ИНДОЛИН-СУЛЬФОНАМИДНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ Российский патент 2010 года по МПК C07D209/08 A61K31/404 A61P35/00 

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

1. Область техники

Данное изобретение относится к индолин-сульфонамидным соединениям и, более конкретно, к индолин-сульфонамидным соединениям для ингибирования полимеризации тубулина.

2. Уровень техники

Микротрубочковая система эукариотических клеток является важной целью при создании противораковых агентов. Если говорить более конкретно, распространенной целью при создании новых химиотерапевтических агентов является полимеризация/деполимеризация тубулина. Ряд клинически используемых агентов (таких как паклитаксел, эпотилон А, винбластин, комбретастатин А-4 (СА-4), доластатин 10 и колхицины), нацеленные на полимеризацию/деполимеризацию тубулина, обладают противораковыми свойствами благодаря тому, что они вызывают разрушение микротрубочковой структуры клетки и благодаря функции, приводящей в результате к митотическому аресту, а также за счет ингибирования роста эпителия вновь образующейся системы сосудов, что приводит к подавлению кровоснабжения опухолей (см. Jordan и соавт. (1998), Med. Res. Rev.18: 259-296).

Поэтому, ориентируясь на микротрубочковую систему (например, полимеризацию/деполимеризацию тубулина) в качестве цели при создании соединений, может быть разработана новая терапия, используемая для лечения или предотвращения рака или связанных с ним симптомов, а также для лечения заболеваний, связанных с ангиогенезом, таких как сердечно-сосудистые заболевания (например, атеросклероз), хронические воспалительные заболевания (например, ревматоидный артрит или болезнь Крона), диабеты (например, диабетическая ретинопатия), псориаз и ретинальная неоваскуляризация или корнеальная неоваскуляризация (см. Griggs и соавт. (2002), Am. J. Pathol. 160(3): 1097-1103).

В качестве ингибиторов полимеризации тубулина описано множество маленьких синтетических молекул, которые конкурируют с тубулином за связывание с колхицинсвязывающим участком. Структурно такие соединения задействуют различные гетероароматические ядра, включая, например, индол, бензотиофен, бензофуран, имидазол, тиазол и оксазолиновые фрагменты. Большая часть индольных систем, например 2-ароилиндолы, 3-ароилиндолы, 3-ароил-2-фенилиндолы, 3-арилтиоиндол-2-карбоксилаты и индолил-3-глиоксамиды, обладают сильной антипролиферативной и антитубулиновой активностью.

Было показано, что соединения, включающие сульфонамид, такие как N-пиридинилсульфонамид АВТ-751 (ранее Е-7010) и стирил-пиридин-N-оксид-сульфонамид HMN-21416, эффективно ингибируют полимеризацию тубулина и являются сильными антимитотическими агентами соответственно. В настоящее время АВТ-751 и HMN-214 проходят клинические испытания на людях в качестве агентов против различных типов опухолей. К настоящему времени сообщения об ингибировании полимеризации тубулина индолин-сульфонамидами отсутствуют.

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к новым 7-ароиламиноиндолин-1-сульфонамидам, применяемым в качестве сильных ингибиторов полимеризации тубулина.

В данном изобретении заявлено индолин-сульфонамидное соединение формулы (I)

;

где R¹ является Н или галогеном;

R² является Ar, Ar-C(O)-, Ar-CH₂-, Ar-SO₂-, Ar-O-C(O), или R''-C(O)- и Ar является замещенным или незамещенным С₅-С₂₀ арилом, циклилом, гетероциклилом или гетероарилом, R' и R'' независимо являются C₁-С₁₀ алкилом или C₁-С₁₀ алкоксилом и

R³ является C₅-C₁₅ арилом или С₁-С₁₀ алкилом.

Гетероатом гетероциклила или гетероарила не лимитирован. Предпочтительно гетероатом является N, О или S. Предпочтительно гетероарил представляет собой

, , , , , , , ,

Предпочтительно R¹ является Н или галогеном (например, F, Cl, Br, I). Более предпочтительно R¹ является H или Br.

Структура Ar не лимитирована. Предпочтительно Ar является незамещенным фенилом, замещенным или незамещенным C₅-C₈ арилом или гетероарилом, или арилом с заместителем. Предпочтительно заместитель является галогеном, нитро, циано, алкоксилом, оксидом или ацетоксилом (CH₃CO₂ ^-). Предпочтительно галоген является F, Cl или Br.

Предпочтительно R² является бензоилом, фторбензоилом, нитробензоилом, цианобензоилом, метоксибензоилом, ацетилбензоилом, изоникотиноилом, N-оксид-изоникотиноилом, фуроилом, тиеноилом, бензолсульфонилом, нитробензолсульфонилом, фторбензолсульфонилом, (CO)ОС₆Н₅, (СО)N(CH₃)C₆H₅, бензилом, ацетилом или пивалоилом.

Предпочтительно R³ является C₁-C₁₀ алкилом. Более предпочтительно R³ является метилом.

Предпочтительные примеры индолин-сульфонамидных соединений по данному изобретению представляют собой

1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил-амин (соединение 19),

1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7ил-амин (соединение 20),

4-фтор-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензамид (соединение 21),

N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-4-нитро-бензамид (соединение 22),

4-циано-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензамид (соединение 23),

4-метокси-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензамид (соединение 24),

метиловый эфир N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-терефталамидной кислоты (соединение 25),

N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-изоникотинамид (соединение 26),

фуран-2-карбоновая кислота[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-амид (соединение 27),

тиофен-2-карбоновая кислота[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-амид (соединение 28),

N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензолсульфонамид (соединение 29),

N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-4-нитро-бензолсульфонамид (соединение 30),

4-фтор-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензолсульфонамид (соединение 31),

фениловый эфир [1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-карбаминовой кислоты (соединение 32),

3-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-1-метил-1-фенилмочевина (соединение 33),

Бензил-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-амин (соединение 34),

N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7ил]-ацетамид (соединение 35),

N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-2,2-диметилпропионамид (соединение 36),

N-[5-бром-1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-изоникотинамид (соединение 37),

фуран-2-карбоновая кислота[5-бром-1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-амид (соединение 38) и

N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-N-оксид-изоникотинамид (соединение 39).

Область применения индолин-сульфонамидных соединений по данному изобретению не ограничена. Предпочтительно индолин-сульфонамидные соединения по данному изобретению применяют для ингибирования полимеризации тубулина, лечения раков, связанных с полимеризацией тубулина, или заболеваний, связанных с ангиогенезом.

Кроме того, в данном изобретении также заявлена фармацевтическая композиция, содержащая индолин-сульфонамидное соединение по данному изобретению и фармацевтически приемлемый носитель, предназначенная для ингибирования полимеризации тубулина или лечения раков или заболеваний, связанных с полимеризацией тубулина.

Индолин-сульфонамидные соединения по данному изобретению включают в себя сами соединения, их фармацевтически приемлемые соли, а также пролекарства на их основе. Например, соль можно получить путем реакции положительной группы соединения (например, аминогруппы) с анионом. Подходящие анионы включают (но не ограничены только этими) хлорид, бромид, иодид, сульфат, нитрат, фосфат, цитрат, алкилсульфонат, трифторацетат и ацетат. Соль может быть получена также путем взаимодействия отрицательной группы соединения (например, карбоксильной) с катионом. Подходящие катионы включают (но не ограничены только этими) натрий, калий, магний, кальций и аммоний (например, тетраметиламмоний). Примеры пролекарств включают эфирные производные упомянутых ранее соединений и другие фармацевтически приемлемые производные.

В индолин-сульфонамидных соединениях по данному изобретению может присутствовать неароматическая двойная связь и один или более асимметричных центров. Приведенная здесь химическая структура включает мезо-соединения, рацемические смеси, энантиомеры, диастереоизомеры, смеси диастереомеров, цис-изомеры и транс-изомеры. Данное изобретение включает все изомерные формы, включая Е-форму изомеров и Z-форму изомеров.

Фармацевтическая композиция, содержащая индолин-сульфонамидные соединения по данному изобретению, может быть введена внутривенно, через рот, через нос, ректально, локально или сублингвально (под язык). Введение включает подкожный, внутрибрюшинный, внутривенный, внутримышечный, внутрисуставный, внутриаортный, внутриплевральный, спинномозговой, интратекальный способы введения, локальную инъекцию в больное место или другие подходящие способы введения.

Стерильная композиция для инъекций может представлять собой раствор или суспензию в нетоксичном разбавителе или растворителе для внутривенного введения (таком как 1,3-бутандиол). Приемлемым носителем или растворителем может быть маннит(ол) или вода. Кроме того, в качестве растворителя или среды для суспензии традиционно используют нелетучее масло (такое как синтетические моно- или диглицериды). При приготовлении фармацевтически приемлемых препаратов для инъекций может быть использована жирная кислота, такая как олеиновая, и эфирное производное олеиновой кислоты и глицерина, оливковое масло или касторовое масло, особенно в полиоксиэтилированной форме. Масляный раствор или суспензия может включать длинноцепочечные алифатические спирты в качестве разбавителей или диспергаторов, карбоксиметилцеллюлозу или аналогичные диспергаторы. Примеры обычно используемых материалов включают поверхностно-активные вещества (например, Твин или Спаны), другие эмульгирующие агенты, фармацевтически приемлемые твердые и жидкие соединения, широко используемые в фармацевтической промышленности или другие биодоступные потенцирующие агенты, используемые для создания новых композиций.

Фармацевтическая композиция может быть в форме, подходящей для введения через рот, например в виде капсулы, таблетки, эмульгатора, жидкой суспензии, дисперсии или растворителя. Для введения в форме таблетки в качестве носителя обычно используют лактозу или кукурузный крахмал, флотационный реагент (например, стеарат магния в качестве простой добавки). Для введения через рот в форме капсулы подходящие разбавители включают лактозу и кукурузный крахмал. Для введения через рот в виде жидкой сусупензии или эмульгатора активный материал можно суспендировать или растворить в масле, содержащем эмульгатор или суспензию. При необходимости можно добавить соответствующие подсластители, ароматизаторы или красители.

Композиции, предназначенные для использования в виде аэрозоля в нос или для ингаляции, могут быть получены любыми способами, известными из уровня техники для производства фармацевтических композиций. Например, композиция, полученная в изотоническом растворе хлорида натрия, может дополнительно содержать бензиловый спирт или другой подходящий консервант, соединение, вызывающее абсорбцию, для усиления биодоступности, фторуглерод или другой известный растворимый диспергатор. Композиции, содержащие одно или более активных соединений по данному изобретению, могут также быть использованы в форме суппозиториев для ректального введения лекарства.

Носитель для фармацевтической композиции, содержащей индолин-сульфонамидное соединение, должен быть приемлемым. Термин «приемлемый» означает, что носитель совместим с активным ингредиентом (более предпочтительно, носитель стабилизирует активный ингредиент) и безвреден для пациента. Один или более агентов может составлять фармацевтический эликсир, поставляющий активное соединение по данному изобретению. Примеры других носителей включают оксид кремния, стеарат магния, целлюлозу, лаурилсульфат натрия и D&C Yellow 10.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ниже приведены индолин-сульфонамидные соединения по данному изобретению, способы их анализа и способы их определения.

Температуры плавления (Тпл.) определены на приборе для определения температур плавления Büchi (B-545) и нескорректированы.

Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (¹Н ЯМР и ¹³С ЯМР) регистрировали с помощью спектрометра Bruker DRX-500 (при 500 МГц и 125 МГц соответственно), спектрометре Varian Mercury-400 (при 400 МГц и 100 МГц соответственно) и спектрометре Varian Mercury-300 (при 300 МГц и 75 МГц соответственно), химические сдвиги выражали в миллионный долях (м.д., δ), используя в качестве внутреннего стандарта ТМС в низких полях.

Масс-спектры высокого разрешения (High-resolution mass spectra, HRMS) получены с помощью масс-спектрометра электронного удара (electron impact, EI) Finnigan (MAT-95XL).

Элементные анализы проведены с помощью экспресс-микроанализатора Heraeus CHN-O.

Жидкостную колоночную хроматографию проводили, используя силикагель (Merck Kieselgel 60, No.9385, поры 230-400 по классификации Американского общества по испытанию материалов (ASTM).

Все реакции проводили в атмосфере сухого азота.

Общий способ синтеза индолин-сульфонамидов 19-38 показан на схеме 1.

Схема 1.

Получение включает прямую последовательность реакций, идущих с высокими выходами (48-56% по трем или четырем стадиям по сумме). Взаимодействие коммерчески доступного 5-бром-7-нитроиндолина (16) с 4-метоксибензолсульфонилхлоридом в пиридине приводит к образованию 5-бром-1-(4-метоксибензолсульфонил)-7-нитроиндолина (17).

Восстановление 7-нитрогруппы соединения 17 с помощью Fe/NH₄Cl в изопропаноле приводит к получению соединения 18, а именно 7-амино-5-бром-1-(4-метоксибензолсульфонил)индолина.

Соединение 18 превращали в 7-амино-1-(4-метоксибензол-сульфонил)индолин (19) путем свободнорадикального дебромирования в присутствии азоизобутилонитрила (AIBN) и Bu₃SnH (стадия d на схеме 1).

Дальнейшее взаимодействие соединения 18 или 19 с соответствующими электрофильными агентами в пиридине (стадия d на схеме 1), включая ароилхлорид, гетероароил хлорид, ArSO₂Cl, ArO(СО)Cl, ArN(CH₃)(CO)Cl, бензилхлорид, ацетилангидрид и пивалоилхлорид, приводит к получению желаемых 7-аминоиндолин-1-сульфонамидов (20-25, 27-36 и 38 соответственно).

7-Изоникотиноилзамещенные индолиновые соединения 26 и 37 были получены соответственно путем обработки соответственно 19 и 18 гидрохлоридом изоникотиноилхлорида в присутствии Cs₂CO₃ в безводном CH₃CN (стадия е на схеме 1).

Синтез соединений 17-39 и их химические свойства приведены далее в примерах.

Пример 1.

5-Бром-1-(4-метокси-бензолсульфонил)-7-нитро-2,3-дигидро-1H-индол (17).

Раствор 5-бром-7-нитроиндолина (5 г, 0.021 моля), 4-метоксифенил-сульфонилхлорида (6.36 г, 0.030 моля) в пиридине (10 мл) перемешивали при 120°С в течение 16 часов. Реакцию останавливали водой и экстрагировали реакционную смесь CH₂Cl₂. Объединенный органический слой сушили над безводным MgSO₄ и выпаривали. Полученный остаток подвергали хроматографии через силикагель (EtOAc : н-гексан = 1:2). Выход соединения 17 составил 85%.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.67 (т, J=7.8 Гц, 2Н), 3.87 (с, 3Н), 4.05 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.92-6.97 (м, 1Н), 7.50 (д, J=1.5 Гц, 1Н), 7.62-7.66 (м, 2Н), 7.89 (д, J=1.5 Гц, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ 29.0, 51.8, 55.7, 114.4, 118.7, 126.4, 128.6, 129.4, 132.0, 134.7, 141.7, 142.5, 163.8.

Масс-спектр (ESI) m/z: 436 (M+23)⁺.

Пример 2

5-Бром-1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил-амин (18).

Смесь соединения 17 (9 г, 0.021 моля), железа (3.65 г, 0.065 моля) и хлорида аммония (2.33 г, 0.043 моля) в смеси изопропанола (200 мл) и воды (50 мл) перемешивали при 100°С в течение 4 часов. После охлаждения реакционную смесь фильтровали и экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенный органический слой сушили с помощью MgSO₄ и упаривали. Полученный остаток подвергали жидкостной колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc : н-гексан = 2:3). Соединение 18 получено с выходом 89%.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 2.13 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 3.84 (с, 3Н), 3.95 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 4.80 (с, 2Н), 6.53 (д, J=2.0 Гц, 1Н), 6.74 (д, J=2.0 Гц, 1Н), 6.85-6.89(м, 2Н), 7.54-7.57 (м, 2Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.9, 53.2, 55.5, 114.1, 117.0, 118.1, 120.4, 127.1, 128.0, 129.6, 140.4, 141.5, 163.5.

Масс-спектр (ESI) m/z: 384 (M+1)⁺, 385 (M+2)⁺.

Пример 3

1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил-амин (19).

Перемешанный раствор соединения 18 (2 г, 4.84 ммоль), AIBN (0.08 г, 0.48 ммоль), Bu₃SnH (3.91 мл, 14.50 ммоль) в толуоле (49 мл) кипятили в течение 15 часов. После охлаждения реакционную смесь упаривали и экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенный органический слой сушили MgSO₄ и концентрировали для получения остатка, который затем очищали с помощью жидкостной колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc : н-гексан = 1:2) для получения соединения 19, выход 90%.

¹H ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ: 2.15 (т, J=7.4 Гц, 2Н), 3.82 (с, 3Н), 3.95 (т, J=7.4 Гц, 2Н), 6.42 (д, J=7.4 Гц, 1Н), 6.59 (д, J=7.9 Гц, 1Н), 6.81-6.84 (м, 2Н), 6.90 (т, J=7.6 Гц, 1Н), 7.51-7.54 (м, 2Н).

Масс-спектр (EI) m/z: 304 (М⁺, 6%), 133 (100%). HRMS (EI) для C₁₅H₁₆N₂O₃S (M⁺): рассчитано 304.0881; найдено 304,0880.

Пример 4

N-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензамид (20).

Раствор соединения 19 (0.1 г, 0.26 ммоль) и бензоилхлорида (0.09 мл, 0.78 ммоль) в пиридине (1 мл) перемешивали при 100-110°С в течение 16 часов. Реакцию останавливали добавлением ледяной воды. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc. Объединенный органический слой сушили над безводным MgSO₄ и выпаривали для получения остатка, который подвергали хроматографии на силикагеле (EtOAc : н-гексан = 1:2) для получения соединения 20, выход 82%.

Тпл. 205-206°С.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 2.25 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 3.84 (с, 3Н), 4.03 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 6.83-6.87 (м, 3Н), 7.20 (т, J=7.6 Гц, 1Н), 7.48-7.57 (м, 5Н), 8.06-8.09 (м, 2Н), 8.27 (д, J=8.0 Гц, 1Н), 10.23 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 29.0, 53.4, 55.6, 114.2, 120.5, 121.9, 127.4, 127.6, 128.6, 129.7, 130.5, 131.7, 131.8, 132.2, 134.6, 138.2, 163.8, 165.6.

Масс-спектр (EI) m/z: 408 (M⁺, 7%), 237 (62%), 105 (100%). HRMS (EI) для C₂₂H₂₀N₂O₄S (М⁺): рассчитано 408.1136; найдено 408.1140. Анал: (C₂₂H₂₀N₂O₄S) С, Н, N, S.

Пример 5

4-Фтор-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензамид (21).

Указанное соединение получено с выходом 78% с использованием 4-фторбензоилхлорида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 184-185°С.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.25 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 3.83 (с, 3Н), 4.02 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.83-6.87 (м, 3Н), 7.14-7.22 (м, 3Н), 7.47-7.52 (м, 2Н), 8.06-8.11 (м, 2Н), 8.24 (д, J=8.1 Гц, 1Н), 10.2 (с, 1Н).

Масс-спектр (EI) m/z: 426 (М⁺, 11%), 255 (95%), 123 (100%). HRMS (EI) для C₂₂H₁₉N₂O₄FS (М⁺): рассчитано 426.1046; найдено 426.1048.

Пример 6

N-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-4-нитро-бензамид (22).

Указанное соединение получено с выходом 90% с использованием 4-нитробензоилхлорида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 151-152°С.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.28 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 3.84 (с, 3Н), 4.04 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.84-6.91 (м, 3Н), 7.23 (т, J=7.8 Гц, 1Н), 7.48-7.53 (м, 2Н), 8.21-8.26 (м, 3Н), 8.34-8.38 (м, 2Н), 10.4 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 29.0, 53.5, 55.6, 114.3, 121.2, 121.8, 123.9, 127.4, 127.8, 128.6, 129.6, 130.9, 132.3, 138.4, 140.1, 149.8, 163.4, 163.9.

Масс-спектр (EI) m/z: 453 (М⁺, 100%), 282 (100%), 150 (65%). HRMS (EI) для C₂₂H₁₉N₃O₆S (М⁺): рассчитано 453.0993; найдено 453.0994. Анал. (C₂₂H₁₉N₃O₆S) C, H, N, S.

Пример 7

4-Циано-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензамид (23).

Указанное соединение получено с выходом 86% с использованием хлористого 4-цианобензоила аналогично получению соединения 20.

Тпл.=179-180°C.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.27 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.84 (с, 3Н), 4.04 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.85-6.90 (м, 3Н), 7.22 (т, J=8.1 Гц, 1Н), 7.49-7.51 (м, 2Н), 7.80-7.82 (м, 2Н), 8.16-8.18 (м, 2Н), 8.24 (д, J=8.1 Гц, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 29.2, 53.7, 55.9, 114.5, 115.7, 118.3, 121.3, 122.1, 127.6, 128.0, 128.3, 129.8, 131.2, 132.5, 132.8, 138.7, 138.8, 163.9, 164.2.

Масс-спектр (EI) m/z: 433 (M⁺, 12%), 262 (100%), 130 (73%). HRMS (EI) для C₂₃H₁₉N₃O₄S (M⁺): рассчитано 433.1098; найдено 433.1097. Анал. (C₂₃H₁₉N₃O₄S) C, H, N, S.

Пример 8

4-Метокси-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензамид (24).

Указанное соединение получено с использованием 4-метоксибензоилхлорида с выходом 75% аналогично получению соединения 20.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.24 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 3.83 (с, 3Н), 3.87 (с, 3Н), 4.02 (т, J=7.8 Гц, 2Н), 6.80-6.86 (м, 3Н), 6.98-7.02 (м, 2Н), 7.18 (т, J=8.1 Гц, 1Н), 7.48-7.53 (м, 2Н), 8.02-8.07 (м, 2Н), 8.26 (д, J=8.1 Гц, 1Н), 10.15 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 29.0, 53.4, 55.2, 55.4, 113.7, 113.8, 114.2, 120.2, 121.8, 126.3, 126.8, 129.3, 129.6, 131.8, 131.9, 138.2, 162.4, 163.7, 165.1.

Масс-спектр (EI) m/z: 438 (M⁺, 4%), 267 (28%), 135 (100%). HRMS (EI) для C₂₃H₂₂N₂O₅S (M⁺): рассчитано 438.1237; найдено 438.1243.

Пример 9

Метиловый эфир N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-терефталамидной кислоты (25).

Указанное соединение получено с выходом 81% с использованием метил-4-хлоркарбонилбензоата аналогично получению соединения 20.

Тпл. 166-167°С.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.25 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 3.82 (с, 3Н), 3.94 (с, 3Н), 4.02 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.82-6.87 (м, 3Н), 7.20 (т, J=7.5 Гц, 1Н), 7.47-7.52 (м, 2Н), 8.11-8.18 (м, 4Н), 8.26 (д, J=7.8 Гц, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.9, 52.2, 53.3, 55.5, 114.2, 120.8, 121.7, 127.3, 127.4, 127.6, 129.5, 129.8, 131.1, 132.1, 132.8, 138.3, 138.4, 163.7, 164.4, 166.2.

Масс-спектр (EI) m/z: 466 (M⁺, 14%), 295 (100%), 163 (89%). HRMS (EI) для C₂₄H₂₂N₂O₆S (М⁺): рассчитано 466.1194; найдено 466.1196.

Пример 10

N-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-изоникотинамид (26).

Смесь соединения 19 (0.2 г, 0.52 ммоль), гидрохлорида изоникотиноилхлорида (0.18 г, 1.04 ммоль) и карбоната цезия (0.68 г, 2.08 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) перемешивали и кипятили в течение 16 часов. Для остановки реакции в реакционную смесь добавляли ледяную воду и проводили экстракцию CH₂Cl₂. Объединенный органический слой сушили над MgSO₄ и упаривали. Полученный остаток очищали жидкостной колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc : н-гексан : NH₃(водный) = 3:2:1%) и перекристаллизовывали (CH₂Cl₂/EtOAc) для получения соединения 26, выход 82%.

Тпл. 219-220°С (солянокислая соль).

¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ: 2.23 (т, J=7.3 Гц, 2Н), 3.79 (с, 3Н), 3.99 (т, J=7.4 Гц, 2Н), 6.81-6.85 (м, 3Н), 7.17 (т, J=7.8 Гц, 1Н), 7.46 (д, J=8.8 Гц, 2Н), 7.87 (д, J=5.7 Гц, 2Н), 8.21 (д, J=8.2 Гц, 1Н), 8.77 (д, J=5.6 Гц, 2Н), 10.35 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.8, 53.3, 55.5, 114.2, 120.9, 121.1, 121.7, 127.2, 127.6, 129.4, 130.7, 132.1, 138.3, 141.5, 150.6, 163.3, 163.8.

Масс-спектр (EI) m/z: 409 (M⁺, 36%), 314 (15%), 238 (100%). HRMS (EI) для C₂₁H₁₉N₃O₄S (M⁺): рассчитано 409.1094; найдено 409.1095. Анал. (C₂₁H₁₉N₃O₄S) C, H, N, S.

Пример 11

Фуран-2-карбоновая кислота[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-амид (27).

Указанное соединение получено с выходом 86% с использованием 2-фуроилхлорида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 163-164°С.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 2.24 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 3.83 (с, 3Н), 4.03 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 6.53-6.55 (м, 1Н), 6.83-6.87 (м, 3Н), 7.18 (т, J=7.6 Гц, 1Н), 7.25-7.26 (м, 1Н), 7.48-7.52 (м, 2Н), 7.60 (м, 1Н), 8.22 (д, J=8.4 Гц, 1Н), 10.25 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 29.0, 53.3, 55.6, 112.0, 114.2, 115.0, 120.5, 121.7, 127.6, 127.7, 129.7, 131.0, 132.1, 138.3, 144.9, 148.0, 156.6, 163.7.

Масс-спектр (EI) m/z: 398 (М⁺, 13%), 303 (10%), 227 (100%). HRMS (EI) для C₂₀H₁₈N₂O₅S (M⁺): рассчитано 398.0933; найдено 398.0935. Анал. (C₂₀H₁₈N₂O₅S) С, Н, N, S.

Пример 12

Тиофен-2-карбоновая кислота[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-амид (28).

Указанное соединение получено с выходом 78% с использованием 2-теноилхлорида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 188-189°С.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 2.26 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 3.83 (с, 3Н), 4.03 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 6.82-6.87 (м, 3Н), 7.12-7.15 (м, 1Н), 7.17 (т, J=7.6 Гц, 1Н), 7.49-7.53 (м, 2Н), 7.55 (дд, J=5.2 Гц, 1.2 Гц, 1Н), 7.82 (дд, J=4.0, 1.2 Гц, 1Н), 8.22 (д, J=8.0 Гц, 1Н), 10.23 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 29.0, 53.5, 55.6, 114.2, 120.4, 121.5, 127.5, 127.6, 127.9, 128.5, 129.6, 130.9, 131.2, 131.8, 138.2, 140.0, 160.1, 163.8.

Масс-спектр (EI) m/z: 414 (M⁺, 13%), 243 (100%), 111 (73%). HRMS (EI) для C₂₀H₁₈N₂O₄S₂ (М⁺): рассчитано 414.0704; найдено 414.0706. Анал. (C₂₀H₁₈N₂O₄S₂) C, H, N, S.

Пример 13

N-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензол-сульфонамид (29).

Указанное соединение получено с выходом 80% с использованием бензолсульфонилхлорида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 143-145°С.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.09 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.53 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 3.80 (с, 3Н), 6.77 (д, J=8.7 Гц, 2Н), 6.84 (д, J=7.2 Гц, 1Н), 7.11 (т, J=7.5 Гц, 1Н), 7.27-7.32 (м, 2Н), 7.40 (м, 2Н), 7.49-7.54 (м, 2Н), 7.75 (д, J=7.8 Гц, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.7, 52.7, 55.6, 114.2, 122.3, 124.2, 127.3, 127.7, 128.5, 129.3, 129.4, 129.6, 132.5, 134.9, 138.3, 139.5, 163.7.

Масс-спектр (EI) m/z: 444 (М⁺, 10%), 273 (85%), 132 (100%). HRMS (EI) для C₂₁H₂₀N₂O₅S₂ (M⁺): рассчитано 444.0812; найдено 444.0813.

Пример 14

N-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-4-нитро-бензолсульфонамид (30).

Указанное соединение получено с выходом 82% с использованием 4-нитробензолсульфонилхлорида аналогично получению соединения 20.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 2.12 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.53 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.82 (с, 3Н), 6.79-6.83 (м, 2Н), 6.92 (дд, J=7.6, 1.2 Гц, 1Н), 7.16 (т, J=7.6 Гц, 1Н), 7.30-7.34 (м, 2Н), 7.52 (д, J=8.0 Гц, 1Н), 7.94-7.97 (м, 2Н), 8.24-8.28 (м, 2Н), 9.16 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.7, 52.8, 55.6, 114.3, 123.2, 123.7, 124.8, 127.0, 128.0, 128.4, 128.7, 129.4, 135.2, 138.5, 145.5, 149.9, 163.9.

Масс-спектр (EI) m/z: 489 (М⁺, 13%), 318 (100%), 132 (72%). HRMS (EI) для C₂₁H₁₉N₃O₇S₂ (М⁺): рассчитано 489.0654; найдено 489.0659.

Пример 15

4-Фтор-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензол-сульфонамид (31).

Указанное соединение получено с выходом 83% с использованием 4-фторбензолсульфонилхлорида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 104-105°С.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.11 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 3.58 (т, J=7.8 Гц, 2Н), 3.81 (с, 3Н), 6.77-6.81 (м, 2Н), 6.86 (дд, J=7.8, 1.2 Гц, 1Н), 7.05-7.15 (м, 3Н), 7.30-7.34 (м, 2Н), 7.50 (д, J=8.0 Гц, 1Н), 7.75-7.80 (м, 2Н), 8.97 (с, 1Н).

Масс спектр (EI) m/z: 462 (M⁺, 13%), 291 (100%), 132 (59%). HRMS (EI) для C₂₁H₁₉N₂O₅S₂F (M⁺): рассчитано 462.0729; найдено 462.0724.

Пример 16

Фениловый эфир [1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-карбаминовой кислоты (32).

Указанное соединение получено с выходом 76% с использованием фенилхлорформиата аналогично получению соединения 20.

Тпл. 164-166°С.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.29 (т, J=7.8 Гц, 2Н), 3.75 (с, 3Н), 4.00 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.75-6.80 (м, 2Н), 7.07 (дд, J=7.5, 0.6 Гц, 1Н), 7.16-7.25 (м, 4Н), 7.30-7.40 (м, 4Н), 7.57-7.62 (м, 2Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 29.0, 53.1, 55.5, 114.0, 121.5, 121.6, 125.1, 125.9, 127.0, 129.1, 129.2, 129.3, 129.6, 130.6, 138.9, 139.1, 150.7, 163.3.

Масс-спектр (ESI) m/z: 425 (M+H)⁺.

Пример 17

3-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-1-метил-1-фенилмочевина (33).

Указанное соединение получено с выходом 75% с использованием N-метил-N-фенилкарбамоилхлорида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 199-201°С.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 2.07 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.38 (с, 3Н), 3.80 (с, 3Н), 3.83 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 6.71 (д, J=8.0 Гц. 1Н), 6.75-6.78 (м, 2Н), 7.12 (т, J=7.8 Гц, 1Н), 7.29-7.33 (м, 2Н), 7.35-7.39 (м, 1Н), 7.40-7.43 (м, 2Н), 7.48-7.52 (м, 2Н), 7.93 (д, J=8.0 Гц, 1Н), 8.28 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.8, 37.4, 53.0, 55.5, 113.9, 119.0, 122.0, 127.3, 127.6, 127.7, 127.8, 129.6, 130.0, 132.2, 132.9, 137.8, 142.6, 155.1, 163.5.

Масс-спектр (EI) m/z: 437 (M⁺, 9%), 266 (100%), 159 (81%). HRMS (EI) для C₂₃H₂₃N₃O₄S (М⁺): рассчитано 437.1405; найдено 437.1408.

Пример 18

Бензил-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-амин (34).

Указанное соединение получено с выходом 85% с использованием бензилхлорида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 162-163°С.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 1.98 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.75 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.77 (с, 3Н), 4.72 (с, 3Н), 6.42 (д, J=7.2 Гц, 1Н), 6.70-6.76 (м, 2Н), 6.92 (т, J=7.5 Гц, 1Н), 7.14-7.27 (м, 4Н), 7.35-7.40 (м, 4Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.7, 51.9, 55.3, 55.4, 113.7, 115.2, 118.4, 126.5, 127.7, 128.1, 128.9, 129.8, 130.4, 139.3, 139.4, 143.7, 163.2.

Масс-спектр (ESI) m/z: 395 (M+H)⁺.

Пример 19

N-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-ацетамид (35).

Указанное соединение получено с выходом 89% с использованием уксусного ангидрида аналогично получению соединения 20.

Тпл. 154-155°С.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.20 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 2.23 (с, 3Н), 3.83 (с, 3Н), 4.00 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.79 (д, J=7.8 Гц, 1Н), 6.82-6.86 (м, 2Н), 7.13 (т, J=7.9 Гц, 1Н), 7.44-7.48 (м, 2Н), 8.10 (д, J=8.4 Гц, 1Н), 8.35 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 24.7, 28.9, 53.4, 55.6, 114.2, 120.2, 121.5, 127.5, 127.6, 129.5, 131.4, 131.5, 138.0, 163.7, 168.8.

Масс-спектр (EI) m/z: 346 (M⁺, 18%), 175 (44%), 133 (100%). HRMS (EI) для C₁₇H₁₈N₂O₄S (М⁺): рассчитано, 346.0979; найдено, 346.0983. Анал. (C₁₇H₁₈N₂O₄S) С, Н, N, S.

Пример 20

N-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-2,2-диметил-пропионамид (36).

Указанное соединение получено с выходом 87% с использованием хлористого пивалоила аналогично получению соединения 20.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 1.37 (с, 9Н), 2.19 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.83 (с, 3Н), 3.98 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.79 (д, J=7.5 Гц, 1Н), 6.82-6.85 (м, 2Н), 7.13 (т, J=7.8 Гц, 1Н), 7.45-7.48 (м, 2Н), 8.09 (д, J=8.1 Гц, 1Н), 9.53 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 27.6, 28.5, 39.9, 53.3, 55.6, 114.1, 120.1, 122.0, 127.5, 127.7, 129.7, 131.8, 132.1, 138.1, 163.7, 177.6.

Масс-спектр (EI) m/z: 388 (M⁺, 13%), 217 (51%), 167 (100%). HRMS (EI) для C₂₀H₂₄N₂O₄S (M⁺): рассчитано 388.1449; найдено 388.1453.

Пример 21

N-[5-Бром-1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-изоникотинамид (37).

Указанное соединение получено с выходом 80% аналогично получению соединения 26, в качестве исходного использовали соединение 18.

Тпл. 191-192°С.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.27 (т, J=7.2 Гц, 2Н), 3.86 (с 3Н), 4.04 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 6.89-6.93 (м, 2Н), 7.02 (д, J=1.8 Гц, 1Н), 7.51-7.56 (м, 2Н), 7.88-7.90 (м, 2Н), 8.51 (л J=1.8 Гц, 1Н), 8.82-8.84 (м, 2Н), 10.3 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.8, 53.6, 55.6, 114.5, 120.6, 120.9, 124.1, 124.3, 127.0, 129.5, 131.2, 131.8, 140.1, 141.1, 150.7, 163.4, 164.0.

Масс-спектр (EI) m/z: 490 (M⁺+2, 3%), 489 (M⁺+1, 12%), 488 (M⁺, 3%), 487 (M⁺-1, 11%), 318 (100%), 316 (98%). HRMS (EI) для C₂₁H₁₈N₃O₄SBr (M⁺-1): рассчитано 489.0178; найдено 489.0180.

Пример 22

Фуран-2-карбоноваякислота[5-бром-1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-амид (38).

Указанное соединение получено с выходом 80% аналогично получению соединения 20, в качестве исходного использовали соединение 18.

Тпл. 170-171°С.

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ: 2.23 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 3.86 (с, 3Н), 4.03 (т, J=7.6 Гц, 2Н), 6.55 (м, 1Н), 6.88-6.91 (м, 2Н), 6.97 (д, J=1.6 Гц, 1Н), 7.26-7.27 (м, 1Н), 7.52-7.56 (м, 2Н), 7.61 (м, 1Н), 8.49 (д, J=1.6 Гц, 1Н), 10.24 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.9, 53.5, 55.6, 112.2, 114.4, 115.5, 120.5, 123.5, 124.2, 127.4, 129.7, 131.1, 132.1, 140.0, 145.1, 147.6, 156.5, 163.9.

Масс-спектр (EI) m/z: 479 (M⁺-2, 3%), 478 (M⁺+1, 13%), 477 (M⁺, 3%), 476 (M⁺-1, 12%), 307 (99%), 305 (100%). HRMS (EI) для C₂₀H₁₇N₂O₅SBr (M⁺+1): рассчитано 478.0017; найдено 478.0016.

Пример 23

N-[1-(4-Метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-N-оксид-изоникотинамид (39)

К раствору соединения 26 (0.27 г, 0.24 ммоль) в EtOAc (10 мл) добавляли м-хлорпербензойную кислоту (МСРВА) (0.3 г, 0.49 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакцию останавливали NaHCO₃ и экстрагировали реакционную смесь CH₂Cl₂ (трижды). Объединенный органический слой сушили над безводным MgSO₄ и упаривали. Полученный остаток хроматографировали через силикагель (CH₂Cl₂:МеОН = 15:1). Выход желаемого соединения 39 составил 85%.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 2.29 (т, J=7.5 Гц, 2Н), 3.84 (с, 3Н), 4.05 (т, J=7.4 Гц, 2Н), 6.84-6.91 (м, 3Н), 7.22 (т, J=7.8 Гц, 1Н), 7.50 (м, 2Н), 7.97 (м, 2Н), 8.21 (д, J=8.1 Гц, 1Н), 8.29 (м, 2Н), 10.38 (с, 1Н).

¹³С ЯМР (CDCl₃) δ: 28.9, 53.5, 55.6, 114.3, 121.2, 121.6, 124.6, 127.2, 127.8, 129.5, 130.6, 130.9, 132.1, 138.4, 139.4, 161.2, 163.9.

Масс-спектр (ESI) m/z: 426 (M+1)⁺.

Пример 24

Элементный анализ соединений 20, 22, 23, 26, 27, 28 и 35.

Соединение Формула Рассчитано Найдено %C %H %N %S %C %H %N %S 20 C₂₂H₂₀N₂O₄S 64.69 4.94 6.86 7.85 64.72 4.81 6.61 7.71 22 C₂₂H₁₉N₃O₆S 58.27 4.22 9.27 7.07 58.49 4.19 9.01 7.08 23 C₂₃H₁₉N₃O₄S 63.73 4.42 9.69 7.40 63.61 4.58 9.72 7.31 26 C₂₁H₁₉N₃O₄S 61.60 4.68 10.26 7.83 61.54 4.71 10.18 7.88 27 C₂₀H₁₈N₂O₅S 60.29 4.55 7.03 8.05 60.40 4.38 7.19 8.21 28 C₂₀H₁₈N₂O₄S₂ 57.95 4.38 6.76 15.47 58.01 4.25 6.78 15.29 35 C₁₇H₁₈N₂O₄S 58.94 5.24 8.09 9.26 58.86 5.28 7.88 9.14

Пример 25

Биологический тест

Реагенты для клеточной культуры получены от Gibco-BRL Life Technologies (Гейтербург, Мэриленд). Использовали тубулин, богатый белками, ассоциированными с микротрубочками (microtubule-associated protein (MAP)-rich tubulin), производства Cytoskeleton, Inc. (Денвер, Колорадо) и [³H]колхицин (специфическая активность 60-87 кюри/ммоль) производства PerkinElmer Life Sciences (Бостон, Массачусетс).

(а) Оценка эффективности ингибирования роста клеток

Человеческие клетки плоскоклеточного рака полости рта KB, клетки колоректальной карциномы НТ29, клетки немелкоклеточной (поп small cell) карциномы легких Н460, а также клетки двух карцином желудка TSGH, MKN45 хранили в среде RPMI-1640, дополнительно содержащей 5% эмбриональной бычьей сыворотки.

KB-VIN10 клетки содержали в питательной среде, дополненной 10 нМ винкристина, полученного с помощью винкристинуправляемой селекции. Была выявлена повышенная экспрессия P-gp170/MDR.

Клетки в логарифмической фазе культурировали при плотности 5000 клеток/мл/лунка в 24-луночном планшете. Перед использованием клетки KB-VIN10 в течение трех дней культурировали в среде, не содержащей лекарства. Затем клетки обрабатывали различными концентрациями тестируемых лекарств в течение 72 часов. Для выявления описанного выше влияния тестируемого соединения на рост клеток использовали анализ с красителем метиленовым голубым. Величину IC₅₀, полученную на основании данных по 50% ингибированию клеточного роста, вычисляли графически относительно контроля.

Результат исследования показывает, что среди соединений 19-39 по данному изобретению, по крайней мере, семнадцать из исследованных соединений обладают IC₅₀ менее 5 мкМ и IC₅₀ оставшихся соединений менее 10 нМ.

(b) Исследования по полимеризации тубулина in vitro

Турбидиметрические исследования микротрубочек проводили способом, описанным Bollag и соавт.

Тубулин, богатый белками, ассоциированными с микротрубочками (MAP-rich тубулин) (2 мг/мл), в 100 мл буфера, содержащего 100 мМ PIPES (pH 6.9), 2 мМ MgCl₂, 1 мМ GTP и 2% (об.) диметилсульфоксида, помещали в 96-луночную пластину микротитратора в присутствии тестируемых соединений. Рост поглощения измеряли при 350 нм с помощью Power Wave X Microplate Reader (BIO-TEK Instruments, Винооски, Вермонт) при 37°С и записывали каждые 30 секунд в течение 30 минут. Площадь под кривой (AUC) использовали для определения концентрации соединений, вызывающей 50% ингибирование полимеризации тубулина (IC₅₀). AUC контроля и 10 мкМ колхицин принимали за 100% и 0% полимеризации соответственно. IC₅₀ вычисляли с помощью нелинейной регрессии по, по крайней мере, трем экспериментам.

Согласно полученным результатам протестированные сульфонамидные соединения (в концентрации в среднем менее 2 мкМ) обладают способностью ингибировать полимеризацию тубулина.

Несмотря на то, что данное изобретение было описано на примерах предпочтительных вариантов его выполнения, очевидно, что можно осуществить множество других модификаций и вариантов, не нарушая сущность и не выходя за рамки изобретения, обозначенные ниже в формуле изобретения.

Изобретение относится к новым индолин-сульфонамидам формулы (I)

где R¹ означает Н, галоген;

R² означает Н, Ar, Ar-C(O)-, Ar-CH₂, Ar-SO₂-, Ar-O-C(O)-, , R''-C(O)-, где Ar является незамещенным фенилом или фенилом, замещенным одним заместителем, выбранным из группы, включающей галоген, NO₂, CN, алкокси, CH₃OC(O)-, или означает шестичленный гетероарил с одним атомом N в качестве гетероатома, или является его N-оксидным производным, или означает пятичленный гетероарил с одним атомом S или О в качестве гетероатома; R' и R'' независимо означают C₁-С₁₀алкил; R³ означает C₁-С₁₀ алкил. Соединения обладают способностью ингибировать полимеризацию тубулина, что позволяет использовать их при лечении рака. 4 н. и 18 з.п.ф-лы.

1. Индолин-сульфонамидное соединение формулы (I):

где R¹ является Н или галогеном;
R² является H, Ar, Ar-C(O)-, Ar-CH₂-, Ar-SO₂-, Ar-O-C(O), ,
или R''-C(O)-, где Ar является незамещенным фенилом или фенилом, замещенным одним заместителем, выбранным из группы, включающей: галоген, NO₂, CN, алкокси, СН₃ОС(О)-, или является шестичленным гетероарилом с одним атомом N в качестве гетероатома, или является его N-оксидным производным, или является пятичленным гетероарилом с одним атомом S или О в качестве гетероатома;
R' и R'' независимо являются С₁-С₁₀ алкилом; и
R³ является С₁-С₁₀ алкилом.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что гетероарил является
, , , ,
или

3. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R¹ является Н или Br.

4. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Ar является незамещенным фенилом.

5. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Ar является гетероарилом или незамещенным или замещенным фенилом.

6. Соединение по п.1, отличающееся тем, что галоген является F, Cl или Br.

7. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R² является бензоилом, фторбензоилом, нитробензоилом, цианобензоилом, метоксибензоилом или ацетилбензоилом.

8. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R² является изоникотиноилом, N-оксид-изоникотиноилом, фуроилом или тиеноилом.

9. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R² является бензолсульфонилом, нитробензолсульфонилом или фторбензолсульфонилом.

10. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R² является (CO)ОС₆Н₅ или (СО)N(СН₃)С₆Н₅.

11. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R² является бензилом, ацетилом или пивалоилом.

12. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R³ является метилом.

13. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно является 1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-иламином.

14. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно представляет собой
N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-бензамид,
4-фтор-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-бензамид,
N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-4-нитро-бензамид,
4-циано-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-бензамид,
4-метокси-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-бензамид, или
метиловый эфир N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-терефталамидной кислоты.

15. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно представляет собой
N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-изоникотин-амид,
фуран-2-карбоновой кислоты[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-амид, или
тиофен-2-карбоновой кислоты[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-амид.

16. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно представляет собой N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-бензолсульфонамид,
N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-4-нитро-бензолсульфонамид, или
4-фтор-N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-бензолсульфонамид.

17. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно является фениловым эфиром [1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-карбаминовой кислоты, или
3-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-1-метил-1-фенилмочевиной.

18. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно является
бензил-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-амином,
N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1H-индол-7-ил]-ацетамидом, или
N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-2,2-диметилпропионамидом.

19. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно представляет собой:
N-[5-бром-1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-изоникотинамид,
фуран-2-карбоновуюкислоту[5-бром-1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-амид, или
N-[1-(4-метокси-бензолсульфонил)-2,3-дигидро-1Н-индол-7-ил]-N-оксид-изоникотинамид.

20. Применение соединения по п.1 для ингибирования клеточной полимеризации тубулина.

21. Применение соединения по п.1 для подавления (ингибирования) рака, связанного с полимеризацией тубулина.

22. Фармацевтическая композиция для ингибирования полимеризации тубулина, содержащая соединение по п.1, объединенное с фармацевтически приемлемым носителем.