СПОСОБ ИММУНОПРОФИЛАКТИКИ МАССОВЫХ ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ТЕЛЯТ Российский патент 2014 года по МПК A61K39/295 

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, касается способа специфической профилактики, в частности иммунопрофилактики, и может быть использовано для предотвращения массовых болезней телят вирусной этиологии.

К массовым вирусным заболеваниям крупного рогатого скота относятся инфекционный ринотрахеит, парагрипп-3, вирусная диарея, респираторно-синцитиальная, ротавирусная, коронавирусная инфекции. В силу различной органотропности этих вирусов вызываемые ими заболевания, как правило, имеют различное клиническое проявление. Вирусы инфекционного ринотрахеита (ИРТ), вирусной диареи (ВД), респираторно-синцитиальной (PC) инфекции, парагриппа-3 (ПГ-3) являются ведущей этиологической причиной респираторных болезней крупного рогатого скота, а вирусы диареи (ВД) крупного рогатого скота, рота- (РВ) и коронавирусы (KB) поражают преимущественно органы пищеварения. Установлено, что в большинстве случаев указанные возбудители редко вызывают заболевание самостоятельно, чаще всего циркулируют в стаде в ассоциации, вызывая появление смешанных инфекций с многообразием форм клинического проявления. Инфицированность поголовья данными вирусами может достигать 100%, гибель и вынужденная выбраковка - 15-30% и более. Ассоциация респираторных вирусов и микроорганизмов приводит к снижению иммунологической реактивности организма телят и возникновению вторичного иммунодефицитного состояния. Наиболее опасным является вирусоносительство в критические возрастные периоды жизни, когда колостральный иммунитет находится на стадии затухания, а иммунная система еще не сформирована (Сюрин В.Н., 1991-1998; Тулева Н.П., 2004-2011). Как правило, в это время снижаются как биохимические, так и иммунологические показатели. Проведенные нами исследования сыворотки крови телят 19-31-дневного возраста в хозяйстве, неблагополучном по респираторным болезням, показали снижение иммунологической реактивности организма животных в пределах 15-20%. Так бактерицидная активность сыворотки крови в подопытной и контрольной группах составила: 29,1±1,4% и 31,3±1,2%; лизоцимная - 11,3±0,4% и 13,01±0,5%; концентрация общего белка - 51,3±1,2 г/л и 50,1±1,2 г/л соответственно.

Вирусы-возбудители респираторных инфекций крупного рогатого скота каждый в отдельности, но особенно в ассоциациях, в свою очередь угнетают отдельные звенья иммунной системы как клеточные, так и гуморальные. При переболевании животных вирусной диареей поражается в основном клеточное звено иммунитета - снижается количество и функциональная активность лимфоцитов, угнетается биосинтез антител, снижается концентрация общего белка в сыворотке крови. При переболевании ассоциативной инфекцией диарея и инфекционный ринотрахеит, диарея и парагрипп-3 снижается биосинтез антител к данным возбудителям. Кроме того, вирус диареи крупного рогатого скота репродуцируется в лейкоцитах - лимфоцитах, моноцитах, нейтрофилах, тем самым вызывая лейкопению. Вирус инфекционного ринотрахеита, репродуцирующийся в организме телят, угнетает функцию В-лимфоцитов, снижает активность альвеолярных макрофагов. Наряду с угнетением иммунной системы поражаются чувствительные клетки дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта, которые являются хорошим субстратом для размножения условно-патогенной микрофлоры. Все вышеуказанные вирусы у молодняка крупного рогатого скота вызывают пневмоэнтериты, а у взрослых животных - поражение репродуктивных органов.

Профилактика вирусных болезней новорожденных телят в возрасте девятнадцати-тридцати одного дня имеет свои характерные особенности. В этот период колостральный иммунитет находится на стадии затухания. Наблюдается снижение, как клеточного, так и гуморального иммунитета, а собственный еще не развивается. У таких животных клинические признаки болезни не проявляются, а выделение возбудителей происходит. Вирусы в большой концентрации (4,5-5,0 log ТЦД 50/мл) выделяются из носовой слизи, содержимого конъюнктивального мешка, слюны и мочи. В связи с этим наблюдается широкое распространение возбудителей и массовое перезаражение (Сюрин В.Н. и др., 1991-1998).

Известны способы иммунопрофилактики вирусных респираторных болезней телят с применением моновалентных (живых и инактивированных) или поливалентных вакцин [1]. Известные способы иммунопрофилактики основаны на комплексных мероприятиях, включающих интраназальную прививку телят в первые недели жизни, их ревакцинацию (парентерально) через 3-4 месяца, а также вакцинацию коров [2]. Но при сложности осуществления известные способы малоэффективны, что обусловлено наличием у телят колостральных антител, которые блокируют антигены вводимых вакцин, тем самым блокируя формирование иммунитета и усугубляя инфекционный процесс. Живые вакцины, кроме того, обладают иммунодепрессивным действием и могут вызывать поствакцинальную болезнь.

Известен также способ иммунопрофилактики респираторных болезней телят с применением иммунной сыворотки крови животных-реконвалесцентов. Сыворотка крови животных-реконвалесцентов представляет собой препарат, содержащий антитела к возбудителям, формирующим вирусно-бактериальный фон животноводческого комплекса, однако набор антител сыворотки крови животных-реконвалесцентов и их титр не всегда соответствуют полному набору антигенной структуры «местной микрофлоры», а при изготовлении препарата и сложности контроля не обеспечиваются стабильность и высокое качество готовых форм, что снижает эффективность терапевтического вмешательства с применением сыворотки крови животных-реконвалесцентов. Кроме того, невысокая варьирующая активность сыворотки крови животных-реконвалесцентов требует смешивания сывороток различных доноров с применением максимально высоких доз (не менее 1,0 мл на 1 кг живой массы), что усложняет осуществление известного способа. Кроме того, пассивная иммунизация специфическими гипериммунными сыворотками легко может быть преодолена вирусами с высокой вирулентностью.

Для повышения эффективности иммунопрофилактики в комплекс лечебно-профилактических мероприятий включают препараты, являющиеся стимуляторами иммунной системы, снимающие иммунодепрессивное состояние и нормализующие клеточный и гуморальный иммунитет до уровня здоровых животных.

Однако использование иммуностимуляторов, иммунокорректоров, вызывающих активацию T- и B-клеточного иммунитета, представляет серьезную проблему. При их длительном применении возможна переактивация клеток иммунной системы (Агеенко А.И., 1994).

Наиболее предпочтительными могут быть лекарственные растения, которые являются наилучшими адаптогенами. Механизм действия адаптогенов сводится не только к улучшению энергетического обмена, нормализации функций центральной нервной системы и положительному влиянию на эндокринный статус, но и к активизации иммунной системы - повышение выработки интерферонов, количества и активности иммунокомпетентных клеток, фагоцитоза (Н.Д. Придыбайло, 1991; А.А. Воробьев, 1999; Н.Н. Гугушвили, 2001). В медицинской практике широко используются: корень женьшеня и его препараты (повышают устойчивость организма к инфекциям и другим неблагоприятным воздействиям); элеутерококк и его препараты (повышают уровень иммунитета); радиола розовая (при профилактическом применении повышает устойчивость к инфекциям); трава очитка едкого (стимулирует регенерацию); алоэ (повышает защитные силы организма); чага - березовый гриб (повышает защитные силы организма, стимулирует обменные процессы); шиповник (усиливает фагоцитарную активность лейкоцитов, повышает устойчивость к инфекциям), эхинацея пурпурная (повышает уровень иммунитета) [3]. Перспективными являются комплексные иммунотропные фитопрепараты с направленным действием - противовирусным, антимикробным и противовоспалительным, например, лечебно-профилактическое средство, представляющее собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой [4].

В качестве предпочтительного аналога нами рассматривается способ иммунопрофилактики респираторных болезней телят, включающий иммунизацию клинически здоровых телят инъекциями ассоциированной вакцины против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи-болезни слизистых, и применение внутрь фитопрепарата, представляющего собой 70% спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой в виде 7-8% водного раствора [5]. Известный способ обеспечивает защиту телят со сформировавшейся иммунной системой, риск же развития инфекционных заболеваний особенно высок в первые недели жизни.

Цель изобретения - повышение эффективности профилактики массовых болезней телят вирусной этиологии.

Поставленная цель достигается последовательными пассивной (с применением гипериммунной сыворотки животных-доноров) и активной (с применением инактивированной вакцины) иммунизациями по оригинальной схеме, причем иммунизацию проводят на фоне нормализации физиологических параметров гомеостаза организма иммунотропным средством на основе растительного сырья.

Способ осуществляется следующим образом.

Клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста иммунизируют трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, с интервалом в 21 день в дозах по наставлению. При проведении иммунизации однократно за 20-30 минут до кормления в течение 15 дней применяют комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, в виде 7% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного.

Эффективность способа профилактики респираторных болезней телят полиэтиологичной природы определяли в научно-производственных опытах в условиях хозяйств, длительно неблагополучных по респираторным болезням, что обусловлено воздействием на организм ассоциаций вирусов, патогенной и условно-патогенной микрофлоры на фоне нарушения условий содержания и кормления стельных коров и телят. В результате эпизоотологического обследования и клинического осмотра животных установлено, что первые признаки респираторных болезней у телят появлялись, начиная с 30-дневного возраста, и характеризовались массовостью, высоким уровнем заболеваемости (80-100%) и летальности (35-40%). Респираторные болезни клинически проявлялись повышением температуры тела до 40,5-41°C, снижением или отсутствием аппетита, общим угнетением, серозно-слизистыми истечениями из носовой полости, учащенным дыханием, кашлем, конъюнктивитом, покраснением носового зеркальца у 60% животных. На вскрытии павших или вынужденно убитых с диагностической целью телят обнаружили отечность слизистых оболочек верхних дыхательных путей, гиперемию слизистой оболочки носовой полости, сильную гиперемию слизистой оболочки гортани и трахеи, воспаление преимущественно верхних и средних долей легких, увеличение и гиперемию средостенных, подчелюстных, перибронхиальных лимфатических узлов. Вирусологическими исследованиями подтверждена этиологическая роль вирусов парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синтициального вируса, рота- и коронавирусов.

Пример 1. В условиях хозяйства, длительно неблагополучного по вирусным заболеваниям телят, протекающим как смешанная инфекция, вызванная вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальным, рота- и коронавирусами (заболеваемость - 60,0%, летальность - 25%), по принципу аналогов формировали 4 группы клинически здоровых телят 20-дневного возраста. Телят первой группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, причем телятам в течение 15 дней перед пассивной (с применением гипериммунной сыворотки животных-доноров) и перед активной (с применением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак») иммунизациями однократно применяли комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, в виде 7% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного. Телят второй группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. Телят третьей группы после достижения ими 30-дневного возраста иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, причем телятам в течение 15 дней перед активной (с применением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак») иммунизации однократно применяли внутрь комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, виде 7% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного. Телят четвертой группы после достижения ими 30-дневного возраста иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. За животными вели клиническое наблюдение, регистрировали количество заболевших животных и характер течения заболевания. Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1 Основные клинические показатели телят Показатели Группы телят 1-я группа: гипериммунная сыворотка + вакцина «Комбовак» + фитопрепарат 2-я группа: гипериммунная сыворотка + вакцина «Комбовак» 3-я группа: вакцина «Комбовак» + фитопрепарат 4-я группа: вакцина «Комбовак» Количество телят, гол. 28 28 24 26 Заболело: гол. (%) 1 (3,6) 3 (10,7) 3 (12,5) 7 (26,9) - вирусные желудочно-кишечные болезни (ЖКБ)   2 2 5 - респираторные болезни (РБ) 1 1 1 2 Форма переболевания:         - легкая 1 (РБ) 1 (ЖКБ) 1 (ЖКБ) 2 (ЖКБ), 1 (РБ) - тяжелая   2 (ЖКБ, РБ) 1 (ЖКБ), 1(РБ) 3 (ЖКБ), 1 (РБ) Профилактическая эффективность, % 96,4 89,3 87,5 73,1 Пало, гол. (%) - 2 (7,1) 2 (8,3) 4 (15,3) Сохранность, % 100,0 92,9 91,7 84,7 Среднесуточный прирост живой массы, г 929,0±21,0 745,0±19,2 628,0±17,4 622,0±18,0

Как видно из таблицы 1, заявляемый способ обеспечивал лучшую защиту телят от вирусных заболеваний, что подтверждалось снижением заболеваемости до 3,6% по сравнению с 10,7% (2-я группа), 12,5% (3-я группа) и 26,9% (4-я группа), увеличением сохранности до 100% по сравнению с 92,9% (2-я группа), 91,7% (3-я группа) и 84,7% (4-я группа) и повышением среднесуточного прироста живой массы на 14,7% по сравнению с группой 2, на 47,9% по сравнению с группой 3 и 49,3% по сравнению с группой 4, что свидетельствовало о нормализации физиологических параметров гомеостаза организма телят и достаточно высоком уровне развития иммунной системы, как основной составляющей резистентности организма к инфекционным заболеваниям и устойчивости к факторам внешней среды.

Пример 2. В условиях хозяйства, длительно неблагополучного по вирусным заболеваниям телят, протекающим как смешанная инфекция, вызванная вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальным, рота- и коронавирусами (заболеваемость - 80,0%, летальность - 30%), по принципу аналогов формировали 3 группы клинически здоровых телят 20-дневного возраста. Телят первой группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, причем телятам в течение 15 дней перед пассивной (с применением гипериммунной сыворотки животных-доноров) и перед активной (с применением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак») иммунизациями однократно применяли внутрь комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, в виде 7% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, в дозе 2,0 мл /кг живой массы животного. Телят второй группы после достижения ими 30-дневного возраста иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, причем телятам в течение 15 дней перед активной (с применением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак») иммунизацией однократно применяли внутрь комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, в виде 7% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного. Телят третьей группы после достижения ими 30-дневного возраста иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. За животными вели клиническое наблюдение, регистрировали количество заболевших животных и характер течения заболевания. Результаты оценивались комплексно по заболеваемости, тяжести течения болезни, иммунологическим показателям сыворотки крови телят. Взятие крови для иммунологических исследований проводили до начала, через 21 день после вакцинации и через 21 день после ревакцинации. В таблицах 2 и 3 приведены результаты проведенных исследований.

Таблица 2 Основные клинические показатели телят Показатели Группы телят 1-я группа: гипериммунная сыворотка + вакцина «Комбовак» + фитопрепарат 2-я группа: вакцина «Комбовак» + фитопрепарат 3-я группа: вакцина «Комбовак» Количество телят, гол. 38 32 30 Заболело: гол. (%) 1 (2,6) 3 (9,3) 8 (26,6) Форма переболевания:       - легкая 1 2 5 - тяжелая   1 3 Профилактическая эффективность, % 97,4 87,5 73,1 Пало, гол. (%)   2 (8,3) 4 (15,3) Сохранность, % 100,0 91,7 84,7 Среднесуточный прирост живой массы, г 748,0±20,1 627,0±25,4 612,0±22,0

Таблица 3 Иммунобиологические показатели телят Показатели Группы телят 1-я группа: гипериммунная сыворотка+вакцина «Комбовак»+фитопрепарат 2-я группа: вакцина «Комбовак»+фитопрепарат 3-я группа: вакцина «Комбовак» до вакцинации 21 день после вакцинации 21 день после ревакцинации до вакцинации 21 день после вакцинации 21 день после ревакцинации до вакцинации 21 день после вакцинации 21 день после ревакцинации Т-лимфоциты, % 27,1±0,9 29,0±0,8 35,5±0,9*** 22,0±1,0 26,1±1,2 28,6±0,9 22,3±1,0 23,8±0,5 26,0±0,6 Т-лимфоциты, 10⁹/л 1,9±0,1 1,5±0,07 2,7±0,1*** 1,5±0,1 1,9±0,2 2,1±0,2 1,5±0,1 1,5±0,08 1,8±0,2 В-лимфоциты, % 7,9±0,5 8,3±0,4 9,9±0,3* 6,5±0,5 7,9±0,2 8,9±0,6 7,4±0,5 8,3±0,4 8,9±0,3 В-лимфоциты, 10⁹/л 0,5±0,03 0,6±0,03 1,1±0,01** 0,42±0,01 0,83±0,01 0,8±0,04 0,5±0,04 0,5±0,04 0,6±0,01* Функциональная активность нейтрофилов крови, %                   - спонтанный тест 7,9±0,3 8,2±0,5 9,8±0,3*** 4,2±0,1 5,7±0,2 9,1±0,7 7,4±0,3 7,1±0,4 7,8±0,3 - индуцированный тест 27,6±1,0 30,4±0,8 36,6±0,7*** 16,2±1,1 20,1±1,2 28,1±0,5 23,3±0,7 26,4±0,7 28,6±0,5 Иммуноглобулины, мг/мл                   G 18,6±0,5 20,9±0,5 28,4±0,5 10,2±1,1 14,3±0,3 17,8±1,2 10,2±1,1 19,0±0,3 22,5±0,4 М 1,0±0,06 1,1±0,05 1,3±0,05 0,9±0,03 2,0±0,02 2,6±0,04 0,9±0,03 1,1±0,05 1,3±0,05 Лизоцимная активность сыворотки крови, % 2,6±0,01 3,0±0,1 3,7±0,1*** 2,4±0,03 2,7±0,09 3,2±0,1 2,2±0,05 2,5±0,09 3,0±0,1 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ИPT-3, log₂ 1,1±0,4 5,5±0,3 8,0±0,1*** 1,1±0,4 5,0±1,2 6,7±1,2 1,1±0,4 4,2±0,3 6,4±0,4 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ПГ-3, log₂ 1,3±0,7 7,4±0,2 8,8±0,2** 1,3±0,6 7,3±1,3 7,6±1,7 1,9±0,7 5,9±0,2 7,0±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ВД-BC, log₂ 1,6±0,4 7,9±0,05 10,9±0,1 2,0±0,3 7,8±1,3 9,6±1,4 1,8±0,4 5,8±0,05 8,2±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу PC, log₂ 1,0±0,4 6,7±0,4 7,7±0,4*** 1,2±0,8 6,1±0,1 6,8±0,3 1,2±0,8 5,9±0,4 6,4±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к ротавирусу, log₂ 2,0±0,4 7,3±0,2 10,0±0,2*** 1,8±0,4 6,2±0,3 8,6±0,1 1,8±0,4 6,0±0,2 8,0±0,3 Титр вируснейтрализующих антител к коронавирусу, log₂ 1,9±0,4 7,0±0,2 8,6±0,2*** 1,6±0,4 5,9±0,4 6,9±0,1 1,7±0,4 5,7±0,2 6,7±0,2 Примечание * - p<0,05; ** - p<0,02; *** - p<0.01; **** - p<0,001

Как видно из таблицы 3, у телят первой группы отмечалось выраженное повышение основных показателей иммунологической реактивности. Напряженность иммунитета у телят первой группы была выше, чем у телят второй и третьей групп, что выражалось в статистически достоверном приросте антител ко всем вирусам. Максимальный титр антител ко всем вирусам регистрировали через 21 день после ревакцинации. Этот показатель превышал соответствующие показатели до вакцинации: титр антител к вирусу инфекционного ринотрахеита - в 7,3 раза (первая группа), в 6 раз (вторая группа), в 5,8 раза (третья группа); титр антител к вирусу парагриппа-3 - в 6,7 раза (первая группа), в 5,8 раза (вторая группа), в 3,6 раза (третья группа); титр антител к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых - в 6,8 раза (первая группа), в 4,8 раза (вторя группа), в 4,6 раза (третья группа); титр антител к респираторно-синтициальному вирусу - в 7,7 раза (первая группа), в 5,6 раза (вторая группа), 5,3 раза (третья группа); титр антител к ротавирусу - в 5 раз (первая группа), в 4,8 раза (вторая группа), в 4,4 раза (третья группа); титр антител к коронавирусу - в 4,5 раза (первая группа), в 3,6 раза (вторая группа), в 3,9 раза (третья группа). Высокий уровень специфического иммунитета у телят первой группы обеспечивал высокий уровень защиты - 97,4% по сравнению с 87,3 и 73,1%. Сохранность телят повышалась до 100% по сравнению с 91,7 и 84,7%. Снижение заболеваемости свидетельствовало об усилении резистентности, что указывало на повышение адаптационного уровня. После выздоровления телята опытных групп хорошо развивались, у них восстанавливались реакции на внешние раздражители, они были подвижны и активны.

Пример 3. В условиях хозяйства, неблагополучного по вирусным заболеваниям телят, протекающим как смешанная инфекция, вызванная вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальным, рота- и коронавирусами (заболеваемость - 75,0%, летальность - 20%), по принципу аналогов формировали 3 группы клинически здоровых телят 20-дневного возраста. Телят первой группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, причем телятам в течение 15 дней перед пассивной (с применением гипериммунной сыворотки животных-доноров) и перед активной (с применением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак») иммунизациями однократно применяли внутрь комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, в виде 7% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного (заявляемый способ). Телят второй группы после достижения ими 30-дневного возраста иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, причем телятам в течение 15 дней перед активной (с применением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак») иммунизации однократно применяли 70% спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой в виде 7% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного (способ-аналог). Телят третьей группы после достижения ими 30-дневного возраста иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней (базовый способ). За животными вели клиническое наблюдение, регистрировали количество заболевших животных и характер течения заболевания. Результаты оценивались комплексно по заболеваемости, тяжести течения болезни, иммунологическим показателям сыворотки крови телят. Взятие крови для иммунологических исследований проводили до начала, через 21 день после вакцинации и 21 день после ревакцинации. В таблицах 4 и 5 приведены результаты проведенных исследований.

Таблица 4 Основные клинические показатели телят Показатели Группы телят 1-я группа: гипериммунная сыворотка + вакцина «Комбовак» + фитопрепарат (заявляемый способ) 2-я группа: вакцина «Комбовак» + фитопрепарат (способ-аналог) 3-я группа: вакцина «Комбовак» (базовый способ) Количество телят, гол. 28 32 30 Заболело: гол. (%) 1 (3.6) 2 (6,3) 6 (20,0) Форма переболевания:       - легкая   1 4 - тяжелая 1 1 2 Профилактическая эффективность, % 96,4 93,7 80,0 Пало, гол. (%) - 1 (3,1) 4 (13,3) Сохранность, % 100,0 96,9 86,7 Среднесуточный прирост живой массы, г 680,0±2,3 660,0±5,4 610,0±6,8

Таблица 5 Иммунологические показатели телят Показатели Группы телят 1-я группа: гипериммунная сыворотка+вакцина «Комбовак»+фитопрепарат (заявляемый способ) 2-я группа: вакцина «Комбовак»+фитопрепарат (способ-аналог) 3-я группа: вакцина «Комбовак» (базовый способ) до вакцинации Т-лимфоциты, % 24,1±0,9 22,0±1,0 22,3±1,0 Т-лимфоциты, 10⁹/л 1,9±0,1 1,5±0,1 1,5±0,1 В-лимфоциты, % 7,9±0,5 6,5±0,5 7,4±0,5 В-лимфоциты, 10⁹/л 0,5±0,03 0,42±0,01 0,5±0,04 Функциональная активность нейтрофилов крови, %       - спонтанный тест 7,9±0,3 7,2±0,1 7,4±0,3 - индуцированный тест 23,6±1,0 24,2±1,1 23,3±0,7 Иммуноглобулины, мг/мл       G 18,6±0,5 17,2±1,1 17,9±0,5 М 1,0±0,06 0,9±0,03 1,0±0,06 Лизоцимная активность сыворотки крови, % 2,2±0,01 2,4±0,04 2,2±0,05 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ИРТ-3, log₂ 1,1±0,4 1,1±0,4 1,1±0,4 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ПГ-3, log₂ 1,3±0,7 1,3±0,6 1,2±0,7 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ВД-BC, log₂ 1,6±0,4 1,6±0,3 1,8±0,4 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу PC, log₂ 1,0±0,4 1,2±0,6 1,2±0,8 Титр вируснейтрализующих антител к ротавирусу, log₂ 2,0±0,4 2,0±0,2 1,8±0,4 Титр вируснейтрализующих антител к коронавирусу, log₂ 1,9±0,4 1,8±0,2 1,7±0,4 21 день после вакцинации Т-лимфоциты, % 26,8±0,9 26,1±1,2 23,8±0,5 Т-лимфоциты, 10⁹/л 1,5±0,08 1,2±0,2 1,5±0,08 В-лимфоциты, % 8,2±0,4 7,9±0,2 8,3±0,4 В-лимфоциты, 10⁹/л 0,5±0,04 0,5±0,01 0,5±0,04 Функциональная активность нейтрофилов крови, %       - спонтанный тест 8,0±0,4 7,7±0,2 7,1±0,4 - индуцированный тест 30,4±0,8 28,1±1,2 26,4±0,7 Иммуноглобулины, мг/мл       G 19,8±0,6 14,3±0,3 19,0±0,3 М 1,6±0,05 1,3±0,02 1,1±0,05

Лизоцимная активность сыворотки крови, % 2,8±0,1 2,6±0,08 2,5±0,09 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ИРТ-3, log₂ 4,8±0,2 4,4±1,2 4,2±0,3 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ПГ-3, log₂ 6,6±0,2 6,3±1,3 5,9±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ВД-БС, log₂ 6,4±0,3 6,0±1,3 5,8±0,05 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу PC, log₂ 6,2±0,3 6,0±0,2 5,9±0,4 Титр вируснейтрализующих антител к ротавирусу, log₂ 6,8±0,2 6,4±0,1 6,0±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к коронавирусу, log₂ 6,0±0,4 6,0±0,5 5,7±0,2 21 день после ревакцинации Т-лимфоциты, % 31,0±0,8 28,0±0,8 26,0±0,6 Т-лимфоциты, 10⁹/л 2,1±0,2 2,0±0,2 1,8±0,2 В-лимфоциты, % 8,4±0,3 8,4±0,3 8,9±0,3 В-лимфоциты, 10⁹/л 0,6±0,01 0,6±0,01 0,6±0,01 Функциональная активность нейтрофилов крови, %       - спонтанный тест 8,6±0,3 8,6±0,3 7,8±0,3 - индуцированный тест 36,6±0,7 32,4±0,4 28,6±0,5 Иммуноглобулины, мг/мл       G 24,0±0,31 23,0±0,3 22,5±0,4 М 1,8±0,03 1,5±0,03 1,3±0,05 Лизоцимная активность сыворотки крови, % 3,2±0,08 3,0±0,3 3,0±0,1 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ИPT-3, log₂ 7,2±0,3 6,6±0,3 6,4±0,4 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ПГ-3, log₂ 8,0±0,2 7,4±0,2 7,0±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ВД-БС, log₂ 10,2±0,2 9,6±0,2 8,2±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу PC, log₂ 7,2±0,7 7,0±0,7 6,4±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к ротавирусу, log₂ 9,4±0,2 8,7±0,2 8,0±0,3 Титр вируснейтрализующих антител к коронавирусу, log₂ 8,2±0,4 7,3±0,4 6,7±0,2

Как видно из таблицы 4, заявляемый способ обеспечивал оптимальный профилактический эффект, который выражался в снижении числа заболевших телят, более легкой форме переболевания и повышении сохранности.

Полученные клинические данные подтвердили достижение заявленного технического результата - повышение профилактической эффективности на фоне естественного вирусоносительства активацией защитных механизмов по всем регистрируемым параметрам. Так повышение уровней иммуноглобулинов G и М указывает на стимуляцию гуморального иммунитета, а усиление функциональной активности клеток Т- и В-лимфоцитов способствует повышению напряженности и длительности иммунитета.

Источники информации

1. Урбан В.П., Найманов И.Л. Болезни молодняка в промышленном животноводстве. - М.: Колос, 1984. - С.192-196.

2. Инфекционные болезни животных. Справочник / Сост. Ю.Ф. Борисович, Л.В. Кириллов; под ред. Д.Ф. Осидзе - М.: Агропромиздат, 1987 - С.99.

3. Чухно Т. Большая энциклопедия лекарственных растений. - М.: Эксмо, 2007. - 1024 с.

4. RU 2303992 C1, 2007.

5. RU 2461385 C1, 2012.

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии. Способ иммунопрофилактики массовых вирусных болезней телят заключается в следующем: клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста иммунизируют трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции иммунизируют инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, а перед пассивной (с применением гипериммунной сыворотки) и перед активной (с применением вакцины «Комбовак») иммунизациями однократно в течение 15 дней применяют внутрь комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, в виде 7% водного раствора в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного. 5 табл., 3 пр.

Способ иммунопрофилактики массовых вирусных болезней телят, включающий иммунизацию клинически здоровых телят двукратным введением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней и применение внутрь комплексного фитопрепарата, отличающийся тем, что клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста иммунизируют трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3, в титре не ниже 1:1280, к вирусу инфекционного ринотрахеита, в титре 1:256, к вирусу вирусной диареи - болезни слизистых, в титре 1:1024, к респираторно-синтициальному вирусу в титре 1:128, к ротавирусу и коронавирусу, в титре 1:128, в дозе 1 мл/кг живой массы, через 15 дней после последней инъекции иммунизируют инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, а перед пассивной, с применением гипериммунной сыворотки, и активной, с применением вакцины «Комбовак», иммунизациями однократно в течение 15 дней применяют внутрь комплексный фитопрепарат, представляющий собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, мать-и-мачехи, тимьяна ползучего и корней солодки голой, в виде 7% водного раствора в дозе 2,0 мл/кг живой массы животного.