СПОСОБ УВЕЛИЧЕНИЯ ВЫЖИВАЕМОСТИ КОЖНОГО ЛОСКУТА В УСЛОВИЯХ РЕДУЦИРОВАННОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ РЕСВЕРАТРОЛОМ Российский патент 2014 года по МПК G09B23/28 A61K31/05 A61P9/10 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии и экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции ишемии.

Известен способ увеличения выживаемости кожного лоскута на ножке дистантным ишемическим прекондиционированием RU 2429547 C1. Недостатком его является то, что метод не лишен потенциальной опасности ишемических эпизодов для патологически измененных тканей и применим преимущественно на здоровом организме.

Наиболее близким к заявленному решению является «Способ фармакологической коррекции показателей выживаемости ишемизированных тканей в условиях редуцированного кровообращения» (RU 2438190 C1). Коррекция ишемии осуществляется рекомбинантным эритропоэтином. Преимуществом данного способа является то, что активация процесса прекондиционирования осуществляется фармакологическим препаратом. То есть отсутствует эпизод ишемии, который может оказывать повреждающее действие на ткань. Однако недостатком данного метода является то, в качестве инициатора процесса прекондиционирования выбран эритропоэтин. Многочисленные исследователи склонны именно его рассматривать гуморальным агентом прекондиционирования. Однако это гормональный белковый препарат и существует ряд противопоказаний для его применения, а именно артериальная гипертензия, онкологические заболевания. Вот почему актуально исследование лекарственных препаратов, способных активировать различные этапы процесса прекондиционирования.

Техническим результатом изобретения является разработка эффективного способа увеличения выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения, включающего применение фармакологического препарата, растительного происхождения, способного инициировать процесс прекондиционирования, не токсичного, с минимальным количеством противопоказаний.

Технический результат достигается тем, что при моделировании кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения на вторые сутки эксперимента с первых суток каждые 46 часов эксперимента лабораторному животному внутрижелудочно вводят ресвератрол в суточной дозе 2,0 мг/кг.

Основным преимуществом предлагаемого способа является отсутствие побочных эффектов (кроме индивидуальной нерпереносимости) фармакологического агента, так как он относится к классу фитоалексинов. В природе существует в виде гликозида и двух цис- и транс- стереоизомеров агликона. Обе стереоформы (цис- и трас-) содержатся в корне горца гребенчатого (Polygonum cuspidatum), а трансформа обнаружена в кожице плодов винограда (Vitis vinifera L.) и в арахисе. В более высокой концентрации содержится в красном вине. К настоящему времени известно, что он содержится в более чем 70 растениях. Это, разные виды смородины, ревеня, арахиса сосны и др. Изученные механизмы кардиопротекции ресвератролом указывают на способность его инициировать процесс прекондиционирования и позволяют изучать возможность универсального использования его в хирургии как препарата для фармакологического прекондиционирования.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводятся на белых крысах линии Wistar массой 220-250 г. Моделирование кожного лоскута осуществляется под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг веса внутрибрюшинно) на вторые сутки эксперимента. Отступив 1 см от мечевидного отростка по белой линии живота, предварительно наметив по трафарету размер, выкраивают кожный лоскут: 1 см - основание, 4 см - длина (сохранив питающий сосуд), который изолируется в полиэтиленовый пакет, края кожи ушиваются непрерывным швом. Выживаемость кожного лоскута оценивается на шестые сутки эксперимента, посредством измерения площади выжившей ткани лоскута в группе животных с моделированием кожного лоскута и в группе с моделированием кожного лоскута и введением ресвератрола.

Ресвератрол вводится внутрижелудочно в суточной дозе 2,0 мг/кг с первых суток каждые 46 часов эксперимента.

При статистической обработке данных рассчитывается среднее значение, величина стандартного отклонения. Различия считаются достоверными при p<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ.

Опыты проводили на белых крысах самцах линии Wistar массой 220-250 г. Экспериментальные животные были разделены на следующие группы:

1. Контрольная (n=10).

2. С применением ресвератрола (n=10).

Животным обеих групп моделировали кожный лоскут на вторые сутки эксперимента. Под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг веса внутрибрюшинно), отступив 1 см от мечевидного отростка по белой линии живота, предварительно наметив по трафарету размер, выкраивали кожный лоскут: 1 см - основание, 4 см - длина (сохранив питающий сосуд), который изолировали в полиэтиленовый пакет, края кожи ушивали непрерывным швом. Животным второй группы внутрижелудочно вводили ресвератрол в суточной дозе 2,0 мг/кг с первых суток каждые 46 часов эксперимента.

Оценку выживаемости кожного лоскута проводили на шестые сутки эксперимента, измеряя площадь здоровой ткани.

Результаты оценки выживаемости кожного лоскута представлены в таблице 1.

Введение экспериментальным животным ресвератрола способствовало достоверному (p<0,05) увеличению площади выжившей ткани лоскута.

Таблица 1 Показатели выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения на 6-е сутки эксперимента (5-е сутки после моделирования) (М±m) Группа (n=10) Площадь здоровой ткани лоскута в см % Моделирование кожного лоскута (контрольная) 1,6±0,02 40 Моделирование кожного лоскута+ресвератрол 2,9±0,18* 73 Примечание. * - p≤0,05 при сравнении с контрольной группой; ресвератрол внутрижелудочно, в суточной дозе 2,0 мг/кг с первых суток каждые 46 часов эксперимента

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать увеличение выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения, моделируемого на вторые сутки эксперимента, при внутрижелудочном введении экспериментальному животному ресвератрола в суточной дозе 2,0 мг/кг с первых суток каждые 46 часов эксперимента.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для изучения средств, предназначенных для коррекции ишемии. Для этого лабораторным животным моделируют кожный лоскут на вторые сутки эксперимента. Ресвератрол вводят внутрижелудочно в суточной дозе 2,0 мг/кг с первых суток эксперимента каждые 46 часов. Способ, являясь нетоксичным с минимальным числом противопоказаний, обеспечивает увеличение выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения за счет активации процесса прекондиционирования. 1 табл., 1 пр.

Способ увеличения выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения, включающий моделирование кожного лоскута у экспериментального животного и введение фармакологического средства, отличающийся тем, что моделирование проводят на вторые сутки эксперимента, а в качестве фармакологического средства используют ресвератрол, который вводят животному внутрижелудочно в суточной дозе 2,0 мг/кг с первых суток каждые 46 часов эксперимента.