональная история рака груди, предварительные доброкачественные опухоли груди, предварительное облучение всего места на груди у пациента с повышенным риском развития рака груди. Специфические факторы генетического риска включают мутации BRCA1, BRCR2, ATM, CHEK-2 и р53. Определенные факторы риска, относящиеся к образу жизни, включают задержку рождения ребенка до возраста старше 30 лет, длительное применение оральных контрацептивов и длительное применение гормональной заместительной терапии. Опытный медицинский работник может выявить эти и другие факторы риска для определения, будет ли полезно пациенту профилактическое применение 4-гидрокситамоксифена. При принятии такого решения практикующий врач может применить модель Гаила.

4-Гидрокситамоксифен особенно полезен для профилактики доброкачественных опухолей у женщин в период до менопаузы. В этой популяции для оккупации эстрогеновых рецепторов анти-эстроген должен конкурировать с высокими количествами циркулирующих в крови эстрогенов. Поскольку 4-гидрокситамоксифен имеет в 100 раз более высокое сродство для эстрогеновых рецепторов, чем тамоксифен, он лучше способен конкурировать за рецепторы при низких дозах. Способность применять низкие дозы имеет определенную важность в аспекте профилактики, где пациент подвергается действию лекарства не очень длительно, и побочные эффекты являются приемлемыми.

В соответствии с настоящим изобретением 4-гидрокситамоксифен может быть введен в любой форме дозировки и через любую систему, которая обеспечивает доставку активного соединения к эстрогеновым рецепторам груди in vivo. Предпочтительно, 4-гидрокситамоксифен доставляется путем «подкожного введения», фраза обозначает любой способ доставки лекарства от поверхности кожи пациента через stratum corneum, эпидермис и слои дермы в микроциркуляцию. Обычно это происходит путем диффузии по градиенту концентрации. Диффузия может происходить за счет проникновения внутрь клеток (через клетки), между клетками (межклеточное проникновение), через фолликулы волос, потовые и сальные железы (трансаппендагеальное проникновение) или комбинированным путем.

Подкожное введение 4-гидрокситамоксифена дает несколько преимуществ. Во-первых, это устраняет печеночный метаболизм, который происходит вслед за оральным введением (Mauvias-Jarvis et al., 1986). Во-вторых, подкожное введение значительно снижает системную экспозицию лекарства и сопутствующий риск неспецифической активации рецепторов эстрогенов в организме; это связано с тем, что 4-гидрокситамоксифен первично абсорбируется в локальные ткани. В частности, когда 4-гидрокситамоксифен вводится подкожно в области груди, он аккумулируется в ткани груди в высоких концентрациях (что вероятно обусловлено наличием здесь множества эстрогеновых рецепторов) без создания высокой концентрации в плазме (Mauvais-Jarvis et al., supra). Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением 4-гидрокситамоксифен может быть применен на любой поверхности кожи, но предпочтительно к одной или обеим грудным железам.

Хотя изобретение не ограничено какой-либо конкретной теорией, имеют место клинически значимые побочные эффекты анти-эстрогеновых агентов, когда агенты вытесняют эстрадиол из тканей, не являющихся мишенями. Поскольку 4-гидрокситамоксифен и эстрадиол имеют близкое сродство к эстрогеновым рецепторам, конкуренция между ними за связывание с рецепторами будет приблизительно равной, когда концентрация каждого соединения приближается друг к другу. Если концентрация 4-гидрокситамоксифена превышает концентрацию эстрадиола, первый будет связан предпочтительно с эстрогеновыми рецепторами, и наоборот.

Соответственно, дозировки 4-гидрокситамоксифена, которые приводят к его концентрациям в плазме более низким чем 80 пг/мл, то есть чем средняя концентрация эстрадиола у нормальной женщины в период до менопаузы, являются предпочтительными. Более предпочтительны дозировки 4-гидрокситамоксифена, которые будут приводить к концентрациям в плазме меньшим, чем примерно 50 пг/мл. Дневные дозировки для введения могут быть первоначально рассчитаны на основе коэффициентов абсорбции 4-гидрокситамоксифена, концентрации в ткани груди, являющейся желательной, и концентрации в плазме, которая не должна быть превышена. Конечно, начальная дозировка может быть оптимизирована для каждого пациента в зависимости от индивидуальных ответов.

Как отмечалось выше, путем направления 4-гидрокситамоксифена к ткани груди, в этой ткани можно достичь высоких концентраций без одновременного повышения уровней 4-гидрокситамоксифена в плазме до точки, где имеет место значительная системная конкуренция за рецепторы для эстрадиола. При подкожной дозировке 1 мг/грудь/день концентрация 4-гидрокситамоксифена в ткани груди превышает нормальные концентрации эстрадиола в ткани груди в 4 раза (Barrat et al., 1990; Pujol et al., supra). Более того, 4-гидрокситамоксифен, примененный таким образом, достигает концентраций в ткани груди, которые на порядок выше, чем концентрации в плазме, то есть 10:1. По контрасту с этим соотношение 4-гидрокситамоксифена в ткани груди и плазме после орального введения тамоксифена составляет примерно 5:1.

В подкожной композиции при дозировках порядка 0,25-2,0 мг/грудь/день 4-гидрокситамоксифена должен достигаться желаемый результат, с предпочтительной дозировкой примерно 0,5-1,0 мг/грудь/день. В конкретных воплощениях дозировки составляют примерно 0,25, 0,5, 0,75, 1,0, 1,5 или 2,0 мг/грудь/день 4-гидрокситамоксифена.

Подкожное введение может осуществляться главным образом двумя различными способами: (i) путем смешивания терапевтически активного соединения или его нетоксичной фармацевтически приемлемой соли с подходящим фармацевтическим носителем и, необязательно, усилителем проницаемости, с образованием мазей, эмульсий, лосьонов, растворов, кремов, гелей и тому подобного, где количество названного препарата прикладывается к определенной области кожи, или (ii) путем включения терапевтически активного вещества в кусочки пластыря или трансдермальные системы доставки в соответствии с известной технологией.

Эффективность подкожного введения лекарства зависит от многих факторов, включая концентрацию лекарства, поверхность области применения, время и длительность применения, предварительное облучение, гидратация кожи, температура кожи, физико-химические свойства лекарства и распределение лекарства между композицией и кожей. Композиции лекарства, предназначенные для подкожного применения, используют преимущества этих факторов для достижения оптимальной доставки. Такие композиции часто включают усилители проницаемости, которые улучшают подкожную абсорбцию за счет снижения устойчивости stratum corneum путем обратимого изменения его физико-химических свойств, изменения гидратации в stratum corneum, действуя как со-растворитель или изменяя организацию липидов и белков в межклеточном пространстве. Такие усилители внутрикожной абсорбции включают сурфактанты, диметилсульфоксид (ДМСО), спирт, ацетон, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, жирные кислоты или жирные спирты и их производные, гидроксикислоты, пирролидоны, мочевину, эссенциальные масла и их смеси. В дополнение к химическим усилителям внутрикожную абсорбцию могут увеличивать физические методы. Например, окклюзионная повязка вызывает гидратацию кожи. Другие физические способы включают ионтофорез и сонофорез, которые применяют электрическое поле и ультразвук высокой частоты соответственно для усиления абсорбции лекарств, которые плохо абсорбируются, что обусловлено их размером и ионными характеристиками.

Многие факторы и способы, относящиеся к подкожной доставке лекарства, рассмотрены в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Alfonso R., Gennaro (Lippincott Williams&Wilkins, 2000), стр.836-858 и в Percutaneous Absorbtion: Drug Cosmetic Mechanisms Methodology, Bronaugh and Maibach (Marcel Dekker, 1999. Как свидетельствуют эти публикации, в фармацевтической области можно манипулировать различными факторами и способами для достижения эффективности подкожной доставки лекарства.

4-Гидрокситамоксифен является большой и очень липофильной молекулой, следовательно, без помощи усилителя проницаемости он плохо проникает в кожу. Соответственно композиции 4-гидрокситамоксифена, примененные в настоящем исследовании, предпочтительно включают один или более усилителей проницаемости. Спирты являются предпочтительными усилителями, поскольку 4-гидрокситамоксифен растворим в спирте. Изопропилмиристат также является предпочтительным усилителем.

Для подкожного введения 4-гидрокситамоксифен может быть доставлен в виде мази, крема, геля, эмульсии (лосьона), пудры, масла или подобной композиции. С этой целью композиция может включать обычные добавки эксципиентов, включая растительные масла, такие как миндальное масло, оливковое масло, масло из косточек персика, арахисовое масло, касторовое масло и подобное; животные масла, ДМСО, жир и жироподобные вещества, ланолиновые липоиды, фосфатиды, углеводороды, такие как парафины, вазелин, воска, детергенты и эмульсифицирующие агенты, лецитин, спирты, каротин, полиолы или полигликоли, такие как глицерол (или глицерин), простые эфиры глицерина, гликоли, простые эфиры гликолей, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, нелетучие жирные спирты, кислоты, сложные эфиры, летучие алкогольные соединения, мочевина, тальк, производные целлюлозы, красящие агенты, антиоксиданты и консерванты.

В соответствии с изобретением 4-гидрокситамоксифен может быть также доставлен с помощью трансдермального кусочка пластыря. В одном воплощении пластырь включает резервуар для композиции 4-гидрокситамоксифена. Пластырь может включать (а) не проницаемую для раствора фольгу на обратной стороне, (б) слоистый элемент, имеющий полость, (в) микропористую или полупроницаемую мембрану, (г) самоклеящийся слой и (д) необязательно удаляемую пленку на обратной стороне. Слоистый элемент, имеющий полость, может быть образован фольгой обратной стороны и мембраной. Альтернативно пластырь может включать (а) не проницаемую для раствора фольгу на обратной стороне, (б) пену с открытыми порами, пену с закрытыми порами, ткане-подобный слой или волокнистый сетчатый слой в качестве резервуара, (в) если слой в соответствии с (б) не самоклеящийся, самоклеящийся слой и (г) необязательно удаляемую пленку на обратной стороне.

В предпочтительных воплощениях изобретения 4-гидрокситамоксифен формулируется как гидроалкогольный гель. Количество 4-гидрокситамоксифена в таком геле может изменяться в интервале примерно от 0,001 до 1,0 грамма 4-гидрокситамоксифена на 100 грамм геля. Предпочтительно, оно изменяется примерно от 0,01 до 0,2 грамм 4-гидрокситамоксифена на 100 грамм геля. Следовательно, количество 4-гидрокситамоксифена может быть примерно 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,10, 0,11, 0,12, 0,13, 0,14, 0,15, 0,16, 0,17, 0,18, 0,19 или 0,20 грамм на 100 грамм геля.

Предпочтительно также, когда композиция 4-гидрокситамоксифена включает один или более сложных эфиров в качестве усилителей проницаемости. Одним крайне предпочтительным примером сложного эфира жирной кислоты в качестве усилителя проницаемости является изопропилмиристат. Когда изопропилмиристат применяется в геле, количество может изменяться примерно от 0,1 до 5,0 грамм на 100 грамм геля. Предпочтительно количество изопропилмиристата варьирует в интервале примерно от 0,5 до 2,0 грамм на 100 грамм геля. Таким образом, количество изопропилмиристата может быть примерно 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9 или 2,0 грамм на 100 грамм геля.

Композиции 4-гидрокситамоксифена изобретения в основном включают один или более неводных носителей, таких как алкогольные носители. Эти носители должны быть способны растворять как 4-гидрокситамоксифен, так и любые применяемые усилители проницаемости. Они должны также иметь низкую точку кипения, предпочтительно ниже 100°С при атмосферном давлении, для обеспечения быстрого испарения при контакте с кожей. Примеры подходящих не-водных носителей включают этанол, изопропанол и этилацетат. Этанол и изопропанол являются предпочтительными. В частности, этанол эффективно вносит вклад в подкожную абсорбцию 4-гидрокситамоксифена за счет быстрого испарения при контакте с кожей. Количество абсолютно неводного носителя в композиции геля в основном варьирует между 35% и 99,9% по весу, предпочтительно между 50% и 85%, более предпочтительно между 60% и 75%. Таким образом, количество абсолютно неводного носителя в композиции геля может быть примерно 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74% или 75%.

Композиции могут также включать водный носитель, который позволяет солюбилизировать любые гидрофильные молекулы композиции, а также облегчает увлажнение кожи. Водный носитель может также регулировать рН. Водные носители включают защелачивающие и основные буферные растворы, включая фосфатные буферные растворы (например, двухосновный и одноосновный фосфат натрия), цитратные буферные растворы (например, цитрат натрия или цитрат калия) и просто очищенную воду. Количество водного носителя предпочтительно изменяется между 0,1% и 65% по весу фармацевтической композиции, более предпочтительно, между 15% и 50% и еще более предпочтительно между 25% и 40%. Следовательно, количество водного носителя может быть примерно 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39% или 40%. В случае, когда композиции включают водный носитель, количество абсолютного алкогольного носителя в композиции составляет предпочтительно примерно от 60% примерно до 75%.

Дополнительно композиции 4-гидрокситамоксифена могут включать один или более желатинизирующих агентов для увеличения вязкости композиции и/или для функционирования в качестве солюбилизирующего агента. В зависимости от природы желатинизирующего агента, он может составлять между 0,1% и 20% по весу композиции, предпочтительно между 0,5% и 10%, и еще более предпочтительно между 0,5% и 5%. Следовательно, количество желатинизирующего агента может быть примерно 0,5%, 1,0%, 1,5%, 2,0%, 2,5%, 3,0%, 3,5%, 4,0%, 4,5%, 5,0%, 5,5%, 6,0%, 6,5%, 7,0%, 7,5%, 8,0%, 8,5%, 9,0%, 9,5% или 10%. Предпочтительные желатинизирующие агенты включают карбомеры, производные целлюлозы, полоксамеры и полоксамины. Более детально, предпочтительные желатинизирующие агенты - это хитозан, декстран, пектины, природные смолы и производные целлюлозы, такие как этилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропил метилцеллюлоза (НРМС), карбоксиметилцеллюлоза (CMC) и подобное. Одним очень предпочтительным желатинизирующим агентом является гидроксипропилцеллюлоза.

Когда композиция включает желатинизирующий агент, в частности, не нейтрализованный предварительно акриловый полимер, может быть выгодным включать также нейтрализующий агент.Соотношение нейтрализующий агент/желатинизирующий агент предпочтительно составляет между 10:1 и 0,1:1, более предпочтительно между 7:1 и 0,5:1 и еще более предпочтительно между 4:1 и 1:1. Следовательно, соотношение нейтрализующий агент/желатинизирующий агент может быть примерно 7:1, 6:1, 5:1, 4:1, 3:1, 2:1, 1:1 или 0,5:1. В присутствии полимера нейтрализующий агент должен образовывать соли, которые растворимы в носителе. Нейтрализующий агент должен также позволять происходить максимальному набуханию полимерных цепей во время нейтрализации зарядов и образования полимерных солей. Полезные нейтрализующие агенты включают гидроксид натрия, гидроксид аммония, гидроксид калия, аргинин, аминометилпропанол, троламин и трометамин. Специалисты выберут нейтрализующие агенты в соответствии с типом желатинизирующего агента, примененного в композиции.

Однако, когда в качестве желатинизирующих агентов применяются производные целлюлозы, нейтрализующие агенты не требуются.

Таблица 1 описывает композицию двух очень предпочтительных гелевых композиций 4-гидрокситамоксифена.

Таблица 1 Композиция гелеобразной формулировки 4-гидрокситамоксифена Ингредиент Количество на 100 г геля 20 мг 4-ОНТ геля 57 мг 4-ОНТ геля 4-гидрокситамоксифен 0,02 г 0,057 г Абсолютный этиловый спирт, ЕР USP 66,5 г 66,5 г Изопропилмиристат, ЕР USP 1 г 1 г Гидроксипропилцеллюлоза, ЕР USP 1.5 г 1,5 г Фосфатный буфер (рН 7, разведен 1:4) q.s. 100 г q.s. 100 г

Ссылки на следующие репрезентативные примеры помогут обеспечить более полное понимание изобретения.

Пример 1: Демонстрация подкожной доставки 4-гидрокситамоксифена

Четыре пациента с раком груди получали [³Н]-4-гидрокситамоксифен в растворе абсолютного спирта, прикладываемый непосредственно к груди в специфические интервалы между 12 ч - 7 дней до хирургического вмешательства по поводу удаления пораженной ткани. После хирургической операции было обнаружено, что как пораженные удаленные ткани, так и нормальная ткань грудной железы, окружающая опухоль, включали радиоактивность (Kuttenn et al, 1985).

В дополнительном исследовании 9 из 12 пациентов, запланированных для хирургической операции по удалению гормон-зависимого рака груди, получали Z-[³H]-4-гидрокситамоксифен (80 мкКи) в 60% растворе спирта и 3 пациента для сравнения получали Z-[³H]-тамоксифен (80 мкКи). Пациенты получали [³H]-меченое лекарство, прикладываемое непосредственно на больную грудь во временном интервале от 12 часов до 7 дней до операции по удалению пораженной ткани. Ткань груди из трех областей: опухоль, ткань, непосредственно окружающая опухоль, и нормальная ткань, были изъяты и немедленно заморожены в жидком азоте. Дополнительно в те же интервалы были получены образцы плазмы крови и мочи и заморожены до анализа.

Таблица 2 показывает результаты проведенных анализов. 4-гидрокситамоксифен концентрировался преимущественно в цитозольной и ядерной фракциях ткани груди, где представлены эстрогеновые рецепторы. В этих внутриклеточных участках 4-гидрокситамоксифен сохранялся неметаболизированным, исключая ограниченную изомеризацию Z в Е форму. Задержка лекарства в груди длилась приблизительно 4 дня в группе с 4-гидрокситамоксифеном, но была короче и значительно слабее в группе с тамоксифеном.

Таблица 2 [³Н]-гидрокситамоксифен и метаболиты, идентифицированные в опухоли ткани груди после подкожного введения Z-[³Н]-гидрокситамоксифена в пораженную грудь Метаболиты % Метаболитов в ткани груди 12 ч¹ 24 ч 36 ч 4 Дня 7 Дней 4-гидрокситамоксифен 97 94 78 70 65 N-Десметил-4-гидрокситамоксифен 2 4 14 20 16 Бисфенол 1 2 3 8 8 N-Десметилтамоксифен     <1 <1 3-4 Тамоксифен       <1 2

Время после введения Z-[³Н]-4-гидрокситамоксифена

Процент идентифицированной радиоактивности в качестве Z-[³H]-4-гидрокситамоксифена в ткани груди после подкожного введения медленно уменьшался в течение семи дней (от 97% до 65%). Во время этого периода происходило увеличивающееся превращение Z изомера в Е изомер с похожими процентами, наблюдаемьми на 7 день (32% и 33%).

Радиоактивность в крови, обусловленная [³Н]-4-гидрокситамоксифеном, увеличивалась постепенно с неизменной концентрацией (плато) в период от 4 до 6 дней. Это контрастирует с [³H]-тамоксифеном, который быстро появляется в крови и концентрация которого находится на плато в течение 2 дней. Через 36 часов после подкожного введения [³Н]-гидрокситамоксифена лишь 0,5% введенной радиоактивности было обнаружено в крови.

В отличие от почти полного отсутствия метаболизма 4-гидрокситамоксифена в ткани груди, в крови происходила значительная метаболизация. В крови через 24 ч после введения 68% радиоактивности было представлено 4-гидрокситамоксифеном, 18% - N-десметил-4-гидрокситамоксифеном и 11% - бисфенолом.

После подкожного введения 4-гидрокситамоксифена пик элиминации с мочой наблюдался в более позднее время по сравнению с подкожным введением тамоксифена. После применения 4-гидрокситамоксифена в моче наблюдалось постепенное увеличение концентрации метаболитов, главным образом, N-десметил-4-гидрокситамоксифена и бисфенола.

Этот пример демонстрирует, что подкожное применение 4-гидрокситамоксифена к груди приводит к существенному и длящемуся увеличению концентрации лекарства с минимальным метаболизмом, стабильной и очень низкой концентрации в плазме и медленной элиминации через мочу.

Пример 2: Демонстрация фармакокинетики и фармакодинамики подкожно введенного 4-ОН-тамоксифена по сравнению с 20 мг тамоксифена, введенного орально

В этом исследовании проведено сравнение концентраций 4-гидрокситамоксифена в ткани и плазме после подкожного введения с применением гидроалкогольного геля и плазматической концентрации 4-гидрокситамоксифена после орального введения тамоксифена (Pujol, 1995).

Тридцать один пациент, запланированный для операции по поводу рака груди, были распределены случайным образом в 1-5 групп. Они получали лечение либо тамоксифеном орально, либо 4-гидрокситамоксифеном подкожно, как показано в таблице 3. Лечение было ежедневным и длилось в течение 3-4 недель до хирургической операции. Исследование дало оценку трем различным дозировкам 4-гидрокситамоксифена (0,5, 1 или 2 мг/день) и двум областям применения на коже (либо к обеим грудным железам, либо к большой области кожи, включая руки, предплечья и плечи). Одна группа пациентов получала 20 мг/день (дважды в день по 10 мг) тамоксифена (Nolvaldex) орально.

Таблица 3 Группы лечения Группа № Лекарство Участок применения Дозировка мг/грудь/день Общая ежедневная дозировка (мг/день) 1 6 РО тамоксифен - - 20^а 2 6 4-ОНТ гель Обе груди 0,25 0,5 3 5 4-ОНТ гель Обе груди 0,50 1 4 5 4-ОНТ гель Руки, предплечья, плечи - 1 5 6 4-ОНТ гель Руки, предплечья, плечи - 2^{б a}10 мг дважды в день ^бРазделено на два ежедневных применения: 1 мг утром и 1 мг вечером.

Гель 4-гидрокситамоксифена (20 мг 4-гидрокситамоксифена/100 мг гидроалкогольного гена; Besins International Laboratories) был упакован под давлением дозометрическим насосом, так что обеспечивалась доставка 1,25 мг геля/измеренную дозу (то есть 0,25 мг 4-гидрокситамоксифена на дозировку).

Во время хирургической операции были изъяты два образца (1 см³ каждый), один опухолевый, а другой макроскопически нормальный. Они были немедленно заморожены в жидком азоте до использования. Образцы крови были получены в день и за день до операции. Все ткани и образцы плазмы были проанализированы на концентрацию 4-гидрокситамоксифена методами газовой хроматографии/масс- спектрометрии (GG-MS).

Образы крови до лечения и после лечения были проанализированы на полное содержание клеток (СВС), билирубин, сывороточную глутамин-пируват трансаминазу (SGPT), сывороточную глутамин-оксалоацетат трансаминазу (SGOT), щелочную фосфатазу, креатинин, эстрадиол, фолликулостимулирующий гормон (FSH), лютеинизирующий гормон (LH), глобулин, связывающий половые гормоны, холестерин, липопротеиды высокой плотности (HDL), липопротеиды низкой плотности (LDL), триглицериды, фибриноген и анти-тромбин III.

Таблица 4 суммирует данные о концентрации 4-гидрокситамоксифена, обнаруженные в ткани груди и плазме. Нормальная и опухолевая ткани груди содержали близкие концентрации 4-гидрокситамоксифена во всех группах, получавших лечение. В наиболее высоких концентрациях 4-гидрокситамоксифен концентрировался в ткани груди, когда гель был апплицирован непосредственно на грудь, а не на другие большие поверхности кожи.

Таблица 4 Концентрации 4-гидрокситамоксифена Группа N Среднее ± SD 4-гидрокситамоксифена (ряд) Концентрация в плазме (пг/мл) Нормальная ткань (пг/г) Опухоль (пг/г) День перед операцией День операции 1 6 2326±585 2317±1098 10215±2151 12453+3751 (1371-2959)^а (881-4176) (5873-11511) (9568-18904)^a 2 6 0 17±27 353±513 1447±2673 (0-0)^а (0^c-61) (0^d-1317) (0^f-6889) 3 5 164±131 62±71 1112±1125 1877±2472 (29-279)^b (28-190) (197-2979) (345-6211) 4 5 94±76 13±29 140±130 552±357 (35-201)^b (0^c-65) (0^c-270) (271-1150) 5 6 78+138 73±114 992±2195 224±312 (0^c±284)^b (0^c-244) (0^d-5462) (0^d-779) ^an=5 ^bn=4 ^c4 пациента имели неопределяемые уровни 4-гидрокситамоксифена (LOQ=20 пг/мл) ^d3 пациента имели неопределяемые уровни 4-гидрокситамоксифена ^e2 пациента имели неопределяемые уровни 4-гидрокситамоксифена ^f1 пациент имел неопределяемый уровень 4-гидрокситамоксифена

Побочные эффекты не создавали значительных проблем. Лечение через кожу не вызывало никакого местного раздражения кожи. Одна женщина в группе 2 (0,5 мг/день 4-гидрокситамоксифенового геля) сообщила о головокружении, цистите и умеренном вагините, который имел место на седьмой день лечения. Одна женщина в группе 1 (прием тамоксифена орально) сообщила о приливах и слабом вагините на пятый день лечения.

Не существовало различий между образцами, взятыми до и после лечения, для любого гематологического или сывороточного параметра у пациентов, которые получали гель 4-гидрокситамоксифена. Однако наблюдалось статистически значимое снижение анти-тромбина III и фибриногена и статистически значимое увеличение в счете тромбоцитов и лимфоцитов в группе, получавшей тамоксифен орально, что согласуется с биологическими эффектами этого лекарства, наблюдаемыми в других исследованиях.

Пример 3: Демонстрация переносимости и фармакокинетики вводимого подкожно 4-ОН-тамоксифена у здоровых женщин

Это исследование демонстрирует толерантность и фармакокинетику применяемого локально геля 4-гидрокситамоксифена у здоровых женщин в период до менопаузы в возрасте 18-45 лет. Каждый участник прикладывал гель ежедневно в течение двух менструальных циклов.

Были тестированы три дозировки и две концентрации геля, как показано в таблице 5. Для групп А-В гель, содержащий 20 мг 4-гидрокситамоксифена/100 г, был выдавлен с применением сжимаемого дозометрического насоса, который доставлял 0,25 мг 4-гидрокситамоксифена/дозировку. Исследование группы С было приостановлено, поскольку количество геля было слишком большим, чтобы прикладывать к одной груди. Группы Г и Д получали более концентрированный гель, который содержал почти в 3 раза больше 4-гидрокситамоксифена: 57 мг 4-гидрокситамоксифена/100 г или 50 мг 4-гидрокситамоксифена/100 мл геля. Этот более концентрированный гель также был доставлен с применением дозометрического насоса, который давал 0,25 мг 4-гидрокситамоксифена/дозировку.

Таблица 5 Группы лечения Группа N Дозировка Концентрация геля (мг 4-ОНТ/г геля Лечение А 12 0,5 20 мг/100 г 1 отмеренная доза/грудь/день Б 8 1 20 мг/100 г 2 отмеренные дозы/грудь/день В 2 2 20 мг/100 г исследование прервано Г 12 1 57 мг/100 г 2 отмеренные дозы/грудь/день Д 12 2 57 мг/100 г 4 отмеренные дозы/грудь/день

В конце менструального цикла каждая пациентка получала единичную дозу, после которой были собраны серии образцов крови через 0, 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 12, 18, 24, 36, 48 и 72 часа.

В первый день после менструации было начато лечение, которое состояло из ежедневной аппликации геля между двумя менструальными циклами. Образцы крови собирали через 24 часа после утренней аппликации геля в дни 7, 20 и 25 первого и второго циклов. В последний день введения, 25 день второго менструального цикла, были собраны серии образцов крови до аппликации и через 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 12, 18, 24, 36, 48 и 72 часа после аппликации геля. Образцы были проанализированы на 4-ОН-тамоксифен, эстрадиол, прогестерон, FSH и LH.

Концентрация 4-гидрокситамоксифена в плазме оставалось определяемой в течение 72 часов после последней аппликации геля. Таким образом, для гарантии, что данные были получены до тех пор, пока 4-гидрокситамоксифен становился необнаруживаемым в крови, были собраны дополнительные образцы от некоторых участников исследования с интервалами до 92 дней после последней аппликации геля.

Таблица 6 показывает среднее ± стандартное отклонение (SD) концентраций 4-гидрокситамоксифена в плазме с вариациями в скобках. Единичная дозировка 0,5 мг не обеспечивала обнаруживаемой концентрации 4-гидрокситамоксифена, но у 6 из 12 пациентов имелись обнаруживаемые концентрации в плазме (>5 пг/мл) после единичной дозы в 1 мг.

Таблица 6 Среднее ± SD концентраций 4-гидрокситамоксифена у здоровых женщин после ежедневного подкожного введения в течение двух менструальных циклов Цикл День Время после введения (ч) Среднее ±SD (изменения показаны в скобках) в пг/мл 0,5 мг/день (n=12)¹ 1 мг/день (n=8)¹ 1 мг/день (n=12)² 2 мг/день (n=12)² Первый 1 0 (0-17,2) (0-13.9) (0-9,5) (0-0) 7 24 6,4±5,6 (<LOQ-16,8) 15,2±9,7 (<LOQ-26,8) 14,4±13,1 (<LOQ-37,9) 26,9±18,2 (8,9-71,3) 20 24 13,6±7,9 (<LOQ-25,9) 17,3±9,5 (<LOQ-29,8) 18,1±15,8 (<LOQ-44,5) 44,0±29,2 (10,5-117,5) 25 24 23,9±23,4 (<LOQ-73,1) 15,5±6,6 (6,4-25,0) 19,8±16,2 (6,2-57,0) 45,4±31,0 (17,9-120,1) Второй 7 24 25,2±16,1 (6,5-61,7) 17,4±11,2 (5,7-39,6) 22,2±16,4 (9,0-64,4) 42,2±24,8 (18,2-98,0) 20 24 15,7±14,0 (<LOQ-52,3) 14,8±6,5 (5,4-24,8) 24,4±20,1 (<LOQ-65,4) 38,9±27,1 (18,7-119,7)   25 0³ 10,8±19,9 (<LOQ-36,4) 15,7±17,1 (<LOQ-56,4) 27,2±20,8 (8,0-72,1) 43,2±27,7 (16,9-120,3)     0,5 10,9±7,4 (<LOQ-26,0) 13,5±9,1 (<LOQ-27,7) 25,9+18,7 (8,7-69,2) 44,5±29,9 (13,6-124,5) 1 10,4±7,8 (<LOQ-26,7) 10,8±6,6 (<LOQ-23,8) 28,7+19,5 (8,8-69,2) 40,5±25,1 (14,2-106,7) 1,5 9,0±8,2 (<LOQ-25,1) 11,8±8,0 (<LOQ-23,6) 25,6±17,8 (7,5-67,0) 36,8±21,1 (15,9-90,0) 2 11,8±9,5 (<LOQ-26,9) 10,7±6,9 (<LOQ-24,7) 25,1±18,0 (6,9-67,3) 36,8+21,6 (13,0-83,7) 3 10,0±7,9 (<LOQ-23,1) 11,4±7,9 (<LOQ-28,1) 24,8±20,5 (9,0- 69,9) 36,1±20,6 (11,9-89,4) 4 9,2±8,3 (<LOQ-25,3) 11,2±7,3 (<LOQ-25,7) 26,8±23,3 (6,4-78,1) 38,1±21,2 (16,5-92,0) ¹Концентрация геля была 20 мг 4-гидрокситамоксифена на 100 г геля. ²Концентрация геля была 57 мг 4-гидрокситамоксифена на 100 г геля. ³ Временная точка 0 - это 24 часа после применения на 24 день и до конечного применения на 25 день

Цикл День Время после введения (ч) Среднее ± SD (изменения показаны в скобках) в пг/мл 0,5 мг/день (n=12)¹ 1 мг/день (n=8)¹ 1 мг/день (n=12)² 2 мг/день (n=12)²     6 11,4±8,5 (<LOQ-26,6) 10,9±6,4 (<LOQ-22,8) 25,0±18,2 (9,0-65,3) 41,0±29,1 (14,0-123,8) 12 11,0±9,7 (<LOQ-29,1) 11,8±7,8 (<LOQ-28,1) 28,3±22,9 (6,4-74,6) 45,1±30,6 (18,7-126,8) 18 9,7±8,8 (<LOQ-24,9) 12,2±8,3 8,3 (<LOQ-29,6) 23,4±17,4 (8,1-57,9) 39,8±25,5 (16,0-107,3) 26 24 12,4±9,4 (<LOQ-34,4) 18,6±14,2 (<LOQ-40,1) 26,0±19,6 (8,9-61,9) 44,0±33,0 (15,8-132,5)   36 10,9±6,9 (5,0-25,8) 13,4±7,5 (5,7-39,6) 22,7±18,4 (8,8-61,3) 42,1±31,5 (15,1-129,3) 27 48 12,1±6,5 (4,8-26,6) 12,5±6,0 (<LOQ-19,6) 22,0±16,0 (5,6-50,2) 38,1±25,3 (17,5-110,0) 28 72 9,9±7,1 (<LOQ-22,3) 9,9±5,8 (<LOQ-19,6) 18,9±8,2 (5,6-37,8) 33,2±22,2 (17,7-98,0) +5 дней   5,8±5,2 (<LOQ-12,4) 11,4±8,2 (<LOQ-25,8) 20,4±17,3 (9,1-71,6) +8 дней <LOQ (<LOQ-17,4) (0-14,8) 10,8±13,4 (<LOQ-52,0) +12 дней (максимум 9,09) (<LOQ-7,0) (0<LOQ) (0-30,4) +20 дней 0 <LOQ (0<LOQ) (0<LOQ) LOQ = предел определения количества (<5 пг/мл)

Фигура 2 показывает кривую зависимости концентрации лекарства в плазме от времени после последнего введения на 25 день второго менструального цикла. Таблица 7 показывает средние фармакокинетические параметры, которые относятся к последнему введению на 25 день второго менструального цикла.

Таблица 7 Средние значения фармакокинетических параметров 4-гидрокситамоксифена у здоровых женщин после последнего введения Параметр Среднее±SD (изменения показаны в скобках) 0,5 мг/день (n=12)^а 1 мг/день (n=8)^а 1 мг/день (n=12)^b 2 мг/день (n=12)^b Смакс (пг/мл) 17,0±8,5 (7,6-34,4) 21,0±14,0 (<LOQ-40,1) 35,1±22,4 (9,9-78,1) 51,6±31,7 (22,1-132,5) t_макс (ч) 40±81 (0,5-288) 24±18 (0,5-48) 12,8±14,9 (1-36) 11,8±12,3 (0,5-36) t_1/2 (ч) - - (58-118) (49-101) AUC_0-24 (пг ч/мл) 256,3±205,3 (24,6-651,1) 300,9±190,8 (0-693,6) 619±466 (187-1522) 998±653 (424-2778) C_max=AUC_0-24/24 (пг/мл) 10,7±8,5 (1,0-27,1) 12,5±7,9 (0-28,9) 25,8±19,4 (7,8-63,4) 41,6±27,2 (17,7-115,8) T(1stC<LOQ) (ч) - 274±141 (144-480) 236±72 (144-384) 326±97 (192-480) ^а Концентрация геля была 20 мг 4-гидрокситамоксифена на 100 г геля. ^b Концентрация геля была 57 мг 4-гидрокситамоксифена на 100 г геля.

AUC_0-24 - область под кривой концентрация-время в течение 0-24 часов; С_max = вычисление области под кривой в течение 24 часов (AUC_0-24), деленное на 24 часа;

С_max = максимальная концентрация в плазме t ¹/₂ - полу-время; T(1stC<LOQ) - первая временная точка, в которой концентрация в плазме была ниже предела определения количества; t_max = время, в течение которого в плазме была максимальная концентрация.

Данные согласуются с кривой доза-ответ при трех тестированных дозах (0,5, 1 и 2 мг). На основании AUC и С_max более концентрированный гель абсорбировался лучше, чем менее концентрированный гель, приблизительно в 2 раза.

Биологическая толерантность была великолепной у всех 36 пациентов. В течение менструального цикла лечение не влияло на уровни гормонов FSH, LH, эстрадиола или прогестерона.

Более того, эхографическое исследование яичников в конце лечения показало, что они нормальны у всех пациентов с развивающимися фолликулами нормального размера. У одного пациента в ответ на гель развилась аллергическая реакция, и 10 сообщили о прыщах на лице (5 из которых имели предыдущую историю прыщей).

В сумме это исследование показывает, что уровень 4-гидрокситамоксифена в области опухоли после локальной апликации увеличивается с дозой, что концентрация 4-гидрокситамоксифена в плазме ниже, чем типичная концентрация эстрадиола (80 пг/мл) и что не обнаруживается лабораторных или клинических свидетельств системных эффектов.

Приложение

Дополнительный пример 1

Исследование проницаемости радиоактивно меченного 4-ОНТ с использованием диффузионной ячейки Франца (эту ячейку используют при исследовании трансдермальной доставки лекарственного средства). В качестве усилителя проницаемости использовали изопропилмиристат (IPM).

Ингредиенты композиции в % мас. Композиция А Композиция В Изопропилмиристат 0,00 1,00 4-Гидрокситамоксифен 0,02 0,02 Клюцел 1,5 1,5 Этанол 72 72 Вода остальное остальное % 4-ОНТ, обнаруженного в клетках Через 24 часа 0,13±0,03 0.45±0.26

Приведенные в таблице данные свидетельствуют о том, что IPM способен действовать как потенциальный усилитель проницаемости для 4-ОНТ(4-гидрокситамоксифена). Композиции тестировали многократно с использованием кожи человека. Видно, что средняя и ошибка средней статистически значимо отличаются друг от друга.

Дополнительный пример 2.

В сходном исследовании оценивали влияние на проницаемость олеиновой кислоты - широко известного усилителя проницаемости (тестирование проводили на коже крыс).

Ингредиенты композиции в % мас. Композиция А Композиция В Олеиновая кислота 0,00 1,00 4-Гидрокситамоксифен 0,02 0,02 ПРМС 2,00 2,00 Этанол 96% 37,38 37,38 Альфа-токоферол 0,10 0,10 Вода 60.50 59,50 % 4-ОНТ обнаруженного в клетках Через 48 часов 12,54±4,36 1,79±0,90

Эти данные свидетельствуют о том, что несмотря на широкую известность олеиновой кислоты как усилителя проницаемости, она демонстрирует ингибирующее (подавляющее) действие на проницаемость 4-ОНТ.

Дополнительный пример 3

С использованием той же ячейки Франца провели сравнительное исследование двух разных усилителей проницаемости (олеиновой кислоты и изопропилмиристата).

Ингредиенты композиции в % мас. Композиция А Композиция В Прогестерон 3,00 3,00 Олеиновая кислота 5,00 0,00 Изопропилмиристат 0,00 1,00 ПРМС 2,00 2,00 Этанол 95% 72,00 72,00 Вода 20,00 24,00 Прогестерон, обнаруженный     через 24 часа 5,06±2,21 3,30±1,58

Эти данные свидетельствуют о том, что в отношении прогестерона IPM не является лучшим усилителем проницаемости, что олеиновая кислота является более эффективным усилителем проницаемости кожи.

Изобретение относится к области медицины и фармацевтики и касается применения 4-гидрокситамоксифена для приготовления медикамента для лечения доброкачественных опухолей груди, где названный медикамент находится в форме, подходящей для подкожного введения и где 4-гидрокситамоксифен сформулирован в виде гидроалкогольной композиции, включающей в качестве усилителя проницаемости изопропилмиристат, а также водный носитель, алкогольный носитель и желатинизирующий агент. Изобретение обеспечивает усиление проницаемости 4-гидрокситамоксифена. 2 н. и 14 з.п. ф-лы, 2 ил., 7 табл.

1. Применение 4-гидрокситамоксифена для приготовления медикамента для лечения доброкачественных опухолей груди, где названный медикамент находится в форме, подходящей для подкожного введения, и где названный 4-гидрокситамоксифен сформулирован в виде гидроалкогольной композиции, включающей усилитель проницаемости, водный носитель, алкогольный носитель и желатинизирующий агент, названный усилитель проницаемости является изопропилмиристатом.

2. Применение по п.1, где названному пациенту в день может быть введено примерно от 0,25 до 2,0 мг/грудь, предпочтительно от 0,5 до 1,0 мг/грудь названного 4-гидрокситамоксифена.

3. Применение по п.1 или 2, где названная гидроалкогольная композиция включает нейтрализующий агент.

4. Применение по п.1, где названная гидроалкогольная композиция включает:
а) примерно от 0,01 до 1%, предпочтительно примерно от 0,01 до 0,20% по весу 4-гидрокситамоксифена,
б) примерно от 0,5 до 2% по весу изопропилмиристата,
в) примерно от 60 до 70% по весу абсолютного спирта,
г) примерно от 25 до 40% по весу водного носителя,
д) примерно от 0,5 до 5% по весу желатинизирующего агента,
где процент компонентов является весом по отношению к весу композиции.

5. Применение по п.4, где названный 4-гидрокситамоксифен составляет примерно 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04%, 0,05%, 0,06%, 0,07%, 0,08%, 0,09%, 0,10%, 0,11%, 0,12%, 0,13%, 0,14%, 0,15%, 0,16%, 0,17%, 0,18%, 0,19% или 0,20% от композиции по весу.

6. Применение по любому из п.4 или 5, где названный изопропилмиристат составляет примерно 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4%, 1,5%, 1,6%, 1,7%, 1,8%, 1,9% или 2,0% от композиции по весу.

7. Применение по п.4, где названный спирт является этанолом или изопропанолом и составляет в абсолютной форме примерно от 60 до 75% от композиции по весу.

8. Применение по п.4, где названный водный носитель является фосфатным буферным раствором и составляет примерно от 25 до 40% от композиции по весу.

9. Применение по п.4, где названный желатинизирующий агент является полиакриловой кислотой, гидроксипропилцеллллозой или другим производным целлюлозы и составляет примерно от 0,5 до 5% от композиции по весу.

10. Применение по п.4, где названная гидроалкогольная композиция дополнительно включает нейтрализующий агент, выбранный из группы, включающей гидроксид натрия, гидроксид аммония, гидроксид калия, аргинин, аминометилпропанол, троламин и трометамин, названный нейтрализующий агент представлен в соотношении нейтрализующий агент/желатинизирующий агент примерно между 4:1 и 1:1.

11. Применение по п.4, где названная гидроалкогольная композиция упакована в виде упаковки с единичной дозировкой или в виде контейнера с множеством доз и с дозирующим насосом.

12. Применение по п.1, где названная доброкачественная опухоль груди является пролиферативным заболеванием груди.

13. Применение по п.12, где названная пролиферативная доброкачественная опухоль груди выбрана из группы, включающей аденоз, кисты, эктазию протока, фиброаденому, фиброкистозную болезнь, фиброз, гиперплазию и метаплазию.

14. Применение по п.1, где названная доброкачественная опухоль груди имеет эстроген-зависимый компонент.

15. Применение 4-гидрокситамокситифена для приготовления медикамента для профилактики доброкачественной опухоли у пациента с риском развития рака груди, где названный медикамент находится в форме для подкожного введения и где названный 4-гидрокситамоксифен сформулирован в виде гидроалкогольной композиции, включающей усилитель проницаемости, водный носитель, алкогольный носитель и желатинизирующий агент, где названный усилитель проницаемости является изопропилмиристатом.

16. Применение по п.15, где названный пациент находится в возрасте до менопаузы.