ИНСЕКТОАКАРИЦИДНОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПЛОТОЯДНЫХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2012 года по МПК A61K31/00 A01N25/02 A01N27/00 A01N29/00 A61P33/00 A61P33/14 

Изобретение относится к области ветеринарной арахноэнтомологии, в частности к разработке эффективного средства лечения плотоядных животных при арахноэнтомозах.

Арахноэнтомозы плотоядных животных распространены повсеместно. При паразитировании насекомых и клещей здоровью животных оказывается значительный ущерб: кровососущие насекомые, клещи, блохи при укусах вызывают беспокойство и стресс; инокулируя при укусе биологически активные вещества и выделяя продукты жизнедеятельности, они вызывают раздражение, воспалительную, аллергическую реакцию, токсикоз; при покусах или персистенции клещей травмируется кожа, нарушается ее целостность, открываются ворота инфекции; при обильной инвазии возможно развитие анемии, истощение, снижение иммунитета; являются переносчиками опасных инфекций и инвазий (пироплазмоз, эрлихиоз, боррелиоз и т.д.) [1].

В настоящее время в ветеринарной практике для лечения эктопаразитозов плотоядных животных применяют инсектоакарицидные капли «Барс форте», которые обладают инсектицидным и акарицидным действием [2].

Недостатками этого препарата являются наличие одного активного компонента, что влечет привыкание эктопаразитов и приводит к снижению эффекта при длительном использовании препарата [3]. Также данный препарат не обеспечивает полный спектр действия при акарозах плотоядных животных.

Наиболее близким к заявляемому техническим решением является препарат «БлохНет» капли на холку, которые эффективны против внешних паразитов: блох, власоедов, а также ушных и иксодовых клещей и комаров. В 1 мл препарата в качестве действующих веществ содержит фипронил - 20 мг, бензилбензоат - 290 мг и диметилфталат - 57 мг, а также вспомогательные компоненты. Применяют, нанося на кожу животного (собаки - 1 мл на 10 кг, кошки - капельно) в места, недоступные для слизывания. Недостатком этого препарата являются: 1) узкий спектр действия (защита от нападения кровососущих насекомых; профилактика и лечение энтомозов собак (вши, блохи, власоеды); профилактика поражения собак иксодовыми и чесоточными клещами; лечение отодектоза); 2) короткая продолжительность действия (при лечении отодектоза обработку проводят 2 раза в день с интервалом 7-10 дней), что приводит к увеличению стоимости лечебных мероприятий; 3) отсутствие компонента регулятора роста и размножения эктопаразитов, что приводит к заражению окружающей среды; 4) имеются случаи проявления признаков интоксикации и аллергии (мышечная дрожь, рвота, обильное слюно- и слезотечение, кожный зуд, раздражение и покраснение кожи); 5) не подлежат обработке беременные и кормящие суки, щенки моложе 10-недельного возраста [3, 4].

В задачу наших исследований входило разработать эффективный инсектоакарицидный препарат для профилактики и лечения арахноэнтомозов плотоядных животных, который мог бы отвечать параметрам: широкий спектр действия; длительный протективный эффект; активность в отношении различных стадий развития; малая токсичность для теплокровных; удобство в применении; экономичность лечебных мероприятий.

Предложенное средство лечения арахноэнтомозов плотоядных животных включает в себя композицию, состоящую из действующих веществ инсектоакарицидов - фипронил, бензилбензоат, перипроксифен (регулятор роста и размножения), растворителей - диметилсульфоксид, изопропиловый спирт, репеллента - гвоздичное масло, эмульгатора - твин-80, наполнителя - полиэтиленгликоль при следующем соотношении компонентов - 5:20:2:20:20:2:2:29.

Композиция «Инсакар» представляет собой прозрачную маслянистую жидкость светло-желтого цвета, со слабым специфическим запахом. Введение в его состав фипронила, бензилбензоата и перипроксифена с разным механизмом действия обеспечивает высокую инсектоакарицидную активность с длительным протективным действием, уменьшает развитие лекарственной устойчивости, активность в отношении различных стадий развития эктопаразитов. Кроме того, введение в состав гвоздичного масла, обладающего репеллентным, иммуномодулирующим, обезболивающим свойством, а также высокой антибактериальной и антивирусной активностью, обеспечивается репеллентное действие, отпугивающее насекомых и клещей, и способствует восстановлению пораженных участков кожи и организма в целом.

Сопоставительный анализ заявляемого технического решения с прототипом показывает, что заявляемое средство отличается от известного тем, что повышено содержание фипронила, снижено содержание бензилбензоата, тем самым увеличен протективный и акарицидный эффект, а также уменьшена токсичность. Дополнительно вносится регулятор роста и развития, в качестве репеллента - гвоздичное масло.

Для приготовления «Инсакара» берется 5 частей фипронила, которая смешивается с 20 частями диметилсульфоксида, параллельно берется 2 части перипроксифена и смешивается с 20 частями изопропилового спирта. Смешиваются полученные растворы и 20 частей бензилбензоата. Добавляется 2 части гвоздичного масла, 2 части твин-80, 29 частей полиэтиленгликоля и смешивается.

Аналогично описанному получают инсектоакарицидное средство, в котором компоненты находятся в соотношениях: фипронил: диметилсульфоксид: перипроксифен: изопропиловый спирт: гвоздичное масло: твин-80: полиэтиленгликоль - 1) 9:20:2:20:2:2:45 и 2) 5:20:2:20:2:2:49; 3) фипронил: диметилсульфоксид: перипроксифен: изопропиловый спирт: бензилбензоат: гвоздичное масло: твин-80: полиэтиленгликоль - 2:20:2:20:20:2:2:29.

Пример 1. Опыты по изучению акарицидных свойств, остаточного акарицидного и овоцидного действия препарата «Инсакар» в 4-х композициях провели на клещах рода Ixodes методом подсадки на обработанную тест-поверхность.

В опыте по определению акарицидных свойств для каждой композиции препарата отбирали по 10 клещей, помещали их на впитывающую влагу поверхность (фанеру) 10×10 см, предварительно обработав препаратами в дозе 1 мл. Контролем служила пятая фанера, обработанная водой. Время контакта клещей с обработанной поверхностью составила 5 минут. Затем клещей переносили в чистую посуду и помещали в термостат при температуре 30°С, относительной влажности 90%. Учет пораженных клещей проводили через 1, 4, 6, 24 и 48 часов. Опыт проведен в трех повторностях.

В результате проведенных исследований было установлено (таблица 1), что капли «Инсакар» в композиции 3, 4 обладают выраженной острой акарицидной активностью. При контакте с обработанной поверхностью 100%-ную гибель клещей наблюдали в течение 6 и 4 часов соответственно. "Инсакар" 1 показал 100%-ную гибель клещей через 48 часов, в то время как вторая композиция препарата показала 90%-ную эффективность.

Таблица 1 Акарицидное действие препарата «Инсакар» на клещей рода Ixodes Композиция препарата Количество Гибель клещей в % через, часов опытов клещей 1 4 6 24 48 1 3 30 3,3 23,3 33,3 83,3 100 2 3 30 0 3,3 16,6 56,6 90 3 3 30 76,6 90 100 - - 4 3 30 90 100 - - - Контроль 3 30 0 0 0 0 0

Остаточное акарицидное действие препарата определяли аналогичным методом, подсаживая клещей на 5 минут на обработанные тест-поверхности на 3, 7, 14, 21 и 30 сутки. Тест-поверхности после их обработки хранили в вертикальном положении при комнатной температуре. После экспозиции клещей переносили в чистую посуду и помещали в термостат. Учет погибших клещей проводили через 24, 48 и 72 ч после контактирования с обработанными поверхностями.

В результате опыта (таблица 2) было установлено, что при контактировании в течение 5 минут клещей с обработанными тест-поверхностями 100-ную гибель клещей на 30 сутки отмечали у препарата в композиции 1 и 4. На поверхностях, обработанных композициями 2 и 3, отмечали 80- и 40%-ную гибель клещей соответственно. Следовательно, капли "Инсакар" 1 и 4 обладают продолжительным остаточным действием.

Таблица 2 Остаточное акарицидное действие Композиция препарата Гибель клещей в % при контакте через, суток 3 7 14 21 30 1 100 100 100 100 100 2 100 100 90 80 80 3 90 80 60 40 40 4 100 100 100 100 100

В опытах по изучению овоцидного действия препаратов использовали яйца иксодовых клещей. Для этого свежие яйцекладки клещей (примерно по 50 яиц на группу) помещали на полоски фильтровальной бумаги в чашки Петри и при помощи пуливизатора (ручного) на все яйца нанесли равномерно: 1 группа - «Инсакар» в композиции 4, 2 группа контроль - вода. Затем полоски с яйцекладками помещали в пробирки, закрыв тканевой салфеткой. Пробирки помещали в эксикатор, где находились при температуре 27°С. Наблюдения вели в течение 7-ми суток. Отсутствие развившихся из яиц личинок в опытах и нормальное развитие в контроле служило доказательством овоцидного действия препарата. В результате было выявлено, что препарат «Инсакар» обеспечивает гибель яиц клещей на 100% (таблица 3).

Таблица 3 Овоцидное действие препарата «Инсакар» Группа Концентрация по ДВ, % Количество яиц в опыте, шт. Гибель яиц, шт. Гибель яиц, % 1 фипронил - 5       бензилбензоат - 20 50 50 100 перипроксифен - 2 2 H₂O 50 7 14

Пример 2. Изучение инсектицидных свойств препарата «Инсакар» в композиции 4 проводили в ветеринарных клиниках Москвы и Московской области, на станциях по борьбе с болезнями животных г.Нижний Новгород и Нижегородской области. Подобрали 40 собак и 40 кошек разного возраста и пород, спонтанно зараженных блохами и вшами, которых разделили на 2 группы (опытную и контрольную). При внешнем осмотре опытных животных наблюдали наличие характерных симптомов (зуд, взъерошенность, расчесы, очаги депиляции). При визуальном осмотре 40 см² поверхности кожи спины и шеи численность блох до опыта составила 20-50 экз, вшей 15-30 экз. Препарат использовали путем топикального (точечного) нанесения на кожу. Перед обработкой у пипетки открывали крышечку, раздвигали у животного шерсть в области спины (между лопатками) и наносили препарат на кожу в одну или несколько точек в дозах 1,5 мл (1 пипетка) на 2-10 кг.

Через 24 часа после обработки провели обследование и установили, что в опытных группах живых личинок, имаго блох и вшей не обнаружено, в то время как животные контрольной группы были заражены. При дальнейшем наблюдении за опытными животными в течение 30 дней живых насекомых не находили. Кроме того, после обработки животных вели ежедневное наблюдение и отмечали: общее состояние улучшилось, отсутствие новых очагов расчесов, происходила регенерация поврежденного кожного покрова. У животных контрольной группы отмечали характерные признаки, при осмотре численность блох и вшей возросла до 50-100 экз. и 50-70 экз. соответственно.

Пример 3. Опыты по изучению акарицидных свойств препарата «Инсакар» в композиции 4 проводили в ветеринарных клиниках Москвы и Московской области, на станциях по борьбе с болезнями животных Нижегородской области. Всего было выделено 120 собак и 105 кошек разного возраста и пород, спонтанно зараженных акарозами, из которых формировали опытные и контрольные группы (таблица 4). Животных опытных групп обрабатывали препаратом "Инсакар". Перед обработкой у животных предварительно очищали очаги поражения от корок и экссудата при помощи ватного тампона, смоченного препаратом либо маслом. Препарат в дозе 1,5 мл/2-10 кг массы тела наносили накожно на пораженные участки с захватом здоровой кожи на 1-2 см. Обработку проводили однократно. При демодекозе двукратно с интервалом 15 дней. При отодектозе перед обработкой у животных предварительно очищали ушные раковины от чешуек, корок и экссудата при помощи ватного тампона, смоченного препаратом. В каждую ушную раковину больным животным с внутренней стороны закапывали по 5 капель/1 кг веса с последующим легким массажем, сложив ушную раковину пополам. Обработку проводили однократно.

После обработки животных вели ежедневное наблюдение: учитывали общее состояние, прием корма и воды, поведение, осматривали кожный покров, а через 2, 7, 14 и 30 дней повторно проводили клинический осмотр кожного покрова. При применении препарата не отмечено каких-либо побочных явлений и осложнений.

Результаты эффективности приведены в таблице 4 (приложение).

Изучение эффективности препарата против иксодовых клещей провели на 30 собаках разного пола, возраста и породы, пораженных Ixodes ricinus. Всех животных обрабатывали однократно путем топикального (точечного) нанесения препарата на кожу в области спины (между лопатками) в дозе 1,5 мл/2-10 кг массы тела. Интенсивность инвазии до обработок составляла 2-8 клещей на животное. После обработки через 24 часа находили только мертвых клещей. Побочных эффектов после применения «Инсакара» не наблюдали. Капли «Инсакар» в рекомендованных дозах губительно действуют на иксодовых клещей.

Изучение профилактической эффективности от иксодовых клещей проводили в весенне-осенний сезон. Всего было обработано 44 животных, из них собак - 37 (в дозе 1,5 мл/2-10 кг), кошек - 7 (в дозах до 1 кг 0,3 мл (10 капель); 1-3 кг - 0,6 мл (20 капель); более 3 кг - 1,0 мл). В результате отмечено, что в течение 1 месяца не выявлено ни одного случая нападения клещей на животных.

Анализ полученных результатов показывает, что применение предложенного средства для лечения плотоядных животных при арахноэнтомозах позволяет получить высокую терапевтическую и профилактическую эффективность при энтомозах и акарозах (демодекозе, саркоптозе, отодектозе, нотоэдрозе, поражения иксодовыми клещами) без проявления побочного действия препарата. Высокая эффективность, широкий спектр действия и уменьшение кратности обработок предложенного средства обусловлены за счет установления оптимальных концентраций действующих веществ и внесения в предлагаемый препарат регулятора роста и развития эктопаразитов.

В опытах на белых крысах изучены токсические свойства «Инсакара». Среднесмертельная доза (ЛД₅₀) при нанесении на кожу составляет 41833 мг/кг (ЛД₅₀ у капель «БлохНэт» равна 27637 мг/кг). При оценке местно-раздражающего действия установлено, что препарат в 2,5 раза превышающей условия применения в практических условиях и в 5 раз повышенной дозе не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые глаз, а также является безопасной при оценке кожно-резорбтивного действия.

Используя комплекс тестов, установлено, что препарат «Инсакар» не обладает аллергизирующими свойствами, а также в пятикратно увеличенной дозе не вызывают отклонений со стороны иммунной системы.

Пример 5. В опыте по изучению эмбриотропных свойств использовали 27 беременных беспородных крыс массой 220-260 г. Обработку проводили препаратом «Инсакар» в трехкратно увеличенной дозе (2,25 мл/кг) накожно в области спины на 1; 7 и 14 дни беременности. Контрольных животных в указанные сроки обрабатывали ПЭГ (полиэтиленгликоль) в соответствующей дозе. В результате установлено, что препарат «Инсакар» не проявил эмбриотропной активности. У крыс опытной группы предимплантационная гибель зигот, постимплантационная гибель эмбрионов и общая эмбриональная смертность были соответственно - 4,1; 11,1 и 14,7%, контрольной группы - 5,9; 9,0 и 14,4%. Число желтых тел беременности, мест имплантации, резорбированных плодов и количеств эмбрионов существенно не отличались в опытной и контрольной группах. Также отмечено, что такие существенные показатели, как масса эмбрионов, кранио-каудальные размеры их, масса плаценты и ее размеры во всех группах животных находились без особых изменений, о чем свидетельствует плодоплацентарный коэффициент (24,5), который был на уровне контроля (24,8). Кроме того, количество мужских и женских особей эмбрионов в обеих группах были почти идентичны, что указывает на отсутствие эмбриотоксической активности препарата «Инсакар».

При визуальном осмотре плодов и исследование внутренних органов не отмечено ни одного случая уродства или изменений внутренних органов, а также разницы в размерах исследуемых костей скелета плодов обеих групп, что указывает на отсутствие тератогенного действия препарата.

Полученные результаты показывают, что применение предложенного средства для лечения плотоядных животных при арахноэнтомозах обеспечивает высокую терапевтическую и профилактическую эффективность при энтомозах и акарозах (демодекозе, саркоптозе, отодектозе, нотоэдрозе, поражения иксодовыми клещами) без проявления побочного действия препарата. Повышение содержания фипронила и снижение содержания бензилбензоата обеспечивает увеличение протективного и акарицидного эффекта, а также снижение токсического воздействия, что дает возможность использовать «Инсакар» для обработки беременных и кормящих животных, молодняка моложе 10-недельного возраста. При включении в состав средства регулятора роста и развития эктопаразитов обеспечивается снижение кратности обработок, тем самым уменьшаются материальные затраты лечения акарозов плотоядных животных и исключение заражения окружающей среды. Кроме того, введение в состав гвоздичного масла обеспечивает репеллентное действие, отпугивающее насекомых и клещей, и улучшение восстановления пораженных участков кожи и организма в целом.

Источники информации

1. Непоклонов А.А., Брюшинина Г.Г., Ивашкова Е.И. // Вет. энтомол. и арахнол. - М., 1983. С.152-155.

2. Головнина О.В. Арахно-энтомозы мелких домашних животных и меры борьбы с ними // Ветеринарная патология. 2007. - №2(21). - С.195-196.

3. Данилевская, Н.В. Особенности современных инсектицидных и акарицидных препаратов, применяемых для мелких домашних животных / Н.В.Данилевская // Ветеринар. 2005. - №2. - С.40-44.

4. Инструкция по применению инсектоакарицидных капель «БлохНет».

Таблица 4 Эффективность инсектоакарицидного средства «Инсакар» при акарозах собак и кошек Группа Количество животных Акарозы собак Демодекоз Саркоптоз Отодектоз количество зараженных эффек-ть, % количество зараженных эффек-ть, % количество зараженных эффек-ть, % опыт (Инсакар) 95 16 87,5 36 100 43 100 контроль 25 5 - 10 - 10 -     Акарозы кошек Отодектоз Нотоэдроз количество зараженных эффек-ть, % количество зараженных эффек-ть, % опыт (Инсакар) 85 57 100 28 100 контроль 20 10 - 10 -

Изобретение относится к области ветеринарии. Средство включает фипронил: диметилсульфоксид: перипроксифен: изопропиловый спирт: бензилбензоат: гвоздичное масло: твин-80: полиэтиленгликоль в соотношении - 5:20:2:20:20:2:2:29. Заявленное средство высокоэффективно, обладает широким спектром действия, обеспечивает длительный протективный эффект, исключает заражение окружающей среды, малотоксичен. 4 табл., 5 пр.

Инсектоакарицидное средство для лечения плотоядных животных, включающее фипронил, бензилбензоат, отличающееся тем, что дополнительно содержит перипроксифен, гвоздичное масло при соотношении компонентов фипронил:диметилсульфоксид:перипроксифен:изопропиловый спирт:бензилбензоат:гвоздичное масло:твин-80:полиэтиленгликоль - 5:20:2:20:20:2:2:29.