СРЕДСТВО, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЕ СОБОЙ ЭТИЛОВЫЙ ЭФИР (±)-11,15-ДИДЕЗОКСИ-16-МЕТИЛ-16-ГИДРОКСИПРОСТАГЛАНДИНА E, ПРОЯВЛЯЮЩЕЕ УТЕРОТОНИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ Российский патент 2010 года по МПК C07C405/00 C07C69/738 A61K31/5575 A61P15/04 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается средства, представляющего собой этиловый эфир (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина E₁ формулы (I), проявляющего утеротоническую активность и обладающего низкой токсичностью.

Ранее были описаны синтез [1], противоязвенная и ряд других видов активности соединения (I) [2-4].

В настоящее время в акушерско-гинекологической практике чрезвычайно актуальна проблема родовозбуждения и прерывания беременности в I и II триместрах при осложненном течении беременности или экстрагенитальных заболеваниях. Существуют 2 способа решения этой проблемы: инструментальный и медикаментозный. Первый подход, особенно в случае раннего прерывания беременности, чрезвычайно опасен возможными далеко идущими последствиями (бездетность). Большое значение имеет выбор наиболее рациональных медикаментозных методов для досрочного прерывания беременности по медицинским показаниям и, в интересах плода, для ускоренного созревания шейки матки, родовозбуждения и родостимуляции.

Одними из наиболее перспективных лекарственных веществ в этом направлении являются простагландины (ПГ). Они способны стимулировать сокращения миометрия и могут приводить к созреванию и раскрытию шейки матки, а применение простагландинов во время терапевтического аборта или в III триместре беременности может индуцировать маточную активность. Простагландины также могут способствовать высвобождению окситоцина из гипофиза матери и создавать низкий порог возбудимости по отношению к окситоцину [5].

Как известно, для раннего прерывания беременности и родовспоможения у женщин применяют ПГ Е-типа: простагландин E₁ [6], сульфамидное производное простагландина Е2 - сульпростон, 9-метиленовый изостер PGE₂ - метенопрост [7], а в последние годы стали широко использовать мизопростол [5, 8].

Однако данные простагландины характеризуются рядом недостатков, а именно: невысокой химической и метаболитической стабильностью, относительно высокой токсичностью, наличием отрицательных побочных гипотензивного и диарогенного действий и дороговизной препаратов на их основе. Следует отметить, что, хотя производство простагландинов достаточно сложный и многостадийный процесс, тем не менее, оно экономически выгодное, поскольку простагландины эффективны в крайне низких дозах.

Важным мировым достижением последних лет в области гинекологии явилось создание комбинированных препаратов (антигестагенный стероид + простагландин) для раннего прерывания беременности и родовспоможения. В качестве стероидной компоненты используется высоко модифицированный стероид Мифепристон (Мифегин, RU 486), простагландиновой компонентой служит аналог простагландина E₁ - Мизопростол (II) [8].

Сочетание стероида (600 мг) с малой дозой (0.2 мг) Мизопростола не только повышает абортивную эффективность (с 84% до 96%), но и уменьшает побочные эффекты (диарея, рвота).

Ближайшим аналогом по свойствам к заявляемому объекту - этиловому эфиру (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина Е₁ (11-дезоксимизопростолу) - является синтетический аналог ПГЕ₁ - мизопростол, обладающий утеротонической активностью [8].

Однако, несмотря на эффективость, мизопростол имеет ряд побочных эффектов со стороны желудочно-кишечного тракта. Кроме этого мизопростол относительно химически неустойчив в результате наличия в циклической части мизопростола β-гидроксикетонной группировки, способной к легкой дигидратации с образованием соединений циклопентенонового типа, склонных к последующим реакциям изомеризации и уплотнения. К тому же мизопростол отличается заметной токсичностью и высокой рыночной стоимостью.

Ввиду указанных выше недостатков применяемых ныне в гинекологии и акушерстве ПГ, в том числе и мизопростола, остается актуальным поиск новых аналогов ПГ с утеротоническим действием, лишенных этих недостатков.

Задача, на решение которой направлено заявленное техническое решение, заключается в поиске среди производных простагландинов доступных соединений, отличающихся высокой утеротонической активностью и клинической приемлемостью (менее токсичных и лишенных нежелательных побочных эффектов).

Поставленная задача решается средством, представляющим собой этиловый эфир (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина E₁ (I), проявляющим утеротоническую активность.

Соединение (I) получали согласно схеме [1] путем обработки при температуре -60°С легкодоступного циклопентенона (III) приготовленным in situ купратным реагентом (IV) (мольное соотношение 1:1,5) в тетрагидрофуране. После кислотного гидролиза реакционной массы и хро-

матографической очистки на колонке с SiO₂ выделяли соединение (I) с выходом 76%.

При изучении биологической активности соединения (I) в качестве референс-препарата использовали синтетический ПГ - Мизопростол. Острую токсичность соединения (I) определяли на белых беспородных мышах массой 18-20 г при однократном внутрибрюшинном способе введения. Установлено, что соединение (I) является малотоксичным веществом (LD₅₀ 75 мг/кг), в 2 раза менее токсичным, чем мизопростол, LD₅₀ которого составляет 35 мг/кг.

Утеротоническую активность соединения (I) изучали на беспородных крысах по методу Магнуса [9]. Проведенные in vivo испытания на беременных самках крыс показали, что соединение (I) обладает высокой утеротонической активностью и превосходит таковую мизопростола. Результаты исследований приведены в таблице 1.

Таблица 1 Влияние 11-дезоксимизопростола и мизопростола на сократительную активность матки крыс Соединение Разведение, г/мл Количество животных Амплитуда маточных сокращений, % Тонус матки, % 11-дезоксимизо-простол 2×10^-6 15 98,2±2,9 15,9±1,3     Р₁<0,01       Р₂<0,01   мизопростол 2×10^-6 15 74,3±5,9 14,3±1,4     Р₁<0,02   P₁ - достоверно по отношению к спонтанным сокращениям Р₂ - достоверно по отношению к мизопростолу

Изучение влияния 11-дезоксимизопростола на моторику желудочно-кишечного тракта голодных крыс показало, что соединение (I) не повышает эвакуаторную способность тонкой кишки (таблица 2), т.е. не проявляет побочного диарогенного дейсвия, характерного для мизопростола [10].

Таблица 2 Влияние 11 -дезоксимизопростола и мизопростола на эвакуаторную способность тонкой кишки крыс (n=15) Соединение Доза, мг/кг Длина тонкой кишки, см Расстояние, пройденное меткой, см Эвакуаторная способность, % 11-дезокси-мизопростол 0.04 93.8±2.89 18,4±3.68 19.5±3,3       Р_1-3<0,05 мизопростол 0.04 91.4±2.73 19.0±3,99 25.8±3,34       Р₁>0,05 контроль - 91.2±3.36 24.8±2.63 27.48±1.11

Таким образом, предложено средство, представляющее собой этиловый эфир (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина E₁ (11-дезоксимизопростол) (I), относящийся к ряду 11-дезоксипростагландинов, и близкое по химическому строению с мизопростолом, но более стабильное, и при меньшей в 2 раза токсичности, превосходящее его по утеротонической активности. Кроме того, синтетическая доступность в сочетании с вышесказанным делает его исключительно перспективным для внедрения в практику с целью замены мизопростола в гинекологических бинарных препаратах.

Сущность изобретения поясняется следующими примерами.

Пример 1. Определение острой токсичности.

Острую токсичность 11-дезоксимизопростола изучали на белых беспородных мышах массой 18-20 г при однократном внутрибрюшинном способе введения. Соединение (I) и мизопростол растворяли в растительном масле. Наблюдение за животными проводилось в течение 10 дней. Клиническая картина отравления животных при введении изучаемых соединений проявлялась в виде бокового положения тела, замедления дыхания и развития судорог.

Параметры острой токсичности вычислялись по методу Литчфильда и Уилкоксона [11]. ЛД₅₀ 11-Дезоксимизопростола равна 75 мг/кг, ЛД₅₀ мизопростола - 35 мг/кг. По классификации ГОСТ 12.1.007.76, 11-дезоксимизопростол относится к классу низкотоксичных веществ, а мизопростол относится к классу среднетоксичных соединений.

Пример 2. Изучение утеротонической активности соединения (I).

Утеротоническую активность соединения (I) изучали на беспородных крысах по методу Магнуса [9]. С этой целью изолированный отрезок матки помещали в аэрируемый воздухом раствор Рингер-Локка (состав раствора: NaCl - 9 г/л; KCl - 200 мг/л; NaHCO₃ - 200 мг/л; CaCl₂ - 200 мг/л; глюкоза - 1 г/л) с температурой 37°С и присоединяли к самописцу. Влияние соединения (I) на сокращение матки исследовали в разведении 2×10^-6 г/мл. Об утеротонической активности судили по проценту увеличения амплитуды сокращения по отношению к исходной (инотропный эффект) и по проценту изменения тонуса матки (тонотропный эффект). Утеротоническую активность сравнивали с таковой Мизопростола в том же разведении.

В разведении 2×10^-6 г/мл соединение (I) увеличивало амплитуду маточных сокращений на 98,2% (Р₁<0,01), в то время как мизопростол - на 74,3% (Р₁<0,02) по отношению к спонтанным сокращениям. При этом 11-дезоксимизопростол и мизопростол незначительно изменяли тонус матки (таблица 1).

Таким образом, 11-дезоксимизопростол обладает более выраженными утеротоническими свойствами (Р₂<0,01) по сравнению с мизопростолом.

Пример 3. Изучение влияния 11-дезоксимизопростола на моторику желудочно-кишечного тракта.

С целью изучения побочного диарогенного влияния соединения (I) исследовано действие на моторику (эвакуаторную способность тонкой кишки) желудочно-кишечного тракта на голодных крысах [10]. Соединение (I) и мизопростол вводили за 5 мин до введения угольной метки (1 мл 5%-ной угольной взеси в крахмале). О диарогенной активности судили по расстоянию, пройденному угольной меткой за 30 минут от пилорической части желудка по кишечнику. Эвакуаторную способность тонкого кишечника выражали в процентах, как отношение расстояния, пройденного основной частью метки, к длине всей кишки.

Введение крысам 11-дезоксимизопростола замедляло перистальтику кишечника. Через 30 минут расстояние, пройденное основной частью метки, у опытных животных обеих групп было меньше, чем у контроля. 11-Дезоксимизопростол достоверно понижал эвакуаторную способность тонкого кишечника по сравнению с контрольной группой. В группе животных, получавших мизопростол в той же дозе, эвакуаторная способность тонкого кишечника была ниже, чем у контроля, и результаты недостоверны (таблица 2).

Таким образом, средство, представляющее собой этиловый эфир (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина Е₁, обладает более выраженной утеротонической активностью, чем мизопростол, в 2 раза менее токсичный, чем он, и не вызывает побочного диарогенного действия.

Литература

1. Иванова Н.А., Шайнурова A.M., Мифтахов М.С. Простаноиды. LXIX. Синтез этилового эфира (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина Е₁. // Хим.-фарм. Журнал. - 1998. - №. 6. - С.39-40.

2. Сапожникова Т.А., Зарудий Ф.С., Карачурина Л.Т., Макара Н.С., Хисамутдинова С.Ю., Иванова Н.А., Шайнурова A.M., Мифтахов М.С. Фармакологические свойства 11-дезоксимизопростола. // Эксперим. и клинич. фармакология. - 2003. - Т. 66. - №1. - С.34-36.

3. Иванова Н.А., Сапожникова Т.А.; Зарудий Ф.С; Басченко Н.Ж.; Макара Н.С.; Хисамутдинова Р.Ю.; Габдрахманова С.Ф.; Назаров В.С. Гепатопротекторная активность 2-дезметоксикарбонил-2-этоксикарбонил-11-дезоксимизопростола. // Эксперим. и клинич. фармакология. - 2007. - Т. 70. - №4. - С.30-31.

4. Сапожникова Т.А.; Зарудий Ф.С; Басченко Н.Ж.; Габдрахманова С.Ф.; Макара Н.С.; Хисамутдинова Р.Ю.; Назаров В.С. Желчегонная активность 2-дезметоксикарбонил-2-этоксикарбонил-11-дезоксимизопростола на модели гепатита, вызванного ССl. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2008. - Т. 145. - №2. - С.183-184.

5. Абрамченко В.В. Простагландины и антигестагены в акушерстве и гинекологии. - Петрозаводск: ИнтелТек. - 2003. - 208 с.

6. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Новая волна. - 2005. - 535 с.

7. Collins P.W., Stevan W.D. Synthesis of therapeutically useful prostaglandin and prostacyclin analogs. // Chem. Rev. - 1993. - V.93. - P.1533-1564.

8. Абрамченко B.B., Абрамян P.A., Абрамян Л.Р. Индукция родов и их регуляция простагландинами. СПб.: ЭЛБИ-СПб. - 2005. - 288 с.

9. Георгиевский В.И. Практическое руководство по физиологии сельскохозяйственных животных. М.: Высшая школа - 1976. - С.271-273.

10. Беляев О.А., Федин А.Н. Оценка действия препаратов микробных ферментов на моторику тонкой кишки крыс и собак // Эксп. и клин. фарм. - 1998. - Т.61. - №5. - С.24-26.

11. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., Медгиз. - 1963. - 152 с.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к средству, представляющему собой этиловый эфир (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина E₁ формулы (I), проявляющему утеротоническую активность. Это соединение относится к ряду 11-дезоксипростагландинов и близко по химическому строению с мизопростолом. Будучи химически более стабильным и в 2 раза менее токсичным, оно превосходит мизопростол по утеротонической активности, что, наряду с синтетической доступностью и отсутствием побочных эффектов, делает его исключительно перспективным для внедрения в практику с целью замены мизопростола в гинекологических бинарных препаратах. 2 табл.

Средство, представляющее собой этиловый эфир (±)-11,15-дидезокси-16-метил-16-гидроксипростагландина Е₁ формулы (I)

проявляющее утеротоническую активность.