СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АБАКТЕРИАЛЬНОГО ПРОСТАТИТА С ПОМОЩЬЮ ИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЯ ЛИМФОЦИТОВ Российский патент 2010 года по МПК G01N33/48 G01N33/50 

Изобретение относится к медицине, в частности к урологии, и может быть использовано для повышения эффективности диагностики абактериального простатита.

Известен способ диагностики абактериального простатита по результатам исследования секрета простаты (Простатит. / Под ред. П.А.Щеплева. - М.: ИД Медпрактика - М, 2005. - 224 с.). Способ заключается в микроскопическом исследовании секрета простаты и позволяет подтвердить воспалительный процесс в предстательной железе, а также судить о ее функциональном состоянии. Перед началом процедуры пациент частично мочится, чтобы удалить содержимое мочеиспускательного канала, затем выполняется массаж простаты, полученный секрет исследуется под микроскопом в большом поле зрения. При микроскопии секрета простаты регистрируют: количество лейкоцитов, количество лецитиновых зерен, наличие микрофлоры. Нормальными показателями секрета простаты являются: менее 10 лейкоцитов в поле зрения, большое количество лецитиновых зерен, отсутствие микрофлоры; превышение количества лейкоцитов, а также отсутствие микроорганизмов в мазке позволяет диагностировать абактериальный простатит.

Недостатками данного способа являются ложноотрицательные и ложноположительные результаты, т.к. данный способ не учитывает иммунологического ответа организма больного, а причина наличия бактерий в мазке может иметь иную природу (может наблюдаться занос бактерий из уретры). Также отсутствие бактерий не является специфичным показателем абактериальной этиологии простатита, т.к. связана с погрешностями проведения исследования и низкой его чувствительности.

Известен способ диагностики абактериального простатита с помощью бактериологического исследования секрета простаты (Meares E.M., Stamey ТА. Bacteriologic localization patterns in bacterial prostatitis and uretritis .// Invest. Urol. - 1968. - Vol.5. - P. 492-518.). Способ заключается в следующем: после подготовки пациента забирают первые 10 мл мочи в стерильный контейнер (уретральная порция), затем, после частичного опорожнения мочевого пузыря в объеме 150-200 мл, аналогичным образом собирают 10 мл мочи (пузырная порция). Следующим этапом выполняют массаж предстательной железы для получения секрета простаты, затем собирают 10 мл мочи после массажа простаты (постмассажная порция). Первая порция мочи характеризует состояние мочеиспускательного канала, вторая позволяет диагностировать первичный или вторичный цистит. Обнаружение уропатогенных бактерий в секрете простаты или в постмассажной моче позволяет установить диагноз бактериального простатита. В случае же наличия клиники простатита и отсутствии бактерий в секрете простаты или в постмассажной моче диагностируется абактериальный простатит.

Недостатками данного способа являются ложноотрицательные и ложноположительные результаты, т.к. данный способ также не учитывает иммунного ответа организма больного. Доказано, что отсутствие уропатогенных бактерий в секрете простаты или в постмассажной моче не является патогнамоничным признаком абактериального простатита. Отсутствие и наличие бактерий в пробе также может быть связано и с техническими погрешностями в ходе исследования, что на фоне отсутствия сведений об иммунном ответе организма препятствует достоверной диагностике.

Задачей изобретения является повышение достоверности диагностики абактериального простатита.

Поставленная задача решается проведением бактериологического исследования секрета простаты и постмассажной мочи с параллельным определением иммунологических показателей пациента (субпопуляционный состав лимфоцитов). Наличие клиники простатита, отсутствие уропатогенных бактерий в секрете простаты или в постмассажной моче, а также изменение иммунологических показателей крови: содержание Т-лимфоцитов (CD3+)>64,0%, NK-клеток (CD16+/CD56+)<12,6%, T-супрессоров (CD3+/CD8+)>29,0%, T-NK клеток (CD3+/CD 16+/CD56+)>8,8%, иммунорегуляторный индекс <1,29 с высокой долей вероятности позволяют диагностировать абактериальный простатит.

Способ включает бактериологическое исследование секрета простаты и постмассажной мочи, а также определение субпопуляционного состава лимфоцитов с помощью иммунофенотипирования на проточном цитометре с последующим расчетом иммунорегуляторного индекса. Данный набор диагностических исследований позволяет оценить иммунологический ответ организма на простатит неизвестной этиологии (Хронический простатит: современный подход к проблеме / Е.В.Репин, В.Т.Долгих, А.В.Ершов // Омский научный вестник, 2006. - №9 (46). - С.290-292; Особенности антибактериальной терапии хронического бактериального простатита. / Е.В.Репин, Д.Г.Макушин, А.В.Ершов, Д.В.Заводов, Р.А.Голубчиков, К.В.Романовский // Материалы научно-практической конференции «Актуальные проблемы патофизиологии». - СПб, 2008. - С.81-82). Учитывая клиническую картину, бактериальный профиль секрета простаты и постмассажной мочи, а также изменение иммунологических параметров крови (процентное содержание Т-лимфоцитов, NK-клеток, Т-супрессоров, Т-NK клеток, иммунорегуляторный индекс) с высокой долей вероятности позволяют диагностировать абактериальный простатит.

Описание методики: при госпитализации пациента с клиникой простатита проводят микроскопию и бактериологическое исследование секрета простаты и постмассажной мочи, а также определение субпопуляционного состава лимфоцитов с помощью иммунофенотипирования на проточном цитометре (Пинегин Б.В., Ярилин А.А., Симонова А.В., Климова С. В., Мазуров Д.В., Дамбаева С. В., Бахус Г.О. Применение проточной цитометрии для оценки функциональной активности иммунной системы человека. // Пособие для врачей - лаборантов. - М. 2001. - 53 с.) с последующим расчетом иммунорегуляторного индекса (ИPИ=CD4aбc./CD8aбc).

Помимо отсутствия уропатогенной микрофлоры, об абактериальной природе простатита свидетельствуют следующие изменения иммунологических показателей крови: содержание Т-лимфоцитов (CD3+)>64,0%, NK-клеток (CD16+/CD56+)<12,6%, Т-супрессоров (CD3+/CD8+)>29,0%, T-NK клеток (CD3+/CD16+/CD56+)>8,75%, иммунорегуляторный индекс <1,29.

ПРИМЕР: Больной Д., 35 лет, госпитализирован в урологическое отделение КМХЦ 14.01.2009 г. в плановом порядке с диагнозом: хронический простатит, обострение с жалобами на боли внизу живота, промежности, яичках, учащенное мочеиспускание. Клинический индекс хронического простатита (по О.Б.Лорану и А.С.Сегалу, 2001 г.) составлял 38 баллов. Состояние удовлетворительное. Сознание ясное. Положение активное. Кожные покровы обычной окраски. Язык влажный. Дыхание везикулярное, равномерно проводится во все отделы легких. ЧД=17-18 мин^-1. Тоны сердца ясные, ритмичные. АД=120/80 мм рт.ст. Пульс 72 мин^-1. Живот мягкий, безболезненный. Ректально: простата не увеличена, тестоватая, болезненная, междолевая бороздка сглажена. При исследовании секрета предстательной железы выявлено повышенное количество лейкоцитов до 50 в поле зрения микроскопа, уменьшение числа лецитиновых зерен. В мазках из уретры, выполненных методом ПЦР оппортунистических инфекций (хламидии, уреаплазма, микоплазма), а также вирусов простого герпеса I и II типов, ЦМВ не обнаружено. Выполнен посев секрета простаты (по Meares Е.М., Stamey Т.А., 1968). В посеве секрета предстательной железы выявлялась Е. coli в титре 1х10³ КОЕ в 1 мл. Проведено иммунофенотипирование лимфоцитов: общее количество лимфоцитов 5,7×10⁹/л, CD3+ - 67%, CD3+/CD4+ - 38%, CD3+/CD8+ - 30%, CD16+/CD56+ - 11%, CD95 - 13%, CD3+/CD16+/CD56+ - 9%, ИРИ - 1,22. При бактериальном простатите при иммунофенотипировании лимфоцитов выявлялись снижение субпопуляций CD3+<59%, CD3+/CD4+<39%, CD3+/CD16+/CD56+<5%, при повышении пула CD16+/CD56+>25%, а также увеличение экспрессии CD95>15%. Полученные при иммунофенотипировании лимфоцитов данные позволили расценить наличие Е. coli в посеве секрета предстательной железы, как диагностически не значимое. Больному начата комплексная терапия с включением в схему лечения иммуномодулятора глюкозаминилмурамилдипептида (ликопида) в течение 10 дней по 10 мг в сутки; антибактериальная терапия в схему лечения не включалась. После окончания терапии отмечался регресс симптомов хронического простатита - клинический индекс хронического простатита составлял 9 баллов, при микроскопии секрета предстательной железы количество лейкоцитов было нормальным (10 в поле зрения микроскопа), что сопровождалось нормализацией субпопуляционного состава лимфоцитов крови.

Клинический диагноз: Хронический абактериальный простатит, обострение.

Данный способ диагностики был применен у 30 больных хроническим абактериальным простатитом, что способствовало повышению качества диагностики на 68%.

В предлагаемом способе диагностики абактериального простатита с помощью иммунофенотипирования лимфоцитов, помимо бактериального профиля секрета простаты и постмассажной мочи, учитывают иммунный ответ организма на этиологический фактор, вызвавший основное заболевание. Изменения иммунологических параметров крови (процентное содержание Т-лимфоцитов, NK-клеток, Т-супрессоров, T-NK клеток, иммунорегуляторный индекс) с высокой долей вероятности позволяют диагностировать абактериальный простатит даже при погрешностях и неоднозначной интерпретации бактериологического исследования секрета простаты и постмассажной мочи.

Изобретение относится к медицине, в частности к урологии, и касается способа диагностики абактериального простатита. Сущность способа заключается в том, что проводят бактериологическое исследование секрета простаты и постмассажной мочи с параллельным определением иммунологических показателей пациента (субпопуляционный состав лимфоцитов). При наличии клиники простатита, отсутствии уропатогенных бактерий в секрете простаты или в постмассажной моче, а также изменении иммунологических показателей крови: содержание Т-лимфоцитов (CD3+)>64,0%, NK-клеток (CD16+/CD56+)<12,6%, Т-супрессоров (CD3+/CD8+)>29,0%, T-NK клеток (CD3+/CD16+/CD56+)>8,8%, иммунорегуляторный индекс <1,29 диагностируют абактериальный простатит. Использование способа позволяет повысить достоверность диагностики абактериального простатита.

Способ диагностики абактериального простатита, включающий проведение бактериологического исследования секрета простаты и постмассажной мочи, отличающийся тем, что параллельно определяют иммунологические показатели пациента и при отсутствии уропатогенных бактерий в секрете простаты или в постмассажной моче, содержании Т-лимфоцитов (CD3+)>64,0%, NK-клеток (CD16+/CD56+)<12,6%, T-супрессоров (CD3+/CD8+)>29,0%, T-NK клеток (CD3+/CD 16+/CD 56+)>8,8%, иммунорегуляторном индексе <1,29 диагностируют абактериальный простатит.