СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКУИИ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИМ ПРЕКОНДИЦИОНИРОВАНИЕМ НИКОРАНДИЛОМ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 2015 года по МПК A61K31/455 G09B23/28 A61P9/14 A61P15/16 

Описание патента на изобретение RU2543359C1

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных и связанной с этим нарушением микроциркуляции в плаценте.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных животных с помощью дистантного ишемического прекондиционирования, согласно описанию патента (RU №2462765, публ. 27.09.2012 г., бюл. №27 - 4 с.), включающему коррекцию моделируемой патологии ежедневно, с 10 по 20 сутки беременности, воспроизведением дистантного прекондиционирования путем 10-минутного пережатия бедренной артерии на уровне верхней трети бедра, с последующей реперфузией.

Основным недостатком способа является то, что первая фаза защитного эффекта длится до 4 часов. Вторая фаза защитного эффекта по данным различных авторов хоть и имеет длительность до 24 часов, но значительно уступает первой по своему эффекту. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели патологии у беременных животных с использованием дистантного ишемического прекондиционирования неудовлетворительны.

Кроме этого, воспроизведение дистантного ишемического прекондиционирования неудобно (вызывает болевые ощущения, требует специальное оборудование и навыки) и потенциально небезопасно (существует риск тромботических осложнений и повреждения венозной стенки).

Задачей изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели гестоза, включающей воспроизведение фармакологического прекондиционирования, обладающего более длительным противоишемическим действием, более удобным в использовании, менее опасным.

Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции, включающий использование в качестве фармакологического прекондиционирования препарата никорандила.

Задача достигается тем, что на фоне моделирования гестоза в эксперименте внутрибрюшинным введением беременным самкам крыс линии Wistar в течение 7 суток (с 14 по 20 день беременности) ADMA-подобного блокатора эндотелиальной NO-синтазы - N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг проводится коррекция эндотелиальной дисфункции с помощью фармакологического прекондиционирования, путем введения внутрижелудочно (через зонд) никорандила в дозе 10 мг/кг 2 раза в сутки (с 14 по 20 день беременности). Это приводит к выраженной коррекции эндотелиальной дисфункции при моделируемой патологии.

Одной из конечных точек ишемического и фармакологического прекондиционирования, обуславливающего его противоишемический эффект, является активация АТФ-зависимых К+ каналов. Поэтому для подтверждения роли фармакологического прекондиционирования в коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобном гестозе в эксперимент введена группа беременных самок, которым в течение 7 суток (с 14 по 20 день беременности) за 45 минут до введения внутрижелудочно никорандила также 2 раза в сутки вводился внутрижелудочно неселективный блокатор АТФ-зависимых К+глибенкламид в дозе 50 мг/кг. Это приводило к практически полной отмене положительных эффектов никорондила, тем самым подтверждая версию о том, что коррекция нарушений происходит за счет его прекондиционирующих свойств.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых беременных крысах самках линии Wistar массой 250-300 г сроком беременности 14 дней. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут в течение 7 дней (с 14 по 20 день беременности). Никорандил вводится внутрижелудчно в дозе 10 мг/кг 2 раза в сутки в течение 7 дней (с 14 по 20 день беременности). Глибенкламид вводится внутрижелудчно в дозе 50 мг/кг 2 раза в сутки в течение 7 дней (с 14 по 20 день беременности) за 45 минут перед никорондилом.

На 8 день от начала эксперимента (21 день беременности, через 14 часов после последнего введения никорондила) под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) вводят катетер в правую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Проводят сосудистые пробы на эндотелийзависимую вазодилатацию (ЭЗВ)-внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, и эндотелийнезависимую вазодилатацию (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг с расчетом коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД) - патент №2301015 от 20.06.2007 г. (Бюл. №17).

Исследование микроциркуляции в плаценте проводили с помощью оборудования компании Biopac systems: полиграф MP 100 с модулем лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) LDf100C и датчиком TSD144. Регистрация результатов ЛДФ производилась программой Acqknowledge версии 3.8.1, значения микроциркуляции выражались в перфузионных единицах (ПЕ).

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Блокада NO-синтазы, вызванная 7-дневным (с 14 по 20 день беременности) введением L-NAME в дозе 25 мг/кг/сут беременным крысам, приводила к нарушению взаимоотношений вазодилатирующих и вазоконстрикторных механизмов регуляции сосудистого тонуса, о чем свидетельствуют результаты сосудистых проб на эндотелийзависимое расслабление (ацетилхолин) и эндотелийнезависимое (нитропруссид натрия) и увеличение КЭД с 1,28±0,23 у интактных беременных животных до 3,06±0,32* (р<0,05). Длительное, в течение 7 суток (с 14 по 20 день беременности), ежедневное внутрижелудочное введение никорандила (10 мг/кг) 2 раза в сутки на фоне ADMA-подобной модели гестоза у беременных крыс приводило к достоверному снижению КЭД до 1,95±0,13, что статистически меньше, чем в группе животных с введением L-NAME (p<0,05).

Введение L-NAME также приводила к нарушению микроциркуляции в плаценте, о чем свидетельствует снижение ее величины с 425,90±39,55 ПЕ у интактных беременных животных до 210,00±21,80 ПЕ (p<0,05). Длительное, в течение 7 суток, ежедневное внутрижелудочное введение никорандила (10 мг/кг) 2 раза в сутки на фоне ADMA-подобной модели гестоза у беременных крыс приводило к достоверному повышению уровня микроциркуляции в плаценте до 394,20±19,00 ПЕ, что выше, чем у животных в группе с введением L-NAME (р<0,05).

Введение глибенкламида в дозе 50 мг/кг 2 раза в сутки в течение 7 дней (с 14 по 20 день беременности) за 45 минут перед никорондилом приводило к увеличению КЭД до 2,8±0,2 и снижению микроциркуляции в плаценте до 279,1±10,5 ПЕ, что статистически не отличалось от группы нелеченых животных с введением L-NAME.

Таким образом, снижение КЭД и повышение микроциркуляции в плаценте убедительно свидетельствуют о выраженной коррекции эндотелиальной дисфункциии никорандилом в условиях воспроизводимой нами ADMA-подобной модели гестоза у беременных крыс, а отмена его эффектов глибенкламидом - о ключевой роли в их реализации прекондиционирующего компонента этого препарата.

Никорандил - производное никотинамида, уникальный препарат с двойным механизмом действия, обладающий свойствами активаторов АТФ-зависимых К+ каналов (активатор билогических процессов прекондиционирования) и нитратов, индуцирующий продукцию оксида азота (NO). В медицинской практике никорандил используется в качестве донатора NO. Как донатор NO никорандил действует 12 часов, поэтому фармакологические препараты на его основе вводятся 2 раза в сутки. Биологические процессы, протекающие при прекондиционировании, имеют более длительное течение. Проводя исследования через 14 часов после последнего введения никорандила, мы тем самым исключали его действие как донатора NO.

Активируя митохондриальные АТФ-зависимые К+ каналы, никорандил индуцирует вход ионов К+ в митохондриальный матрикс, что вызывает деполяризацию внутренней митохондриальной мембраны. Это, в свою очередь, способствует снижению перегрузки митохондрий ионами Са2+ во время ишемии, уменьшению их набухания и ведет к продукции сублетальных уровней активных форм кислорода (ROS). Это приводит к уменьшению расходования АТФ. Снижение уровня ишемии приводит к уменьшению ответного образования некоторых гуморальных факторов: рецептор-1 растворимого фактора роста эндотелия сосудов (VEGf) (sflt-1), свободные радикалы, аутоантителорецептор ангиотензина II (тип 1) (АТ1-АА) и цитокины (фактор некроза опухоли (TNf-α)) и интерлейкин-1 (IL-1), вызывающих эндотелиальную дисфункцию.

Похожие патенты RU2543359C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЯ МИКРОЦИРКУЛЯЦИИ В ПЛАЦЕНТЕ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА 2011
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Полянская Оксана Сергеевна
  • Корокина Лилия Викторовна
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Гуреева Елена Геннадьевна
  • Кочкаров Владимир Исхакович
  • Бондаренко Евгения Валерьевна
  • Даниленко Людмила Михайловна
  • Жернаков Евгений Владиславович
  • Головченко Илья Олегович
  • Хадиева Таисия Абдуладировна
  • Пахомов Сергей Петрович
  • Денисюк Татьяна Алексеевна
  • Котельникова Лилия Викторовна
  • Алехин Сергей Александрович
  • Алехина Валерия Валерьевна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Белоус Александр Сергеевич
  • Цыбульский Игорь Валерьевич
RU2460148C1
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 2012
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Кочкаров Владимир Исхакович
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Арустамова Анна Александровна
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Полянская Оксана Сергеевна
  • Жернакова Нина Ивановна
  • Цыбульский Игорь Валерьевич
  • Алехин Сергей Александрович
  • Колесник Инга Михайловна
RU2507594C2
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ ДИСТАНТНЫМ ПРЕКОНДИЦИОНИРОВАНИЕМ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА 2011
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Полянская Оксана Сергеевна
  • Корокина Лилия Викторовна
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Гуреева Елена Геннадьевна
  • Кочкаров Владимир Исхакович
  • Бондаренко Евгения Валерьевна
  • Даниленко Людмила Михайловна
  • Жернаков Евгений Владиславович
  • Головченко Илья Олегович
  • Хадиева Таисия Абдуладировна
  • Пахомов Сергей Петрович
  • Денисюк Татьяна Алексеевна
  • Котельникова Лилия Викторовна
  • Алехин Сергей Александрович
  • Алехина Валерия Валерьевна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Белоус Александр Сергеевич
  • Цыбульский Игорь Валерьевич
RU2462765C1
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ АЗИТРОМИЦИНОМ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 2012
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Кочкаров Владимир Исхакович
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Арустамова Анна Александровна
  • Жернаков Евгений Владиславович
  • Головченко Игорь Олегович
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Полянская Оксана Сергеевна
  • Цыбульский Игорь Валерьевич
  • Мостовой Александр Сергеевич
RU2507595C2
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ ПОЛИВИТАМИННО-МИНЕРАЛЬНЫМ КОМПЛЕКСОМ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 2011
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Полянская Оксана Сергеевна
  • Артюшкова Елена Борисовна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Белоус Александр Сергеевич
  • Цыбульский Игорь Валерьевич
  • Котельникова Лилия Викторовна
  • Денисюк Татьяна Алексеевна
  • Терехова Елена Геннадьевна
  • Бабко Анна Владимировна
  • Алехин Сергей Александрович
  • Алехина Валерия Валерьевна
  • Мостовой Александр Сергеевич
  • Лебедев Кирилл Александрович
  • Старосельцева Ольга Александровна
  • Жуков Сергей Владимирович
  • Каплин Антон Николаевич
RU2460149C1
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ГЕСТОЗА ПРЕПАРАТОМ ТАУРИН 2017
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Покровская Татьяна Григорьвна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Хадиева Таисия Абдулкадировна
  • Костина Дарья Александровна
  • Якушев Владимир Иванович
  • Довгань Антон Павлович
RU2672475C2
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЯ МИКРОЦИРКУЛЯЦИИ В ПЛАЦЕНТЕ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 2010
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Барсук Анна Александровна
  • Проскурякова Елена Витальевна
  • Лазарева Галина Анатольевна
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Полянская Оксана Сергеевна
  • Гуреева Елена Геннадиевна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Белоус Александр Сергеевич
  • Цыбульский Игорь Валерьевич
  • Даниленко Людмила Михайловна
  • Кочкаров Владимир Исхакович
  • Новиков Олег Олегович
RU2432618C1
СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ГЕСТОЗА ПРЕПАРАТОМ АДЕМЕТИОНИН 2017
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Хадиева Таисия Абдулкадировна
  • Костина Дарья Александровна
  • Якушев Владимир Иванович
  • Довгань Антон Павлович
RU2655100C1
Способ коррекции эндотелиальной дисфункции субстанцией 3-гидрокси-2-этил-6-метилпиридиния никотинат при ADMA-подобной модели преэклампсии 2020
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Юракова Алеся Викторовна
  • Голубев Иван Владимирович
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Пересыпкина Анна Александровна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Победа Анна Сергеевна
  • Якушев Владимир Иванович
  • Корокина Лилия Викторовна
  • Лазарева Галина Анатольевна
  • Гуреева Елена Геннадиевна
  • Черноморцева Елена Станиславовна
  • Коновалова Елена Анатольевна
  • Затолокина Мария Алексеевна
  • Жунусов Никита Сергеевич
RU2735903C1
Способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели преэклампсии с использованием детралекса 2019
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Локтева Татьяна Ивановна
  • Анцифероа Оксана Евгеньевна
  • Юракова Алеся Викторовна
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Пересыпкина Анна Александровна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Победа Анна Сергеевна
  • Якушев Владимир Иванович
  • Корокина Лилия Викторовна
  • Лазарева Галина Анатольевна
  • Гуреева Елена Геннадиевна
  • Жилинкова Людмила Анатольевна
  • Затолокина Мария Алексеевна
  • Щуровская Кристина Владимировна
  • Колесниченко Павел Дмитриевич
  • Пахомов Сергей Петрович
  • Северинова Ольга Владимировна
  • Голубев Иван Владимирович
  • Ивахно Елена Николаевна
  • Поветка Елена Николаевна
  • Гуреева Анастасия Владимировна
  • Вайн Дарья Сергеевна
  • Кудрявцев Константин Викторович
RU2723453C1

Реферат патента 2015 года СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКУИИ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИМ ПРЕКОНДИЦИОНИРОВАНИЕМ НИКОРАНДИЛОМ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Изобретение относится к области медицины, предназначено для коррекции эндотелиальной дисфункции у беременных и связанной с этим нарушением микроциркуляции в плаценте. Способ включает воспроизведение модели гестоза в эксперименте внутрибрюшинным введением беременным самкам крыс линии Wistar в течение 7 суток с 14 по 20 день беременности ADMA-подобного блокатора эндотелиальной NO-синтазы - N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг. На фоне этого ежедневно в течение 7 суток с 14 по 20 день беременности вводят внутрижелудочно через зонд никорандил в дозе 10 мг/кг 2 раза в сутки. Заявленный способ позволяет эффективно корректировать эндотелиальную дисфункцию, обладает более длительным противоишемическим действием, удобен и безопасен. 1 пр.

Формула изобретения RU 2 543 359 C1

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции при ADMA-подобной модели гестоза, включающий воспроизведение модели гестоза в эксперименте внутрибрюшинным введением беременным самкам крыс линии Wistar в течение 7 суток с 14 по 20 день беременности ADMA-подобного блокатора эндотелиальной NO-синтазы - N-нитро-L-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг, отличающийся тем, что на фоне этого ежедневно в течение 7 суток с 14 по 20 день беременности вводят внутрижелудочно через зонд никорандил в дозе 10 мг/кг 2 раза в сутки.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2015 года RU2543359C1

СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ РЕКОМБИНАНТНЫМ ЭРИТРОПОЭТИНОМ ПРИ ADMA-ПОДОБНОЙ МОДЕЛИ ГЕСТОЗА 2011
  • Покровский Михаил Владимирович
  • Гуреев Владимир Владимирович
  • Полянская Оксана Сергеевна
  • Мальцева Наталья Викторовна
  • Корокина Лилия Викторовна
  • Покровская Татьяна Григорьевна
  • Гуреева Елена Геннадьевна
  • Кочкаров Владимир Исхакович
  • Бондаренко Евгения Валерьевна
  • Даниленко Людмила Михайловна
  • Жернаков Евгений Владиславович
  • Головченко Илья Олегович
  • Хадиева Таисия Абдуладировна
  • Пахомов Сергей Петрович
  • Денисюк Татьяна Алексеевна
  • Котельникова Лилия Викторовна
  • Алехин Сергей Александрович
  • Алехина Валерия Валерьевна
  • Корокин Михаил Викторович
  • Гудырев Олег Сергеевич
  • Белоус Александр Сергеевич
  • Цыбульский Игорь Валерьевич
RU2462766C1
ПОКРОВСКИЙ М.В
и др
Фармакологическая коррекция L-аргинином "ADMA-ENOS-ассоциированных мишеней" при экспериментальной преэклампсии
Кубанский научный медицинский вестник, 2010, N1, с.85-92
WO2004008946 A2, 29.01.2004

RU 2 543 359 C1

Авторы

Гуреев Владимир Владимирович

Покровский Михаил Владимирович

Молчанова Ольга Викторовна

Кочкаров Владимир Исхакович

Покровская Татьяна Григорьевна

Пересыпкина Анна Александровна

Корокин Михаил Викторович

Гудырев Олег Сергеевич

Шабельникова Анна Сергеевна

Якушев Владимир Иванович

Корокина Лилия Викторовна

Лазарева Галина Анатольевна

Ступакова Елена Геннадьевна

Гуреева Елена Геннадиевна

Даты

2015-02-27Публикация

2014-03-11Подача