СПОСОБ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАЛИЯ АСПАРАГИНАТА В ПРЕПАРАТЕ "АСПАРКАМ" Российский патент 2010 года по МПК G01N21/78 G01N31/16 G01N33/15 

Изобретение относится к области фармации, а именно к способу количественного определения калия аспарагината в препарате «Аспаркам», и может быть использовано в лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств, содержащих калия аспарагинат.

Ближайшими аналогами являются способы определения калия аспарагината: эмиссионная спектрофотометрия и ацидиметрическое титрование в среде протогенного растворителя [ФС 42-1701-97 Таблетки "Аспаркам", ФС 42-1600-91 Калия аспарагинат]. Принцип определения методом эмиссионной спектрофотометрии заключается в следующем: раствор препарата распыляется в виде аэрозоля в пламени горелки; возникает характеристическое излучение атомов калия, интенсивность которого измеряют на пламенном фотометре. Ацидиметрическое титрование в среде протогенного растворителя (уксусного ангидрида) в присутствии бензола проводится раствором хлорной кислоты после предварительного ацетилирования аминогруппы; точка эквивалентности определяется потенциометрически, графическим способом. На одно определение затрачивается около двух часов, метод требует использования токсичных реагентов. Оба способа дают плохо воспроизводимые результаты.

Целью настоящего изобретения является разработка более простого, экономичного, чувствительного и точного способа определения калия аспарагината в препарате «Аспаркам». Поставленная цель достигается использованием спектрофотометрической методики. Сначала сумму калия аспарагината и магния аспарагината определяют, измеряя оптическую плотность окрашенного продукта реакции аспарагинат-ионов с нингидрином при длине волны 568 нм, используя при этом в качестве стандартного образца только калия аспарагинат; количество магния аспарагината определяют комплексонометрическим титрованием [3]. При расчетах содержания калия аспарагината в препарате «Аспаркам» вычитают содержание в нем магния аспарагината.

Для решения поставленной цели были решены следующие задачи:

сняты спектры поглощения продуктов реакции кислоты аспарагиновой, калия аспарагината и магния аспарагината с нингидрином, выбрана аналитическая длина волны;

установлены оптимальные условия проведения реакции кислоты аспарагиновой с нингидрином;

исследовано влияние ионов магния на поглощение продукта реакции кислоты аспарагиновой с нингидрином;

проверено соблюдение основного закона светопоглощения продуктов реакции кислоты аспарагиновой, калия аспарагината и магния аспарагината с нингидрином;

разработаны методики определения кислоты аспарагиновой, калия аспарагината и магния аспарагината спектрофотометрическим методом на основе реакции с нингидрином.

Теоретический расчет отдельных компонентов в калия и магния аспарагинате показал, что количество аспарагинат-иона в них практически одинаково (73,3%). Следовательно, их продукты реакции с нингидрином должны иметь равную или очень близкую оптическую плотность (табл.1). Величины удельного и молярного показателей поглощения свидетельствуют о высокой чувствительности методики (табл.2).

Пример 1. Определение содержания калия аспарагината в смеси с магния аспарагинатом (соотношение 1:1, модельная смесь).

0,1750 г калия аспарагината и 0,1750 г магния аспарагината (точные навески) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл воды, нагретой до температуры 50-60°С, перемешивают содержимое колбы в течение 5 мин, охлаждают до 20°С, доводят объем колбы водой до метки и перемешивают (раствор А). 5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем колбы водой до метки и перемешивают (раствор Б). 2 мл раствора Б помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 4 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,4, 2 мл 1% раствора нингидрина в спирте этиловом 95%, 2 мл 0,05% водного раствора кислоты аскорбиновой, нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин, быстро охлаждают до 20°С, доводят объем колбы водой до метки и перемешивают. Параллельно проводят опыт с 2 мл 0,0175% раствора рабочего стандартного образца (РСО) калия аспарагината (магния аспарагината) и контролем (2 мл воды). Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют на фоне контроля на спектрофотометре при 568 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Содержание калия аспарагината в смеси в процентах (X) вычисляют по формуле:

,

где D₁ - оптическая плотность продукта реакции смеси калия аспарагината и магния аспарагината;

D₂ - оптическая плотность, соответствующая поглощению продукта реакции магния аспарагината. Рассчитывают по формуле:

D_o(K) - оптическая плотность продукта реакции калия аспарагината (РСО);

D_o(Mg) - оптическая плотность продукта реакции магния аспарагината (РСО);

a_o(K) - навеска РСО калия аспарагината, г;

a_o(Mg) - навеска РСО магния аспарагината, г;

a₁ - суммарная навеска смеси калия и магния аспарагината (0,3500 г);

У - содержание магния аспарагината в смеси (50%).

Анализируя данные табл.3, можно сделать вывод, что поглощение продуктов реакции калия аспарагината и магния аспарагината практически одинаково, поэтому можно ограничиться измерением оптической плотности только продукта реакции раствора РСО калия аспарагината. Тогда формула расчета упрощается:

Пример 2. Определение содержания калия аспарагината в таблетках "Аспаркам" состава:

калия аспарагината (C₄H₆KNO₄*1/2H₂O) 0,175 г,

магния аспарагината (C₈H₁₂MgN₂O₈*4H₂O) 0,175 г,

вспомогательных веществ до получения таблетки массой 0,5 г.

Точную навеску порошка растертых таблеток в пределах 0,055-0,070 г помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл воды, нагретой до температуры 50-60°С, перемешивают содержимое колбы в течение 5 мин, охлаждают до 20°С, доводят объем колбы водой до метки и перемешивают. Содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента», отбрасывая первые 10-15 мл фильтрата. 2 мл фильтрата помешают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 4 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,4, 2 мл 1% раствора нингидрина в спирте этиловом 95%, 2 мл 0,05% водного раствора кислоты аскорбиновой, нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин, быстро охлаждают до 20°С, доводят объем колбы водой до метки и перемешивают. Параллельно проводят опыт с 2 мл раствора рабочего стандартного образца (РСО) калия аспарагината (0,045 г в 250 мл воды) и контролем (2 мл воды). Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют на фоне контроля на спектрофотометре при 568 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Содержание магния аспарагината в таблетках определяют комплексонометрическим методом (методика ФС 42-1598-98).

Содержание калия аспарагината в одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:

,

где D₁ - оптическая плотность испытуемого раствора (продукта реакции смеси калия аспарагината и магния аспарагината);

D_o - оптическая плотность продукта реакции калия аспарагината (РСО);

а_о - навеска РСО калия аспарагината, г;

a₁ - навеска порошка растертых таблеток, г;

Р - средняя масса одной таблетки, г;

У - содержание магния аспарагината в одной таблетке, определенное комплексонометрическим методом, г.

Результаты количественного определения калия аспарагината в модельной смеси таблеток «Аспаркам» (в одной таблетке) приведены в таблице 4, в различных сериях таблеток «Аспаркам» - в таблице 5.

Сравнительная характеристика предлагаемого способа с известным (ацидиметрическое титрование в среде протогенного растворителя) представлена в таблице 6.

Таблица 1 Содержание отдельных компонентов в калия и магния аспарагинатах Название вещества и его формула М.м. Теоретически рассчитанное содержание, % Определено, % Аспарагинат-иона Mg²⁺ (K⁺) H₂O Аспарагинат-иона Магния аспарагинат, гидрат (C₈H₁₂MgN₂O₈*4H₂O) 360,59 73,269 6,742 19,989 73,50±0,85 Калия аспарагинат, гидрат (C₄H₆KNO₄*1/2H₂O) 180,21 73,303 21,697 5,000 73,54±0,97

Таблица 2 Пределы обнаружения калия аспарагината и магния аспарагината спектрофотометрическим методом по реакции с нингидрином Вещество Показатели поглощения Предел обнаружения Концентрация вещества в фотометрируемом растворе, мкг/мл E^1% 1 см ε мкг/мл мкмоль/л Магния аспарагинат 1200 43300 0,208 0,577 0,875-7,000 (r=0,999) Калия аспарагинат 1200 21600 0,208 1,16 0,875-7,000 (r=1,000)

Таблица 4 Результаты определения калия аспарагината в модельной смеси таблеток «Аспаркам» Навеска модельной смеси (а₁), г D₁ D_o (a_o) У, г Х, г Метрологические данные [4] 0,0557 0,370 0,430 0,178 0,168 0,0607 0,408 0,172 S=0,00303 0,0625 0,418 0,170 0,0663 0,435 (0,0448) 0,164 0,0688 0,460 0,170

Таблица 5 Результаты определения калия аспарагината в различных сериях таблеток «Аспаркам» Серия Требование ФС 42-1701-97 Определено Магния аспарагината, г
(при n=5) Калия аспарагината, г
(при n=5) 1 Магния аспарагината 0,168-0,184 г 0,180 0,183 2 0,182 0,184 3 Калия аспарагината 0,168-0,192 г 0,183 0,183

Таблица 6 Сравнительная характеристика предлагаемого способа с известным способом титрования в среде протогенного растворителя Способ Навеска порошка растертых таблеток, г Время анализа, мин Применяемые токсичные реагенты Метрологическая характеристика (при n=5) Титрование в среде протогенного растворителя 2,5 120 Ангидрид
уксусный - 10 мл; бензол -10 мл S=0,00572 Предлагаемый 0,055-0,070 80 Нет S=0,00303

Источники информации

1. ФС 42-1701-97 Таблетки "Аспаркам".

2. ФС 42-1600-91 Калия аспарагинат.

3. ФС 42-1598-98 Магния аспарагинат.

4. Государственная фармакопея СССР: вып.1. Общие методы анализа. / МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1987.

Изобретение относится к области фармации, а именно к способу количественного определения калия аспарагината в препарате «Аспаркам», и может быть использовано в лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств, содержащих калия аспарагинат. Сущность изобретения: сначала сумму калия аспарагината и магния аспарагината определяют спектрофотометрическим методом, измеряя оптическую плотность окрашенного продукта реакции аспарагинат-ионов с нингидрином при длине волны 568 нм; количество магния аспарагината определяют комплексонометрическим титрованием. При расчетах содержания калия аспарагината в препарате «Аспаркам» вычитают содержание в нем магния аспарагината. Способ дает точные результаты, чувствительный, простой в исполнении, экономичный, не требует использования токсичных реагентов. 6 табл.

Способ количественного определения калия аспарагината в препарате «Аспаркам», отличающийся тем, что содержание калия аспарагината в препарате «Аспаркам» рассчитывают вычитанием содержания магния аспарагината, определенного комплексонометрическим титрованием, из суммы калия и магния аспарагинатов, содержание которых определяют спектрофотометрическим методом, измеряя оптическую плотность окрашенного продукта реакции аспарагинат-ионов с нингидрином при длине волны 568 нм, используя при этом в качестве стандартного образца только калия аспарагинат.