СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ОСЛОЖНЕНИЙ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫХ ЯЗВ Российский патент 2013 года по МПК G01N33/48 

Описание патента на изобретение RU2487354C1

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии и гастроэнтерологии, и может быть использовано в прогнозировании развития осложнений гастродуоденальных язв.

В настоящее время раскрыта роль мелатонина в патогенезе многих заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и, в первую очередь, язв желудка и двенадцатиперстной кишки. Перспективными являются исследования по изучению экспрессии на слизистой рецепторов мелатонина МТ-1 и МТ-2, через которые реализуются эффекты мелатонина.

Известен способ прогнозирования развития осложнений гастродуоденальных язв, заключающийся в определении уровня мелатонина в ЕС-клетках слизистых желудка и двенадцатиперстной кишки путем проведения иммуногистохимических исследований с использованием поликлональных кроличьих специфических антител к мелатонину (CIDtech. Res. Inc., титр 1:150). При обострении язвенной болезни зафиксирована существенная гиперплазия мелатонинсодержащих ЕС-клеток, что дает возможность прогнозирования течения патологического процесса (Князькин И.В. Экстрапинеальный мелатонин в процессе старения 14.00.53 - геронтология и гериатрия. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Санкт-Петербург - 2008). Этот способ принят авторами за прототип.

Недостаток прототипа состоит в том, что в группе пациентов с язвенной болезнью в стадии ремиссии уровень гиперплазии мелатонинсодержащих ЕС-клеток возвращается к величинам, аналогичным у пациентов с хроническим гастритом, и по этой причине прогнозировать отдаленные осложнения гастродуоденальных язв не представляется возможным.

Техническим результатом изобретения является разработка более эффективного и специфичного способа прогнозирования хирургических осложнений гастродуоденальных язв.

Указанный технический результат достигается тем, что в известном способе прогнозирования развития осложнений гастродуоденальных язв путем иммунологического исследования клеток слизистой оболочки желудка и/или двенадцатиперстной кишки согласно изобретению определяют экспрессию рецепторов мелатонина МТ-1 и МТ-2 в исследуемых клетках и рассчитывают значение дискриминантной функции по формуле:

D=1,127×MT1/MT2-4,005,

где МТ-1 - экспрессия рецепторов мелатонина МТ-1 в исследуемых клетках, %;

МТ-2 - экспрессия рецепторов мелатонина МТ-2 в исследуемых клетках, % и при D>0 прогнозируют развитие осложнений, а при D<0 - благоприятное течение заболевания.

В результате проведенных исследований установлен феномен, заключающийся в различной степени экспрессии рецепторов мелатонина МТ-1 и МТ-2 на клетках слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки у пациентов с различным течением заболевания.

Исследования показали, что соотношение экспрессии рецепторов мелатонина МТ-1/МТ-2 может быть прогностическим фактором развития осложнений гастродуоденальных язв в любой стадии заболевания (р=0,00001). Для определения прогностического значения этого фактора был проведен дискриминантный анализ и составлена формула для вычисления.

По результатам дискриминантного анализа чувствительность способа составила 100%, специфичность - 82%.

Исследование экспрессии рецепторов мелатонина было выполнено 40 пациентам. Исследования проводились у трех групп пациентов:

В группе (n-8) больных без эрозивно-язвенных поражений желудка и двенадцатиперстной кишки соотношение МТ-1/МТ-2 в среднем составило 1,46±0,42. У пациентов с язвой желудка или двенадцатиперстной кишки в момент исследования или в анамнезе (n-16) этот показатель в среднем оказался на уровне 2,04±1,10. В группе с хирургическими осложнениями (кровотечения, перфорации, n-16) в анамнезе средний показатель соотношения МТ-1/МТ-2 повысился до 5,07±1,21.

Предлагаемый способ может быть осуществлен, например, следующим образом.

При помощи полученных в ГНЦ НИИ Особо Чистых Биопрепаратов (г.Санкт-Петербург) первичных специфических антител к МТ-1 и МТ-2 рецепторам [А.Г.Тоноян. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности хирургия "Прогнозирование течения острого панкреатита на основании определения экспрессии рецепторов мелатонина в мононуклеарных клетках крови (клинико-экспериментальное исследование)" Санкт-Петербург 2009] и коммерческих моноклональных антител с флюоресцентными метками (goat anti rabbit FITC Ig G+M производства Becton Dickinson) выполняют непрямую иммунофлюоресценцию.

Исследуемым материалом являются биоптаты слизистой желудка или двенадцатиперстной кишки, полученные при эндоскопической инцизионной биопсии. Материал транспортируют в жидком азоте с последующим хранением при температуре t=-70°С. Для получения суспензии клеток слизистой оболочки производят механическое измельчение биоптата слизистой до фрагментов величиной d=1 мм с помощью скальпеля в чашке Петри с последующим добавлением буферного раствора в объеме 5 мл и фильтрацией через 35 мм фильтр. Центрифугируют полученную взвесь в течение 10 мин при 2300 об/мин.

Удаляют надосадочную жидкость и перемещают с помощью автоматической пипетки осевшие на дно клетки в две промаркированные пробирки по 100 мкл в каждую.

Добавляют в первую пробирку с образцами клеток 10 мкл полученных ранее специфических антител к МТ-1 рецепторам, во вторую - 10 мкл специфических антител к МТ-2 рецепторам.

Инкубацию образцов производят в темноте при температуре t=+4°С в течение 12 часов.

Центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин с последующей отмывкой.

Окрашивают клетки коммерческими моноклональными антителами с флюоресцентными метками (goat anti rabbit FITC Ig G+M производства Becton Dickinson).

Инкубируют образцы в темноте при температуре t=+4°С в течение 30 мин.

Анализ готовых проб проводят на проточном цитометре EPICS XL/MCL/Beckman Coulter/, с использованием программы System II. Учитывают процент экспрессирующих клеток отдельно по МТ-1 и МТ-2 рецепторам.

По найденным значениям экспрессии рецепторов мелатонина МТ-1 и МТ-2 в исследуемых клетках определяют значение дискриминантной функции D=1,127×MT1/MT2-4,005 и при D>0 прогнозируют развитие осложнений, а при D<0 - благоприятное течение заболевания, без осложнений.

Способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Пациентка Т., 43 лет, язвенного анамнеза нет. При ФГДС от 07.12.06. впервые выявленная язва на передней стенке луковицы двенадцатиперстной кишки 0,5×0,6 см, умеренный гастродуоденит.

Проведено исследование предлагаемым способом.

Экспрессия рецепторов мелатонина МТ-1 в исследуемых клетках - 6,5%, экспрессия рецепторов мелатонина МТ-2 - 4,9%, значение дискриминантной функции D=1,127×6,5/4,9-4,005=-2,51. D<0 - полученные данные позволяют прогнозировать благоприятное течение заболевания. Наблюдение за пациенткой в течение 5 лет подтверждает, что осложнений не было.

Пример 2. Пациент Г., 22 лет, язвенного анамнеза нет. При ФГДС от 09.02.07. впервые выявленная язва на задней стенке луковицы двенадцатиперстной кишки 0,5×0,5 см, умеренный гастродуоденит.

Проведено исследование предлагаемым способом.

Экспрессия рецепторов мелатонина МТ-1 в исследуемых клетках - 9,8%, экспрессия рецепторов мелатонина МТ-2 - 2,1%, значение дискриминантной функции D=1,127×9,8/2,1-4,005=1,25. D>0 - полученные данные позволили прогнозировать развитие осложнений и пациент был отнесен к группе риска. Наблюдение за пациентом в течение 5 лет показали, что у пациента имел место эпизод кровотечения.

Предлагаемый способ является высокоспецифичным и позволяет повысить эффективность прогнозирования развития осложнений гастродуоденальных язв в любой стадии заболевания.

Похожие патенты RU2487354C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ПЕПТИЧЕСКОЙ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ЯЗВЫ И ЕЕ ОСЛОЖНЕНИЙ 2005
  • Корымасов Евгений Анатольевич
  • Блашенцева Светлана Александровна
  • Лейбов Михаил Иосифович
  • Христ Александр Андреевич
RU2284037C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ ДЕСТРУКТИВНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ЗОНЫ 2008
  • Нестерова Ирина Вадимовна
  • Швыдченко Ирина Николаевна
  • Капранова Нина Павловна
  • Быковская Екатерина Юрьевна
  • Николаев Владимир Валерьевич
RU2391915C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ У ДЕТЕЙ 2011
  • Камалова Аэлита Асхатовна
  • Булатов Владимир Петрович
  • Зинкевич Олег Данилович
  • Сафина Нэлля Ахметовна
RU2475754C2
Способ прогнозирования риска развития язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки на основе молекулярно-генетического тестирования 2023
  • Рашина Ольга Викторовна
  • Чурносов Михаил Иванович
RU2816514C1
Способ прогнозирования риска развития H. pylori-позитивной язвенной болезни двенадцатиперстной кишки с использованием данных о полиморфизме гена ММР-9 2022
  • Чурносов Михаил Иванович
  • Миняйло Оксана Николаевна
  • Елыкова Анна Владимировна
  • Пономаренко Ирина Васильевна
RU2782496C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ОСТРЫХ ИЗЪЯЗВЛЕНИЙ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ЗОНЫ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОГО ТРАКТА 1998
  • Чернов В.Н.
  • Мизиев И.А.
  • Таранов И.И.
RU2140087C1
Способ прогнозирования риска развития язвенной болезни двенадцатиперстной кишки на основе молекулярно-генетического тестирования 2023
  • Рашина Ольга Викторовна
  • Чурносов Михаил Иванович
RU2816519C1
Способ прогнозирования риска развития язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки у женщин на основе молекулярно-генетического тестирования 2023
  • Рашина Ольга Викторовна
  • Чурносов Михаил Иванович
RU2811577C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНО-ДЕГЕНЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖЕЛУДКА И ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ 2005
  • Шимчук Светлана Федоровна
  • Семенова Ольга Петровна
RU2289448C1
Способ прогнозирования сезонного обострения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки 2022
  • Эседов Эсед Мутагирович
  • Мусаева Луиза Надировна
RU2787913C1

Реферат патента 2013 года СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ОСЛОЖНЕНИЙ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫХ ЯЗВ

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, гастроэнтерологии, и может быть использовано для прогнозирования развития осложнений гастродуоденальных язв. Способ заключается в том, что определяют экспрессию рецепторов мелатонина МТ-1 и МТ-2 в клетках слизистой оболочки желудка и/или двенадцатиперстной кишки, рассчитывают значение дискриминантной функции по формуле: D=1,127×MT1/MT2-4,005. При D>0 прогнозируют развитие осложнений, а при D<0 - благоприятное течение заболевания. Способ является высокоспецифичным и позволяет повысить эффективность прогнозирования. 2 пр.

Формула изобретения RU 2 487 354 C1

Способ прогнозирования развития осложнений гастродуоденальных язв путем иммунологического исследования клеток слизистой оболочки желудка и/или двенадцатиперстной кишки, отличающийся тем, что определяют экспрессию рецепторов мелатонина МТ-1 и МТ-2 в исследуемых клетках и рассчитывают значение дискриминантной функции по формуле
D=1,127·MT1/MT2-4,005,
где МТ-1 - экспрессия рецепторов мелатонина МТ-1 в исследуемых клетках, %;
МТ-2 - экспрессия рецепторов мелатонина МТ-2 в исследуемых клетках, %,
и при D>0 прогнозируют развитие осложнений, а при D<0 - благоприятное течение заболевания.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2013 года RU2487354C1

КНЯЗЬКИН И.В
Паровоз для отопления неспекающейся каменноугольной мелочью 1916
  • Драго С.И.
SU14A1
Станок для изготовления деревянных ниточных катушек из цилиндрических, снабженных осевым отверстием, заготовок 1923
  • Григорьев П.Н.
SU2008A1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ У ДЕТЕЙ 1999
  • Потехин П.П.
  • Переслегина И.А.
  • Широкова Н.Ю.
  • Соколова И.Л.
  • Саралов С.Н.
  • Жукова Е.А.
  • Артемова А.В.
RU2162600C1
БЕРЕСЛАВСКИЙ М.И
и др
Мелатонин слизистой оболочки желудка при язвенной болезни и гастродуоденальных кровотечениях//Актуальные

RU 2 487 354 C1

Авторы

Семенов Дмитрий Юрьевич

Османов Зейнур Худдусович

Колоскова Людмила Евгеньевна

Резван Татьяна Афанасьевна

Даты

2013-07-10Публикация

2012-05-04Подача