СПОСОБ КАЧЕСТВЕННОЙ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ НОВООБРАЗОВАНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ГУБЫ ПО СОДЕРЖАНИЮ БИОМАРКЕРОВ В РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ ПАЦИЕНТА Российский патент 2014 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, и может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.

Известен способ прогнозирования и диагностики плоскоклеточного рака головы и шеи по содержанию матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в плазме крови пациента, включающий исследования плазмы венозной крови, при этом сыворотку крови забирали стандартным способом у больных плоскоклеточным раком головы и шеи после постановки диагноза до начала лечебных процедур. Сыворотку хранили при температуре -50°C не более 10 месяцев и размораживали не более 1 раза для иммуноферментного определения содержания матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов с использованием наборов для твердофазного иммуноферментного анализа на ИФА-анализаторе (см. Клишо Е.В. Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при плоскоклеточном раке головы и шеи, автореферат диссертации д.м.н., Томск, 2011 г., с.43).

Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:

- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностики новообразований слизистой оболочки губы в день обращения пациента,

- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы,

- недостаточность вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,

- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала,

- возможность инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала,

- сложность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Задачей изобретения является создание способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента.

Техническим результатом является достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей).

Технический результат достигается тем, что предложен способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследования ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, при этом ротовую жидкость забирают у пациента для качественных экспресс исследований новообразований слизистой оболочки губы, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 210-350 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475-791 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,47-180,47 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 658,5-1096,5 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1675,5-2761,5 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C. При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость забирают у пациента для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняют забор ротовой жидкости пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. При этом при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 210-350 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475-791 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента.

В качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,47-180,47 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 658,5-1096,5 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1675,5-2761,5 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента.

Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:

- отсутствие выполнения забора венозной крови у пациента для качественных экспресс исследований новообразований слизистой оболочки губы,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 23,85-39,65 нг/мл отсутствия новообразования слизистой оболочки губы у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 210-350 нг/мл папилломы слизистой оболочки губы пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475-791 нг/мл рака слизистой оболочки губы пациента,

- выбор в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определение его количественного содержания в ротовой жидкости пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 108,47-180,47 нг/мл отсутствия новообразования слизистой оболочки губы у пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 658,5-1096,5 нг/мл папилломы слизистой оболочки губы пациента,

- диагностирование при определении содержания в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1675,5-2761,5 нг/мл рака слизистой оболочки губы пациента,

- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента тактики его лечения,

- выполнение при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед проведением анализа ее центрифугирования при 3000 об/мин в течение 15 минут, забора поверхностной части в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещения в пробирку «salicaps» и сразу замораживания в морозильной камере при температуре минус 80°C,

- дополнительное осуществление в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента контрольного определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Экспериментальные исследования предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы в день обращения пациента, значительное повышение чувствительности дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы, достижение высокой вероятности выявления процесса доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы в организме пациента как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора и хранения диагностического материала, отсутствие инфицирования «через кровь» во время забора диагностического материала, а также возможность забора диагностического материала у лиц с плохим венозным наполнением (в том числе у пожилых людей и у детей). Кроме того, предложенный способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента обеспечил при практическом использовании значительное повышение качества жизни пациентов.

Реализация предложенного способа качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Пациент Л., 58 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки верхней губы слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 223,5 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 728,1 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки верхней губы слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки губы.

Пример 2. Пациентка Е., 91 год, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки нижней губы справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. При этом в связи с преклонным возрастом пациентки возникла необходимость кратковременного хранения ее ротовой жидкости, поэтому перед выполнением анализа ее центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирали поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещали в пробирку «salicaps» и сразу замораживали в морозильной камере при температуре минус 80°C. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 350,8 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 932,2 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки нижней губы справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки губы.

Пример 3. Пациент Ф., 42 года, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки нижней губы слева».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 290,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 806,4 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали папиллому слизистой оболочки нижней губы слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое лечение: иссечение папилломы слизистой оболочки губы.

Пример 4. Пациентка С., 64 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки верхней губы слева».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 2562,8 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки верхней губы слева. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования и иссечение новообразования слизистой оболочки губы на 2-м этапе.

Пример 5. Пациентка П., 47 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки нижней губы справа».

Ротовую жидкость забирали у пациентки для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациентки до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:1000 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациентки размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 628,1 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациентки матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1890,7 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки нижней губы справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациентке было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования и иссечение новообразования слизистой оболочки губы на 2-м этапе.

Пример 6. Пациент Н., 76 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «новообразование слизистой оболочки верхней губы справа».

Ротовую жидкость забирали у пациента для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы. Выполняли забор ротовой жидкости у пациента до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавляли физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещали в кювету и выполняли метод иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 791,3 нг/мл, а также установили содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 2397,4 нг/мл. На основании полученных результатов диагностировали рак слизистой оболочки верхней губы справа. Клинический диагноз также подтверждали морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение: на 1-м этапе предоперационная лучевая терапия на опухоль и пути регионарного метастазирования и иссечение новообразования слизистой оболочки губы на 2-м этапе.

Установленные клинические диагнозы впоследствии подтвердились результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у всех пациентов биопсийного материала из очага поражения.

При этом в процессе до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациентов дополнительно осуществляли контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациентов, по результатам которых судили об эффективности выбранного лечения у пациентов.

Изобретение относится к области медицины, а именно к медицинской диагностике, и описывает способ качественной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента. Способ включает забор ротовой жидкости у пациента, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100, повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител. В качестве независимых биомаркеров выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9). Способ характеризуется высокой точностью и чувствительностью дифференциальной экспресс-диагностики доброкачественных и злокачественных новообразований слизистой оболочки губы, упрощением подготовки пациента для забора и хранения диагностического материала, возможностью получения результата в день обращения пациента, высокой вероятностью выявления доброкачественных и злокачественных новообразований в организме пациента как на ранних, так и на более поздних стадиях заболевания. Изобретение может быть использовано в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений. 2 з.п. ф-лы, 6 пр.

1. Способ качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости пациента, включающий исследование ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента производится до или не ранее чем через 30 минут после приема пищи пациентом, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 3000 об/мин в течение 15 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:100 и повторное центрифугирование при 3000 об/мин в течение 15 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного метода иммуноферментного анализа на плашке на основе моноклональных антител с последующим анализом результатов исследований, отличающийся тем, что ротовую жидкость забирают у пациента для исследования новообразований, в качестве биомаркера при качественной дифференциальной экспресс-диагностике новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) группы клинического контроля принимают уровень 23,85-39,65 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 210-350 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 8/matrix metalloproteinase 8 (ММП 8/ММР 8) в количестве 475-791 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента, в качестве биомаркера для качественной дифференциальной экспресс-диагностики новообразований слизистой оболочки губы по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают матриксную металлопротеиназу 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента, при этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) группы клинического контроля принимают уровень 108,47-180,47 нг/мл, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 658,5-1096,5 нг/мл, то диагностируют папиллому слизистой оболочки губы пациента, при этом, если определяют содержание в ротовой жидкости пациента матриксной металлопротеиназы 9/matrix metalloproteinase 9 (ММП 9/ММР 9) в количестве 1675,5-2761,5 нг/мл, то диагностируют рак слизистой оболочки губы пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при необходимости кратковременного хранения ротовой жидкости пациента перед выполнением анализа ее центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут, забирают поверхностную часть в виде надосадочной жидкости в количестве 1 мл, помещают в пробирку «salicaps» и сразу замораживают в морозильной камере при температуре минус 80°C.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что до выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.