СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХЛОРОФИЛЛИПТА Российский патент 2011 года по МПК A61K36/61 B01D11/02 

Настоящее изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения хлорофиллипта, используемого в медицинской практике в качестве антибактериального средства.

Хлорофиллипт получают в виде сухого или густого экстрактов из листьев эвкалипта шарикового (эвкалипта голубого) - Eucalyptus globulus Labill. или эвкалипта прутовидного - Eucalyptus viminalis Labill., семейство миртовые - Myrtaceae. Основными биологически активными веществами препарата являются липофильные вещества: смесь эуглобалей (фенолоальдегидов), терпеноидов и хлорофиллов (Куркин В.А. «Фармакогнозия», Самара, ООО «Офорт», 2004 г., с.327-333).

На основе спиртовых экстрактов, получаемых из листьев эвкалипта, в бывшем СССР, в России и за рубежом (Украина) были разработаны и получили широкую известность такие препараты, как Хлорофиллипта раствор масляный 2%, Хлорофиллипта раствор спиртовой 0,25% и 1%, Хлорофиллин-ОЗ и др. (Государственный реестр лекарственных средств, М., 2008 г., стр.74, 504, 991).

Известен способ получения хлорофиллипта, описанный в патенте РФ №2320360, МПК А61К 36/61, публ. 2008 г., заключающийся в том, что для его производства используют листья эвкалипта прутовидного, которые экстрагируют 96% этиловым спиртом, спиртовое извлечение упаривают до небольшого объема и ведут очистку кубового остатка 4% раствором сернокислой меди, предварительно разбавив водой, после чего чистый хлорофиллипт извлекают бензолом, бензольное извлечение промывают водой и упаривают. Затем полученный густой остаток обрабатывают 96% этиловым спиртом для удаления остатков бензола и высушивают. Выход готового продукта, содержащего до 10% влаги, составляет 6,5-7,0% от массы воздушно-сухого сырья.

Недостатками этого способа являются: недостаточно высокий выход готового продукта по сравнению с содержанием экстрактивных веществ в растительном сырье, использование высокотоксичного растворителя - бензола и образование длительно расслаивающихся эмульсий (до 6 часов). Кроме этого, при переработке ряда партий растительного сырья, как показали результаты экспериментальной проверки, не всегда получали готовый продукт с требуемой антибактериальной активностью.

Наиболее близким является способ получения хлорофиллипта, включающий измельчение листьев, экстракцию этиловым спиртом, разделение твердой и жидкой фаз, упаривание спиртового извлечения, обработку кубового остатка раствором сернокислой меди и органическим растворителем, промывку полученного извлечения водой, упаривание, удаление остатков органического растворителя и высушивание. Общий выход готового продукта, содержащего до 5% влаги, по хлорофиллам составляет 64% (Минина С.А., Каухова И.Е. «Химия и технология фитопрепаратов, М., изд-во «ГЭОТАР-МЕД», 2004 г., стр.287-289).

Недостатками этого способа являются: сравнительно невысокий выход готового продукта, использование высокотоксичного растворителя - бензола и труднодоступного (экзотического) растительного сырья - листьев эвкалипта шарикового (голубого), а также возможное присутствие в готовом продукте остаточных количеств бензола.

Задачей настоящего изобретения является устранение указанных недостатков, повышение выхода готового продукта и разработка более экологичного технологического процесса без снижения качества готового продукта.

Для этого в способе получения хлорофиллипта из листьев эвкалипта, включающем измельчение листьев, экстракцию этиловым спиртом, разделение твердой и жидкой фаз, упаривание спиртового извлечения, обработку кубового остатка раствором сернокислой меди и органическим растворителем, промывку полученного извлечения водой, упаривание и удаление остатков органического растворителя, предложено обработку кубового остатка осуществлять 8% водным раствором сернокислой меди, а в качестве органического растворителя использовать хлороформ. При этом смесь кубового остатка и 8% водного раствора сернокислой меди охлаждают до комнатной температуры, затем в нее подают хлороформ, перемешивают и отстаивают до расслоения на фазы, последние разделяют, а водную фазу экстрагируют, по меньшей мере, четыре раза хлороформом при перемешивании. Все хлороформные извлечения объединяют, промывают однократно водой, после этого обрабатывают 8% водным раствором сернокислой меди и затем промывают водой, упаривают до густого состояния, а остатки хлороформа удаляют путем добавления этилового спирта, полученный спиртовой концентрат доупаривают в вакууме до полного удаления этилового спирта.

Кроме того, предложено измельченное растительное сырье экстрагировать пятикратно 95% или 80% этиловым спиртом при соотношении сырье:экстрагент при первом контакте фаз 1:(3,6-4,3), при этом первое, второе и третье спиртовые извлечения направлять на упаривание, а четвертое и пятое спиртовые извлечения направлять на экстрагирование свежего растительного сырья.

Разработанный способ получения хлорофиллипта позволяет повысить выход готового продукта, получать готовый продукт стабильного качества, соответствующий нормативной документации (НД), а также полностью исключить бензол из производства, что повышает его экологическую привлекательность.

Изучение роли катионов Cu⁺² при получении хлорофиллипта определило необходимость использования менее концентрированного - 8% раствора сернокислой меди вместо 10% раствора (по прототипу). Было установлено также, что двукратная обработка полупродуктов, получаемых в производстве хлорофиллипта, 8% водным раствором сернокислой меди обеспечивает более полную очистку препарата от балластных веществ, а также способствует эффективному насыщению его катионами меди, что приводит к повышению антибактериальной активности и ее стабильности. Антибактериальная активность хлорофиллипта при данной обработке повышается до 3,125-6,25 мкг/мл.

Способ реализуется следующим образом.

Измельченные листья эвкалипта экстрагируют пятикратно 95% этиловым спиртом при комнатной температуре методом настаивания, при этом первое, второе и третье спиртовые извлечения направляют на упаривание в вакууме до ~5% от первоначального объема объединенного спиртового извлечения.

Четвертое и пятое спиртовые извлечения используют при первой и второй экстракции свежего сырья в этом же или в другом экстракторе.

Кубовый остаток - упаренное спиртовое извлечение смешивают последовательно с 8% водным раствором сульфата меди и хлороформом, отделяют органическую фазу, после чего водную фазу обрабатывают четырехкратно хлороформом. Объединенное хлороформное извлечение промывают водой, вновь обрабатывают 8% водным раствором сульфата меди, после чего очищенное хлороформное извлечение вновь промывают водой и направляют на упаривание до густого состояния. К кубовому остатку добавляют порциями этиловый спирт и отгоняют из него остатки хлороформа. Получают хлорофиллипт - густой экстракт из листьев эвкалипта с потерей в массе при высушивании до 20%, соответствующий ФСП 42-8556-07 с выходом 10,46% от массы воздушно-сухого измельченного растительного сырья.

Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.

Измельченное сырье (размер частиц 5 мм, потеря в массе при высушивании 14%) в количестве 70 кг экстрагируют пятикратно 95% этиловым спиртом при комнатной температуре методом настаивания. Продолжительность каждой экстракции составляет 8 ч. На первую экстракцию сырья подают 300 л экстрагента, на последующие - в количестве, равном слитому предыдущему извлечению (в среднем по 220 л). Первое, второе и третье спиртовые извлечения последовательно выводят на следующую стадию процесса - упаривание. Четвертое и пятое спиртовые извлечения используют для экстрагирования свежей порции сырья.

Спиртовые извлечения упаривают в вакууме до густого состояния - 34 л (~5% от первоначального объема трех извлечений), при этом содержание сухого остатка в кубовом остатке составляет около 40%.

К горячему кубовому остатку, содержащему экстрактивные вещества и представляющему собой густоватую неоднородную жидкость с включением смолистых частиц, приливают при перемешивании 11 л 8% водного раствора сернокислой меди, перемешивают в течение 1-2 мин, после чего охлаждают полученную смесь до комнатной температуры. Затем к охлажденной смеси приливают 22 л хлороформа, перемешивают и оставляют до расслоения на фазы. Затем фазы разделяют. Хлороформную фазу направляют на следующую стадию, а водную фазу обрабатывают еще четыре раза хлороформом при перемешивании. На каждую экстракцию подают по 16 л хлороформа. Продолжительность каждой обработки составляет 10 мин, а отстаивания - 1 час.

Все хлороформные извлечения объединяют (получают 86 л) и промывают однократно 26 л воды (~30% от его объема). Продолжительность перемешивания извлечения с водой составляет 10 мин, а отстаивания - 1 час.

Промытое водой хлороформное извлечение обрабатывают 14 л 8% водного раствора сернокислой меди, при этом продолжительность перемешивания составляет 30 мин, а отстаивания - 2 часа. Отработанный раствор сернокислой меди используют вторично на этой же стадии в следующей загрузке, после чего используют однократно на стадии первичной обработки горячего кубового остатка, полученного после упаривания спиртового извлечения, в последующих загрузках.

Очищенное хлороформное извлечение вторично промывают 26 л воды (~30% от его объема). Продолжительность перемешивания очищенного извлечения с водой составляет 15 мин, а отстаивания - 1 час.

Промытое водой хлороформное извлечение (84 л) упаривают в вакууме до густого состояния - «смолки», после чего полностью удаляют остатки хлороформа путем добавления к «смолке» ~30 л этилового спирта несколькими порциями. Получают ~15 л спиртового концентрата, который доупаривают в вакууме до полного удаления этилового спирта. Получают 7,32 кг густого экстракта - хлорофиллипта с потерей в массе при высушивании 19,0%, соответствующего ФСП 42-8556-07, с выходом 10,46% от массы воздушно-сухого измельченного сырья.

Пример 2.

Способ проводят по предлагаемому способу, при этом для экстракции растительного сырья используют 80% этиловый спирт (соотношение сырье:экстрагент 1:3,6) в условиях вышеописанного технологического процесса. Получают 7,2 кг хлорофиллипта с потерей в массе при высушивании 19,0%, соответствующего ФСП 42-8556-07, с выходом 10,3% от массы воздушно-сухого измельченного сырья.

Использование предлагаемого способа в сравнении с известными обеспечивает следующие преимущества:

- увеличение выхода готового продукта на ~30%;

- полную замену на стадии жидкостной экстракции высокотоксичного бензола на менее токсичный - хлороформ (ПДК бензола в воздухе рабочей зоны составляет 5 мг/м³, а хлороформа 20 мг/м³), что улучшает экологичность технологического процесса;

- сокращение продолжительности экстрагирования сырья этиловым спиртом; сокращение объема упариваемого спиртового извлечения; исключение операции сушки густого экстракта; исключение образования значительных и длительно не расслаивающихся эмульсий, в результате сокращение общей продолжительности процесса;

- вторичное использование отработанного 8% водного раствора сульфата меди, полученного после очистки хлороформного извлечения на двух стадиях технологического процесса и, как результат, снижение расхода сырья, а также более низкие материальные затраты по всему используемому сырью;

- снижение трудозатрат на ~30%;

- стабильное качество готового продукта и более высокую антибактериальную активность;

- увеличение мощности производства минимум на 30%.

Разработанный способ проверен в промышленных условиях при переработке различных партий сырья и подтвердил вышеописанные результаты. Качество полученного продукта является стабильным и соответствует НД на препарат.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу получения хлорофиллипта, используемого в качестве антибактериального средства. Способ получения хлорофиллипта из листьев эвкалипта, включающий измельчение листьев, экстракцию этиловым спиртом, разделение твердой и жидкой фаз, упаривание спиртового извлечения, обработку кубового остатка раствором сернокислой меди и органическим растворителем, промывку полученного извлечения водой, упаривание и удаление остатков органического растворителя, при этом обработку кубового остатка осуществляют водным раствором сернокислой меди, а в качестве органического растворителя используют хлороформ, смесь кубового остатка и водного раствора сернокислой меди охлаждают до комнатной температуры, затем в нее подают хлороформ, перемешивают и отстаивают до расслоения на фазы, последние разделяют, а водную фазу экстрагируют, по меньшей мере, четыре раза хлороформом при перемешивании, все хлороформные извлечения объединяют, промывают однократно водой, после этого обрабатывают водным раствором сернокислой меди и затем промывают водой, упаривают до густого состояния, а остатки хлороформа удаляют путем добавления этилового спирта, полученный спиртовой концентрат доупаривают в вакууме до полного удаления этилового спирта. Вышеописанный способ позволяет повысить выход готового продукта стабильного качества. 1 з.п. ф-лы.

1. Способ получения хлорофиллипта из листьев эвкалипта, включающий измельчение листьев, экстракцию этиловым спиртом, разделение твердой и жидкой фаз, упаривание спиртового извлечения, обработку кубового остатка раствором сернокислой меди и органическим растворителем, промывку полученного извлечения водой, упаривание и удаление остатков органического растворителя, отличающийся тем, что обработку кубового остатка осуществляют 8%-ным водным раствором сернокислой меди, а в качестве органического растворителя используют хлороформ, при этом смесь кубового остатка и 8%-ного водного раствора сернокислой меди охлаждают до комнатной температуры, затем в нее подают хлороформ, перемешивают и отстаивают до расслоения на фазы, последние разделяют, а водную фазу экстрагируют, по меньшей мере, четыре раза хлороформом при перемешивании, все хлороформные извлечения объединяют, промывают однократно водой, после этого обрабатывают 8%-ным водным раствором сернокислой меди и затем промывают водой, упаривают до густого состояния, а остатки хлороформа удаляют путем добавления этилового спирта, полученный спиртовой концентрат доупаривают в вакууме до полного удаления этилового спирта.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что измельченное растительное сырье экстрагируют пятикратно 95%- или 80%-ным этиловым спиртом при соотношении сырье: экстрагент при первом контакте фаз 1:(3,6-4,3), при этом первое, второе и третье спиртовые извлечения направляют на упаривание, а четвертое и пятое спиртовые извлечения направляют на экстрагирование свежего растительного сырья.