СПОСОБ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ РЕСПИРАТОРНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ТЕЛЯТ Российский патент 2014 года по МПК A61K39/295 A61P11/00 A61P31/12 

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, касается способа иммунопрофилактики, в частности вакцинопрофилактики, и может быть использовано для специфической защиты телят от смешанных респираторных болезней вирусной этиологии.

Синдром острых респираторных вирусных инфекций у телят развивается при воздействии респираторных вирусов, преимущественно парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальных и аденовирусов, на фоне неблагоприятных факторов внешней среды. Вирусные агенты вызывают первичные повреждения слизистых оболочек верхних дыхательных путей, оказывая иммуносупрессорное действие на местный иммунитет респираторного тракта, что способствует проникновению в легкие бактериальной микрофлоры, осложняющей патологический процесс. Особенностью распространения вирусов инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной инфекции является то, что данные возбудители у молодняка до 1 месяца могут вызывать энтериты, у более старших животных - респираторные заболевания, а у взрослых половозрелых коров и быков - нарушение воспроизводительной функции. Кроме того, вирус парагриппа-3 широко распространен у телят старше 1-го месячного возраста при нарушениях технологии выращивания, т.е. при стрессовых воздействиях на организм, вызывая поражения дыхательных путей. По тропизму все вышеуказанные возбудители могут репродуцироваться в клетках респираторного и желудочно-кишечного тракта, половых органах, иммунокомпетентных клетках, то есть они пантропны. Это обусловливает их высокую контагиозность и тяжесть течения болезни.

Разрыв инфекционной цепи и при возможности предотвращение перехода эпизоотического процесса в скрытое состояние рассматривается как основной принцип борьбы с энзоотиями, одним из основных инструментов которой является иммунопрофилактика. Иммунопрофилактика предполагает создание искусственной невосприимчивости организма введением биологических препаратов против соответствующего возбудителя, при этом различают активную (с использованием вакцин и анатоксинов) и пассивную (с использованием антител в виде сывороток или глобулина) иммунизацию.

Известны способы иммунопрофилактики вирусных респираторных болезней телят с применением моновалентных (живых и инактивированных) или поливалентных вакцин /1/. Известные способы иммунопрофилактики основаны на комплексных мероприятиях, включающих интраназальную прививку телят в первые недели жизни, их ревакцинацию (парентерально) через 3-4 месяца, а также вакцинацию коров /2/. Вакцинация телят обеспечивает им защиту от инфекции через 10-14 дней (при использовании живых вакцин) или через 21 день (при использовании инактивированных) после повторного введения вакцины /3/.

В качестве предпочтительного аналога рассматривается способ специфической профилактики инфекционных болезней крупного рогатого скота с применением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, которую вводят телятам в возрасте 30 дней дважды с интервалом 20-25 суток /4/.

На эффективность вакцинации отрицательно влияет наличие у телят колостральных антител, которые блокируют антигены вводимых вакцин, тем самым блокируя формирование иммунитета и усугубляя инфекционный процесс. Кроме того, вакцины могут вызывать поствакцинальные реакции (реактогенность и аллергенность вакцин), снижающие в течение определенного времени (1-10 дней) качество здоровья животных, а их применение почти всегда сопровождается временным (на 7-14 дней) иммунодефицитным состоянием организма животных. Применение живых или инактивированных вакцин не предотвращает латенции вирулентных вирусов в организме животных.

Цель изобретения - повышение эффективности профилактики массовых респираторных болезней телят вирусной этиологии.

Поставленная цель достигается сочетанием пассивной (с применением гипериммунной сыворотки животных-доноров) и активной (с применением инактивированной вакцины) иммунизации по оригинальной схеме.

Способ осуществляется следующим образом.

Клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста иммунизируют трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу - (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции вакцинируют двукратным введением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, с интервалом в 21 день в дозах по наставлению.

Эффективность способа профилактики респираторных болезней телят полиэтиологичной природы определяли в научно-производственных опытах в условиях хозяйств, длительно неблагополучных по респираторным болезням, обусловленным воздействием на организм ассоциаций вирусов, патогенной и условно патогенной микрофлоры на фоне нарушения условий содержания и кормления стельных коров и телят. Вирусологическими исследованиями подтверждена этиологическая роль вирусов парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальных вирусов, рота- и коронавирусов. Гипериммунную сыворотку готовили по методу Н.И. Горбань (1981) из крови клинически здоровых взрослых животных-доноров живой массой не менее 300 кг того же хозяйства, свободных от инфекционных и кровепаразитарных болезней.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. В условиях хозяйства, длительно неблагополучного по вирусным заболеваниям телят, протекающим как смешанная инфекция, вызванная вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальным, рота- и коронавирусами (заболеваемость - 80,0%, летальность - 20%), по принципу аналогов формировали три группы клинически здоровых телят 20-дневного возраста. Телят первой группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синцитиальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы; телят второй группы иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, телят третьей группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синцитиальному вирусу - (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. За животными вели клиническое наблюдение, регистрировали количество заболевших животных и характер течения заболевания. Срок наблюдения 3 месяца. Результаты представлены в таблице 1.

Таблица 1 Основные клинические показатели телят Показатели Группы животных 1-я группа: гипериммунной сыворотки животных-доноров* 2-я группа: вакцина «Комбовак» 3-я группа: гипериммунной сыворотки животных-доноров*+вакцина «Комбовак» Количество животных, гол. 10 10 10 Заболело, гол. (%): 4 (40,0) 3 (30,0) 1 (10,0) - вирусные желудочно-кишечные болезни (ЖКБ) 3 2 1 - вирусные респираторные болезни (РБ) 1 1   Форма переболевания:       - легкая 1 (ЖКБ) 2 (ЖКБ) 1 - тяжелая 2 (ЖКБ, РБ) 1 (РБ)   Пало, гол (%) 2 1 - Сохранность, % 80,0 90,0 100,0 Среднесуточный прирост живой массы, г 516,2±16,5 528,0±18,6 748,0±20,1 *Гипериммунная сыворотка животных-доноров, содержащая антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синцитиальному вирусу - (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128).

Как видно из таблицы 1, вирусные заболевания регистрировали во всех группах, причем респираторная патология в 1-й и 2-й группах протекала в тяжелой форме (1 группа - 2 случая, 2 группа - 1 случай). Телят лечили традиционными способами с применением симптоматических средств, в том числе антибактериальных. Полного излечения достигнуть не удалось, и животные были вынужденно убиты. Иммунизация гипериммунной сывороткой с последующей вакцинацией не только снижала заболеваемость и обеспечивала переболевание в легкой форме, но и способствовала лучшему развитию телят, что подтверждалось повышением среднесуточного прироста живой массы на 232,0 г в сравнении с 1-й группой и на 220,0 г в сравнении со 2-й группой.

Пример 2. В условиях хозяйства, длительно неблагополучного по вирусным заболеваниям телят, протекающим как смешанная инфекция, вызванная вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальными, рота- и коронавирусами (заболеваемость - 60,0%, летальность - 10%), по принципу аналогов формировали две группы клинически здоровых телят 30-дневного возраста. Телят первой группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синцитиальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. Телят второй группы иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. Эффективность профилактики оценивали по следующим показателям: относительное и абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов (определяли в реакции спонтанного розеткообразования по методу Н.И. Блинова, 1980), функциональная активность нейтрофилов крови (определяли в реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) по методу М.Е. Виксмана и А.M. Маянского, 1979), уровень иммуноглобулинов отдельных изотипов (G, М) (определяли по методу Manchini, 1964), лизоцимная активность сыворотки крови (определяли по методу О.И. Смирновой и Т.А. Кузьминой, 1966), уровень вируснейтрализующих антител к вирусам парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальному вирусу и к рота- и коронавирусу (определяли в реакции торможения гемагглютинации, реакции непрямой гемагглютинации и методом иммуноферментного анализа). Взятие крови для иммунобиологических исследований проводили до вакцинации, через 21 день после вакцинации и через 21 день после ревакцинации. Учитывали результаты клинических наблюдений (число заболевших животных, среднесуточный прирост живой массы, сохранность).

Результаты представлены в таблицах 2 и 3.

Таблица 2 Иммунобиологические показатели телят Показатели Группы животных 1-я группа: гипериммунная сыворотка животных-доноров + вакцина «Комбовак» 2-я группа: вакцина «Комбовак» до вакцинации 21 день после вакцинации 21 день после ревакцинации до вакцинации 21 день после вакцинации 21 день после ревакцинации Т-лимфоциты, % 24,7±1,0 26,8±0,9 31,0±0,8*** 22,3±1,0 23,8±0,5 26,0±0,6 Т-лимфоциты, 10⁹/л 1,8±0,1 1,5±0,08 2,1±0,2*** 1,5±0,1 1,5±0,08 1,8±0,2 В-лимфоциты, % 7,5±0,2 8,2±0,4 8,4±0,3* 7,4±0,5 8,3±0,4 8,9±0,3 В-лимфоциты, 10⁹/л 0,5±0,04 0,5±0,04 0,6±0,01** 0,5±0,04 0,5±0,04 0,6±0,01* Функциональная активность нейтрофилов крови, %:             - спонтанный тест 7,6±0,3 8,0±0,4 8,6±0,3*** 7,4±0,3 7,1±0,4 7,8±0,3 - индуцированный тест 25,2±0,8 30,4±0,8 36,6±0,7*** 23,3±0,7 26,4±0,7 28,6±0,5 Иммуноглобулины, мг/мл             G 17,6±0,4 19,8±0,6 24,0±0,3*** 17,9±0,5 19,0±0,3 22,5±0,4 М 1,1±0,09 1,6±0,05 1,8±0,03*** 1,0±0,06 1,1±0,05 1,3±0,05 Лизоцимная активность сыворотки крови, % 2,4±0,02 2,8±0,1 3,2±0,08*** 2,2±0,05 2,5±0,09 3,0±0,1 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу HPT-3, log₂ 1,1±0,4 4,8±0,2 7,2±0,3*** 1,1±0,4 4,2±0,3 6,4±0,4 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ПГ-3, log₂ 1,9±0,5 6,6±0,2 8,0±0,2** 1,9±0,7 5,9±0,2 7,0±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ВД-БС, log₂ 2,0±0,4 6,4±0,3 10,2±0,2*** 1,8±0,4 5,8±0,05 8,2±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к вирусу PC, log₂ 1,2±0,6 6,2±0,3 7,2±0,7*** 1,2±0,8 5,9±0,4 6,4±0,2 Титр вируснейтрализующих антител к ротавирусу, log₂ 2,0±0,4 6,8±0,2 9,4±0,2*** 1,8±0,4 6,0±0,2 8,0±0,3 Титр вируснейтрализующих антител к коронавирусу, log₂ 1,9±0,3 6,0±0,4 8,2±0,4*** 1,7±0,4 5,7±0,2 6,7±0,2 * р<0,05; ** р<0,02; *** р<0,01; **** р<0,001.

Таблица 3 Результаты клинических наблюдений Показатели Группы телят Опытная, n=15 Контрольная, n=15 Гипериммунная сыворотка животных-доноров+вакцина «Комбовак» Вакцина «Комбовак» Заболело, гол., (%) 1 (6,7) 3 (20,0) Форма переболевания, гол.:     - легкая 1 1 - тяжелая 0 2 Пало, гол., (%) 0 1 (6,7) Профилактическая эффективность, % 93,3 80,0 Среднесуточный прирост живой массы, г 648,0±20,1 528,0±18,6 Сохранность, гол., (%) 100 90,0

Как видно из таблицы 2, вакцинация телят приводила к формированию иммунного ответа, причем у телят первой группы напряженность была выше, чем у телят второй группы, что выражалось в статистически достоверном приросте антител ко всем вирусам. Максимальное содержание антител ко всем вирусам регистрировали через 21 день после ревакцинации, оно превышало соответствующие показатели до вакцинации: титр нейтрализующих антител к вирусу инфекционного ринотрахеита в 6,5 раза (1 группа) и 5,8 раза (вторая группа); к вирусу парагриппа-3 - в 4,2 раза (первая группа) и 3,7 раза (вторая группа); к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых - в 5,1 раза (первая группа) и 4,6 раза (вторая группа); к респираторно-синцитиальному вирусу - в 6 раз (первая группа) и 5,3 раза (вторая группа); к ротавирусу - в 4,7 раза (первая группа) и 4,4 раза (вторая группа); к коронавирусу - в 4,3 раза (первая группа) и 3,9 раза (вторая группа). Вакцинация в первой группе проводилась на фоне более высоких показателей иммунного статуса, что свидетельствовало о лучшей адаптации к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды и способствовало подготовке иммунной системы к формированию адекватного ответа. Высокий уровень специфического иммунитета у телят первой группы обеспечивал профилактическую эффективность на уровне 93,3% (по сравнению с 80% во второй группе) и сохранность - на уровне 100,0% (по сравнению с 90,0% во второй группе). У заболевшего теленка первой группы респираторная инфекция протекала в легкой форме и после курса медикаментозной терапии полное выздоровление отмечалось через 8 дней. У 2 телят из 3 заболевших во второй группе респираторная инфекция протекала в тяжелой, у 1 теленка - в легкой форме. После курса медикаментозной терапии у 1 теленка с тяжелой формой переболевания полное выздоровление наступало через 14 дней, у теленка с легкой формой переболевания - через 10 дней. 1 теленок пал.

Проведенные исследования показали, что заявленный способ обеспечивал повышение поствакцинального иммунитета и стимуляцию продукции антител в результате активизации клеточного и гуморального иммунитета и оптимизации естественной резистентности организма.

Источники информации

1. Урбан В.П., Найманов И.Л. Болезни молодняка в промышленном животноводстве. - М.: Колос, 1984. - С.192-196.

2. Инфекционные болезни животных. Справочник./Сост. Ю.Ф. Борисович, Л.В. Кириллов; под ред. Д.Ф. Осидзе. - М.: Агропромиздат, 1987. - С.99.

3. Ефанова Л.И. Защитные механизмы организма. Иммунодиагностика и иммунопрофилактика инфекционных болезней животных. - Воронеж: ВГАУ, 2004. - 391 с.

4. RU 2395298 C1, 2010.

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии. Способ вакцинопрофилактики респираторных болезней телят включает иммунизацию клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 в титре не ниже 1:1280, к вирусу инфекционного ринотрахеита в титре 1:256, к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых в титре 1:1024, к респираторно-синцитиальному вирусу в титре 1:128, к ротавирусу и коронавирусу в титре 1:128, в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции вакцинируют двукратным введением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней согласно наставлению. Способ обеспечивает повышение поствакцинального иммунитета и стимуляцию продукции антител в результате активизации клеточного и гуморального иммунитета и оптимизации естественной резистентности организма. 3 табл., 2 пр.

Способ вакцинопрофилактики респираторных болезней телят, включающий иммунизацию клинически здоровых телят двукратным введением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, отличающийся тем, что телят 20-30-дневного возраста иммунизируют трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 в титре не ниже 1:1280, к вирусу инфекционного ринотрахеита в титре 1:256, к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых в титре 1:1024, к респираторно-синтициальному вирусу в титре 1:128, к ротавирусу и коронавирусу в титре 1:128, в дозе 1 мл/кг живой массы, а вакцинацию проводят через 15 дней после последней инъекции.