ДИЛИТИЕВАЯ СОЛЬ N-САЛИЦИЛОИЛГЛИЦИНА, ОБЛАДАЮЩАЯ НООТРОПНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2013 года по МПК C07C235/52 C07C235/60 A61P25/00 

Изобретение относится к новым производным глицина, а именно N-салицилоилглицина и его применению как ноотропного средства.

Многие психотропные средства обладают недостаточной эффективностью, лишены избирательности действия и имеют большое количество побочных эффектов, нередко заставляющих клиницистов решать вопрос о соотношении вреда и пользы [Richardson J.S. Animal models of depression reflect changing views on the essence and etiology of depressive disorders in human/ZProg. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. - 1991. - Vol.15, №2. - P.199-204.]. В связи с этим актуальна проблема поиска новых психофармакологических средств, свободных от нежелательных эффектов, безопасных, эффективных, надежных, экономичных.

Глицин (аминоуксусная кислота, CAS 56-40-6) как средство, повышающее умственную работоспособность и уменьшающее психоэмоциональное напряжение. Глицин применяется в таблетках по 0,1 г 2-3 раза в день. При функциональных и органических поражениях нервной системы, сопровождающихся повышенной возбудимостью, эмоциональной лабильностью и нарушением сна, детям до трех лет назначают по 0,5 таблетки (0,05 г) на прием 2-3 раза в день в течение 7-14 дней. [Машковский М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей. - Т.2. - М.: Новая волна. - 2002. - с.124]. Лития карбонат (седалит) применяют в маниакальной фазе и для профилактики обострений биполярного аффективного расстройства, шизоаффективные расстройства, маниакальные состояния различного генеза, аффективные расстройства при хроническом алкоголизме, лекарственная зависимость, сексуальные отклонения, синдром Меньера, мигрень [Машковский М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей. - Т.2. - М.: Новая волна. - 2002. - с.124]. Эталонным ноотропом который используется для восстановления нарушений интеллектуальных функций у больных при нарушении мозгового кровообращения, является пирацетам (2-оксо-1-пирролидинацетамид, С AS 932-17-2). Недостатком пирацетама как эталонного препарата является его низкая активность: уровень эффективных доз действия составляет 200-500 мг/кг, эффект пирацетама часто плохо воспроизводим. Другой лекарственный препарат "Мексидол" (этилметилгидроксипиридина сукцинат) проявляет ноотропную, нейропротекторную, анксиолитическую, противогипоксическую, антистрессорную, антиалкогольную, противопаркинсоническую и противосудорожную активность и др. Однако, летальная доза мексидола, вызывающая гибель 50% животных (ЛД₅₀) составляет для крыс 820 (625÷1025) мг/кг и для мышей 475 (365÷617) мг/кг, а при введении внутрь - более 3000 мг/кг у крыс и 2010 (1608÷2513) мг/кг у мышей. Терапевтический индекс, вычисляемый по соотношению ЛД₅₀/ЭД₅₀ составляет 16,4 [Воронина, Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол: основные эффекты, механизм действия, применение. - М.: 2004. - 248 с.]

В медицинской практике среди используемых салициламидов известны отдаленные аналоги заявляемого соединения, такие как салициламид (CAS 65-45-2), который назначают внутрь в качестве болеутоляющего и жаропонижающего средства, оксафенамид (CAS 526-18-1) усиливает образование и выделение желчи, оказывает спазмолитическое действие и снимает или уменьшает спазмы желчевыводящих путей, тиаприд и султоприд оказывают антидофаминергическое действие которые применяют наружно в качестве обезболивающих и противовоспалительных средств [Машковский М.Д. Лекарственные средства: пособие для врачей. - Т.1. - М.: Новая волна. - 2002. - с.74, 167, 318]. К побочным действиям салицилатов относят тошноту, гастралгию, аллергические реакции, нарушения функции печени, синдром Рейе и др. [Машковский М.Д. Лекарственные средства: Пособие для врачей. - Т.1. - М., Новая волна. - 2002. - с.165]. Однако в медицинской практике отсутствуют препараты СК, которые обладали бы ноотропным действием.

Соединение N-салицилоилглицин (CAS 207-661-6) повышает антикоагулирующий эффект аспирина (US 5389621) и обладает терапевтическим эффектом при лечении воспалительных процессов (US 4287190).

Цель изобретения заключается в получении высокоэффективного производного глицина, сочетающего основные эффекты, присущие ноотропным средствам и характеризующегося низкой токсичностью и действующего в малых дозах.

Сущность изобретения заключается в синтезе дилитиевой соли N-салицилоилглицина (дилития N-салицилоиламиноацетат) формулы

и использования ее в качестве ноотропного средства.

В исследованиях ноотропного эффекта заявляемого соединения использовались дозы 10 и 50 мг/кг разведенных в изотоническом 0,9% NaCl при комнатной температуре. Вещество вводилось однократно за 60 минут до начала эксперимента. Результаты проведенных исследований подвергнуты статистической обработке, достоверность различий оценивали с помощью критерия Уитни-Манна. Заявляемое соединение в обеих дозах вызывало достоверные однонаправленные изменения в тесте УРПИ - увеличивался латентный период первого захода в темный отсек (в 8 раз в дозе 10 мг/кг и в 7,5 раз в дозе 60 мг/кг) и уменьшалось общее время пребывания в нем (в 6 раз в дозе 10 мг/кг и в 4,4 раза в дозе 50 мг/кг). В связи с этим можно говорить о наличии у заявляемого соединения выраженных антиамнестических свойств. Это же соединение в обеих дозах проявило однонаправленный эффект в тесте форсированного плавания Порсольта, заключающийся в уменьшении времени иммобилизации, что, несмотря на недостоверность некоторых данных, свидетельствует о его незначительном антидепрессивном эффекте.

Исследования острой токсичности заявляемого соединения (ЛД₅₀ 1233,92 мг/кг) показали, что по классификации опасности (вредности) веществ дилитиевая соль N-салицилоилглицина при внутрибрюшинном введении мышам относится к классу умеренно токсичных соединений [Саноцкий И.В., Уланова И.П. Критерий вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений. - М.: Медицина, 1975 - 328 с.] (таблица 3).

Пример 1. Дилитиевая соль N-салицилоилглицина (дилития N-салицилоиламиноацетат). Синтез N-салицилоилглицина может быть осуществлен по методике описанной в статье [Диванян Н.М., Казарян Л.Х., Галстян Л.Х. Синтез и противовоспалительная активность некоторых амидов салициловой кислоты - производных α-аминокислот. Хим.-фарм. журнал. 1978. Т XII, №9. С.45-48]. Для получения дилитиевой соли N-салицилоилглицина 20,0 г (200 ммоль) фенолята лития, 70 г толуола или бензола и 19,5 г (100 ммоль) N-салицилоилглицина смешивают и при перемешивании нагревают при температуре 100°C в течение 60 минут. После охлаждения продукт отделяют фильтрованием, промывают небольшим количеством растворителя и сушат. Получают белое кристаллическое вещество (19,6 г, 95%) с температурой плавления выше 270°C.

Пример 2. Оценка антидепрессивной активности новых производных оксибензойных кислот с аминокислотами в тесте форсированного плавания Порсольта. Наличие или отсутствие антидепрессивной активности изучаемых соединений определяли с помощью плавательного теста (тест «выученной беспомощности» или «поведенческого отчаяния»), предложенного Porsolt R.D. в 1978 году. Эта модель считается одной из наиболее адекватных для выявления для выявления антидепрессантов с различными механизмами действия [Q.J. Huang, Н. Jiang, X.L. Hao, T.R. Minor Brain IL-1 beta was involved in reserpine-induced behavioral depression in rats / Acta. Pharmacol. Sin. - 2004. - Vol.25, №3. - P.293-296]. Основным показателем этого метода служит время иммобилизации, которое расценивается как отказ животного от поиска выхода из аверсивной ситуации при повторном помещении в сосуд с водой. Исходя из этого, сокращение длительности иммобилизации у животных и увеличение количества прыжков из воды характеризовалось нами как проявление антидепрессивного действия вещества. По мнению ряда авторов, если под влиянием веществ, сокращающих длительность иммобилизации в тесте принудительного плавания, не отмечается увеличения психомоторной активности в тесте «открытого поля», подобный факт свидетельствует о наличии у соединений специфической антидепрессивной, а не общей психостимулирующей активности (таблица 1).

Пример 3. Метод изучения ноотропной активности «выработка условной реакции пассивного избегания». Для изучения ноотропной активности соединений была использована методика выработки условной реакции пассивного избегания (УРПИ). В работе использовали модификацию этой методики, специально разработанную для крыс. Выработку условной реакции избегания затемненного отсека производили в экспериментальной камере, которая состояла из двух смежных отсеков, большого освещенного (60×40 см) немалого затемненного (15×15 см), снабженного электродным полом. Крыса считалась обученной, если в течение 30 секунд после сеанса обучения она не заходила в темный отсек экспериментальной камеры. Тест на воспроизведение. памятного следа осуществлялся через 24 часа после обучения. Животное помещали в светлый отсек камеры и в течение 3 минут регистрировали три показателя: латентный период первого захода в темный отсек, количество заходов и общее время пребывания в темной камере. Ноотропный эффект исследуемого вещества выражался в увеличении латентного периода первого захода животного в темный отсек, уменьшении количества заходов в этот отсек и времени пребывания в нем по сравнению с животными контрольной группы (таблица 2).

Пример 4. Определение острой токсичности. Острую суточную токсичность при однократном введении изучали на мышах-самках массой 25-30 г. Соединение в изотоническом растворе хлорида натрия вводили животным внутрибрюшинно в различных возрастающих дозах однократно. Наблюдение за животными проводили в течение суток, отмечая количество погибших животных. Расчет ЛД₅₀ проводили по методу Литчфилда и Уилкоксона (таблица 3).

Терапевтический индекс заявляемого соединения - дилитиевой соли N-салицилоилглицина в 5 раз выше, чем у глицина, в 12 раз, чем у пирацетама и в 14 раз превышает терапевтическую широту действия мексидола (таблица 3). Так как дилитиевая соль N-салицилоилглицина водорастворима, возможно ее применение в виде растворов.

Таблица 1 Тест принудительного плавания по Porsolt дилития N-салицилоиламиноацетата Соединение Доза, мг/кг Время иммобилизации Количество прыжков Контроль 0 79,50±17,10 0,00±0,00 дилития N-салицилоиламиноацетат 10 35,50±7,59* 0,00±0,00   50 37,38±5,60 1,50±0,50* * - данные статистически достоверны, p<0,05, критерий Уитни-Манна

Таблица 2 Тест УРПИ дилития N-салицилоиламиноацетата Соединение Доза, мг/кг Латентный период захода в темный отсек, с Время пребывания в темном отсеке, с Контроль 0 19,13±3,20 160,88±3,20 дилития N-салицилоиламиноацетат 10 152,43±23,10* 27,57±23,10* 50 143,00±22,86* 37,00±22,86* * - данные статистически достоверны, p<0,05, критерий Уитни-Манна

Таблица 3 Сравнительная характеристика эффективности дилития N-салицилоиламиноацетата эффективностью глицина, пирацетама и мексидола   ЛД₅₀, мг/кг Терапевтический индекс $$\frac{{\text{ЛД}}_{\text{50}}}{{\text{ЭД}}_{\text{50}}}$$ дилития N-салицилоиламиноацетат 2341,1* (1106,69÷1375,78) 234,1 Глицин 2370,0** 47,4 Пирацетам 8000,0 20,0 Мексидол*** 475 (365÷617) 16,4 Отношение $$\frac{соль}{Глицин}$$ 1:1 4,9 Отношение $$\frac{соль}{пирацета}$$ 1:3,4 11,7 Отношение $$\frac{соль}{Мексидол}$$ 4,9:1 14,3 * данные статистически достоверны, р<0,05, критерий Уитни-Манна ** Yakuri to Chiryo. Pharmacology and Therapeutics. Vol.5, pg. 1502, 1977. *** Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол: основные эффекты, механизм действия, применение. - М.: 2004. - 248 с.

Изобретение относится к новому производному N-салицилоилглицина формулы , которое обладает ноотропным действием. Данное соединение может найти применение в химико-фармацевтической отрасли для получения эффективных ноотропных препаратов. 3 табл., 4 пр.

Производное N-салицилоилглицина формулы

обладающее ноотропным действием.