СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ПСОРИАЗА Российский патент 2009 года по МПК G01N33/52 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в дерматологии для выявления псориаза.

В клинической практике для постановки диагноза псориаз и псориатическая артропатия учитываются следующие критерии (Mathies Н, 1974; Хобейшн М.М. и соавт., 1999, Институт Ревматологии РАМН):

Псориатические высыпания на коже с триадой характерных признаков (феномен стеаринового пятна; феномен терминальной пленки, феномен точечного кровотечения), изоморфная реакция Кебнера, псориаз ногтевых пластинок, псориаз у близких родственников (указание на наличие больных серонегативным артритом и псориазом среди родственников).

1. Артрит дистальных межфаланговых суставов кистей.

2. Артрит трех суставов одного и того же пальца кистей (осевое поражение).

3. Разнонаправленное поражение (подвывих пальцев рук).

4. Асимметричный хронический артрит.

5. Параартикулярные явления.

6. Сосискообразная конфигурация пальцев стоп.

7. Параллелизм течения кожного и суставного синдромов.

8. Боль и утренняя скованность в позвоночнике, которые сохраняются в течение не менее 3 месяцев.

9. Серонегативность по ревмофактору.

10. Акральный остеолиз.

11. Анкилоз дистальных межфаланговых суставов кистей и/или

межфаланговых суставов стоп.

12. Рентгенологические признаки определенного сакроилеита.

13. Синдесмофиты или паравертебральные оссификаты.

Диагноз может считаться правомочным, если проявления заболевания совпадают с тремя из приведенных выше критериев, из которых обязательно должен быть один из приведенных в пунктах 1, 11. При обнаружении РФ необходимо совпадение по 5 критериям, из них обязательны два - кожные псориатические высыпания и остеолизис (из книги Беляев Г.М., Рыжко П.П. Псориаз. Псориатическая артропатия. М.: МЕДпресс-информ, 2000).

Существующий метод не количественный, и диагностика наличия псориаза является субъективной.

Задачей изобретения является объективизация способа диагностики псориаза с целью выработки лабораторного критерия псориаза.

Сущность предложенного способа заключается в том, что наряду с определением клинических признаков проводят оценку хемилюминесценции (ХЛ) суспензии липопротеидов низкой и очень низкой плотности (ЛПНП ЛПОНОП), выделенных из сыворотки крови пациентов, измеряют показатели светосуммы (S) и интенсивности быстрой вспышки (I), после чего рассчитывают коэффициент Н, равный отношению S к I, и если Н больше 4,8, предполагают наличие псориаза у обследуемого пациента.

Патогенез псориаза связан с гиперсекрецией провоспалительных медиаторов, что в свою очередь приводит к цитолизу и активации системы мононуклеарных фагоцитов. Все эти процессы стимулируют перекисное окисление липидов, что приводит к их молекулярной трансформации.

Поэтому при псориазе изменяется характер хемилюминесценции липопротеидов сыворотки крови, что стало основой данного диагностического метода.

ПРИМЕР: Пациент К. Возраст: 59 лет.

Клинический диагноз: псориаз обыкновенный, распространенный, полиартрит II ст.

Сопутствующие заболевания: АГ 2 ст, риск 2. Атеросклеротический кардиосклероз.

Диагноз поставлен на основании:

- жалоб пациента на сильный зуд, высыпания на волосистой части головы, туловище, верхних, нижних конечностях, боли в локтевых суставах, мелких суставах кисти, стопы, скованность по утрам;

- данных анамнеза заболевания: больной себя считает в течение 8 лет, когда впервые после психоэмоционального стресса появились высыпания. Обострения 1 раз в год в осенне-зимний период;

- данных объективного осмотра: процесс распространенный, локализован на волосистой части головы, туловище, верхних, нижних конечностях, представлен ярко-красными папулами, сливающимися в бляшки, покрытые серебристо-белыми чешуйками с инфильтрацией в основании. Псориатическая триада положительная. Наблюдается незначительное ограничение активных и пассивных движений в локтевых, коленных суставах, мелких суставах кистей и стоп.

Кровь из локтевой вены забирали утром натощак. Сыворотку крови получали путем центрифугирования в течение 15мин при 2400 g.

Липопротеиды сыворотки крови выделяли осаждением в присутствии гепарина и СаСl₂. К 2 мл 15 мМ раствора СаСl₂ добавляли 0,2 мл сыворотки крови и 0,04 мл 1% раствора кристаллического гепарина. Пробирку осторожно встряхивали. Образовавшуюся суспензию через 5 мин инкубации при комнатной температуре центрифугировали в течение 5 мин при 200 g. Надосадочную жидкость, состоящую из ЛПВП и белков, удаляли пипеткой в отдельную пробирку. Осадок, который представлял собой суммарную фракцию ЛПНП и ЛПОНП, ресуспензировали в фосфатном буфере (Лопухин Ю.М., Владимиров Ю.А., Молоденков М.Н., Клебанов Г.И., Сергиенко В.И., Наумов А.В., Максимов В.А., Шерстнев М.П. Регистрация хемилюминесценции составных частей сыворотки крови в присутствии двухвалентного железа // Бюллетень экспериментальной биологии и клинической медицины. - №5. - 1982. - С.61-63).

Суспензию ЛПНП и ЛПОНП в количестве 200 мкл помещали в кювету хемилюминесцентной установки, добавляли 200 мкл фосфатного буфера (20 мМ КН₂РO₄, 10 мМ КСl pH 7,4). Для инициации ХЛ вводили 50 мкл FeSO₄·7H₂O, на 7 цикле вводили 100 мкл 3% Н₂O₂ (Климкина Е.И. Влияние производных 3-оксипиридина и 4-тиосульфокислоты на функциональное состояние печени при ее токсическом поражении. Автореферат дисс…. канд.мед.наук. - Смоленск, 2005. - С.59-60).

Регистрировали ХЛ в течение 20 циклов и рассчитывали высоту быстрой вспышки I=5616 у.е. и светосумму S=32124 у.е. После чего определяли коэффициент Н, равный отношению S к I, Н=32124/5616=5,8. Так как 5,8 больше 4,8, то пациент страдает псориазом.

Провели хемилюминесцентный анализ суспензии ЛПНП и ЛПОНП, выделенной из сыворотки у 12 пациентов с псориазом и 12 практически здоровых доноров по описанной выше методике. Данные исследования сведены в таблицу (табл.1).

У всех пациентов с псориазом значение коэффициента Н больше 4,8, в группе здоровых доноров меньше 4,8. Среднегрупповое значение коэффициента Н у пациентов с псориазом и здоровых доноров соответственно было равным 5,43±0,18 и 4,49±0,08 (р<0,001) (табл.2).

Таким образом, предложенный способ диагностики псориаза является простым, объективным, надежным, может быть широко использован в клинике как дополнительный лабораторный критерий в постановке диагноза.

Таблица 1 № Пациенты с псориазом Здоровые доноры   I S Н I S Н 1 17344 87171 5,026003 15177 69798 4,598933 2 17342 94311 5,4383 11220 57984 5,167914 3 13874 81522 5,875883 15256 71511 4,687402 4 14570 77718 5,334111 32022 128028 3,998126 5 17172 87801 5,113033 14528 67371 4,637321 6 13997 69807 4,987283 31325 120390 3,843256 7 18202 90777 4,987199 18566 85311 4,595012 8 8262 56973 6,895788 17723 81828 4,617051 9 9565 52854 5,525771 20608 86484 4,196623 10 9270 48387 5,219741 20047 83724 4,176385 11 11552 57345 4,964075 18602 87318 4,694011 12 7017 40794 5,813596 18407 86136 4,679524 Таблица 2 Группа Н   (М±m) Пациенты с псориазом 5,43±0,18 Здоровые доноры 4,49±0,08

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в дерматологии для диагностики псориаза. Для осуществления способа диагностики определяют клинические признаки псориаза, и в качестве дополнительного лабораторного критерия проводят оценку хемилюминесценции (ХЛ) суспензии липопротеидов низкой плотности и очень низкой плотности, выделенных из сыворотки крови пациентов. Для чего измеряют показатели светосуммы - S, интенсивности быстрой вспышки -I и рассчитывают коэффициент Н, равный отношению S к I. Если Н больше 4,8, диагностируют наличие псориаза у обследуемого пациента. Использование изобретения позволяет провести объективную диагностику псориаза. 2 табл.

Способ диагностики псориаза, включающий определение клинических признаков, отличающийся тем, что дополнительно проводят оценку хемилюминесценции суспензии липопротеидов низкой и очень низкой плотности, выделенных из сыворотки крови пациентов, измеряют показатели светосуммы S и интенсивности быстрой вспышки I, после чего рассчитывают коэффициент Н, равный отношению S к I, и, если Н больше 4,8, предполагают наличие псориаза у обследуемого пациента.