ПРОИЗВОДНЫЕ МЕТАСТИНА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2011 года по МПК C07K7/06 C07K14/47 A61K38/08 A61K38/17 A61P35/04 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к производным метастина и к их применению.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Известны метастин человеческого происхождения (также называемый KiSS-1 пептид) (WO 00/24890) и метастин мышиного или крысиного происхождения (WO 01/75104). Известны также препараты с пролонгированным высвобождением, содержащие метастин (WO 02/85399).

По имеющимся сообщениям, известно, что метастин оказывает эффект по супрессии метастазирования рака и, в этой связи, эффективен с точки зрения предупреждения или лечения раковых опухолей (например, рака легкого, рака желудка, рака печени, рака поджелудочной железы, колоректального рака, ректального рака, рака толстой кишки, рака предстательной железы, рака яичника, цервикального рака, рака молочной железы, рака почки, рака мочевого пузыря, опухоли головного мозга и т.п.); метастин также оказывает эффект в отношении контроля функции поджелудочной железы и эффективен с точки зрения профилактики или лечения заболеваний поджелудочной железы (например, острого или хронического панкреатита, рака поджелудочной железы и т.п.); кроме того, метастин оказывает эффект в отношении контроля функции плаценты и, в этой связи, эффективен с точки зрения предупреждения или лечения хориокарциномы, пузырного заноса, инвазивного пузырного заноса, выкидышей, гипоплазии плода, аномального метаболизма глюкозы, аномального метаболизма липидов или аномальных родов (WO 00/24890, WO 01/75104 и WO 02/85399).

ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Целью настоящего изобретения является получение стабильных производных метастина, обладающих высокой биологической активностью (активностью, связанной с супрессией метастазирования рака, супрессией роста раковой опухоли, стимуляцией секреции гонадотропных гормонов, стимуляцией секреции половых гормонов и т.п.).

Авторы настоящего изобретения провели обширные исследования для решения указанных проблем и в результате неожиданно обнаружили, что при замещении аминокислот, входящих в состав метастина, определенными другими аминокислотами наблюдается повышение стабильности препаратов в крови, растворимости и т.п., снижается тенденция к гелеобразованию, улучшаются показатели фармакокинетики и наблюдается превосходная супрессивная активность в отношении раковых метастазов или роста раковой опухоли. Авторы настоящего изобретения также показали, что неожиданно указанные производные метастина оказывают супрессивный эффект на секрецию гонадотропных гормонов, супрессивный эффект на секрецию половых гормонов и т.п., которые в корне отличны от известных к настоящему времени эффектов. Основываясь на полученных наблюдениях, авторы продолжили свои исследования, что составило сущность настоящего изобретения.

Таким образом, настоящее изобретение относится к описанным ниже объектам и др.

(1) Производное метастина, описываемое формулой:

XX0-XX2-XX3-XX4-XX5-XX6-AzaGly-XX8-XX9-XX10-NH₂

(где

ХХ0 означает формил, С_1-20 алканоил, циклопропанкарбонил, 6-(ацетил-D-аргиниламино)капроил, 6-((R)-2,3-диаминопропиониламино)капроил, 6-(D-норлейциламино)капроил, 4-(D-аргиниламино)бутирил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил, глицил, тирозил, ацетилглицил, ацетилтирозил, D-тирозил, ацетил-D-тирозил, пироглютамил, 3-(пиридин-3-ил)пропионил, адипоил, гликолоил, 6-аминокапроил, 6-ацетиламинокапроил, 4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил или 4-уреидобензоил;

ХХ2 означает Tyr, D-Tyr, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D-Lys, D-Trp или химическую связь;

ХХ3 означает:

i) аминокислоту, выбранную из Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Ser, Thr, Trp, Tyr и Val, где α-аминогруппа может быть необязательно метилирована;

ii) циклическую аминокислоту, выбранную из Pro, Aze(2), Aze(3), Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, Abz(2), Abz(3), Pzc(2), Pro(4NH₂), Hyp(Bzl), цисHyp, Pro(4F) и lzc;

iii) аминокислоту, выбранную из D-Dap, D-Pya(4), DL-Ala(Pip), Orn, Aib и Tyr(PO₃H₂); или

iv) химическую связь;

ХХ4 означает Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^β-формил-β-диаминопропионовую кислоту, N^β-ацетил-β-диаминопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин, 2,4-диаминобутаноевую кислоту, 2,3-диаминопропионовую кислоту, His, Gln, Gly, Arg, Cit, Nva, D-Asn или химическую связь;

ХХ5 означает Ser, Thr, Val, NMeSer, Gly, Ala, Hyp, D-Ala, D-Thr, D-Pro или химическую связь;

ХХ6 означает Phe, Tyr, Trp, Tyr(Me), Thi, Nal(2), Cha, Pya(4), трео-Ser(3-фенил), эритро-Ser(3-фенил) или необязательно замещенный фенилаланин;

AzaGly означает азаглицин;

ХХ8 означает Leu, Nva, Val или Ala(cPr);

ХХ9 означает необязательно замещенный аргинин, необязательно замещенный лизин или необязательно замещенный орнитин; и

ХХ10 означает 2-нафтилаланин, 2-тиенилаланин, тирозин, необязательно замещенный фенилаланин или необязательно замещенный триптофан); или его соль.

(2) Производное метастина, описываемое формулой:

XX0-XX2-XX3-XX4-XX5-XX6-AzaGly-XX8-XX9-XX10-NH₂

(где

ХХ0 означает формил, С_1-20 алканоил, циклопропанкарбонил, 6-(ацетил-D-аргиниламино)капроил, 6-((R)-2,3-диаминопропиониламино)капроил, 6-(D-норлейциламино)капроил, 4-(D-аргиниламино)бутирил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил, глицил, тирозил, ацетилглицил, ацетилтирозил, D-тирозил, ацетил-D-тирозил, пироглютамил, 3-(пиридин-3-ил)пропионил, адипоил, гликолоил, 6-аминокапроил, 6-ацетиламинокапроил, 4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил или 4-уреидобензоил;

ХХ2 означает Tyr, D-Tyr, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D-Lys, D-Trp или химическую связь;

ХХ3 означает D-Asp, D-Dap, D-Ser, D-Gln, D-His, D-Trp, D-Tyr, D-Pya(4), D-NMeAla, D-NMePhe, Aze(2), Aze(3), Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, Gly, Aib, Abz(2), Abz(3), Sar, Izc, Leu, Lys, Glu, Thr, Trp, Ser, Ala, NMeAla, β-аланин, DL-Ala(Pip), Pzc(2), Orn, His(3Me), Tyr(PO₃H₂), Pro(4NH₂), Hyp(Bzl), цисHyp, Pro(4F) или химическую связь;

ХХ4 означает Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^β-формил-β-диаминопропионовую кислоту, N^β-ацетил-β-диаминопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин, 2,4-диаминобутаноевую кислоту, 2,3-диаминопропионовую кислоту, His, Gln, Gly, Arg, Cit, Nva, D-Asn или химическую связь;

ХХ5 означает Ser, Thr, Val, NMeSer, Gly, Ala, Hyp, D-Ala, D-Thr, D-Pro или химическую связь;

ХХ6 означает Phe, Tyr, Trp, Tyr(Me), Thi, Nal(2), Cha, Pya(4), Phe(2F), Phe(3F) Phe(4F), Phe(4Cl), αMePhe, Phe(2Me), Phe(3Me), Phe(4Me), трео-Ser(3-фенил), эритро-Ser(3-фенил) или D-Phe;

AzaGly означает азаглицин;

ХХ8 означает Leu, Nva, Val или Ala(cPr);

ХХ9 означает Arg, Orn, Arg(Me), D-Arg или Arg(асимMe₂); и

ХХ10 означает Phe, Trp, 2-нафтилаланин, 2-тиенилаланин, тирозин или 4-фторфенилаланин); или его соль.

(3) Производное метастина, описываемое формулой:

XX0-XX2-XX3-XX4-XX5-XX6-AzaGly-XX8-XX9-XX10-NH₂

(где

ХХ0 означает формил, С_1-20 алканоил, циклопропанкарбонил, 6-(ацетил-D-аргиниламино)капроил, 6-((R)-2,3-диаминопропиониламино)капроил, 6-(D-норлейциламино)капроил, 4-(D-аргиниламино)бутирил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил, глицил, тирозил, ацетилглицил, ацетилтирозил, D-тирозил, ацетил-D-тирозил, пироглютамил, 3-(пиридин-3-ил)пропионил, адипоил, гликолоил или 6-аминокапроил;

ХХ2 означает Tyr, D-Tyr, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D-Lys, D-Trp или химическую связь;

ХХ3 означает D-Asp, D-Dap, D-Ser, D-Gln, D-His, D-NMeAla, D-NMePhe, Aze(2), Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, NMeAla, Gly, Aib, Abz(2), Abz(3), Sar, Leu, Lys, Glu, β-аланин, Pzc(2), Orn, His(3Me), Tyr(PO₃H₂), Pro(4NH₂) или Hyp(Bzl);

ХХ4 означает Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^β-формил-β-диаминопропионовую кислоту, N^β-ацетил-β-диаминопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин, 2,4-диаминобутаноевую кислоту, His, Gln, Cit или D-Asn;

ХХ5 означает Ser, Thr, Val, NMeSer, Gly, Ala, Hyp, D-Ala или D-Thr;

ХХ6 означает Phe, Tyr, Trp, Tyr(Me), Thi, Nal(2), Cha, Pya(4), Phe(2F), Phe(3F) Phe(4F), Phe(4Cl) или D-Phe;

AzaGly означает азаглицин;

ХХ8 означает Leu, Nva или Val;

ХХ9 означает Arg, Orn, Arg(Me) или Arg(асимMe₂); и

ХХ10 означает Phe, Trp, 2-нафтилаланин, 2-тиенилаланин, тирозин или 4-фторфенилаланин); или его соль.

(4) Производное метастина, описываемое формулой:

XX0-XX2-XX3-XX4-XX5-XX6-AzaGly-XX8-XX9-XX10-NH₂

(где

ХХ0 означает формил, С_1-12 алканоил, циклопропанкарбонил, 6-(ацетил-D-аргиниламино)капроил, 6-((R)-2,3-диаминопропиониламино)капроил, 6-(D-норлейциламино)капроил, 4-(D-аргиниламино)бутирил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил, глицил, тирозил, ацетилглицил, ацетилтирозил, D-тирозил, ацетил-D-тирозил, пироглютамил, 3-(пиридин-3-ил)пропионил, адипоил, гликолоил или 6-аминокапроил;

ХХ2 означает Tyr, D-Tyr, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D-Lys, D-Trp или химическую связь;

ХХ3 означает D-Asp, D-Dap, D-Ser, D-Gln, D-His, D-NMeAla, D-NMePhe, Aze(2), Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, NMeAla, Gly, Aib, Abz(2), Abz(3), Sar, Leu, Lys, Glu, β-аланин, Pzc(2), Orn, His(3Me), Tyr(PO₃H₂), Pro(4NH₂) или Hyp(Bzl);

ХХ4 означает Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^β-формилдиаминопропионовую кислоту, N^β-ацетилдиаминопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин или 2,4-диаминобутаноевую кислоту;

ХХ5 означает Ser, Thr или Val;

ХХ6 означает Phe, Tyr, Trp, Tyr(Me), Thi, Nal(2), Cha, Pya(4), Phe(2F), Phe(3F) Phe(4F) или Phe(4Cl);

AzaGly означает азаглицин;

ХХ8 означает Leu, Nva или Val;

ХХ9 означает Arg, Orn, Arg(Me) или Arg(асимMe₂); и

ХХ10 означает Phe, Trp, 2-нафтилаланин, 2-тиенилаланин, тирозин или 4-фторфенилаланин); или его соль.

(5) Производное метастина или его соль согласно (1), где

ХХ0 означает С_1-12 алканоил, 6-аминокапроил, 6-ацетиламинокапроил, гликолоил, 4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил, 4-уреидобензоил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил или пироглютамил;

ХХ2 означает D-Tyr, Tyr или химическую связь;

ХХ3 означает D-Asp, D-Dap, D-Ser, D-Gln, D-His, D-Trp, D-Tyr, D-Pya(4), D-NMeAla, D-NMePhe, Aze(2), Aze(3), Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, Gly, Aib, Abz(2), Sar, Izc, Leu, Lys, Glu, Thr, Trp, Ser, Ala, NMeAla, β-аланин, DL-Ala(Pip), Pzc(2), Orn, His(3Me), Tyr(PO₃H₂), Pro(4NH₂), Hyp(Bzl), цисHyp, Pro(4F) или химическую связь;

ХХ4 означает Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин, 2,4-диаминобутаноевую кислоту, 2,3-диаминопропионовую кислоту, His, Gln, Gly, Arg, Cit, Nva, D-Asn или химическую связь;

ХХ5 означает Thr, NMeSer, Gly, Ala, Hyp, D-Ala, D-Thr, D-Pro или химическую связь;

ХХ6 означает Phe, Phe(2F), Phe(3F) Phe(4F), Phe(4Cl), αMePhe, Phe(2Me), Phe(3Me), Phe(4Me), трео-Ser(3-фенил), эритро-Ser(3-фенил) или D-Phe;

ХХ8 означает Leu или Ala(cPr);

ХХ9 означает Arg, Arg(Me) или D-Arg; и

ХХ10 означает Trp.

(6) Производное метастина согласно (1), которое описывается формулой:

XX0-XX2-XX3-XX4-XX5-XX6-AzaGly-XX8-XX9-XX10-NH₂

(где

ХХ0 означает формил, С_1-6 алканоил или гликолоил;

ХХ2 означает D-Tyr или химическую связь;

ХХ3 означает Aze(2), Hyp, Gly, Aib, Leu, Lys, Glu, His(3Me), Tyr(PO₃H₂), Hyp(Bzl), цисHyp или Pro(4F);

ХХ4 означает Asn или 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту;

ХХ5 означает Ser, Thr или Ala;

ХХ6 означает Phe, Cha, Phe(2F), Phe(3F) Phe(4F), Phe(4Cl), Phe(2Me), Phe(3Me), Phe(4Me), трео-Ser(3-фенил) или эритро-Ser(3-фенил);

AzaGly означает азаглицин;

ХХ8 означает Leu или Ala(cPr);

ХХ9 означает Arg или Arg(Me); и

ХХ10 означает Phe или Trp); или его соль.

(7) Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-D-Arg-Trp-NH₂ (соединение № 708),

Ac-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 709),

деканоил-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 710),

Acp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 712),

Ac-Acp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 713),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHPen)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 714),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHcPr)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 715),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHBzl)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 716),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 717),

Ac-D-Tyr-D-Pya(4)-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 718),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-D-Pro-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 719),

Ac-D-Tyr-Aze(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 720),

Ac-D-Tyr-Pic(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 721),

Ac-D-Tyr-Pic(3)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 722),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 723),

Ac-D-Tyr-Thz-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 724),

Ac-D-Tyr-NMeAla-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 725),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 726),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 727),

Ac-D-Tyr-Abz(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 728),

Ac-D-Tyr-Aze(3)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 730),

Ac-D-Tyr-Sar-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 731),

Ac-D-Tyr-D-NMeAla-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 732),

Ac-D-Tyr-Izc-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 734),

Ac-D-Tyr-D-Asp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 735),

Ac-D-Tyr-D-Dap-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 736),

Ac-D-Tyr-D-Ser-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 737),

Ac-D-Tyr-D-Gln-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 738),

Ac-D-Tyr-D-His-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 739),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Dab-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 740),

Ac-D-Tyr-Ala-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 742),

Ac-D-Tyr-Leu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 743),

Ac-D-Tyr-Ser-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 744),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 745),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 746),

Ac-D-Tyr-β-Ala-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 747),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 748),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 749),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 750),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 754),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 755),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 756),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 757),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 758),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 759),

Ac-D-Tyr-Pzc(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 760),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 763),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 764),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 765),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 766),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 767),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 768),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 769),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 770),

Ac-D-Tyr-Orn-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 771),

Ac-D-Tyr-Thr-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 772),

Ac-D-Tyr-His(3Me)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 773),

Ac-D-Tyr-DL-Ala(Pip)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 774),

Ac-D-Tyr-Tyr(PO₃H₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 775),

гликолоил-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 776),

Ac-D-Tyr-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 777),

Ac-D-Tyr-Pro(4NH₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 780),

Ac-D-Tyr-Hyp(Bzl)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 781),

Ac-D-Tyr-D-NMePhe-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 782),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 783),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 784),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 785),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 786),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 787),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 788),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 789),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 790),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 791),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-D-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 794),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 797),

Ac-D-Tyr-Hyp-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 800),

4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 801),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-NMeSer-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 809),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Hyp-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 810),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Gly-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 813),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 814),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-D-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 815),

Ac-D-Tyr-Hyp-His-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 816),

Ac-D-Tyr-Hyp-Gln-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 843),

Ac-D-Tyr-Hyp-D-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 844),

Ac-D-Tyr-Hyp-Cit-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 845),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-D-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 846),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Ala(cPr)-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 856),

4-уреибензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 860),

Ac-D-Tyr-Hyp-Arg-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 861),

Ac-D-Tyr-Hyp-Gly-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 862),

Ac-D-Tyr-Hyp-Dap-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 863),

Ac-D-Tyr-Hyp-Dab-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 864),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-αMePhe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 868),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 870),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 872),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 874),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-трео-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 877),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-эритро-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 882),

Ac-D-Tyr-Hyp-Nva-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 886),

Ac-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 887),

3-(п-гидроксифенил)пропионил-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 888),

pGlu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 889),

Ac-D-Tyr-цисHyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 896),

Ac-D-Tyr-Pro(4F)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 897),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 899), или их соль.

(8) Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHPen)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 714),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHcPr)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 715),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHBzl)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 716),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 717),

Ac-D-Tyr-D-Pya(4)-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 718),

Ac-D-Tyr-Aze(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 720),

Ac-D-Tyr-Pic(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 721),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 723),

Ac-D-Tyr-Thz-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 724),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 726),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 727),

Ac-D-Tyr-D-NMeAla-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 732),

Ac-D-Tyr-D-Gln-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 738),

Ac-D-Tyr-D-His-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 739),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Dab-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 740),

Ac-D-Tyr-Ala-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 742),

Ac-D-Tyr-Leu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 743),

Ac-D-Tyr-Ser-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 744),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 745),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 746),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 748),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 749),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 750),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 754),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 755),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 756),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 757),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 758),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 759),

Ac-D-Tyr-Pzc(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 760),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 763),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 764),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 765),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 766),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 767),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 768),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 769),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 770),

Ac-D-Tyr-Orn-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 771),

Ac-D-Tyr-Thr-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 772),

Ac-D-Tyr-His(3Me)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 773),

Ac-D-Tyr-Tyr(PO₃H₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 775),

гликолоил-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 776),

Ac-D-Tyr-Pro(4NH₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 780),

Ac-D-Tyr-Hyp(Bzl)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 781),

Ac-D-Tyr-D-NMePhe-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 782),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 783),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 784),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 785),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 786),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 787),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 788),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 789),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 790),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 791),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-D-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 794),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg-Trp-NH₂ (соединение № 797),

Ac-D-Tyr-Hyp-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 800),

4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 801),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-NMeSer-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 809),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Hyp-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 810),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Gly-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 813),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 814),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-D-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 815),

Ac-D-Tyr-Hyp-His-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 816),

Ac-D-Tyr-Hyp-Gln-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 843),

Ac-D-Tyr-Hyp-D-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 844),

Ac-D-Tyr-Hyp-Cit-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 845),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-D-Thr-Phe-AzaGly-Ala(cPr)-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 846),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 856),

4-уреидобензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 860),

Ac-D-Tyr-Hyp-Arg-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 861),

Ac-D-Tyr-Hyp-Gly-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 862),

Ac-D-Tyr-Hyp-Dap-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 863),

Ac-D-Tyr-Hyp-Dab-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 864),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-αMePhe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 868),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 870),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 872),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 874),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-трео-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 877),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-эритро-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 882),

Ac-D-Tyr-Hyp-Nva-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 886),

3-(п-гидроксифенил)пропионил-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 888),

Ac-D-Tyr-цисHyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 896),

Ac-D-Tyr-Pro(4F)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 897),

Ac-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 899) или их соль.

(9) Пролекарство на основе производного метастина согласно (1) или его соль.

(10) Пролекарство на основе производного метастина согласно (7) или его соль.

(11) Лекарственное средство, содержащее производное метастина согласно (1)-(8), его соль или его пролекарство.

(12) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент, оказывающий супрессивное воздействие на метастазирование рака, или агент, оказывающий супрессивное воздействие на рост раковой опухоли.

(13) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент для профилактики или лечения рака.

(14) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент для контроля функции плаценты.

(15) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент для профилактики или лечения хориокарциномы, пузырного заноса, инвазивного пузырного заноса, выкидышей, гипоплазии плода, аномального метаболизма глюкозы, аномального метаболизма липидов или индукции родов.

(16) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент для улучшения гонадной функции.

(17) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент для профилактики или лечения гормон-зависимого рака, бесплодия, эндометриоза, преждевременного полового созревания или миомы матки.

(18) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент для индукции или стимуляции овуляции.

(19) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент, способствующий секреции гонадотропного гормона, или агент, способствующий секреции полового гормона.

(20) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент для профилактики или лечения болезни Альцгеймера, аутизма или умеренного нарушения познавательной функции.

(21) Способ супрессии метастазирования рака или роста раковой опухоли, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), его соли или его пролекарства.

(22) Способ профилактики или лечения рака, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), его соли или его пролекарства.

(23) Способ контроля функции плаценты, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

(24) Способ профилактики или лечения хориокарциномы, пузырного заноса, инвазивного пузырного заноса, выкидышей, гипоплазии плода, аномального метаболизма глюкозы, аномального липидного метаболизма или индукции родов, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

(25) Способ улучшения гонадной функции, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

(26) Способ профилактики или лечения гормон-зависимого рака, бесплодия, эндометриоза, преждевременного полового созревания или миомы матки, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

(27) Способ индукции или стимуляции овуляции, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

(28) Способ усиления секреции гонадотропного гормона или усиления секреции полового гормона, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1), или его соли, или его пролекарства.

(29) Способ профилактики или лечения болезни Альцгеймера, аутизма или умеренного нарушения познавательной функции, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

(30) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент, осуществляющий отрицательную регуляцию гонадотропного гормона или полового гормона.

(31) Лекарственное средство согласно (11), которое представляет собой агент, осуществляющий отрицательную регуляцию человеческого белка ОТ7Т175 (рецептора метастина), состоящего из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO 9.

(32) Агент согласно (30) или (31), представляющий собой агент для профилактики или лечения гормон-зависимого рака.

(33) Способ отрицательной регуляции гонадотропного гормона или полового гормона, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

(34) Способ отрицательной регуляции человеческого белка ОТ7Т175 (рецептора метастина), состоящего из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO 9, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

(35) Способ профилактики или лечения гормон-зависимого рака, который включает в себя введение млекопитающему эффективной дозы производного метастина согласно (1)-(8), или его соли, или его пролекарства.

Настоящее изобретение охватывает также следующие аспекты.

(36) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента для подавления метастазирования рака или агента для подавления роста раковой опухоли.

(37) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента для профилактики или лечения рака.

(38) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента для контроля функции плаценты.

(39) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента для профилактики или лечения хориокарциномы, пузырного заноса, инвазивного пузырного заноса, выкидышей, гипоплазии плода, аномального метаболизма глюкозы, аномального метаболизма липидов или индукции родов.

(40) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента для улучшения гонадной функции.

(41) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента для профилактики или лечения гормон-зависимого рака, бесплодия, эндометриоза, преждевременного полового созревания или миомы матки.

(42) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента для индукции или стимуляции овуляции.

(43) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента, способствующего секреции гонадотропного гормона, или агента, способствующего секреции полового гормона.

(44) Применение производного метастина согласно (1)-(8) или его соли или его пролекарства при получении агента для профилактики или лечения болезни Альцгеймера, аутизма или умеренного нарушения познавательной функции.

В настоящем изобретении Tyr-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Gly-Leu-Arg-Phe-NH₂ (SEQ ID No: 16) относится к метастину 10 (Метастин 10), например к MS10.

В тексте настоящего описания N-концевой Tyr и С-концевой Phe в MS10 расположены в 1 и 10 положениях соответственно.

Например, [Hph10]MS10 означает пептид, в котором Phe на С-конце (10 положение) в MS10 замещен Hph.

Например, дез(1)-MS10 означает пептид, в котором Tyr на N-конце (1 положение) в MS10 делетирован.

Например, дез(1-3)-Fmoc-MS10 означает пептид, в котором участок Tyr-Asn-Trp на N-конце (1-3 положения) делетирован и аминогруппа Asn в 4 положении модифицирована Fmoc.

Например, дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Thr5,AzaGly7,D-Arg9,Trp10]MS10 соединения № 708 означает пептид, в котором амино-конец MS10 модифицирован Ас, Tyr на N-конце (1 положение) делетирован, Asn во 2 положении замещен D-Tyr, Trp в 3 положении замещен D-Trp, Ser в 5 положении замещен Thr, Gly в 7 положении замещен AzaGly, Arg в 9 положении замещен D-Arg, и Phe в 10 положении замещен Trp, т.е. представляет собой Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-D-Arg-Trp-NH₂.

В описанных выше формулах ХХ0 означает модифицирующую группу на амино-конце, и каждый из XX2, ХХ3, XX4, XX5, XX6, XX8, XX9 и XX10 означает 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 8-, 9- и 10-положения в указанном выше MS10 соответственно.

Каждая химическая связь «-» между ХХ0, XX2, ХХ3, XX4, XX5, XX6, AzaGly, XX8, XX9, XX10 и NH₂ в формуле: "ХХ0-ХХ2-ХХ3-ХХ4-ХХ5-ХХ6-AzaGly-ХХ8-ХХ9-ХХ10-NH₂" имеет указанные ниже значения.

Химическая связь «-» в формуле "ХХ0-ХХ2" означает связь между группой, обозначаемой ХХ0, и аминогруппой (α-аминогруппа), содержащейся в ХХ2. Более конкретно, формула "ХХ0-ХХ2" означает атом водорода в аминогруппе (NH₂), содержащейся в ХХ2, который замещен группой, обозначаемой ХХ0.

Химическая связь «-» в формуле "ХХ2-ХХ3" означает, что карбоксильная группа (α-карбоксильная группа), содержащаяся в ХХ2, связана с аминогруппой (α-аминогруппа) в ХХ3 через амидную связь. Химические связи «-» в формулах "ХХ3-ХХ4", "ХХ4-ХХ5", "ХХ5-ХХ6", "ХХ8-ХХ9" и "ХХ9-ХХ10" имеют указанное выше значение.

Химическая связь «-» в формуле "ХХ6-AzaGly" означает, что карбоксильная группа (α-карбоксильная группа), содержащаяся в ХХ6, связана с аминогруппой (α-аминогруппа) в AzaGly (азаглицин) через амидную связь.

Химическая связь «-» в формуле "AzaGly-ХХ8" означает, что карбоксильная группа (α-карбоксильная группа), содержащаяся в AzaGly, связана с аминогруппой (α-аминогруппа) в ХХ8 через амидную связь.

Химическая связь «-» в формуле "ХХ10-NH₂" означает связь между карбоксильной группой (α-карбоксильная группа) и -NH₂. Более конкретно, формула "ХХ10-NH₂" означает, что -OH в карбоксильной группе (-COOH), содержащаяся в ХХ10, замещена -NH₂.

В том случае, когда ХХ2, ХХ3, ХХ4 и/или ХХ5 обозначают химические связи «-», данные химические связи «-» имеют указанное выше значение.

Конкретные примеры данных химических связей включают связи, обозначенные структурными формулами, приведенной ниже таблице 1B и так далее.

В формулах, описанных выше, ХХ0 означает формил, С_1-20 алканоил (например, ацетил, пропионил, бутирил, гексаноил, деканоил и т.п.; предпочтительно означает С_1-6 алканоил, такой как ацетил, пропионил, бутирил и т.п.; более предпочтительно, ацетил и др.), циклопропанкарбонил, 6-(ацетил-D-аргиниламино)капроил, 6-((R)-2,3-диаминопропиониламино)капроил, 6-(D-норлейциламино)капроил, 4-(D-аргиниламино)бутирил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил, глицил, тирозил, ацетилглицил, ацетилтирозил, D-тирозил, ацетил-D-тирозил, пироглютамил, 3-(пиридин-3-ил)пропионил, адипоил, гликолоил, 6-аминокапроил, 6-ацетиламинокапроил, 4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил или 4-уреидобензоил, предпочтительно, означает С_1-12 алканоил, 6-аминокапроил, 6-ацетиламинокапроил, гликолоил, 4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил, 4-уреидобензоил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил или пироглютамил, более предпочтительно, означает формил, С_1-6 алканоил или гликолоил, еще более предпочтительно, означает С_1-6 алканоил или гликолоил и, наиболее предпочтительно, означает ацетил или гликолоил. Также предпочтительно, ХХ0 означает формил, С_1-20 алканоил, циклопропанкарбонил, 6-(ацетил-D-аргиниламино)капроил, 6-((R)-2,3-диаминопропиониламино)капроил, 6-(D-норлейциламино)капроил, 4-(D-аргиниламино)бутирил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил, глицил, тирозил, ацетилглицил, ацетилтирозил, D-тирозил, ацетил-D-тирозил, пироглютамил, 3-(пиридин-3-ил)пропионил, адипоил, гликолоил или 6-аминокапроил; также предпочтительно формил, С_1-12 алканоил, циклопропанкарбонил, 6-(ацетил-D-аргиниламино)капроил, 6-((R)-2,3-диаминопропиониламино)капроил, 6-(D-норлейциламино)капроил, 4-(D-аргинилиамино)бутирил, 3-(4-гидроксифенил)пропионил, глицил, тирозил, ацетилглицил, ацетилтирозил, D-тирозил, ацетил-D-тирозил, пироглютамил, 3-(пиридин-3-ил)пропионил, адипоил, гликолоил и 6-аминокапроил.

В формулах, описанных выше, ХХ2 означает Tyr, D-Tyr, D-Ala, D-Leu, D-Phe, D-Lys, D-Trp или химическую связь; предпочтительно, означает D-Tyr, Tyr или химическую связь; более предпочтительно, означает D-Tyr или химическую связь; и, наиболее предпочтительно, означает D-Tyr.

В формулах, описанных выше, ХХ3 означает (i) аминокислоту, где α-аминогруппа может быть необязательно метилирована (аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из Ala [аланин], Arg [аргинин], Asn [аспарагин], Asp [аспарагиновая кислота], Cys [цистеин], Gln [глутамин], Glu [глутаминовая кислота], Gly [глицин], His [гистидин], Ile [изолейцин], Leu [лейцин], Lys [лизин], Met [метионин], Phe [фенилаланин], Ser [серин], Thr [треонин], Trp [триптофан], Tyr [тирозин], Val [валин], (ii) циклическую аминокислоту (циклическую аминокислоту, выбранную из Pro [пролин], Aze(2), Aze(3), Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, Abz(2), Abz(3), Pzc(2), Pro(4NH₂), Hyp(Bzl), цисHyp, Pro(4F) и Izc, (iii) аминокислоту, выбранную из D-Dap, D-Pya(4), DL-Ala(Pip), Orn, Aib и Tyr(PO₃H₂), или (iv) химическую связь.

В тексте настоящего описания Aze(2) означает [азетидин-2-карбоновую кислоту], Aze(3) означает [азетидин-3-карбоновую кислоту], Pic(2) означает [пипеколиновую кислоту], Pic(3) означает [3-пиперидинкарбоновую кислоту], D-Dap означает [D-2,3-диаминопропионовую кислоту], D-Pya(4) означает [4-пиридил-D-аланин], Hyp означает [транс-4-гидроксипролин], Thz означает [тиопролин], Aib означает [α-аминоизобутаноевую кислоту], Abz(2) означает [2-аминобензойную кислоту], Abz(3) означает [3-аминобензойную кислоту], Izc означает [имидазолидин-2-карбоновую кислоту], DL-Ala(Pip) означает [DL-(4-пиперидин-1-ил)аланин], Pzc(2) означает [пиперазин-2-карбоновую кислоту], Orn означает [орнитин], Tyr(PO₃H₂) означает [О-фосфотирозин], Pro(4NH₂) означает [цис-4-аминопролин], Hyp(Bzl) означает [транс-4-бензилоксипролин], цисHyp означает [цис-4-гидроксипролин], и Pro(4F) означает [транс-4-фторпролин].

В тексте настоящего описания аминокислота может быть также L-аминокислотой или D-аминокислотой. Аланин может представлять собой α-аланин или β-аланин, если особо не указано иное. Предпочтительно, ХХ3 означает D-Asp, D-Dap [D-2,3-диаминопропионовую кислоту], D-Ser, D-Gln, D-His, D-Trp, D-Tyr, D-Pya(4), D-NMeAla [D-N^α-метилаланин], D-NMePhe [D-N^α-метилфенилаланин], Aze(2), Aze(3) [азетидин-3-карбоновую кислоту], Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, NMeAla, Gly, Aib, Abz(2), Abz(3), Sar, Izc, Leu, Lys, Glu, Thr, Trp, Ser, Ala, NMeAla, β-аланин, Pzc(2), Orn, His(3Me), [3-метилгистидин], Tyr(PO₃H₂), Pro(4NH₂), Hyp(Bzl), цисHyp, Pro(4F) или химическую связь;, более предпочтительно, означает D-Asp, D-Dap, D-Ser, D-Gln, D-His, D-Trp, D-Tyr, D-Pya(4), D-NMeAla, D-NMePhe, Aze(2), Aze(3), Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, Gly, Aib, Abz(2), Sar, Izc, Leu, Lys, Glu, Thr, Trp, Ser, Ala, NMeAla, β-аланин, DL-Ala(Pip), Pzc(2), Orn, His(3Me), Tyr (PO₃H₂), Pro(4NH₂), Hyp(Bzl), цисHyp, Pro(4F) или химическую связь; особенно предпочтительно, означает D-Gln, D-His, Aze(2), Aze(3), Pic(2), Hyp, Thz, Gly, Aib, D-NMeAla, Leu, Lys, Glu, Orn, His(3Me), Tyr(PO₃H₂), Pro(4NH₂), D-NMePhe, Hyp(Bzl), цисHyp или Pro(4F), еще более предпочтительно, означает Aze(2), Hyp, Gly, Aib, Leu, Lys, Glu, His(3Me), Tyr(PO₃H₂), Hyp(Bzl), цисHyp или Pro(4F) и, наиболее предпочтительно, означает Hyp, Glu, Hyp(Bzl) или Pro(4F). В качестве ХХ3 предпочтительны также D-Asp, D-Dap, D-Ser, D-Gln, D-His, D-NMeAla, D-NMePhe, Aze(2), Pic(2), Pic(3), Hyp, Thz, NMeAla, Gly, Aib, Abz(2), Abz(3), Sar, Leu, Lys, Glu, β-аланин, Pzc(2), Orn, His(3Me), Tyr (PO₃H₂), Pro(4NH₂) или Hyp(Bzl).

В формулах, описанных выше, ХХ4 означает Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^β-формил-β-диаминопропионовую кислоту, N^β-ацетил-β-диаминопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин, 2,4-диаминобутаноевую кислоту, 2,3-диаминопропионовую кислоту, His, Gln, Gly, Arg, Cit, Nva, D-Asn или химическую связь; предпочтительно означает Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин, 2,4-диаминобутаноевую кислоту, 2,3-диаминопропионовую кислоту, His, Gln, Gly, Arg, Cit, Nva, D-Asn или химическую связь; более предпочтительно, означает Asn или 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту. Также предпочтительно, ХХ4 означает Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^β-формил-β-диаминопропионовую кислоту, N^β-ацетил-β-диаминопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин, 2,4-диаминобутаноевую кислоту, His, Gln, Cit или D-Asn; или также предпочтительно Asn, 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту, N^β-формилдиаминопропионовую кислоту, N^β-ацетилдиаминопропионовую кислоту, N^ω-пентиласпарагин, N^ω-циклопропиласпарагин, N^ω-бензиласпарагин или 2,4-диаминобутаноевую кислоту.

В формулах, описанных выше, ХХ5 означает Ser, Thr, Val, NMeSer, Gly, Ala, Hyp, D-Ala, D-Thr, D-Pro или химическую связь; предпочтительно означает Thr, NMeSer, Gly, Ala, Hyp, D-Ala, D-Thr, D-Pro или химическую связь; более предпочтительно, означает Ser, Thr или Ala и, наиболее предпочтительно, означает Thr. Также предпочтительно ХХ5 означает Ser, Thr, Val, NMeSer, Gly, Ala, Hyp, D-Ala или D-Thr; или также предпочтительно Thr или Val.

В формулах, описанных выше, ХХ6 означает Phe, Tyr, Trp, Tyr(Me), Thi, Nal(2), Cha, Pya(4) или трео-Ser(3-фенил), эритро-Ser(3-фенил) или необязательно замещенный фенилаланин. В рамках настоящего описания заместитель в необязательно замещенном фенилаланине включает, например, оксо, атом галогена (например, атом фтора, хлора, брома, йода и т.п.), С_1-3 алкилендиокси (например, метилендиокси, этилендиокси и т.п.), нитро, циано, необязательно замещенный С_1-6 алкил, необязательно замещенный С_2-6 алкенил, необязательно замещенный С_2-6 алкинил, необязательно замещенный С_3-8 циклоалкил, необязательно замещенный С_6-14 арил, необязательно замещенный С_7-16 аралкил, необязательно замещенный С_1-6 алкокси, гидрокси, необязательно замещенный С_6-14 арилокси, необязательно замещенный С_7-16 аралкилокси, меркапто, необязательно замещенный С_1-6 алкилтио, необязательно замещенный С_6-14 арилтио, необязательно замещенный С_7-16 аралкилтио, необязательно замещенный амино [амино, необязательно замещенный моно- или ди-С_1-6 алкиламино (например, метиламино, диметиламино, этиламино, диэтиламино, пропиламино, изопропиламино и т.п.), необязательно замещенный моно- или ди-С_2-6 алкениламино (например, виниламино, пропениламино, изопропениламино), необязательно замещенный С_2-6 алкиниламино (например, 2-бутин-1-иламино, 4-пентин-1-иламино, 5-гексин-1-иламино), необязательно замещенный моно- или ди-С_3-8 циклоалкиламино (например, циклопропиламино, циклогексиламино), необязательно замещенный С_6-14 ариламино (например, фениламино, дифениламино, нафтиламино), необязательно замещенный С_1-6 алкоксиамино (например, метоксиамино, этоксиамино, пропоксиамино, изопропоксиамино), формиламино, необязательно замещенный С_1-6 алкилкарбониламино (например, ацетиламино, пропиониламино, пивалоиламино и т.п.), необязательно замещенный С_3-8 циклоалкилкарбониламино (например, циклопропилакарбониламино, циклопентилкарбониламино, циклогексилкарбониламино и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилкарбониламино (например, бензоиламино, нафтоиламино и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкоксикарбониламино (например, метоксикарбониламино, этоксикарбониламино, пропоксикарбониламино, бутоксикарбониламино и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкилсульфониламино (например, метилсульфониламино, этилсульфониламино и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилсульфониламино (например, фенилсульфониламино, 2-нафтилсульфониламино, 1-нафтилсульфониламино и т.п.)], формил, карбокси, необязательно замещенный С_1-6 алкилкарбонил (например, ацетил, пропионил, пивалоил и т.п.), необязательно замещенный С_3-8 циклоалкилкарбонил (например, циклопропилкарбонил, циклопентилкарбонил, циклогексилкарбонил, 1-метилциклогексилкарбонил и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилкарбонил (например, бензоил, 1-нафтоил, 2-нафтоил и т.п.), необязательно замещенный С_7-16 аралкилкарбонил (например, фенилацетил, 3-фенилпропионил и т.п.), необязательно замещенный 5-7-членный гетероциклический карбонил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода (например, никотиноил, изоникотиноил, теноил, фуроил, морфолинокарбонил, тиоморфолинокарбонил, пиперазин-1-илкарбонил, пиролидин-1-илкарбонил и т.п.), необязательно этерифицированный карбоксил, необязательно замещенную карбамоильную группу, необязательно замещенный С_1-6 алкилсульфонил (например, метилсульфонил, этилсульфонил и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкилсульфинил (например, метилсульфинил, этилсульфинил и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилсульфонил (например, фенилсульфонил, 1-нафтилсульфонил, 2-нафтилсульфонил и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилсульфинил (например, фенилсульфинил, 1-нафтилсульфинил, 2-нафтилсульфинил и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкилкарбонилокси (например, ацетокси, пропионилокси и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилкарбонилокси (например, бензилокси, нафтилкарбонилокси и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкоксикарбонилокси (например, метоксикарбонилокси, этоксикарбонилокси, пропоксикарбонилокси, бутоксикарбонилокси и т.п.), необязательно замещенный моно-С_1-6 алкилкарбамоилокси (например, метилкарбамоилокси, этилкарбамоилокси и т.п.), необязательно замещенный ди-С_1-6 алкилкарбамоилокси (например, диметилкарбамоилокси, диэтилкарбамоилокси и т.п.), необязательно замещенный моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоилокси (например, феникарбамоилокси, нафтилкарбамоилокси и т.п.), необязательно замещенную гетероциклическую группу, сульфо, сульфамоил, сульфинамоил, сульфенамоил или группу, полученную объединением 2 или более (например, 2 или 3) указанных заместителей и т.п. (заместитель-группа А). Количество заместителей особенно не ограничивается, но указанные группы могут содержать 1-5, предпочтительно 1-3 заместителей в замещаемых положениях, и в случае наличия двух или более заместителей, каждый заместитель может быть таким же или может отличаться.

Фраза «необязательно этерифицированная карбоксильная группа» в заместителе-группе А включает, например, необязательно замещенный С_1-6 алкоксикарбонил (например, метоксикарбонил, этоксикарбонил, пропоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилоксикарбонил (например, феноксикарбонил и т.п.), необязательно замещенный С_7-16 аралкилоксикарбонил (например, бензилоксикарбонил фенетилоксикарбонил и т.п.) и аналогичные группы.

Термин «С_1-6 алкил» в «необязательно замещенном С_1-6 алкиле» в заместителе-группе А включает, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, гексил и т.п.

Термин «С_2-6 алкенил» в «необязательно замещенном С_2-6 алкениле» в заместителе-группе А включает, например, винил, пропенил, изопропенил, 2-бутен-1-ил, 4-пентен-1-ил, 5-гексен-1-ил и т.п.

Термин «С_2-6 алкинил» в «необязательно замещенном С_2-6 алкиниле» в заместителе-группе А включает, например, 2-бутин-1-ил, 4-пентин-1-ил, 5-гексин-1-ил и т.п.

Термин «С_3-8 циклоалкил» в «необязательно замещенном С_3-8 циклоалкиле» в заместителе-группе А включает, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п.

Термин «С_6-14 арил» в «необязательно замещенном С_6-14 ариле» в заместителе-группе А включает, например, фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, 2-бифенилил, 3-бифенилил, 4-бифенилил, 2-антрил и т.п.

Термин «С_7-16 аралкил» в «необязательно замещенном С_7-16 аралкиле» в заместителе-группе А включает, например, бензил, фенетил, дифенилметил, 1-нафтилметил, 2-нафтилметил, 2,2-дифенилэтил, 3-фенилпропил, 4-фенилбутил, 5-фенилпентил, 2-бифенилилметил, 3-бифенилилметил, 4-бифенилилметил и т.п.

Термин «С_1-6 алкокси» в «необязательно замещенном С_1-6 алкокси» в заместителе-группе А включает, например, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, втор-бутокси, пентилокси, гексилокси и т.п.

Термин «С_6-14 арилокси» в «необязательно замещенном С_6-14 арилокси» в заместителе-группе А включает, например, фенилокси, 1-нафтилокси, 2-нафтилокси и т.п.

Термин «С_7-16 аралкилокси» в «необязательно замещенном С_7-16 аралкилокси» в заместителе-группе А включает, например, бензилокси, фенетилокси и т.п.

Термин «С_1-6 алкилтио» в «необязательно замещенном С_1-6 алкилтио» в заместителе-группе А включает, например, метилтио, этилтио, пропилтио, изопропилтио, бутилтио, втор-бутилтио, трет-бутилтио и т.п.

Термин «С_6-14 арилтио» в «необязательно замещенном С_6-14 арилтио» в заместителе-группе А включает, например, фенилтио, 1-нафтилтио, 2-нафтилтио и т.п.

Термин «С_7-16 аралкилтио» в «необязательно замещенном С_7-16 аралкилтио» в заместителе-группе А включает, например, бензилтио, фенетилтио и т.п.

Заместители в группах «С_1-6 алкоксикарбонил», «С_1-6 алкильная группа», «С_2-6 алкенил», «С_2-6 алкинил», «С_1-6 алкокси», «С_1-6 алкилтио», «С_1-6 алкиламино», «С_2-6 алкениламино», «С_2-6 алкиниламино», «С_1-6 алкоксиамино», «С_1-6 алкилкарбонил», «С_1-6 алкилсульфонил», «С_1-6 алкилсульфинил», «С_1-6 алкилкарбониламино», «С_1-6 алкоксикарбониламино», «С_1-6 алкилсульфониламино», «С_1-6 алкилкарбонилокси», «С_1-6 алкоксикарбонилокси», «моно-С_1-6 алкилкарбамоилокси» и «ди-С_1-6 алкилкарбамоилокси» в заместителе-группе А включают, например, 1-5 заместителей, выбранных из таких заместителей, как, например, атом галогена (например, атом фтора, атом хлора, атом брома, атом йода), карбокси, гидрокси, амино, моно- или ди-С_1-6 алкиламино, моно- или ди-С_6-14 ариламино, С_3-8 циклоалкил, С_1-6 алкокси, С_1-6 алкоксикарбонил, С_1-6 алкилтио, С_1-6 алкилсульфинил, С_1-6 алкилсульфонил, необязательно этерифицированный карбоксил, описанный выше, карбамоил, тиокарбамоил, моно-С_1-6 алкилкарбамоил (например, метилкарбамоил, этилкарбамоил и т.п.), ди-С_1-6 алкилкарбамоил (например, диметилкарбамоил, диэтилкарбамоил, этилметилкарбамоил и т.п.), моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоил (например, фенилкарбамоил, 1-нафтилкарбамоил, 2-нафтилкарбамоил и т.п.), моно- или ди-5-7-членный гетероциклический карбамоил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода (например, 2-пиридилкарбамоил, 3-пиридилкарбамоил, 4-пиридилкарбамоил, 2-тиенилкарбамоил, 3-тиенилкарбамоил и т.п.) и т.п.

Заместители в группах «С_6-14 арилоксикарбонил», «С_7-16 аралкилоксикарбонил», «С_3-8 циклоалкил», «С_6-14 арил», «С_7-16 аралкил», «С_6-14 арилокси», «С_7-16 аралкилокси», «С_6-14 арилтио», «С_7-16 аралкилтио», «С_3-8 циклоалкиламино», «С_6-14 ариламино», «С_3-8 циклоалкилкарбонил», «С_6-14 арилкарбонил», «С_7-16 аралкилкарбонил», «5-7-членный гетероциклический карбонил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода», «С_6-14 арилсульфонил», «С_6-14 арилсульфинил», «С_3-8 циклоалкилкарбониламино», «С_6-14 арилкарбониламино», «С_6-14 арилсульфониламино», «С_6-14 арилкарбонилокси» и «моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоилокси» в заместителе-группе А включают, например, 1-5 заместителей, выбранных, например, из атома галогена, гидрокси, карбокси, нитро, циано, необязательно замещенного С_1-6 алкила, описанного выше, необязательно замещенного С_2-6 алкенила, описанного выше, необязательно замещенного С_2-6 алкинила, описанного выше, необязательно замещенного С_3-8 циклоалкила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкокси, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкилтио, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкисульфинила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкисульфонила, описанного выше, необязательно этерифицированного карбоксила, описанного выше, карбамоила, тиокарбамоила, моно-С_1-6 алкилкарбамоила, ди-С_1-6 алкилкарбамоила, моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоила, моно- или ди-5-7-членного гетероциклического карбамоила, содержащего от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода, и т.п.

Фраза «необязательно замещенная гетероциклическая группа» в заместителе-группе А включает, например, 5-14-членную (моноциклическую, бициклическую или трициклическую) гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода, которая может быть необязательно замещена атомом галогена, гидрокси, карбокси, нитро, циано, необязательно замещенным С_1-6 алкилом, описанным выше, необязательно замещенным С_2-6 алкенилом, описанным выше, необязательно замещенным С_2-6 алкинилом, описанным выше, необязательно замещенным С_3-8 циклоалкилом, описанным выше, необязательно замещенным С_6-14 арилом, описанным выше, необязательно замещенным С_1-6 алкокси, описанным выше, необязательно замещенным С_1-6 алкилтио, описанным выше, необязательно замещенным С_6-14 арилтио, описанным выше, необязательно замещенным С_7-16 аралкилтио, описанным выше, необязательно замещенным С_1-6 алкилсульфинила, описанным выше, необязательно замещенным С_6-14 арилсульфинилом, описанным выше, необязательно замещенным С_1-6 алкилсульфонилом, описанным выше, необязательно замещенным С_6-14 арилсульфонилом, описанным выше, необязательно этерифицированным карбоксилом, описанным выше, карбамоилом, тиокарбамоилом, моно-С_1-6 алкилкарбамоилом, описанным выше, ди-низшим алкилкарбамоилом, моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоилом, моно- или ди-5-7-членным гетероциклическим карбамоилом, содержащим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода, или т.п.; предпочтительно используют (i) 5-14-членную (предпочтительно, 5-10-членную) ароматическую гетероциклическую группу, (ii) 5-10-членную неароматическую гетероциклическую группу или (iii) одновалентную группу, сформированную при необязательном вовлечении одного атома водорода из 7-10-членного гетерокольца с мостиковой связью и др.; среди них предпочтительно используют 5-членную ароматическую гетероциклическую группу. Конкретно, используют ароматическую гетероциклическую группу, такую как тиенил (например, 2-тиенил, 3-тиенил), фурил, (например, 2-фурил, 3-фурил), пиридил (например, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил), тиазолил (например, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил), оксазолил (например, 2-оксазолил, 4-оксазолил), хинолил (например, 2-хинолил, 3-хинолил, 4-хинолил, 5-хинолил, 8-хинолил), изохинолил (например, 1-изохинолил, 3-изохинолил, 4-изохинолил, 5-изохинолил), пиразинил, пиримидинил (например, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил), пирролил (например, 1-пирролил, 2-пирролил, 3-пирролил), имидазолил (например, 1-имидазолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил), пиразолил (например, 1-пиразолил, 3-пиразолил, 4-пиразолил), пиридазинил (например, 3-пиридазинил, 4-пиридазинил), изотиазолил (например, 3-изотиазолил), изоксазолил (например, 3-изоксазолил), индолил (например, 1-индолил, 2-индолил, 3-индолил), 2-бензотиазолил, бензо[b]тиенил (например, 2-бензо[b]тиенил, 3-бензо[b]тиенил), бензо[b]фуранил (например, 2-бензо[b]фуранил, 3-бензо[b]фуранил) и т.п., неароматическую гетероциклическую группу, такую как пирролидинил (например, 1-пирролидинил, 2-пирролидинил, 3-пирролидинил), оксазолидинил (например, 2-оксазолидинил), имидазолинил (например, 1-имидазолинил, 2-имидазолинил, 4-имидазолинил), пиперидинил (например, 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил 4-пиперидинил), пиперазинил (например, 1-пиперазинил, 2-пиперазинил), морфолино, тиоморфолино и т.п.

Фраза «необязательно замещенная карбамоильная группа» в заместителе-группе А включает карбамоильную группу, которая необязательно может быть замещена необязательно замещенным С_1-6 алкилом, необязательно замещенным С_2-6 алкенилом, необязательно замещенным С_2-6 алкинилом, необязательно замещенным С_3-8 циклоалкилом, необязательно замещенным С_6-14 арилом, необязательно замещенной гетероциклической группой, описанной выше, и т.д., и конкретные примеры включают карбамоил, тиокарбамоил, моно-С_1-6 алкилкарбамоил (например, метилкарбамоил, этилкарбамоил и т.п.), ди-С_1-6 алкилкарбамоил (например, диметилкарбамоил, диэтикарбамоил, этилметилкарбамоил и т.п.), С_1-6 алкил(С_1-6 алкокси)карбамоил (например, метил(метокси)карбамоил, этил(метокси)карбамоил) моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоил (например, фенилкарбамоил, 1-нафтилкарбамоил, 2-нафтилкарбамоил и т.п.), моно- или ди-5-7-членный гетероциклический карбамоил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода (например, 2-пиридилкарбамоил, 3-пиридилкарбамоил, 4-пиридилкарбамоил, 2-тиенилкарбамоил, 3-тиенилкарбамоил и т.п.), 5-7-членный циклический карбамоил (например, 1-пирролидинилкарбонил, 1-пиперидинилкарбонил, гексаметилениминокарбонил) и т.п.

Фраза «необязательно замещенный амино» в заместителе-группе А включает амино, который может быть необязательно замещен 1 или 2 группами, выбранными из необязательно замещенного С_1-6 алкила, описанного выше, необязательно замещенного С_2-6 алкенила, описанного выше, необязательно замещенного С_2-6 алкинила, описанного выше, необязательно замещенного С_3-8 циклоалкила, описанного выше, необязательно замещенного С_6-14 арила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкокси, описанного выше, формила, необязательно замещенного С_1-6 алкилкарбонила, описанного выше, необязательно замещенного С_3-8 циклоалкилкарбонила, описанного выше, необязательно замещенного С_6-14 арилкарбонила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкоксикарбонила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкилсульфонила, описанного выше, необязательно замещенного С_6-14 арилсульфонила и т.п.

Более предпочтительно, указанные заместители обозначают атом галогена, гидрокси, С_1-6 алкокси, необязательно галогенизированный С_1-6 алкил, необязательно галогенизированный С_1-6 алкокси, амино, нитро, циано и т.п.

ХХ6 предпочтительно означает Phe, Tyr, Trp, Tyr(Me) [О-метилтирозин], Thi [2-тиенилаланин], Nal(2) [2-нафтилаланин], Cha [циклогексилаланин], Pya(4) [4-пиридилаланин], Phe(2F) [2-фторфенилаланин], Phe(3F) [3-фторфенилаланин], Phe(4F) [4-фторфенилаланин], Phe(4Cl) [4-хлорфенилаланин], αMePhe [α-метилфенилаланин], Phe(2Me), Phe(3Me), Phe(4Me), трео-Ser(3-фенил), эритро-Ser(3-фенил) или D-Phe, более предпочтительно, означает Phe, Cha, Phe(2F), Phe(3F), Phe(4F), Phe(4Cl), αMePhe, Phe(2Me), Phe(3Me), Phe(4Me), трео-Ser(3-фенил), эритро-Ser(3-фенил) или D-Phe, еще более предпочтительно, означает Phe, Phe(2F), Phe(3F), Phe(4F), Phe(4Cl), αMePhe, Phe(2Me), Phe(3Me), Phe(4Me), трео-Ser(3-фенил), эритро-Ser(3-фенил) или D-Phe, еще более предпочтительно, означает Phe, Cha, Phe(2F), Phe(3F), Phe(4F), Phe(4Cl), Phe(2Me), Phe(3Me), Phe(4Me), трео-Ser(3-фенил) или эритро-Ser(3-фенил) и, наиболее предпочтительно, означает Phe, Cha, Phe(3F) или Phe(4F). В случае ХХ6 также предпочтительны Phe, Tyr, Trp, Tyr(Me), Thi, Nal(2), Cha, Pya(4), Phe(2F), Phe(3F), Phe(4F), Phe(4Cl) или D-Phe; или Phe, Tyr, Trp, Tyr(Me), Thi, Nal(2), Cha, Pya(4), Phe(2F), Phe(3F), Phe(4F) или Phe(4Cl).

В формулах, описанных выше, AzaGly означает азаглицин.

В формулах, описанных выше, ХХ8 означает Leu, Nva [норвалин], Val или Ala(cPr) [циклопропилаланин], и предпочтительно означает Leu или Ala(cPr). Для ХХ8 Leu, Nva или Val также предпочтительны.

В формулах, описанных выше, ХХ9 означает необязательно замещенный аргинин, необязательно замещенный лизин или необязательно замещенный орнитин. При этом заместители в случае необязательно замещенного аргинина, необязательно замещенного лизина или необязательно замещенного орнитина включают 1 или замещаемое количество С_1-6 алкила (например, метила, этила, пропила, изопропила, бутила и т.п.), С_1-6 ацила (например, ацетила, пропионила и т.п.). ХХ9 предпочтительно означает Arg, Orn [орнитин], Arg(Me) [N^ω-метиларгинин], D-Arg или Arg(асимMe₂) [асимметиричный-N^ω,ω-диметиларгинин], более предпочтительно, означает Arg, Arg(Me) или D-Arg, еще более предпочтительно, означает Arg или Arg(Me). В случае XX9 Arg, Orn, Arg(Me) или Arg (асимMe₂) также предпочтительны.

В формулах, описанных выше, ХХ10 означает 2-нафтилаланин, 2-тиенилалнин, тирозин, необязательно замещенный фенилаланин или необязательно замещенный триптофан. В данном случае, заместители в необязательно замещенном фенилаланине и необязательно замещенном триптофане включают, например, оксо, атом галогена (например, атом фтора, хлора, брома, йода и т.п.), С_1-3 алкилендиокси (например, метилендиокси, этилендиокси и т.п.), нитро, циано, необязательно замещенный С_1-6 алкил, необязательно замещенный С_2-6 алкенил, необязательно замещенный С_2-6 алкинил, необязательно замещенный С_3-8 циклоалкил, необязательно замещенный С_6-14 арил, необязательно замещенный С_7-16 аралкил, необязательно замещенный С_1-6 алкокси, гидрокси, необязательно замещенный С_6-14 арилокси, необязательно замещенный С_7-16 аралкилокси, меркапто, необязательно замещенный С_1-6 алкилтио, необязательно замещенный С_6-14 арилтио, необязательно замещенный С_7-16 аралкилтио, необязательно замещенный амино [амино, необязательно замещенный моно- или ди-С_1-6 алкиламино (например, метиламино, диметиламино, этиламино, диэтиламино, пропиламино, изопропиламино и т.п.), необязательно замещенный моно- или ди-С_2-6 алкениламино (например, виниламино, пропениламино, изопрпениламино), необязательно замещенный С_2-6 алкиниламино (например, 2-бутин-1-иламино, 4-пентин-1-иламино, 5-гексин-1-иламино), необязательно замещенный моно- или ди-С_3-8 циклоалкиламино (например, циклопропиламино, циклогексиламино), необязательно замещенный С_6-14 ариламино (например, фениламино, дифениламино, нафтиламино), необязательно замещенный С_1-6 алкоксиамино (например, метоксиамино, этоксиамино, пропоксиамино, изопропоксиамино), формиламино, необязательно замещенный С_1-6 алкилкарбониламино (например, ацетиламино, пропиониламино, пивалоиламино и т.п.), необязательно замещенный С_3-8 циклоалкилкарбониламино (например, циклопропилакарбониламино, циклопентилкарбониламино, циклогексилкарбониламино и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилкарбониламино (например, бензоиламино, нафтоиламино и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкоксикарбониламино (например, метоксикарбониламино, этоксикарбониламино, пропоксикарбониламино, бутоксикарбониламино и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкилсульфониламино (например, метилсульфониламино, этилсульфониламино и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилсульфониламино (например, фенилсульфониламино, 2-нафтилсульфониламино, 1-нафтилсульфониламино и т.п.)], формил, карбокси, необязательно замещенный С_1-6 алкилкарбонил (например, ацетил, пропионил, пивалоил и т.п.), необязательно замещенный С_3-8 циклоалкилкарбонил (например, циклопропилкарбонил, циклопентилкарбонил, циклогексилкарбонил, 1-метилциклогексилкарбонил и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилкарбонил (например, бензоил, 1-нафтоил, 2-нафтоил и т.п.), необязательно замещенный С_7-16 аралкилкарбонил (например, фенилацетил, 3-фенилпропионил и т.п.), необязательно замещенный 5-7-членный гетероциклический карбонил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода (например, никотиноил, изоникотиноил, теноил, фуроил, морфолинокарбонил, тиоморфолинокарбонил, пиперазин-1-илкарбонил, пиролидин-1-илкарбонил и т.п.), необязательно этерифицированный карбоксил, необязательно замещенную карбамоильную группу, необязательно замещенный С_1-6 алкилсульфонил (например, метилсульфонил, этилсульфонил и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкилсульфинил (например, метилсульфинил, этилсульфинил и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилсульфонил (например, фенилсульфонил, 1-нафтилсульфонил, 2-нафтилсульфонил и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилсульфинил (например, фенилсульфинил, 1-нафтилсульфинил, 2-нафтилсульфинил и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкилкарбонилокси (например, ацетокси, пропионилокси и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилкарбонилокси (например, бензоилокси, нафтилкарбонилокси и т.п.), необязательно замещенный С_1-6 алкоксикарбонилокси (например, метоксикарбонилокси, этоксикарбонилокси, пропоксикарбонилокси, бутоксикарбонилокси и т.п.), необязательно замещенный моно-С_1-6 алкилкарбамоилокси (например, метилкарбамоилокси, этилкарбамоилокси и т.п.), необязательно замещенный ди-С_1-6 алкилкарбамоилокси (например, диметилкарбамоилокси, диэтилкарбамоилокси и др.), необязательно замещенный моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоилокси (например, феникарбамоилокси, нафтилкарбамоилокси и т.п.), необязательно замещенную гетероциклическую группу, сульфо, сульфамоил, сульфинамоил, сульфенамоил или группу, полученную объединением 2 или более (например, 2 или 3) указанных заместителей и др. (заместитель-группа А). Количество заместителей особенно не ограничивается, но указанные группы могут содержать 1-5, предпочтительно 1-3 заместителей в замещаемых положениях, и в случае наличия двух или более заместителей, каждый из заместителей может быть одинаковым, или они могут отличаться.

Фраза «необязательно этерифицированная карбоксильная группа» в заместителе-группе А включает, например, необязательно замещенный С_1-6 алкоксикарбонил (например, метоксикарбонил, этоксикарбонил, пропоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил и т.п.), необязательно замещенный С_6-14 арилоксикарбонил (например, феноксикарбонил и т.п.), необязательно замещенный С_7-16 аралкилоксикарбонил (например, бензилоксикарбонил фенетилоксикарбонил и т.п.) и т.п.

Термин «С_1-6 алкил» в «необязательно замещенном С_1-6 алкиле» в заместителе-группе А включает, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, гексил и т.п.

Термин «С_2-6 алкенил» в «необязательно замещенном С_2-6 алкениле» в заместителе-группе А включает, например, винил, пропенил, изопропенил, 2-бутен-1-ил, 4-пентен-1-ил, 5-гексен-1-ил и т.п.

Термин «С_2-6 алкинил» в «необязательно замещенном С_2-6 алкиниле» в заместителе-группе А включает, например, 2-бутин-1-ил, 4-пентин-1-ил, 5-гексин-1-ил и т.п.

Термин «С_3-8 циклоалкил» в «необязательно замещенном С_3-8 циклоалкиле» в заместителе-группе А включает, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п.

Термин «С_6-14 арил» в «необязательно замещенном С_6-14 ариле» в заместителе-группе А включает, например, фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, 2-бифенилил, 3-бифенилил, 4-бифенилил, 2-антрил и т.п.

Термин «С_7-16 аралкил» в «необязательно замещенном С_7-16 аралкиле» в заместителе-группе А включает, например, бензил, фенетил, дифенилметил, 1-нафтилметил, 2-нафтилметил, 2,2-дифенилэтил, 3-фенилпропил, 4-фенилбутил, 5-фенилпентил, 2-бифенилилметил, 3-бифенилилметил, 4-бифенилилметил и т.п.

Термин «С_1-6 алкокси» в «необязательно замещенном С_1-6 алкокси» в заместителе-группе А включает, например, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, втор-бутокси, пентилокси, гексилокси и т.п.

Термин «С_6-14 арилокси» в «необязательно замещенном С_6-14 арилокси» в заместителе-группе А включает, например, фенилокси, 1-нафтилокси, 2-нафтилокси и т.п.

Термин «С_7-16 аралкилокси» в «необязательно замещенном С_7-16 аралкилокси» в заместителе-группе А включает, например, бензилокси, фенетилокси и т.п.

Термин «С_1-6 алкилтио» в «необязательно замещенном С_1-6 алкилтио» в заместителе-группе А включает, например, метилтио, этилтио, пропилтио, изопропилтио, бутилтио, втор-бутилтио, трет-бутилтио и т.п.

Термин «С_6-14 арилтио» в «необязательно замещенном С_6-14 арилтио» в заместителе-группе А включает, например, фенилтио, 1-нафтилтио, 2-нафтилтио и т.п.

Термин «С_7-16 аралкилтио» в «необязательно замещенном С_7-16 аралкилтио» в заместителе-группе А включает, например, бензилтио, фенетилтио и т.п.

Заместители в указанных группах «С_1-6 алкоксикарбонил», «С_1-6 алкильная группа», «С_2-6 алкенил», «С_2-6 алкинил», «С_1-6 алкокси», «С_1-6 алкилтио», «С_1-6 алкиламино», «С_2-6 алкениламино», «С_2-6 алкиниламино», «С_1-6 алкоксиамино», «С_1-6 алкилкарбонил», «С_1-6 алкилсульфонил», «С_1-6 алкилсульфинил», «С_1-6 алкилкарбониламино», «С_1-6 алкоксикарбониламино», «С_1-6 алкилсульфониламино», «С_1-6 алкилкарбонилокси», «С_1-6 алкоксикарбонилокси», «моно-С_1-6 алкилкарбамоилокси» и «ди-С_1-6 алкилкарбамоилокси» включают 1-5 заместителей, выбранных из таких заместителей, как, например, атом галогена (например, атом фтора, атом хлора, атом брома, атом йода), карбокси, гидрокси, амино, моно- или ди-С_1-6 алкиламино, моно- или ди-С_6-14 ариламино, С_3-8 циклоалкил, С_1-6 алкокси, С_1-6 алкоксикарбонил, С_1-6 алкилтио, С_1-6 алкилсульфинил, С_1-6 алкилсульфонил, необязательно этерифицированный карбоксил, описанный выше, карбамоил, тиокарбамоил, моно-С_1-6 алкилкарбамоил (например, метилкарбамоил, этилкарбамоил и т.п.), ди-С_1-6 алкилкарбамоил (например, диметилкарбамоил, диэтилкарбамоил, этилметилкарбамоил и т.п.), моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоил (например, фенилкарбамоил, 1-нафтилкарбамоил, 2-нафтилкарбамоил и т.п.), моно- или ди-5-7-членный гетероциклический карбамоил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода (например, 2-пиридилкарбамоил, 3-пиридилкарбамоил, 4-пиридилкарбамоил, 2-тиенилкарбамоил, 3-тиенилкарбамоил и т.п.) и др.

Заместители в группах «С_6-14 арилоксикарбонил», «С_7-16 аралкилоксикарбонил», «С_3-8 циклоалкил», «С_6-14 арил», «С_7-16 аралкил», «С_6-14 арилокси», «С_7-16 аралкилокси», «С_6-14 арилтио», «С_7-16 аралкилтио», «С_3-8 циклоалкиламино», «С_6-14 ариламино», «С_3-8 циклоалкилкарбонил», «С_6-14 арилкарбонил», «С_7-16 аралкилкарбонил», «5-7-членный гетероциклический карбонил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода», «С_6-14 арилсульфонил», «С_6-14 арилсульфинил», «С_3-8 циклоалкилкарбониламино», «С_6-14 арилкарбониламино», «С_6-14 арилсульфониламино», «С_6-14 арилкарбонилокси» и «моно- или ди-С_6-14 арил-карбамоилокси» в заместителе-группе А включают 1-5 заместителей, выбранных, например, из атома галогена, гидрокси, карбокси, нитро, циано, необязательно замещенного С_1-6 алкила, описанного выше, необязательно замещенного С_2-6 алкенила, описанного выше, необязательно замещенного С_2-6 алкинила, описанного выше, необязательно замещенного С_3-8 циклоалкила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкокси, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкилтио, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкилсульфинила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкисульфонила, описанного выше, необязательно этерифицированного карбоксила, описанного выше, карбамоила, тиокарбамоила, моно-С_1-6 алкилкарбамоила, ди-С_1-6 алкилкарбамоила, моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоила, моно- или ди-5-7-членного гетероциклического карбонила, содержащего от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода и др.

Фраза «необязательно замещенная гетероциклическая группа» в заместителе-группе А включает, например, 5-14-членную (моноциклическую, бициклическую или трициклическую) гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода, которые могут быть необязательно замещены атомом галогена, гидрокси, карбокси, нитро, циано, необязательно замещенным С_1-6 алкилом, описанным выше, необязательно замещенным С_2-6 алкенилом, описанным выше, необязательно замещенным С_2-6 алкинилом, описанным выше, необязательно замещенным С_3-8 циклоалкилом, описанным выше, необязательно замещенным С_6-14 арилом, описанным выше, необязательно замещенным С_1-6 алкокси, описанным выше, необязательно замещенным С_1-6 алкилтио, описанным выше, необязательно замещенным С_6-14 арилтио, описанным выше, необязательно замещенным С_7-16 аралкилтио, описанным выше, необязательно замещенным С_1-6 алкилсульфинилом, описанным выше, необязательно замещенным С_6-14 арилсульфинилом, описанным выше, необязательно замещенным С_1-6 алкилсульфонилом, описанным выше, необязательно замещенным С_6-14 арилсульфонилом, описанным выше, необязательно этерифицированным карбоксилом, описанным выше, карбамоилом, тиокарбамоилом, моно-С_1-6 алкилкарбамоилом, описанным выше, ди-низшим алкилкарбамоилом, моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоилом, моно- или ди-5-7-членным гетероциклическим карбамоилом, содержащим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода или т.п.; предпочтительно используют (i) 5-14-членную (предпочтительно, 5-10-членную) ароматическую гетероциклическую группу, (ii) 5-10-членную неароматическую гетероциклическую группу или (iii) одновалентную группу, сформированную при необязательном вовлечении одного атома водорода из 7-10-членного гетерокольца с мостиковой связью; и среди них предпочтительно используют 5-членную ароматическую гетероциклическую группу. Конкретно, используют, например, ароматическую гетероциклическую группу, такую как тиенил (например, 2-тиенил, 3-тиенил), фурил, (например, 2-фурил, 3-фурил), пиридил (например, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил), тиазолил (например, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил), оксазолил (например, 2-оксазолил, 4-оксазолил), хинолил (например, 2-хинолил, 3-хинолил, 4-хинолил, 5-хинолил, 8-хинолил), изохинолил (например, 1-изохинолил, 3-изохинолил, 4-изохинолил, 5-изохинолил), пиразинил, пиримидинил (например, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил), пирролил (например, 1-пирролил, 2-пирролил, 3-пирролил), имидазолил (например, 1-имидазолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил), пиразолил (например, 1-пиразолил, 3-пиразолил, 4-пиразолил), пиридазинил (например, 3-пиридазинил, 4-пиридазинил), изотиазолил (например, 3-изотиазолил), изоксазолил (например, 3-изоксазолил), индолил (например, 1-индолил, 2-индолил, 3-индолил), 2-бензотиазолил, бензо[b]тиенил (например, 2-бензо[b]тиенил, 3-бензо[b]тиенил), бензо[b]фуранил (например, 2-бензо[b]фуранил, 3-бензо[b]фуранил) и т.п., неароматическую гетероциклическую группу, такую как пирролидинил (например, 1-пирролидинил, 2-пирролидинил, 3-пирролидинил), оксазолидинил (например, 2-оксазолидинил), имидазолинил (например, 1-имидазолинил, 2-имидазолинил, 4-имидазолинил), пиперидинил (например, 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил 4-пиперидинил), пиперазинил (например, 1-пиперазинил, 2-пиперазинил), морфолино, тиоморфолино и т.п.

Фраза «необязательно замещенная карбамоильная группа» в заместителе-группе А включает карбамоильную группу, которая необязательно может быть замещена необязательно замещенным С_1-6 алкилом, необязательно замещенным С_2-6 алкенилом, необязательно замещенным С_2-6 алкинилом, необязательно замещенным С_3-8 циклоалкилом, необязательно замещенным С_6-14 арилом, необязательно замещенной гетероциклической группой, описанной выше, и т.д., и конкретные примеры, включают карбамоил, тиокарбамоил, моно-С_1-6 алкилкарбамоил (например, метилкарбамоил, этилкарбамоил и т.п.), ди-С_1-6 алкилкарбамоил (например, диметилкарбамоил, диэтикарбамоил, этилметилкарбамоил и т.п.), С_1-6 алкил(С_1-6 алкокси)карбамоил (например, метил(метокси)карбамоил, этил(метокси)карбамоил) моно- или ди-С_6-14 арилкарбамоил (например, фенилкарбамоил, 1-нафтилкарбамоил, 2-нафтилкарбамоил и т.п.), моно- или ди-5-7-членный гетероциклический карбамоил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из 1 или 2 видов, входящих в группу, состоящую из атомов азота, серы и кислорода, в дополнение к атомам углерода (например, 2-пиридилкарбамоил, 3-пиридилкарбамоил, 4-пиридилкарбамоил, 2-тиенилкарбамоил, 3-тиенилкарбамоил и т.п.), 5-7-членный циклический карбамоил (например, 1-пирролидинилкарбонил, 1-пиперидинилкарбонил, гексаметилениминокарбонил) и т.п.

Фраза «необязательно замещенный амино» в заместителе-группе А включает амино, который необязательно может быть замещен 1 или 2 группами, выбранными из необязательно замещенного С_1-6 алкила, описанного выше, необязательно замещенного С_2-6 алкенила, описанного выше, необязательно замещенного С_2-6 алкинила, описанного выше, необязательно замещенного С_3-8 циклоалкила, описанного выше, необязательно замещенного С_6-14 арила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкокси, описанного выше, формила, необязательно замещенного С_1-6 алкилкарбонила, описанного выше, необязательно замещенного С_3-8 циклоалкилкарбонила, описанного выше, необязательно замещенного С_6-14 арилкарбонила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкоксикарбонила, описанного выше, необязательно замещенного С_1-6 алкилсульфонила, описанного выше, необязательно замещенного С_6-14 арилсульфонила и т.п.

Более предпочтительно, указанные заместители обозначают атом галогена, гидрокси, С_1-6 алкокси, необязательно галогенизированный С_1-6 алкил, необязательно галогенизированный С_1-6 алкокси, амино, нитро, циано и т.п.

ХХ10 предпочтительно означает Phe, Trp, 2-нафтилаланин, 2-тиенилаланин, тирозин или 4-фторфенилаланин, более предпочтительно, означает Phe или Trp и, наиболее предпочтительно, означает Trp.

В сочетании указанных групп предпочтительным является производное метастина, описываемое формулой:

XX0-XX2-XX3-XX4-XX5-XX6-AzaGly-XX8-XX9-XX10-NH₂

(где

XX0 означает формил, С_1-6 алканоил или гликолоил;

ХХ2 означает D-Tyr или химическую связь;

ХХ3 означает Aze(2), Hyp, Gly, Aib, Leu, Lys, Glu, His(3Me), Tyr(PO₃H₂), Hyp(Bzl) или Pro(4F);

ХХ4 означает Asn или 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту;

ХХ5 означает Ser, Thr или Ala;

XX6 означает Phe, Cha, Phe(2F), Phe(3F), Phe(4F) или Phe(4Cl);

AzaGly означает азаглицин;

ХХ8 означает Leu или Ala(cPr);

ХХ9 означает Arg или Arg(Me); и

ХХ10 означает Phe или Trp); или его соль.

В сочетании указанных групп еще более предпочтительным является производное метастина, описываемое формулой:

XX0-XX2-XX3-XX4-XX5-XX6-AzaGly-XX8-XX9-XX10-NH₂

(где

XX0 означает ацетил или гликолоил (предпочтительно, ацетил);

ХХ2 означает D-Tyr;

ХХ3 означает Hyp, Glu, Hyp(Bzl) или Pro(4F);

ХХ4 означает Asn или 2-амино-3-уреидопропионовую кислоту;

ХХ5 означает Thr;

XX6 означает Phe, Cha, Phe(3F) или Phe(4F);

AzaGly означает азаглицин;

ХХ8 означает Leu или Ala(cPr);

ХХ9 означает Arg или Arg(Me); и

ХХ10 означает Trp); или его соль.

При выборе производных метастина предпочтительно используют все те соединения, в которых группы, показанные определенными выше символами, объединены. Предпочтительно используют соединения, указанные ниже, вместе с соответствующими номерами.

Соединение № 708:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Thr5,AzaGly7,D-Arg9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-D-Arg-Trp-NH₂

Соединение № 709:

дез(1-3)-Ac-[Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 710:

дез(1)-деканоил-[Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

деканоил-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 712:

дез(1-2)-[Acp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Acp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 713:

дез(1-2)-Ac-[Acp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-Acp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 714:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Asp(NHPen)4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHPen)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-D-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 715:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Asp(NHcPr)4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHcPr)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 716:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Asp(NHBzl)4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHBzl)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 717:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Alb4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 718:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Pya(4)3,Alb4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Pya(4)-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 719:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,D-Pro5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-D-Pro-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 720:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Aze(2)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Aze(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 721:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Pic(2)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Pic(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 722:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Pic(3)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Pic(3)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 723:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 724:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Thz3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Thz-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 725:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,NMeAla3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-NMeAla-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 726:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Gly3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 727:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Aib3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 728:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Abz(2)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Abz(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 730:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Aze(3)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Aze(3)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 731:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Sar3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Sar-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 732:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-NMeAla3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-NMeAla-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 734:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Izc3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Izc-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 735:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Asp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Asp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 736:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Dap3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Dap-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 737:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Ser3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Ser-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 738:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Gln3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Gln-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 739:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-His3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-His-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 740:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Dab4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Dab-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 742:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Ala3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Ala-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 743:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Leu3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Leu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 744:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Ser3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Ser-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 745:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Lys3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 746:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Glu3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 747:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,β-Ala3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-β-Ala-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 748:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Thr5,Phe(4Cl)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 749:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Thr5,Phe(2F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 750:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 754:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Lys3,Thr5,Phe(2F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 755:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Glu3,Thr5,Phe(2F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 756:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Lys3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 757:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Glu3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 758:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Lys3,Thr5,Phe(4Cl)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 759:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Glu3,Thr5,Phe(4Cl)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 760:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Pzc(2)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Pzc(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 763:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(2F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 764:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Trp3,Thr5,Phe(2F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 765:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 766:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Trp3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 767:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(4Cl)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 768:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Trp3,Thr5,Phe(4Cl)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 769:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Gly3,Thr5,Phe(4Cl)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 770:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Aib3,Thr5,Phe(4Cl)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 771:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Orn3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Orn-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 772:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Thr3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Thr-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 773:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,His(3Me)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-His(3Me)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 774:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,DL-Ala(Pip)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-DL-Ala(Pip)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 775:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Tyr(PO₃H₂)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Tyr(PO₃H₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 776:

дез(1)-гликолоил-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

гликолоил-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 777:

дез(1-2)-Ac-[D-Tyr3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 780:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Pro(4NH₂)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Pro(4NH₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 781:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp(Bzl)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp(Bzl)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 782:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-NMePhe3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-D-NMePhe-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 783:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Gly3,Thr5,Phe(2F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 784:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Aib3,Thr5,Phe(2F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 785:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Gly3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 786:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Aib3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 787:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(4F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 788:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Glu3,Thr5,Phe(4F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 789:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Lys3,Thr5,Phe(4F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 790:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Gly3,Thr5,Phe(4F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 791:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Aib3,Thr5,Phe(4F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 794:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,D-Phe6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-D-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 797:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg-Trp-NH₂

Соединение № 800:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Alb4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 801:

дез(1-5)-4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил-[AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 809:

дез(1)-Ac-[D-Tyr3,Hyp3,NMeSer5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-NMeSer-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 810:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Hyp5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Hyp-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 813:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Gly5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Gly-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 814:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Ala5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 815:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,D-Ala5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-D-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 816:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,His4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-His-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 843:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Gln4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Gln-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 844:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,D-Asn4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-D-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 845:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Cit4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Cit-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 846:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,D-Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-D-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 856:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Ala(cPr)8,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Ala(cPr)-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 860:

дез(1-5)-4-уреидобензоил-[AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

4-уреидобензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 861:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Arg4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Arg-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 862:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Gly4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Gly-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 863:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Dap4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Dap-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 864:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Dab4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Dab-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 868:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,αMePhe6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-αMePhe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 870:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(2Me)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 872:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(3Me)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 874:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(4Me)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 877:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,трео-Ser(3фенил)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-трео-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 882:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,эритро-Ser(3фенил)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-эритро-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 886:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Nva4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Nva-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 887:

дез(1-2)-Ac-[Hyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 888:

дез(1-2)-3-(п-гидроксифенил)пропионил-[Hyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

3-(п-гидроксифенил)пропионил-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 889:

дез(1-2)-[pGlu3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

pGlu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 896:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,цисHyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-цисHyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 897:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Pro(4F)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Pro(4F)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 899:

дез(1)-Ac-[Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

В особенности, соединения, представленные приведенными ниже соединениями с соответствующими номерами, предпочтительны в качестве производных метастина:

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHPen)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 714),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHcPr)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 715),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHBzl)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 716),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 717),

Ac-D-Tyr-D-Pya(4)-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 718),

Ac-D-Tyr-Aze(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 720),

Ac-D-Tyr-Pic(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 721),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 723),

Ac-D-Tyr-Thz-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 724),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 726),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 727),

Ac-D-Tyr-D-NMeAla-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 732),

Ac-D-Tyr-D-Gln-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 738),

Ac-D-Tyr-D-His-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 739),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Dab-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 740),

Ac-D-Tyr-Ala-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 742),

Ac-D-Tyr-Leu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 743),

Ac-D-Tyr-Ser-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 744),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 745),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 746),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 748),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 749),

Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 750),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 754),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 755),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 756),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 757),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 758),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 759),

Ac-D-Tyr-Pzc(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 760),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 763),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 764),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 765),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 766),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 767),

Ac-D-Tyr-Trp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 768),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 769),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 770),

Ac-D-Tyr-Orn-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 771),

Ac-D-Tyr-Thr-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 772),

Ac-D-Tyr-His(3Me)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 773),

Ac-D-Tyr-Tyr(PO₃H₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 775),

гликолоил-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 776),

Ac-D-Tyr-Pro(4NH₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 780),

Ac-D-Tyr-Hyp(Bzl)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 781),

Ac-D-Tyr-NMePhe-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 782),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 783),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 784),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 785),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 786),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 787),

Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 788),

Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 789),

Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 790),

Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 791),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-D-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 794),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg-Trp-NH₂ (соединение № 797),

Ac-D-Tyr-Hyp-Alb-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 800),

4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 801),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-NMeSer-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 809),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Hyp-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 810),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Gly-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 813),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 814),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-D-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 815),

Ac-D-Tyr-Hyp-His-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 816),

Ac-D-Tyr-Hyp-Gln-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 843),

Ac-D-Tyr-Hyp-D-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 844),

Ac-D-Tyr-Hyp-Cit-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 845),

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-D-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение № 846),

Соединение № 856:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Ala(cPr)8,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Ala(cPr)-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 860:

дез(1-5)-4-уреидобензоил-[AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

4-уреидобензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 861:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Arg4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Arg-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 862:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Gly4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Gly-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 863:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Dap4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Dap-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 864:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Dab4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Dab-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 868:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,αMePhe6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-αMePhe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 870:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(2Me)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 872:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(3Me)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 874:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(4Me)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 877:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,трео-Ser(3фенил)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-трео-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 882:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,эритро-Ser(3фенил)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-эритро-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 886:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Nva4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Hyp-Nva-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 888:

дез(1-2)-3-(п-гидроксифенил)пропионил-[Hyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

3-(п-гидроксифенил)пропионил-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 896:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,цисHyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-цисHyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

Соединение № 897:

дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Pro(4F)3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-D-Tyr-Pro(4F)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂

или

Соединение № 899:

дез(1)-Ac-[Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10

Ac-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂.

Производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства, кроме их способности оказывать супрессивный эффект на метастазирование рака и рост раковой опухоли, характеризуются прекрасной стабильностью в крови, растворимостью и т.п., и могут быть полезны в качестве агентов для профилактики или лечения рака (например, рака легкого, рака желудка, рака печени, рака поджелудочной железы, колоректального рака, рака прямой кишки, рака толстой кишки, рака предстательной железы, рака яичника, цервикального рака, рака молочной железы и т.п.). Производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства оказывают эффект в отношении контроля функции поджелудочной железы и могут быть полезны в качестве агентов для профилактики или лечения заболеваний поджелудочной железы (например, острого или хронического панкреатита, рака поджелудочной железы и т.п.). Производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства оказывают эффект в отношении контроля функции плаценты и могут быть полезны в качестве агентов для профилактики или лечения хориокарциномы, пузырного заноса, инвазивного пузырного заноса, выкидышей, гипоплазии плода, аномального метаболизма глюкозы, аномального метаболизма липидов или индукции родов.

Кроме того, производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства оказывают эффект по повышению уровня сахара, усилению секреции глюкагона из поджелудочной железы и способствуют мочеобразованию и могут использоваться в качестве агентов для профилактики или лечения ожирения, гиперлипемии, сахарного диабета типа II, гипогликемии, гипертензии, диабетической нейропатии, диабетической нефропатии, диабетической ретинопатии, отека, нарушения функции мочевых путей, инсулинрезистентности, нестабильного сахарного диабета, жировой атрофии, инсулиновой аллергии, инсулиномы, артериосклероза, тромботических расстройств или липотоксичности.

Дополнительно производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства обладают превосходной активностью в направлении повышения секреции гонадотропных гормонов, повышения секреции половых гормонов, индукции овуляции или стимуляции овуляции и могут использоваться в качестве низкотоксичных и стабильных агентов, например агентов, улучшающих гонадную функцию, агентов для профилактики или лечения гормон-зависимого рака (например, рака предстательной железы, рака молочной железы и т.п.), бесплодия, эндометриоза, преждевременного полового созревания, миомы матки и т.п., агентов для индукции или стимуляции овуляции, средств, стимулирующих секрецию гонадотропных гормонов, контрацептивов, средств, стимулирующих секрецию половых гормонов, или т.п.

Кроме того, производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства могут использоваться в качестве агентов для профилактики или лечения болезни Альцгеймера, аутизма, выраженных в умеренной степени расстройств познавательной функции и т.п.

Производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства могут использоваться в качестве агентов для подавления секреции гонадотропных гормонов или секреции половых гормонов, в качестве агентов отрицательной регуляции применительно к гонадотропному гормону или половому гормону, в качестве агентов отрицательной регуляции применительно к человеческому белку ОТ7Т175 (рецептор метастина), состоящему из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9, в качестве агентов для профилактики или лечения гормон-зависимых видов рака (например, рака предстательной железы, рака молочной железы и т.п., в частности, гормон-чувствительного рака предстательной железы, гормон-чувствительного рака молочной железы и т.п.); в качестве агентов для профилактики или лечения эндометриоза; агентов для ингибирования созревания фолликул в яичнике; агентов, задерживающих менструальный цикл; агентов для лечения миомы матки, агентов для лечения преждевременного созревания; контрацептивов и т.п.

Дополнительно производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства могут использоваться в качестве агентов для потенцирования иммунитета (например, в качестве профилактических агентов против инфекции после трансплантации костного мозга, агентов для потенцирования иммунитета, направленных на раковую опухоль и т.п.), в качестве иммуностимулятора (например, для регенерации вилочковой железы, возобновления роста вилочковой железы, усиления развития Т-клеток и т.п.); в качестве агентов для профилактики или лечения бульбоспинальной мышечной атрофии; агентов для защиты яичника; агентов для профилактики или лечения доброкачественной гипертрофии простаты (ВРН); агентов для профилактики или лечения расстройства идентификации пола; или агентов для оплодотворения in vitro (IFV). Кроме того, они также могут использоваться в качестве агентов для профилактики или лечения бесплодия, гипогонадизма, олигоспермии, азооспермии, аспермии, астеноспермии или некроспермии. Дополнительно, они также могут использоваться в случае гормон-зависимых заболеваний (таких как рак, связанный с половыми гормонами, такой как рак предстательной железы, рак матки, рак молочной железы, опухоль гипофиза и т.п.), при увеличении предстательной железы, при эндометриозе, фиброме матки, преждевременном половом созревании, дисменорее, аменорее, предменструальном синдроме, синдроме многогнездного яичника, послеоперативном рецидиве указанных выше видов рака, при метастазах указанных выше видов рака, гипопитуитаризм, карликовости (в том случае, когда секреция полового гормона нарушена за счет гипосекреции гормона гипофиза и т.п.), при расстройствах в менопаузе, в случае неясных жалоб, при расстройствах, зависимых от половых гормонов, таких как связанные с кальцием и фосфором нарушения метаболизма в кости. Они также применимы для целей контрацепции (или инфертильности, когда используется так называемый эффект «рикошета» после прекращения действия лекарственного средства) и т.п.

Кроме того, метастин, как таковой, или ДНК, кодирующая метастин, и т.п. также могут применяться в качестве агентов, подавляющих секрецию гонадотропных гормонов или секрецию половых гормонов; средств, осуществляющих отрицательную регуляцию рецептора человеческого белка ОТ7Т175 (рецептора метастина), состоящего из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9; а также в качестве агентов для профилактики или лечения гормон-зависимых видов рака (например, рака предстательной железы, рака молочной железы и т.п.; в частности, гормон-чувствительного рака предстательной железы, гормон-чувствительного рака молочной железы и т.п.); в качестве агентов для профилактики или лечения эндометриоза; агентов для подавления созревания фолликул в яичнике; агентов, задерживающих менструальный цикл; агентов для лечения миомы матки; агентов для лечения преждевременного полового созревания; контрацептивов и т.п.

Производные метастина согласно изобретению могут быть получены по известным методам пептидного синтеза. В качестве одного из подходящих для данной цели методов пептидного синтеза, например, может использоваться процедура твердофазного синтеза или синтеза в жидкой фазе. При этом часть пептида или аминокислоты, которые могут составлять пептид согласно изобретению, подвергают повторной конденсации с оставшейся частью до образования продукта с желательной последовательностью. В том случае, когда рассматриваемый продукт содержит защитные группы, указанные защитные группы удаляют с получением заданного пептида. Хорошо известные методы конденсации и удаления защитных групп описаны в приведенных ниже работах (1)-(5):

(1) M. Bodansky & M.A. Ondetti: Peptide Synthesis, Interscience Publishers, New York (1966);

(2) Schroeder & Luebke: The Peptide, Academic Press, New York (1965);

(3) Nobuo Izumiya, et al.: Peptide Gosei-no-Kiso to Jikken (Basics and experiments of peptide synthesis), published by Mazuren Co. (1975);

(4) Haruaki Yajima & Shunpei Sakakibara: Seikagaku Jikken Koza (Biochemical Experiment) 1, Tanpakushitsu no Kagaku (Chemistry of Proteins) IV, 205 (1977);

(5) Haruaki Yajima, ed.: Zoku Iyakuhin no Kaihatsu (A sequel to Development of Pharmaceuticals), Vol.14, Peptide Synthesis, published by Hirokawa Shoten.

По завершении реакции продукт может быть очищен и выделен с использованием сочетания традиционных методов очистки, таких как экстракция растворителями, отгонка, хроматография на колонке, жидкостная хроматография и рекристаллизация, с получением пептида согласно изобретению. Если полученный в соответствии с указанными выше методами пептид находится в свободной форме, такой пептид может быть преобразован в соответствующую соль по известным методам; и наоборот, когда полученный пептид имеет солевую форму, он может быть превращен в свою свободную форму, также по известным методам.

Для целей конденсации защищенных аминокислот или пептидов может использоваться множество активирующих реагентов при проведении пептидного синтеза, но особенно предпочтительными являются соли трифосфония, соли тетраметилурония, карбодиимиды и т.п. Примеры солей трифосфония включают гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис(пирролидино)фосфония (PyBOP), гексафторфосфат бромтрис(пирролидино)фосфония (PyBroP) и гексафторфосфат 7-азабензотриазол-1-илокситрис(пирролидино)фосфония (PyАoP), примеры солей тетраметилурония включают 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-гексафторфосфат (HBTU), 2-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-гексафторфосфат (HАTU), тетрафторборат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (ТBTU), тетрафторборат 2-(5-норборнен-2,3-дикарбоксиимидо)-1,1,3,3-тетраметилурония (ТNTU) и тетрафторборат О-(N-сукцимидил)-1,1,3,3-тетраметилурония (ТSTU), примеры карбодиимидов включают ДЦК (DCC), N,N'-диизопропилкарбодиимид (DIPCDI) и гидрохлорид N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDCI.HCl); и т.п. При проведении реакции конденсации с использованием указанных реагентов предпочтительно добавление ингибиторов рацемизации (например, HONB, HOBt, HOAt, HOOBt и т.п.). Используемые в реакции конденсации растворители могут быть выбраны из тех растворителей, в отношении которых известно, что они применимы для конденсации. Так, например, могут использоваться амиды кислот, такие как безводный или водный N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид, N-метилпирролидон и т.п., галогенизированные углеводороды, такие как метиленхлорид, хлороформ и т.п., спирты, такие как трифторэтанол, фенол и т.п., сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид и т.п., третичные амины, такие как пиридин и т.п., эфиры, такие как диоксан, тетрагидрофуран и т.п., нитрилы, такие как ацетонитрил, пропионитрил и т.п., сложные эфиры, такие как метилацетат, этилацетат и т.п., или их подходящие смеси. Используемое для проведения реакции значение температуры выбирают из перечня соответствующих показателей, применимых в пептидной химии для реакции связывания, которые обычно укладываются в диапазон температур примерно от -20ºС до 50ºС. Активированные производные аминокислот обычно используют в 1,5-6-кратном избытке. В случае твердофазного синтеза состояние конденсации оценивают с помощью нингидриновой реакции; при этом если конденсация прошла недостаточно полно, то реакция конденсация может быть завершена путем ее повтора без удаления защитных групп. И если конденсация была все еще недостаточно полной даже после повторения реакции, то непрореагировавшие аминокислоты подвергают ацилированию уксусным ангидридом или ацетилимидазолом для предотвращения любого побочного эффекта на ход последующей реакции.

Примеры защитных групп, используемых для защиты аминогрупп в исходных аминокислотах, включают Z, Boc, трет-пентилоксикарбонил, изоборнилоксикарбонил, 4-метоксибензилоксикарбонил, Cl-Z, Br-Z, адамантилоксикарбонил, трифторацетил, фталоил, формил, 2-нитрофенилсульфенил, дифенилфосфинотиоил, Fmoc, тритил и т.п. Примеры защитных групп для карбоновой группы включают, в дополнение к С_1-6алкильной группе, С_3-8циклоалкильной группе и С_7-14аралкильной группе, применительно к описанному выше R, аллильную, 2-адамантильную, 4-нитробензильную, 4-метоксибензильную, 4-хлорбензильную, фенацильную группу, бензилоксикарбонилгидразид, трет-бутоксикарбонилгидразид, тритилгидразид и т.п.

Гидроксильная группа серина и треонина может быть защищена, например, за счет этерификации сложным или простым эфиром. Примеры групп, подходящих для такой этерификации сложным эфиром, включают группу, полученную из органической кислоты, такую как низшая (С_2-4)алканоильная группа, такую как ацетильная группа, ароильная группа, такую как бензоильная группа, и т.п. Примеры групп, подходящих для такой этерификации простым эфиром, включают бензильную группу, тетрагидропиранильную группу, трет-бутильную группу, тритильную группу (Trt) и т.п.

Примеры групп, применяемых для защиты фенольной гидроксильной группы тирозина, включают Bzl, 2,6-дихлорбензил (Cl₂-Bzl), 2-нитробензил, Br-Z, трет-бутил и т.п.

Примеры групп, используемых для защиты имидазольного фрагмента гистидина, включают Tos, 4-метокси-2,3,6-триметилбензолсульфонил (Mtr), DNP, Bom, Bum, Boc, Trt, Fmoc и т.п.

Примеры защитных групп для гуанидино группы аргинина включают Tos, Z, 4-метокси-2,3,6-триметилбензолсульфонил (Mtr), п-метоксибензолсульфонил (MBS), 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сульфонил (Pmc), мезитилен-2-сульфонил (Mts), 2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофуран-5-сульфонил (Pbf), Boc, Z, NO₂ и т.п.

Примеры защитных групп для аминогруппы в боковой цепи лизина включают Z, Cl-Z, трифторацетил, Boc, Fmoc, Trt, Mtr, 4,4-диметил-2,6-диоксоциклогексилиденеил (Dde) и т.п.

Примеры защитных групп для индолильного фрагмента в триптофане включают формил (For), Z, Boc, Mts, Mtr и т.п.

Примеры защитных групп для аспарагина и глутамина включают Trt, ксантил (Xan), 4,4'-диметоксибензгидрил (Mbh), 2,4,6-триметоксибензил (Tmob) и т.п.

Примеры активированных карбоксильных групп в исходном материале включают соответствующие ангидриды, азиды, активированные сложные эфиры [сложные эфиры, полученные со спиртами (такими как, например, пентахлорфенол, 2,4,5-трихлорфенол, 2,4-динитрофенол, цианометиловый спирт, п-нитрофенол, HONB, N-гидроксисукцинимид, 1-гидроксибензотриазол (HOBt) или 1-гидрокси-7-азабензотриазол (HOAt)] и т.п. В качестве аминокислот, в случае которых аминогруппы в исходном материале активированы, используют соответствующие фосфорамиды.

Для удаления (расщепления) защитных групп используют каталитическую реакцию, проводимую в потоке газообразного водорода, в присутствии катализатора, такого как черный палладий или палладий на угле; кислотную обработку безводным фтористым водородом, метансульфоновой кислотой, трифторметансульфоновой кислотой, трифторуксусной кислотой, триметилсиланбромидом (TMSBr), триметилсилилтрифторметансульфонатом, тетрафторборной кислотой, трис(трифтор)бором, трибромидом бора или смесью растворов на их основе, щелочную обработку диизопропилэтиламином, триэтиламином, пиперидином, пиперазином и т.п., а также путем восстановления натрием в жидком аммиаке. Указанный выше способ удаления защитных групп путем кислотной обработки проводят в основном при температуре, составляющей примерно от -20ºС до 40ºС. При проведении кислотной обработки эффективно добавлять соединение, выполняющее функцию катионной ловушки, такое как анизол, фенол, тиоанизол, м-крезол, п-крезол и т.п., диметилсульфид, 1,4-бутандитиол, 1,2-этандитиол и т.п. Кроме того, 2,4-динитрофенильную группу, добавляемую в качестве защитной группы для имидазольного фрагмента гистидина, удаляют путем обработки тиофенолом. Формильную группу, используемую в качестве защитной группы для индольного фрагмента триптофана, удаляют путем указанной выше кислотной обработки в присутствии 1,2-этандитиола, 1,4-бутандитиола и т.п., а также за счет обработки щелочью, такой как разбавленный раствор гидроксида натрия, разбавленный аммиак и т.п.

Защита функциональных групп, которые не должны вовлекаться в реакцию исходных материалов, сами защитные группы, удаление защитных групп и активация функциональных групп, вовлекаемых в реакцию, могут быть соответствующим образом выбраны из хорошо известных для этих целей групп и хорошо известных средств.

Способы получения амида пептида включают, например, твердофазный синтез с использованием смол, подходящих для формирования амида пептида. В рамках другого способа, для получения амида пептида, например, α-карбоксильную группу карбокси-концевой аминокислоты вначале защищают посредством амидирования; затем пептидную цепь расширяют со стороны аминогруппы до желательной длины. И далее получают пептид, в котором была удалена только защитная группа от N-концевой α-аминогруппы в пептидной цепи, и пептид (или аминокислота), в котором была удалена только защитная группа от С-концевой карбоксильной группы. Оба пептида конденсируют в смеси растворителей, описанных выше. Детали проведения реакции конденсации соответствуют описанной выше реакции. После очистки защищенного пептида, полученного в ходе конденсации, удаляют все защитные группы по описанному выше способу с получением желательного неочищенного пептида. Указанный неочищенный пептид подвергают очистке с использованием известных процедур очистки. Лиофилизация основной фракции дает амид желательного пептида.

В том случае, когда производное метастина согласно изобретению присутствует в виде конформационного изомера, диастереомера, конформера или т.п., каждая из таких форм может быть выделена и очищена, при желании, с использованием описанных выше методов. Кроме того, в том случае, когда соединение согласно изобретению представляет собой рацемическое соединение, оно может быть получено в виде S изомера и R изомера с использованием обычных способов разрешения.

В том случае, когда имеются пространственные изомеры производного метастина согласно изобретению, настоящее изобретение включает оба таких изомера по отдельности, а также изомеры, присутствующие в виде смеси.

Дополнительно, производное метастина согласно изобретению также может быть гидратированным или негидратированным соединением.

Производное метастина согласно изобретению также может быть мечено изотопом (например, ³Н, ¹⁴С, ³⁵S) и т.п.

В тексте описания пептиды обозначаются в соответствии с принятым способом описания пептидов, то есть N-конец (амино-конец) указывается с левой стороны и С-конец (карбоксильный конец) указывается с правой стороны. В пептидах С-конец обычно представлен в виде амида (-СОNH₂), карбоксильной группы (-СООН), карбоксилата (-СОО^-), алкиламида (-CONHR) или сложноэфирной группы (-COOR), при этом амид (-СОNH₂) в данном случае особенно предпочтителен. Примеры R групп в сложном эфире или алкиламиде включают С_1-6 алкильную группу, такую как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил и т.п.; С_3-8 циклоалкильную группу, такую как циклопентил, циклогексил и т.п.; С_6-12 арильную группу, такую как фенил, α-нафтил и т.п.; С_7-14 аралкильную группу, такую как фенил-С_1-2 алкильная группа, например, бензил, фенетил и т.п.; или α-нафтил-С_1-2 алкильную группу, такую как α-нафтилметил и т.п.; пивалоилоксиметильную группу, которые, будучи сложным эфиром, широко используются для перорального приема, и т.п.

Примеры соли производного метастина согласно изобретению включают соль металла, соль аммония, соль, полученную с использованием органического основания, соль, полученную с использованием неорганической кислоты, соль, полученную с использованием органической кислоты, соль, полученную с использованием основной или кислой аминокислоты и т.п. Предпочтительные примеры соли металла включают соли щелочного металла, такие как соли натрия, соли калия и т.п.; соли щелочноземельного металла, такие как соли кальция, соли магния, соли бария и т.п.; соли алюминия и т.п. Предпочтительные примеры солей, полученных с использованием органических оснований, включают соли с триметиламином, триэтиламином, пиридином, пиколином, 2,6-лютидином, этаноламином, диэтаноламином, триэтаноламином, циклогексиламином, дициклогексиламином, N,N'-дибензилэтилендиамином и т.п. Предпочтительные примеры солей, полученных с использованием неорганических кислот, включают соли хлористо-водородной кислоты, бромисто-водородной кислоты, азотной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты и т.п. Предпочтительные примеры солей, полученных с использованием органических кислот, включают соли муравьиной кислоты, уксусной кислоты, трифторуксусной кислоты, фталевой кислоты, фумаровой кислоты, щавелевой кислоты, винной кислоты, малеиновой кислоты, лимонной кислоты, янтарной кислоты, яблочной кислоты, метансульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты и т.п. Предпочтительные примеры солей, полученных с использованием основных аминокислот, включают соли аргинина, лизина, орнитина и т.п., и предпочтительные примеры солей, полученных с использованием кислых аминокислот, включают соли аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты и т.п.

Среди указанных выше солей предпочтительны фармацевтически приемлемые соли. Например, в том случае, когда соединение содержит кислую функциональную группу, предпочтительны неорганические соли, такие как соли щелочного металла (например, соли натрия, соли калия и т.п.), соли щелочноземельного металла (например, соли кальция, соли магния, соли бария и т.п.), соли аммония и т.п. В том случае, когда соединение содержит основную функциональную группу, предпочтительны соли с неорганическими кислотами, такими как хлористо-водородная кислота, бромисто-водородная кислота, азотная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и т.п., и соли с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, фталевая кислота, фумаровая кислота, щавелевая кислота, винная кислота, малеиновая кислота, лимонная кислота, янтарная кислота, метансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота и т.п.

Пролекарство производного метастина или его соли (далее иногда называемое просто как производное метастина согласно изобретению) относится к такому производному метастина, которое превращается в живом организме в производное метастина согласно изобретению в физиологических условиях или в ходе реакции, идущей под действием фермента, желудочного сока и т.п. Иными словами, пролекарство согласно изобретению представляет собой производное метастина, которое подвергается ферментативному окислению, восстановлению, гидролизу и т.п., с превращением в производное метастина согласно изобретению или в производное метастина, которое подвергается гидролизу и т.п. под действием желудочной кислоты и т.п., так что при этом превращается в производное метастина согласно изобретению.

Примеры пролекарства производного метастина согласно изобретению включают производное метастина, где аминогруппа в указанном производном метастина согласно изобретению замещена ацилом, алкилом, фосфорной кислотой и т.п. (например, производные метастина, где аминогруппа в указанном производном метастина согласно изобретению замещена эйкозаноилом, пентиламинокарбонилом, (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метоксикарбонилом, тетрагидрофуранилом, пирролидилметилом, пивалоилоксиметилом, трет-бутилом и т.п.), производные метастина, где гидроксигруппа в указанном производном метастина согласно изобретению замещена ацилом, алкилом, фосфорной кислотой, борной кислотой и т.п. (например, производные метастина, где гидроксигруппа в указанном производном метастина согласно изобретению замещена ацетилом, пальмитоилом, пропаноилом, пивалоилом, сукцинилом, фумарилом, аланилом, диметиламинометилкарбонилом и т.п.); и производные метастина, где карбоксигруппа в указанном производном метастина согласно изобретению замещена сложноэфирной группой, амидом и т.п. (например, производные метастина, где карбоксигруппа в указанном производном метастина согласно изобретению замещена сложным этиловым эфиром, сложным фениловым эфиром, сложным карбоксиметиловым эфиром, сложным диметиламинометиловым эфиром, сложным пивалоилоксиметиловым эфиром, сложным этоксикарбонилоксиэтиловым эфиром, сложным фталидиловым эфиром, сложным (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метиловым эфиром, сложным циклогексилоксикарбонилэтиловым эфиром, метиламидом и т.п.) и т.п. Указанные производные метастина могут быть получены из производных метастина согласно изобретению по pеr se известным методам.

Пролекарства производного метастина согласно изобретению могут представлять собой такие пролекарства, которые в физиологических условиях превращаются в производное метастина согласно изобретению, как описано в соответствующем руководстве (“Pharmaceutical Research and Development”, Vol. 7 (Drug Design), pages 163-198, published 1990 by Hirokawa Publishing Co.).

Производные метастина согласно изобретению или их соли или пролекарства (далее иногда называемые просто как соединение согласно изобретению) обладают супрессивной активностью в отношении метастазирования рака или супрессивной активностью в отношении роста раковой опухоли. Таким образом, производные метастина могут использоваться в качестве лекарственных средств, таких как агенты для профилактики или лечения всех видов рака (например, рака легкого, рака желудка, рака печени, рака поджелудочной железы, колоректального рака, рака прямой кишки, рака толстой кишки, рака предстательной железы, рака яичника, цервикального рака, рака молочной железы и т.п.) и т.п.

Соединение согласно изобретению также обладает эффектом, определяемым его способностью контролировать функцию поджелудочной железы, и, в этой связи, оно может использоваться как лекарственное средство, такое как агент для профилактики или лечения различных расстройств поджелудочной железы (например, острого или хронического панкреатита, рака поджелудочной железы и т.п.).

Кроме того, соединение согласно изобретению обладает эффектом, определяемым его способностью контролировать функцию плаценты, и, в этой связи, оно может использоваться как лекарственное средство, такое как агент для профилактики или лечения хориокарциномы, пузырного заноса, инвазивного пузырного заноса, выкидышей, гипоплазии плода, аномального метаболизма глюкозы, аномального метаболизма липидов или индукции родов.

Кроме того, соединение согласно изобретению оказывает эффект по повышению уровня сахара, усилению секреции глюкагона из поджелудочной железы и способствует мочеобразованию и, в этой связи, может использоваться в качестве лекарственного средства, такого как гипергликемические агенты, агенты, способствующие секреции глюкагона из поджелудочной желез, или агенты, способствующие мочеобразованию, которые используются для профилактики или лечения ожирения, гиперлипемии, сахарного диабета типа II, гипогликемии, гипертензии, диабетической нейропатии, диабетической нефропатии, диабетической ретинопатии, отека, нарушения функции мочевых путей, инсулинрезистентности, нестабильного сахарного диабета, жировой атрофии, инсулиновой аллергии, инсулиномы, артериосклероза, тромботических расстройств или липотоксичности и т.п.

Дополнительно, соединение согласно изобретению также обладает эффектом по усилению секреции гонадотропных гормонов (например, ФСГ (FSH), ЛГ (LH), и т.п.), по усилению секреции половых гормонов [например, андрогенов (например, тестостерона, андростендиона и т.п.), эстрогенов (например, эстрадиола, эстрона и т.п.), прогестеронов и т.п.], по улучшению гонадной функции и по индукции или стимуляции овуляции, а также оказывает воздействие на половое созревание и т.п. и, в этой связи, может использоваться в качестве агента, способствующего улучшению гонадной функции, агента для индукции или стимуляции овуляции, агента, способствующего секреции гонадотропных гормонов, или агента, способствующего секреции половых гормонов, или агента для профилактики или лечения гормон-зависимых видов рака [например, рака предстательной железы, рака молочной железы и т.п.], бесплодия [например, нерегулярных менструаций, дисменореи, аменореи, снижения веса, вызванного аменореей, вторичной аменореи, ановуляции, гипооварианизма, гипогонадизма, недостаточности сперматогенеза, гипогонадизма (например, импотенции и т.п.), атрофии половых органов, атрофии яичка, расстройства функции яичка, азооспермии, гипоандрогенемии и т.п.], эндометриоза, преждевременного полового созревания, миомы матки и т.п.

Кроме того, пролекарство производного метастина согласно изобретению или его соль может использоваться в качестве агента для профилактики или лечения болезни Альцгеймера, аутизма, умеренного нарушение познавательной функции и т.п.

Существенно также, что соединение согласно изобретению характеризуется прекрасной стабильностью в крови, растворимостью и стабильностью в растворе, в сравнении с нативным метастином, таким как метастин 54 (1-54) или метастин 10 (45-54).

Производное метастина согласно изобретению или его соль или пролекарство, метастин, как таковой, или ДНК, кодирующая метастин, и т.п. могут использоваться в качестве агента, подавляющего секрецию гонадотропных гормонов (например, ФСГ, ЛГ) или секрецию половых гормонов [например, андрогена (например, тестостерона, андростендиона), эстрогена (например, эстрадиола, эстрона), прогестерона]; агента, осуществляющего отрицательную регуляцию гонадотропного гормона или полового гормона; в частности, может использоваться для супрессии секреции гонадотропного гормона или секреции полового гормона через механизм отрицательной регуляции гонадотропного гормона или полового гормона (где указанная отрицательная регуляция гонадотропного гормона или полового гормона может представлять собой пульсирующее снижение уровня ЛГРГ (LHRH) или истощение по ЛГРГ), или агента, осуществляющего отрицательную регуляцию человеческого белка ОТ7Т175 (рецептора метастина), состоящего из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9; в частности, может быть особенно полезен в качестве агента для профилактики или лечения гормон-зависимых видов рака (например, рака предстательной железы, рака молочной железы и т.п.; в особенности, рака предстательной железы, гормон-чувствительного рака предстательной железы и т.п.); в качестве агента для профилактики или лечения эндометриоза; агента для подавления созревания фолликул в яичнике; агента, задерживающего менструальный цикл; агента для лечения миомы матки; агента для лечения преждевременного полового созревания или в качестве контрацептивов и т.п. В том случае, когда производное метастина согласно изобретению или его соль или пролекарство, метастин, как таковой, или ДНК, кодирующая метастин, и т.п. обладают нормальной агонистской активностью, эффективную дозу производного метастина, достаточную для супрессии секреции гонадотропного гормона или полового гормона, вводят в определенное место или в ткань, где должны будут проявиться соответствующие терапевтические эффекты, так чтобы производное метастина присутствовало в дозе, большей, чем требуемая (например, производное метастина вводят в избытке относительно нормальной эффективной дозы, при которой производное метастина проявляет эффекты, связанные с супрессией метастазирования рака, супрессией роста раковой опухоли и т.п.; или эффект по усилению секреции гонадотропного гормона или эффект по усилению секреции полового гормона и т.п.), для проявления эффектов, связанных с супрессией секреции гонадотропного гормона или секреции полового гормона. Конкретные примеры включают длительное или непрерывное введение нормальной эффективной дозы (включая такую технику введения, при которой происходит постепенное высвобождение фармацевтических ингредиентов, как при введении болюсом) и т.п. Кроме того, в том случае, когда производное метастина согласно изобретению или его соль или его пролекарство обладают достаточной агонистической активностью, которая превышает требуемую (в случае супер-агонистической активности), вполне возможно поддерживать уровни активности, большие, чем в случае необходимой дозы в определенном месте или в ткани, где должен проявиться терапевтический эффект. В этой связи в данном случае достаточно введения даже нормальной эффективной дозы для подавления секреции гонадотропного гормона или секреции полового гормона, за счет чего достигается эффект, определяемый супрессией секреции гонадотропного гормона или секреции полового гормона.

Иными словами, вводят эффективную дозу производного метастина согласно изобретению или его соль или пролекарство, метастин, как таковой, ДНК, кодирующую метастин и т.п., достаточную для супрессии секреции гонадотропного гормона или полового гормона, так что производное метастина присутствует в дозе, большей, чем требуемая доза, в определенном месте или ткани, где должны появиться соответствующие терапевтические эффекты, или его активность может поддерживаться дольше, чем требуется, что позволяет проявить эффекты, связанные с супрессией секреции гонадотропного гормона или секреции полового гормона.

Фармацевтический препарат, содержащий соединение согласно изобретению, характеризуется низкой токсичностью. В этой связи соединение согласно изобретению может быть безопасно введено либо непосредственно в виде самого соединения, либо в виде смеси с фармакологически приемлемыми носителями, перорально или парентерально (например, местно, ректально, внутривенно и т.п.), в виде фармацевтических препаратов, таких как таблетки (включая драже и таблетки с пленочным покрытием), в виде порошкообразных дозированных форм, гранул, капсул (включая мягкие капсулы), в виде жидких дозированных форм, инъецируемых форм, суппозиториев, форм с длительным высвобождением дозы и т.п., в соответствии с известными способами, которые в основном используются при получении фармацевтических препаратов.

Соединение согласно изобретению содержится в фармацевтическом препарате согласно изобретению в количестве от примерно 0,01 до примерно 100 вес.% от общего веса препарата.

Доза соединения согласно изобретению может варьировать, в зависимости от субъекта, которому проводится введение, от целевого органа, состояния, пути введения и т.п., и, в случае перорального введения, указанное соединение в основном вводят пациенту с раком (применительно к весу тела 60 кг) в суточной дозе, составляющей от примерно 0,01 до примерно 100 мг, предпочтительно от примерно 0,01 до примерно 50 мг и, более предпочтительно, от примерно 0,1 до примерно 20 мг. При парентеральном введении однократная доза соединения может варьировать, в зависимости от субъекта, которому проводится введение, от целевого органа, состояния, пути введения и т.п., и, в случае инъецируемой дозированной формы, рассматривается как эффективный вариант введения указанного соединения пациенту с раком (применительно к весу тела 60 кг) в основном в суточной дозе, составляющей от примерно 0,001 до примерно 30 мг, предпочтительно от примерно 0,01 до примерно 20 мг и, более предпочтительно, от примерно 0,01 до примерно 10 мг. В случае других видов животных может вводиться доза, соответствующая дозе, рассчитанной на вес 60 кг.

Фармакологически приемлемые носители, которые могут использоваться при получении фармацевтического препарата согласно изобретению, включают различные органические или неорганические вещества-носители, традиционно используемые в качестве материалов для фармацевтических препаратов. Указанные вещества включают, например, эксципиент, смазывающее вещество, связующее вещество и средство, способствующее разложению, в твердой дозированной форме, а также растворитель, средство, улучшающее растворение, суспендирующее средство, агент, способствующий поддержанию изотоничности, буфер, успокаивающее средство и т.п., в жидкой дозированной форме. Кроме того, могут использоваться в соответствующих количествах, при необходимости, традиционные добавки, такие как консервант, антиоксидант, краситель, подсластитель, адсорбент и смачивающее вещество.

Примеры эксципиентов включают лактозу, сахарозу, D-маннит, крахмал, кукурузный крахмал, кристаллическую целлюлозу, легкую безводную кремниевую кислоту и т.п.

Примеры смазывающих веществ включают стеарат магния, стеарат кальция, тальк, коллоидный силикагель и т.п.

Примеры связующих веществ включают кристаллическую целлюлозу, сахарозу, D-маннит, декстрин, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, поливинилпирролидон, крахмал, сахарозу, желатин, метилцеллюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу и т.п.

Примеры средств, способствующих разложению, включают крахмал, карбоксиметилцеллюлозу, кальций-карбоксиметилцеллюлозу, натрий-карбоксиметил-крахмал, L-гидроксипропилцеллюлозу и т.п.

Примеры растворителей включают воду для инъекций, спирт, пропиленгликоль, макрогол (Macrogol), кунжутное масло, кукурузное масло, оливковое масло и т.п.

Примеры добавок, улучшающих растворение, включают полиэтиленгликиль, пропиленгликоль, D-маннит, бензилбензоат, этанол, трис-аминометан, холестерин, триэтаноламин, карбонат натрия, цитрат натрия и т.п.

Примеры средств, способствующих суспендированию, включают поверхностно-активные вещества, такие как стеарилтриэтаноламин, лаурилсульфат натрия, лауриламинопропионат, лецитин, хлорид бензалкония, хлорид бензетония, моностеарат глицерина и т.п.; гидрофильные полимеры, такие как поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу и т.п.

Примеры агентов, способствующих поддержанию изотоничности, включают глюкозу, D-сорбит, хлорид натрия, глицерин, D-маннит и т.п.

Примеры буферов включают буферные растворы фосфата, ацетата, карбоната, цитрата и т.п.

Примеры успокаивающих средств включают бензиловый спирт и т.п.

Примеры консервантов включают п-гидроксибензоаты, хлорбутанол, бензиловый спирт, фенетиловый спирт, дегидроксиуксусную кислоту, сорбиновую кислоту и т.п.

Примеры антиоксидантов включают сульфит, аскорбиновую кислоту, α-токоферол и т.п.

Кроме того, соединение согласно изобретению может использоваться в сочетании с лекарственными средствами, отличными от соединения согласно изобретению.

Примеры лекарственных средств, которые могут использоваться в сочетании с соединением согласно изобретению (далее иногда называемые просто как сопутствующие лекарственные средства), включают химиотерапевтические агенты для лечения рака, гормональные терапевтические агенты, иммунотерапевтические агенты и т.п. (далее просто называемые как сопутствующие агенты).

Примеры химиотерапевтических агентов включают алкилирующие агенты, антиметаболиты, противораковые антибиотики, противораковые средства, полученные из растений, и т.п.

Примеры алкилирующих агентов включают азотистый иприт, гидрохлорид N-оксида азотистого иприта, хлорамбуцил, циклофосфамид, ифосфамид, тиотепу, карбоквон, тозилат импросульфана, бусульфан, гидрохлорид нимустина, митобронитол, рнелфалан, дакарбазин, ранимустин, фосфат натрий-эстрамустина, триэтиленмеламин, кармустин, ломустин, стрептозоцин, пипоброман, этоглюцид, карбоплатин, цисплатин, мибоплатин, недаплатин, оксалиплатин, альтретамин, амбамустин, гидрохлорид диброспидия, фотемустин, преднимустин, пумитепу, рибомустин, темозоломид, треосульфан, трофосфамид, циностатин-стималамер, карбоквон, адозелезин, цистемустин, бизелезин и т.п.

Примеры антиметаболитов включают меркаптопурин, рибозид 6-меркаптопурина, тиоинозин, метотрексат, эноцитабин, цитарабин, октофосфат цитарабина, гидрохлорид анцитабина, лекарственные средства на основе 5-ФУ (например, фторурацил, тегафур, UFT, доксифлуридин, кармофур, галлоцитабин, эммитефур и т.п.), аминоптерин, лейковорин-кальций, таблоид, бутоцин, фолинат-кальций, левофолинат-кальций, кладрибин, эмитефур, флударабин, гемцитабин, гидроксикарбамид, пентостатин, пиритрексим, идоксуридин, митогуазон, тиазофрин, амбамустин и т.п.

Примеры противораковых антибиотиков включают актиномицин D, актиномицин С, митомицин С, хромомицин А3, гидрохлорид блеомицина, сульфат блеомицина, сульфат пепломицина, гидрохлорид даунорубицина, гидрохлорид доксорубицина, гидрохлорид акларубицина, гидрохлорид пирарубицина, гидрохлорид эпирубицина, неокарциностатин, митрамицин, саркомицин, карцинофилин, митотан, гидрохлорид зорубицина, гидрохлорид митоксантрона, гидрохлорид идарубицина и т.п.

Примеры противораковых средств, полученных из растений, включают этопозид, фосфат этопозида, сульфат винбластина, сулфат винкристина, сульфат виндестина, тенипозид, паклитаксел, доцетаксел, винорелбин и т.п.

Примеры гормональных терапевтических агентов включают фосфестрол, диэтилстилбестрол, хлортрианизен, ацетат медроксипрогестерона, ацетат мегестрола, ацетат хлормадинона, ацетат ципротерона, даназол, аллилэстренол, гестринон, мепартрицин, ралоксифен, ормелоксифен, левормелоксифен, анти-эстрогены (например, цитрат тамоксифена, цитрат торемифена и т.п.), дозированные формы в виде пилюль, мепитиостан, тестролактон, аминоглютетимид, агонисты ЛГ-РГ (LH-RH) (например, ацетат гозерелина, бузерелин, лейпрорелин и т.п.), дролоксифен, эпитиостанол, сульфонат этинилэстрадиола, ингибиторы ароматазы (например, гидрохлорид фадрозола, анастрозол, ретрозол, эксеместан, ворозол, форместан и т.п.), анти-андрогены (например, флутамид, бикартамид, нилутамид и т.д.), ингибиторы 5α-редуктазы (например, финастерид, эпристерид и т.п.), лекарственные средства на основе адренокортикотропного гормона (например, дексаметазон, преднизолон, бетаметазон, триамцинолон и т.п.), ингибиторы синтеза андрогенов (например, абиратерон и т.п.), ретиноиды и лекарственные средства, которые задерживают метаболизм ретиноидов (например, лиарозол и т.п.) и среди них предпочтительны агонисты ЛГ-РГ (например, ацетат гозерелина, бузерелин, лейпрорелин и т.п.).

Примеры иммунотерапевтических агентов (BRM) включают пицибанил, крестин, сизофиран, лентинан, убенимекс, интерфероны, интерлейкины, макрофагальный колониестимулирующий фактор, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор, эритропоэтин, лимфотоксин, вакцину БЦЖ, Corynebacterium parvum, левамизол, полисахарид К, прокодазол и т.п.

Объединенное использование соединения согласно изобретению и сопутствующего средства демонстрирует следующие превосходные эффекты.

(1) Вводимая доза может быть снижена, в сравнении с дозой в том случае, когда соединение согласно изобретению или соответствующее лекарственное средство вводят по отдельности.

(2) Лекарственное средство, вводимое в сочетании с соединением согласно изобретению, может быть выбрано в зависимости от состояния пациента (легкое, тяжелое и т.п.).

(3) Сопутствующее лекарственное средство, механизм функционирования которого отличается от такового для соединения согласно изобретению, может быть выбрано таким образом, чтобы стало возможным продлить период лечения.

(4) Сопутствующее лекарственное средство, механизм функционирования которого отличается от такового для соединения согласно изобретению, может быть выбрано таким образом, чтобы достичь продолжительного терапевтического эффекта.

(5) Может быть получен синергический эффект при объединенном использовании соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства.

Кроме того, соединение согласно изобретению может снижать показатели тестостерона сразу после введения препарата до уровня, характерного для эмаскуляции. Таким образом, в том случае, когда сопутствующее средство, такое как агонист ЛГ-РГ (например, ацетат гозерелина, бузерелин, лейпрорелин и т.п.; предпочтительно лейпрорелин), используют в сочетании с соединением согласно изобретению, показатели тестостерона могут быть снижены сразу же после введения соединения согласно изобретению до уровня, характерного для эмаскуляции. Кроме того, поскольку объединенное использование сопутствующего лекарственного средства, такого как агонист ЛГ-РГ (например, ацетата гозерелина, бузерелина, лейпрорелина и т.п., предпочтительно лейпрорелина), и соединения согласно изобретению позволяет пролонгировать гормон-зависимое состояние, оно может с успехом использоваться.

В тексте настоящего описания объединенное использование соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства обозначается как «объединенный препарат согласно изобретению».

В том случае, когда используют объединенный препарат согласно изобретению, период дозирования соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства не ограничивается, при этом соединение согласно изобретению или его фармацевтическая композиция и сопутствующее лекарственное средство, или его фармацевтическая композиция могут вводиться субъекту, которому проводится введение, либо одновременно, либо с некоторыми временными интервалами. Доза сопутствующего лекарственного средства может быть модифицирована, в соответствии с используемой для лечения дозой, и может быть соответствующим образом выбрана с учетом субъекта, которому проводится введение, пути введения, заболевания, используемого сочетания препаратов и т.п.

Способ введения объединенного препарата согласно изобретению конкретно не ограничивается, но должен позволять осуществлять введение соединения согласно изобретению в сочетании с сопутствующим лекарственным средством в определенный момент введения. Для такого введения могут использоваться следующие варианты, например, (1) введение одной дозированной формы, полученной при смешивании соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства в одно и то же время, (2) одновременное введение двух дозированных форм, полученных отдельно на основе соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства, посредством одного пути введения, (3) введение двух дозированных форм, полученных отдельно на основе соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства, с определенными временными интервалами посредством одного пути введения, (4) одновременное введение двух дозированных форм, полученных отдельно на основе соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства, посредством разных путей введения, (5) введение двух дозированных форм, полученных отдельно на основе соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства, с определенными временными интервалами (например, введение соединения согласно изобретению и сопутствующего лекарственного средства в указанном порядке или их введение в обратном порядке) посредством разных путей введения и т.д.

Объединенный препарат согласно изобретению характеризуется низкой токсичностью, и, в этой связи, может быть безопасно введен перорально или парентерально (например, местно, ректально, внутривенно и т.п.), либо непосредственно в виде самого соединения, либо в виде фармацевтических препаратов, таких как таблетки (включая драже и таблетки с пленочным покрытием), в виде порошковых дозированных форм, гранул, капсул (включая мягкие капсулы), жидких дозированных форм, инъецируемых форм, суппозиториев, дозированных форм с длительным высвобождением и т.п., которые получают при смешивании соединения согласно изобретению или (и) сопутствующего лекарственного средства, описанного выше, с фармакологически приемлемыми носителями посредством известных способов. Инъецируемые дозированные формы могут вводиться внутривенно, внутримышечно или подкожно в орган или непосредственно в нужный очаг.

Фармакологически приемлемые носители, которые могут использоваться для получения объединенного препарата согласно изобретению, включают различные органические или неорганические вещества-носители, традиционно используемые в качестве материалов для фармацевтических препаратов. Указанное вещество включает, например, эксципиент, смазывающее вещество, связующее вещество и средство, способствующее разложению, в твердой дозированной форме, а также растворитель, средство, улучшающее растворение, средство, способствующее суспендированию, агент, способствующий поддержанию изотоничности, буфер, успокаивающее средство и т.п., в жидкой дозированной форме. Кроме того, могут использоваться, в соответствующих количествах, при необходимости, традиционные добавки, такие как консервант, антиоксидант, краситель, подсластитель, адсорбент, смачивающий агент.

Примеры эксципиентов включают лактозу, сахарозу, D-маннит, крахмал, кукурузный крахмал, кристаллическую целлюлозу, легкую безводную кремниевую кислоту и т.п.

Примеры смазывающих веществ включают стеарат магния, стеарат кальция, тальк, коллоидный силикагель и т.п.

Примеры связующих веществ включают кристаллическую целлюлозу, сахарозу, D-маннит, декстрин, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, поливинилпирролидон, крахмал, сахарозу, желатин, метилцеллюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу и т.п.

Примеры средств, способствующих разложению, включают крахмал, карбоксиметилцеллюлозу, кальций-карбоксиметилцеллюлозу, натрий-карбоксиметил-крахмал, L-гидроксипропилцеллюлозу и т.п.

Примеры растворителей включают воду для инъекций, спирт, пропиленгликоль, макрогол (Macrogol), кунжутное масло, кукурузное масло, оливковое масло и т.п.

Примеры добавок, улучшающих растворение, включают полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, D-маннит, бензилбензоат, этанол, трис-аминометан, холестерин, триэтаноламин, карбонат натрия, цитрат натрия и т.п.

Примеры средств, способствующих суспендированию, включают поверхностно-активные вещества, такие как стеарилтриэтаноламин, лаурилсульфат натрия, лауриламинопропионат, лецитин, хлорид бензалкония, хлорид бензетония, моностеарат глицерина и т.п.; гидрофильные полимеры, такие как поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу и т.п.

Примеры агентов, способствующих поддержанию изотоничности, включают глюкозу, D-сорбит, хлорид натрия, глицерин, D-маннит и т.п.

Примеры буферов включают буферные растворы фосфата, ацетата, карбоната, цитрата и т.п.

Примеры успокаивающих средств включают бензиловый спирт и т.п.

Примеры консервантов включают п-гидроксибензоаты, хлорбутанол, бензиловый спирт, фенетиловый спирт, дегидроксиуксусную кислоту, сорбиновую кислоту и т.п.

Примеры антиоксидантов включают сульфит, аскорбиновую кислоту, α-токоферол и т.п.

В объединенном препарате согласно изобретению соотношение соединения согласно изобретению к сопутствующему лекарственному средству может быть соответствующим образом выбрано с учетом субъекта, которому проводится введение, пути введения, заболевания и т.п.

Так, например, количество соединения согласно изобретению, содержащегося в объединенном препарате согласно изобретению, варьирует в зависимости от дозированной формы препарата, и обычно составляет примерно от 0,01 до 100 вес.%, предпочтительно от примерно 0,1 до примерно 50 вес.%, и, более предпочтительно, примерно от 0,5 до 20 вес.% относительно общего веса препарата.

Количество сопутствующего лекарственного средства, содержащегося в объединенном препарате согласно изобретению, варьирует в зависимости от дозированной формы препарата, но обычно составляет примерно от 0,01 до 100 вес.%, предпочтительно примерно от 0,1 до примерно 50 вес.%, и, более предпочтительно, примерно от 0,5 до 20 вес.% относительно общего веса препарата.

Количество добавок, таких как носитель и т.п., содержащихся в объединенном препарате согласно изобретению, варьирует в зависимости от дозированной формы препарата и обычно составляет примерно от 1 до 99,99 вес.%, предпочтительно примерно от 10 до 90 вес.% относительно общего веса препарата.

Указанные количества, соответственно, могут быть такими же и в том случае, когда соединение согласно изобретению и сопутствующее лекарственное средство получают отдельно.

Указанные препараты могут быть получены в основном per se по известным методам, традиционно используемым в данной области.

Например, соединение согласно изобретению или сопутствующее лекарственное средство могут быть получены в виде инъецируемой дозированной формы для введения в композицию вместе с диспергирующим агентом (таким как, например, Твин-80, производство компании Atlas Powder Company, USA), HCO 60 (производство компании Nikko Chemicals., Ltd.), полиэтиленгликоль, карбоксиметилцеллюлоза, альгинат натрия, гидроксипропилметилцеллюлоза, декстрин и т.п.), со стабилизатором (например, с аскорбиновой кислотой, пиросульфитом натрия и т.п.), поверхностно-активным веществом (например, полисорбатом 80, макроголом и т.п.), солюбилизирующим агентом (например, глицерином, этанолом и т.п.), забуферивающим агентом (например, с фосфорной кислотой или ее солью щелочного металла, с лимонной кислотой или ее солью щелочного металла и т.п.), средством, способствующим поддержанию изотоночности (например, хлоридом натрия, хлоридом калия, маннитом, сорбитом, глюкозой и т.п.), с агентом, корректирующим pH (например, хлористо-водородной кислотой, гидроксидом натрия и т.п.), консервантом (например, этил-п-оксибензоатом, бензойной кислотой, метилпарабеном, пропилпарабеном, бензиловым спиртом и т.п.), солюбилизатором (например, концентрированным глицерином, меглумином и т.п.), средством, улучшающим растворение (например, пропиленгликолем, сахарозой и т.п.), успокаивающим средством (например, глюкозой, бензиловым спиртом и т.п.), с получением водного инъецируемого препарата; или путем растворения, суспендирования, эмульгирования с растительным маслом, таким как оливковое масло, кунжутное масло, хлопковое масло, кукурузное масло и т.п., с добавкой средства, улучшающего растворение, такого как пропиленгликоль или т.п., с получением масляного инъецируемого препарата.

Пероральная дозированная форма может быть произведена традиционным способом при добавлении соединения согласно изобретению или сопутствующего средства, например эксципиента (например, лактозы, сахарозы, крахмала и т.п.), средства, способствующего разложению (например, крахмала, карбоната кальция и т.п.), связующего вещества (например, крахмала, аравийской камеди, карбоксиметилцеллюлозы, пиливинилпирролидона, гидроксипропилцеллюлозы и т.п.), смазывающего вещества (например, талька, стеарата магния, полиэтиленгликоля 6000 и т.п.) и других добавок, с последующим прессованием полученной смеси и, при необходимости, нанесении на прессованный продукт покрытия с целью улучшения вкуса, достижения разложения в кишечнике или пролонгированного высвобождения, по известным per se методикам. Средства для нанесения покрытия, используемые с данной целью, включают, например, гидрокспропилметилцеллюлозу, этилцеллюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, полиоксиэтиленгликоль, Твин-80, Pluronic F68, ацетатфталат целлюлозы, фталат гидроксипропилметилцеллюлозы, ацетат-сукцинат гидроксиметилцеллюлозы, Eudragit (производство компании Rohm Company, Germany, сополимер метакриловой кислоты/акриловой кислоты) и красители (например, оксид железа, диоксид титана). Пероральная дозированная форма может представлять собой дозированную форму с немедленным высвобождением или дозированную форму с пролонгированным высвобождением.

Так, например, в случае суппозитория, соединение согласно изобретению или сопутствующее лекарственное средство получают в виде масляной или водной, твердой, полутвердой или жидкой композиции по методикам per se, известным в данной области. Масляные основы, используемые для описанной выше композиции, включают глицериды высших жирных кислот [например, какао-масло, уитепсолы (производство компании Dynamite Nobel Company, Germany) и т.п.], жирные кислоты со средней длиной цепи [например, миглиолы (производство компании Dynamite Nobel Company, Germany) и т.п.], растительные масла (например, кунжутное масло, соевое масло, хлопковое масло и т.п.) и т.п. Водные основы включают, например, полиэтиленгликоли и пропиленгликоль. Основы для водных гелей включают, например, природные смолы, производные целлюлозы, виниловые полимеры, акриловые полимеры и т.п.

Примеры указанных выше дозированных форм с пролонгированным высвобождением включают микрокапсулы с пролонгированным высвобождением и т.п.

Микрокапсулы с пролонгированным высвобождением могут быть получены per se и предпочтительно получаются в форме, например, дозированных форм с длительным высвобождением по указанному ниже методу [2], с последующим введением.

Предпочтительно соединение согласно изобретению получают в виде дозированной формы для перорального введения, такой как твердая дозированная форма (например, порошковая дозированная форма, гранулы таблетки, капсулы) или в виде дозированной формы, подходящей для ректального введения, такой как суппозиторий и т.п. Особенно предпочтительной является дозированная форма для перорального введения.

Сопутствующее лекарственное средством может быть изготовлено в виде описанной выше лекарственной дозированной формы, с учетом вида лекарственного средства.

Далее в настоящем тексте в разделе [1] описывается инъецируемый препарат на основе соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства и его получение, в разделе [2] описывается получение препарата с пролонгированным высвобождением или препарата с немедленным высвобождением на основе соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства и его получение, и в разделе [3] описываются препараты для сублингвального, трансбуккального или быстрого перорального разложения на основе соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства и его получение.

[1] Инъецируемый препарат и его получение

Инъецируемый препарат, получаемый при растворении соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства в воде, является предпочтительным. Инъецируемый препарат может содержать бензоат и/или салицилат.

Инъецируемый препарат получают путем растворения соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства и необязательно бензоата и/или салицилата в воде.

Примеры указанного выше бензоата и/или салицилата включают соль щелочного металла, такую как соль натрия и соль калия и т.п., соль щелочноземельного металла, такую как соль кальция и соль магния, соль аммония, соль меглумина, соль на основе органической кислоты, такую как трометамол, и т.п.

Концентрация соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства в инъецируемом препарате составляет примерно от 0,05 до 50% (вес./объем), предпочтительно примерно от 0,3 до 20% (вес./объем). Концентрация бензоата и/или салицилата составляет от 0,5 до 50% (вес./объем), предпочтительно от 3 до 20% (вес./объем).

Дополнительно, к препарату добавляют в соответствующем режиме добавки, в основном используемые в инъецируемом препарате, такие как стабилизатор (аскорбиновая кислота, пиросульфит натрия и т.п.), поверхностно-активное вещество (полисорбат 80, макрогол и т.п.), солюбилизирующий агент (глицерин, этанол и т.п.), забуферивающий агент (фосфорная кислота и ее соль щелочного металла, лимонная кислота и ее соль щелочного металла и т.п.), средство, способствующее поддержанию изотоничности (хлорид натрия, хлорид калия и т.п.), диспергирующий агент (гидроксипропилметилцеллюлоза, декстрин и т.п.), агент, корректирующий pH (хлористо-водородная кислота, гидроксид натрия и т.п.), консервант (этил-п-оксибензоат, бензойная кислота и т.п.), солюбилизатор (концентрированный глицерин, меглумин и т.п.), средство, улучшающее растворение (пропиленгликоль, сахароза и т.п.), успокаивающее средство (глюкоза, бензиловый спирт и т.п.). Любую из указанных добавок добавляют в количестве, которое в основном используют в случае инъецируемого препарата.

Значение pH инъецируемого препарата корректируют до достижения диапазона рН 2-12, предпочтительно 2,5-8,0 путем добавления агента для корректировки pH.

Инъецируемый препарат получают путем растворения как соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства, так и необязательно бензоата и/или салицилата и, при необходимости, указанных выше добавок в воде. Указанные компоненты могут быть растворены в любом порядке в соответствии с той процедурой, которая в основном применяется при получении традиционных инъецируемых препаратов.

Водный раствор для инъекции предпочтительно нагревают и используют в виде инъецируемого препарата после стерилизации фильтрованием или автоклавированием, в соответствии с традиционной процедурой изготовления инъецируемых препаратов, с получением инъецируемого препарата.

Водный инъецируемый препарат предпочтительно подвергают автоклавированию, например, при температуре 100-121°С в течение 5-30 минут.

Кроме того, препарат может быть представлен в виде раствора, который делают активным в антибактериальном отношении по методиками, используемым в случае многодозных форм с разделением доз.

[2] Препарат с пролонгированным высвобождением или немедленным высвобождением и его получение

Предпочтительный препарат с пролонгированным высвобождением включает ядро, содержащее соединение согласно изобретению или сопутствующее лекарственное средство, на которое необязательно наносят покрытие с помощью водонерастворимого материала или набухающего полимера. Так, например, предпочтителен препарат с пролонгированным высвобождением для перорального введения в виде дозированной формы для однократного ежедневного приема.

Примеры водонерастворимого материала, используемого в качестве покрывающего агента, включают эфиры целлюлозы, такие как этилцеллюлоза, бутилцеллюлоза и т.п., сложные эфиры целлюлозы, такие как ацетат целлюлозы, пропионат целлюлозы и т.п., сложные поливиниловые эфиры, такие как поливинилацетат, поливинилбутират и т.п., полимеры на основе акриловой кислоты, такие как сополимер акриловой кислоты/метакриловой кислоты, сополимер метилметакрилата, сополимер этоксиэтилметакрилата/циннамоэтилметакрилата/аминоалкилмет-акрилата, полиакриловую кислоту, полиметакриловую кислоту, сополимер алкиламида и метакриловой кислоты, поли(метилметакрилат), полиметакрилат, сополимер аминоалкилметакрилата, поли(метакриловый ангидрид), сополимер глицидилметакрилата, в частности, включают серию Eudragit (Rohm&Pharma), такие как Eudragit RS-100, RL-100, RS-30D, RL-30D, RL-PO и RS-PO (сополимер этилакрилата/метилметакрилата/хлортриметилметакрилата/этил-аммония) и Eudragit NE-30D (сополимер метилметакрилата/этилакрилата) и т.п., гидрогензированные масла, такие как гидрогенизированное касторовое масло (например, LUBRI WAX (Freund Industrial Co., Ltd.) и т.п.), воски, такие как карнаубский воск, сложный эфир глицерина и жирной кислоты, парафин и т.п., сложные эфиры полиглицерина и жирной кислоты и т.п.

Набухающий полимер представляет собой предпочтительно полимер, содержащий кислотную удаляемую группу и демонстрирующий pH-зависимое набухание, при этом предпочтителен полимер, содержащий кислотную удаляемую группу, который подвергается меньшему набуханию при кислом значении pH, имеющемся в желудке, но который в значительной мере набухает при нейтральном значении pH, имеющемся в толстой и тонкой кишке.

Примеры такого полимера, содержащего кислотную удаляемую группу, демонстрирующего pH-зависимое набухание, включают сшитый полимер полиакриловой кислоты, такой как Карбомеры 934P, 940, 941, 974P, 980, 1342 и т.п., поликарбофил и кальций-поликарбофил (все производимые компанией BF Goodrich Chemicals), Hivis Wakos 103, 104, 105 и 304 (все производимые компанией Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и т.п.

Агент покрытия, используемый в препарате с пролонгированным высвобождением, может также содержать гидрофильный материал.

Примеры гидрофильного материала включают полисахарид, который может содержать сульфатную группу, такой как пуллулан, декстрин, альгинаты щелочного металла и т.п., полисахарид, содержащий гидроксиалкильную группу или карбоксиалкильную группу, такой как гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натрий-карбоксиметилцеллюлоза и т.п., метилцеллюлозу, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, полиэтиленгликоль и т.п.

Количество водонерастворимого материала, содержащегося в агенте покрытия в препарате с пролонгированным высвобождением, составляет от примерно 30 до примерно 90 вес.%, предпочтительно от примерно 35 до примерно 80 вес.%, более предпочтительно, от примерно 40 до примерно 75 вес.%, и содержание набухшего полимера составляет от примерно 3 до примерно 30 вес.%, предпочтительно от примерно 3 до примерно 15 вес.%. Агент покрытия может также содержать гидрофильный материал и количество указанного гидрофильного материала, находящегося в агенте покрытия, составляет примерно 50 вес.% или меньше, предпочтительно от примерно 5 до примерно 40 вес.%, более предпочтительно, от примерно 5 до примерно 35 вес.%. В контексте настоящего описания термин «вес.%», указанный выше, используется для обозначения % по весу от всей композиции агента покрытия, который представляет собой остаток раствора на основе агента покрытия после удаления любого из растворителей (например, воды, низшего спирта, такого как метанол, этанол и т.п.).

Препарат с пролонгированным высвобождением производят путем изготовления ядра, содержащего лекарственное средство, описанное ниже, с последующим нанесением покрытия на полученное ядро, с использованием раствора агента покрытия, полученного путем расплавления при нагревании водонерастворимого материала или набухающего полимера, или путем растворения или диспергирования такого материала в растворителе.

I. Получение ядра, содержащего лекарственное средство

Форма ядра, содержащего лекарственное средство, подлежащее покрытию агентом покрытия (далее называемого просто как «ядро»), конкретно не ограничивается, но предпочтительно, чтобы оно формировалось в виде частиц, таких как гранулы, мелкоизмельченные гранулы, или т.п.

В том случае, когда ядро представлено гранулами или мелкоизмельченными гранулами, они могут характеризоваться средним значением размера частиц, составляющим предпочтительно от примерно 150 до примерно 2000 мкм, более предпочтительно, от примерно 500 до примерно 1400 мкм.

Указанное ядро может быть получено традиционным способом. Так, например, лекарственное средство смешивают с подходящим эксципиентом, связующим веществом, средством, способствующим разложению, смазывающим веществом, стабилизатором и т.п., и после этого его подвергают гранулированию путем влажной экструзии, гранулированию в псевдоожиженном слое или т.п.

Содержание лекарственного средства в ядре составляет от примерно 0,5 до 95 вес.%, предпочтительно от примерно 5,0 вес.% до примерно 80 вес.%, более предпочтительно, от примерно 30 до примерно 70 вес.%.

Примеры эксципиента, содержащегося в ядре включают сахарид, такай как сахароза, лактоза, маннит, глюкоза и т.п., крахмал, кристаллическую целлюлозу, фосфат кальция, кукурузный крахмал и т.п. В числе указанных эксципиентов предпочтительны кристаллическая целлюлоза и кукурузный крахмал.

Примеры используемого связующего вещества включают поливиниловый спирт, гидроксипропилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, поливинилпирролидон, Pluronic F68, аравийскую камедь, желатин, крахмал и т.п. Примеры средства, способствующего разложению, включают кальций-карбоксиметилцеллюлозу, (EСG505), натрий-кросскармеллозу (Ac-Di-Sol), сшитый поливинилпирролидон (кросповидон), низкозамещенную гидроксипропилцеллюлозу (L-HPC) и т.п. Среди них предпочтительны гидроксипропилцеллюлоза, поливинилпирролидон и низкозамещенная гидроксипропилцеллюлоза. Примеры смазывающего вещества и антикоагулянта включают тальк, стеарат магния и его неорганические соли, а примеры смазывающих веществ включают полиэтиленгликоль и т.п. Примеры стабилизатора включают кислоту, такую как винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота и т.п.

Кроме описанной выше методики, для получения ядра могут быть использованы другие методики, такие как методика нанесения покрытия при гранулировании, методика, включающая смазывание форм, методика нанесения покрытия в псевдоожиженном слое и методика гранулирования в расплавленном состоянии, в ходе которых лекарственное средство или смесь лекарственного средства с эксципиентом, смазывающим веществом и т.п. распределяют на части и в виде частей добавляют к частицам инертного носителя в качестве затравок для ядра, путем распыления связующего вещества, растворенного в подходящем растворителе, таком как вода, низший спирт (например, метанол, этанол и т.п.) или т.п. Примеры частиц инертного носителя включают соответствующие частицы, полученные из сахарозы, лактозы, крахмала, кристаллической целлюлоза и восков, и, предпочтительно, указанные носителя характеризуются средним размером частиц от примерно 100 мкм до примерно 1500 мкм.

Для целей отделения лекарственного средства, содержащегося в ядре, от агента покрытия, на поверхность ядра может быть наслоен защитный материал. Примеры такого защитного материала включают описанный выше гидрофильный материал и водонерастворимый материал. Предпочтительным защитным материалом является полиэтиленгликоль или полисахарид, содержащий гидроксиалкильную группу или карбоксиалкильную группу, более предпочтительно, это может быть гидроксипропилметилцеллоза и гидроксипропилцеллюлоза. Защитный материал может содержать в качестве стабилизатора кислоту, такую как винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота и т.п., а также смазывающее вещество, такое как тальк. В том случае, когда используют защитный материал, его количество, подлежащее нанесению, составляет от примерно 1 до примерно 15 вес.%, предпочтительно от примерно 1 до примерно 10 вес.%, более предпочтительно, от примерно 2 до примерно 8 вес.% от ядра.

На защитный материал может быть нанесено покрытие с использованием традиционного метода нанесения покрытия, и, конкретно, ядро подвергают покрытию путем распыления защитного материала с помощью методики нанесения покрытия в псевдоожиженном слое, методики смазывания форм и т.п.

II. Нанесение покрытия на ядро с использованием агента покрытия

На ядро, полученное по приведенной выше процедуре I, наносят покрытие с использованием раствора агента покрытия, полученного при нагревании путем расплавления водонерастворимого материала и полимера, набухающего в pH-зависимом режиме, описанных выше, и гидрофильного материала, или путем растворения или диспергирования их в растворителе с получением препарата с пролонгированным высвобождением.

В качестве метода нанесения покрытия на ядро с использованием агента покрытия используют, например, метод нанесения покрытия распылением и т.п.

Соотношение в композиции водонерастворимого материала, набухающего полимера и гидрофильного материала в растворе агента покрытия может быть соответствующим образом выбрано, с тем чтобы оно соответствовало количествам такого рода компонентов, которые должны содержаться в покрытии.

Количество агента покрытия составляет от примерно 1 до примерно 90 вес.%, предпочтительно от примерно 5 до примерно 50 вес.%, более предпочтительно, от примерно 5 до примерно 35 вес.% от всего ядра (за исключением защитного материала покрытия).

В качестве растворителя в растворе агента покрытия могут использоваться вода и органический растворитель, по отдельности или в виде смеси. В случае использования смеси, соотношение воды и органического растворителя (вода/органический растворитель: весовое соотношение) может варьировать в диапазоне от 1 до 100% и составлять предпочтительно от 1 до примерно 30%. Природа органического растворителя конкретно не ограничивается, при этом важно, чтобы он мог растворять водонерастворимый материал, и примеры такого растворителя включают низший спирт, такой как метиловый спирт, этиловый спирт, изопропиловый спирт, н-бутиловый спирт и т.п., низший алканон, такой как ацетон, ацетонитрил, хлороформ, метиленхлорид и т.п. Среди них предпочтителен низший спирт и более предпочтительным является этиловый и изопропиловый спирт. Предпочтительно используют воду и смесь воды и органического растворителя в качестве растворителя для получения раствора агента покрытия. В данном случае кислота, такая как винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота и т.п., могут быть добавлены к раствору агента покрытия, при необходимости, с целью стабилизации раствора агента покрытия.

Для нанесения покрытия путем распылительной процедуры, указанный способ покрытия может быть осуществлен по традиционной методике. В конкретном случае на ядро распыляют раствор агента покрытия по методике нанесения покрытия в псевдоожиженном слое, по методике смазывания форм или т.п. В это же время могут быть добавлены смазывающее вещество, такое как тальк, оксид титана, стеарат магния, стеарат кальция, легкий кремниевый ангидрид и т.п., а также пластификатор, такой как сложный эфир глицерина и жирной кислоты, затвердевшее касторовое масло, триэтилцитрат, цетиловый спирт, стеариловый спирт и т.п.

После нанесения покрытия агентом покрытия, при необходимости, может быть добавлен антистатик, такой как тальк.

Препарат с немедленным высвобождением может представлять собой жидкий препарат (раствор, суспензию, эмульсию и т.п.) или твердый препарат (частицы, пилюли, таблетки и т.п.). При этом может использоваться пероральный препарат и парентеральный препарат, такой как инъецируемый препарат, и предпочтительным является пероральный препарат.

Препарат с немедленным высвобождением может обычно содержать носитель, добавки и эксципиент (долее иногда называемые сокращенно как эксципиенты), которые традиционно используются в фармацевтической области для добавления к лекарственному средству, которое представляет собой активный ингредиент. Природа фармацевтических наполнителей конкретно не ограничивается, главное, чтобы они представляли собой такие эксципиенты, которые обычно используются в фармацевтической области. Примеры эксципиента, подходящего для перорального твердого препарата, включают лактозу, крахмал, кукурузный крахмал, кристаллическую целлюлозу (Avicel PH101, производство компании Asahi Kasei Corporation и т.п.), порошкообразный сахар, гранулированный сахар, маннит, легкий кремниевый ангидрид, карбонат магния, карбонат кальция, L-цистеин и т.п., при этом предпочтительными являются кукурузный крахмал и маннит. Любой из указанных эксципиентов может использоваться по отдельности или в сочетании друг с другом. Количество эксципиентов составляет, например, от примерно 4,5 до примерно 99,4 вес.%, предпочтительно от примерно 20 до примерно 98,5 вес.%, более предпочтительно, от примерно 30 до примерно 97 вес.% от общего веса препарата с немедленным высвобождением.

Содержание лекарственного средства в препарате с немедленным высвобождением может быть соответствующим образом выбрано из диапазона, включающего количество от примерно 0,5 вес.% до примерно 95 вес.%, предпочтительно от примерно 1 вес.% до примерно 60 вес.% от общего веса препарата с немедленным высвобождением.

В том случае, когда препарат с немедленным высвобождением представляет собой пероральный твердый препарат, указанный препарат содержит средство, способствующее разложению, в дополнение к компонентам, описанным выше. Примеры средства, способствующего разложению, включают кальций-крабоксиметилцеллюлозу (EСG505, производство компании GOTOKU CHEMICAL Co., Ltd.), натрий-кроскармеллозу (например, Ac-Di-Sol, производство компании Asahi Kasei Corporation), кросс-повидон (например, COLIDON CL, производство компании BASF), низкозамещенную гидроксипропилцеллюлозу (Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.), карбоксиметилкрахмал (MATSUTANI CHEMICAL INDUSTRY Co., Ltd.), натрий-карбоксиметилкрахмал (EXORITAB, производство компании KIMURA SANGYO), частичный α-крахмал (PCS, производство компании Asahi Kasei Corporation) и т.п. Например, также может использоваться средство, способствующее разложению, которое способно дезинтегрировать гранулы за счет абсорбции воды или набухания при контакте с водой, или за счет формирования канала между активным компонентом, включающим ядро, и эксципиентом. Любые из указанных агентов, способствующих разложению, могут использоваться сами по себе или в сочетании друг с другом. Количество агента, способствующего разложению, может быть соответствующим образом выбрано с учетом типа и количества используемого лекарственного средства или препарата в виде частиц, разработанного для достижения конкретного характера высвобождения. Так, например, указанное количество составляет от примерно 0,05 вес.% до примерно 30 вес.%, предпочтительно от примерно 0,5 вес.% до примерно 15 вес.% от общего веса препарата с немедленным высвобождением.

В том случае, когда препарат с немедленным высвобождением представляет собой пероральный твердый препарат, указанный пероральный твердый препарат может необязательно содержать добавки, традиционно используемые при получении твердой композиции, в дополнение к описанным выше компонентам. Примеры таких добавок включают связующие вещества (например, сахарозу, желатин, порошкообразную аравийскую камедь, метилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, поливинилпирролидон, пуллулан, декстрин и т.п.), смазывающие вещества (полиэтиленгликоль, стеарат магния, тальк, легкий кремниевый ангидрид (например, аэросил (NIPPON AEROSIL)), поверхностно-активные вещества (например, анионные поверхностно-активные вещества, такие как алкилсульфат натрия, неионные поверхностно-активные вещества, такие как сложный эфир полиоксиэтилена и жирной кислоты, сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты, производные полиоксиэтилен-содержащего касторового масла и т.п.), красители (например, красители дегтя, карамель, колкотар, оксид титана, рибофлавины), при необходимости, корригенты (например, подсластители, вкусо-ароматические вещества и т.п.), адсорбенты, консерванты, смачивающие агенты, антистатики и т.п. Кроме того, в качестве стабилизатора может быть добавлена органическая кислота, такая как винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота или т.п.

В качестве указанного выше связующего вещества предпочтительно используют гидроксипропилцеллюлозу, полиэтиленгликоль и поливинилпирролидон.

Препарат с немедленным высвобождением может быть получен путем смешивания описанных выше компонентов и разминания такой смеси, при необходимости, с последующим формованием по известным традиционным методикам с получением фармацевтических препаратов. Указанное выше смешивание может быть проведено традиционным способом, например путем смешивания, разминания и т.п. Конкретно, препарат с немедленным высвобождением имеет форму частиц, при этом указанный препарат может быть получен путем смешивания компонентов в вертикальном грануляторе, с использованием многоцелевого разминателя (HATA IRON WORKS CO., LTD), с использованием гранулятора, включающего обработку в псевдоожиженном слое FD-5S (POWREX CORPORATION), или т.п., с последующим гранулированием полученной смеси путем гранулирования по процедуре влажной экструзии или гранулирования в псевдоожиженном слое по методике, аналогичной методике получения ядра в препарате с пролонгированным высвобождением, описанной выше.

Полученные таким образом препарат с немедленным высвобождением и препарат с пролонгированным высвобождением могут быть объединены в составе композиции сами по себе или в сочетании с соответствующими фармацевтическими эксципиентами, в составе фармацевтических препаратов, по отдельности, с использованием традиционного способа получения соответствующих препаратов, предназначенных для введения в сочетании друг с другом, в одновременном режиме или с некоторыми интервалами времени. Альтернативно, оба препарата могут быть объединены в составе однократной дозированной формы для перорального введения (например, в виде гранул, тонко мелкоизмельченных гранул, таблеток, капсул), сами по себе или в сочетании с соответствующими фармацевтическим эксципиентами. Оба препарата в виде гранул или мелкоизмельченных гранул могут быть также введены в состав одной капсулы для перорального введения.

[3] Препарат для сублингвального, трансбуккального или быстрого перорального введения с достижением разложения и его получение

Препарат для сублингвального, трансбуккального или быстрого перорального введения с достижением разложения может быть представлен в виде твердого препарата, такого как таблетка, или может быть представлен в виде перорального чресслизистого пластыря (пленки) или пероральной разлагаемой пленки.

Сублингвальный, трансбуккальный или пероральный препарат для быстрого разложения предпочтительно представляет собой препарат, содержащий соединение согласно изобретению или сопутствующее лекарственное средство и эксципиент. Указанный препарат может также содержать вспомогательные вещества, такие как смазывающее вещество, средство, способствующее поддержанию изотоничности, гидрофильный носитель, вододиспергируемый полимер, стабилизатор и т.п. Кроме того, для целей усиления абсорбции и повышения биодоступности указанный препарат может также содержать β-циклодекстрин или производные β-циклодекстрина (например, гидроксипропил-β-циклодекстрин и т.п.) и пр.

Примеры указанного выше эксципиента включают лактозу, сахарозу, D-маннит, крахмал, кристаллическую целлюлозу, легкий кремниевый ангидрид и т.п. Примеры смазывающего вещества включают стеарат магния, стеарат кальция, тальк, коллоидный силикагель и т.п., при этом предпочтительны стеарат магния и коллоидный силикагель. Примеры агента, способствующего поддержанию изотоничности, включают хлорид натрия, глюкозу, фруктозу, маннит, сорбит, лактозу, сахарозу, глицерин и мочевину, при этом особенно предпочтительным является маннит. В качестве гидрофильного носителя может использоваться, например, набухающий гидрофильный носитель, такой как кристаллическая целлюлоза, этилцеллюлоза, сшитый поливинилпирролидон, легкий кремниевый ангидрид, кремниевая кислота, фосфат дикальция, карбонат кальция и т.п., при этом предпочтительна кристаллическая целлюлоза (например, микрокристаллическая целлюлоза и т.п.). В качестве вододиспергируемого полимера могут использоваться, например, камеди, такие как трагакант, аравийская камедь, гуаровая камедь, альгинат (например, альгинат натрия), производные целлюлозы (например, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, гидроксиметилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза), желатин, водорастворимый крахмал, полиакриловая кислота (например, карбомер), полиметакриловая кислота, поливиниловый спирт, полиэтиленгликоль, поливинилпирролидон, поликарбофил, аскорбат-пальмитатная соль и т.п., при этом предпочтительными являются гидроксипропилметилцеллюлоза, полиакриловая кислота, альгинат, желатин, карбоксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль. Особенно предпочтительна гидроксипропилметилцеллюлоза. В качестве стабилизатора могут использоваться, например, цистеин, тиосорбит, винная кислота, лимонная кислота, карбонат натрия, аскорбиновая кислота, глицин, сульфит натрия и т.п., при этом особенно предпочтительными являются лимонная кислота и аскорбиновая кислота.

Сублингвальный, трансбуккальный и пероральный препараты с быстрым разложением могут быть получены путем смешивания соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства и эксципиента по известным per se методикам. Кроме того, при желании, в композицию могут быть добавлены вспомогательные агенты, приведенные выше, такие как смазывающее вещество, средство, способствующее поддержанию изотоничности, гидрофильный носитель, вододиспергируемый полимер, стабилизатор, краситель, подсластитель, консервант и т.п. После перемешивания описанных выше компонентов, одновременно или с некоторым интервалом времени, смесь прессуют в таблетки с получением сублингвальных, трансбуккальных или пероральных таблеток с быстрым разложением. Для достижения нужной твердости может быть использован растворитель, такой как вода, спирт и т.п., для увлажнения или смачивания компонентов до или после таблетирования, с последующей сушкой.

При изготовлении пероральной формы препарата в виде пластыря (пленки) соединение согласно изобретению или сопутствующее лекарственное средство и вододиспергируемый полимер (предпочтительно гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу), эксципиент и т.п., описанные выше, растворяют в растворителе, таком как вода и т.п., и затем полученный раствор разливают для формования с получением пленки. Дополнительно, в препарат могут быть введены добавки, такие как пластификатор, стабилизатор, антиоксидант, консервант, краситель, забуферивающее вещество, подсластитель и т.п. Может быть также добавлен гликоль, такой как полиэтиленгликоль и т.п., для придания нужной эластичности пленке, и может быть также добавлен биоадгезивный полимер (например, поликарбофил, карбопол) для повышении адгезии пленки к слизистой ротовой полости. Формование может быть осуществлено путем розлива раствора на неадгезивную поверхность, распределения раствора с использованием устройства для нанесения покрытия, такого как медицинское лезвие с однородной толщиной (предпочтительно, с толщиной примерно 10-1000 микрон), с последующей сушкой раствора и формированием пленки. Полученную таким образом пленку сушат при комнатной температуре или при нагревании и затем нарезают на участки с желательной площадью поверхности.

Предпочтительным пероральным препаратом с быстрым разложением является, например, препарат с быстрой диффузией в твердой сетевой среде, который включает соединение согласно изобретению или сопутствующее лекарственное средство и водорастворимый или диффундирующий в воде носитель, инертный для соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства. Указанная сетка формируется путем сублимации растворителя из твердой композиции, включающей раствор соединения согласно изобретению или сопутствующее лекарственное средство в подходящем растворителе.

Кроме соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства, композиция перорального препарата с быстрым разложением может предпочтительно содержать матрикс-формирующий агент и вторичные компоненты.

Примеры матрикс-формирующего агента включают желатины, декстрины и животные белки или растительные белки из сои, пшеницы, семян подорожника и т.п.; камеди, такие как аравийская камедь, гуаровая камедь, агар-агар, ксантановая камедь и т.п.; полисахариды; альгинаты; карбоксиметилцеллюлозы; каррагенаны; декстраны; пектины; синтетические полимеры, такие как поливинилпирролидоны; материалы, полученные из комплексов желатин-аравийская камедь и т.п. Матрикс-формирующий агент также включает сахариды, такие как маннит, декстроза, лактоза, галактоза, трегалоза; циклические сахариды, такие как циклодекстрины, и т.п.; неорганические соли, такие как фосфат натрия, хлорид натрия, силикат алюминия и т.п.; аминокислоты, содержащие 2-12 атомов углерода, такие как глицин, L-аланин, L-аспарагиновая кислота, L-глутаминовая кислота, L-гидроксипролин, L-изолейцин, L-лейцин, L-фенилаланин и т.п.

В состав раствора или суспензии перед отверждением могут быть включены один или более матрикс-формирующих агентов. Указанные матрикс-формирующие агенты могут присутствовать, в дополнение к поверхностно-активному веществу, или они могут присутствовать без поверхностно-активного вещества. Матрикс-формирующие агенты нужны не только для формирования самого матрикса, но они также способствуют поддержанию соответствующей диффузии соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства в растворе или суспензии.

Композиция может содержать вторичный компонент, такой как консервант, антиоксидант, поверхностно-активное вещество, загуститель, краситель, агент, корректирующий pH, вкусоароматическое вещество вещество, подсластитель, агент, маскирующий вкус и т.п. В качестве подходящего красителя могут, например, использоваться красный, черный и желтый оксид железа, красители FD & C, доступные от компании ERIS & EVERALD, такие как FD & C синий № 2 и FD & C красный № 40 и т.п. Примеры подходящего вкусоароматического вещества включают вкусовые вещества на основе мяты, малины, солодки, апельсина, лимона, грейпфрута, карамели, ванили, вишни, винограда и их сочетания. Примеры подходящего агента, корректирующего pH, включают лимонную кислоту, винную кислоту, фосфорную кислоту, хлористоводородную кислоту и малеиновую кислоту. Примеры подходящего подсластителя включают аспартам, ацесульфам К и тауматин. Примеры подходящего агента, маскирующего вкус, включают бикарбонат натрия, ионообменные смолы, соединения с включением циклодекстрина, адсорбенты и микроинкапсулированный апоморфин.

Препарат в основном содержит соединение согласно изобретению или сопутствующее лекарственное средство, в количестве от примерно 0,1 вес.% до примерно 50 вес.%, предпочтительно от примерно 0,1 вес.% до примерно 30 вес.% и, более предпочтительно, препарат (сублингвальная таблетка, трансбуккальный препарат и т.п., описанные выше) создают возможность для растворения 90% или более соединения согласно изобретению или сопутствующего лекарственного средства (в воде) в течение периода времени, равного от примерно от 1 минуты до примерно 60 минут, предпочтительно в течение периода времени от примерно от 1 минуты до примерно 15 минут, более предпочтительно, в течение периода времени от примерно 2 минут до примерно 5 минут, или указанный препарат представляет собой пероральный препарат с быстрым разложением, который разлагается в течение примерно 1-60 секунд, предпочтительно в течение периода времени от примерно 1 до примерно 30 секунд, более предпочтительно, в течение периода времени от примерно 1 до примерно 10 секунд после помещения в ротовую полость.

Количество указанного выше эксципиента составляет от примерно 10 вес.% до примерно 99 вес.%, предпочтительно от примерно 30 до примерно 90 вес.% от общего веса препарата. Количество β-циклодекстрина или производного β-циклодекстрина составляет от примерно 0 до примерно 30 вес.% от общего веса препарата. Количество смазывающего вещества составляет от примерно 0,01 вес.% до примерно 10 вес.%, предпочтительно от примерно 1 до примерно 5 вес.% от общего веса препарата. Количество средства, способствующего поддержанию изотоничности, составляет от примерно 0,1 вес.% до примерно 90 вес.%, предпочтительно от примерно 10 до примерно 70 вес.% от общего веса препарата. Количество гидрофильного носителя составляет от примерно 0,1 вес.% до примерно 50 вес.%, предпочтительно от примерно 10 до примерно 30 вес.% от общего веса препарата. Количество вододиспергируемого полимера составляет от примерно 0,1 вес.% до примерно 30 вес.%, предпочтительно от примерно 10 до примерно 25 вес.% от общего веса препарата. Количество стабилизатора составляет от примерно 0,1 вес.% до примерно 10 вес.%, предпочтительно от примерно 1 до примерно 5 вес.% от общего веса препарата. При необходимости, описанный выше препарат может также содержать добавки, такие как краситель, подсластитель, консервант и т.п.

Доза объединенных препаратов согласно изобретению варьирует в зависимости от вида соединения согласно изобретению, возраста пациента, веса тела, состояния, используемой дозированной формы, пути введения, периода дозирования и т.п.

Доза соединения согласно изобретению может варьировать в зависимости от того субъекта, которому проводится введение, от целевого органа, состояния субъекта, пути введения и т.п., и при пероральном введении указанно соединение вводится пациенту с раком (применительно к весу тела 60 кг) в суточной дозе, составляющей от примерно 0,01 до примерно 100 мг, предпочтительно от примерно 0,1 до примерно 50 мг и, более предпочтительно, от примерно 0,1 до примерно 20 мг. При парентеральном введении однократная доза соединения может варьировать, в зависимости от того субъекта, которому проводится введение, от целевого органа, состояния субъекта, пути введения и т.п., и в случае инъецируемой дозированной формы считается эффективным при внутривенном введении соединения пациенту с раком (применительно к весу тела 60 кг) использовать в основном суточную дозу, составляющую от примерно 0,001 до примерно 30 мг, предпочтительно от примерно 0,01 до примерно 20 мг и, более предпочтительно, от примерно 0,01 до примерно 10 мг. В случае других видов животных может вводиться соответствующая доза, пересчитанная на вес 60 кг. При этом, разумеется, доза может варьировать в зависимости от состояния животного, как это было указано выше, в таком случае может использоваться доза, меньшая, чем приведенная ранее доза, которая будет в этом случае достаточной, или может использоваться доза выше, чем указанная ранее.

Возможно также указать любой диапазон дозы для сопутствующего лекарственного средства, при этом важно, чтобы оно не вызывало побочных эффектов. Дневная доза сопутствующего лекарственного средства варьирует в зависимости от тяжести заболевания, возраста пациента, пола, веса тела и его чувствительности, периода дозирования и интервалов такого дозирования, от характеристик композиции, типа и природы активных компонентов фармацевтического препарата и т.п., и конкретно не ограничивается. Так, например, при пероральном введении указанная доза составляет примерно от 0,001 до примерно 2000 мг, предпочтительно примерно от 0,01 до примерно 500 мг, и, более предпочтительно, примерно от 0,1 до примерно 100 мг на кг веса тела млекопитающих, применительно к лекарственному средству, обычно эту дозу вводят при разделении ее на 1-4 раза в день.

При введении фармацевтических препаратов согласно изобретению такие препараты могут вводиться одновременно. Альтернативно, сопутствующее лекарственное средство вводят вначале и затем уже вводят соединение согласно изобретению, или, наоборот, соединение согласно изобретению вводят раньше и затем вводят сопутствующее лекарственное средство. В том случае, когда их вводят с некоторыми интервалами времени, указанные интервалы могут варьироваться в зависимости от вводимого компонента, дозированной формы и пути введения; например, в том случае, когда вначале вводят сопутствующее лекарственное средство, соединение согласно изобретению может быть введено в течение периода времени от 1 минуты до 3-х дней, предпочтительно от 10 минут до 1 дня, более предпочтительно, от 15 минут до 1 часа после введения сопутствующего лекарственного средства. В том случае, когда вначале вводят соединение согласно изобретению, сопутствующее лекарственное средство может вводиться в течение периода времени, равного от 1 минуты до 1 дня, предпочтительно от 10 минут до 6 часов, более предпочтительно, от 10 минут до 1 часа, после введения соединения согласно изобретению.

В качестве предпочтительного способа введения, например, рассматривается введение перорально от примерно 0,001 до 200 мг/кг сопутствующего лекарственного средства в форме перорального дозированного препарата и приблизительно через 15 минут введение примерно от 0,005 до 0,5 мг/кг соединения согласно изобретению в форме парентерального препарата, в качестве суточной дозы.

Что касается метастинов, то может использоваться, например, человеческий метастин, описанный в WO 00/24890, мышиный или крысиный метастин, описанные в WO 01/75104, и т.п.

Конкретные примеры человеческого метастина включают пептид, содержащий N-концевую аминокислотную последовательность с 47 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, и состоящий из 8-54 аминокислотных остатков и т.п.

Фраза «пептид, содержащий N-концевую аминокислотную последовательность с 47 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, и состоящий из 8-54 аминокислотных остатков» может относиться к любому пептиду, при условии, что это пептид, содержащий N-концевую аминокислотную последовательность с 47 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, и состоящий из 8-54 аминокислотных остатков, а также означает, что эти пептиды имеют по существу одну и ту же физиологическую активность (например, активность по связыванию с рецептором, функция сигнальной трансдукции, эффект по повышению уровня сахара, эффект по усилению секреции глюкагона из поджелудочной железы, эффект по усилению мочеобразования и т.п.). Конкретно, в настоящем изобретении используется (i) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, описываемую в SEQ ID NO: 1 (ii) пептид, содержащий N-концевую аминокислотную последовательность с 47 по 54 аминокислоту на С-конце аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, и состоящий из 8-15 аминокислотных остатков и т.п.

Более конкретно, используемый человеческий метастин включает (i) пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 54 (1-54)), (ii) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности с 40 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 15 (40-54); SEQ ID NO: 15), (iii) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности с 45 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 10 (45-54); SEQ ID NO: 16), (iv) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности с 46 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 9 (46-54); SEQ ID NO: 17), (v) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности с 47 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 8 (47-54); SEQ ID NO: 18) и т.п.

В качестве мышиного метастина (А) в рамках настоящего изобретения используется, например, (i) пептид, содержащий N-концевую аминокислотную последовательность с 134 по 141 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 3, и состоящий из 8-52 аминокислотных остатков. Конкретные примеры используемого мышиного метастина (А) включают (i) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности с 90 по 141 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 3, (ii) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности со 132 по 141 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 3 (iii), пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности со 127 по 141 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 3, и т.п.

В качестве мышиного метастина (B) в рамках настоящего изобретения используется, например, (i) пептид, содержащий N-концевую аминокислотную последовательность со 138 по 145 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 5, и состоящий из 8-52 аминокислотных остатков. Конкретные примеры используемого мышиного метастина (B) включают пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности с 94 по 145 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 5, и т.п.

В качестве крысиного метастина в рамках настоящего изобретения используется, например, (i) пептид, содержащий N-концевую аминокислотную последовательность со 112 по 119 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7, и состоящий из 8-52 аминокислотных остатков. Конкретные примеры используемого крысиного метастина включают (i) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности с 68 по 119 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7, (ii) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности со 110 по 119 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7, (iii) пептид, состоящий из N-концевой аминокислотной последовательности со 105 по 119 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7, и т.п.

В тексте описания метастины приводятся в соответствии с традиционно принятым способом описания пептидов, что означает следующее: N-конец (аминоконец) пишется с левой стороны, а С-конец (карбоксильный конец) приводится с правой стороны. В пептиде, обозначаемом как SEQ ID NO: 1, С-конец может представлять собой любую форму карбоксильной группы (-COOH), карбоксилата (-COO-), амида (-CONH₂) и сложного эфира (-COOR). В тексте описания примеры R в сложноэфирной группе или алкиламиде включают: C_1-6 алкильную группу, такую как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил и т.п.; C_3-8 циклоалкильную группу, такую как циклопентил, циклогексил и т.п.; C_6-12 арильную группу, такую как фенил, α-нафтил и т. п; C_7-14 аралкил, такой как фенил-С_1-2 алкильная группа, например, бензил, фенетил, бензгидрил и т.п.; или α-нафтил-C_1-2 алкильную группу, такую как α-нафтилметил и т.п.; пивалоилоксиметильную группу, которые широко используются в качестве сложного эфира для перорального введении и т.п.

Кроме того, метастины включают пептиды, где аминогруппа в N-концевом остатке метионина защищена защитной группой (например, C_1-6 ацильной группой, такой как C_2-6 алканоильная группа, например, формильной группой, ацетильной группой и т.п.); такие пептиды, в которых N-концевой участок расщепляется in vivo, и образуемая при этом глютамильная группа пироглутаминирована; такие пептиды, в которых заместитель (например, -OH, -SH, аминогруппа, имидазольная группа, индольная группа, гуанидиновая группа и т.п.) в боковой цепи аминокислоты в молекуле защищена соответствующей защитной группой (например, C_1-6 ацильной группой, такой как C_2-6 алканоильная группа, например, формильной группой, ацетильной группой и т.п.), или включают конъюгированные пептиды, такие как гликопептиды, связанные с сахарными цепями.

Что касается солей метастина согласно изобретению, то предпочтительны соли с физиологически приемлемыми основаниями (например, соли щелочного металла) или кислотами (например, соли на основе органических кислот или неорганических кислот) и т.п., при этом особенно предпочтительными являются физиологически приемлемые аддитивные соли кислоты. Примеры таких солей включают соли, полученные, например, с использованием неорганических кислот (например, с использованием хлористо-водородной кислоты, фосфорной кислоты, бромисто-водородной кислоты, серной кислоты); соли, полученные с использованием органических кислот (например, с использованием уксусной кислоты, муравьиной кислоты, пропионовой кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты, янтарной кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, яблочной кислоты, щавелевой кислоты, бензойной кислоты, метансульфоной кислоты, бензолсульфоновой кислоты) и т.п.

В качестве ДНК, кодирующих метастины, в рамках настоящего изобретения используются, например, ДНК, кодирующие человеческий метастин, описанные в WO 00/24890, ДНК, кодирующие мышиный или крысиный метастин, описанные в WO 01/75104, и т.п.

ДНК, кодирующие метастины, могут представлять собой геномные ДНК, ДНК из геномной библиотеки, кДНК, полученные из клеток и тканей, описанных выше; кДНК, из библиотеки, полученной на основе клеток и тканей, описанных выше, и синтетические ДНК. Вектор, используемый для данной библиотеки, может представлять собой любой бактериофаг, плазмиду, космиду и фагемиду. ДНК может быть также непосредственно подвергнута амплификации по процедуре полимеразно-цепьевой реакции с обратной транскриптазой (далее сокращенно называемой как ОТ-ПЦР) с использованием суммарной РНК или фракции мРНК, полученной из клеток и тканей, описанных выше.

ДНК, кодирующая человеческий метастин, предшественник мышиного метастина (А), предшественник мышиного метастина (B) или предшественник крысиного метастина, может представлять собой любую ДНК, при этом важно, чтобы это была ДНК, содержащая последовательность оснований, представленную SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 8, или чтобы это была ДНК, имеющая последовательность оснований, гибридизуемую с последовательностью оснований, описываемой любой последовательностью, соответствующей SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 8, в условиях высокой жесткости, и кодирующая человеческий метастин, мышиный метастин (А), мышиный метастин (B) или крысиный метастин, описанные выше.

Конкретные примеры ДНК, гибридизуемой с последовательностью оснований, описываемой любой из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 8, включают ДНК, содержащие последовательность оснований, обладающую по меньшей мере примерно 70% гомологией, предпочтительно по меньшей мере примерно 80% гомологией, более предпочтительно, по меньшей мере примерно 90% гомологией и, наиболее предпочтительно, по меньшей мере примерно 95% гомологией к последовательности оснований, описываемой любой из SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 8.

Гомология в последовательности основания может быть определена в следующих условиях (ожидаемое значение = 10; бреши разрешены; фильтрование = ON; баллы, оценивающее спаривание = 1; баллы, оценивающие ошибочное спаривание = -3) с использованием алгоритма определения гомологии NCBI BLAST (National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool).

Гибридизация может быть проведена per se по известным методам или при модификации указанных методов, например, в соответствии процедурой, описанной в работе Самбрука с соавт. (Molecular Cloning, 2^nd, J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989). Может быть также использована коммерчески доступная библиотека, в соответствии с инструкциями и протоколом производителя. Предпочтительно, гибридизация может быть проведена в условиях высокой жесткости.

Используемые в рамках настоящего изобретения условия высокой жесткости включают, например, проведение реакции с концентрацией натрия, равной примерно 19-40 мМ, предпочтительно примерно от 19 до 20 мМ, при температуре, равной примерно 50°С-70°С, предпочтительно примерно при температуре 60°С-65°С. В частности, наиболее предпочтительны такие условия гибридизации, когда гибридизацию проводят с концентрацией натрия, равной примерно 19 мМ, при температуре примерно 65°С.

Конкретно, в качестве ДНК, кодирующей человеческий метастин, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, может использоваться ДНК, включающая последовательность оснований, представленную SEQ ID NO: 2. Соответственно, применительно к последовательности оснований, кодирующей человеческий метастин, состоящий из различных аминокислотных последовательностей, описанных выше, может быть выбрана последовательность оснований, соответствующая каждой из частичных аминокислотных последовательностей в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 2.

В качестве ДНК, кодирующей предшественник мышиного метастина (А), включающий аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 3, используют ДНК, состоящую из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 4, и т.п. Соответственно, применительно к последовательности оснований, кодирующей предшественник мышиного метастина (А), состоящий из различных описанных выше аминокислотных последовательностей, может быть выбрана последовательность оснований, соответствующая каждой из частичных аминокислотных последовательностей в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 3, из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 4.

В качестве ДНК, кодирующей предшественник мышиного метастина (B), включающий аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 5, используют ДНК, состоящую из последовательности оснований, представленных SEQ ID NO: 6, и т.п. Соответственно, применительно к последовательности оснований, кодирующей предшественник мышиного метастина (B), включающего различные описанные выше аминокислотные последовательности, может быть выбрана последовательность оснований, соответствующая каждой из частичных аминокислотных последовательностей в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 5, из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 6.

В качестве ДНК, кодирующей крысиный метастин, включающий аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 7, используют ДНК, состоящую из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 8, и т.п. Соответственно, применительно к последовательности оснований, кодирующей крысиный метастин, состоящий из различных описанных выше аминокислотных последовательностей, может быть выбрана последовательность оснований, соответствующая каждой из частичных аминокислотных последовательностей в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7, из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 8.

Более конкретно, применительно к пептиду, состоящему из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 54 (1-54)), используют ДНК, содержащую последовательность оснований, представленную SEQ ID NO: 2, и т.п.

Применительно к пептиду, состоящему из N-концевой аминокислотной последовательности с 40 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 15 (40-54), SEQ ID NO: 15), используют ДНК, содержащую последовательность оснований, представленную SEQ ID NO: 19, и т.п.

Применительно к пептиду, состоящему из N-концевой аминокислотной последовательности с 45 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 10 (40-54), SEQ ID NO: 16), используют ДНК, содержащую последовательность оснований, представленную SEQ ID NO: 20, и т.п.

Применительно к пептиду, состоящему из N-концевой аминокислотной последовательности с 46 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 9 (46-54), SEQ ID NO: 17), используют ДНК, содержащую последовательность оснований, представленную SEQ ID NO: 21, и т.п.

Применительно к пептиду, состоящему из N-концевой аминокислотной последовательности с 47 по 54 аминокислоту в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1 (человеческий метастин 8 (47-54), SEQ ID NO: 18), используют ДНК, содержащую последовательность оснований, представленную SEQ ID NO: 22 и т.п.

В качестве рецептора метастина используют его частичные пептиды или его соли, например рецептор человеческого метастина, его частичные пептиды или его соли, описанные в WO 00/24890, рецептор мышиного, крысиного или человеческого метастина, его частичные пептиды или его соли, описанные в WO 01/75104 и т.п.

Конкретно, в качестве рецептора метастина используют белок, включающий такую же или по существу такую же аминокислотную последовательность, что и в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, и т.п.

Аминокислотная последовательность, которая по существу является такой же аминокислотной последовательностью, что и аминокислотная последовательность, описываемая SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, включает, например, аминокислотную последовательность, обладающую по меньшей мере примерно 70% гомологией, предпочтительно по меньшей мере примерно 80% гомологией, более предпочтительно, по меньшей мере примерно 90% гомологией и, наиболее предпочтительно, по меньшей мере примерно 95% гомологией к аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13.

Гомология аминокислотных последовательностей может быть определена в следующих условиях (показатель ожидаемого значения = 10; бреши разрешены; матрица = BLOSUM62: фильтрование = OFF) с использованием алгоритма определения гомологии NCBI BLAST (National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool).

В качестве белка, включающего по существу такую же аминокислотную последовательность, что и аминокислотная последовательность, описываемая SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, предпочтительным является белок, содержащий по существу такую же аминокислотную последовательность, что и аминокислотная последовательность, описываемая SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, и имеющий по существу активность той же природы, что и аминокислотная последовательность, описываемая SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13.

Что касается активности по существу той же природы, то в рамках настоящего изобретения рассматривается, например, активность по связыванию лиганда, активность по сигнальной трансдукции и т.п. Фраза «по существу той же природы» используется для обозначения природы указанных видов активности, которые эквивалентны с точки зрения качества. Таким образом, такие виды активности, как активность по связыванию лиганда, активность по сигнальной трансдукции и т.п., предпочтительно эквивалентны (в частности, примерно от 0,01 до 100 раз, предпочтительно примерно от 0,5 до 10 раз, более предпочтительно, от 0,5 до 2 раз), но различия в количественных факторах, такие как уровень такой указанной активности или такие как молекулярный вес белка, могут присутствовать, и они допустимы.

Активность, такая как активность по связыванию лиганда, активность по сигнальной трансдукции и т.п., может быть оценена per sе с использованием известного метода с введением в него модификаций и, в частности, может быть определена по процедурам оценки лиганда или по методам скрининга, описанным, например, в WO 00/24890 или WO 01/75104.

Примеры используемого рецептора метастина включают белки, содержащие (i) аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, из которых по меньшей мере одна или две (предпочтительно, от примерно 1 до примерно 30, более предпочтительно, от примерно 1 до примерно 10, и, наиболее предпочтительно, несколько (1 или 2)) аминокислоты делетированы; (ii) аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, к которым могут быть присоединены по меньшей мере 1 или 2 (предпочтительно, от примерно 1 до примерно 30, более предпочтительно, от примерно 1 до примерно 10, и, наиболее предпочтительно, несколько (1 или 2)) аминокислот; (iii) аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, в которых по меньшей мере одна или две (предпочтительно, от примерно 1 до примерно 30, более предпочтительно, от примерно 1 до примерно 10, и, наиболее предпочтительно, несколько (1 или 2)) аминокислоты замещены другими аминокислотами; или (iv) сочетание указанных аминокислотных последовательностей; и т.п.

В тексте описания рецепторы метастина обозначаются в соответствии с принятым способом описания пептида, то есть, N-конец (аминоконец) пишется с левой стороны, а С-конец (кабоксильный конец) пишется с правой стороны. В рецепторах метастина, включающих рецептор метастина, описываемый SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, С-конец может быть представлен в любой форме карбоксильной группы (-COOH), карбоксилата (-COO-), амида (-CONH₂) и сложного эфира (-COOR). В данном тексте примеры R в сложноэфирной группе включают C_1-6 алкильную группу, такую как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил и т.п.; C_3-8 циклоалкильную группу, такую как циклопентил, циклогексил и т.п.; C_6-12 арильную группу, такую как фенил, α-нафтил и т. п; C_7-14 аралкил, такой как фенил-С_1-2 алкильная группа, например, бензил, фенетил и т.п.; или α-нафтил-C_1-2 алкильную группу, такую как α-нафтилметил и т.п.; пивалоилоксиметильную группу, которые широко используются в качестве сложного эфира для перорального введения, и т.п.

В том случае, когда рецептор метастина содержит карбоксильную группу (или карбоксилат) в положении, отличном от С-конца, указанная карбоксильная группа может быть амидирована или этерифицирована, и такие амиды или сложные эфиры также входят в определение рецептора белка согласно изобретению. В данном случае используемая сложноэфирная группа может представлять собой такую же группу, как и С-концевой сложный эфир, описанный выше.

Кроме того, рецепторы метастина включают такие рецепторы, в которых аминогруппа на N-концевом остатке метионина защищена защитной группой (например, C_1-6 ацильной группой, такой как C_2-6 алканоильная группа, например, формильной группой, ацетильной группой и т.п.); такие рецепторы, в которых N-концевой участок расщепляется in vivo, и образуемая при этом глютамильная группа пироглутаминирована; такие рецепторы, в которых заместитель (например, -OH, -SH, аминогруппа, имидазольная группа, индольная группа, гуанидино группа и т.п.) в боковой цепи аминокислоты в молекуле защищен соответствующей защитной группой (например, C_1-6 ацильной группой, такой как C_2-6 алканоильная группа, например, формильной группой, ацетильной группой и т.п.), или включают конъюгированные пептиды, такие как гликопротеины, связанные с сахарными цепями.

Конкретные примеры рецепторов метастина включают рецептор человеческого метастина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9, рецептор крысиного метастина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 11, рецептор мышиного метастина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 13, и т.п.

Частичные пептиды на основе рецептора метастина (далее просто называемые как частичные пептиды) могут представлять собой любые пептиды, главное, чтобы они представляли собой частичные пептиды описанного выше рецептора метастина; при этом используются такие рецепторы, как белковые молекулы рецептора метастина, которые представляют собой экспонированные сайты, расположенные снаружи клеточной мембраны и обладающие активностью по связыванию лиганда.

Конкретно, частичный пептид рецептора метастина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 13, представляет собой белок, содержащий части, которые, по данным анализа, представляют собой внеклеточные домены (гидрофильные домены) при проведении анализа локализации гидрофобных участков. Может также использоваться пептид, содержащий гидрофобный домен в данной части. Кроме того, указанный пептид может содержать каждый из доменов по отдельности или множество таких доменов вместе.

В рецепторе метастина предпочтительные частичные белки представляют собой такие белки, которые содержат по меньшей мере 20 аминокислот, предпочтительно по меньшей мере 50 аминокислот и, более предпочтительно, по меньшей мере 100 аминокислот в описанной выше аминокислотной последовательности, которая составляет рецептор метастина.

Частичный пептид может представлять собой пептид, имеющий описанную выше аминокислотную последовательность, в которой по меньшей мере одна или две (предпочтительно, от примерно 1 до примерно 10 и, более предпочтительно, несколько (1 или 2)) аминокислоты делетированы; к которой добавлены по меньшей мере одна или две(предпочтительно, от примерно 1 до примерно 10 и, более предпочтительно, несколько (1 или 2)) аминокислоты, или в которой по меньшей мере одна или две (предпочтительно, от примерно 1 до примерно 10 и, более предпочтительно, несколько (1 или 2)) аминокислоты замещены другими аминокислотами.

В частичном пептиде С-конец может быть представлен в любой форме карбоксильной группы (-COOH), карбоксилата (-COO-), амида (-CONH₂) и сложного эфира (-COOR), как было описано выше применительно к рецептору метастина.

Кроме того, частичные пептиды включают такие пептиды, в которых аминогруппа на N-концевом остатке метионина защищена защитной группой, такие пептиды, в которых N-концевой участок расщепляется in vivo, и образуемая при этом глутамильная группа пироглутаминирована; такие пептиды, в которых заместитель в боковой цепи аминокислоты в молекуле защищен соответствующей защитной группой, или включают конъюгированные пептиды, такие как гликопептиды, связанные с сахарными цепями, как было описано выше применительно к рецепторам метастина.

Что касается солей рецептора метастина или частичного пептида, то предпочтительны соли с физиологически приемлемыми кислотами, в особенности аддитивные соли физиологически приемлемой кислоты. Примеры таких солей включают соли, образованные, например, с использованием неорганических кислот (например хлористо-водородной кислоты, фосфорной кислоты, бромисто-водородной кислоты, серной кислоты); соли, полученные с использованием органических кислот (например, с использованием уксусной кислоты, муравьиной кислоты, пропионовой кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты, янтарной кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, яблочной кислоты, щавелевой кислоты, бензойной кислоты, метансульфоной кислоты, бензолсульфоновой кислоты) и т.п.

В качестве ДНК, кодирующих рецептор метастина или его частичные пептиды, в рамках настоящего изобретения используются, например, ДНК, кодирующие рецептор человеческого метастина или его частичные пептиды, описанные в WO 00/24890, ДНК, кодирующие рецептор мышиного или крысиного метастина или его частичные пептиды, описанные в WO 01/75104 и т.п.

ДНК, кодирующие рецепторы метастина или его частичные пептиды, могут представлять собой геномные ДНК, ДНК из геномной библиотеки, кДНК полученные из клеток и тканей, описанных выше, кДНК, из библиотеки, полученной на основе клеток и тканей, описанных выше, и синтетические ДНК. Вектор, используемый для данной библиотеки, может представлять собой любой бактериофаг, плазмиду, космиду и фагемиду. Указанная ДНК может быть также непосредственно подвергнута амплификации по процедуре полимеразно-цепьевой реакции с обратной транскриптазой (далее сокращенно называемой как ОТ-ПЦР) с использованием суммарной РНК или фракции мРНК, полученной из клеток и тканей, описанных выше.

Конкретно, ДНК, кодирующая рецептор человеческого метастина, рецептор мышиного метастина или рецептор крысиного метастина, может представлять собой любую ДНК, при этом важно, чтобы это была ДНК, включающая каждую из последовательностей оснований, представленных SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, или чтобы это была ДНК, имеющая последовательность оснований, гибридизуемую с последовательностью оснований, представленной SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, в условиях высокой жесткости, и кодирующая рецептор, обладающий активностью, по существу той же природы (например, активностью по связыванию лиганда, активностью по сигнальной трансдукции и т.п.), что и рецептор человеческого метастина, рецептор мышиного метастина или рецептор крысиного метастина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12 или SEQ ID NO: 14.

Примеры ДНК, гибридизуемой с последовательностью оснований, описываемой любой из SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12 или SEQ ID NO: 14, включают ДНК, содержащие последовательность оснований, обладающую по меньшей мере примерно 70% гомологией, предпочтительно по меньшей мере примерно 80% гомологией, более предпочтительно, по меньшей мере примерно 90% гомологией и, наиболее предпочтительно, по меньшей мере примерно 95% гомологией к последовательности оснований, описываемой любой из SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12 или SEQ ID NO: 14.

Гомология в последовательности основания может быть определена в следующих условиях (показатель ожидания = 10; бреши разрешены; фильтрование = ON; балл, оценивающий спаривание = 1; балл, оценивающий ошибочное спаривание = -3) с использованием алгоритма определения гомологии NCBI BLAST (National Center for Biotechnology Information Basic Local Alignment Search Tool).

Гибридизация может быть проведена per se по известным методикам или по указанным методикам, включающим соответствующие модификации, например, в соответствии процедурой, описанной в работе Самбрука с соавт. (Molecular Cloning, 2^nd J. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989) и т.п. При этом может быть также использована коммерчески доступная библиотека, в соответствии с инструкциями и протоколом производителя. Предпочтительно, гибридизация может быть проведена в условиях высокой жесткости.

Используемые в рамках настоящего изобретения условия высокой жесткости включают, например, проведение реакции с концентрацией натрия, равной примерно 19-40 мМ, предпочтительно примерно от 19 до 20 мМ при температуре, равной примерно 50°С-70°С, предпочтительно при температуре примерно 60°С-65°С. В частности, наиболее предпочтительны такие условия гибридизации, когда гибридизацию проводят с концентрацией натрия, равной примерно 19 мМ, при температуре 65°С.

Более конкретно, в качестве ДНК, кодирующей рецептор человеческого метастина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9, может использоваться ДНК, состоящая из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 10.

В качестве ДНК, кодирующей рецептор крысиного метастина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 11, может использоваться ДНК, состоящая из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 12.

В качестве ДНК, кодирующей рецептор мышиного метастина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 13, может использоваться ДНК, состоящая из последовательности оснований, представленной SEQ ID NO: 14.

Рецепторы метастина, их частичные пептиды или их соли, а также ДНК, кодирующие рецепторы метастина или их частичные пептиды, могут быть получены или произведены по методам, описанным в WO 00/24890 или WO 01/75104.

Ниже настоящее изобретение описывается подробно со ссылкой на примеры создания композиций и тест-примеры, однако настоящее изобретение ими не ограничивается, так что может быть введена любая модификация без отклонения от области и тематики настоящего изобретения.

В приведенных ниже ПРИМЕРАХ термин «комнатная температура» в норме означает температуру, равную от примерно 10°С до примерно 35°С. Проценты обозначают следующее: выход продукта показан в виде моль/моль%, применительно к используемому в хроматографии растворителю они означают об.%, а оставшиеся показатели приводятся в виде вес.%. В протонных спектрах ЯМР не показаны данные по OH, NH протонам и т.п., которые являются широкими и которые не идентифицированы.

Ниже приведены другие сокращения, использованные в тексте описания.

Сокращенное обозначение Описание 10ψ,CSNH: C-концевая-CONH₂ в 10-ом положении, замещенная -CSNH₂. 1ψ,CH₂NH: -CONH-связь между 1- и 2-положениями, замещенная -CH₂NH-связью. 2ψ3,CH₂NH: -CONH-связь между 2- и 3-положениями, замещенная -CH₂NH-связью. 3ψ4,CH₂NH: -CONH-связь между 3- и 4-положениями, замещенная -CH₂NH-связью.

4ψ5,CH₂NH: -CONH-связь между 4- и 5-положениями, замещенная -CH₂NH-связью. 6ψ7,CSNH: -CONH-связь между 6- и 7-положениями, замещенная -CSNH-связью. 6ψ7,NHCO: -CONH-связь между 6- и 7-положениями, замещенная -NHCO-связью. 6ψ7,CH₂NH: -CONH-связь между 6- и 7-положениями, замещенная -CH₂NH-связью. 6ψ7,CH₂O: -CONH-связь между 6- и 7-положениями, замещенная -CH₂O-связью. 7ψ8,CH₂NH: -CONH-связь между 7- и 8-положениями, замещенная -CH₂NH-связью. 8ψ9,CH₂NH: -CONH-связь между 8- и 9-положениями, замещенная -CH₂NH-связью. 9ψ10,CH₂NH: -CONH-связь между 9- и 10-положениями, замещенная -CH₂NH-связью. Abu: 2-аминобутаноевая кислота Abz(2): 2-аминобензойная кислота Abz(3): 3-аминобензойная кислота Ac: ацетил AcONB: N-ацетокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксимид Acp: 6-аминокапроновая кислота AcOEt: этилацетат AcOH: уксусная кислота Aib: α-аминоизобутаноевая кислота Ala(2-Qui): 2-хинолилаланин Ala(3-Bzt): 3-бензотиенилаланин Ala(cPr): циклопропилаланин Ala(Pip): (4-пиперидин-1-ил)аланин Alb: албицциин, 2-амино-3-уреидопропионовая кислота Ambz(4): 4-аминометилбензоил Arg(Ac): N^ω-ацетиларгинин Arg(Boc₂,Me): N^ω,ω'-бис-трет-бутоксикарбонил-N^ω-метиларгинин Arg(Et): N^ω-этиларгинин Arg(Me): N^ω-метиларгинин

Arg(асимMe₂) или Arg(Me₂)асим: асимметричный N^ω,ω-диметиларгинин Arg(симMe₂) или Arg(Me₂)сим: симметричный N^ω,ω'-диметиларгинин Arg(NO₂): N^ω-нитроаргинин Arg(Pbf): N^ω-2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофурансульфониларгинин Arg(n-Pr): N^ω-пропиларгинин Arg(Tos): N^ω-тозиларгинин Asp(NHMe): N^ω-метиласпарагин Asp(NMe₂): N^ω,ω-диметиласпарагин Asp(NHPen): N^ω-пентиласпарагин Asp(NHcPr): N^ω-циклопропиласпарагин Asp(NHBzl): N^ω-бензиласпарагин AzaGly: азаглицин AzaPhe: азафенилаланин Aze(2): азетидин-2-карбоновая кислота Aze(3): азетидин-3-карбоновая кислота β-Ala: β-аланин Boc: трет-бутоксикарбонил Boc₂O: ди-трет-бутилдикарбонат Br-Z: 2-бромбензилоксикарбонил Bu^t: трет-бутил Bzl: бензил CDI: 1,1'-карбонилдиимидазол Cha: циклогексилаланин CIP: тетрафторборат 2-хлор-1,3-диметилимидазолия Cit: цитруллин Clt смола: 2-хлортритильная смола Cl-Z: 2-хлорбензилоксикарбонил cPr: циклопропил Dab: 2,4-диаминобутаноевая кислота Dap: 2,3-диаминопропионовая кислота Dap(Ac): N^β-ацетил-β-диаминопропионовая кислота

Dap(For): N^β-формил-β-диаминопропионовая кислота Dap(Gly): N^β-глицил-β-диаминопропионовая кислота Dap(GnGly): N^β-(N-гуанидиноглицил)-β-диаминопропионовая кислота DCM: дихлорметан DEA: диэтиламин DIEA: N,N-диизопропилэтиламин DIPCDI: 1,3-диизопропилкарбодиимид DMAP: 4-диметиламинопиридин DMF: N,N-диметилформамид EDT: 1,2-этандитиол Fmoc: 9-флуоренилметоксикарбонил For: формил γ-Abu: 4-аминобутаноевая кислота γ-MeLeu: γ-метиллейцин Gn: гуанидино GuAmb: 4-гуанидинометилбензоил Har: гомоаргинин Har(Me): N^ω-метилгомоаргинин His(3Me): 3-метилгистидин π-метилгистидин HoAt: 1-гидрокси-7-азабензотриазол HoBt: 1-гидроксибензотриазол HoNB: N-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксимид Hph: гомофенилаланин цисHyp: цис-4-гидроксипролин Hyp: транс-4-гидроксипролин Hyp(Bzl): О-бензил-транс-4-гидроксипролин IndPr: 3-(индол-3-ил)пропионил Izc: имидазолидин-2-карбоновая кислота Lys(Me₂): N^ε,ε-диметиллизин MBHA: п-метилбензгидриламин MeOH: метанол

Mtt: 4-метилтритил N((CH₂)₃Gn)Gly: N-(3-гуанидинопропил)глицин Nal(1): 1-нафтилаланин Nal(2): 2-нафтилаланин Nar: нораргинин Nar(Me): N^ω-метилнораргинин Nle: норлейцин NMeAla: N^α-метилаланин NMeArg: N^α-метиларгинин NMeasn: N^α-метиласпарагин NMeLeu: N^α-метиллейцин NMePhe: N^α-метилфенилаланин NMeSer: N^α-метилсерин NMeTrp: N^α-метилтриптофан NMeTyr: N^α-метилтирозин Nva: норвалин OBu^t: трет-бутокси Orn: орнитин Orn(Mtt): N^δ-(4-метилтритил)орнитин PAL: 5-(4-(9-флуоренилметоксикарбонил)аминометил-3,5-диметоксифенокси)валериановая кислота Pbf: 2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофуран-5-сульфонил pGlu: пироглутаминовая кислота Phe(2Cl): 2-хлорфенилаланин Phe(2F): 2-фторфенилаланин Phe(2Me): 2-метилфенилаланин Phe(3,4Cl₂): 3,4-дихлорфенилаланин Phe(3,4F₂): 3,4-дифторфенилаланин Phe(3CF₃): 3-трифторметилфенилаланин Phe(3Cl): 3-хлорфенилаланин Phe(3F): 3-фторфенилаланин Phe(3Me): 3-метилфенилаланин

Phe(4Cl): 4-хлорфенилаланин Phe(4CN): 4-цианофенилаланин Phe(4F): 4-фторфенилаланин Phe(4Gn): 4-гуанидинофенилаланин Phe(4NH₂): 4-аминофенилаланин Phe(4NO₂): 4-нитрофенилаланин Phe(4CN): 4-цианофенилаланин Phe(4Me): 4-метилфенилаланин Phe(F₅): пентафторфенилаланин αMePhe: α-метилфенилаланин Pheψ(CH₂O)Gly: -CONH-связь между Phe и Gly, замещенная -CH₂O-связью. Pheψ(CSNH)-NH₂: С-концевой фенилаланиламид, замещенный фенилаланилтиоамидом. Phg: фенилглицин PhOH: фенол PhSMe: тиоанизол Pic(2): пипеколиновая кислота Pic(3): 3-пиперидинкарбоновая кислота Pip(2): 2-аминопипеколиновая кислота Pro: пролин Pro(4F): транс-4-фторпролин Pro(4NH₂): цис-4-аминопролин Pya(2): 2-пиридилаланин Pya(3): 3-пиридилаланин Pya(4): 4-пиридилаланин PyAOP: гексафторфосфат (7-азабензотриазол-1-илокси)-трис(пирролидино)фосфония PyBOP: гексафторфосфат (бензотриазол-1-илокси)-трис(пирролидино)фосфония PyBrop: гексафторфосфат бром-трис(пирролидино)фосфония Pzc(2): пиперазин-2-карбоновая кислота Sar: N-метилглицин

Ser(Ac): O-ацетилсерин Ser(Me): O-метилсерин Ser(3фенил): 3-фенилсерин Thi: 2-тиенилаланин Thz: тиопролин Tic: 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-карбоновая кислота TIS: триизопропилсилан Tle: трет-лейцин Tos: тозил Trp(For): Nⁱⁿ-формилтриптофан Trt: тритил Tyr(Me): O-метилтирозин Tyr(PO₃H₂): O-фосфотирозин Tyrψ(CH₂NH)Asn: -CONH-связь между Tyr и Asn, замещенная -CH₂NH-связью. TFA: трифторуксусная кислота TFE: трифторэтанол Z: бензилоксикарбонил

В описании, где коды оснований и аминокислот обозначены в виде сокращений, указанные сокращения основаны на сокращениях, соответствующих Биохимической Номенклатуре IUPAC-IUB или общепринятым в данной области кодам, примеры которых приведены ниже. В случае аминокислот, которые могут иметь оптический изомер, показана L форма, если особо не указано иное.

ДНК: дезоксирибонуклеиновая кислота кДНА: комплементарная дезоксирибонуклеиновая кислота A: аденин T: тимин G: гуанин C: цитозин

Y: тимин или цитозин N: тимин, цитозин, аденин или гуанин R: аденин или гуанин M: цитозин или аденин W тимин или аденин S цитозин или гуанин РНК: рибонуклеиновая кислота мРНК: матричная рибонуклеиновая кислота dATP: дезоксиаденозинтрифосфат dTTP: дезокситимидинтрифосфат dGTP: дезоксигуанозинтрифосфат dCTP: дезоксицитидинтрифосфат ATP: аденозинтрифосфат ЭДТА: этилендиаминтетрауксусная кислота ДСН: додецилсульфат натрия ТФУ: трифторуксусная кислота ИФА (EIA): иммуноферментный анализ Gly или G: глицин Ala или A: аланин Val или V: валин Leu или L: лейцин Ile или I: изолейцин Ser или S: серин Thr или T: треонин Cys или C: цистеин Met или M: метионин Glu или E: глутаминовая кислота Asp или D: аспарагиновая кислота Lys или K: лизин Arg или R: аргинин His или H: гистидин Phe или F: фенилаланин

Tyr или Y: тирозин Trp или W: триптофан Pro или P: пролин Asn или N: аспарагин Gln или Q: глутамин pGlu: пироглутаминовая кислота

Номера, идентифицирующие последовательность, в перечне последовательностей в данном тексте обозначают, соответственно, каждую из приведенных ниже последовательностей.

[SEQ ID NO: 1]

Данный термин означает аминокислотную последовательность метастина, полученного из организма человека (Метастин).

[SEQ ID NO: 2]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующую метастин человека.

[SEQ ID NO: 3]

Данный термин означает аминокислотную последовательность предшественника мышиного метастина (А).

[SEQ ID NO: 4]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующую предшественник мышиного метастина (А), который представляет собой последовательность оснований в плазмиде pCMV-mKiSS-1, содержащейся в трансформанте Escherichia coli DH10B/pCMV-mKiSS-1.

[SEQ ID NO: 5]

Данный термин означает аминокислотную последовательность, предшественника мышиного метастина (В).

[SEQ ID NO: 6]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующую предшественник мышиного метастина (B), который представляет собой последовательность оснований в плазмиде pCR2.1-mKiSS-1.4, содержащейся в трансформанте Escherichia coli DH5α/pCR2.1-mKiSS-1.4A.

[SEQ ID NO: 7]

Данный термин означает аминокислотную последовательность предшественника крысиного метастина.

[SEQ ID NO: 8]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующей предшественник крысиного метастина.

[SEQ ID NO: 9]

Данный термин означает аминокислотную последовательность человеческого ОТ7Т175 (рецептор метастина).

[SEQ ID NO: 10]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующей человеческий ОТ7Т175 (рецептор метастина).

[SEQ ID NO: 11]

Данный термин означает аминокислотную последовательность крысы ОТ7Т175 (рецептор метастина).

[SEQ ID NO: 12]

Данный термин означает аминокислотную последовательность оснований ДНК, кодирующей крысиный ОТ7Т175 (рецептор метастина).

[SEQ ID NO: 13]

Данный термин означает аминокислотную последовательность мыши ОТ7Т175 (рецептор метастина).

[SEQ ID NO: 14]

Данный термин означает аминокислотную последовательность оснований ДНК, кодирующей мышиный ОТ7Т175 (рецептор метастина).

[SEQ ID NO: 15]

Данный термин означает аминокислотную последовательность человеческого метастина 15 (40-54).

[SEQ ID NO: 16]

Данный термин означает аминокислотную последовательность человеческого метастина 10 (45-54) (MS10).

[SEQ ID NO: 17]

Данный термин означает аминокислотную последовательность человеческого метастина 9 (46-54).

[SEQ ID NO: 18]

Данный термин означает аминокислотную последовательность человеческого метастина 18 (47-54).

[SEQ ID NO: 19]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующей человеческий метастин 15 (40-54).

[SEQ ID NO: 20]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующей человеческий метастин 10 (45-54).

[SEQ ID NO: 21]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующей человеческий метастин 9 (46-54).

[SEQ ID NO: 22]

Данный термин означает последовательность оснований ДНК, кодирующей человеческий метастин 8 (47-54).

Трансформант Escherichia coli DH10B/pCMV-mKiSS-1 был депонирован 24 января 2000 года в Международном Депозитарии запатентованных организмов при Национальном Институте промышленной науки и технологии (International Patent Organisms Depository, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology) (бывшее Министерство Внешней Торговли и Промышленности, Агентство по промышленной науке и технологии, Национальный Институт Биологической науки и Технологии по проблемам изучения человека (Ministry of International Trade and Industry, Agency of Industrial Science and Technology, National Institute of Bioscience and Human Technology (NIBH)), расположенном по адресу: Central 6, 1-1-1 Higashi, Tsukuba, Ibaraki (почтовый код 305-8566), Япония, с номером доступа FERM BP-7003, а с 16 декабря 1999 года депонирован в Институте ферментации (Institute for Fermentation (IFO)), расположенном по адресу: 2-17-85, Juso-Honmachi, Yodogawa-ku, Osaka-shi, Osaka, Япония, с номером доступа IFO 16348.

Трансформант Escherichia coli DH5α/pCR2.1-mKiSS-1.4A был депонирован 6 марта 2000 года в Международном Депозитарии запатентованных организмов при Национальном Институте промышленной науки и технологии (International Patent Organisms Depository, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology) (бывшее Министерство внешней торговли и промышленности, Агентство по промышленной науке и технологии, Национальный Институт Биологической науки и Технологии по проблемам изучения человека (Ministry of International Trade and Industry, Agency of Industrial Science and Technology, National Institute of Bioscience and Human Technology (NIBH)), расположенном по адресу: Central 6, 1-1-1 Higashi, Tsukuba, Ibaraki (почтовый код 305-8566), Япония, с номером доступа FERM BP-7073, а с 16 февраля 2000 года депонирован в Институте ферментации (Institute for Fermentation (IFO)), расположенном по адресу: 2-17-85, Juso-Honmachi, Yodogawa-ku, Osaka-shi, Osaka, Япония, с номером доступа IFO 16360.

ПРИМЕРЫ

(СТАНДАРТНЫЙ ПРИМЕР 1)

Получение N-метил-N,N'-бис-Boc-1-гуанилпиразола

В потоке азота 720 мг 60% NaH в масле растворяют в 20 мл сухого ДМФ и добавляют 20 мл раствора сухого ДМФ с 5,59 г коммерчески доступного N,N'-бис-Boc-1-гуанилпиразола к раствору при температуре 0°С с последующим перемешиванием в течение 10 минут. После добавления 1,68 мл метилйодида смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 часов. После удаления растворителя отгонкой полученный остаток растворяют в AcOEt, и раствор промывают с использованием 1N водного раствора HCl, насыщенного водного раствора NaHCO₃ и затем насыщенного водного раствора NaCl. После сушки над Na₂SO₄ растворитель концентрируют, и концентрат очищают флэш-хроматографией на колонке (этилацетат/н-гексан = 1/4) с использованием силикагеля 60 (200 мл), получая 5,35 г (выход 91,6%) N-метил-N,N'-бис-Boc-1-гуанилпиразола в виде бесцветного масла.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 8,00 (ушир. с, 1Н), 7,69 (ушир. с, 1Н), 6,42 (дд, 1H, J=2,7, 1,5 Гц), 3,25 (с, 3H), 1,53 (с, 9H), 1,30 (с, 9H)

Элементный анализ С₁₅H₂₄N₄O₄

Расчет: С, 55,54; Н, 7,46; N, 17,27

Найдено: С, 55,36; Н, 7,48; N, 17,06

Rf1: 0,64, Rf2: 0,79

Растворитель для проведения ТСХ:

Rf1: (этилацетат/н-гексан = 1/2), Rf2: (метанол/хлороформ = 2/98)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 26,7 минут

Условия элюции:

Колонка: Wakosil-II 5C18 HG (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 100/0-20/80 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1 % ТФУ, в качестве элюента B (40 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(СТАНДАРТНЫЙ ПРИМЕР 2)

Получение N-метил-N,N'-бис-Z-1-гуанилпиразола

В атмосфере аргона 40 мг 60% NaH в масле растворяют в 5 мл сухого ДМФ, и добавляют 5 мл раствора сухого ДМФ с 380 мг коммерчески доступного N,N'-бис-Boc-1-гуанилпиразола к данному раствору при температуре 0°С с последующим перемешивание в течение 10 минут. После добавления к смеси 125 мкл метилйодида смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов. После отгонки растворителя полученный остаток растворяют в AcOEt, и раствор промывают с использованием 1N водного раствора HCl, насыщенного водного раствора NaHCO₃ и затем насыщенного водного раствора NaCl. После сушки над Na₂SO₄ растворитель концентрируют с получением 393 мг неочищенного продукта. От указанного неочищенного продукта отбирают 170 мг и проводят очистку флэш-хроматографией на колонке (этилацетат/н-гексан = 1/4) с использованием силикагеля 60 (75 мл) с получением 353 мг (выход 89,5%) N-метил-N,N'-бис-Z-1-гуанилпиразола в виде бесцветного масла.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 7,97 (ушир,с, 1H), 7,61 (д, 1H, J=1,0 Гу), 7,37-7,32 (м, 4H), 7,29-7,26 (м, 4H), 7,16-7,13 (м, 2H), 6,36 (дд, 1H, J=2,8, 1,6 Гц), 5,18 (с, 2H), 5,04 (с, 2H), 3,22 (с, 3H).

Элементный анализ С₂₁H₂₀N₄O₄

Расчет: С, 64,28; Н, 5,14 N, 14,28

Найдено: С, 64,09; Н, 5,24; N, 14,43

Rf1: 0,50, Rf2: 0,86

Растворитель для проведения ТСХ:

Rf1: (этилацетат/н-гексан = 1/2),

Rf2: (метанол/хлороформ = 2/98)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 28,9 минут

Условия элюции:

Колонка: Wakosil-II 5C18 HG (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 100/0-20/80 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1 % ТФУ, в качестве элюента B (40 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 1)

(Синтез А): Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Thr5,AzaGly7, D-Arg9,Trp10]MS10 (Соединение No708)

Trp(Boc), D-Arg(Pbf) и Leu в указанном порядке вносят в 178 мг смолы Rink Amide MBHA (0,56 ммоль/г) на пептидном синтезаторе ABI 433A с получением смолы H-Leu-D-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Отдельно, суспендируют 116,3 мг (0,4 ммоль) Fmoc-NHNH₂ HCl в 1 мл ДМФ, и при охлаждении льдом добавляют суспензию 61,6 мг (0,38 ммоль) CDI в 10 мл ТГФ. Далее, к смеси добавляют 139,4 мкл (0,8 ммоль) DIEA с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение одного часа. Полученный реакционный раствор добавляют к смоле H-Leu-D-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, описанной выше, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 15 часов. После завершения реакции смолу промывают и в указанном порядке добавляют Phe, Thr(Bu^t) и Asn(Trt) в получаемую смолу Fmoc-AzaGly-Leu-D-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA на синтезаторе ABI 433A. Смолу разделяют на две половины, одну из которых отбирают, а оставшуюся половину снова вводят в синтезатор ABI 443, вводя AD-Trp(Boс) и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-D-Trp(Boc)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-D-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Далее продукт обрабатывают в течение 20 минут при добавлении 3 мл ДМФ с содержанием 9,4 мкл (0,1 ммоль) Ac₂O и 17,4 мкл (0,1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования. Смолу промывают и сушат с получением 202,2 мг смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-D-Trp(Boc)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-D-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 1,5 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5), и смесь перемешивают в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют дважды для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и экстракт фильтруют для удаления смолы. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью 15 мл/мин с использованием элюентов A/B: 70/30-60/40: элюент А: 0,1% ТФУ в воде и элюент B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и далее лиофилизируют с получением 16,2 мг белого порошка.

Масс-спектр: (M+H)⁺ 1284,9 (расчет: 1284,6)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 13,3 минуты

Условия элюции:

Колонка: YMC-AM301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 2)

Получение смолы Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc ₂ ,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA

5 г (0,4 ммоль/г) коммерчески доступной Rink Amide MBHA оставляют для набухания в ДМФ и затем указанную смолу обрабатывают добавлением 50 мл раствора 20% пиридина/ДМФ в течение 20 минут для удаления Fmoc группы. Полученную смолу промывают ДМФ, обрабатывают с использованием 4,213 г (8 ммоль) Fmoc-Trp(Boc)-OH, 1,272 мл (8 ммоль) DIPCDI и 16 мл (8 ммоль) 0,5 M раствора HOAt/ДМФ при комнатной температуре в течение 90 минут, вводя Trp(Boc), c получением смолы Fmoc-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Аналогично, Orn(Mtt) вводят с получением 2 ммоль смолы Fmoc-Orn(Mtt)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. После того как полученная смола будет промыта, и будет достигнуто ее набухание с использованием DCM, добавляют 50 мл ТФУ/TIS/DCM (1/5/94) и затем встряхивают в течение 10 минут, и удаляют раствор фильтрованием. Указанную процедуру повторяют до тех пор, пока не исчезнет желтое окрашивание, вызванное свободной Mtt группой в растворе ТФУ/TIS/DCM (1/5/94), при добавлении указанного раствора, что будет означать удаление Mtt группы.

Полученную смолу Fmoc-Orn-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA нейтрализуют раствором 5% DIEA/DCM. После промывки DCM к смоле добавляют 25 мл DCM-TFE (4:1) и 1,946 г (6 ммоль) N-метил-N,N'-бис-Boc-1-гуанилпиразола, полученного по процедуре стандартного примера 1. К смеси добавляют DIEA для корректировки pH полученного раствор до значения 10. Далее раствор встряхивают в течение 15 часов с получением 6,195 г смолы Fmoc-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Вносят Fmoc-Leu в полученную смолу по описанной выше процедуре. Далее указанную смолу разделяют на две половинки и Fmoc группу удаляют из полученной смолы Fmoc-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA (1 ммоль) с получением смолы H-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA (1 ммоль).

Отдельно 1,745 г (6 ммоль) Fmoc-NHNH₂ HCl суспендируют в 20 мл ДМФ-ТГФ (4:1). В условиях охлаждения льдом к суспензии добавляют 973 мг (6 ммоль) CDI и 2,09 мл (12 ммоль) DIE с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение одного часа. Полученный реакционный раствор добавляют к описанной выше смоле H-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, и указанную смесь далее перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов. После завершения реакции смолу промывают и сушат с получением 3,314 г смолы Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA.

(ПРИМЕР 3)

(Синтез B): Получение дез(1-3)-Ac-[Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Coединение № 709)

После набухания в ДМФ 5,455 г (0,55 ммоль/г) коммерчески доступной смолы Rink Amide MBHA, указанную смолу обрабатывают добавлением 50 мл раствора 20% пиперидина/ДМФ в течение 20 минут для удаления Fmoc группы. Полученную таким образом смолу промывают ДМФ и затем обрабатывают добавлением 6,319 г (12 ммоль) Fmoc-Trp(Boc)-OH, 1,908 мл (12 ммоль) DIPCDI и 24 мл (12 ммоль) 0,5M раствора HOAt/ДМФ при комнатной температуре в течение 90 минут, вводя Trp(Boc), с получением смолы Fmoc-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Аналогично, вводят Orn(Mtt) с получением 3 ммоль смолы Fmoc-Orn(Mtt)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Полученную смолу промывают DCM и оставляют для набухания, после чего добавляют 50 мл ТФУ/TIS/TFE/DCM (1/5/19/75) и затем встряхивают в течение 10 минут и фильтруют раствор. Указанную процедуру повторяют до исчезновения желтого окрашивания, вызванного группой Mtt в растворе ТФУ/TIS/TFE/DCM (1/5/19/75), при добавлении к нему раствора, и таким образом делается вывод об удалении группы Mtt.

Полученную смолу Fmoc-Orn-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA нейтрализуют 5% раствором DIEA/DCM. После промывания DCM к смоле добавляют 20 мл DCM-TFE (4:1) и 2,919 г (9 ммоль) N-метил-N,N'-бис-Boc-1-гуанилпиразола, полученного по процедуре стандартного примера 1. К смеси добавляют DIEA для корректировки pH раствора до значения 10. Указанную смесь встряхивают в течение 15 часов с получением смолы Fmoc-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. В полученную смолу вносят Fmoc-Leu по процедуре, описанной выше. Из полученной таким образом смолы Fmoc-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA (3 ммоль) удаляют Fmoc группу с получением смолы H-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA (3 ммоль).

Отдельно, суспендируют 3,489 г (12 ммоль) Fmoc-NHNH₂.HCl в 20 мл ДМФ. В условиях охлаждения льдом добавляют в суспензию 1,849 г (11,4 ммоль) CDI в 20 мл ТГФ и затем добавляют к смеси 4,181 мл (24 ммоль) DIEA с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение одного часа. Полученный реакционный раствор добавляют к смоле H-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, описанной выше, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 15 часов. После завершения реакции смолу промывают и сушат с получением смолы Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA.

Полученную смолу оставляют набухать в ДМФ и затем обрабатывают добавлением 30 мл раствора 20% пиперидина/DMF в течение 20 минут для удаления Fmoc группы. После промывания полученной смолы с использованием ДМФ, указанную смолу обрабатывают добавлением 5,419 г (12 ммоль) Trt-Phe-OH.0,5AcOEt, 6,257 г (12 ммоль) PyAOP, 24 мл (12 ммоль) 0,5M HOAt/ДМФ и 7,316 мл (42 ммоль) DIEA при комнатной температуре в течение 90 минут с получением смолы Trt-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. После промывки полученной смолы DCM и ее набухания добавляют к смоле 50 мл ТФУ/TIS/TFE/DCM (1/5/19/75) и затем встряхивают в течение 10 минут, и фильтруют раствор. Указанную процедуру повторяют до тех пор, пока не исчезнет желто-коричневое окрашивание, вызванное свободной Trt группой, в растворе ТФУ/TIS/TFE/DCM (1/5/19/75), при добавлении раствора; таким образом, делается вывод об удалении Trt группы. Полученную смолу H-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA нейтрализуют раствором 5%-DIEA/ДМФ и промывают в ДМФ. Далее указанную смолу обрабатывают добавлением 4,780 г (12 ммоль) Fmoc-Thr(Bu^t)-OH, 1,908 мл (12 ммоль) DIPCDI и 24 мл (12 ммоль) 0,5M HOAt/ДМФ при комнатной температуре в течение 90 минут для целей введения Thr(Bu^t).

Далее проводят депротекцию Fmoc при обработке с использованием 50 мл раствора 20% пиперидина/ДМФ в течение 20 минут и конденсации по методу DIPCDI/HOAt, как в случае введения Thr(Bu^t), для введения Asn(Trt). Указанную смолу далее промывают и сушат с получением 10,624 г смолы Fmoc-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. После набухания 100 мг (0,03 ммоль) полученной смолы в ДМФ, указанную смолу обрабатывают добавлением 3 мл 20% пиперидина/ДМФ в течение 20 минут для удаления Fmoc группы. Полученную смолу промывают ДМФ и обрабатывают добавлением 1 мл ДМФ с содержанием 9,4 мкл (0,1 ммоль) Ac₂О и 17,4 мкл (0,1 ммоль) DIEA при комнатной температуре в течение 30 минут для достижения N-концевого ацетилирования. Указанную смолу промывают и сушат с получением 94,2 мг смолы Ac-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA.

К полученной смоле добавляют 0,75 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂О/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5), и указанную смесь перемешивают в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный остаток центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и экстракт фильтруют для удаления смолы. Далее, проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью 15 мл/мин элюентов A/B: 76/24-66/34 с использованием элюента А: 0,1% ТФУ в воде, и элюента В: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют с получением 2,8 мг белого порошка.

Масс-спектр (M+H)⁺ 949,8 (Расчет: 949,5)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 10,2 минуты

Условия элюции:

Колонка YMC-AM301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 4)

(Синтез C): Получение дез(1-2)-Ac-[Acp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 713)

После набухания 100 мг (0,03 ммоль) смолы Fmoc-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA в ДМФ, указанную смолу обрабатывают добавлением 3 мл раствора 20% пиперидина/ДМФ для удаления Fmoc группы. Далее указанную смолу промывают ДМФ и затем обрабатывают добавлением 1 мл ДМФ с содержанием 70,6 мг (0,2 ммоль) Fmoc-Acp-OH, 104,2 мг (0,2 ммоль) PyAOP и 52,4 мкл (0,2 ммоль) DIEA при комнатной температуре в течение 90 минут для введения Acp; получая смолу Fmoc-Acp-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Полученную таким образом смолу обрабатывают добавлением 3 мл раствора 20% пиперидина/ДМФ и затем промывают в ДМФ для удаления Fmoc групп. Далее указанную смолу обрабатывают добавлением 1 мл ДМФ с содержанием 9,4 мкл (0,1 ммоль) AC₂O и 17,4 мкл (0,1 ммоль) DIEA при комнатной температуре в течение 30 минут для ацетилирования N-конца. Обработанную смолу далее промывают и сушат с получением 101,2 мг смолы Ac-Acp-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 0,75 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H20/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) и затем перемешивают в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и экстракт фильтруют для удаления смолы. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин элюентов A/B: 77/23-67/33 с использованием: элюента А: 0,1% ТФУ в воде и элюента B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют с получением 7,3 мг белого порошка.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1062,7 (Расчет: 1062,6)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 10,7 минуты

Условия элюции:

Колонка YMC-AM301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 5)

(Синтез D): Получение Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp(NHPen)-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH ₂ (Соединение № 714)

С использованием 661 мг (0,25 ммоль) смолы Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA удлиняют пептидную цепь на пептидном синтезаторе ABI 433 A (Fmoc/DCC/HOBt) с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-D-Trp(Boc)-Asp(OBu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-NH₂-Rink Amide MBHA. К указанной смоле добавляют 5 мл ДМФ, 111 мг AcONB и 87 мкл DIEA, и затем встряхивают все в течение 3 часов. Смолу промывают и затем сушат с получением смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-D-Trp(Boc)-Asp(OBu^t)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К 9/10 количеству смолы добавляют 5 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5), смесь встряхивают в течение 2-х часов, и к осадку добавляют диэтиловый эфир. Процедуру промывки эфиром повторяют, и далее сушат продукт с получением 218,4 мг Ac-D-Tyr-D-Trp-Asp-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂. К 32,5 мг продукта добавляют 1 мл ДМФ, 5,7 мкл аминопентана, 13,5 мг HOBt, 26,0 мг PyBOP и 26,1 мкл DIEA, и смесь перемешивают в течение 24 часов. После удаления растворителя отгонкой добавляют для осаждения диэтиловый эфир. Повторяют указанную процедуру промывки диэтиловым эфиром и сушат продукт. Остаток растворяют в водном растворе уксусной кислоты. После удаления нерастворимого материала фильтрованием проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) элюентов A/B: 65/35-55/45 с использованием: элюента А: 0,1% ТФУ в воде и элюента B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC D-ODS-5-ST S-5, 120A (20 × 150 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют с получением 11,0 мг белого порошка.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1368,9 (Расчет: 1368,7)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 20,9 минуты

Условия элюции:

Колонка Wakosil-II 5C18 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 100/0-50/50 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 6)

(Синтез Е): Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,D-Trp3,Alb4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp 10]MS10 (Соединение № 717)

С использованием 132 мг (0,05 ммоль) смолы Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA удлиняют пептидную цепь на пептидном синтезаторе ABI 433A (Fmoc/DCC/HOBt) с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-D-Trp(Boc)-Alb-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К указанной смоле добавляют 2 мл ДМФ, 23 мг AcONB и 17 мкл DIEA, затем встряхивают все в течение 3 часов. Указанную смолу промывают и затем сушат с получением смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-D-Trp(Boc)-Alb-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К смоле добавляют 1 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 2 часов. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и нерастворимый материал удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) элюентов A/B: 69/31-59/41 с использованием: элюента А: 0,1% ТФУ в воде, и элюента B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC D-ODS-5-ST S-5, 120A (20 × 150 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют с получением 4,8 мг белого порошка.

Масс-спектр (M+H)+ 1313,9 (Расчет: 1313,7)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 18,3 минуты

Условия элюции:

Колонка Wakosil- II 5C18 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 100/0-50/50 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 7)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 723)

Используют смолу Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, 800 мг (0,3 ммоль) в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции на пептидном синтезаторе ABI 433A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt 0,25 моль) для введения Phe, Thr(Bu^t), Asn(Trt), Hyp(Bu^t) и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-Hyp(Bu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Далее указанную смолу обрабатывают в течение 20 минут в ДМФ с содержанием 94,4 мкл (1 ммоль) Ac₂O и 174,2 мкл (1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования с получением 1,049 г смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Hyp(Bu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Такую же процедуру проводят еще раз с получением 1,035 г смолы. К каждой из полученных порций смолы добавляют 8 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин элюентов A/B: 76/24-66/34, используя элюент А: 0,1% ТФУ в воде, и элюент B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют. Полученный белый порошок, 159,5 мг, растворяют в 200 мл воды и добавляют к раствору 550 мкл ионообменной смолы в форме BioRAD AG1 × 8 AcO^-. При проведении изредка перемешивания реакционного раствора вручную оставляют указанный раствор на один час. Раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы и получают 134,5 мг ацетата в виде белого порошка. К полученному очищенному образцу (ацетат) добавляют 6,725 мл ледяной уксусной кислоты, и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут. Затем добавляют 20,175 мл чистой воды с получением раствора 5 мг/мл 25% водной уксусной кислоты. Полученный раствор с концентрацией 5 мг/мл распределяют по шести флаконам объемом 4 мл, и оставшийся раствор переносят в другой флакон. Указанные флаконы замораживают при температуре -80°С на 2 часа и затем лиофилизируют, где указанную лиофилизацию проводят при охлаждении до -40°С в течение 1 часа, -20°С в течение 2 часов, 0°С в течение 12 часов, 5°С в течение 8 часов и 20°С в течение 5 часов. Получают шесть флаконов, каждый по 20 мг, и один флакон содержит 12,34 мг.

Масс-спектр (M+H)+ 1225,9 (Расчет: 1225,6)

Аналитические данные для аминокислот (20% HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Asp 0,99 (1); Thr 0,96 (1); Leu 0,98 (1); Tyr 0,98 (1); Phe 1,00 (1)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 11,4 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Элюцию проводят в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 8)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Gly3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 726)

Используют смолу Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, 661 мг (0,25 ммоль), в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции на пептидном синтезаторе ABI 433A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt, 0,25 моль) для введения Phe, Thr(Bu^t), Asn(Trt), Gly и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-Gly-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Далее указанную смолу обрабатывают в течение 20 минут в ДМФ с содержанием 94,4 мкл (1 ммоль) Ac₂O и 174,2 мкл (1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования с получением 866,6 мг смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Gly-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 8 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин, с использованием элюентов A/B: 76/24-66/34, где элюент А: 0,1% ТФУ в воде, и элюент B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок, 42,9 мг, растворяют в 50 мл воды и добавляют к раствору 153 мкл ионообменной смолы в форме BioRAD AG1 × 8 AcO^-. При проведении изредка перемешивания реакционного раствора вручную, оставляют указанный раствор выстаиваться на один час. Далее раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы и получают 39,9 мг ацетата в виде белого порошка. К полученному очищенному образцу (ацетат) добавляют 1,995 мл ледяной уксусной кислоты, и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут. Затем добавляют 5,985 мл чистой воды с получением раствора 5 мг/мл 25% водного раствора уксусной кислоты. Полученный раствор с концентрацией 5 мг/мл вводят в один флакон объемом 4 мл, а оставшуюся часть раствора переносят в другой флакон. Указанные флаконы замораживают при температуре -80°С на 2 часа и затем лиофилизируют, где указанную лиофилизацию проводят при охлаждении при -40°С в течение 1 часа, при -20°С в течение 2 часов, 0°С в течение 12 часов, 5°С в течение 8 часов и 20°С в течение 5 часов. В результате получают 1 флакон, содержащий 20 мг, и один флакон, содержащий 19,08 мг, на основе оставшегося раствора.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1169,7 (Расчет: 1169,6)

Аналитические данные для аминокислот (20% раствор HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Asp 0,98 (1); Thr 0,93 (1); Gly 0,97 (1); Leu 0,94 (1), Tyr 0,97 (1); Phe 1,00 (1)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 11,3 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 9)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Aib3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 727)

Используют смолу Fmoc-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, 1325 мг (0,4 ммоль) в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции в системе ручного твердофазного синтеза (Fmoc/DIPCDI/HOAt) для введения Aib и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке. Таким образом, получают смолу H-D-Tyr(Bu^t)-Aib-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Затем добавляют 5 мл ДМФ, 265 мг AcONB и 209 мкл DIEA, и смесь встряхивают в течение 3 часов для достижения N-концевого ацетилирования с получением смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Aib-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 8 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Далее, проводят элюцию в градиенте линейной плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин элюентов A/B: 72/28-62/38 с использованием: элюента А: 0,1% ТФУ в воде, и элюента B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок растворяют в 50 мл воды и добавляют к раствору 150 мкл ионообменной смолы в форме BioRAD AG1 × 8 AcO^-. При проведении изредка перемешивания вручную реакционного раствора, оставляют указанный раствор выстаиваться на один час. Далее указанный раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы и получают 41,9 мг ацетата в виде белого порошка. К полученному очищенному образцу (ацетат) добавляют 2,095 мл ледяной уксусной кислоты, и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут. Затем добавляют 6,285 мл очищенной воды с получением раствора 5 мг/мл 25% водной уксусной кислоты. Полученный раствор с концентрацией 5 мг/мл вносят в один флакон объемом 4 мл и один флакон объемом 3 мл, и оставшуюся часть раствора переносят в другой флакон. Указанные флаконы замораживают при температуре -80°С на 2 часа и затем лиофилизируют, где указанную лиофилизацию проводят при охлаждении при -40°С в течение 1 часа, при -20°С в течение 2 часов, 0°С в течение 12 часов, 5°С в течение 8 часов и 20°С в течение 5 часов. В результате получают один флакон, содержащий 20 мг, один флакон, содержащий 15 мг, и один флакон, содержащий 4,8 мг, на основе оставшегося раствора.

Масс-спектр (M+H)+ 1197,7 (Расчет: 1197,6)

Аналитические данные для аминокислот (20% раствор HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Asp 0,98 (1); Thr 0,94 (1); Leu 0,95 (1); Tyr 0,97 (1); Phe 1,00 (1)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 13,0 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 10)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Glu3,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 746)

Используют смолу Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, 661 мг (0,25 ммоль) в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции на пептидном синтезаторе ABI 433A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt, 0,25 моль) для введения Phe, Thr(Bu^t), Asn(Trt), Glu(OBu^t) и D-Tyr(Bu^t), встраивая при этом в указанном порядке, с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-Glu(OBu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Далее указанную смолу обрабатывают в течение 20 минут в ДМФ с содержанием 94,4 мкл (1 ммоль) Ac₂O и 174,2 мкл (1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования с получением 940,0 мг смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Glu(OBu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 6 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин элюентов A/B: 76/24-66/34, с использованием элюента А: 0,1% ТФУ в воде, и элюента B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок, 57,3 мг, растворяют в 100 мл воды и добавляют к раствору 192 мкл ионообменной смолы в форме AG1 × 8 AcО^-, которую получают при превращении коммерчески доступной формы BioRAD AG1 × 8 Cl^- в ацетатный тип стандартным способом. При проведении изредка перемешивания реакционного раствора вручную, оставляют указанный раствор на один час выстаиваться. Далее раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы, и лиофилизируют смолу с получением 42,7 мг белого порошка. К полученному очищенному образцу (ацетат) добавляют 2,135 мл ледяной уксусной кислоты, и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут. Затем добавляют 6,405 очищенной воды с получением раствора 5 мг/мл 25% водной уксусной кислоты. Полученный раствор распределяют по двум флаконам, каждый объемом 4 мл, и остаток раствора переносят в другой флакон. Указанные флаконы замораживают при температуре -80°С на 2 часа и затем лиофилизируют, где указанную лиофилизацию проводят при охлаждении при -40°С в течение 4 часов, при -20°С в течение 2 часов, 0°С в течение 12 часов, 5°С в течение 8 часов и 20°С в течение 5 часов. В результате получают два флакона, содержащие по 20 мг, каждый, и один флакон, содержащий 0,52 мг на основе оставшегося раствора.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1241,8 (Расчет: 1241,4)

Аналитические данные для аминокислот (20% раствор HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Asp 0,99 (1); Thr 0,95 (1); Glu 0,96 (1); Leu 0,98 (1); Tyr 0,98 (1); Phe 1,00 (1)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 11,4 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 11)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Lys3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 756)

Смолу Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, 661 мг (0,25 ммоль) используют в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции на пептидном синтезаторе ABI 433A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt, 0,25 моль), вводя Phe(3F), Thr(Bu^t), Asn(Trt), Lys(Boc) и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке, с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Затем указанную смолу обрабатывают в течение 20 минут в ДМФ с содержанием 94,4 мкл (1 ммоль) Ac₂O и 174,2 мкл (1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования с получением 881,7 г смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 6 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин, с использованием элюентов A/B: 77/23-67/33, где элюент А представляет: 0,1% ТФУ в воде, и элюент B представляет: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок, 47,7 мг, растворяют в 50 мл воды и добавляют к раствору 316 мкл ионообменной смолы в форме BioRAD AG1 × 8 AcO^-. При проведении изредка перемешивания реакционного раствора вручную, оставляют указанный раствор на один час выстаиваться. Далее раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы, и получают 42,2 мг ацетата в виде белого порошка. К полученному очищенному образцу (ацетат) добавляют 2,11 мл ледяной уксусной кислоты, и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут. Затем добавляют 6,33 мл очищенной воды с получением раствора 5 мг/мл 25% водной уксусной кислоты. Полученный раствор с концентрацией 5 мг/мл распределяют по двум флаконам, каждый объемом 4 мл, и остаток раствора переносят в другой флакон. Указанные флаконы замораживают при температуре -80°С на 2 часа и затем лиофилизируют, где указанную лиофилизацию проводят при охлаждении при -40°С в течение 1 часа, при -20°С в течение 2 часов, 0°С в течение 12 часов, 5°С в течение 8 часов и 20°С в течение 5 часов. В результате получают два флакона, содержащие по 20 мг каждый, и один флакон, содержащий 0,20 мг, на основе оставшегося раствора.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1258,8 (Расчет: 1258,6)

Аналитические данные для аминокислот (20% раствор HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Asp 0,99 (1); Thr 0,95 (1); Leu 0,95 (1); Tyr 0,99 (1); Phe(3F) 1,00 (1); Lys 0,97 (1)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 10,8 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

(ПРИМЕР 12)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Glu3,Thr5,Phe(3F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 757)

Смолу Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, 661 мг (0,25 ммоль) используют в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции на пептидном синтезаторе ABI 433A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt, 0,25 ммоль), вводя Phe(3F), Thr(Bu^t), Asn(Trt), Glu(OBu^t) и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке, с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-Glu(OBu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Затем указанную смолу обрабатывают в течение 20 минут в ДМФ с содержанием 94,4 мкл (1 ммоль) Ac₂O и 174,2 мкл (1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования с получением 872,5 г смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Glu(Obu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 6 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин, с использованием элюентов A/B: 74,5/25,5-64,5/35,5, где элюент А: 0,1% ТФУ в воде, и элюент B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок, 60,0 мг, растворяют в 100 мл воды и добавляют к раствору 198 мкл ионообменной смолы AG1 × 8 AcO^-, которую получают путем превращения коммерчески доступной формы BioRAD AG1 × 8 Cl^- в ацетатный тип традиционным способом. При проведении изредка перемешивания реакционного раствора вручную, оставляют указанный раствор на один час выстаиваться. Далее раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы, и получают 45,2 мг ацетата в виде белого порошка. К полученному очищенному образцу (ацетат) добавляют 2,26 мл ледяной уксусной кислоты, и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут. Затем добавляют 6,78 мл очищенной воды с получением водного раствора 5 мг/мл 25% водной уксусной кислоты. Полученный раствор с концентрацией 5 мг/мл распределяют по двум флаконам, каждый объемом 4 мл, и остаток раствора переносят в другой флакон. Указанные флаконы замораживают при температуре -80°С на 2 часа и затем лиофилизируют, где указанную лиофилизацию проводят при охлаждении при -40°С в течение 1 часа, при -20°С в течение 2 часов, 0°С в течение 12 часов, 5°С в течение 8 часов и 20°С в течение 5 часов. В результате получают два флакона, содержащие по 20 мг, и один флакон, содержащий 3,81 мг, на основе оставшегося раствора.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1259,9 (Расчет: 1259,6)

Аналитические данные для аминокислот (20% раствор HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Asp 0,99 (1); Thr 0,94 (1); Glu 0,99 (1); Leu 0,94 (1); Tyr 0,97 (1); Phe(3F) 1,00 (1);

Время элюции в системе ВЭЖХ: 11,9 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 13)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,Phe(4F)6,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 787)

Смолу Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, 661 мг (0,25 ммоль) используют в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции на пептидном синтезаторе ABI 433A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt, 0,25 ммоль), вводя Phe(4F), Thr(Bu^t), Asn(Trt), Hyp(Bu^t) и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке, с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-Hyp(Bu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Затем указанную смолу обрабатывают в течение 20 минут в ДМФ с содержанием 94,4 мкл (1 ммоль) Ac₂O и 174,2 мкл (1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования с получением 832,8 мг смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Hyp(Bu^t)Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Проводят снова ту же самую процедуру с получением 823,9 мг смолы. К каждой порции смолы добавляют 6 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют, и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин, с использованием элюентов A/B: 74/26-64/36, где элюент А: 0,1% ТФУ в воде, и элюент B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODA-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок,117,7 мг, растворяют в 200 мл воды и добавляют к раствору 394 мкл ионообменной смолы AG1 × 8 AcO^-, которую получают путем превращения коммерчески доступной формы BioRAD AG1 × 8 Cl^- в ацетатный тип традиционным способом. Затем при проведении изредка перемешивания реакционного раствора вручную, оставляют указанный раствор на один час выстаиваться. Далее раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы с получением 115,5 мг ацетата в виде белого порошка. К полученному очищенному образцу (ацетат) добавляют 5,775 мл ледяной уксусной кислоты, и смесь обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут. Затем добавляют 17,325 мл очищенной воды с получением водного раствора 5 мг/мл 25% водной уксусной кислоты. Полученный раствор с концентрацией 5 мг/мл распределяют по пяти флаконам, каждый объемом 4 мл, и остаток раствора переносят в другой флакон. Указанные флаконы замораживают при температуре -80°С на 2 часа и затем лиофилизируют, где указанную лиофилизацию проводят при охлаждении при -40°С в течение 4 часов, при -20°С в течение 2 часов, 0°С в течение 12 часов, 5°С в течение 8 часов и 20°С в течение 5 часов. В результате получают два флакона, содержащие по 20 мг, и один флакон, содержащий 11,95 мг, на основе оставшегося раствора.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1243,6 (Расчет: 1243,6)

Аналитические данные для аминокислот (20% раствор HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Asp 1,01 (1); Thr 0,96 (1); Leu 0,97 (1); Tyr 1,02 (1); Phe(4F) 1,00 (1);

Время элюции в системе ВЭЖХ: 12,0 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 14)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Thr5,AzaGly7,Trp10]MS10 (Соединение № 797)

Смолу Rink Amide MBHA, 357 мг (0,25 ммоль) используют в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции на пептидном синтезаторе ABI 433A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt 0,25 ммоль), вводя Trp(Boc), Arg(Pbf) и Leu, с получением смолы H-Leu-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. В отдельном реакторе взвешивают 290,75 мг (1 ммоль) Fmoc-NHNH₂.HСl и растворяют в ДМФ. В условиях охлаждения льдом добавляют суспензию 156,9 мг (0,95 ммоль) CDI в ТГФ и 339,7 мкл DIEA, и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение одного часа. Указанную смесь добавляют к смоле H-Leu-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA, с последующим перемешиванием в течение ночи при комнатной температуре. После промывания смолы вводят Phe, Thr(Bu^t), Asn(Trt), Hyp(Bu^t) и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке, снова на пептидном синтезаторе ABI 433 A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt, 0,25 ммоль) с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-Hyp(Bu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Затем указанную смолу обрабатывают в течение 20 минут в ДМФ с содержанием 94,4 мкл (1 ммоль) Ac₂O и 174,2 мкл (1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования с получением 596,6 мг смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Hyp(Bu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Pbf)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 4 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют, и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин, с использованием элюентов A/B: 74/26-64/36, где элюент А: 0,1% ТФУ в воде, и элюент B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок, 146,3 мг, растворяют в 100 мл воды и добавляют к раствору 530 мкл ионообменной смолы BioRAD AG1 × 8 AcO^- и затем перемешивают в течение одного часа. После удаления смолы фильтрованием с использованием хлопковой прокладки через силикагелевый слой, снова добавляют то же самое количество смолы, и смесь перемешивают в течение одного часа. Указанный раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы, и лиофилизируют смолу с получением 127,3 мг ацетата в виде белого порошка.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1211,1 (Расчет: 1211,6)

Аналитические данные для аминокислот (20% раствор HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Asp 0,99 (1); Thr 0,96 (1); Leu 0,93 (1); Tyr 0,98 (1); Phe 1,00 (1); Arg 0,99 (1)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 11,4 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 15)

Получение дез(1)-Ac-[D-Tyr2,Hyp3,Alb4,Thr5,AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 800)

Смолу Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)- Rink Amide MBHA (0,378 ммоль/г), 661 мг (0,25 ммоль) используют в качестве исходного материала, и указанный исходный материал подергают реакции на пептидном синтезаторе ABI 433A (в соответствии с протоколом Fmoc/DCC/HOBt, 0,25 ммоль), вводя Phe, Thr(Bu^t), Alb, Hyp(Bu^t) и D-Tyr(Bu^t) в указанном порядке, с получением смолы H-D-Tyr(Bu^t)-Hyp(Bu^t)-Alb-Thr(Bu^t)-Phe-Gly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. Затем указанную смолу обрабатывают в течение 20 минут в ДМФ с содержанием 94,4 мкл (1 ммоль) Ac₂O и 174,2 мкл (1 ммоль) DIEA для достижения N-концевого ацетилирования с получением 1,173 г смолы Ac-D-Tyr(Bu^t)-Hyp(Bu^t)-Asn(Trt)-Thr(Bu^t)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. К полученной смоле добавляют 7 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют, и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 8 мл/мин, с использованием элюентов A/B: 74/26-64/36, где элюент А: 0,1% ТФУ в воде, и элюент B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки Daisopak-SP100-5-ODS-P (20 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок, 94,8 мг, растворяют в 20 мл воды и добавляют к раствору 320 мкл ионообменной смолы в форме BioRAD AG1 × 8 AcO^-. Указанный раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы и лиофилизируют с получением 79,4 мг ацетата в виде белого порошка.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1240,4 (Расчет: 1240,6)

Аналитические данные для аминокислот (20% раствор HCl, содержащий 4% тиогликолевой кислоты, 110°C, гидролиз в течение 24 часов, цифры в скобках обозначают расчетные значения): Thr 1,02 (1); Leu 0,99 (1); Tyr 1,00 (1); Phe 1,00 (1);

Время элюции в системе ВЭЖХ 12,3 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мин.

(ПРИМЕР 16)

(Синтез F): Получение дез(1-5)-4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил-[AzaGly7,Arg(Me)9,Trp10]MS10 (Соединение № 801)

В реакторе взвешивают 265 мг (0,1 ммоль) смолы Fmoc-AzaGly-Leu-Arg(Boс₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA (0,378 ммоль/г), промывают и оставляют для набухания в ДМФ. Затем указанную смолу обрабатывают в 5 мл раствора 20% пиперидина/ДМФ в течение 20 минут для удаления Fmoc группы. Указанную смолу обрабатывают с использованием 155,0 мг (0,4 ммоль) Fmoc-Phe-OH, 63,6 мкл (0,4 ммоль) DIPCDI и 0,8 мл (0,4 ммоль) 0,5M HOAt/ДМФ при комнатной температуре в течение 90 минут для введения Phe. Далее проводят удаление Fmoc группы обработкой в 5 мл раствора 20% пиперидина/ДМФ в течение 20 минут и реакцию конденсации по методу DIPCDI/HOAt, как в случае введения Phe, вводя Ambz(4), с получением смолы Fmoc-Ambz(4)-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA. После удаления Fmoc полученную смолу обрабатывают в течение 10 минут в ДМФ с содержанием 11,4 мкл (0,12 ммоль) 2-пиридинкарбоксиальдегида в присутствии 50 мкл AcOH, 41,1 мг (0,4 ммоль) NaBH₃CN, и смесь перемешивают в течение одного часа. После промывания в ДМФ снова повторяют ту же процедуру. Полученную смолу промывают в ДМФ и MeOH и сушат с получением 281,4 мг смолы 4-[бис-(2-пиридилметил)аминометил]бензоил-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Boc₂,Me)-Trp(Boc)-Rink Amide MBHA.

К полученной смоле добавляют 2 мл ТФУ/PhSMe/м-крезол/H₂O/TIS/EDT (80/5/5/5/2,5/2,5) с последующим перемешиванием в течение 90 минут. К реакционному раствору добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок центрифугируют, и удаляют супернатант. Указанную процедуру повторяют два раза для промывки. Полученный остаток экстрагируют водным раствором уксусной кислоты, и смолу удаляют фильтрованием. Затем проводят элюцию в линейном градиенте плотности (60 минут) со скоростью течения 15 мл/мин, с использованием элюентов A/B: 76/24-66/34, где элюент А: 0,1% ТФУ в воде, и элюент B: 0,1% ТФУ-содержащий ацетонитрил, в системе препаративной ВЭЖХ с использованием колонки YMC Pack R&D-ODS-5-B S-5, 120A (30 × 250 мм). Собирают фракции, содержащие данный продукт, и лиофилизируют их. Полученный белый порошок, 17,3 мг, растворяют в 20 мл смеси AcCN-вода (9:1) и добавляют 210 мкл ионообменной смолы BioRAD AG1 × 8 AcO^- к данному раствору. При проведении перемешивания изредка реакционного раствора вручную, указанный раствор фильтруют через мембранный фильтр для удаления смолы и лиофилизируют с получением 10,8 мг ацетата в виде белого порошка.

Масс-спектр (M+H)⁺ 1000,7 (Расчет: 1007,5)

Время элюции в системе ВЭЖХ: 10,7 минуты.

Условия элюции:

Колонка: YMC ODS AM-301 (4,6 × 100 мм)

Проводят элюцию в линейном градиенте плотности элюентов A/B = 80/20-30/70 c использованием 0,1% ТФУ в воде в качестве элюента А и ацетонитрила, содержащего 0,1% ТФУ, в качестве элюента B (25 минут).

Скорость течения: 1,0 мл/мл.

Структуры соединений, синтезированных по процедурам ПРИМЕРОВ 1-16, или соединений, синтезированных по методам синтеза, аналогичным процедурам, описанным в ПРИМЕРАХ 1-6, а также физико-химические свойства указанных соединений приведены ниже в Таблице 1А.

Описание колонки «Метод синтеза» в данной таблице указывает на то, что соединение может быть синтезировано или было синтезировано по методам синтеза, приведенным в настоящем описании, или в соответствии с ними.

Более конкретно, символ «А» в колонке «Метод синтеза» для соединения номер 708 указывает на то, что данное соединение было синтезировано по методу синтеза А, как было описано в примере 1.

Символ «B» в колонке «Метод синтеза» для соединения номер 709 указывает на то, что данное соединение было синтезировано по методу синтеза B, как было описано в примере 3.

Символ «С» в колонке «Метод синтеза» для соединения номер 713 указывает на то, что данное соединение было синтезировано по методу синтеза С, как было описано в примере 4.

Символ «D» в колонке «Метод синтеза» для соединения номер 714 указывает на то, что данное соединение было синтезировано по методу синтеза D, как было описано в примере 5.

Символ «E» в колонке «Метод синтеза» для соединения номер 717 указывает на то, что данное соединение было синтезировано по методу синтеза E, как было описано в примере 6.

Каждое описание, приведенное в колонке «Метод синтеза», для каждого соединения, описанного в примерах 7-16, указывает на то, что данное соединение было синтезировано согласно каждому из методов синтеза, приведенных в настоящем описании.

Каждое описание, приведенное в колонке «Метод синтеза» для каждого соединения, которое не описано в примерах 1-16, указывает на то, что данное соединение было синтезировано согласно каждому из методов синтеза, приведенных в настоящем описании.

Описание колонки «Условия ВЭЖХ» в таблице указывает на то, что каждое указанное соединение было элюировано с использованием одного из набора условий проведения ВЭЖХ, таких как «a», «b» или «с», приведенных в данном описании.

Структура соединений из числа приведенных в Таблице 1А показана ниже в Таблице 1B.

Таблица 1B

ТЕСТ-ПРИМЕР 1

Тест для оценки активности по повышению уровня внутриклеточных ионов кальция с использованием метода FLIPR

В соответствии с методом, описанным в JPA 2000-312590, определяют активность по повышению уровня внутриклеточных ионов кальция с использованием метода FLIPR.

Получают стабильную экспрессирующую клеточную линию hOT7T175 путем трансфекции экспрессирующей плазмиды pAK-rOT175 для клеток животных в клетки CHO/dhfr с использованием набора CellPhect Trancfection (Amersham Pharmacia Biotech. Inc.). Вначале добавляют 240 мкл буфера А (включенного в набор CellPhect Trancfection) к 9,6 мкг плазмидной ДНК, растворенной в 240 мкл дистиллированной воды, с последующим перемешиванием. После осаждения смеси в течение 10 минут, к смеси добавляют 480 мкл буфера B (включенного в набор CellPhect Trancfection), и указанную смесь энергично перемешивают с формированием липосом, содержащих ДНК. Затем 4 × 10⁵ клеток CHO/dhfr (полученных от ATCC) инокулируют в чашки Петри размером 60 мм. После культивирования клеток в среде Хэмса (Ham's) F-12 (Nissui Seiyaku Co., Ltd.) с добавкой 10% фетальной сыворотки теленка (BIO WHITTAKER, Inc.) при температуре 37°С в течение 2 дней в атмосфере 5% газообразного диоксида углерода, добавляют по каплям 480 мл липосом к клеткам в чашках Петри. После культивирования клеток при температуре 37°С в течение 6 часов в атмосфере 5% газообразного диоксида углерода, указанные клетки промывают два раза бессывороточной средой Хэмса F-12, и к клеткам в чашках Петри добавляют 3 мл 15% глицерина с последующей обработкой в течение 2 минут. Далее клетки снова промывают два раза бессывороточной средой Хэмса F-12 с последующей инкубацией в среде Хэмса F-12 с добавкой 10% фетальной сыворотки теленка при температуре 37°С в течение 15 часов в атмосфере 5% газообразного диоксида углерода. Клетки диспергируют путем трипсиновой обработки для отбора из чашки Петри. Восстановленные клетки инокулируют в 6-ячеечный планшет в количестве 1,25 × 10⁴ клеток/ячейку и начинают инкубирование при температуре 37°С в среде Дульбекко в модификации Игла (DMEM) (Nissui Seiyaku Co., Ltd.), содержащей 10% диализованной фетальной сыворотки теленка (JRH BIOSCIENCES, Inc.), в атмосфере 5% газообразного диоксида углерода. Трансфицированные плазмидой CHO трансформанты растут в среде, тогда как нетрансфицированные клетки постепенного погибают, соответственно, среду меняют в дни 1 и 2 после начала инкубации для удаления погибших клеток. Отбирают примерно 20 колоний CHO трансформантов, которые продолжают расти в дни 8-10 после начала инкубации. Из клеток, растущих в этих колониях, отбирают клетки, демонстрирующие высокую реактивную способность с пептидным лигандом метастина (далее называемым просто как hOT7T175/CHO) для проведения дальнейшего эксперимента.

Активность синтезированного пептида в hOT7T175/CHO по повышению уровня внутриклеточных ионов Ca определяют с использованием FLIPR (Molecular Devices, Inc.).

hOT7T175/CHO подвергают субкультивированию в среде DMEM с добавкой 10% диализованной фетальной сыворотки теленка (далее называемой сокращенно как dFBS) (указанная среда далее называется как 10% dFBS/DMEM) и проводят эксперимент. hOT7T175/CHO суспендируют в 10% dFBS-DMEM в количестве 15 × 10⁴ клеток/мл. Суспензию инокулируют в 96-ячеечные планшеты для проведения FLIPR (Black Plate Clear Bottom, Coster, Inc.) в количестве 200 мкл на ячейку (3,0 × 10⁴/200 мкл/ячейку) с последующей инкубацией при температуре 37°C в течение ночи в инкубаторе с содержанием 5% CO₂ (далее называемый как клеточный планшет). Затем смешивают 21 мл HANKS/HBSS (9,8 г HANKS, 0,35 г гидрокарбоната натрия, 20 мл 1M HEPES, после коррекции pH до значения 7,4 с использованием 1N гидроксида натрия, смесь стерилизуют фильтрованием), 210 мкл 250 мМ Пробенецида (Probenecid) и 210 мкл фетальной сыворотки теленка (FBS) (HANKS/HBSS-Пробенецид-FBS).

Далее содержимое 2 флаконов с Fluo3-AM (50 мкг/флакон) растворяют в 21 мкл диметилсульфоксида и 21 мкл 20% кислоты Pluronic. Полученный раствор добавляют к 10 мл описанной выше смеси HANKS/HBSS-Пробенецид-FBS и все перемешивают. После отбора культуральной среды смесь распределяют по клеточному планшету в количестве 100 мкл каждой из них/ячейку с последующей инкубацией при температуре 37°C в течение одного часа в инкубаторе с содержанием 5% CO₂ (по внесенному пигменту). Пептид растворяют в диметилсульфоксиде с концентрацией 1 × 10^-3 М. Раствор пептида разбавляют с использованием HANKS/HBSS, содержащего 2,5 мМ Пробенецида, 0,2% БСА и 0,1% CHAPS. Разведение затем переносят на 96-ячеечные планшеты для проведения FLIPR (планшет с V-образным дном, V-Bottom plate, Coster, Inc.) (далее называемый как планшет для образца). После внесения пигмента на клеточный планшет, указанный клеточный планшет промывают 4 раза промывочным буфером, который готовят при добавлении 2,5 мМ Пробеницида к HANKS/HBSS, с использованием промывочного аппарата для планшетов, оставляя 100 мкл промывочного буфера после промывки. Клеточный планшет и планшет для образца устанавливают в устройстве для проведения FLIPR и 0,05 мл образца из каждого планшета для образца автоматически переносят на клеточный планшет с использованием устройства FLIPR, для усиления клеточного ответа. Измеряют изменение в уровне внеклеточных ионов Ca в течение 180 секунд по окончании указанного периода времени. Активность по повышению уровня внеклеточных ионов Ca [удельная активность применительно к Метастину (1-54)] показана в таблице 2.

Таблица 2 Соединение № Удельная активность Соединение № Удельная активность Соединение № Удельная активность 708 12,8 747 2,6 789 3,4 709 9,8 748 0,4 790 2,3 710 7,2 749 0,5 791 2,9 712 8,9 750 1,0 794 2,3 713 3,7 754 3,1 797 1,4 714 0,7 755 3,5 800 0,8 715 1,6 756 2,4 801 11,1 716 3,6 757 2,7 809 1,0 717 1,0 758 1,8 810 1,5 718 2,6 759 1,9 813 0,5 719 3,8 760 1,7 814 0,5 720 0,8 763 6,4 815 0,5 721 1,1 764 1,5 816 1,1 722 2,2 765 2,6 843 0,8 723 2,0 766 0,2 844 0,9 724 1,4 767 1,5 845 1,0 725 2,7 768 0,6 846 0,9 726 3,1 769 1,5 856 0,6 727 1,5 770 2,6 860 1,3 728 3,2 771 1,9 861 1,4 730 4,1 772 1,3 862 0,7 731 8,8 773 1,1 863 0,9 732 3,2 774 2,0 864 1,0 734 2,3 775 1,3 868 1,4 735 3,4 776 1,5 870 0,6 736 2,4 111 1,8 872 0,7 737 3,0 780 2,1 874 0,8 738 1,4 781 1,0 877 1,0 739 1,6 782 1,8 882 0,8 740 1,1 783 8,8 886 1,2 742 2,3 784 3,4 888 1,1 743 3,4 785 3,2 896 0,6 744 2,4 786 3,3 897 0,7 745 3,0 787 2,3 899 1,1 746 2,2 788 27    

ТЕСТ-ПРИМЕР 2

Оценка пептидных производных метастина с точки зрения их способности снижать уровень тестостерона в крови с использованием зрелых самцов крыс

Пептидное производное метастина (далее называемое как пептид) растворяют в 50% водном растворе ДМСО (Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.) с получением раствора пептида с концентрацией 0,03, 0,01 или 0,003 мМ. Указанный пептидный раствор используют для внесения в пять осмотических насосов ALZET (модель 2001, объем 0,2 мл, скорость высвобождения 0,001 мл/час, DURECT Corporation). Насосы ALZET, заполненные раствором пептида, имплантируют подкожно пяти 9-недельным крысам-самцам CD(SD)IGS (Charles River Japan, Inc.) в область спины под эфирной анестезией с использованием одного насоса на животное. В качестве негативного контроля проводят эксперимент, в котором 50% водный раствор ДМСО вводят в 5 осмотических насосов ALZET, которые аналогичным образом имплантируют 5 самцам крыс CD(SD)IGS (Charles River Japan, Inc.), соответственно. Указанных крыс с имплантированным насосом кормят в течение 6 дней в нормальных условиях кормления. После взвешивания животных подвергают декапитации и отбирают кровь. После добавления к крови 0,03 мл/мл крови раствора апротинина (Trasylol, Bayer), содержащего 0,1 г/мл ЭДТА.2Na, отделяют плазму и восстанавливают путем центрифугирования при 1800 × g в течение 25 минут. Из полученной плазмы отбирают 0,05 мл для радиоиммуноанализа (DPC Total Testosterone Kit, Diagnostic Products Corporation) для определения уровня плазменного тестостерона у каждой крысы. В таблице 3 перечислены пептиды, в случае которых количество крыс, имеющих уровень тестостерона ниже предела измерения (0,04 нг/мл плазменного уровня) в радиоиммуноанализе, составляет 3 или более для 5 крыс, получавших пептиды.

Таблица 3 Соединение № Соединение № 720 763 721 765 723 767 726 773 727 775 732 776 734 787 738 788 739 797 742 814 744 856 745 870 746 872 750 874 755 877 756 882 757 888 758 896 759 897

ПРОМЫШЛЕННОЕ ПРИМЕНЕНИЕ

В соответствии с настоящим изобретением, предлагаются стабильные производные метастина, обладающие прекрасной биологической активностью (активностью, связанной с супрессией метастазирования рака, супрессией роста раковой опухоли, стимуляцией секреции гонадотропных гормонов, стимуляцией секреции половых гормонов и т.д.).

Настоящее изобретение относится к стабильным производным метастина, обладающим биологической активностью, связанной с супрессией метастазирования рака, супрессией роста раковых клеток, стимуляцией секреции гонадотропного гормона и стимуляцией полового гормона. При замещении аминокислот, входящих в состав метастина, определенными аминокислотами в полученном производном метастина согласно изобретению достигается улучшение стабильности, растворимости в крови, снижается тенденция к гелеобразованию, улучшаются также фармакокинетические показатели. 13 н. и 2 з.п. ф-лы, 3 табл.

1. Производное метастина, выбранное из группы, состоящей из:
Ac-D-Tyr-Aze(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №720),
Ac-D-Tyr-Pic(2)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №721),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №723),
Ac-D-Tyr-Gly-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №726),
Ac-D-Tyr-Aib-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №727),
Ac-D-Tyr-D-NMeAla-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №732),
Ac-D-Tyr-Izc-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №734),
Ac-D-Tyr-D-Gln-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №738),
Ac-D-Tyr-D-His-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-TrP-NH₂ (соединение №739),
Ac-D-Tyr-Ala-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №742),
Ac-D-Tyr-Ser-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №744),
Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №745),
Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №746),
Ac-D-Tyr-D-Trp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №750),
Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №755),
Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №756),
Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №757),
Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №758),
Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №759),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №763),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №765),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №767),
Ac-D-Tyr-His(3Me)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №773),
Ac-D-Tyr-Tyr(PO₃H₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №775),
гликолоил-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №776),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №787),
Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №788),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg-Trp-NH₂ (соединение №797),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Ala-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №814),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Ala(cPr)-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №856),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(2Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №870),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №872),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Me)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №874),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-tpeo-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №877),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-эритро-Ser(3-фенил)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №882),
3-(п-гидроксифенил)пропионил-Нур-Аsn-Тhr-Рhе-АzаGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №888),
Ac-D-Tyr-циcHyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №896), и
Ac-D-Tyr-Pro(4F)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №897),
или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Производное метастина, выбранное из группы, состоящей из:
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №723),
Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №745),
Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №746),
Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №757),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №765),
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №767),
Ac-D-Tyr-Tyr(PO₃H₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №775),
гликолоил-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №776),
Ac-D-Tyr-Hyp(Bzl)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №781), и
Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №787),
или его фармацевтически приемлемая соль.

3. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №723) или его фармацевтически приемлемые соли.

4. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Lys-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №745) или его фармацевтически приемлемые соли.

5. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №746) или его фармацевтически приемлемые соли.

6. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Glu-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №757) или его фармацевтически приемлемые соли.

7. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(3F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №765) или его фармацевтически приемлемые соли.

8. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4Cl)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №767) или его фармацевтически приемлемые соли.

9. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Tyr(PO₃H₂)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №775) или его фармацевтически приемлемые соли.

10. Производное метастина, которое представляет собой гликолоил-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №776) или его фармацевтически приемлемые соли.

11. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Hyp(Bzl)-Asn-Thr-Phe-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №781) или его фармацевтически приемлемые соли.

12. Производное метастина, которое представляет собой Ac-D-Tyr-Hyp-Asn-Thr-Phe(4F)-AzaGly-Leu-Arg(Me)-Trp-NH₂ (соединение №787) или его фармацевтически приемлемые соли.

13. Лекарственное средство, содержащее производное метастина по любому из пп.1-12, или его фармацевтически приемлемую соль, которое представляет собой агент, оказывающий супрессивное воздействие на метастазирование рака или агент, оказывающий супрессивное воздействие на рост раковой опухоли.

14. Лекарственное средство по п.13, которое представляет собой агент для профилактики или лечения рака.

15. Лекарственное средство по п.13, которое представляет собой агент для профилактики или лечения гормон-зависимого рака.