N-(2-БЕНЗОТИАЗОЛИЛ)АМИД 3-БРОМ-2,4-ДИОКСО-4-(4-МЕТОКСИФЕНИЛ)БУТАНОВОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩИЙ ГИПОГЛИКЕМИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2012 года по МПК C07D277/82 A61K31/428 A61P3/10 

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса N-гетериламидов 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот, а именно к N-(2-бензотиазолил)амиду 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты (1) формулы:

обладающему гипогликемической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве гипогликемического средства.

Ближайшим аналогом по структуре заявляемому соединению является N-(2-бензотиазолил)амид 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-метоксифенил)-2-бутеновой кислоты (2) [Гипогликемическая активность производных ароилпировиноградных кислот / Пулина Н.А., Юшкова Т.А., Краснова А.И. [и др.] // Фармация. - 2009. - №7. - С.36-38.] формулы:

Структурный аналог 2 не обладает гипогликемической активностью.

Эталоном сравнения выбран метформин (3), который широко применяется в лечебной практике и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т.2. - С.562-563].

Задачей изобретения является поиск в ряду N-гетериламидов 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот веществ с выраженной гипогликемической активностью и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением N-(2-бензотиазолил)амида 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты (1), обладающего гипогликемической активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием N-(2-бензотиазолил)амида 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-метоксифенил)-2-бутеновой кислоты (2) с бромом в безводном хлороформе при эквимолярном соотношении реагентов, при температуре 20-25°C с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме:

Пример 1 получения соединения 1. К суспензии 3.54 г (0.01 моль) N-(2-бензотиазолил)амида 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-метоксифенил)-2-бутеновой кислоты в 50 мл безводного хлороформа прикапывают 1.60 г (0.01 моль) брома. Реакционную смесь перемешивают при температуре 20-25°C до полного растворения реагента и раствор выдерживают 12 ч. Реакционную смесь охлаждают до 0°C, выпавший осадок отфильтровывают, перекристаллизовывают из четыреххлористого углерода. Выход 3.22 г (74%). Т.пл. 123-125°C. Найдено, %: C 49.82; H 3.42; Br 18.29; N 6.40. C₁₈H₁₃BrN₂O₄S. Вычислено, %: C 49.67; H 3.47; Br 18.36; N 6.44.

ИК спектр (Specord M80, вазелиновое масло, v, см^-1): 3290 ш (NHCO), 1750, 1720, 1680 (NHCO, C²=O, C⁴=O). Спектр ЯМР ¹H (BS-567A (100 МГц), ДМСО-d₆, ГМДС, δ, м.д.): 3.76 с (3H, СН₃О), 7.06 с (1H, C³H), 7.12-7.97 м (8H, 2 C₆H₄), 9.73 с (1H, NH).

Заявляемое соединение 1 представляет собой бесцветное кристаллическое вещество, растворимое в диоксане, диметилсульфоксиде, умеренно растворимое в четыреххлористом углероде, нерастворимое в воде.

Гипогликемическая активность соединения 1 изучена на модели аллоксанового диабета. Опыты выполнены на белых беспородных крысах обоего пола массой 180-200 г. В каждой серии использовались 6 животных. Экспериментальную гипергликемию моделировали подкожным введением аллоксана в дозе 170 мг/кг. Соединение 1 вводили перорально крысам с аллоксановым диабетом в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Концентрацию глюкозы в крови животных определяли глюкозооксидазным методом до введения исследуемого соединения 1 (контроль), а также через 120 мин после его введения (опыт) [Волчегорский И.А., Рассохина Л.М., Мирошниченко И.Ю. Антиоксиданты при экспериментальном сахарном диабете // Проблемы эндокринологии, 2008. - Т.54. - №5. - С.43-50]. Крыс лишали пищи за 16 часов до опыта и на время его проведения. Степень гипогликемической активности изучаемого соединения 1 через 120 минут после его введения сравнивали с активностью метформина в дозе 50 мг/кг. Результаты обработаны статистически с определением критерия Стьюдента с помощью статистических программ Windows XP (Excel).

Острую токсичность заявляемого соединения 1 при пероральном введении изучали на белых мышах обоего пола массой 18-20 г с определением ЛД₅₀ [Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией член-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.41-54]. В каждой серии использовались 6 животных. Наблюдение вели ежечасно в течение суток после введения соединения 1 в виде взвеси в 2% крахмальном растворе. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Результаты обрабатывали по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы (ЛД₅₀) при P=0,05 [Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. // Фармакология и токсикология. - 1978. - №4. - С.497-502].

Установлено, что ЛД₅₀ соединения 1 составляет 3800 мг/кг. Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к классу малотоксичных веществ [Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. М.: Медицина, 1977, с.196-197].

Таблица Гипогликемическое действие при аллоксановом диабете и острая токсичность соединения 1 Серии опытов ЛД₅₀, мг/кг Доза, мг/кг Уровень глюкозы, ммоль/л % торможения гипергликемии Контроль Через 120 мин Соедине
ние 1 3800 50 17,3±1,0 7,2±0,3*** 58,4*** Метфор
мин 1266 (1050-1485) 50 16,6±0,8 8,2±0,9*** 50,6*** Примечание: *** = р<0,001

Как видно из таблицы, соединение 1 проявило гипогликемическую активность на модели аллоксанового диабета, превышающую действие метформина. При этом заявляемое вещество 1 в 3 раза менее токсично, чем препарат сравнения.

Таким образом, N-(2-бензотиазолил)амид 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты (1) проявляет высокую гипогликемическую активность и обладает значительно меньшей токсичностью в сравнении с метформином, что делает возможным его использование в медицине для создания новых лекарственных препаратов, обладающих гипогликемической активностью.

ЛИТЕРАТУРА

1. Гипогликемическая активность производных ароилпировиноградных кислот / Пулина Н.А., Юшкова Т.А., Краснова А.И. [и др.] // Фармация. - 2009. - №7. - С.36-38.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т.2. - С.562-563.

3. Волчегорский И.А., Рассохина Л.М., Мирошниченко И.Ю. Антиоксиданты при экспериментальном сахарном диабете // Проблемы эндокринологии, 2008. - Т.54. - №5. - С.43-50.

4. Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией член-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб., и доп.. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.41-54.

5. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки // Фармакология и токсикология. - 1978. - №4. - С.497-502.

6. Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. М.: Медицина, 1977. - С.196-197.

Изобретение относится к N-(2-бензотиазолил)амиду 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты формулы 1. Технический результат - N-(2-бензотиазолил)амид 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты, обладающий высокой гипогликемической активностью и низкой токсичностью. 1 табл., 1 пр.

N-(2-бензотиазолил)амид 3-бром-2,4-диоксо-4-(4-метоксифенил)бутановой кислоты формулы:

обладающий гипогликемической активностью.