СПОСОБ ОЦЕНКИ ОСТЕОИНТЕГРАЦИИ ПОРИСТЫХ ПРОВОЛОЧНЫХ МАТЕРИАЛОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 2015 года по МПК A61B17/56 A61B10/02 G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии, патологической физиологии и может быть использовано для оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте.

Известны различные способы оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте.

Известен способ оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте, представляющий глубокое травление костных блоков с приживленными имплантатами из титана. Производят приготовление раствора со следующими ингредиентами: 40% р-р плавиковой кислоты 220 г; металлический цинк 100 г; этиленгликоль 800 г. Опускают в приготовленный раствор костный блок с приживленными имплантатами из титана. Способ позволяет получить возможность исследования процессов роста костной ткани внутри пористых имплантатов [1].

Недостатком данного способа является разрушение химическими компонентами раствора костной ткани, недостаточная достоверность результатов исследования.

Известен способ оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте, представляющий забор на аутопсии костной ткани с фрагментом материала, выделение костных блоков в области имплантации, фиксацию фрагментов в 10% растворе формалина, обезвоживание в вакуумной камере, металлизация образцов для исследования золото-палладиевым покрытием, сканирование на электронном микроскопе [2].

Недостатками данного способа являются разрушение костной ткани факторами физического воздействия, недостаточная достоверность результатов исследования, поверхностный анализ макропрепарата, невозможность провести гистоморфометрический анализ остеоинтеграции в глубине пор изучаемого материала.

Известен способ оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте представляющий забор костных блоков с изучаемым пористым проволочным материалом, фиксацию в растворе формалина, декальцинирование, обезжиривание, обезвоживание костных блоков с изучаемым пористым проволочным материалом, заливку в парафин, изготовление срезов на границе кость - имплантат, окрашивание, гистоморфометрию [3].

Недостатком данного способа являются недостаточная достоверность результатов исследования, поверхностный анализ макропрепарата, невозможность провести гистоморфометрический анализ остеоинтеграции в глубине пор изучаемого материала.

Данный способ взят за прототип.

Целью изобретения являются обеспечение достоверности результатов исследования остеоинтеграции, анализа макропрепаратов при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала, обеспечение возможности, забора тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала для гистоморфометрического исследования, создание возможности забора и анализа внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала.

Эта цель достигается тем, что до или после фиксации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом, и до или после декальцинации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом, производят поиск и фиксацию краевого проволочного элемента пористого проволочного материала в костном блоке; после чего производят расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента пористого проволочного материала; производят анализ макропрепаратов при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала; производят забор тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала; производят забор и анализ внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала.

Способ поясняется графическим материалом.

На Рис. 1 изображено расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента пористого проволочного материала.

Способ используется следующим образом.

В эксперименте, под общим обезболиванием производят эвтаназию животного. Производят забор костного блока с изучаемым пористым проволочным материалом. До или после фиксации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом, и до или после декальцинации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом, производят поиск и фиксацию краевого проволочного элемента пористого проволочного материала в костном блоке. Производят расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента пористого проволочного материала. Производят анализ макропрепаратов при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала. Производят забор тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала. Производят забор и анализ внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала. Производят заливку костной ткани из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала. Изготавливают срезы костной ткани. Окрашивают костную ткань. Производят гистоморфометрию костной ткани. Оценивают остеоинтеграцию пористого проволочного материала с костной тканью.

При предложенном способе открывается возможность анализа внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала, анализа макропрепаратов при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала, открывается возможность забора тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала. При данном способе не нарушается нативная структура костной ткани в которую интегрирован пористый проволочный материал. Расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента пористого проволочного материала не является высокоэнергетическим и денатурирующим фактором для костной ткани.

Достижения результата нового способа подтверждены примерами, произведенными на базе института экспериментальной медицины и биотехнологии Самарского государственного медицинского университета.

Способ представлен следующими примерами.

Пример 1. Из вивария взята крыса-самец линии Wistar массой 190 г., ранее прооперированная в эксперименте с установкой в область лопатки пористого проволочного материала. На этапе интеграции, под общим наркозом (Золетил - Рометар) произведена эвтаназия животного внутрисердечным введением раствора тиопентала натрия. Производят забор костного блока с изучаемым пористым проволочным материалом. До фиксации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом и до декальцинации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом, под ванночкой физиологического раствора производен поиск и фиксация краевого проволочного элемента пористого проволочного материала в костном блоке. Произведено расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента пористого проволочного материала. Произведен анализ макропрепарата при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала. Производен забор тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала. Производят забор и анализ внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала.

Произведена фиксация костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом раствором формалина. Произведено декальцинирование костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом в растворе Трилон-Б, обезжиривание, обезвоживание костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом. Произведена заливка костной ткани. Срезы толщиной 5 мкм изготовлены на роторном микротоме Sakura с дальнейшим окрашиванием гематоксилином и эозином и пикрофуксином по Ван Гизон. Проведена гистоморфометрия костной ткани. Оценена остеоинтеграция пористого проволочного материала в эксперименте.

Пример 2. Из вивария взята крыса-самец линии Wistar массой 200 г., анее прооперированная в эксперименте с установкой в область лопатки пористого проволочного материала. На этапе интеграции, под общим наркозом (Золетил - Рометар) произведена эвтаназия животного внутрисердечным введением раствора тиопентала натрия. Производят забор костного блока с изучаемым пористым проволочным материалом. Произведена фиксация костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом в растворе формалина. После фиксации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом и до декальцинации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом произведен поиск и фиксация краевого проволочного элемента пористого проволочного материала в костном блоке. Произведено расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента пористого проволочного материала. Произведен анализ макропрепарата при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала. Производен забор тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала. Производят забор и анализ внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала. Произведено декальцинирование костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом в растворе Трилон-Б, обезжиривание, обезвоживание костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом. Произведена заливка костной ткани. Срезы толщиной 5 мкм изготовлены на роторном микротоме Sakura с дальнейшим окрашиванием гематоксилином и эозином и пикрофуксином по Ван Гизон. Проведена гистоморфометрия костной ткани. Оценена остеоинтеграция пористого проволочного материала в эксперименте.

Пример 3. Из вивария взята крыса-самка линии Wistar массой 180 г., ранее прооперированная в эксперименте с установкой в область лопатки пористого проволочного материала. На этапе интеграции, под общим наркозом (Золетил - Рометар) произведена эвтаназия животного внутрисердечным введением раствора тиопентала натрия. Производят забор костного блока с изучаемым пористым проволочным материалом. Произведена фиксация костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом в растворе формалина. Произведено декальцинирование костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом в растворе Трилон-Б, обезжиривание, обезвоживание костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом. После фиксации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом и после декальцинации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом, произведен поиск и фиксация краевого проволочного элемента пористого проволочного материала в костном блоке. Произведено расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента пористого проволочного материала. Произведен анализ макропрепарата при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала. Произведен забор тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала. Производят забор и анализ внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала. Произведена заливка костной ткани. Срезы толщиной 5 мкм изготовлены на роторном микротоме Sakura с дальнейшим окрашиванием гематоксилином и эозином и пикрофуксином по Ван Гизон. Проведена гистоморфометрия костной ткани. Оценена остеоинтеграция пористого проволочного материала в эксперименте.

Положительный эффект от предложенного способа выражается в том, что он обеспечивает достоверность результатов исследования остеоинтеграции, анализа макропрепаратов при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала, обеспечивает возможность забора тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала для гистоморфометрического исследования, создает возможность забора и анализа внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала.

Способ может применяться и широко использоваться в экспериментальной медицине по изучению влияния новых композиционных материалов на процессы остеоинтеграции.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии, патологической физиологии и может быть использовано для оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте. Способ включает забор костных блоков с изучаемым пористым проволочным материалом, фиксацию костной ткани с пористым проволочным материалом, декальцинирование, обезжиривание, обезвоживание, заливку этой ткани, изготовление срезов, окрашивание и гистоморфометрию. При этом до или после фиксации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом и до или после декальцинации производят поиск и фиксацию краевого проволочного элемента пористого проволочного материала в костном блоке. Производят расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента. Анализ макропрепаратов производят при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала. Далее производят забор тканей из освобождающихся поровых пространств, в т.ч. производят забор и анализ внутрипоровых фрагментов. Способ обеспечивает возможность качественной и количественной оценки гистоморфометрических параметров внутрипоровых тканей во всем объеме имплантата, в т.ч. за счет обеспечения сохранения структуры внутрипоровой архитектоники. 3 пр., 1 ил.

Способ оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте, включающий забор костных блоков с изучаемым пористым проволочным материалом; фиксацию костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом; декальцинирование костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом; обезжиривание, обезвоживание костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом; заливку костной ткани; изготовление срезов костной ткани; окрашивание костной ткани; гистоморфометрию костной ткани, отличающийся тем, что до или после фиксации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом и до или после декальцинации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом производят поиск и фиксацию краевого проволочного элемента пористого проволочного материала в костном блоке; после чего производят расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента пористого проволочного материала; производят анализ макропрепаратов при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала; производят забор тканей из освобождающихся поровых пространств пористого проволочного материала; производят забор и анализ внутрипоровых фрагментов пористого проволочного материала.