СПОСОБ СОЧЕТАННОГО КОНСЕРВАТИВНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российский патент 2010 года по МПК A61K31/282 A61N5/10 A61K31/375 A61P35/00 

Изобретение относится к области биологии и медицины, а именно к консервативным методам воздействия на злокачественные опухоли.

Широко известно, что использование цитостатических средств для консервативного лечения злокачественных опухолей сопровождается высокой токсичностью, проявляющейся в отношении жизненно важных органов. В то же время известен «Способ подавления опухолевого роста», включающий применение цитостатических средств в сочетании со смесью октакарбоксифталоцианина кобальта или оксикобаламина с аскорбинатом натрия (RU 2114623). Известный способ обеспечивает эффективное подавление опухолевого роста при снижении токсичности за счет минимизации доз цитостатических средств.

Одним из основных методов лечения местнораспространенных злокачественных процессов различной локализации (опухолей головы-шеи, пищевода, шейки матки и др.) является лучевая терапия в самостоятельном варианте. Однако применение высоких доз облучения приводит к развитию тяжелых местных и общих токсических реакций, а недостаточная чувствительность многих опухолей к облучению заставляет клиницистов во всем мире искать пути повышения эффективности лучевой терапии.

Известен «Способ подавления опухолевого роста», включающий комбинированное использование лучевой терапии в виде ионизирующего излучения и введение смеси натриевой соли окта-4,5-карбоксифталоцианина кобальта или оксикобаламина с аскорбатом натрия (RU 2255742). Известный способ позволяет повысить эффективность противоопухолевого лечения при снижении лучевой нагрузки и токсичности.

Известен способ повышения эффективности лучевой терапии путем использования сочетания ее с химиотерапией. В ряде рандомизированных клинических исследований, проведенных на больших когортах пациентов, показано, что применение различных цитостатиков (цисплатина, 5-фторурацила, ифосфамида и др.) одновременно с облучением существенно улучшает результаты лечения (Дарьялова С.Л., Бойко А.В., Борисов В.И. и др. 5-Фторурацил и препараты платины как радиосенсибилизаторы при лучевом лечении больных местнораспространенным дифференцированным раком легкого «Российский онкологический журнал», 1999 г., №1, стр.21-24). Принят в качестве прототипа.

В то же время выявлено, что сочетанное химиолучевое лечение приводит к увеличению количества и тяжести непосредственных побочных реакций, особенно гематологических и со стороны органов желудочно-кишечного тракта.

Предлагаемое изобретение направлено на решение задачи повышения эффективности консервативного воздействия на злокачественные опухоли.

Использование в клинической практике предлагаемого способа позволяет достичь нескольких технических результатов:

- повысить противоопухолевую эффективность химиолучевой терапии;

- снизить дозы компонентов специфического лечения;

- уменьшить токсические реакции лечения.

Указанные технические и лечебные результаты при осуществлении изобретения достигаются за счет того, что так же как в известном способе сочетанное консервативное воздействие на злокачественные опухоли включает лучевое воздействие и введение цитостатического препарата. Особенность прелагаемого способа заключается в том, что дополнительно в качестве третьего компонента используют бинарную каталитическую систему «оксикобаламин+аскорбиновая кислота» (далее - БКС «Ок+Ак»).

Сущность изобретения заключается в следующем.

Ранее было установлено (RU 2114623, RU 2255742), что компоненты БКС «Ок+Ак» являются модификаторами как химиотерапии, так и лучевого лечения, введение которых снижает токсические проявления. Авторами изобретения установлено, что оксикобаламин и аскорбиновая кислота при индивидуальном применении не обладают цитотоксическим действием. В то же время БКС «Ок+Ак» является эффективным цитотоксическим агентом. Цитотоксическое действие БКС «Ок+Ак» подтверждено в системе in vitro на опухолевых клетках человека. Таким образом, БКС «Ок+Ак» может быть самостоятельно использована в качестве противоопухолевого средства.

Авторами изобретения установлено также, что наибольшая терапевтическая эффективность консервативного противоопухолевого воздействия достигается путем сочетания трех компонентов лечения: лучевой терапии, химиотерапии и БКС «Ок+Ак», то есть имеет место синергетический эффект сочетанного использования трех известных ранее способов консервативного воздействия на злокачественные опухоли.

Для выявления эффективности сочетанного консервативного воздействия были использованы экспериментальные опухолевые модели аденокарциномы легкого Льюис (LLC) и аденокарциномы молочной железы Эрлиха (ОЭ), которые значительно различаются по чувствительности к облучению.

В ходе эксперимента были исследованы различные варианты сочетанного воздействия всех трех компонентов: дозы облучения, цитостатического препарата -цисплатина (ДДП), компонентов БКС - оксикобаламина и аскорбиновой кислоты, последовательность и интервалы времени между облучением, введением ДДП и компонентов БКС. В частности установлено, что наибольший эффект достигается при молярном соотношении компонентов БКС 1:10÷1:30. Применение Ок и Ак в составе БКС в молярном соотношении, выходящем за нижний предел, приводит к снижению противоопухолевой эффективности БКС, а в соотношении, выходящем за верхний предел указанного интервала, - оказывает токсическое действие.

Для оценки эффективности комплексного воздействия были исследованы следующие режимы лечения и группы сравнения:

1. инокуляция опухоли ДДП (2 мг/кг) облучение (2 Гр) БКС 2. инокуляция опухоли ДДП (4 мг/кг) облучение (2 Гр) БКС 3. инокуляция опухоли ДДП (2 мг/кг) БКС     4. инокуляция опухоли ДДП (4 мг/кг) БКС     5. инокуляция опухоли     облучение (6 Гр) БКС 6. инокуляция опухоли ДДП (2 мг/кг) облучение (6 Гр)     7. инокуляция опухоли ДДП (4 мг/кг) облучение (6 Гр)     8. инокуляция опухоли ДДП (2 мг/кг)         9. инокуляция опухоли ДДП (4 мг/кг)         10. инокуляция опухоли БКС         11. инокуляция опухоли облучение (6 Гр)        

В качестве показателей для оценки эффективности результатов эксперимента были выбраны следующие показатели:

- торможение роста опухоли (ТРО),

- средняя продолжительность жизни (СПЖ),

- удлинение продолжительности жизни (УПЖ).

Результаты исследований по изучению терапевтической эффективности сочетанного противоопухолевого воздействия на мышах с LLC представлены в таблицах 1 и 2.

В результате проведенных экспериментов установлено, что облучение животных с LLC в дозе 6 Гр (на 2-е сутки после перевивки опухолевого материала) не приводит к биологически значимому ТРО в течение всего срока наблюдения.

Трехкратное внутривенное введение БКС «Ок+Ак» на 3-и сутки после перевивки опухолевого материала также оказывает слабое противоопухолевое действие в отношении LLC: ТРО на 14 день роста опухоли составляет 25±6% и 35±11% соответственно.

Введение ДДП в дозах 2 мг/кг и 4 мг/кг не приводит к значимому ТРО, так как дозы, используемые в эксперименте, ниже терапевтических в 4 и 2 раза соответственно.

Попарное сочетание противоопухолевых агентов приводит к увеличению эффективности лечения экспериментальной опухоли LLC. Так, исследования выявляют радиомодифицирующее действие цисплатина независимо от введенной разовой дозы (2 мг/кг или 4 мг/кг), которое имеет место в течение всего срока наблюдения. На 21-й день роста опухоли ТРО (44±10% и 48±10%) в группе животных с комбинированным применением ДДП и облучения биологически значимо отличается от значения ТРО (21±6%) в контрольной группе (облучение 6 Гр), что коррелирует с клиническими данными по эффективности лечения местно распространенных опухолевых процессов.

Введение БКС «Ок+Ак» в комплексе с лучевой и химиотерапией приводит к биологически значимому ТРО в течение всего срока наблюдения и способствует усилению лечебного эффекта этих методов лечения, используемых в самостоятельном варианте. Значения ТРО на 21-й день наблюдения достоверно отличаются от таковых в контрольных группах животных и составляют 56±16% и 58±17%, в то время как в контрольных - 21±6% (облучение 6 Гр) и 14±5% и 22±6% (ДДП 2 мг/кг и 4 мг/кг, соответственно).

Более выраженный терапевтический эффект сочетанного воздействия получен на более чувствительной к облучению и химиотерапии экспериментальной модели - опухоли Эрлиха.

Для оценки эффективности комплексного воздействия были исследованы следующие режимы лечения и группы сравнения:

1. инокуляция опухоли ДДП (2 мг/кг) облучение (2 Гр) БКС 2. инокуляция опухоли ДДП (4 мг/кг) облучение (2 Гр) БКС 3. инокуляция опухоли ДДП (2 мг/кг) БКС     4. инокуляция опухоли ДДП (4 мг/кг) БКС     5. инокуляция опухоли     облучение (2 Гр) БКС 6. инокуляция опухоли ДДП (2 мг/кг) облучение (2 Гр)     7. инокуляция опухоли ДДП (4 мг/кг) облучение (2 Гр)     8. инокуляция опухоли ДДП (2 мг/кг)         9. инокуляция опухоли ДДП (4 мг/кг)         10. инокуляция опухоли БКС         11. инокуляция опухоли облучение (21 Гр)        

В таблицах 3 и 4 представлены данные исследований по изучению противоопухолевой эффективности комплексного применения БКС «Ок+Ак», лучевой терапии и химиотерапии у мышей с ОЭ.

Как видно из представленных в таблице 3 данных, однократное внутривенное введение БКС в схемах комплексного применения с лучевой терапией способствует усилению лечебного эффекта в отношении ОЭ. Обнаружено, что облучение животных в режиме монотерапии (2 Гр) приводит к ингибированию роста опухоли в течение всего срока наблюдения (ТРО на 21 сутки составляет 40±8%). В то же время на 21 день наблюдения в опытной группе ТРО составило 70±16%.

Установлено, что включение БКС на основе оксикобаламина в схему комбинированного применения лучевой и химиотерапии увеличивает эффективность сочетания двух методов лечения - химиотерапии и облучения, что выражается в увеличении ТРО в виде тенденции. Так, например, ТРО на 21 день наблюдения в опытных группах составляет 85±13% (при применении ДДП в дозе 2 мг/кг) и 89±11% (при применении ДДП в дозе 4 мг/кг), в то время как в группах сравнения - 72±11% и 75±14% соответственно. При этом применение указанных выше схем лечения приводит к достоверному увеличению продолжительности жизни животных с ОЭ до 35% по сравнению с контрольной группой (8%), что является биологически значимым и косвенно подтверждает существенное снижение токсичности лечения при применении комбинированной схемы, состоящей из 3-х компонентов: лучевой терапии, химиотерапии и БКС «Ок+Ак».

Таким образом, на экспериментальной модели установлено, что сочетанное консервативное воздействие, включающее лучевую терапию, химиотерапию и введение БКС на основе препарата оксикобаламин, обладает выраженным противоопухолевым действием на фоне сниженного относительно химиолучевой терапии токсического действия.

Таблица 1 Влияние сочетанного противоопухолевого воздействия на рост опухоли LLC № группы Воздействие Торможение роста опухоли, % Срок наблюдения, сут. 10 14 17 21 1 ДДП (2 мг/кг) + Облучение 6 Гр + «БКС» 51±13 59±19 64±14 56±16 2 ДДП (4 мг/кг) + Облучение 6 Гр + «БКС» 50±19 66±15 68±13 58±17 3 ДДП (2 мг/кг) + «БКС» 36±11 38±10 36±11 30±8 4 ДДП (4 мг/кг) + «БКС» 42±12 46±19 40±13 35±15 5 Облучение 6 Гр + «БКС» 40±11 48±15 42±12 31±10 6 ДДП (2 мг/кг) + Облучение 6 Гр 31±6 47±14 48±10 44±10 7 ДДП (4 мг/кг) + Облучение 6 Гр 40±10 51±12 51±13 48±10 8 ДДП (2 мг/кг) 17±5 20±6 21±6 14±5 9 ДДП (4 мг/кг) 23±6 27±7 30±10 22±6 10 «БКС» 20±3 25±6 18±3 10±3 11 Облучение 6 Гр 33±7 43±10 36±8 21±6

Таблица 2 Продолжительность жизни животных при сочетанном противоопухолевом воздействии у мышей с LLC № группы Воздействие СПЖ, сут УПЖ, % 1 ДДП (2 мг/кг) + Облучение 6 Гр + «БКС» 37±4 19 2 ДДП (4 мг/кг) + Облучение 6 Гр + «БКС» 37±2 19 3 ДДП (2 мг/кг) + «БКС» 35±3 13 4 ДДП (4 мг/кг) + «БКС» 35±5 13 5 Облучение 6 Гр + «БКС» 36±2 16 6 ДДП (2 мг/кг) + Облучение 6 Гр 36±4 16 7 ДДП (4 мг/кг) + Облучение 6 Гр 36±2 16 8 ДДП (2 мг/кг) 33±3 6 9 ДДП (4 мг/кг) 34±5 10 10 «БКС» 33±5 6 11 Облучение 6 Гр 35±4 13 12 Контроль 31±2  

Таблица 3 Влияние сочетанного противоопухолевого воздействия на рост опухоли Эрлиха № группы Воздействие Торможение роста опухоли, % Срок наблюдения, сут 10 14 17 21 1 ДДП (2 мг/кг) + Облучение 2 Гр + «БКС» 60±9 70±8 83±16 85±13 2 ДДП (4 мг/кг) + Облучение 2 Гр + «БКС» 59±11 69±10 83±12 89±11 3 ДДП (2 мг/кг) + «БКС» 39±5 45±9 46±8 43°9 4 ДДП (4 мг/кг) + «БКС» 40±9 46±11 48±10 45±10 5 Облучение 2 Гр + «БКС» 50±13 63±14 75±10 70±16 6 ДДП (2 мг/кг) + Облучение 2 Гр 51±9 64±8 70±11 72±11 7 ДДП (4 мг/кг) + Облучение 2 Гр 48±5 66±10 72±11 75±14 8 ДДП (2 мг/кг) 29±4 27±6 32±7 30±6 9 ДДП (4 мг/кг) 33±8 35±8 35±13 34±12 10 «БКС» 25±5 21±6 17±3 14±6 11 Облучение 2 Гр 38±7 45±14 44±9 40±8

Таблица 4 Продолжительность жизни животных при сочетанном противоопухолевом воздействии у мышей с опухолью Эрлиха № группы Воздействие СПЖ, сут УПЖ, % 1 ДДП (2 мг/кг) + Облучение 2 Гр + «БКС» 78±10 30 2 ДДП (4 мг/кг) + Облучение 2 Гр + «БКС» 81±9 35 3 ДДП (2 мг/кг) + «БКС» 63±5 5 4 ДДП (4 мг/кг) + «БКС» 64±7 7 5 Облучение 2 Гр + «БКС» 62±3 3 6 ДДП (2 мг/кг) + Облучение 2 Гр 65±4 8 7 ДДП (4 мг/кг) + Облучение 2 Гр 65±5 8 8 ДДП (2 мг/кг) 63±3 7 9 ДДП (4 мг/кг) 66±4 10 10 «БКС» 62±7 4 11 Облучение 2 Гр 63±5 5 12 Контроль 60±8  

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для консервативного воздействия на злокачественные опухоли. Способ включает воздействие на злокачественную опухоль трех компонентов - лучевой терапии и цитостатического препарата и бинарной каталитической системы «оксикобаламин + аскорбиновая кислота». Сочетанное применение всех компонентов способа позволяет повысить противоопухолевый эффект за счет усиления торможения роста опухоли за счет синергического действия компонентов, а также снизить токсичность лечения за счет уменьшения доз лучевой терапии и цитостатического препарата. 4 табл.

Способ сочетанного консервативного воздействия на злокачественные опухоли, включающий воздействие лучевой терапии и цитостатического препарата, отличающийся тем, что дополнительно в качестве третьего компонента используют бинарную каталитическую систему «оксикобаламин + аскорбиновая кислота».