СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕНДАЗОЛА Российский патент 2014 года по МПК G01N33/15 G01N21/33 

Предлагаемое изобретение относится к области медицины и может быть использовано в Центрах контроля качества и сертификации лекарственных средств для стандартизации и контроля качества лекарственных средств.

Действующая система контроля качества лекарственных средств требует от фармацевтической науки постоянного повышения эффективности имеющихся методов анализа.

Среди современных методов фармацевтического анализа важное место занимают оптические методы контроля, которые широко применяются как для целей количественного определения, так и для контроля чистоты и идентификации лекарственных средств.

Известны различные способы определения бендазола, применяющегося в медицинской практики как спазмолитическое, гипотензивное и иммуномодулирующее средство.

Известен способ ацидиметрического количественного определения бендазола (дибазола) в субстанции, заключающийся в приготовлении раствора дибазола в ледяной уксусной кислоте, прибавлением раствора ртути окисной ацетата с последующим титрованием 0,1 М раствором кислоты хлорной с использованием в качестве индикатора кристаллического фиолетового (ФС 42-1548-97 «Дибазол», С 3). Рекомендованный нормативной документацией титриметрический метод количественного определения дибазола высокотоксичен, малочувствителен, трудоемок.

Наиболее близким и принятым нами за прототип является способ определения бендазола путем приготовления растворов испытуемого вещества и раствора рабочего стандартного образца (РСО) определяемого вещества с использованием в качестве растворителя 0,01М раствора кислоты хлористоводородной, с последующим их спектрофотометрированием при длинах волн 267, 270, 273, 276, 279 нм и расчетом результатов по формуле (Вергейчик и др. «Количественное определение дибазола в лекарственных формах методом производной спектрофотометрии» // Фармация, М., Медицина, 1988, №5, С.41-43). В этой работе предложен спектрофотометрический метод определения бендазола с использованием производной спектрофотометрии, растворитель - 0,01М раствор кислоты хлористоводородной. Данный метод ведет как к повышению затрат времени, так и увеличению ошибки количественного определения.

Использование спектрофотометрического метода для анализа субстанции бендазола затруднено из-за отсутствия государственного стандартного образца на данный препарат. Выпуск такого стандартного образца является дорогостоящим, так как он находит применение только в фармацевтическом анализе. Поэтому способ определения с использованием государственных стандартных образцов будет малодоступным для многих лабораторий.

В предлагаемом способе авторы предложили использовать в качестве растворителя 0,1М раствор кислоты хлористоводородной. Оптимальный растворитель обеспечивает стабилизацию испытуемого раствора, что повышает воспроизводимость результатов определения и уменьшает погрешность анализа. Применение в качестве растворителя 0,1М раствора кислоты хлористоводородной повышает стабильность испытуемого раствора и увеличивает чувствительность анализа в 2 раза, которая составляет 0,0001 г/мл. Использование оптимальных значений оптической плотности и применение в качестве растворителя 0,1М раствора кислоты хлористоводородной уменьшает погрешность анализа, что подтверждает сравнение погрешностей определения Е=0,27% для предложенного способа и Е=2,3% для близкого аналога, следовательно, предложенный способ позволяет уменьшить погрешность анализа по сравнению с прототипом. Кроме этого, повышается воспроизводимость результатов определения, что подтверждает сравнение дисперсий двух выборочных совокупностей при помощи F-распределения при f₁=f₂=10, р=99% для предложенного способа и близкого аналога. Установлено F_экс=10,72 при F_табл=8,47, следовательно, предложенный способ обладает более высокой воспроизводимостью.

Применение кислоты бензойной и фенолфталеина в качестве стандартного образца в предлагаемом способе приводит к уменьшению погрешности и стоимости анализа. Важную роль в анализе по внешним образцам сравнения играет конкретное значение коэффициента пересчета, позволяющее сделать пересчет на исследуемое вещество. Точность определения коэффициента пересчета существенно влияет на достижение технического результата. Проведенные авторами экспериментальные исследования доказали, что значение коэффициента пересчета 0,181 при определении по кислоте бензойной и 0,293 при определении по фенолфталеину приводит к получению воспроизводимых и точных результатов, что обусловливает ошибку определения 0,27%. Значение коэффициента пересчета обязательно указывается в расчетной формуле. Коэффициент пересчета находят из выражения:

$${К}_{пер}=\frac{{Е}_{вос}}{{Е}_{ос}}$$ ,

где Е_вос - удельный показатель поглощения образца сравнения кислоты бензойной или фенолфталеина при аналитической длине волны;

Е_ос - удельный показатель поглощения рабочего образца сравнения определяемого (исследуемого) вещества при аналитической длине волны (определяется при разработке методики).

Предложенный авторами способ позволяет проводить анализ как в таблетках, так и в субстанции, т.е. является унифицированным.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение воспроизводимости результатов определения, уменьшение погрешности анализа, унифицирование методик анализа, снижение стоимости анализа.

Технический результат достигается путем приготовления раствора определяемого вещества и стандартного образца сравнения с последующим их спектрофотометрированием и расчетом результатов по формуле.

Новым в достижении технического результата является то, что в качестве растворителя для приготовления определяемого раствора используют 0,1М раствор кислоты хлористоводородной, а в качестве стандартного образца сравнения используют кислоту бензойную или фенолфталеин, измеряют оптическую плотность растворов при аналитической длине волны 270 нм, в формулу расчета результатов вводят значение коэффициента пересчета 0,181 при определении по кислоте бензойной и 0,293 при определении по фенолфталеину.

Изучаемое вещество изменяет спектр поглощения в зависимости от рН среды. Исходя из экспериментальных данных и свойств бендазола, авторы доказали, что оптимальным растворителем для спектрофотометрического определения является 0,1М раствор кислоты хлористоводородной. Оптимальный растворитель обеспечивает стабилизацию испытуемого раствора, что повышает воспроизводимость результатов определения и уменьшает погрешность анализа.

Спектр поглощения бендазола в 0,1М растворе кислоты хлористоводородной (рН 1,1) характеризуется двумя максимумами поглощения при длинах волн 270±1 нм и 275±1 нм и минимумом поглощения при 245±1 нм. Дальнейшее увеличение рН до 12,5 приводит к батохромному сдвигу максимумов поглощения на 4 нм с одновременным гипсохромным смещением, а также появлению еще одного максимума при длине волны 244±1 нм. Хранение растворов бендазола в течение трех суток показало, что в течение этого времени существенных изменений с растворами не происходит. Наиболее стабильны растворы бендазола при рН 1,1 - 3,0, поэтому в качестве оптимального растворителя для спектрофотометрического определения бендазола можно предложить 0,1М раствор кислоты хлористоводородной (рН 1,1).

В качестве аналитической для количественного определения бендазола выбрана длина волны 270 нм. При данной длине волны наблюдается минимальная погрешность измерения величины оптической плотности, так как эта длина волны является максимумом поглощения определяемого вещества в 0,1М растворе кислоты хлористоводородной.

Исходя из установленной авторами зависимости, согласно которой в качестве образцов сравнения могут применяться вещества, для которых интервал между аналитической длиной волны и максимумом (или минимумом) поглощения этих образцов сравнения не превышает половины полуширины их полосы поглощения, в качестве образца сравнения в предлагаемом способе авторы используют кислоту бензойную и фенолфталеин, так как оптимальная область поглощения, в которой их можно использовать, составляет 266-280 нм и 268-282 нм соответственно. Кислота бензойная и фенолфталеин выпускаются серийно промышленностью категории хч, на них имеется ГОСТы (ГОСТ 10521-78 и 5850-72), регламентирующие их качество. Раствор кислоты бензойной и фенолфталеина в 0,1М растворе кислоты хлористоводородной устойчивы при хранении длительное время. Использование кислоты бензойной и фенолфталеина в предлагаемом способе приводит к уменьшению погрешности анализа.

Сопоставительный анализ с прототипом показывает, что заявляемое техническое решение отличается тем, что в качестве растворителя для приготовления испытуемого раствора используют 0,1М раствор хлористоводородной кислоты, а в качестве образца сравнения используют кислоту бензойную или фенолфталеин, спектрофотометрирование проводят при аналитической длине волны 270 нм и вводят в формулу расчета результатов значение коэффициента пересчета 0,181 при определении по кислоте бензойной и 0,293 при определении по фенолфталеину, что соответствует критерию изобретения «новизна».

Новая совокупность признаков обеспечивает повышение воспроизводимости результатов определения, уменьшение погрешности анализа, позволяет снизить стоимость и уменьшить время анализа, унифицировать методики анализа, что соответствует критерию «промышленная применимость».

При анализе известных решений было выявлено, что в них отсутствуют сведения о влиянии отличительных признаков на достижение поставленного технического решения, следовательно, изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».

Способ осуществляют следующим образом. Готовят раствор образца сравнения кислоты бензойной или фенолфталеина для анализа бендазола. Для этого точную массу кислоты бензойной или фенолфталеина 0,1000 г или 0,0700 г соответственно помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 20 мл спирта этилового, доводят объем раствора спиртом до метки и перемешивают. 2 мл раствора кислоты бензойной или фенолфталеина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора 0,1М раствором хлористоводородной кислоты до метки и перемешивают.

Затем проводят количественное определение бендазола в субстанции. Для этого точную массу бендазола (0,2000 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл спирта этилового, доводят объем раствора этой спиртом до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора 0,1М раствором хлористоводородной кислоты до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора внешнего образца сравнения на спектрофотометре при длине волны 270 нм в кюветах с длиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения применяют 0,1М раствор хлористоводородной кислоты.

Расчет результатов количественного определения бендазола проводят по формуле

$$X\%=\frac{D_{х}\cdot a_{вос}\cdot V_1\cdot V_2\cdot V_3^{/}\cdot {К}_{пер}\cdot 100\cdot 100}{D_{вос}\cdot a_{х}\cdot V_3\cdot V_1^{/}\cdot V_2^{/}\left(100-W\right)},$$

где D_х и D_вос - оптические плотности определяемого вещества и образца сравнения соответственно;

a _х и a _вос - точные навески определяемого вещества и образца сравнения соответственно;

V₁ и V₂ - объемы приготовленного раствора определяемого вещества;

V₃ - объем аликвоты определяемого вещества;

$$V_1^{/}иV_2^{/}$$ - объемы приготовленного раствора образца сравнения;

$$V_3^{/}$$ - объем аликвоты образца сравнения;

100 - коэффициент для пересчета в проценты;

W - влажность, %;

К_пер - 0,181 - значение коэффициента пересчета по кислоте бензойной и 0,293 значение коэффициента пересчета по фенолфталеину в 0,1М растворе хлористоводородной кислоты.

Содержание бендазола должно быть не менее 99,0% в пересчете на сухое вещество.

Предлагаемый способ поясняется следующими примерами.

Пример 1. Готовят растворы определяемого вещества и образца сравнения вышеописанным способом. Измеряют на спектрофотометре оптические плотности приготовленных растворов. Далее ведут расчет результатов по формуле, используя соответствующее значение коэффициента пересчета.

При определении бендазола по кислоте бензойной получили следующие результаты:

Д_х=0,9393; Д_вос=0,6799; а_х=0,0998; а_вос=0,1998; влажность 0,5%; Х=99,97%. Результаты статистически обработаны и представлены следующим образом:

При n=10; $$\overline{X}$$ =99,91; S²=0,1459; S=0,3819; $$S_{\overline{x}}$$ =0,1208; ΔХ=0,2729; Е%=0,273; S_r=0,004.

Данный пример подтверждает, что содержание бендазола соответствует требованиям нормативного документа (ФС 42-1548-97).

При определении бендазола по фенолфталеину получили следующие результаты:

Д_х=0,9208; Д_вос=0,7545; а_х=0,2010; а_вос=0,0701 влажность 0,5%; Х=99,82%. Результаты статистически обработаны и представлены следующим образом:

При n=10; $$\overline{X}$$ =99,90; S²=0,0836; S=0,2891; $$S_{\overline{x}}$$ =0,0914; ΔХ=0,2066; Е%=0,207; S_r=0,003.

Данный пример подтверждает, что содержание бендазола соответствует требованиям нормативного документа (ФС 42-1548-97).

Предлагаемый способ с использованием образцов сравнения кислоты бензойной и фенолфталеина оказался оптимальным для количественного определения бендазола в таблетках по 0,02 г, а также позволяет провести определение однородности дозирования и контроль теста «растворения» таблеток бендазола.

Методика количественного определения в лекарственной форме бендазола отличается от методики количественного определения бендазола в субстанции только приготовлением испытуемого раствора.

Пример 2. Для количественного определения бендазола в таблетках по 0,02 г берут точную массу порошка растертых таблеток 0,25 г и помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл спирта, взбалтывают в течение 5 мин. Доводят объем раствора спиртом до метки и перемешивают. Раствор фильтруют, первые 10-15 мл фильтрата отбрасывают и 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора 0,1М раствором хлористоводородной кислоты до метки и перемешивают.

Содержание бендазола в таблетках по 0,02 г должно быть 0,018-0,022 г, считая на среднюю массу одной таблетки.

При анализе таблеток бендазола по 0,02 г по кислоте бензойной получены результаты:

Д_х=0,7447; Д_вос=0,5528; а_х=0,2573; а_вос=0,1014; P_ср=0,2618; X=0,0201 г. Результаты статистически обработаны и представлены следующим образом:

При n=10; $$\overline{X}$$ =102,76; S²=4,8377; S=2,1995; $$S_{\overline{x}}$$ =0,6955; ΔХ=1,5719; Е%=1,530; S_r=0,021.

Содержание бендазола в лекарственных формах соответствует требованиям нормативного документа.

При анализе таблеток бендазола по 0,02 г по фенолфталеину получены результаты:

Д_х=0,7328; Д_вос=0,7447; а_х=0,2524; а_вос=0,0829; Р_ср=0,2618; X=0,0198 г. Результаты статистически обработаны и представлены следующим образом:

При n=10; $$\overline{X}$$ =95,16; S²=5,0351; S=2,2439; $$S_{\overline{x}}$$ =0,7096; ΔХ=1,6037; Е%=1,685; S_r=0,024.

Содержание бендазола в лекарственных формах соответствует требованиям нормативного документа.

Пример 3. Для определения однородности дозирования таблеток бендазола по 0,02 г одну таблетку помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяют в 20 мл спирта, взбалтывают в течение 5 мин. Доводят объем раствора спиртом до метки и перемешивают. Раствор фильтруют, первые 10-15 мл фильтрата отбрасывают и 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до метки и перемешивают.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 270 нм в кювете с длиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 0,1М раствор хлористоводородной кислоты. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора внешнего образца сравнения кислоты бензойной или фенолфталеина.

Допустимые нормы отклонения от номинала не более 15% для десяти проанализированных таблеток.

При анализе десяти таблеток бендазола по 0,02 г получили максимальное отклонение от номинального содержания +5,94 и -9,35%.

Пример 4. Для контроля теста «растворения» таблеток бендазола за основу брали унифицированную методику (ГФХI изд, С.159-160). В качестве среды растворения использовали 0,1М раствор хлористоводородной кислоты, время растворения 30 минут, объем среды растворения 1000 мл, скорость вращения 100 об/мин, температура (37±1)°C.

При анализе таблеток бендазола по 0,02 г в корзинку помещают одну таблетку, через 30 минут вращения отбирают пробу. Раствор фильтруют. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 270 нм в кюветах с длиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения применяют 0,1М раствор хлористоводородной кислоты. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора образца сравнения кислоты бензойной или фенолфталеина.

Согласно (ГФXI изд. С.159-160) в среду растворения должно перейти не менее 75% действующего вещества от содержания в лекарственной форме в течение 30 мин.

При анализе таблеток бендазола по 0,02 г высвобождение вещества составило: 99%, 98%, 100%, 99%, 98%, 100%, 99%, 98%, 99%, 99% для десяти таблеток соответственно.

Предлагаемый способ определения бендазола с использованием образца сравнения кислоты бензойной или фенолфталеина позволяет повысить воспроизводимость анализа, уменьшить погрешность анализа, снизить его стоимость, исключить использование токсичных реактивов и унифицировать методики анализа.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в контрольно-аналитических лабораториях для стандартизации и контроля качества лекарственных средств. Готовят растворы определяемого вещества (бендазола) и образца сравнения. В качестве растворителя для приготовления испытуемых растворов используют 0,1М раствор хлористоводородной кислоты. В качестве образца сравнения используют кислоту бензойную или фенолфталеин. Измеряют оптическую плотность раствора определяемого вещества (бендазола) и образца сравнения на спектрофотометре при аналитической длине волны 270 нм. Расчет результатов проводят по формуле, вводя в нее коэффициент пересчета 0,181 при определении по кислоте бензойной и 0,293 при определении по фенолфталеину. Способ позволяет повысить воспроизводимость результатов определения, уменьшить стоимость, трудоемкость, погрешность анализа, унифицировать методику анализа. 4 пр.

Способ количественного определения бендазола путем спектрофотометрирования определяемого вещества и стандартного образца сравнения, отличающийся тем, что в качестве растворителя для приготовления определяемого раствора используют 0,1М раствор хлористоводородной кислоты, спектрофотометрирование проводят при аналитической длине волны 270 нм, и качестве образца сравнения используют кислоту бензойную или фенолфталеин и расчет результатов проводят по формуле:
,
где D_х и D_вос - оптические плотности определяемого вещества и образца сравнения соответственно;
а _х и а _вос - точные навески определяемого вещества и образца сравнения соответственно;
V₁ и V₂ - объемы приготовленного раствора определяемого вещества;
V₃ - объем аликвоты определяемого вещества;
и - объемы приготовленного раствора образца сравнения;
- объем аликвоты образца сравнения;
100 - коэффициент для пересчета в проценты;
W - влажность, %;
К_пер. - 0,181 - значение коэффициента пересчета по кислоте бензойной и 0,293 значение коэффициента пересчета по фенолфталеину в 0,1М растворе хлористоводородной кислоты.