СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОПИСТОРХОЗА ПЛОТОЯДНЫХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2012 года по МПК A61K31/00 A61K36/42 A61P33/10 

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной гельминтологии, а более конкретно к разработке надежных средств для лечения описторхоза плотоядных животных.

Описторхоз - биогельминтоз плотоядных животных и человека, вызываемый трематодой, паразитирующей в желчных протоках печени, желчном пузыре и реже в протоках поджелудочной железы. Возбудитель трематода рода Opisthorchis, вид Opisthorchis felineus, относится к семейству Opisthorchidae. Описторхоз при длительном течении вызывает хроническое заболевание печени, желчного пузыря и поджелудочной железы, способствует раку печени и желчных протоков. Тело двуустки кошачьей плоское, суженое спереди. Длинна 8-14 мм, ширина 1,2-3,5 мм.

Зараженные окончательные хозяева постоянно выделяют во внешнюю среду с фекалиями яйца паразита со сформировавшимся мирацидием, которых заглатывают пресноводные моллюски нескольких видов рода Bithynia, являющиеся промежуточными хозяевами. В их кишечнике из яиц вылупляются мирацидии, которые мигрируют в печень и превращаются в спороцисту. Примерно через месяц из спороцисты образуются редии, в которых начинают развиваться церкарии, они покидают тело моллюска, дозревают и став инвазионными плавают в водоеме, где нападают на дополнительных хозяев - рыб семейства карповых, проникают через кожные покровы в мышечную и соединительную ткань, инцистируются превращаясь в метацеркариев. Находящиеся в мускулатуре рыб метацеркарии достигают инвазионной стадии через 6 недель. Развитие от яйца до метацеркария завершается примерно за 2,5 месяца [1].

Заражение плотоядных и человека описторхисами происходит при употреблении рыбы, инвазированной метацеркариями. Проглоченные вместе с рыбой метацеркарии освобождаются из цист и проникают через желчный проток в желчные ходы печени. Уже через 5 часов после заражения метацеркариев можно обнаружить в желчных ходах печени дефинитивного хозяина. Описторхисы в печени достигают половой зрелости за 21-28 дней. Живут эти паразиты в организме плотоядных животных в течение 3-5 лет, а у человека 10-20 лет и более [2].

Основным источником распространения описторхоза считается зараженные человек, кошки, собаки и в какой-то степени другие плотоядные животные. В настоящее время на Россию приходится не менее 70% мировой заболеваемости людей описторхозом, Украину и Казахстан - примерно по 7-10%, Беларусь - около 3-5% и на долю стран Западной Европы, включая страны Балтии, - оставшиеся 3-4%. Из всего вышеуказанного вытекает, что описторхоз плотоядных на сегодняшний день одна из актуальных проблем. При этом следует отметить, что борьба с описторхозом, плотоядных играет значительную роль в профилактике заболеваемости данной инвазией людей.

Учитывая важность проблемы, борьба с описторхозом плотоядных остается приоритетной задачей и перед исследователями стоит задача совершенствования мер борьбы и разработка комплексного лечения с комбинированными препаратами.

Для лечения плотоядных животных до последнего времени были рекомендованы гексахлорэтан, гексихол, политрем, празиквантел [3]. Безусловно, каждый из отмеченных препаратов имеет свои достоинства и недостатки. Гексахлорэтан и гексихол были доступны, их применяли широко, поскольку отечественные препараты, хотя не всегда устраивала их эффективность. На сегодня эти препараты морально устаревшие и их практически не используют. На этом фоне появление политрема устраивало многих. Это отечественный препарат недорогой, доступный. Правда, при высокой интенсивности описторхозной инвазии этот препарат не показал высокую эффективность и были осложнения у животных после его назначения при тяжелом течении инвазии. Следующий рекомендованный препарат - празиквантел (дронцит, азинокс) лишен этих недостатков, его лекарственные формы поставляют на Российский ветеринарный рынок несколько отечественных и иностранных фирм, но при всех своих достоинствах он достаточно дорогой.

В задачу наших исследований входило разработать эффективный комплексный способ лечения описторхоза плотоядных животных доступными средствами, учитывая отсутствие отрицательного действия на животных, нормализуя деятельность печени, ускоряя регенерацию поврежденных паразитами участков.

Решение поставленной задачи достигается тем, что в качестве лечебного средства (этиотропное лечение) при описторхозе плотоядных животных был использован комбинированный препарат празиотрем, состоящий из празиквантела (35%) и политрема (40%), а для нормализации деятельности печени после изгнания паразитов назначали гепатопротектор тыквеол (патогенетическая терапия). При использовании комбинированного препарата празиотрема доза входящего в его состав празиквантела снижена на 25%, стало быть настолько же снижены затраты на лечение животных. Другой составляющий комбинированного препарата - политрем снижен на 33%, стало быть исключены возможные осложнения со стороны интенсивно зараженных описторхисами животных. Суммарная доза двух входящих в состав комбинированного препарата празиотрема препаратов празиквантела и политрема достаточная для обеспечения высокого лечебного эффекта при описторхозе плотоядных при умеренных затратах на лечение. Завершающим и важным элементом предлагаемого комплексного лечения является назначение гепатопротектора тыквеола, который улучшает функциональное состояние желчевыводящих путей. Из доступных заявителю источников информации не известна указанная совокупность существующих признаков, позволяющая получать указанный технический результат, поэтому заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «новизна».

Заявителю не известны средства аналогичного назначения, в которых были бы раскрыты отличительные признаки заявляемого изобретения с получением от использования его в какой-либо совокупности признаков указанного технического результата. Следовательно, заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».

Доказательства промышленной применимости заявляемого приводятся в следующих примерах.

Пример 1. Определение оптимальной лечебной дозы комбинированного препарата празиотрема при экспериментальном описторхозе хомяков

Изучение лечебной эффективности оптимальной лечебной дозы празиотрема при экспериментальном описторхозе хомяков проводили в условиях вивария и лаборатории ВНИИ гельминтологии им. К.И.Скрябина согласно методическим рекомендациям [4].

Для испытаний было проведено экспериментальное заражение сирийских хомяков трехмесячного возраста, масса которых колебалась от 120 до 150 г. Предварительно опытных хомяков подвергали клиническим исследованиям, взвешиванию, индивидуальной и групповой нумерации, содержали в клетках по 6 голов. Экспериментальному заражению подвергали 36 хомяков, которым задавали по 50 метацеркариев, полученных от спонтанно зараженных рыб. Предварительные исследования, проведенные в условиях Ханты-Мансийского автономного округа, показали, что из обследованных рыб семейства карповых: плотва, лещ, карась, язь, - наибольшая экстенсивность (ЭИ - 100%) и интенсивность (ИИ до 3000 экземпляров) описторхозной инвазии установлена у язя.

Шесть хомяков аналогичного возраста и массы оставались без заражения и служили контролем. За время опыта животных всех групп содержали в аналогичных условиях, но изолированно по группам, кормили по зоотехническим нормам и они оставались под ежедневными клиническими наблюдениями. Успешность экспериментального заражения описторхисами устанавливали по результатам ежедневных копроскопических исследований опытных животных с 25 по 30 дни после заражения с установлением экстенсивности и интенсивности инвазии (по количеству яиц нематод в 1 г фекалий).

Следует отметить, что по результатам проведенных исследований все хомяки, которым задавали отмеченную дозу инвазионного материала, были заражены описторхисами, а количество выделяемых яиц колебалось от 2 до 7 экземпляров.

После установления экстенсивности и интенсивности описторхозной инвазии зараженных хомяков разделили на шесть аналогичных групп по 6 голов в каждой. Животным первой группы задавали комбинированный препарат празиотрем в дозе по действующему веществу (ДВ) из расчета 50 мг/кг празиквантела и 75 мг/кг политрема внутрь однократно, а в последующие 5 дней задавали гепатопротектор тыквеол в дозе 5 мг на животное ежедневно. Животным второй группы назначали празиотрем в дозе из расчета 75 мг/кг массы празиквантела и 100 мг/кг политрема внутрь однократно, а гепатопротектор назначали в дозе 10 мг на животное в течение 5 дней ежедневно. Третья группа животных получала препарат в дозе из расчета 80 мг/кг празиквантела и 125 мг/кг массы политрема, с последующей дачей гепатопротектора в дозе 20 мг на животное в течение 5 дней. Животным четвертой группы назначали празиквантел в дозе по ДВ 100 мг/кг массы внутрь однократно (базовый препарат). Пятая группа животных получала рекомендованную дозу политрема - 150 мг/кг массы однократно (базовый препарат). Животные шестой группы лечению не подвергались и служили контролем (зараженный контроль), а животные седьмой группы были свободны от инвазии и служили контролем (чистый контроль). За время опыта после лечения животных всех групп продолжали содержать в аналогичных условиях и кормили по принятым нормам.

Эффективность назначенных препаратов и разных доз определяли по результатам копроскопических исследований, убоя и вскрытия опытных животных через 30 и 35 дней после лечебного назначения. Проведенные в период лечения и в последующие 10 дней после наблюдения показали, что подопытные животные переносили назначенное лечение удовлетворительно, за исключением животных, получавших рекомендованную дозу политрема, которые переболевали более тяжело. У этих животных в клиническом статусе отмечено слегка угнетенное состояние, малая подвижность, обычную норму корма съедали не до конца. Дальнейшие наблюдения за этими животными показали нормализацию их общего состояния через 10 дней после назначения политрема. У животных других групп, которым назначали разные дозы комбинированного препарата празиотрема с гепатопротектором и рекомендованную дозу празиквантела, каких-либо заметных отклонений от нормы в состоянии и поведении подопытных животных не отмечено.

При исследовании через 30 дней после лечения с последующим убоем и вскрытием через 35 дней после назначения комбинированного препарата празиотрема и гепатопротектора из 6 животных первой группы описторхисы обнаружены у одного в количестве 3 экземпляров (табл.1). При исследовании и вскрытии животных второй и третьей групп в печени и поджелудочной железе описторхисы не найдены, как и у животных четвертой группы, дегельментизированных одним празиквантелом, но в большей дозе. Тогда как у трех животных из шести, которым назначали рекомендованную дозу политрема (пятая группа) обнаружены описторхисы в количестве 4; 5 и 7 экземпляров. При исследовании животных зараженного контроля находили яйца описторхисов, а при вскрытии печени и поджелудочной железы найдены описторхисы в количестве от 29 до 43 экземпляров, а средняя интенсивность инвазии составила 36 экземпляров на одно зараженное животное. Хомяки седьмой контрольной группы по результатам копроскопических исследований оставались свободными от инвазии.

Анализ результатов проведенных исследований показывает, что хомяки, получавшие комбинированный препарат празиотрем в дозе из расчета 50 мг празиквантела и 75 мг политрема на 1 кг массы внутрь и 5 дней гепатопротектор в дозе 5 мг, были заражены описторхисами на 16,7%, при интенсивности инвазии (ИИ) 3 экз. Отсюда экстенсэффективность (ЭЭ) составила 83,3%, интенсэффективность (ИЭ) - 98,6%. Экстенсэффективность комбинированного препарата празиотрема в дозах из расчета 75 мг празиквантела + 100 мг политрема и 80 мг празиквантела + 125 мг политрема на 1 кг массы внутрь однократно с последующим назначением гепатопротектора составила 100%. Поскольку обе дозы комбинированного препарата празиотрема показали одинаково высокую эффективность по экономическим соображениям предпочтение отдаем первой - 75 мг празиквантела + 100 мг политрема на 1 кг массы животного. Празиквантел в испытанной дозе 100 мг/кг обеспечил при описторхозе 100%-ную эффективность. Политрем в рекомендованной дозе 150 мг/кг показал 50%-ную ЭЭ и 92,6%-ную ИЭ.

Полученные данные дают нам основание считать оптимальной дозой комбинированного препарата празиотрема по составляющим из расчета 75 мг празиквантела + 100 мг политрема на 1 кг массы животного внутрь

однократно с последующим назначением тыквеола в дозе 10 мг на животное 5 дней, которые обеспечивают при описторхозе 100%-ную эффективность.

Пример 2. Испытание оптимальной дозы празиотрема при описторхозе хомяков

Испытание оптимальной лечебной дозы комбинированного препарата празиотрема при описторхозе проводили на 25 экспериментально зараженных хомяках, средняя масса которых составила 116,5 г. Экспериментальному заражению подвергали всех 25 хомяков, которых взвешивали, нумеровали и задавали по 50 метацеркариев описторхисов, полученных от спонтанно инвазированных карповых рыб. В течение 30 дней зараженные хомяки оставались под ежедневным наблюдением, затем их подвергали копроскопическим исследованиям. Результаты проведенных исследований показали, что все животные, подвергнутые экспериментальному заражению, инвазированы описторхисами, а количество выделенных яиц колебалось от 3 до 12 экз.

Исходя из результатов исследований зараженных хомяков разделили на четыре аналогичные группы. Животным первой группы (10 голов) назначали комбинированный препарат празиотрем в дозе из расчета 75 мг празиквантела + 100 мг политрема на 1 кг массы животного внутрь однократно, а в последующие 5 дней им назначали гепатопротектор тыквеол в дозе 10 мг на животное. Животным второй группы (5 голов) назначали празиквантел в дозе 100 мг/кг массы внутрь однократно. Хомякам третьей группы (5 голов) давали рекомендованную дозу политрема - 150 мг/кг массы внутрь однократно. Животные четвертой (контрольной) группы антгельминтик не получали, но в течение 5 дней им давали гепатопротектор в отмеченной дозе. За время опыта как до лечения, так и после лечебного назначения, животных всех пяти групп содержали в аналогичных условиях в виварии и кормили по принятым нормам.

Эффективность проведенного лечения определяли по результатам убоя и вскрытия печени и поджелудочной железы всех опытных животных через 32 дня после лечебного назначения.

Наблюдения, проведенные в период лечения и в последующие 10 дней после, показали, что животные, дегельминтизированные оптимальной дозой комбинированного препарата призиотрема с гепатопротектором и празиквантелом, переносили назначенное лечение хорошо. Тогда как животные, обработанные рекомендованной дозой политрема, были слегка угнетены и двигались меньше в течение семи дней после лечения. Через 10 дней после назначения политрема животные мало чем отличались от контрольных.

Результаты убоя и вскрытия подопытных животных показали, что хомяки, дегельментизированные оптимальной дозой комбинированного препарата празиотрема с последующим в течение 5 дней назначением гепатопротектора, были свободны от описторхисов как и животные, обработанные празиквантелом. При вскрытии пяти леченных политремом хомяком описторхисы найдены у двух в количестве 6 и 9 экземпляров. ЭЭ политрема составила 60%, ИЭ - 90,8% (табл.2). Контрольные животные были заражены описторхисами, а их общее количество составило 163 экз., что в среднем 32 экз. на одно зараженное животное.

Результаты испытаний показали, что оптимальная доза комбинированного препарата празиотрема из расчета 75 мг празиквантела + 100 мг политрема на 1 кг массы животного внутрь однократно с последующим в течение 5 дней назначением гепатопротектора тыквеола обеспечивает при экспериментальном описторхозе хомяков высокую антгельминтную эффективность (ЭЭ - 100%). Празиквантел в отмеченной дозе показал высокую эффективность при описторхозе (ЭЭ - 100%). Политрем в рекомендованной дозе обеспечивал 60%-ную ЭЭ и 90,8%-ную ИЭ. Использованный гепатопротектор тыквеол не оказывает влияние на зараженность животных описторхисами, но будучи средством

патогенетической терапии облегчает состояние леченых животных в период их восстановления.

Пример 3. Испытание комбинированного препарата празиотрема при экспериментальном описторхозе кошек

На следующем этапе исследований мы должны были подтвердить полученные на хомяках результаты по части эффективности комбинированного препарата при описторхозе кошек. Данная работа проведена в условиях вивария ВИГИС на 18 беспородных кошках в возрасте 1-1,5 лет, масса животных колебалась от 0,8 до 1,3 кг. Всех опытных кошек в период выдержки до заражения подвергали клиническим исследованиям и по их результатам они были здоровые. Экспериментальному заражению подвергали 15 кошек, которым задавали по 150 метацеркариев, полученных от спонтанно инвазированных рыб. В последующие 30 дней после заражения кошки оставались под ежедневными наблюдениями, которые позволили установить болезненное состояние всех зараженных животных особенно в течение первых пяти дней, они были малоподвижны, не всегда реагировали на корм и больше лежали. Только через две недели после экспериментального заражения описторхисами общее состояние инвазированных кошек приблизилось к состоянию контрольных незараженных животных и по части реакции на корм они мало отличались друг от друга. Известно, что на организм зараженных животных описторхисы оказывают механическое, аллергическое и токсическое действие. В зависимости от интенсивности инвазии описторхоз у плотоядных животных протекает в острой форме, а затем переходит в хроническую. Результаты индивидуальных взвешиваний опытных кошек показали, что за 20 дней после экспериментального заражения описторхисами у инвазированных животных была потеря живой массы (отвес) от 30 до 70 г, тогда как контрольные животные прибавили на 20 г.

Через 28, 29 и 30 дней после заражения всех животных подвергали копроскопическим исследованиям для установления их инвазированности.

Согласно результатов проведенных исследований все кошки, подвергнутые экспериментальному заражению, были инвазированы описторхисами, а количество выделяемых яиц колебалось от 4 до 15 экз.

Учитывая результаты исследований, зараженных кошек разделили на четыре аналогичные группы. Животным первой группы (6 голов) назначали комбинированный препарат празиотрем в дозе из расчета 75 мг/кг празиквантрела и 100 мг/кг массы политрема внутрь однократно, а в последующие пять дней им давали гепатопротектор тыквеол в дозе 100 мг/кг массы животного. Животным второй группы (3 головы) назначали празиквантел в дозе 100 мг/кг массы внутрь однократно. Животные третьей группы (3 головы) получали рекомендованную дозу политрема - 150 мг/кг массы внутрь однократно. Животных четвертой группы лечению не подвергали, они служили контролем как и животные пятой группы (незараженный контроль). После назначенного лечения животных всех групп содержали в аналогичных условиях под наблюдением и кормили по принятым нормам.

Результаты проведенного лечения определяли по данным двукратных копроскопических исследований через 30 дней после назначения препаратов.

Проведенные в период лечения и в последующие 10 дней после наблюдения показали, что животные, получавшие комбинированный препарат празиотрем с гепатопротектором и празиквантел, переносили назначенное лечение без каких-либо осложнений. А животные, обработанные политремом в течение семи дней после лечения, были угнетены и малоподвижны, но через 10 дней после дачи препарата мало чем отличались от контрольных.

Результаты копроскопических исследований показали, что животные первой группы, получавшие комбинированный препарат празиотрем с гепатопротектором тыквеолом, были свободны от осторхисов как и животные второй группы, дегельментизированные празиквантелом. При исследовании трех кошек, леченных политремом, яйца описторхисов нашли у одной в количестве 2-3 экземпляров. ЭЭ политрема составила 66,7%, ИЭ - 87,5% (табл.3). Животные первой контрольной группы все были заражены описторхисами, а количество выделяемых яиц составило 9-16 экземпляров, тогда как животные второй контрольной группы были свободы от инвазии.

Результаты испытаний показали, что комбинированный препарат празиотрем в дозе из расчета 75 мг/кг празиквантела и 100 мг/кг массы животного политрема внутрь однократно с последующим в течение 5 дней назначением гепатопротектора тыквеола обеспечивает при экспериментальном описторхозе кошек высокую антгельминтную эффективность (ЭЭ - 100%) и хорошо переносится животными.

Пример 4. Производственное испытание лечебной эффективности комбинированного препарата празиотрема с последующим назначением гепатопротектора тыквеола при спонтанном описторхозе кошек разного возраста

В условиях трех ветеринарных клиник г.Москвы и одной клиники Московской области в течение 2009 года были обследованы 288 кошек в возрасте от 1 до 9 лет методом последовательных промываний на спонтанную инвазированность описторхисами. Всего зараженных было выявлено 16 кошек, которых использовали в производственном испытании. Экстенсинвазированность установленной описторхозной инвазии составила 5,5%, а интенсивность инвазии по количеству яиц колебалась от 5 до 19 яиц (табл.4).

Исходя из зараженности животных условно разделили на две группы. Животным первой группы (10 голов) назначали комбинированный препарат празиотрем в дозе из расчета 75 мг/кг празиквантела и 100 мг/кг политрема внутрь однкратно, а в последующие пять дней им давали гепатопротектор тыквеол в дозе 100 мг/кг массы животного. Животным второй группы (6 голов) назначали препарат сравнения празиквантел в дозе 100 мг/кг массы внутрь однократно.

Оценивали проведенное лечение по данным копроскопических исследований через 30 дней после назначения отмеченных препаратов.

Наблюдения, проведенные в период лечения и в последующие 10 дней после, показали, что животные, дегельментизированные комбинированным препаратом празиотремом в комплексе с гепатопротектором и празиквантелом, отдельно переносили назначенное лечение хорошо и без осложнений.

Результаты копроскопических исследований показали, что кошки, получавшие комбинированный препарат празиотрем с гепатопротектором, были свободны от описторхисов как и животные, обработанные празиквантелом (ЭЭ - 100%).

Результаты производственного испытания подтвердили высокую эффективность комбинированного препарата празиотрема с последующим назначением гепатопротектора тыквеола при описторхозе кошек разного возраста.

Учет затрат на лечение животных использованными и предлагаемыми препаратами показал, что обработка одной кошки массой 1,0 кг обходилась - празиквантелом 0,4 руб., политремом 0,1 руб., комбинированным препаратом празиотремом 0,35 руб. и гепатопротектором тыквеолом 0,8 руб., а за весь курс 1,15 руб. В расчетах была использована следующая исходная информация: цена 1 кг празиквантела - 4000 руб., политрема - 500 руб., 1 флакон тыквеола 100 мл - 160 руб.

Таким образом, комбинированный препарат празиотрем в дозе из расчета 75 мг/кг празиквантела и 100 мг/кг политрема внутрь однкратно с последующим в течение 5 дней назначением гепатопротектора тыквеола обеспечивает 100%-ную лечебную эффективность при описторхозе хомяков и кошек.

Предложенный способ, включающий в себя применение комбинированного препарата празиотрема с последующим назначением гепатопротектора тыквеола, обеспечивает высокую лечебную эффективность при описторхозе плотоядных животных.

Источники информации

1. Акбаев М.Ш. и др. Паразитология и инвазионные болезни животных. - М., 1998.

2. Беэр С.А. Биология возбудителя описторхоза. - М., 2005.

3. Инструкция «О мероприятиях по предупреждению и ликвидации заболеваний животных гельминтозами», М.: МСХ, 1999.

4. Методические рекомендации по оценке антгельминтиков в ветеринарии. - М.: ВАСХНИЛ, 1986.

Изобретение относится в области ветеринарии. Животным назначают комбинированный препарат празиотрем в дозе из расчета 75 мг празиквантела и 100 мг политрема на 1 кг массы животного внутрь однократно с последующей дачей гепатопротектора тыквеола в дозе 100 мг/кг массы в течение пяти дней подряд. Способ эффективен в лечении описторхоза, при этом отсутствует отрицательное действие на организм животного, нормализуется деятельность печени, ускоряется регенерация поврежденных паразитами участков. 4 табл.

Способ лечения описторхоза плотоядных животных, включающий применение лечебных препаратов в сочетании с гепатопротектором, отличающийся тем, что в качестве лечебного средства назначают комбинированный препарат празиотрем в дозе из расчета 75 мг празиквантела и 100 мг политрема на 1 кг массы животного внутрь однократно, а в качестве гепатопротектора дают тыквеол в дозе 100 мг/кг в течение пяти дней подряд.