СПОСОБ ТЕРАПИИ И ПРОФИЛАКТИКИ ОПУХОЛИ, ПОДДАЮЩЕЙСЯ ЛЕЧЕНИЮ ЭНДОКРИННОЙ ТЕРАПИЕЙ, С ПОМОЩЬЮ КОМБИНИРОВАННОГО ПРИМЕНЕНИЯ ИНГИБИТОРА РЕЦЕПТОРА ФАКТОРА РОСТА ФИБРОБЛАСТОВ И ЭНДОКРИННОЙ ТЕРАПИИ Российский патент 2024 года по МПК A61K31/138 A61K31/519 A61K31/565 A61P35/00 

Область техники, к которой относится изобретение

[0001]

Перекрестная ссылка на родственную заявку

Данная заявка испрашивает приоритет на основании японской патентной заявки № 2018-220046, поданной 26 ноября 2018 года, полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки. Настоящее изобретение относится к лечению и профилактике опухолей, к которым должна применяться эндокринная терапия.

Уровень техники

[0002]

Факторы роста фибробластов (FGF) экспрессируются в различных тканях и являются одним из факторов роста, регулирующих клеточную пролиферацию и дифференцировку. Физиологическая активность FGF опосредована рецепторами фактора роста фибробластов (FGFR), которые представляют собой специфические рецепторы клеточной поверхности. FGFR относятся к семейству рецепторных тирозиновых протеинкиназ и включают внеклеточный лиганд-связывающий домен, один трансмембранный домен и внутриклеточный тирозинкиназный домен. К настоящему времени определено четыре типа FGFR (FGFR1, FGFR2, FGFR3 и FGFR4). FGFR связываются с FGF с образованием димеров и активируются фосфорилированием. Активация рецепторов индуцирует мобилизацию и активацию специфических молекул по ходу сигнальной трансдукции, с проявлением при этом физиологических функций. Имеются некоторые сообщения о взаимосвязи между аберрантной передачей сигнала FGF/FGFR и различными опухолями человека. Считается, что аберрантная активация передачи сигналов FGF/FGFR в опухолях человека ассоциирована со сверхэкспрессией FGFR и/или амплификацией гена, генной мутацией, хромосомной транслокацией, инсерцией и инверсией, слиянием генов или с аутокринным или паракринным механизмом повышенной выработки FGF (лигандов) (NPL 1, 2, 3 и 4).

[0003]

При некоторых типах опухолей в гормон-чувствительных тканях, таких как молочная железа и предстательная железа, гормональная стимуляция этих тканей способствует росту опухоли. Фокусируясь на этом моменте, терапия путем контроля гормональной стимуляции опухолей известна как эндокринная терапия (также называется «гормональной терапией»). Например, при опухолях молочной железы, положительных по рецептору эстрогена, рассматривается применение эндокринной терапии, такой как подавление эстрогенпродуцирующей функции яичников (с помощью хирургических процедур, процедур облучения или введения лекарственных средств), а также ингибиторы эстрогенпродуцирующих ферментов (ароматазы) и ингибиторы эстрогенных рецепторов (антиэстрогены). Кроме того, среди опухолей простаты, для андрогензависимых опухолей простаты известна эндокринная терапия, такая как подавление секреции тестостерона (резекция яичек, которые представляют собой репродуктивные органы, или введение лекарственного средства агонистов LH-RH, антагонистов LH-RH, эстрогенных препаратов, или тому подобного) и введение антиандрогенов. Антиандрогены также используются при доброкачественной гиперплазии простаты (BPH). Кроме того, агонисты LH-RH также используются при раке яичников в некоторых случаях.

[0004]

Аберрантная передача сигнала FGF/FGFR также обнаруживается в опухолях в этих гормон-чувствительных тканях, и, как сообщается, связана с опухолями. У ER-положительных пациентов с раком молочной железы зарегистрирована корреляция между амплификацией FGFR1 и плохим прогнозом (NPL 5). При раке простаты аберрантная экспрессия системы FGF/FGFR приводит к конститутивной активации нескольких нисходящих сигнальных путей и участвует в прогрессировании рака (NPL 6). Сверхэкспрессия FGFR1, локализованная в стромальных клетках, зарегистрирована при доброкачественной гиперплазии простаты (NPL 7). Кроме того, например, сообщалось об амплификации гена FGFR1 при раке яичников (NPL 1).

[0005]

В дополнение к этому, применительно к эндокринной терапии рака гормон-чувствительных тканей, существует известное явление, называемое «резистентностью к эндокринной терапии», при котором пациенты первоначально демонстрируют супрессивный ответ на прогрессирование, но позже теряют способность к такому ответу. Сообщается, что система FGF/FGFR участвует в такой резистентности к эндокринной терапии. Например, амплификация гена FGFR1 при раке молочной железы приводит к сверхэкспрессии FGFR1 и активирует нисходящую передачу сигнала FGFR1 лиганд-зависимым и -независимым образом (NPL 4), и облегчает экспрессию генов ниже рецептора эстрогена в отсутствие стимуляции эстрогеном, что приводит к резистентности к эндокринной терапии (NPL 8). Кроме того, при раке простаты иногда наблюдается резистентность к андрогендепривационной терапии с нейроэндокринной опухолеподобной дифференцировкой без экспрессии андрогенного рецептора. В дополнение к этому, существует двойной негативный фенотип, который не экспрессирует андрогенный рецептор и не проявляет характеристик нейроэндокринных опухолей. Сообщалось, что конститутивная активация FGF и нисходящих сигнальных путей позволяет избежать зависимости от андрогенного рецептора (NPL 9). При возникновении резистентности к эндокринной терапии обычно обнаруживается активация MAPK и т.д. ниже сигнального пути FGFR (NPL 4 и NPL 9).

[0006]

Для рака, к которому должна применяться эндокринная терапия, несколько ингибиторов FGFR находятся на стадии клинической разработки для применения в комбинации с гормональными лекарственными средствами. Что касается рака молочной железы, II фаза исследования довитиниба (ингибитора мультикиназ, включая FGFR киназу) в сочетании с фулвестрантом (антиэстрогеном) показала, что в субпопуляции пациентов с амплификацией пути FGF медианное значение средней выживаемости без прогрессирования (PFS) значительно улучшалось в группе, получавшей комбинацию, по сравнению с группой, получавшей один только фулвестрант (10,9 по сравнению с 5,5 месяцами) (NPL 10). Для рака молочной железы II фаза исследования AZD4547 (пан-FGFR ингибитор) осуществляется в группе, получающей комбинацию с фулвестрантом или эксеместаном (ингибитор ароматазы), и в группе фулвестранта и плацебо (NCT01202591) (NPL 11). Для рака простаты проводится II фаза исследования довитиниба в сочетании с андрогендепривационной терапией (NCT02065323) и II фаза исследования довитиниба в сочетании с абиратероном (ингибитор фермента синтеза андрогена) (NCT01994590).

[0007]

В PTL 1 сообщается о дизамещенных бензолалкинильных соединениях, имеющих FGFR ингибирующий эффект. В PTL 2 и PTL 3 соответственно сообщается, что эти соединения эффективны против рака со специфической мутацией FGFR2, и что схема прерывистого введения может быть эффективной. В PTL 4 сообщается, что может быть осуществлено лечение рака в комбинации с противоопухолевыми средствами.

Перечень ссылок

Патентные документы

[0008]

PTL 1: WO2013/108809

PTL 2: WO2015/008844

PTL 3: WO2015/008839

PTL 4: WO2017/150725

Непатентные документы

[0009]

NPL 1: Nat. Rev. Cancer 10: 116-129 (2010)

NPL 2: J. Clin. Oncol. 24, 3664-3671 (2006)

NPL 3: Mol. Cancer Res. 3, 655-667 (2005)

NPL 4: Cancer Res. 70, 2085-2094 (2010)

NPL 5: Breast Cancer Res 2007; 9: R23

NPL 6: Clin Cancer Res 19: 5856-5866 (2013)

NPL 7: Eur J Endocrinol 145: 303-310 (2001)

NPL 8: Clin Cancer Res 23: 6138-6150 (2017)

NPL 9: Cancer Cell 32: 474-489 (2017)

NPL 10: Breast Cancer Research. 19, 18 (2017)

NPL 11: The Breast. 37, 126-133 (2018)

NPL 12: Oncotarget. 8: 16052-16074 (2017)

Краткое изложение сущности изобретения

[0010]

Сущность изобретения

[0011]

Техническая задача

Задачей настоящего изобретения является предложить новый способ лечения опухолей, к которым должна применяться эндокринная терапия, способ, демонстрирующий существенно более высокий противоопухолевый эффект и использующий ингибитор FGFR.

Решение задачи

[0012]

В настоящем изобретении, когда комбинированное применение введения ингибитора FGFR (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли и эндокринной терапии исследовали в отношении опухолей, к которым должна применяться эндокринная терапия, было обнаружено, что противоопухолевый эффект существенно усиливался по сравнению с отдельным применением такого введения или эндокринной терапии.

[0013]

Таким образом, варианты осуществления настоящего изобретения предусматривают следующее в [A1] - [A16], [B1] - [B14], [C1] - [C14], [D1] - [D14] и [E1] - [E14].

[A1]

Фармацевтическая композиция для применения в лечении и/или профилактике опухоли, к которой должна применяться эндокринная терапия, причем фармацевтическая композиция содержит (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтическая композиция вводится в комбинации с эндокринной терапией.

[A2]

Фармацевтическая композиция в соответствии с [A1], где опухоль представляет собой опухоль, экспрессирующую FGFR.

[A3]

Фармацевтическая композиция в соответствии с [A1] или [A2], где опухоль представляет собой опухоль с активированной передачей сигнала FGFR.

[A4]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [A1] - [A3], где опухоль представляет собой опухоль, имеющую генетическую аберрацию FGFR.

[A5]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [A1] - [A4], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака простаты, рака яичников и доброкачественной гиперплазии простаты.

[A6]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [A1] - [A5], где опухоль представляет собой опухоль, резистентную к эндокринной терапии.

[A7]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [A1] - [A6], где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR1.

[A8]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [A1] - [A7], где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий амплификацию гена FGFR1.

[A9]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [A1] - [A8], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, представляет собой рак молочной железы, и эндокринная терапия включает в себя по меньшей мере один элемент, выбранный из группы, состоящей из подавления функции яичников, введения ингибитора ароматазы, введения антиэстрогена и введения прогестагена.

[A10]

Фармацевтическая композиция в соответствии с [A9], где эндокринная терапия представляет собой введение антиэстрогена.

[A11]

Фармацевтическая композиция в соответствии с [A10], где антиэстроген представляет собой тамоксифен, фулвестрант или их соль или производное.

[A12]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [A1] - [A11], где эндокринная терапия и введение композиции, содержащей (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемую соль, осуществляются одновременно, раздельно или непрерывно.

[A13]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [А1] - [А12], которая вводится пациенту с опухолью, прошедшему эндокринную терапию.

[A14]

Фармацевтическая композиция в соответствии с любым из [А1] - [А13], которая вводится пациенту с опухолью, который будет проходить эндокринную терапию после введения фармацевтической композиции.

[A15]

Способ лечения и/или профилактики опухоли, к которой должна применяться эндокринная терапия, включающий введение эффективного количества (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, в комбинации с эндокринной терапией.

[A16]

Комбинация эндокринной терапии и введения (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении и/или профилактике опухоли, к которой должна применяться эндокринная терапия.

[B1]

(S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении и/или профилактике опухоли, к которой должна применяться эндокринная терапия, вводимые в комбинации с эндокринной терапией.

[B2]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с [B1], где опухоль представляет собой опухоль, экспрессирующую FGFR.

[B3]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с [B1] или [B2], где опухоль представляет собой опухоль с активированной передачей сигнала FGFR.

[B4]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [B1] - [B3], где опухоль представляет собой опухоль, имеющую генетическую аберрацию FGFR.

[B5]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [B1] - [B4], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака простаты, рака яичников и доброкачественной гиперплазии простаты.

[B6]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [B1] - [B5], где опухоль представляет собой опухоль, резистентную к эндокринной терапии.

[B7]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [B1] - [B6], где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR1.

[B8]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [B1] - [B7], где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий амплификацию гена FGFR1.

[B9]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [B1] - [B8], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, представляет собой рак молочной железы, и эндокринная терапия включает в себя по меньшей мере один элемент, выбранный из группы, состоящей из подавления функции яичников, введения ингибитора ароматазы, введения антиэстрогена и введения прогестагена.

[B10]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с [B9], где эндокринная терапия представляет собой введение антиэстрогена.

[B11]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с [B10], где антиэстроген представляет собой тамоксифен, фулвестрант или их соль или производное.

[B12]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [B1] - [B11], где эндокринная терапия и введение (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли осуществляются одновременно, раздельно или непрерывно.

[B13]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [В1] - [В12], которое вводится пациенту с опухолью, прошедшему эндокринную терапию.

[B14]

Соединение или его фармацевтически приемлемая соль в соответствии с любым из [В1] - [В13], которое вводится пациенту с опухолью, который будет проходить эндокринную терапию после введения соединения или его фармацевтически приемлемой соли.

[C1]

Применение (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для применения в лечении и/или профилактике опухоли, к которой должна применяться эндокринная терапия, вводимого в комбинации с эндокринной терапией.

[C2]

Применение в соответствии с [C1], где опухоль представляет собой опухоль, экспрессирующую FGFR.

[C3]

Применение в соответствии с [C1] или [C2], где опухоль представляет собой опухоль с активированной передачей сигнала FGFR.

[C4]

Применение в соответствии с [C1] или [C2], где опухоль представляет собой опухоль, имеющую генетическую аберрацию FGFR.

[C5]

Применение в соответствии с [C1] или [C2], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака простаты, рака яичников и доброкачественной гиперплазии простаты.

[C6]

Применение в соответствии с [C1] или [C2], где опухоль представляет собой опухоль, резистентную к эндокринной терапии.

[C7]

Применение в соответствии с [C1] или [C2], где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR1.

[C8]

Применение в соответствии с [C1] или [C2], где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий амплификацию гена FGFR1.

[C9]

Применение в соответствии с [C1] или [C2], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, представляет собой рак молочной железы, и эндокринная терапия включает в себя по меньшей мере один элемент, выбранный из группы, состоящей из подавления функции яичников, введения ингибитора ароматазы, введения антиэстрогена и введения прогестагена.

[C10]

Применение в соответствии с [C9], где эндокринная терапия представляет собой введение антиэстрогена.

[C11]

Применение в соответствии с [C10], где антиэстроген представляет собой тамоксифен, фулвестрант или их соль или производное.

[C12]

Применение в соответствии с любым из [C1] - [C11], где эндокринная терапия и введение лекарственного средства, содержащего (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемую соль, осуществляются одновременно, раздельно или непрерывно.

[C13]

Применение в соответствии с любым из [C1] - [C12], где введение проводится пациенту с опухолью, который прошел эндокринную терапию.

[C14]

Применение в соответствии с любым из [C1] - [C13], где лекарственное средство вводится пациенту с опухолью, который будет проходить эндокринную терапию после введения фармацевтической композиции.

[D1]

Способ лечения и/или профилактики опухоли, к которой должна применяться эндокринная терапия, включающий введение эффективного количества (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, в комбинации с эндокринной терапией.

[D2]

Способ в соответствии с [D1], где опухоль представляет собой опухоль, экспрессирующую FGFR.

[D3]

Способ в соответствии с [D1] или [D2], где опухоль представляет собой опухоль с активированной передачей сигнала FGFR.

[D4]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D3], в котором опухоль представляет собой опухоль, имеющую генетическую аберрацию FGFR.

[D5]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D4], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака простаты, рака яичников и доброкачественной гиперплазии простаты.

[D6]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D5], где опухоль представляет собой опухоль, резистентную к эндокринной терапии.

[D7]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D6], где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR1.

[D8]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D7], где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий амплификацию гена FGFR1.

[D9]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D8], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, представляет собой рак молочной железы, и эндокринная терапия включает в себя по меньшей мере один элемент, выбранный из группы, состоящей из подавления функции яичников, введения ингибитора ароматазы, введения антиэстрогена и введения прогестагена.

[D10]

Способ в соответствии с [D9], где эндокринная терапия представляет собой введение антиэстрогена.

[D11]

Способ в соответствии с [D10], где антиэстроген представляет собой тамоксифен, фулвестрант или их соль или производное.

[D12]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D11], где эндокринная терапия и введение (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли осуществляются одновременно, раздельно или непрерывно.

[D13]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D12], где введение проводится пациенту с опухолью, который прошел эндокринную терапию.

[D14]

Способ в соответствии с любым из [D1] - [D13], где (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемая соль вводится пациенту с опухолью, который будет проходить эндокринную терапию после введения соединения или его фармацевтически приемлемой соли.

[E1]

Комбинация эндокринной терапии и введения (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении и/или профилактике опухоли, к которой должна применяться эндокринная терапия.

[E2]

Комбинация в соответствии с [E1], где опухоль представляет собой опухоль, экспрессирующую FGFR.

[E3]

Комбинация в соответствии с [E1] или [E2], где опухоль представляет собой опухоль с активированной передачей сигнала FGFR.

[E4]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E3], где опухоль представляет собой опухоль, имеющую генетическую аберрацию FGFR.

[E5]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E4], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, выбирают из группы, состоящей из рака молочной железы, рака простаты, рака яичников и доброкачественной гиперплазии простаты.

[E6]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E5], где опухоль представляет собой опухоль, резистентную к эндокринной терапии.

[E7]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E6], где опухоль является раком молочной железы, экспрессирующим FGFR1.

[E8]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E7], где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий амплификацию гена FGFR1.

[E9]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E8], где опухоль, к которой должна применяться эндокринная терапия, представляет собой рак молочной железы, и эндокринная терапия включает в себя по меньшей мере один элемент, выбранный из группы, состоящей из подавления функции яичников, введения ингибитора ароматазы, введения антиэстрогена и введения прогестагена.

[E10]

Комбинация в соответствии с [E9], где эндокринная терапия представляет собой введение антиэстрогена.

[E11]

Комбинация в соответствии с [E10], где антиэстроген представляет собой тамоксифен, фулвестрант или их соль или производное.

[E12]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E11], где эндокринная терапия и введение (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли осуществляются одновременно, раздельно или непрерывно.

[E13]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E12], где введение проводится пациенту с опухолью, который прошел эндокринную терапию.

[E14]

Комбинация в соответствии с любым из [E1] - [E13], где (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемая соль вводится пациенту с опухолью, который будет проходить эндокринную терапию после введения соединения или его фармацевтически приемлемой соли.

[0014]

Эффекты изобретения

В соответствии с настоящим изобретением, может быть реализовано лечение опухолей с высоким противоопухолевым эффектом. Такие эффекты включают эффект регрессии опухоли и эффект задержки роста, что может приводить к подавлению прогрессирования симптомов у пациентов с опухолями, улучшению патологических состояний и выживаемости в длительных сроках.

Краткое описание чертежей

[0015]

На фиг.1A показано влияние комбинированного использования соединения 1 и 4-гидрокситамоксифена в клетках MDA-MB-134VI на рост клеток.

На фиг.1B показано влияние комбинированного использования соединения 1 и фулвестранта в клетках MDA-MB-134VI на рост клеток.

[0016]

В качестве вариантов осуществления настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция для применения в лечении и/или профилактике опухолей, к которым должна быть применена эндокринная терапия, причем фармацевтическая композиция содержит (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемую соль, и применяется в комбинации с эндокринной терапией, а также предложено его родственное соединение, применение, способ и комбинация.

[0017]

(S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он представляет собой дизамещенное бензолалкинильное соединение, имеющее следующую структуру. В настоящем описании данное соединение просто называется «соединение 1». Соединение 1 описано в качестве примера соединения 2 в PTL 1 (WO2013/108809), упомянутом выше. Сообщалось, что соединение 1 обладает превосходным FGFR ингибирующим эффектом и ингибирует способность рецепторных белковых тирозинкиназ (FGFR1, FGFR3 и FGFR4) фосфорилировать тирозин в пептидной последовательности субстрата (PTL 1).

[0018]

[0019]

Соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль в фармацевтической композиции настоящего изобретения могут быть синтезированы любым способом; например, их можно синтезировать в соответствии со способом получения, описанным в WO2013/108809 (PTL 1).

[0020]

В настоящем изобретении соединение 1 может быть использовано как есть или в форме фармацевтически приемлемой соли. Фармацевтически приемлемая соль соединения 1 не имеет особых ограничений, и примеры включают аддитивные соли с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота и серная кислота, или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, лимонная кислота, винная кислота и малеиновая кислота; соли с щелочными металлами, такими как калий и натрий; соли с щелочноземельными металлами, такими как кальций и магний; соли с органическими основаниями, такими как соли аммония, соли этиламина, соли аргинина; и тому подобное.

[0021]

Настоящее изобретение может быть использовано для лечения и/или профилактики опухолей, к которым должна применяться эндокринная терапия. Опухоли, к которым должна применяться эндокринная терапия, включают опухоли, которые, как ожидается, проявляют некоторые биологические ответные реакции вследствие применения эндокринной терапии. Примеры некоторых биологических ответных реакций включают изменения показателей (например, скорости роста и окрашенного изображения) на клеточном или тканевом уровне в образцах опухоли, а также изменения показателей (например, снижения объема опухоли на изображениях, общей выживаемости (OS), выживаемости без прогрессирования (PFS) и частоты объективных ответов (RR)) в клинических испытаниях. Опухоли, к которым должна применяться эндокринная терапия, включают опухоли с некоторыми биологическими ответными реакциями в результате эндокринной терапии. Кроме того, опухоли, к которым должна применяться эндокринная терапия, включают опухоли, резистентные к эндокринной терапии, при которых у пациентов первоначально наблюдались биологические ответные реакции на эндокринную терапию, но позже биологические ответные реакции на эндокринную терапию уменьшились или исчезли.

[0022]

Опухоли, к которым должна применяться эндокринная терапия, включают доброкачественные опухоли, злокачественные опухоли (рак) и пограничные опухоли.

[0023]

Опухоли, к которым должна применяться эндокринная терапия, включают опухоли в тканях-мишенях гормонов. Ткани-мишени гормонов включают грудь (молочную железу), предстательную железу и яичники. Гормоны включают половые гормоны. Опухоли, к которым должна применяться эндокринная терапия, включают гормонзависимые опухоли. Половые гормоны включают половые стероидные гормоны.

[0024]

Рак, к которому должна применяться эндокринная терапия, включает рак молочной железы и рак простаты. Рак, к которому должна применяться эндокринная терапия, включает рак яичников.

[0025]

Вариант осуществления настоящего изобретения применяется для первичного рака и метастатического и рецидивирующего рака.

[0026]

Доброкачественные опухоли, к которым должна применяться эндокринная терапия, включают доброкачественную гиперплазию простаты (BPH).

[0027]

Лечение в настоящем описании включает процедуры, выполняемые с целью лечения или облегчения заболеваний, или с целью подавления прогрессирования заболевания или рецидива, или для облегчения симптомов. Лечение включает введение лекарственных средств до или после хирургической процедуры. Лечение включает послеоперационную и предоперационную терапию, а также адъювантную и неоадъювантную терапию.

[0028]

Профилактика в настоящем изобретении включает подавление развития рака, к которому должна применяться эндокринная терапия, без достижения рака, к которому должна применяться эндокринная терапия. Профилактика включает в себя снижение риска развития рака, к которому должна применяться эндокринная терапия, у пациентов, подверженных риску развития рака, к которому должна применяться эндокринная терапия.

[0029]

Настоящее изобретение характеризуется тем, что соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль применяются в комбинации с эндокринной терапией. «Эндокринная терапия» также называется «гормональной терапией» и представляет собой метод профилактики и лечения, который осуществляет подавление развития опухолей путем прямого или косвенного регулирования гормональной стимуляции опухолей.

[0030]

Известно, что некоторые типы рака молочной железы прогрессируют в присутствии эстрогена, и эти типы рака молочной железы имеют соответствующую экспрессию рецептора эстрогена и/или рецептора прогестерона (ER- и/или PgR-положительные). Эндокринная терапия рака молочной железы представляет собой способ лечения или профилактики, который подавляет прогрессирование злокачественных опухолей вследствие присутствия эстрогена.

[0031]

Основные типы эндокринной терапии при раке молочной железы можно грубо разделить на подавление функции яичников (OFS), введение ингибиторов ароматазы, введение антиэстрогенов и введение прогестагенов.

[0032]

Примеры подавления функции яичников включают хирургические процедуры, включая овариэктомию, процедуры облучения, включающие в себя выключение функции яичников путем облучения, и введение агонистов LH-RH. Агонисты LH-RH подавляют действие гормонов гипофиза, которые способствуют биосинтезу эстрогена в яичниках, и снижают способность яичников вырабатывать эстроген. Агонисты LH-RH включают, например, гозерелин, лейпрорелин, трипторелин, а также их соли и производные.

[0033]

Ингибиторы ароматазы снижают способность вырабатывать эстроген, ингибируя ароматазу, которая вырабатывает эстроген из мужских гормонов. Ингибиторы ароматазы включают, например, анастрозол, эксеместан, летрозол, а также их соли и производные.

[0034]

Антиэстрогены включают, например, селективные модуляторы рецептора эстрогена, которые ингибируют связывание эстрогена с рецептором эстрогена, и селективные регуляторы-супрессоры рецептора эстрогена, которые обладают ингибирующей связывание активностью, и активностью, способствующей деградации рецептора эстрогена. Примеры первых включают тамоксифен, торемифен, ралоксифен, а также их соли и производные. Примеры последних включают фулвестрант, а также его соли и производные.

[0035]

Прогестагены оказывают противоопухолевое действие на рак молочной железы посредством различных действий, включая антиэстрогенное действие. Прогестагены включают, например, медроксипрогестеронацетат (синтетический прогестаген), а также его соли и производные.

[0036]

Вариант осуществления настоящего изобретения применяется для предклимактерического рака молочной железы. Кроме того, вариант осуществления настоящего изобретения применяется для постклимактерического рака молочной железы.

[0037]

Вариант настоящего изобретения применяется для рака молочной железы, положительного по рецептору эстрогена и/или прогестерона (ER- и/или PgR-положительного). ER- и/или PgR-положительность может быть определена, например, с помощью метода определения по заполняемости положительных клеток, используя иммуногистохимический метод (метод IHC) или метод, комбинирующий заполняемость и интенсивность окрашивания. В случае определения по заполняемости в качестве показателя можно использовать наличие по меньшей мере одной положительной клетки (любой положительной клетки). Кроме того, заполняемость положительных клеток 1% или 10% может быть использована в качестве индекса отсечения. Кроме того, интенсивность окрашивания также может быть принята во внимание (Arch Pathol Lab Med. 2010; 134 (7): e48-72). ER- и/или PgR-положительность также может быть определена методами, которые могут показать результаты, с научной точки зрения сходные с результатами указанных выше методов. Примеры ER- и/или PgR-положительного рака молочной железы включают не только рак молочной железы, который дает положительный результат на первичной стадии, но также и рак молочной железы, который имеет ER- и/или PgR- положительный статус по меньшей мере один раз на любой стадии эволюции рака молочной железы, включая метастазирование и рецидив. Рецепторы эстрогена включают две высоко гомологичные изоформы, ERα и ERβ, которые кодируются различными генами, ESR1 и ESR2, соответственно (Arch Pathol Lab Med., ibid). При использовании просто выражения «рецептор эстрогена» или ER в настоящем описании, оно означает ERα (продукт гена ESR1).

[0038]

Вариант осуществления настоящего изобретения применяется для рака простаты. Известно, что некоторые типы рака простаты прогрессируют в присутствии андрогена, и эти типы рака простаты имеют соответствующую экспрессию рецептора андрогена (АR-положительные). Эндокринная терапия рака простаты представляет собой способ лечения или профилактики, который подавляет прогрессирование злокачественных опухолей вследствие присутствия андрогена.

[0039]

Основные виды эндокринной терапии при раке простаты можно условно разделить на подавление секреции тестостерона, который является одним из видов андрогенов (резекция яичек, которые являются репродуктивными органами, или введение лекарственных средств - агонистов LH-RH, антагонистов LH-RH, эстрогенных лекарственных средств или тому подобное), и эндокринную терапию, такую как введение антиандрогенов, ингибиторов синтеза андрогенов и т.п., при андрогензависимом раке простаты.

[0040]

Агонисты LH-RH воздействуют на гипофиз, снижая выработку тестостерона. Агонисты LH-RH включают, например, гозерелин, лейпрорелин, бусерелин, а также их соли и производные.

[0041]

Некоторые из известных механизмов действия антиандрогенов представляют собой, например, ингибирование связывания лиганда с рецептором андрогена, ингибирование ядерной транслокации рецептора андрогена и ингибирование передачи сигналов рецептора андрогена. Антиандрогены включают, например, хлормадинонацетат, бикалутамид, флутамид, энзалутамид, нилутамид, соединения, описанные в WO2015/182712, а также их соли и производные.

[0042]

Кроме того, эндокринная терапия включает, например, ингибиторы синтеза андрогенов, которые ингибируют ферменты на пути синтеза андрогенов. Такие ингибиторы синтеза андрогенов включают, например, кетоконазол, аминоглютетимид, абиратерона ацетат, а также их соли и производные.

[0043]

В варианте осуществления настоящего изобретения, соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль вводится для лечения и/или профилактики опухолей, к которым должна применяться эндокринная терапия, в комбинации с эндокринной терапией, то есть введением соединения, описанного в WO 2015/182712, которое является антиандрогеном. В варианте осуществления настоящего изобретения, соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль вводится для лечения и/или профилактики опухолей, к которым должна применяться эндокринная терапия, в комбинации с эндокринной терапией, которая представляет собой введение антиандрогена, отличного от соединения, описанного в WO 2015/182712.

[0044]

Хирургические процедуры, процедуры облучения и введение лекарственных препаратов в эндокринной терапии, описанные выше, известны, и эти процедуры могут быть выполнены специалистами в данной области. Механизм действия, доза и цель лечения для вышеуказанных лекарственных средств известны и могут быть получены вместе с необходимой информацией о лекарственных средствах. Когда эндокринная терапия представляет собой введение лекарственного средства, специалисты в данной области могут вводить эффективное количество лекарственного средства.

[0045]

Вариант осуществления настоящего изобретения применяется для рака яичников. В варианте осуществления, соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль используются в сочетании с агонистом LH-RH для лечения рака яичников.

[0046]

Вариант осуществления настоящего изобретения применяется для доброкачественной гиперплазии простаты (BPH). В варианте осуществления, соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль применяются в комбинации с антиандрогеном для лечения доброкачественной гиперплазии простаты (BPH).

[0047]

Вариант осуществления настоящего изобретения применяется для опухолей, экспрессирующих FGFR. В варианте осуществления FGFR выбирают из группы, состоящей из FGFR1, FGFR2, FGFR3 и FGFR4. В предпочтительном варианте осуществления FGFR представляет собой FGFR1.

[0048]

Экспрессия FGFR может быть обнаружена с помощью методов, известных специалистам в данной области. Экспрессия генов и белковый продукт генов могут быть обнаружены известными методами, такими как методы с использованием антител (иммуногистохимия, иммуноферментный анализ (ИФА), проточная цитометрия, иммуноблоттинг и т.п.), методы с использованием нуклеиновых кислот (гибридизация in situ, ПЦР, нозерн-блоттинг и т.п.), а также методы, основанные на общем принципе этих методов. Детектирующим устройством может быть любое известное устройство (GeneChip, микроматрица и др.).

[0049]

Кроме того, вариант осуществления настоящего изобретения применяется для опухолей с активированной передачей сигнала FGFR. FGFR связываются с FGF с образованием димеров и активируются путем фосфорилирования, которое индуцирует мобилизацию и активацию специфических молекул по ходу сигнальной трансдукции, с проявлением при этом физиологических функций.

[0050]

Активация передачи сигнала FGFR может быть обнаружена с помощью методов, известных специалистам в данной области. Активация передачи сигнала может быть обнаружена, например, путем обнаружения FGF, которые являются субстратами для FGFR; путем обнаружения прямого фосфорилирования FGFR, которые являются фосфорилированными ферментами, или биологической активности, включающей ферментативную активность; или же путем обнаружения состояния фосфорилирования внутриклеточных субстратов и внутриклеточных белков, существующих в нисходящем сигнальном каскаде FGFR, или биологической активности, включающей ферментативную активность.

[0051]

Кроме того, вариант осуществления настоящего изобретения применяется для опухолей, имеющих генетические аберрации FGFR. Генетические аберрации FGFR включают амплификацию гена, генную мутацию, хромосомную транслокацию, инсерцию и инверсию, а также слияние генов. О некоторых генетических аберрациях FGFR в опухолях уже сообщалось в документах, доступных специалистам в данной области (NPL 11 и NPL 12). Генетические аберрации FGFR1 могут быть обнаружены методами, известными специалистам в данной области, такими как, например, пиросеквенирование, секвенирование ДНК, включая секвенирование следующего поколения (NGS), методы на основе ПЦР, включая аллель-специфичные цепные реакции, сравнительная геномная гибридизация на основе микроматрицы (aCGH), флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) и хромогенная гибридизация in situ (CISH).

[0052]

Вариант осуществления настоящего изобретения применяется для рака молочной железы с амплификацией гена FGFR1. Рак молочной железы с амплификацией гена FGFR1 относится к раку молочной железы, при котором число копий гена FGFR1 в геноме выше, чем у нормальных клеток. Амплификация гена FGFR1 может быть обнаружена с помощью методов, известных специалистам в данной области, как например, секвенирование ДНК, включая секвенирование следующего поколения (NGS), сравнительная геномная гибридизация на основе микроматрицы (aCGH), флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) и хромогенная гибридизация in situ (CISH).

[0053]

В настоящем изобретении две процедуры, т.е. введение соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли и эндокринная терапия, применяются в комбинации. Выражение «применяются в комбинации» означает, что эти две процедуры осуществляются одновременно, раздельно или непрерывно в последовательности процессов лечения. Таким образом, настоящее изобретение включает в себя вариант осуществления, в котором соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль вводится пациентам с опухолью, которые уже прошли эндокринную терапию. Кроме того, настоящее изобретение включает в себя вариант осуществления, в котором соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль вводится одновременно с эндокринной терапией. В этом случае, когда эндокринную терапию осуществляют путем введения лекарственного средства, лекарственное средство эндокринной терапии и соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль могут быть получены в виде одного фармацевтического препарата или одного набора для введения. Кроме этого, настоящее изобретение включает в себя вариант осуществления, в котором, например, эндокринную терапию проводят пациентам с опухолями, которым уже вводили соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль. Когда эндокринную терапию осуществляют путем введения лекарственного средства, интервал между введениями, когда лекарственное средство эндокринной терапии и соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль вводятся раздельно, не имеет особых ограничений, и может быть выбран таким образом, чтобы эффект каждого соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли и другого соединения, обладающего противоопухолевым эффектом, или его фармацевтически приемлемой соли, и эффект комбинированного применения могли проявляться оптимальным образом.

[0054]

Настоящее изобретение включает в себя вариант осуществления, в котором осуществляется введение других противоопухолевых средств и других процедур, в дополнение к комбинированному использованию двух процедур, т.е. введению соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли и эндокринной терапии. В настоящем изобретении эндокринная терапия, применяемая в комбинации с введением соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли, может проводиться один раз, или же один и тот же или разные типы эндокринной терапии могут проводиться несколько раз.

[0055]

В варианте осуществления настоящего изобретения соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль усиливают противоопухолевый эффект эндокринной терапии, применяемой в комбинации. В варианте осуществления настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, для применения в усилении противоопухолевого эффекта эндокринной терапии. В варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в усилении противоопухолевого эффекта эндокринной терапии. В варианте осуществления настоящего изобретения предлагается применение соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства, используемого в усилении противоопухолевого эффекта эндокринной терапии. В варианте осуществления настоящего изобретения предлагается способ усиления противоопухолевого эффекта эндокринной терапии, включающий введение эффективного количества соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли пациенту. В варианте осуществления настоящего изобретения предлагается комбинация эндокринной терапии и введения соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли, для усиления противоопухолевого эффекта эндокринной терапии.

[0056]

В настоящем изобретении соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль и лекарственное средство, используемое в эндокринной терапии, могут быть получены в виде множества отдельных препаратов или могут быть интегрированы в один препарат. Кроме того, настоящее изобретение может дополнительно включать активные ингредиенты, отличные от соединения 1 или его фармацевтически приемлемых солей, и другое соединение, обладающее противоопухолевым эффектом, или его фармацевтически приемлемые соли.

[0057]

Когда соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль и другое лекарственное средство, используемое в эндокринной терапии, включены в фармацевтический препарат в качестве активных ингредиентов, каждый активный ингредиент может быть необязательно смешан с фармацевтическим носителем, тем самым образуя различные лекарственные формы в соответствии с целями профилактики и лечения. Примеры лекарственной формы включают пероральные препараты, препараты для инъекций, суппозитории, мази, пластыри и тому подобное. Из них предпочтительными являются пероральные препараты. Примеры пероральных препаратов включают таблетки, капсулы, гранулы, порошки, сиропы и тому подобное без каких-либо ограничений. Такие лекарственные формы могут быть получены способами, известными специалистам в данной области. Подходящий носитель, такой как эксципиент, разбавитель, наполнитель или разрыхлитель, может быть дополнительно добавлен к фармацевтическому препарату или фармацевтической композиции в соответствии с лекарственной формой.

[0058]

Специалисты в данной области могут вводить пациенту эффективное количество соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли. Количество соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли, которое должно включаться в каждую из таких стандартных лекарственных форм, зависит от состояния пациента, которому вводится соединение 1 или его соль, от лекарственной формы, и тому подобное. Как правило, в случае перорального препарата, инъекции и суппозитория, количество предпочтительно составляет 0,05-1000 мг, 0,01-500 мг и 1-1000 мг, соответственно, на стандартную лекарственную форму.

[0059]

Суточная доза соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли зависит от состояния, массы тела, возраста, пола и т.п., пациента, и не может быть определена в общем виде. Например, доза соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли для взрослого человека (масса тела: 60 кг) в день обычно составляет примерно 1-1000 мг, предпочтительно 10-500 мг и более предпочтительно 20-300 мг.

[0060]

Когда соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль вводят каждый день, доза соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли составляет, например, примерно 1-200 мг, предпочтительно 2-100 мг, более предпочтительно 4-50 мг и еще более предпочтительно 10-40 мг в сутки.

[0061]

Когда соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль вводятся через день, доза соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли составляет, например, примерно 2-1000 мг, предпочтительно 10-500 мг, более предпочтительно 20-200 мг и еще более предпочтительно 50-160 мг в сутки.

[0062]

В настоящем изобретении препарат, содержащий соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и лекарственное средство, используемое в эндокринной терапии, могут вводиться одним и тем же или различными путями. Например, препарат, содержащий соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, и лекарственное средство, используемое в эндокринной терапии, могут вводиться перорально. В качестве альтернативы, например, препарат, содержащий соединение 1 или его фармацевтически приемлемую соль, можно вводить перорально, и лекарственное средство, используемое в эндокринной терапии, можно вводить внутривенно. Способ введения может быть соответствующим образом определен в зависимости от вводимого активного ингредиента, а также с учетом стадии прогрессирования злокачественной опухоли у пациента, общего состояния пациента и тому подобного.

[0063]

В настоящем изобретении соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль могут вводиться пациентам до или после операции, а также могут вводиться неоперабельным пациентам. Кроме того, настоящее изобретение может включать введение лекарственных средств для дальнейшего усиления противоопухолевого эффекта и введение лекарственных средств для уменьшения побочных эффектов.

[0064]

В качестве варианта осуществления настоящего изобретения, например, для лечения рака молочной железы, соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль могут использоваться в сочетании с агонистом LH-RH, ингибитором ароматазы, антиэстрогеном и/или прогестагеном. Оба лекарственных средства можно вводить перорально в качестве активных ингредиентов, или в качестве активных ингредиентов фармацевтической композиции, описанной в настоящем изобретении.

[0065]

В качестве варианта осуществления настоящего изобретения, например, для лечения рака простаты, соединение 1 или его фармацевтически приемлемая соль могут использоваться в сочетании с агонистом LH-RH, антагонистом LH-RH, эстрогенным лекарственным средством, антиандрогеном и/или ингибитором синтеза андрогена. Оба лекарственных средства можно вводить перорально в качестве активных ингредиентов, или в качестве активных ингредиентов фармацевтической композиции, описанной в настоящем изобретении.

[0066]

Введение или соотношение в смеси соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли и лекарственного средства, используемого в эндокринной терапии, не имеют особых ограничений при условии, что проявляются противоопухолевые эффекты. Например, количество соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли в свободной форме может составлять примерно 0,001-1000 моль и предпочтительно примерно 0,01-100 моль на моль другого соединения, обладающего противоопухолевым эффектом.

[0067]

Например, когда другое соединение, обладающее противоопухолевым эффектом, является антиэстрогеном, подходящий диапазон используемого соединения 1 или его фармацевтически приемлемой соли составляет 0,001-10 моль, предпочтительно 0,001-1 моль и более предпочтительно 0,001-0,1 моль на моль антиэстрогена.

[0068]

Настоящее изобретение также может эффективно использоваться для опухолей, резистентных к ингибиторам FGFR, отличным от соединения 1 или его фармацевтически приемлемых солей.

Примеры

[0069]

Настоящее изобретение описано ниже более подробно со ссылкой на примеры. Однако объем настоящего изобретения не ограничивается этими примерами.Настоящее изобретение полностью описано ниже посредством примеров; однако имеется ввиду, что возможны различные изменения и модификации, осуществляемые специалистом в данной области. Соответственно, такие изменения и модификации включены в настоящее изобретение при условии, что они не выходят за пределы объема изобретения. Различные реагенты, использованные в примерах, получали от коммерческих поставщиков, если не указано иное.

[0070]

Пример 1: Оценка эффекта ингибирования роста клеток при комбинированном применении соединения 1 и 4-гидрокситамоксифена или фулвестранта In Vitro (комбинационный индекс)

А. Материалы и методы

Клеточную линию рака молочной железы человека T47D (Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd.) культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, руководствуясь British Journal of Cancer (2006) 94, 661-671. Клетки выдерживали при 37°С и 5% СО₂ и пассировали один или два раза в неделю в соотношении от 1:5 до 1:20. Клеточную линию рака молочной железы человека MDA-MB-134VI (American Type Culture Collection) культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, руководствуясь British Journal of Cancer (2006) 94, 661-671. Клетки выдерживали при 37°С и 5% СО₂ и пассировали один или два раза в неделю в соотношении от 1:2 до 1:3.

[0071]

Анализ жизнеспособности клеток

Жизнеспособность клеток измеряли с помощью CellTiter-Glo 2.0 (Promega). После сбора в соответствии с обычным способом клетки суспендировали в среде RPMI-1640 (без фенолового красного), содержащей 1% фетальную бычью сыворотку (очищенную на активированном угле), 0,5 нг/мл эстрадиола и 25 нг/мл FGF2 человека, и высевали в 96-луночный планшет с ультранизким прикреплением. Количество посеянных клеток составляло 500 клеток/80 мкл на лунку. После инкубации при 37°C и 5% CO₂ в течение 24 ч добавляли 10 мкл среды, содержащей раствор лекарственного средства. Растворы лекарственных средств готовили для группы носителя (ДМСО), и серии разведений отдельных лекарственных средств (соединение 1, тамоксифен и фулвестрант). Эксперименты проводили в общей сложности на 7 группах: группа носителя, группы с одним лекарственным средством соединения 1, тамоксифена и фулвестранта, а также их комбинированные группы (соединение 1+носитель, соединение 1+тамоксифен, и соединение 1+фулвестрант). Максимальная конечная концентрация соединения 1 составляла 1 мкМ, и 5 концентраций устанавливали в 10-кратном серийном разведении. Для 4-гидрокситамоксифена и фулвестранта была установлена серия 10-кратных разведений с максимальной концентрацией 10 мкМ для 4 концентраций. После добавления лекарственного средства клетки дополнительно инкубировали при 37°С и 5% СО₂ в течение 120 ч. Эксперименты проводили в двух повторностях (2 лунки на группу обработки). Жизнеспособность клеток рассчитывали, используя добавление 100 мкл реагента CellTiter-Glo 2,0 на лунку, инкубирование при комнатной температуре в течение 30 мин и затем измерение хемилюминесценции каждой лунки планшет-ридером (EnSpire). Жизнеспособность клеток в случае добавления лекарственного средства рассчитывали по отношению к контрольной группе, которую принимали за 100%, в соответствии со следующей ниже формулой, и для анализа использовали среднее значение данных двух лунок.

[0072]

Жизнеспособность клеток (%) = (хемилюминесценция при добавлении лекарственного средства)/(хемилюминесценция контрольной группы) × 100

Значение Fa (затронутая фракция) рассчитывали вычитанием 1/100 жизнеспособности клеток из 1.

[0073]

Далее значение комбинационного индекса (CI) определяли при комбинированных концентрациях лекарственных средств. Эффект от комбинированного применения двух лекарственных средств определяли следующим образом: значение CI более 1, равное 1, или менее 1, указывало на антагонизм, аддитивность или синергизм, соответственно (таблица 1, Pharmacol Rev. 2006; 58 (3): 621-81, BMC Complement Altern Med. 2013; 13: 212, Anticancer Res. 2005; 25 (3B): 1909-17).

[0074]

Таблица 1

Диапазон CI (верхний предел) Пояснение 0,1 Очень сильный синергизм 0,3 Сильный синергизм 0,7 Синергизм 0,85 Умеренный синергизм 0,9 Слабый синергизм 1 Почти аддитивность 1,2 Слабый антагонизм 1,45 Умеренный антагонизм 3,3 Антагонизм 10 Сильный антагонизм >10 Очень сильный антагонизм

[0075]

Далее, из значений Fa, рассчитанных по комбинациям концентраций соединения 1 и 4-гидрокситамоксифена или фулвестранта в клетках T47D и клетках MDA-MB-134VI, получали комбинации концентраций обоих лекарственных средств, удовлетворяющие Fa=0,5 (соответствует ED50), 0,75 (соответствует ED75) и 0,9 (соответствует ED90), и подвергали линейной аппроксимации кривой в программе CalcuSyn (HULINKS Inc.) для получения CI.

[0076]

В. Результаты

В клеточной линии рака молочной железы T47D, экспрессирующей FGFR1, и клеточной линии рака молочной железы MDA-MB-134VI, имеющей амплификацию гена FGFR1, комбинированное использование соединения 1 и 4-гидрокситамоксифена показало синергизм во всех комбинациях четырех выполненных соотношений концентраций (таблица 2). В следующей таблице 2 приведены значения комбинационного индекса, когда соотношение 4-гидрокситамоксифена и соединения 1 составляло 1:1, 10:1, 100:1 и 1000:1 в каждый момент времени, когда эффект ингибирования роста клеток при комбинированном использовании составлял 50%, 75% и 90% (ED50, ED75 и ED90).

[0077]

Таблица 2

Клеточная линия 4-Гидрокситамоксифен : соединение 1 ED50 ED75 ED90 T47D 1 : 1 0,27 1,90 14,49 10 : 1 0,19 0,31 0,53 100 : 1 0,38 0,45 0,54 1000 : 1 0,40 0,51 0,65 MDA-MB-134VI 1 : 1 0,14 0,13 0,28 10 : 1 0,32 0,26 0,37 100 : 1 0,52 0,61 0,78 1000 : 1 0,66 0,72 0,79 Клеточная линия Фулвестрант : соединение 1 ED50 ED75 ED90 T47D 1 : 1 0,01 0,01 0,01 10 : 1 0,03 0,03 0,03 100 : 1 0,05 0,02 0,01 1000 : 1 0,16 0,08 0,04 MDA-MB-134VI 1 : 1 0,11 0,04 0,02 10 : 1 0,18 0,04 0,01 100 : 1 0,13 0,01 0,00 1000 : 1 0,46 0,09 0,02

[0078]

Пример 2: Оценка эффекта ингибирования роста клеток при комбинированном применении соединения 1 и 4-гидрокситамоксифена или фулвестранта In Vitro

А. Материалы и методы

Клеточную линию рака молочной железы человека MDA-MB-134VI (American Type Culture Collection) культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, руководствуясь British Journal of Cancer (2006) 94, 661-671. Клетки выдерживали при 37°С и 5% СО₂ и пассировали один или два раза в неделю в соотношении от 1:2 до 1:3.

[0079]

Анализ жизнеспособности клеток

Жизнеспособность клеток измеряли с помощью CellTiter-Glo 2.0 (Promega). После сбора в соответствии с обычным способом клетки суспендировали в среде RPMI-1640 (без фенолового красного), содержащей 1% фетальную бычью сыворотку (очищенную на активированном угле), 0,5 нг/мл эстрадиола и 25 нг/мл FGF2 человека, и высевали в 96-луночный планшет с ультранизким прикреплением. Количество посеянных клеток составляло 500 клеток/80 мкл на лунку. После инкубации при 37°C и 5% CO₂ в течение 24 ч добавляли 10 мкл среды, содержащей соединение 1 и 4-гидрокситамоксифен или фулвестрант, и в качестве контроля добавляли 10 мкл среды, содержащей носитель (ДМСО), не содержащей ни одного из этих лекарственных средств. Максимальная концентрация была установлена на уровне 0,1 мкМ для соединения 1; на уровне 1 мкМ - для 4-гидрокситамоксифена; и 0,1 мкм - для фулвестранта. После добавления лекарственного средства клетки дополнительно инкубировали при 37°С и 5% СО₂ в течение 120 ч. Эксперименты проводили в трех повторностях (3 лунки на группу обработки). Жизнеспособность клеток рассчитывали, используя добавление 100 мкл реагента CellTiter-Glo 2,0 на лунку, инкубирование при комнатной температуре в течение 30 мин и затем измерение хемилюминесценции каждой лунки планшет-ридером (EnSpire). Жизнеспособность клеток в случае добавления лекарственного средства рассчитывали по отношению к контрольной группе, которую принимали за 100%, в соответствии со следующей ниже формулой, и для анализа использовали среднее значение данных трех лунок.

[0080]

Жизнеспособность клеток (%) = (хемилюминесценция при добавлении лекарственного средства)/(хемилюминесценция контрольной группы) × 100

[0081]

В. Результаты

Обработка соединением 1 (0,1 мкМ), 4-гидрокситамоксифеном (1 мкМ) или фулвестрантом (0,1 мкМ) в отдельности подавляло рост клеток MDA-MB-134VI, и T/C ((опыт (группа обработки)/контроль (контрольная группа)) (%) на день определения составляло 35%, 65% и 75%, соответственно. В противоположность этому, комбинированная обработка комбинацией 0,1 мкМ соединения 1 и 1 мкМ 4-гидрокситамоксифена, а также комбинированная обработка комбинацией 0,1 мкМ соединения 1 и 0,1 мкМ фулвестранта дополнительно подавляли рост клеток по сравнению с обработкой только одним каждым лекарственным средством, и T/C (%) составляло 7% и 16% соответственно.

[0082]

Эффект ингибирования роста клеток при комбинированном применении соединения 1 и 4-гидрокситамоксифена или фулвестранта превышал эффекты комбинированного применения обоих лекарственных средств (T/C=23% и 27%), предсказанные с помощью вычислений на основе эффекта обработки одним только каждым лекарственным средством в качестве показателя (метод Bliss, Ann Appl Biol. 1939; 26: 585-615). Это означает, что проявляется синергическое действие комбинированного применения (Р<0,05; t-критерий Стьюдента) (фиг.1А и фиг.1B).

Группа изобретений относится в области фармацевтики, а именно к применению комбинации (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли и антиэстрогенного лекарственного средства, выбранного из группы, состоящей из тамоксифена и фулвестранта, для изготовления лекарственного средства для лечения или профилактики рака молочной железы, а также к способу лечения или профилактики рака молочной железы. При этом количество (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил) этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль антиэстрогенного лекарственного средства. Вышеописанная комбинация обладает синергетическим действием при лечении рака молочной железы. 3 н. и 36 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 2 пр.

1. Применение (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения или профилактики опухоли в комбинации с антиэстрогенным лекарственным средством,

где опухоль представляет собой рак молочной железы,

где антиэстрогенное лекарственное средство является выбранным из группы, состоящей из тамоксифена и фулвестранта, или их фармацевтически приемлемых солей, и

где количество (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил) этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль антиэстрогенного лекарственного средства.

2. Применение по п.1, где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR.

3. Применение по п.1 или 2, где опухоль представляет собой рак молочной железы с активированной передачей сигнала FGFR.

4. Применение по п.1 или 2, где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий генетическую аберрацию FGFR.

5. Применение по п.1 или 2, где опухоль представляет собой рак молочной железы, резистентный к эндокринной терапии.

6. Применение по п.1 или 2, где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR1.

7. Применение по п.1 или 2, где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий амплификацию гена FGFR1.

8. Применение по п.1 или 2, где антиэстрогенное лекарственное средство представляет собой тамоксифен или его фармацевтически приемлемую соль.

9. Применение по п.8, где количество(S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль тамоксифена.

10. Применение по п.1 или 2, где антиэстрогенное лекарственное средство представляет собой фулвестрант или его фармацевтически приемлемую соль.

11. Применение по п.10, где количество (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль фулвестранта.

12. Применение по п.1 или 2, где антиэстрогенное лекарственное средство и лекарственное средство, содержащее (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемую соль, предназначены для применения одновременно или раздельно.

13. Применение по п.1 или 2, где лекарственное средство, содержащее (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемую соль, предназначены для применения к пациенту с опухолью, прошедшему введение антиэстрогенного лекарственного средства.

14. Способ лечения или профилактики опухоли, включающий введение эффективного количества (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли пациенту, в комбинации с антиэстрогенным лекарственным средством,

где опухоль представляет собой рак молочной железы,

где антиэстрогенное лекарственное средство является выбранным из группы, состоящей из тамоксифена и фулвестранта, или их фармацевтически приемлемых солей, и

где количество (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил) этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль антиэстрогенного лекарственного средства.

15. Способ по п.14, где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR.

16. Способ по п.14 или 15, где опухоль представляет собой рак молочной железы с активированной передачей сигнала FGFR.

17. Способ по п.14 или 15, где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий генетическую аберрацию FGFR.

18. Способ по п.14 или 15, где опухоль представляет собой рак молочной железы, резистентный к эндокринной терапии.

19. Способ по п.14 или 15, где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR1.

20. Способ по п.14 или 15, где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий амплификацию гена FGFR1.

21. Способ по п.14 или 15, где антиэстрогенное лекарственное средство представляет собой тамоксифен или его фармацевтически приемлемую соль.

22. Способ по п.21, где количество(S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль тамоксифена.

23. Способ по п.14 или 15, где антиэстрогенное лекарственное средство представляет собой фулвестрант или его фармацевтически приемлемую соль.

24. Способ по п.23, где количество (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль фулвестранта.

25. Способ по п.14 или 15, где антиэстрогенное лекарственное средство и (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемую соль вводят одновременно или раздельно.

26. Способ по п.14 или 15, где введение осуществляется пациенту с опухолью, прошедшему введение антиэстрогенного лекарственного средства.

27. Применение комбинации антиэстрогенного лекарственного средства и (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли для лечения или профилактики опухоли,

где опухоль представляет собой рак молочной железы,

где антиэстрогенное лекарственное средство является выбранным из группы, состоящей из тамоксифена и фулвестранта, или их фармацевтически приемлемых солей, и

где количество (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил) этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль антиэстрогенного лекарственного средства.

28. Применение по п.27, где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR.

29. Применение по п.27 или 28, где опухоль представляет собой рак молочной железы с активированной передачей сигнала FGFR.

30. Применение по п.27 или 28, где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий генетическую аберрацию FGFR.

31. Применение по п.27 или 28, где опухоль представляет собой рак молочной железы, резистентный к эндокринной терапии.

32. Применение по п.27 или 28, где опухоль представляет собой рак молочной железы, экспрессирующий FGFR1.

33. Применение по п.27 или 28, где опухоль представляет собой рак молочной железы, имеющий амплификацию гена FGFR1.

34. Применение по п.27 или 28, где антиэстрогенное лекарственное средство представляет собой тамоксифен или его фармацевтически приемлемую соль.

35. Применение по п.34, где количество(S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на соль тамоксифена.

36. Применение по п.27 или 28, где антиэстрогенное лекарственное средство представляет собой фулвестрант или его фармацевтически приемлемую соль.

37. Применение по п.36, где количество (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемой соли в расчете на свободное основание составляет 0,001-10 моль на моль фулвестранта.

38. Применение по п.27 или 28, где антиэстрогенное лекарственное средство и (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-она или его фармацевтически приемлемую соль вводят одновременно или раздельно.

39. Применение по п.27 или 28, где (S)-1-(3-(4-амино-3-((3,5-диметоксифенил)этинил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пирролидин-1-ил)проп-2-ен-1-он или его фармацевтически приемлемая соль вводится пациенту с опухолью, прошедшему введение антиэстрогенного лекарственного средства.