СПОСОБ КРИОГЕННОГО ЛЕЧЕНИЯ Российский патент 2011 года по МПК A61B18/02 

Изобретение относится к медицине, в частности к медицинской криологии, и может быть использовано для криотерапии и криохирургии воспалительных, опухолевых, в том числе и в первую очередь злокачественных очагов, рубцов, дискератозов, всех папилломавирусных манифестаций, ожогов, кожных заболеваний, трофических изменений, для стерилизующих воспалительные очаги любой этиологии и первично-инфицированные раны криовоздействий, для регенеративных, закаливающих и иммуностимулирующих криогенных воздействий на кожу и слизистые оболочки, точечной и плоскостной криорефлексотерапии во всех областях клинической медицины.

Лечебные методы медицинской криологии, предполагающие низкотемпературное воздействие на патологические очаги и ткани, охваченные тем или иным патологическим процессом, глубокое локальное замораживание патологически измененных участков, криорефлексогенные воздействия все шире входят в повседневную клиническую практику (Третья международная научно-практическая конференция «Новое в практической медицинской криологии», ГУ РОНЦ им.Н.Н.Блохина, Москва, 2006 - в кн.: Медицинская криология под ред. д.м.н. В.И.Коченова, вып.6, Н.Новгород, 2006, 332 с.). Совершенствование технологий криогенного лечения представляет актуальную задачу.

Способов воздействия на ткани при криогенном лечении принципиально два -аппликационный (контактный) и криоорошение. При контактном способе подводят к ткани охлажденный криоаппликатор, а его охлаждают за счет циркуляции жидкого азота внутри инструмента или предварительным погружением в хладагент. Вариант контактного замораживания - пенетрационный способ, когда криоаппликатор вводят вовнутрь охлаждаемой ткани. При криоорошении обдувают ткань парами и капельками хладагента. В результате криогенного воздействия, в зависимости от места его приложения, созданной в тканях температуры, скорости ее понижения, замороженного объема и экспозиции, возникают рефлекторные, обменные, сосудистые, деструктивные, противомикробные, аналгезирующие, прерывающие патологические рефлекторные дуги, регенеративные, иммунные и другие лечебные эффекты.

В качестве аналога предлагаемого способа криогенного лечения выбран известный способ криогенного лечения путем криоорошения ткани парами жидкого азота (В.В.Шенталь и др. Практическая криохирургия, Москва, 1995. С.21-22). Однако способ не обеспечивает достаточно интенсивной теплопередачи, пары жидкого азота плохо входят в механический и тепловой контакт с тканью, жидкий азот отталкивается от ткани, собирается в шарики и скользит по поверхности, как ртуть, площадь истинной теплопередачи у каждой капельки очень мала и она постоянно находится в движении по поверхности ткани. Азот не впитывается тканевыми жидкостями, так как не растворяется в воде. Отсутствует целенаправленное подведение к патологическому очагу сжиженного кислорода или озонированного кислорода в процессе криовоздействия для ускорения процесса охлаждения, способ не дает эффекта криооксикавитации на поверхности патологической ткани, криооксипропитывания. Способ не обеспечивает внутритканевых терапевтических и деструктивных кислородных и озонокислородных эффектов.

В качестве аналога предлагаемого изобретения выбран способ криогенного лечения, включающий нанесение жидкого азота непосредственно на опухоль, после создания вокруг нее углубления из пропитанных воском салфеток, пришитых к коже (J.C.A.Goncalves. В кн.: Достижения криомедицины. Международный симпозиум. С-Птербург, 2001, с.95-99). При этом жидкий азот в большом количестве, слоем расположенный на опухоли, кипит и обеспечивает замораживание и деструкцию патологической ткани. Однако между тканью и жидким азотом возникает прослойка нетеплопроводного испарившегося газа, этим затрудняется теплопроводность, снижается эффективность замораживания, способ не обеспечивает точности криоповреждения, криооксикавитации на поверхности патологической ткани, криооксипропитывания и криооксипроведения веществ в ткань, привнесение в арсенал лечебных механизмов криогенного лечения внутритканевых терапевтических и деструктивных кислородных и озонокислородных эффектов

В качестве прототипа предлагаемого изобретения выбран способ криогенного лечения патологических очагов, включающий нанесение на кончик активного криоаппликатора капли жидкости (раствор с высоким поверхностным натяжением), согревание этой капли на пламени спиртовки, поднесение теплой капли жидкости на кончике аппликатора к патологической ткани и замораживание очага через обледеневающую между аппликатором и поверхностью ткани жидкость (В.И.Коченов и соавт. Способ криодеструкции патологических образований. Патент РФ №№2237449. БИ №28, 10.10.2004). Однако жидкость выполняет в этом способе только роль теплопроводной уплотняющей, обеспечивающей механическую связь прослойки, которая, замерзая, становится твердым телом и обхватывает криоаппликатор, препятствуя его отторжению от охлаждаемой ткани после достижения им крайне низкой температуры, при которой отсутствует адгезия. При крайне низких температурах теплопроведение и между аппликатором и льдом, между тканью и льдом ухудшается, лед прослойки превращается в снег. Поэтому эффективность замораживания оказывается ограниченной. Способ не обеспечивает целенаправленное подведение к патологическому очагу сжиженного кислорода или озонированного кислорода в процессе криовоздействия для ускорения процесса охлаждения, не дает эффекта криооксикавитации на поверхности патологической ткани, криооксипропитывания, криооксипроведения веществ в ткань, отсутствуют внутритканевые кислородные повреждающие и регенеративные эффекты криогенного воздействия. Лечебные механизмы не включают внутритканевые терапевтические и деструктивные кислородные и озонокислородные эффекты.

Задачей предлагаемого изобретения является улучшение результатов криогенного лечения, улучшение теплопередачи между криоаппликатором, каплями хладагента и тканями, обеспечение криооксикавитации на поверхности патологической ткани, криооксипропитывания и криооксипроведения веществ в ткань, привнесение в арсенал лечебных механизмов криогенного лечения новых внутритканевых терапевтических и деструктивных кислородных и озонокисдородных эффектов.

Поставленная задача в известном способе криогенного лечения, включающем локальное замораживание патологических тканей, очагов, рефлексогенных зон, дополнительно наносят жидкий кислород или жидкий озонированный кислород, криоконденсирующийся на охлажденном криоаппликаторе и на нетеплоизолированной канюле криоинструмента при температуре их поверхности ниже температуры сжижения атмосферной фракции кислорода из воздуха, ниже температуры сжижения кислорода из обогащенного кислородом воздуха или озонированного кислорода воздуха, ниже температуры пассивного сжижения кислорода или озонированного кислорода, при этом осуществляют аппликационное (пенетрационное) локальное замораживание, располагая рабочую часть криоинструмента в этих газовых средах в момент криогенного лечения; либо наносят жидкий кислород или жидкий озонированный кислород, сжижающийся на каплях сжиженного газа или смеси сжиженных газов с температурой ниже температуры сжижения кислорода или озонированного кислорода, осуществляют капельное криоорошение патологического очага ими при прохождении их капель к ткани через воздух, обогащенный кислородом или озонированным кислородом или озонированный кислород над патологическим очагом; либо погружают пористую рабочую часть криоинструмента, рабочую часть, снабженную капиллярными отверстиями, полостями и углублениями, в непосредственно в жидкий кислород или жидкий озонированный кислород и переносят их на криоаппликаторе в виде слоя или капли или непосредственно в пористой части криоинструмента, в капиллярных отверстиях, полостях, углублениях на ткань; либо осуществляют криоорошение ткани жидким кислородом или озонированным кислородом - осуществляют дополнительное локальное замораживание, впитывание кислорода и озонированного кислорода, криооксикавитацию, криооксипропитывание и проведение вглубь ткани веществ, растворенных в сжиженном кислороде, предварительно нанесенных на патологический очаг или криоинструмент.

Способ отвечает критерию изобретения «новизна», так как в результате проведенных патентно-информационных исследований не выявлены источники, порочащие новизну предлагаемого способа.

Предлагаемый способ отвечает критерию изобретения «изобретательский уровень», так как не выявлено наличие использования существенных отличий предлагаемого способа в аналогичных решениях.

Способ основан на реализации не описанных ранее закономерных и объективно реализующихся физических явлений пассивной криооксиконденсации - сжижении из воздуха кислорода и озонированного кислорода на поверхности других предметов и капелек жидких газов, имеющих температуру ниже отметки сжижения кислорода и озонированного кислорода. Эффект видимого сжижения из воздуха кислорода при работе с криогенными аппаратами стал известен только после создания портативного криогенного аппарата «Ледок» по доктору В.И.Коченову, благодаря его конструктивным особенностям.

Способ апробирован в экспериментальных лабораториях НИИ ПФМ ГОУ ВПО НижГМА Минздравсоцразвития России, лаборатории медицинской криологии кафедры оперативной хирургии ГОУ ВПО НижГМА Минздравсоцразвития, Центре медицинской криологии «онКолор» после изготовления соответствующих моделей криоинструментов и озонокислородного оборудования в экспериментальных криогенных операциях у животных (25 крыс) с перевивными злокачественными опухолями (лимфосаркома Плисса), у пациентов при криотерапии тонзиллита (25 пациентов), фарингита (14), аллергического ринита (32), ожогов (3), псориаза (12), бородавок (46), фибром кожи (7), базальноклеточного рака кожи (9), рака гортани (2), губы (3), омолаживающей криотерапии кожи лица (7), криорефлексотерапии люмбалгий (6), криорефлексотерапии при психотерапии аддикций (12).

Предлагаемый способ обеспечивает:

- улучшение по всем параметрам результатов криохирургического и криотерапеватического лечения опухолевых, воспалительных, аллергических заболеваний, криорегенеративных и криорефлексогенных лечебных воздействий,

- улучшение теплопередачи при аппликационных криовоздействиях с адгезией, без адгезии и капельном криоорошении за счет обеспечения вступления в непосредственный контакт с замораживаемой патологической тканью жидкого кислорода или жидкого озонированного кислорода,

- способ позволяет реализовать кавитацию сжиженного кислорода или озонированного кислорода на поверхности еще теплой ткани, что обеспечивает наиболее интенсивное и быстрое замораживание,

- способ обеспечивает кипение сжиженного кислорода или озонированного кислорода по пленочному типу на уже замороженной ткани, при этом процессе наиболее активно отнимается тепло от ткани, ускоряется процесс ее глубокого локального замораживания, усиливается деструкция,

- способ обеспечивает вхождение сжиженного кислорода или озонированного кислорода в микротрещины в замороженной ткани через разорванные кристаллами льда клеточные мембраны, проникновение в замороженную ткань, увеличивая глубину и скорость охлаждения,

- способ реализует поглощение кислорода и озона всеми тканевыми жидкостями, так как кислород в отличие от азота растворим в воде,

- обеспечивает на поверхности криоинструмента и на каплях криогенного газа не только возникновение жидкого озона в смеси с жидким кислородом, но и сохранение его вплоть до реализации окислительного потенциала внутри ткани, увеличивается время до распада молекул озона,

- способ дает возможность увеличивать концентрацию озона в озонокислородной смеси по сравнению с газообразной озонокислородной фракцией, сжижение которой происходит при реализации способа,

- способ обеспечивает насыщение различными аллотропными формами кислорода, в т.ч. активными (т.е. с неспаренным электроном на внешнем слое), в поврежденных тканях активно запускаются окислительные процессы, которые, прежде всего, приводят к разрыву двойных ненасыщенных углеродных связей, лежащих в основе sp2 гибридизированных атомов углерода,

- способ активирует разрушение фосфолипидов клеточных мембран и активный «выброс» эйкозаноидов, производных распада жирных полиненасыщенных кислот (в т.ч. арахидоновой), лежащих в основе любой бифосфолипидной клеточной мембраны, это приводит к повышению концентрации продуктов ее распада: простогландинов, лейкотриенов, тромбоксанов, фактора активации тромбоцитов, других эйкозаноидов, являющихся билогически активными липидами, в начальной фазе воспаления, прежде всего, выполняющих функцию активных хемоатрактантов для большинства форм лейкоцитов (факторов, способствующих хемотаксису, выходу лейкоцитов из сосудистого русла в поврежденные ткани), этот обеспечивает ускорение хемотаксиса, приводящего к сокращению периода вторичной альтерации, с быстрейшей локализацией очага криодеструкции в организме, ускорение формирования фагоцитарного вала,

- запускаемые способом перечисленные процессы ускоряют перевод воспалительного процесса в репаративную фазу, что отмечено в экспериментах на животных и наблюдалось клинически,

- после реализации способа в условиях криооксигенации замороженной ткани возможно образование новых биологически активных производных липидов, несущих особую функциональную нагрузку,

- при заживлении после реализации способа при самом фагоцитозе:

а) ускоряются процессы, зависящие от присутствия кислорода, прежде всего, фаза фагоцитоза, называемая «респираторным взрывом»,

б) клеточные и макромолекулярные структуры при таком виде разрушения утрачивают свою нативность (биологическую функциональность), следовательно, снижается токсигенная нагрузка на фагоциты, это обуславливает их малый процент гибели, высокую фибринолитическую активность, а активность наоборот фибробластов ингибируется аэробной средой (основным фактором активации фибробластов служат именно анаэробные условия, возникающие при воспалительном процессе),

- криооксипропитывание предупреждает образование фибриллярно коллагеновых соединительнотканных рубцовых структур и замещение ими функциональных клеток паренхимы, т.е. репаративный процесс при данном виде воздействия приобретает направленность к полному функциональному восстановлению участка криодеструкции,

- способ обеспечивает индукцию механизмов апоптоза опухолевых клеток, генерализацию иммунного противоопухолевого ответа с формированием специфических эффекторов клеточного и гуморального звена, стимуляцию естественных факторов противоопухолевой защиты организма при сочетании следующих факторов за счет:

1) одномоментности разрушения всех и клеточных, и внутриклеточных мембран,

2) массивного выплеска аутоантигенов содержимого ядер опухолевых клеток в межклеточное пространство,

3) разрушения мембран митохондрий и выброс митохондриального содержимого в том числе ферментов: цитохрома С и СДГ в клеточный матрикс и за пределы клетки,

4) того, что сжиженный озон успевает прореагировать с тканевыми структурами и оказывается способен запустить каскадные свободнорадикальные и окислительные процессы, приводящие к формированию активных Т-зависимых опухолевых антигенов, в том числе антигенов из мембранного комплекса опухолевых клеток,

5) отрыва озоном тяжелых аминокислотных остатков, линейных участков мембранных белков опухолевых клеток, прежде всего липофильных аминокислот - фенилаланина, тирозина, триптофана и гистидина, они окисляются до аланина, глицина и валина, создавая уникальные стектурные участки (с отличной последовательностью аминокислот), имеющие ярко выраженную, в том числе и Т-зависимую антигенность,

6) этот механизм заставляет сработать Т-рецептор без антигенпредставляющих клеток с последующей клоноспецифичной пролиферативной дифференцировкой клоноспецифических Т-киллерных лимфоцитов, которые по принципу меньшей аффинности (меньшего сродства, комплиментарности соединения) реагируют на присутствие растворенных и корпускулярных форм мембранных опухолевых белков рецепторного комплекса опухолевой клетки по всему организму, т.е. на мембране опухолевой клетки, где бы она ни находилась, так и на растворенную форму антигенов этих белков по всему организму.

Таким образом, для онкологии предлагаемый способ обеспечивает:

- повышение радикальности повреждающего эффекта криодеструкции злокачественной патологической ткани, полное отсутствие не чувствительных к криооксиразрушению и криоозонодеструкции морфологических форм опухолей;

- абластичность - не только путем фиксации злокачественных клеток в куске льда, фиксации непосредственными последующими физиологическими тканевыми реакциями на глубокое локальное замораживание первичной опухоли (отечность вокруг очага, тромбоз внутри опухоли, нежизнеспособность злокачественных клеток в очаге), но после криоозонодеструкции - и запуск новых механизмов активного поиска и уничтожения таких же злокачественных клеток во всем организме;

- появляется возможность, направлять повреждающий эффект сразу в центр опухолевой ткани, где в наименьшей мере срабатывают лучевое лечение и химиотерапия, причем во многом как раз из-за гипоксии в центре злокачественной опухоли;

- возможность потенцирования лучевых повреждений и химиотерапии непосредственным предварительным замораживанием с кислородным насыщением;

- антигенобразующий эффект криооксиозонодеструкции опухоли с индивидуализированной противоопухолевой иммунной реакцией дает возможность надеяться на излечение генерализованных форм злокачественных опухолей как после криоозонодеструкции первичного очага, так и метастазов,

- сама операция криооксиозонодеструкции основного опухолевого узла или метастаза превращается в противоопухолевую вакцинацию;

- ускорение некротизирования и отторжения разрушенного криооксиозонодеструкцией опухолевого очага с минимальными функциональными и тканевыми дефектами.

Примеры, подтверждающие возможность применения изобретения

Пример 1

Пациентка О.Г.В. 18 лет, а.к. №359, обратилась в Центр медицинской криологии «онКолор» с диагнозом хронический тонзиллит, частые ангины, гранулезный фарингит.

15.02.2008. Произведена криоокситерапия небных миндалин. После орошения слизистой оболочки глотки 10% лидокаином использование криогенного аппарата «Ледок» и криораспылителя из набора инструментов для медицинской криологии по доктору В.И.Коченову при ороскопии при подведении газообразного кислорода в полость рта и глотки пациентки по трубке, укрепленной на шпателе, произведена криоокситерапия. Произвели орошение слизистой глотки и промывание лакун миндалин 0,25% раствором хлоргексидина биглюконата, после чего просили пациентку не глотать. Аппликатор и нетеплоизолированную дистальную часть канюли с диаметром 4 мм охладили за счет циркуляции жидкого азота внутри рабочей части инструмента ниже минус 182°С, ввели в полость рта, где на поверхности канюли и аппликатора появилась видимая пленка пассивно сжиженного кислорода, имеющая тенденцию собраться в каплю на криоаппликаторе, вследствие того, что дистальную часть канюли держали постоянно немного наклоненной вниз. Осуществили множественные аппликации в течение 1 сек, прикасаясь каплей пассивно сжиженного кислорода к измененным участкам на поверхности небных миндалин, с перерывами, когда возникал рвотный рефлекс. Всего 10 аппликаций. В момент прикосновения к миндалинам капля пассивно сжиженного кислорода моментально исчезала, как бы впитывалась тканью небных миндалин, на месте прикосновения оставалась зона замораживания диаметром 5-6 мм, самопроизвольно исчезающая за 10-15 сек. Такие же аппликации каплей пассивно сжиженного кислорода нанесены и на каждую лимфоидную гранулу на задней стенке глотки. Следующим этапом произведено замораживание наиболее выступающих гранул задней стенки глотки и устьев крипт небных миндалин капельным распылением жидкого азота, причем между направляющей трубкой распылителя и поверхностью ткани оставляли расстояние в 1 см, заполненное газообразным кислородом. Всего 7 криоорошений в разных участках.

Назначены полоскания с отварами трав.

После лечения самочувствие пациентки оставалось хорошим, температура не поднималась, 3 дня на слизистой глотки отмечалось наличие участков, покрытых фибринозным налетом в тех местах, где прикасались аппликатором с каплей пассивно сжиженного кислорода. Трудоспособность нарушена не была. При глотании - ощущение инородного тела исчезло на 4 день.

Наблюдение в течение 9 месяцев - боли в горле отсутствуют, интоксикации нет, обострений не было. При осмотре отмечено исчезновение лимфоидных бляшек задней стенки глотки, гиперемии небных миндалин и дужек.

Пример 2

Больная Б.Т.С. 58 лет, а.к. №780, обратилась в Центр медицинской криологии «онКолор» с морфологически подтвержденным диагнозом - плоскоклеточный рак кожи носа. При осмотре - язвенная поверхность с утолщением по краю на спинке и скате носа неправильной формы диаметром 8 мм. Криооксидеструкция 5.09.07 - местная анестезия орошением 10% лидокаином. Осуществлено 5 циклов замораживания-оттаивания патологической ткани до выхода зоны замораживания на 5 мм за пределы видимых изменений. Причем два цикла осуществили путем проведения капельного криораспыления на патологическую ткань, причем соосно струе капелек жидкого кислорода направляли поток газообразного кислорода. Воздействовали импульсно по 2-3 сек с перерывами в 3-5 сек, многократно в каждой точке. В двух циклах замораживания-оттаивания использовали аппарат «Ледок» с канюлей диаметром 8 мм и плоским криоаппликатором. Аппликатор приводили в контакт с тканью только после того, как в результате охлаждения рабочей части инструмента за счет циркуляции жидкого азота внутри его полостей при нахождении рабочей части рядом с опухолью в операционном поле при обдувании его газообразным кислородом на аппликаторе появлялся слой видимого, внешне похожего на влагу, пассивно сжиженного кислорода. Прикасались к поверхности опухолевой язвы слоем пассивно сжиженного кислорода многократно до достижения зоны замораживания нужных размеров.

Отечность, тромбозы в разрушенной ткани появились уже в ходе криооксидеструкции. Повязка не накладывалась. Назначена обработка настойкой календулы. Влажный крионекроз с четкой демаркационной линией сформировался за 3 часа, высыхание крионекротического участка произошло за 4 дня, регенерация кожи под крионекрозом за 18 дней. На месте опухоли едва заметный светлый участок. Наблюдение более года - рецидива, метастазов нет.

Пример 3

Криоозоновая деструкция осуществлена нами в экспериментальном исследовании на 25 животных (лабораторные крысы - нелинейные, самцы) с перевивной экспериментальной опухолью лимфосаркомой Плисса. Криооксидеструкцию и криоозонодеструкцию производили на 16-й день после перевивки штамма опухолевых клеток (введения гомогената опухолевых клеток в объеме 1 см³ животным подкожно в паховую область правой нижней конечности). При соблюдении равномерности по массе и по наличию пальпируемых метастазов объем первичного опухолевого ассоциата составлял 25-30 см³, животные с соблюдением равномерности распределения по объему развившегося поражения в группах были распределены на три группы: 1) контрольная (5 животных), в которой лечения не проводилось; 2) экспериментальная группа (10 животных) - осуществлена криооксидеструкция со сжижением кислорода атмосферного воздуха с помощью аппарата «Ледок» с нетеплоизолированной канюлей диаметром 8 мм из набора по В.И.Коченову; 3) экспериментальная группа (10 животных) - осуществлена криооксиозонодеструкция со сжижением с помощью аппарата «Ледок» озонокислородной смеси и введением ее в опухоль (криодеструкция с подведением к рабочей части криоаппарата «Ледок» озонированного кислорода и сжижением его на максимально охлажденной канюле и аппликаторе).

Методика криодеструкции. Применяли эфирный наркоз. В ходе криодеструкции осуществляли на первом этапе чрезкожное аппликационное глубокое замораживание с адгезией и сжижением кислорода воздуха или озонокислородной смеси (в разных группах), затем рассечение полуоттаявших тканей с проникновением в середину опухолевого узла, затем не менее чем двукратное повторение цикла замораживания-оттаивания с введением капелек сжиженного на криоинструменте кислорода или озонированного кислорода вовнутрь опухоли, стремились к полному охвату очага зоной замораживания. Длина трубки подачи озонокислородной газообразной смеси от озонатора кислорода к аппликатору составляла 40 см.

Выживаемость, клинические наблюдения, результаты морфологических исследований

1 контрольная группа - все животные погибли на 16-25 день после перевивки, первичная опухоль взята на морфологическое исследование. При вскрытии уже на 16 день наблюдались многочисленные метастатические тяжи вдоль позвоночного столба, в области межреберий, у двух животных на момент наблюдались пальпируемые метастатические очаги объемом 1-2 см³ в районе шейных лимфатических узлов, у четырех животных контрольной группы на 18-21 день в центральной части первичной опухоли наблюдалось образование очага некроза до 1.5 см в диаметре и до 2,5 см в глубину.

Гистологическое исследование выявило, что в первой группе животных опухоль представляла собой массив мономорфных опухолевых клеток с наличием большого количества митозов (наличие активного развития неопластического процесса), выраженный инфильтративный рост в окружающие опухоль мышцы, причем мышечные волокна атрофировались с эффектом растворения.

Во 2 экспериментальной группе крыс - одно животное погибло сразу после криодеструкции из-за кровотечения. У 9 животных наблюдались активные некротические процессы в опухоли с положительным репаративным исходом. На 10-й день после криооксидеструкции (26 день после перевивки) у одного животного взят материал из опухоли для морфологического исследования.

Морфологически выявлено присутствие полей опухолевых клеток с наличием многочисленных зон некроза, имеются участки, где просматриваются лишь островки опухолевых клеток, заключенных в некротизированные массы.

Оставшиеся 8 животных 2 группы прожили от 41 до 56 дней после криооксидеструкции. Вскрытие погибших животных показало полную деструкцию первичного опухолевого очага, отторжение с восстановлением кожного покрова и брюшной стенки, выявило наличие мелких метастатических узлов 1-2 мм в районах позвоночного столба, легких, в районе ворот печени, пальпируемые узлы объемом 1-3 см³ наблюдались у двух животных в шейных лимфатических узлах. Средняя продолжительность жизни 8 животных составила 48 после воздействия и 64 дня после перевивки.

В 3-й экспериментальной группе крыс в ходе применения криооксиозонодеструкции отмечено наиболее активное поглощение жидкой озонокислородной смеси биологической тканью, опухолевая ткань сразу после оттаивания приобретала желеобразную консистенцию, изменения цвета, плотности после оттаивания ткани были видны в ране сразу.

Одно животное погибло во время операции от наркоза.

У 5 животных - они были выделены в особую подгруппу (3а), зоной замораживания по техническим причинам не удалось охватить весь объем первичного опухолевого очага, зона замораживания не вышла за пределы опухоли, в среднем у каждого из 5 животных осталось от 7 до 12 см³ незамороженной опухолевой ткани по внутреннему краю и периметру первичного опухолевого ассоциата. У одного из животных из 3а подгруппы на 12-й день после криовоздействия перестали пальпироваться метастазы в области шейных лимфатических узлов. После завершения активных некротических процессов в центральной части опухоли, наблюдавшихся на протяжении 10-12-ти дней после криовоздействия, по периметру первичной опухоли остались участки не подвергшейся криовоздействию опухолевой ткани, на протяжении последующих 10-13-ти дней объем оставшейся опухолевой ткани практически не изменялся, визуально наблюдалось исчезновение инфильтрации в окружающие мышечные ткани бедра и брюшной стенки. На 21-25-й день после частичной криооксиозонодеструкции недоразрушенная первичная опухоль у всех 5-ти животных подгруппы 3а инкапсулировалась, наблюдалась ярко выраженная экспансивность первичного опухолевого ассоциата. На 23-й день у одного животного из подгруппы 3а были взяты образцы остатков первичной опухоли, опухоль по внешнему краю была заключена в капсулу из соединительной ткани!.

Морфологическое заключение: исследование выявило многочисленные зоны некроза опухолевых клеток при наличии резких расстройств кровообращения в виде полнокровия сосудов и множественных кровоизлияний. Изучая характер изменения опухолевых клеток, следует отметить выраженные дегенеративные изменения как цитоплазмы, так и ядер, причем в части случаев можно подозревать изменения опухолевых клеток по типу апоптоза (фрагментация ядер, пикноз).

У остальных 4 животных зона замораживания при криоозонодеструкции практически совпала с пальпируемыми границами опухоли. У одного животного были взяты образцы опухолевой ткани на 10 день после криовоздействия.

Описание: в препаратах признаков наличия опухолевого роста нет. Значительное количество соединительной ткани - вновь образованные фиброзные волокна на месте зон некроза.

Одно из 7 оставшихся в живых в группах 3 и 3а животных погибло на 60-й день после криовоздействия, при вскрытии опухолевых очагов не обнаружено. Оставшиеся животные прожили 90 дней после криовоздействия, после чего наблюдение за ними прекратилось, опухолевых очагов у них при вскрытии не обнаружено.

Выводы.

Таким образом, после криооксидеструкции метастазировавших сарком Плисса отмечался хороший эффект элиминации первичного очага и увеличение продолжительности жизни животных при сохранении метастазов.

Криоозонодеструкция только первичного очага, причем у нескольких животных частичная, дала при метастазировавшей саркоме Плисса у животных полный генерализованный лечебный эффект, было констатировано излечение у 7 животных в 3-й экспериментальной группе.

Результаты эксперимента позволяют сделать вывод о вероятном возникновении в результате криоозонодеструкции первичного очага метастазировавшей злокачественной опухоли общего иммунного противоопухолевого эффекта.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для криогенного лечения. Для этого при проведении криогенного лечения дополнительно проводят аппликационное локальное замораживание патологических тканей, очагов, рефлексогенных зон с помощью нанесения капель сжиженного кислорода или озонированного кислорода. При этом капли указанных газов получают охлаждением поверхности криоаппликатора до температуры ниже температуры сжижения этих газов, располагая рабочую часть криоинструмента в этих газовых средах. Либо аппликационное замораживание осуществляют капельным криорошением при прохождении к ткани через обогащенный кислородом или озонированным кислородом воздух или озонированный кислород над патологическим очагом. Либо погружают пористую рабочую часть криоинструмента в эти газы и переносят на криоаппликаторе в виде слоя или капли на ткань. Способ позволяет улучшить результаты криогенного лечения, ускорить процесс глубокого локального замораживания, усилить деструкцию за счет вхождения сжиженных газов в микротрещины в замороженной ткани, активно запустить окислительные процессы, активировать разрушение фосфолипидов клеточных мембран и активный «выброс» эйкозаноидов.

Способ криогенного лечения, включающий локальное замораживание патологических тканей, очагов, рефлексогенных зон, отличающийся тем, что дополнительно наносят жидкий кислород или жидкий озонированный кислород, криоконденсирующийся на охлажденном криоаппликаторе и на нетеплоизолированной канюле криоинструмента при температуре их поверхности ниже температуры сжижения атмосферной фракции кислорода из воздуха, ниже температуры сжижения кислорода из обогащенного кислородом воздуха или озонированного кислорода воздуха, ниже температуры пассивного сжижения кислорода или озонированного кислорода, при этом осуществляют аппликационное (пенетрационное) локальное замораживание, располагая рабочую часть криоинструмента в этих газовых средах в момент криогенного лечения; либо наносят жидкий кислород или жидкий озонированный кислород, сжижающийся на каплях сжиженного газа или смеси сжиженных газов с температурой ниже температуры сжижения кислорода или озонированного кислорода, осуществляют капельное криоорошение патологического очага ими при прохождении их капель к ткани через воздух, обогащенный кислородом или озонированным кислородом или озонированный кислород над патологическим очагом; либо погружают пористую рабочую часть криоинструмента, рабочую часть, снабженную капиллярными отверстиями, полостями и углублениями, в непосредственно жидкий кислород или жидкий озонированный кислород и переносят их на криоаппликаторе в виде слоя или капли или непосредственно в пористой части криоинструмента, в капиллярных отверстиях, полостях, углублениях на ткань; либо осуществляют криоорошение ткани жидким кислородом или озонированным кислородом, осуществляют дополнительное локальное замораживание, впитывание кислорода и озонированного кислорода, криооксикавитацию, криооксипропитывание и проведение вглубь ткани веществ, растворенных в сжиженном кислороде, предварительно нанесенных на патологический очаг или криоинструмент.