СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ АЗИТРОМИЦИНОМ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 2014 года по МПК G09B23/28 A61P9/08 A61P15/06 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии.

По известным литературным источникам - эндотелиальная дисфункция лежит в основе патогенеза гестоза. Одним из путей коррекции эндотелиальной дисфункции является увеличение концентрации оксида азота (NO), который относится к основным фактором вазодилатации и индукторам ангиогенеза (Марков, X.М. Молекулярные механизмы дисфункции сосудистого эндотелия / X.М. Марков // Кардиология. - 2005. - Т.45, №12).

Известен способ коррекции нарушения микроциркуляции в плаценте при ADMA - подобной модели гестоза в эксперименте (RU №2432618, публ. 27.10.2011), который заключается в том, что эксперимент проводят на белых беременных крысах-самках линии Wistar массой 250-300 г сроком беременности 14 дней. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут в течение 7 дней. Резвератрол вводится внутрижелудочно в дозе 2 мг/кг/сут в течение 7 дней.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных крыс с помощью L-аргинина-субстрата для синтеза NO, согласно описанию экспериментальных исследований в статье: «Фармакологическая коррекция L-аргинином «ADMA-eNOS-ассоциированных мишеней» при экспериментальной преэклампсии» (Кубанский научный медицинский вестник №1, 2010 г., стр. 85-92). Опыты проводились на белых крысах-самках (беременных, 14-16-е сутки) линии Wistar массой 250-300 г. Неселективный блокатор NO-синтазы N-нитро-L-аргинин-метиловый эфир (L-NAME) вводился внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут однократно в течение 7 дней. На фоне такого моделирования для коррекции эндотелиальной дисфункции беременным крысам-самкам вводят внутрижелудочно L-аргинин в дозе 200 мг/кг/сут однократно в течение 7 дней, начиная с 14-16-го дня беременности.

Основным недостатком способа является то, что L-аргинин является эндогенным субстратом для образования NO и прямым конкурентом ADMA, поэтому повышение его концентрации приводит только к увеличению количества образуемого NO и активации эндотелиальной NO-синтазы. Кроме того, дополнительным фактором развития гестоза и возникновения эндотелиальной дисфункции являются остро возникающие инфекционные заболевания и обострение хронически протекающих инфекционных процессов. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели патологии у беременных животных с использованием только L-аргинина неудовлетворительны, так как он не обладает антибактериальным действием.

Задачей предлагаемого изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели гестоза, включающий использование антибактериального препарата азитромицин, относящегося к группе макролидов.

Задача достигается тем, что на фоне моделирования гестоза в эксперименте внутрибрюшинным введением беременным самкам крыс линии Wistar в течение 7 суток, начиная с 14 дня беременности ADMA-подобного блокатора эндотелиальной NO-синтазы-N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг проводится фармакологическая коррекция эндотелиальной дисфункции внутрижелудочным (через зонд) введением азитромицина в дозе 30 мг/кг однократно в течение 7 суток (с 14 по 20 день беременности).

Предлагаемый способ приводит к выраженной коррекции эндотелиальной дисфункции, так как введение азитромицина приводит к увеличению биодоступности NO.

Основным преимуществом предлагаемого способа является отсутствие противопоказаний, наблюдающихся при приеме L-аргинина, а именно, L-аргинин противопоказан при активном проявлении заболевания вирусом герпеса. Кроме того, азитромицин устраняет остро возникающие инфекционные заболевания и обострение хронически протекающих инфекционных процессов, которые приводят к формированию гестоза.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых беременных крысах-самках линии Wistar массой 250-300 г.сроком беременности 14 дней. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут в течение 7 дней (с 14 по 20 день беременности). Азитромицин вводится ежедневно внутрижелудочно (через зонд) в дозе 30 мг/кг/сут в течение 7 дней.

На 8 день от начала эксперимента под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) вводят катетер в правую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Проводят сосудистые пробы на эндотелийзависимую вазодилатацию (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, и эндотелийнезависимую вазодилатацию (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг с расчетом коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД):

$$КЭД=\frac{S_{АДНП}}{S_{АДАХ}}$$ ,

где КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции; S_{АД НП} - площадь треугольника над кривой восстановления АД при проведении функциональной пробы с введением нитропруссида натрия, S_{АД АХ} - площадь треугольника над кривой восстановления АД при проведении функциональной пробы с введением ацетилхолина в дозе 40 мкг/кг (патент №2301015 от 20.06.2007 г. (Бюл. №17).

При статистической обработке данных рассчитывается среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считаются достоверными при р<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Блокада NO-синтазы, вызванная 7-дневным введением L-NAME беременным крысам, приводила к нарушению взаимоотношений вазодилати-рующих и вазоконстрикторных механизмов регуляции сосудистого тонуса, о чем свидетельствуют результаты сосудистых проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин) и эндотелийнезависимое (нитропруссид натрия) расслабление сосудов и увеличение КЭД с 1,28±0,23 у интактных беременных животных до 3,06±0,32 (р<0,05). Длительное, в течение 7 суток, ежедневное внутрижелудочное (через зонд) введение азитромицина (30 мг/кг) на фоне ADMA-подобной модели гестоза у беременных крыс приводило к достоверному снижению КЭД до 1,82±0,09, что достоверно меньше, чем в группе животных с введением L-NAME (р<0,05). Артериальное давление у интактных животных составляло: систолическое (САД) - 125,0±6,3 мм. рт.ст., диастолическое (ДАД) - 82,0±5,8 мм. рт. ст. При введении L-NAME происходило увеличение артериального давления до 183,1±9,4 мм. рт. ст. и 136,7±7,4 мм. рт.ст. соответственно. Введение азитромицина на фоне L-NAME снижало артериальное давление до 150,5±2,3 мм. рт.ст. и 107,7±4,8 мм. рт.ст. соответственно (р<0,05).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о выраженной фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции в условиях воспроизводимой ADMA-подобной модели гестоза у беременных крыс азитромицином.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных. Способ включает воспроизведение модели гестоза у крыс линии Wistar ежедневным в течение 7 дней внутрибрюшинным введением L-нитроаргининметилового эфира в дозе 25 мг/кг. После чего на фоне данной модели с 14 по 20 день беременности вводят внутрижелудочно азитромицин в дозе 30 мг/кг однократно в сутки. Способ обеспечивает выраженную коррекцию эндотелиальной дисфункции в особых условиях патогенеза этого состояния у беременных самок при дополнительном устранении остро возникающих инфекционных заболеваний или обострения хронически протекающих инфекционных процессов, которые также могут приводить к формированию гестоза. 1 пр.

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции азитромицином при ADMA-подобной модели гестоза в эксперименте, включающий воспроизведение модели гестоза у крыс линии Wistar ежедневным в течение 7 дней внутрибрюшинным введением L-нитро-аргинин-метилового эфира в дозе 25 мг/кг, отличающийся тем, что на фоне данной модели с 14 по 20 день беременности вводят внутрижелудочно азитромицин в дозе 30 мг/кг однократно в сутки.