СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ ДЛЯ ЦЫПЛЯТ, ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ Российский патент 2010 года по МПК A23K1/08 A23K1/16 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к кормопроизводству.

Известен препарат на основе травы чистотела, например Гепатофальк, представляющий собой композицию из 3-х лекарственных трав - чертополоха, чистотела и японского турмерика. Применяют его с целью уменьшения интоксикации и защиты клеток печени от повреждающего действия вирусов, является гепатопротектором (htt://gepatit.allipetsk.ru www.refstar.ru Просмотр темы-Чистотел; www.childfond.ru/gepatit14.html).

Известен препарат Бластофаг, который получают из сока чистотела, подвергнутого микробной ферментации. Способствует биологической стимуляции защитных сил (иммуномодуляция), эффективен при доброкачественных образованиях вирусной этиологии (бородавки и др.), применяется при лечении рака шейки матки (Онкология №1 Т.5 2003; Гинекология. Том 1/N 2/1999, Иммунология злокачественных новообразований яичников аутологотичными препаратами в послеоперационном периоде. О.В.Макаров, И.Г.Сидорович, В.И.Новиков и др. Кафедра акушерства и гинекологии РГМУ, Москва, Федеральный центр иммунологии МЗ РФ). Повышает естественную резистентность организма, способствует повреждению ингибиторной системы и защитных барьеров опухолевых клеток, восстанавливает Т-клеточный и гуморальный иммунитет (htt://www.immunomed.ru/ll.php Иммуномед. Применение препаратов чистотела. В.Гончар).

Недостатками известных способов приготовления препаратов на основе чистотела являются трудоемкость процесса их приготовления; получение препаратов, обладающих узкой функциональной направленностью.

Наиболее близким является техническое решение (патент RU, №2276984, кл. А61К 33/38, 2006 г.), согласно которому используется сброженный сок чистотела, растворенный в водном растворе ионизированного серебра. Способ получения сброженного сока чистотела (см. описание патента RU, №2276984, кл. А61К 33/38, 2006 г.) включает следующие операции: траву чистотела выдерживают при пониженной температуре в темном месте, измельчают, отцеживают сок, затем его сбраживают в течение 1 недели при комнатной температуре. После этого надосадочную жидкость отделяют и стабилизируют 96% этиловым спиртом.

Технический результат заключается в обеспечении активного состояния молочнокислых бактерий в среде пребиотика, путем регулирования рН до уровня 3,5-4,0; стабильности свойств и длительного срока хранения биологической добавки; получение добавки расширенного спектра действия с заданными свойствами синбиотика.

Технический результат достигается тем, что в известном способе, включающем использование сброженного чистотела, согласно изобретению предварительно нарезанную траву чистотела и сахар добавляют в молочную сыворотку при соотношении компонентов, мас.%: нарезанная трава чистотела 5-7, сахар 35-45, молочная сыворотка - остальное; и сбраживают в течение 2-3 недель, доводя рН до 3,5-4,0; затем добавляют на 1 л сброженной травы чистотела аминокислоты в следующих количествах: валин 1,08 г; изолейцин 0,77 г; лейцин 1,77 г.

Проведение процесса брожения в течение 2-3 недель позволяет более качественно осуществить брожение и получить качественный промежуточный сброженный продукт.

Ведение процесса брожения в среде молочной сыворотки дает возможность придать целевому продукту свойства пребиотика, что позволит расширить спектр действия получаемого препарата.

Ведение процесса брожения в кислой среде и доводка рН среды до оптимальной 3,5-4,0 способствует не только сохранности молочнокислых бактерий сыворотки, но и позволяет им оставаться в активном состоянии. Тем самым обеспечивается стабильность свойств и длительный срок хранения производимой биологически активной добавки.

Введение на завершающем этапе в сброженную траву чистотела аминокислот - валина, изолейцина и лейцина дает возможность получить качественный целевой продукт, а биологически активной добавке проявить свойства метаболизации, что при использовании для выращивания молодняка позволит повысить сохранность и живую массу поголовья. Целевой продукт на основе молочной сыворотки и нарезанной травы чистотела и незаменимых аминокислот по своему биологическому действию относится к синбиотикам.

БАД «Аминочистол» содержит флавоноиды (рутин, кемиферол и кверцетин), сапонины, дубильные вещества, витамины А, С, органические кислоты (лимонную, яблочную, холедоновую, аскорбиновую, янтарную), жирные масла, микроэлементы (цинк, молибден, селен, медь, бром, барий, серебро), алкалоиды (хелидонин, хелеритрин, сангвинарин, протопин, аллокриптопин, спартеин, берберин, коптизин, хелирубин), а также содержит аминокислоты (валин, изолейцин, лейцин); содержит ферменты - липазу, протеазу, пероксидазу; молочнокислые бактерии.

По данным патентной и научно-технической литературы не обнаружено аналогичное заявляемому предложение, что позволяет судить об его изобретательском уровне.

Способ приготовления БАД «Аминочистол» осуществляют следующим образом.

Предварительно нарезанную траву чистотела и сахар добавляют в молочную сыворотку при соотношении, мас.%: нарезанная трава чистотела 5-7, сахар 35-45 и молочная сыворотка - остальное. Полученную смесь сбраживают в течение 2-3 недель, доводя рН до 3,5-4,0. Затем добавляют на 1 л сброженной травы чистотела аминокислоты в следующих количествах: валин 1,08 г; изолейцин 0,77 г; лейцин 1,77 г.

Пример конкретного осуществления способа приготовления БАД «Аминочистол».

На 3 л молочной сыворотки берут 20 г нарезанной травы чистотела, помещенной в мешочек из марли, опускают на дно. Добавляют 120 г сахара. Стеклянную банку или эмалированную посуду или бочку накрывают марлей или крышкой (периодически открывают, чтобы выходили газы). Хранят в затемненном месте. Брожение происходит в течение 2-3 недель. Если произошло перегревание, ведущее к гибели молочнокислых бактерий, следует добавить 1 чайную ложку сметаны. После того как закончилось брожение, добавляют аминокислоты: валин 1,08 г/л, изолейцин 0,77 г/л, лейцин 1,77 г/л. Упаковывают препарат в полиэтиленовые канистры различной емкости. Срок годности 3 года.

Молочная сыворотка, входящая в состав препарата, содержит молочнокислые бактерии, которые в период ферментативного брожения с чистотелом закисляют рН до 3,5-4,0. Молочная сыворотка обеспечивает оптимальную среду для развития собственной нормальной микрофлоры, является пребиотической основой препарата. Кроме того она содержит лактозу, сывороточные белки, которые являются питательной основой для микро- и макроорганизма; также витамины А, С, Е, В; никотиновую кислоту, биотин; микроэлементы - кальций, магний; молочный жир; пробиотические культуры молочнокислых бактерий. Молочная сыворотка нормализует работу пищеварительной системы; успокаивающе действует на нервную систему (в период стрессов); от авитаминозов.

Трава чистотела в том количестве, в котором она включена в добавку, повышает функциональную способность печени, предупреждает развитие патологических изменений в гепатоцитах; тормозит процессы свободно-радикального окисления липидов и способствует усиленному обезвреживанию вредных продуктов обмена; имеет выраженное противомикробное действие; противогрибковую активность; обладает иммуностимулирующей активностью и противоопухолевой; стимулирует секрецию желчи и работу поджелудочной железы; имеет обезболивающее действие; содержит витамины А, С. Однако, если взять траву чистотела меньше, чем предложено, то не будет достигаться требуемое ее воздействие, а если взять больше, может наступить отравление организма. Что крайне нежелательно.

Сахар (глюкоза) добавляется в БАД «Аминочистол» для процессов брожения, питания микроорганизмов и придает вкусовые качества.

Незаменимые аминокислоты - валин, лейцин, изолейцин являются основными для наращивания массы тела, они метаболизируются в мышечную ткань и имеют следующие особенности: валин - участвует в образовании и запасании гликогена; стимулирует работу нервной системы; участвует в синтезе пантотеновой кислоты.

Изолейцин: участвует в образовании гликогена; участвует в образовании гемоглобина; расщепляет холестерин; участвует в метаболизме сахара.

Лейцин: способствует заживлению поврежденной кожи и костной ткани; снижает повышенные уровни сахара в крови; способствует расщеплению холестерина; участвует в метаболизации сахара.

Оптимальное количество аминокислот (валин, лейцин, изолейцин), которые используются для приготовления БАД «Аминочистол», обеспечивает все те свойства, которые аминокислоты проявляют в отдельности. Если количество их будет меньше предложенного, то их свойства будут проявляться недостаточно, а при передозировке начинают проявляться побочные явления.

Эффективность использования биологически активной добавки подтверждается результатами, полученными при проведении экспериментальных опытов.

Опыт проводили на птицефабрике «Родина» Кореновского района Краснодарского края на 600 цыплятах-бройлерах, кросса «Росс-308». Было сформировано 3 группы по 200 голов: 1-я группа (контрольная) с водой получала антибактериальный препарат «Колмик Е»; 2-я группа (опытная) с кормом получала молочную сыворотку; 3-я группа (опытная) получала препарат Аминочистол вместо воды или с небольшим количеством воды. За время опыта проведены исследования в 20-дневном возрасте бактериологические, иммунологические.

По результатам исследований было установлено, что применение БАД «Аминочистол» приводит к увеличению в толстом кишечнике содержания общего количества микроорганизмов, в том числе молочнокислых, бифидобактерий, целлюлозолитических, резкому уменьшению стрептококков, бактерий группы кишечной палочки(особенно патогенной по сравнению со 2-й и 1-й группами). (Таблица 1).

Таблица 1 Микрофлора слепых отростков цыплят-бройлеров в 20-дневном возрасте Микроорганизмы 1 группа 2 группа 3 группа Общее количество микроорганизмов, млрд/г 40,75±4,41 56,07±9,85 67,13±3,31 Молочнокислые, млн/г 20,13±2,35 40,0±10,72^* 55,70±7,81^* Лактатферментирующие, млн/г 0,0013±0,0002 0,014±0,007^* 0,019±0,002^* Бифидобактерии, млн/г 25,0±2,16 30,12±3,45 45,25±5,13^* Бактерии группы кишечной палочки, млн/г 20,5±0,16 27,15±9,12 19,3±0,96 Стрептококки, млн/г 30,5±5,13 29,15±2,43 14,0±1,37^* Целлюлозолитические, титр 1:10⁵ 1:10⁴ 1:10⁶ * - разница с контролем статистически достоверна

Исследование иммунологических показателей указывает на достоверное увеличение во 2-й и 3-й группах эритроцитов, гемоглобина, лизоцимной активности, фагоцитарной активности лейкоцитов, увеличение содержания В-клеток, что свидетельствует о высоком уровне естественной резистентности птицы, особенно в опытной 3-й группе (таблица 2).

Таблица 2 Иммунологические показатели крови цыплят в 20 дней Показатели 1 группа 2 группа 3 группа Эритроциты, 10¹²/л 1,33±0,05 1,85±0,06 1,90±0,02 Гемоглобин, г/л 65,0±0,13 76,0±0,05 78,0±0,01 Лейкоциты, 10⁹/л 29,18±0,42 32,15±0,18 35,17±0,23^* Лизоцим, мкг % 197,0±0,06 230,3±0,08 237,5±0,05 Бактерицидная активность, % 48,12±0,6 33,16±0,2 20,89±7,3^*** Фагоцитарная способность лейкоцитов: ФА, % 21,0±0,2 25,0±0,4 27,0±0,06 Тл, % 28,15±0,28 25,7±0,16 22,3±0,18 Тл абс., 10⁹/л 5,19±0,06 6,20±0,04 6,87±0,05 Вл, % 14,42±0,23 18,8±0,22 20,2±0,31^* Вл, 10⁹/л 2,4±0,17 4,8±0,06^* 5,9±0,04^* Общий белок, г/л 22,9±0,5 27,9±0,6 29,0±1,3 Альбумины, % 61,8±0,2 65,90±0,1 67,5±0,3 Y-глобулины, % 16,13±0,1 15,20±0,l 14,11±0,1*

Птица содержалась до 35-дневного возраста. Сохранность в 1-й группе составила 97%; во 2-й группе 98%; в 3-й группе - 99%. Живая масса цыплят в 20 дней в 1-й группе составила 840,95 г; во 2-й группе - 936,15 г; в 3-й группе - 957,88 г (таблица 3).

Таблица 3 Расход корма, живая масса цыплят в 20 дней Группа Расход корма, кг Масса цыплят, г 1 1,220 840,95 2 1,190 936,15 3 1,052 957,88

Таким образом, примененный нами препарат Аминочистол увеличивает сохранность поголовья по сравнению с 1-й и 2-й группой на 2% и 1% соответственно; увеличивает живую массу птицы на 116,93 г и на 21,73 г соответственно; повышает иммунитет, снижает потребление корма на 30 г и 168 г (в 3-й группе).

На телятах и поросятах опыт проводили в учхозе «Краснодарское» г.Краснодара. Были созданы по две группы телят и поросят: 1-я группа - контрольная (интактные); 2-я группа - опытная с препаратом Аминочистол, который задают телятам перорально (вместо воды) 2 раза в сутки в суточной дозе 2 мл/кг на протяжении 10-15 дней с первого дня жизни перед кормлением. У телят исследовали кровь и фекалии на 20-й день жизни. В группе было по 10 животных физиологически здоровых.

Результаты исследований свидетельствуют о том, что при использовании новорожденными телятами препарата Аминочистол наблюдался активный синтез белка по сравнению с контрольными животными, возрастало содержание общего белка. В первой группе повышались γ-глобулины, что говорит о развивающемся воспалительном процессе. В опытной группе телят увеличивались Т-В-лимфоциты, снижались NK-лимфоциты в 2 раза (таблица 4).

Таблица 4 Иммунологические показатели крови телят Показатели 1 группа 2 группа Гемоглобин, г/л 75,0±1,33 98,0±17,2 Эритроциты, 10¹²/л 5,7±0,20 6,8±0,42 Лейкоциты, 10⁹/л 6,53±0,67 9,12±0,61 Лимфоциты, % 40,12±2,60 52,67±3,18 Глюкоза, моль/л 2,78±0,50 3,35±0,21 Общий кальций, моль/л 2,69±0,16 3,38±0,10 Неорганический фосфор, моль/л 1,45±0,31 1,94±0,64 Общий белок, г/л 69,8±0,58 72,8±6,21 Альбумины, % 49,6±7,3 49,4±3,18 γ-глобулины, % 15,1±1,01 10,1±1,01

В отличие от интактных животных (контрольные), количество эшерихий в кале телят опытной группы снижалось с lg 17,5±0,32 до 8,7±0,18 КОЕ/г, не только общее число эшерихий снижалось, но и их гемолитические формы. Содержание стафилококков и клостридии снижалось. При даче препарата Аминочистол, уровень лактобактерий, бифидобактерий оставался стабильно высоким: lg12,5±0,17 и lg10,8±0,09 КОЕ/г, а в контроле он составлял lg7,7±0,22 и lg9,3±0,47 КОЕ/г. Из 10-ти животных в контрольной группе к 20-у дню заболели эшерихиозом 2 теленка.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что применение препарата Аминочистол у телят способствует повышению иммунитета, препятствует размножению бактерий группы кишечной палочки, стимулирует развитие собственной нормальной микрофлоры.

Телята в опытной группе активно наращивали массу тела, среднесуточный привес составил 600 г, что на 300 г больше, чем в контроле.

Среди поросят отъемышей сформировано было 2 группы по 20 голов, 1-я группа - контрольная; 2-я опытная, получала препарат Аминочистол с 1-х суток в течение 10 дней вместо воды 2 раза в сутки в суточной дозе 2 мл/кг.

Изучение влияния Аминочистола на кишечный микробиоценоз поросят-отъемышей осуществляли в процессе его скармливания в течение 10 дней. Качественный и количественный состав бактериальной популяции оценивали на 10, 14 день после отъема.

Исследования показали, что у поросят, получавших Аминочистол (опытные) в отличие от контрольных, у которых количество эшерихий в кале имело четкую тенденцию к повышению с lg7,0±0,28 КОЕ/г до lg15,5±0,32 КОЕ/г на 10-й день отъема с незначительным снижением к 14-у дню до lg10,8±0,64 КОЕ/г, численность эшерихий воросла только до lg8,4±0,34 КОЕ/г на 3-й день отъема, с последующим закономерным снижением до lg7,4±0,18 КОЕ/г к 14 суткам. В результате действия препарата Аминочистол у поросят опытной группы снижается не только общее число эшерихий, но и их гемолитических форм. Также теряют гемолитическую активность и энтерококки, хотя их содержание в кишечнике подопытных поросят на период исследования достоверно не отличается от поросят контрольной группы.

Содержание стафилококков и клостридий, напротив, у поросят, получавших Аминочистол, на 10, 14 день было достоверно ниже на 18-30,2%, чем у поросят, находившихся на общем рационе. Аминочистол оказывал позитивное влияние на количественный состав симбионтной микрофлоры. Так, у поросят контрольной группы к 10-у дню отъема отмечалось снижение молочнокислых стрептококков до lg6,3±0,18 КОЕ/г, лактобактерий - lg4,7±0,23 КОЕ/г и бифидобактерий - lg7,0±0,40 КОЕ/г, что совпадало с периодом массовых диарей. По мере выздоровления к 14 дню отъема количество лактококков повышалось до 7,9±0,17 KOE/г, лактобактерий - lg7,7±0,20 КОЕ/г и бифидобактерий - lg10,3±0,14 КОЕ/г. У поросят же, получавших Аминочистол, уровень данных бактерий оставался стабильно высоким: молочнокислых стрептококков - lg10,5±0,17, лактобактерий - lg12,6±0,25 КОЕ/г и бифидобактерий - lg11,9±0,3 КОЕ/г.

При этом среднесуточные привесы опытной группы были на 150 г выше, чем в контроле. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что применение поросятам Аминочистола в течение 10 дней после их отъема от матерей препятствует не только чрезмерному размножению в кишечнике эшерихий, но и угнетает проявление их патогенности (выработку гемолизинов). Кроме того, Аминочистол сдерживает рост условно-патогенных бактерий, таких как стафилококки, клостридии и энтерококки, причем у последних также подавляет гемолитическую активность, за счет чистотела, но напротив, стимулирует развитие и размножение собственной симбионтной микрофлоры. У поросят, так же как и у телят с применением Аминочистола снижалась заболеваемость (в контроле она была 96%, а в опыте 100%).

Способ приготовления биологически активной добавки для цыплят, телят и поросят является эффективным, так как обеспечивает активное состояние молочнокислых бактерий в среде пребиотика, путем регулирования рН до уровня 3,5-4,0; обеспечивает стабильность свойств и удлиняет срок хранения биологической добавки; расширяет спектр действия добавки.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к кормопроизводству. Способ приготовления биологически активной добавки для цыплят, телят и поросят включает использование сброженного чистотела. Предварительно нарезанную траву чистотела и сахар добавляют в молочную сыворотку при соотношении компонентов, мас.%: нарезанная трава чистотела 5-7; сахар 35-45; молочная сыворотка - остальное; и сбраживают в течение 2-3 недель, доводя рН до 3,5-4,0. Затем добавляют на 1 л сброженной травы чистотела аминокислоты в следующих количествах: валин 1,08 г; изолейцин 0,77 г; лейцин 1,77 г. Изобретение обеспечивает активное состояние молочнокислых бактерий в среде пробиотика, стабильность свойств продукта и длительный срок его хранения, получение добавки расширенного спектра действия. Использование полученной добавки при выращивании молодняка позволяет повысить сохранность и живую массу поголовья. 4 табл.

Способ приготовления биологически активной добавки для цыплят, телят и поросят, включающий использование сброженного чистотела, отличающийся тем, что предварительно нарезанную траву чистотела и сахар добавляют в молочную сыворотку при соотношении компонентов, мас.%:
нарезанная трава чистотела 5-7 сахар 35-45 молочная сыворотка остальное,