КОМПОЗИЦИЯ С АНТИОКСИДАНТНОЙ И АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2014 года по МПК A61K31/192 A61K31/375 A61P31/04 A61P39/06 

Изобретение относится к области медицины, биологии и фармакологии, а именно к веществам, обладающим антиоксидантной и антибактериальной активностью, и может быть использовано в медицине, ветеринарии, фармацевтической промышленности для создания на его основе комплексных препаратов, в том числе с целью коррекции аддиктивных расстройств (как соль лития) и сопутствующих метаболических нарушений. Заявленная композиция может использоваться как составная часть в различных лекарственных и фармацевтических формах: мазях, бальзамах, растворах и таблетках.

Известно, что соли лития широко используются в медицинской практике, так как катионы лития обладают нормотимической (психостабилизирующей) активностью, а анион определяет биодоступность, растворимость, токсичность и ряд других параметров соединения, в том числе антиоксидантную и антибактериальную активность. Поэтому подбор соответствующего аниона и получение соли с заданным набором свойств является актуальной задачей.

В качестве прототипа использована антиоксидантная композиция на основе солей лития, обладающая иммуностимулирующей активностью (патент RU №2372081 от 25.07.2008 г. Плотников Е.В., Плотников В.М.), содержащая аскорбат лития и аспартат лития в процентном соотношении 50:50.

Аскорбат лития, входящий в состав данной композиции, является биоактивным препаратом, обладающим антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью, но его антибактериальная активность в сочетании с аспартатом лития невысока. Это снижает потенциальный спектр применения аскорбата лития при различных заболеваниях. Таким образом, основным недостатком данной композиции является отсутствие антибактериальной активности.

Технической задачей, на решение которой направлено изобретение, является получение композиции, с высокой антибактериальной и антиоксидантной активностью, содержащей литий в легкорастворимой форме.

Технический результат изобретения заключается в расширении перечня малотоксичных антиоксидантов с антибактериальной активностью, обладающих нормотимическим действием.

Поставленная задача решается получением композиции литиевых солей аскорбиновой и бензойной кислот в соотношении, мас.%:

аскорбат лития 50 бензоат лития 50

Отличительным признаком технического решения является применение в композиции бензоата лития. Бензоат лития совместно с аскорбатом лития обеспечивает высокую антиоксидантную активность и антибактериальные свойства заявляемого изобретения.

Антиоксидантная активность заявленной композиции в сочетании с различными компонентами и композиции-прототипа была исследована с помощью метода катодной вольтамперометрии (Е.И. Короткова, Ю.А. Карбаинов. Вольтамперометрический способ определения суммарной активности антиоксидантов. Патент РФ МПК G01N 33/00. №2002-115-232 от 06.06.02). О величине антиоксидантной активности судили по относительному изменению тока электровосстановления кислорода.

Определение антибактериальных свойств заявленной композиции в сочетании с различными компонентами и композиции-прототипа проводилось путем оценки его минимальной подавляющей концентрации в отношении культур E.Coli и Str. Pyogenes.

Пример 1.

Точную навеску 500 мг аскорбата лития смешивают с 500 мг бензоата лития, разбавляют в 100 см³ дистиллированной водой. Полученную композицию исследуют на антиоксидантную активность методом катодной вольтамперометрии.

В электрохимическую ячейку помещали 10 см³ раствора фонового электролита. В качестве фонового электролита использовали фосфатный буфер (pH 6,86).

Для работы собирали трехэлектродную ячейку, состоящую из рабочего ртутно-пленочного электрода, хлорид-серебряного электрода, используемого в качестве электрода сравнения, и вспомогательного электрода (ХСЭ). Электроды опускали в раствор фонового электролита и подключали к вольтамперометрическому анализатору ТА-2 (ООО «НПП «Томаналит», Томск). В работе использовали постоянно-токовый режим катодной вольтамперометрии, скорость развертки потенциала составляла W=40 мВ/с, рабочий диапазон потенциалов от 0 до -1,0 В. Перемешивали раствор с помощью вибрации электродов 20 с, 10 с - стадия успокоение раствора. Далее снимали первую волну катодного восстановления кислорода, растворенного в фоновом растворителе, в указанной области потенциалов. Повторяли съемку вольтамперограммы не менее трех раз. Далее в электрохимическую ячейку вносили аликвоту 0,5 см³ образца исследуемой композиции и повторно снимали вольтамперограмму при тех же условиях.

По полученным результатам строили график зависимости относительного тока электровосстановления кислорода от времени взаимодействия антиоксидантов (АО) с активными кислородными формами. По тангенсу угла наклона касательной к прямолинейному участку данной кривой проводили расчет кинетического (k_кинет (мкмоль/л·мин)) критерия антиоксидантной активности. Антиоксидантную активность образца определяли по формуле:

Размерность: мкмоль/л·мин

где Ii - ток ЭВ O2 в присутствии АО в растворе, мкА, Io - ток ЭВ O2 в отсутствии АО в растворе, мкА; $$C_{O_2}^o$$ - исходная концентрация кислорода в растворе, мкмоль/л, t - время реакции взаимодействия антиоксидантов с активными кислородными формами, мин. Кинетический критерий - отражает количество активных кислородных форм, прореагировавших с АО (или суммарным содержанием АО) за минуту времени.

Таблица 1 Антиоксидантная активность заявляемой композиции Препарат Концентрация, мг/см³ Антиоксидантная активность, K, мкмоль/л·мин Заявленная композиция 0,5 1,54 Композиция-прототип 0,5 1,26

Определение антибактериальных свойств заключалось в определении минимальной подавляющей концентрации композиции (МПК), при котором наблюдается отсутствие роста микроорганизмов. В пробирках готовили серию разведений заявляемой композиции и прототипа в мясопептонном бульоне (МПБ) в концентрациях 20 мг/см³, 10 мг/см³, 5 мг/см³, 2,5 мг/см³. Контролем служила пробирка, содержащая питательную среду без бактериальной суспензии и исследуемых композиций. Инкубировали образцы в течение 24 ч при температуре 37°C.

За минимальную бактерицидную концентрацию исследуемых композиций принимали ту минимальную концентрацию, при которой подавлялся рост микроорганизмов. Контроль роста микроорганизмов проводили визуально по изменению мутности среды. Для контроля мутности среды использовалась пробирка с бактериальной суспензией ("отрицательный" контроль - без исследуемых композиций).

Таблица 2 Результаты исследования антибактериальной активности Исследуемая композиция Е. coli Str. pyogenes Концентрация композиции, мг/см³ 2,5 5 10 20 2,5 5 10 20 Заявленная Композиция рост рост Отсутствие
роста Отсутствие роста рост рост Отсутствие роста Отсутствие роста Прототип рост рост рост рост рост рост рост рост

Результаты исследований заявленной композиции представлены в таблицах №1 и №2. Из материалов табл. №1 видно, что заявленная композиция обладает выраженной антиоксидантной активностью, соответствующей активности прототипа и при этом обладает антибактериальной активностью в дозах 20,0-10,0 мг/см³, значительно превосходя активность прототипа табл. №2 (по методу разведений).

Заявленная смесь проявляет антибактериальные свойства. Вследствие чего можно говорить о возможности использования данной композиции как составной части или как самостоятельного препарата, из группы солей лития (нормотимиков), предотвращающего повреждение клеток свободными радикалами и обладающего антибактериальной активностью. Заявленная композиция может использоваться как составная часть в различных лекарственных формах.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой композицию, обладающую антиоксидантной и антибактериальной активностью, включающую аскорбат лития, отличающуюся тем, что дополнительно содержит бензоат лития при следующем соотношении компонентов, мас.%: аскорбат лития - 50; бензоат лития - 50. Изобретение обеспечивает расширение перечня антиоксидантов с антибактериальной активностью, обладающих нормотимическим действием. 1 пр., 2 табл.

Композиция с антиоксидантной и антибактериальной активностью, включающая аскорбат лития, отличающаяся тем, что дополнительно содержит бензоат лития при следующем соотношении компонентов, мас.%:
аскорбат лития 50 бензоат лития 50