БИС[3-(4-ХЛОРФЕНИЛ)-1-(4-МЕТИЛФЕНИЛ)КАРБОКСАМИДО-1,3-ПРОПАНДИОНАТО]ОКСОВАНАДИЙ, ОБЛАДАЮЩИЙ ГИПОГЛИКЕМИЧЕСКОЙ И АНТИГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2011 года по МПК C07F9/00 A61K31/28 A61P3/10 

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса комплексных соединений ариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот, а именно к бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксованадия (1) формулы

обладающему гипогликемической и антигипоксической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве гипогликемического средства с сопутствующей антигипоксической активностью.

Ближайшим аналогом по структуре заявляемому соединению является 4-метилфениламид 2-гидрокси-4-оксо-4-фенил-2-бутеновой кислоты (2) [Андрейчиков Ю.С., Налимова Ю.А., Тендрякова С.П., Виленчик Я.М. Химия оксалильных производных метилкетонов. IX. Взаимодействие 5-арил-2,3-дигидрофуран-2,3-дионов с аммиаком и ароматическими аминами // Журнал органической химии. - 1978. - Т.14, №1. - С.160-163] формулы

Структурный аналог 2 не обладает гипогликемической и антигипоксической активностью.

Эталонами сравнения выбраны:

1. Сахароснижающий препарат метформин (3), широко применяемый в лечебной практике и являющийся аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т.2. - С.562-563].

2. Ангипоксический препарат пирацетам (4), широко применяемый в лечебной практике и являющийся аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Издательство Новая волна», 2005. - с.113-115].

Задачей изобретения является поиск в ряду комплексных соединений ариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот веществ с выраженной гипогликемической и антигипоксической активностью, а также низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3 -пропандионато]оксованадия (1), обладающего гипогликемической и антигипоксической активностью.

Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием 4-метилфениламида 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеновой кислоты (5) с ванадила сульфатом, при соотношении реагентов 2:1 в среде спирта этилового при комнатной температуре с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме:

Пример 1 получения соединения 1. К суспензии 6,32 г (0,02 моль) 4-метилфениламида 2-гидрокси-4-оксо-4-(4-хлорфенил)-2-бутеновой кислоты в 40 мл спирта этилового прибавляют раствор 1,63 г (0,01 моль) (VO)SO₄ в 25 мл воды, перемешивают до полного растворения реагента и выдерживают при комнатной температуре в течение 12 часов. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают горячим толуолом и высушивают. Выход 6,19 г (89%). Т.пл.=325-327°С. Найдено, %: С 58.53; Н 3.69; С1 10.24; N 4.09; V 7.27. C₃₄H₂₆C₁₂N₂O₇V. Вычислено, %: С 58.64; Н 3.76; С1 10.18; N 4.02; V 7.31.

ИК-спектр (Specord M80, вазелиновое масло, ν, см^-1): 3275 (NHCO), 1665 (CONH), 1605, 1580 (C=O, C=C, C=N). Спектр ЯМР ¹H (Bruker DRX 500, ДМСО-d₆, ГМДС, δ, м.д.): 3.15 с (6Н, 2CH₃), 7.12-8.08 м (18Н, 4C₆H₄, 2СН), 8.92 уш. c (2H, 2NH).

Заявляемое соединение 1 представляет собой темно-зеленое кристаллическое вещество, растворимое в диметилсульфоксиде и диметилформамиде, нерастворимое в воде, хлороформе, алканах.

Гипогликемическая активность соединения 1 изучена на модели аллоксанового диабета. Опыты выполнены на белых беспородных крысах обоего пола массой 180-200 г. Экспериментальную гипергликемию моделировали внутрибрюшинным введением аллоксана в дозе 160 мг/кг. Соединение 1 вводили перорально крысам с аллоксановым диабетом в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Концентрацию глюкозы в крови животных определяли глюкозооксидазным методом [Волчегорский И.А., Рассохина Л.М., Мирошниченко И.Ю. Антиоксиданты при экспериментальном сахарном диабете // Проблемы эндокринологии, 2008. - Т.54. - №5. - С.43-50] до введения исследуемого соединения 1, а также через 30 и 120 мин после него. Крыс лишали пищи за 16 часов до опыта и на время его проведения. Степень гипогликемической активности изучаемого соединения 1 через 30 и 120 минут после его введения сравнивали с активностью метформина в дозе 50 мг/кг.

Антигипоксическая активность изучалась на модели нормобарической гиперкапнии. Для воспроизведения этой формы гипоксии мышам соединение 1 вводилось в дозе 50 мг/кг, через час животных поодиночке сажали в герметически закрывающиеся сосуды (200 см³). По мере потребления кислорода животными, его концентрация в сосуде снижается, что приводит к их гибели. Регистрировали продолжительность жизни животных, по которой судили об эффективности исследуемого вещества. Мышам контрольной группы в том же объеме вводилось плацебо (вода). Препаратом сравнения служил пирацетам в дозе 50 мг/кг [Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств. / Под ред. Л.Д.Лукьяновой. - М., 1990. - 19 с.].

Результаты обработаны статистически с использованием коэффициента Стьюдента и представлены в таблицах 1, 2.

Острую токсичность заявляемого соединения 1 при пероральном введении изучали на белых мышах обоего пола массой 18-20 г с определением ЛД₅₀ [Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. /Под общей редакцией чл.-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб., и доп.. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.41-54]. В каждой серии использовались 6 животных. Наблюдение вели ежечасно в течение суток после введения соединения 1 в виде взвеси в 2% крахмальном растворе. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Результаты обрабатывали по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы (ЛД₅₀) при Р=0,05 [Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки // Фармакология и токсикология. - 1978. - №4. - С.497-502].

Установлено, что ЛД₅₀ соединения 1 составляет 2800 мг/кг. Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к классу малотоксичных веществ [Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К., Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977. - с.196-197].

Таблица 1 Гипогликемическое действие при аллоксановом диабете и острая токсичность соединения 1 Серии опытов ЛД₅₀ Доза, мг/кг Количество животных Уровень глюкозы, ммоль/л 30 мин 120 мин Контроль₁ - - 6 4,38±0,09 4,74±0,06 Контроль₂ - - 6 14,63±1,83***¹ 14,28±0,38^***1 Соединение 1 2800 50 6 7,43±0,99*¹ *² ***³ 4,43±0,59**² ***³ Метформин 1266(1050-1485) 50 6 8,62±0,34***¹ ***² 4,34±0,23***² Примечание:^* =p<0,05^**, =p<0,01, ^***=p<0,001; 1 - по отношению к контролю - 1 2 - по отношению к контролю - 2 3 - по отношению к метформину

Таблица 2 Антигипоксическое действие соединения 1 Серии опытов Нормобарическая гиперкапния (мыши) Время жизни, с % увеличения продолжительности жизни Соединение 1 2633,3±106,0***¹ **² 70,2 метформин 1728,9±113,4 1,3 пирацетам 3200,0±168,8**³ 92,3 контроль 1706,7±129,1 - Примечание^*: =p<0,05, ^**=р<0,01, ^***=р<0,001; 1 - по отношению к контролю 2 - по отношению к пирацетаму 3 - по отношению к соединению 1

Как видно из таблицы 1, соединение 1 проявило гипогликемическую активность на модели аллоксанового диабета в течение всего периода наблюдения, и оно не уступает по действию метформину. Также соединению 1 присуща высокая антигипоксическая активность (см. таблицу 2), в то время как метформин данным видом активности не обладает. Этот вид активности является положительным фактором, так как при сахарном диабете практически всегда имеется гипоксия, выраженность которой значительно возрастает при декомпенсации болезни и развитии сосудистых осложнений. При этом заявляемое вещество 1 в 2,2 раза менее токсично, чем метформин.

Таким образом, бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксованадий (1) проявляет высокую гипогликемическую и антигипоксическую активность и обладает значительно меньшей токсичностью в сравнении с метформином, что делает возможным его использование в медицине для создания новых лекарственных препаратов, обладающих гипогликемической и антигипоксической активностью.

ЛИТЕРАТУРА

1. Андрейчиков Ю.С., Налимова Ю.А., Тендрякова С.П., Виленчик Я.М. Химия оксалильных производных метилкетонов. IX. Взаимодействие 5-арил-2,3-дигидрофуран-2,3-дионов с аммиаком и ароматическими аминами // Журнал органической химии. - 1978. - Т.14, №1. - С.160-163.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства, - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - Т.2. - С.113-115, 562-563.

3. Волчегорский И.А., Рассохина Л.М., Мирошниченко И.Ю. Антиоксиданты при экспериментальном сахарном диабете // Проблемы эндокринологии, 2008. - Т. 54. - №5. - С.43-50.

4. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств / Под ред. Л.Д.Лукьяновой. - М., 1990. - 19 с.

5. Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ /Под общей редакцией чл.-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - С.41-54.

6. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки // Фармакология и токсикология. - 1978.- №4. - С.497-502.

7. Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К., Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977. - с.196-197.

Изобретение относится к бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксованадию формулы

Соединение обладает гипогликемической и антигипоксической активностью. Технический результат - получение соединения, обладающего высокой гипогликемической и антигипоксической активностью и низкой токсичностью. 2 табл.

Бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато] оксованадий формулы:

обладающий гипогликемической и антигипоксической активностью.