ОКСАЗОЛИДИНОНСОДЕРЖАЩИЕ ДИМЕРНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ИСПОЛЬЗОВАНИЯ Российский патент 2015 года по МПК A61K31/675 C07D413/14 A61P31/04 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Эта заявка имеет приоритет по Предварительной заявке на патент США №61/181,955, которая приводится здесь для ссылки во всей ее целостности.

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Область техники, к которой относится изобретение

[0002] Настоящее описание относится к фармацевтически полезным оксазолидинонсодержащим димерным соединениям, композициям и способам их получения и применения для лечения и профилактики заболеваний у млекопитающих.

Описание уровня техники

[0003] Различные оксазолидинонсодержащие соединения применяют в качестве антибиотиков. Например, оксазолидинонсодержащие соединения были описаны в заявке на патент США №10/596,412 (подана 17 декабря 2004) и WO 04/048350, WO 03/022824 и WO 01/94342, которые приводятся здесь для ссылки.

[0004] Заявка на патент США №12/577,089 (поданная 9 октября 2009) и заявка на патент США №12/699,864 (поданная 3 февраля 2010) принадлежат тому же правообладателю, что и настоящая заявка, и раскрывают примеси димера фосфата, полученные в процессе получения соединений по настоящему изобретению. Неожиданно было обнаружено, что соединения, содержащие по меньшей мере два фосфата, связывающих два оксазолидинонсодержащих фрагмента, такие как димеры оксазолидинонсодержащих соединений, обладают антибактериальной активностью, подобной их диводород монофосфатному аналогу, но имеют преимущественно другую кривую высвобождения, как обсуждается в деталях ниже.

[0005] Бактериальные инфекции являются нерешенной медицинской проблемой, потому что антибактериальные лекарственные средства обычно вызывают резистентность у бактерий, против которых они используются. Следовательно, существует необходимость в новых лекарственных средствах, эффективных против патогенных бактерий для их применения в терапии и профилактике бактериальных инфекций.

[0006] В частности, необходимость существует в антибактериальных лекарственных средствах с различными фармакокинетическими свойствами, таких как лекарственные средства с медленным высвобождением, дающие возможность назначать пациенту различные графики приема в терапевтических и профилактических целях в различных клинических условиях, и также с различными физико-химическими свойствами для облегчения получения различных форм с подобными механизмами воздействия.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0007] Дозированные формы и композиции, представленные здесь, соответствуют этим целям.

[0008] В некоторых аспектах дозированная форма или фармацевтическая композиция содержит терапевтически эффективное количество соединения, имеющего структурную формулу IV:

где n представляет собой неотрицательное целое число;

где каждый Z представляет собой оксазолидинон-содержащий фрагмент, обладающий антибиотической активностью in vivo при расщеплении,

где М независимо представляет собой OR₁ или NR₁R₂;

где R₁ и R₂ являются независимо выбранными из группы, состоящей из Н, необязательно замещенного углеводородного остатка, который может содержать один или более гетероатомов или фармацевтически приемлемый катион.

[0009] В некоторых вариантах осуществления изобретения каждый Z дозированной формы или фармацевтической композиции, описанных здесь, представляет собой:

где * представляет собой точку присоединения Z к Р;

где R¹a и R²b каждый независимо выбирают из Н и F, при условии, что по меньшей мере один из R¹a и R²b представляет собой F, и

Het представляет собой необязательно замещенный пяти- или шестичленный гетероцикл, содержащий по меньшей мере один N, О или S атом.

[0010] В некоторых вариантах осуществления изобретения соединение в дозированной форме или композиции, описанной здесь, имеет структуру:

где М представляет собой OR₁ и R₁ представляет фармацевтически приемлемый катион, такой как азотсодержащий катион, например, имидазолиум катион. В некоторых аспектах этих вариантов осуществления изобретения каждый Z представляет собой:

или

[0011] Дозированная форма или фармацевтическая композиция могут также содержать фармацевтически приемлемый носитель, дилюент или экципиент.

[0012] В некоторых вариантах осуществления изобретения каждый Z в соединении в дозированной форме или фармацевтической композиции имеет R стереохимию, например, каждый Z представляет собой:

.

[0013] В некоторых вариантах осуществления изобретения соединение в дозированной форме или фармацевтической композиции представляет собой:

В некоторых аспектах Het представляет собой тетразолил.

[0014] Некоторые варианты осуществления также включают способы получения соединения в дозированной форме или фармацевтической композиции, описанной здесь, включающей стадию обработки соединения формулы Z-H фосфорилирующим агентом, таким как POCl₃.

[0015] Некоторые варианты осуществления изобретения включают способы получения соединения, описанного здесь, в дозированной форме или фармацевтической композиции, включающей стадию обработки дегидрирующим агентом соединения Z-P', где Р' представляет собой моно- или диводород фосфатную группу.

[0016] Варианты осуществления изобретения также включают способы и применение для лечения бактериальной инфекции, включающие введение дозированной формы или фармацевтической композиции, описанной здесь, субъекту, нуждающемуся в лечении.

[0017] Эти и другие варианты осуществления изобретения описаны в деталях ниже.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

[0018] На Фигуре 1 представлен график фармакокинетики соединения Формулы IV (как проиллюстрировано в Примере 2), при введении или перорально или внутривенно, показывающий как концентрацию пролекарства Формулы IV, так и активного антибактериального агента Формулы 1а.

[0019] На Фигуре 2 представлен график фармакокинетики соединения Формулы III (как проиллюстрировано в Примере 1) при введении или перорально или внутривенно, показывающий как концентрацию пролекарства Формулы III, так и активного антибактериального агента Формулы Ia.

[0020] На Фигуре 3 представлен график in vivo эффективности соединения TR-701 и димера Формулы IV при 24- и 48-часовых интервалах при различных уровнях доз в соответствии с Примером 5.

[0021] На Фигуре 4 представлен график эффективности соединения TR-701 и димера Формулы IV против Staphylococcus aureus (золотистого стафилококка) in vivo при 24- и 48-часовых интервалах при различных уровнях доз в соответствии с Примером 5.

ДЕТАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0022] В некоторых вариантах осуществления изобретения представлены новые соединения пролекарства, обладающие антибиотической активностью, и фармацевтические композиции, содержащие соединения, а также способы их получения и использования. В некоторых вариантах осуществления изобретения соединения являются пролекарствами, которые расщепляются после введения с высвобождением активного оксазолидинонсодержащего метаболита in vivo. В некоторых вариантах осуществления изобретения соединение имеет структуру Формулы IV:

где n представляет собой неотрицательное целое число;

где каждый Z представляет собой оксазолидинонсодержащий фрагмент, обладающий антибиотической активностью in vivo при расщеплении,

где М независимо представляет собой OR₁ или NR₁R₂;

где R₁ и R₂ являются независимо выбранными из группы, состоящей из Н, необязательно замещенного углеводородного остатка, который может содержать один или более гетероатомов или фармацевтически приемлемый катион.

[0023] В некоторых вариантах осуществления изобретения соединение находится в фармацевтической композиции или дозированной форме, где фармацевтическая композиция или дозированная форма содержит количество соединения для антибиотического лечения или профилактики.

[0024] В некоторых вариантах осуществления изобретения оксазолидинонсодержащий фрагмент Z имеет структуру:

где * представляет собой точку присоединения Z к Р;

где R¹a и R²b каждый независимо выбирают из Н и F, при условии, что по меньшей мере один из R¹a и R²b представляет собой F, и

[0025] Het представляет собой необязательно замещенный пяти- или шестичленный гетероцикл, содержащий по меньшей мере один N, О или S атом, такой как тетразолил или оксадиазолил.

[0026] В некоторых аспектах R1a представляет собой F и R1b представляет собой Н и Het представляет собой 2-метил-тетразол-5-ил. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения Z представляет собой:

, или

[0027] В некоторых аспектах активный метаболит получают после расщепления in vivo Z фрагмента из соединений, описанных здесь. Например, активный метаболит может иметь следующую формулу:

.

[0028] В некоторых вариантах осуществления изобретения активное лекарственное средство Формулы I представляет собой (5R)-3-[3-фтор-4-[6-(2-метил-2Н-тетразол-5-ил)-3-пиридинил]фенил]-5-(гидроксиметил)-2-оксазолидинон, то есть:

,

[0029] Эти активные соединения описаны в WO 05/058886 и патентной публикации US №20070155798, способы получения этих и родственных соединений описаны в заявке на патент США 12/577,089 (поданной 9 октября 2009), и кристаллическая форма фосфат эфира и соответствующих солей вышеуказанных соединений в заявке на патент США 12/699,864 (поданной 3 февраля 2010). Две последние заявки принадлежат тому же правообладателю, что и настоящая заявка. Каждая из ссыпок, цитированная здесь, приводится здесь для ссылки во всей их целостности.

[0030] Соединения Формулы IV могут появляться в виде примеси, вместе с другими примесями в процессе фосфорилирования активного метаболита оксазолидинонсодержащего антибиотика (например, Формулы I). Таким образом, эти «примеси» не могут рассматриваться для использования в качестве лекарственных средств. В качестве иллюстрации фосфорилирование Формулы I образует фосфат диводород моноэфир пролекарство Формулы II:

,

где М представлено здесь, например, соединение со следующей формулой:

[0031] Аналогично в подобной иллюстрации фосфорилирование соединения Ia (TR-700) дает фосфат диводород моноэфир Формулы IIa, [(5R)-3-{3-фтор-4-[6-(2-метил-2Н-тетразол-5-ил)пиридин-3-ил]фенил}-2-оксо-5-оксазолидинил]метил]фосфат:

.

[0032] Дополнительно соли Формулы II, такие как динатриевые соли Формулы IIа, могут быть также получены, например Формула IIb ниже:

.

[0033] Примеры примесей, которые могут получиться во время такого фосфорилирования активного метаболита оксазолидинонсодержащего антибиотика, включает соединения Формулы III (бис- соединения):

такой как фосфат моноводород диэфир (когда М=ОН), где Z представляет собой:

, и

где * представляет собой место присоединения Z к Р.

Побочные продукты могут включать также соединение Формулы IV:

где n представляет собой неотрицательное целое число, такое как 0, 1 или 2. В некоторых вариантах осуществления изобретения n представляет собой 0 и имеет следующую формулу:

где Z является таким, как определено выше, например, дифосфат диводород диэфиром Формулы I (когда М=ОН).

[0034] В некоторых вариантах осуществления изобретения Формула IV представляет собой кислоту или производное кислоты, например соль, эфир или амид. В некоторых вариантах осуществления изобретения М представляет собой независимо OR₁ или NR₁R₂; где R₁ и R₂ независимо выбирают из группы, состоящей Н, необязательно замещенного углеводородного остатка, который может содержать один или более гетероатомов, фармацевтически приемлемый катион и положительно заряженный азотсодержащий ион. В некоторых вариантах осуществления изобретения присутствие М не может значительно нарушать антибиотическую активность активного метаболита соединения Формулы IV. Однако в некоторых вариантах осуществления изобретения присутствие М может изменять степень антибиотической активности.

[0035] В некоторых вариантах осуществления изобретения необязательный заместитель углеводородного остатка указанного выше не может значительно нарушать антибиотическую активность метаболита соединения Формулы IV. В некоторых вариантах осуществления изобретения заместитель может изменять степень антибиотической активности. Антибиотическая активность может измеряться различными способами, известными в уровне техники, на модели мышиной септицемии, описанной в Примере 5.

[0036] Как используется здесь, термин «углеводородный остаток» относится к остатку, который содержит только углерод и водород. Остаток может быть алифатическим или ароматическим, прямолинейным, циклическим, разветвленным, насыщенным или ненасыщенным. Углеводородный остаток, где указано, может содержать гетероатомы, кроме углерода и водорода в заместителе. При этом когда отдельно указано, что остаток содержит такие гетероатомы, углеводородный остаток может также содержать карбонильные группы, амино группы, гидроксильные группы и тому подобное, или содержать гетероатомы в «основной цепи» углеводородного радикала. В некоторых вариантах осуществления изобретения углеводородный остаток, содержащий 1-20 С, имеет 0-5 гетероатомов, выбранных из О, S и N.

[0037] Как используется здесь, термин «алкил», «алкенил» и «алкинил» включает линейную или разветвленную цепь и циклические моновалентные заместители. Примеры включают метил, этил, изобутил, циклогексил, циклопентилэтил, 2-пропенил, 3-бутинил и тому подобное. Обычно алкил, алкенил и алкинил заместители содержат 1-10С (алкил) или 2-10С (алкенил или алкинил), такие как 1-6C (алкил), 2-6С (алкенил или алкинил) или 3-6С циклоалкил. Гетероалкил, гетероалкенил и гетероалкинил определяют также, только они могут содержать 1-2 О, S или N гетероатома или их комбинаций в основной цепи остатка.

[0038] Как используется здесь, термин «ацил» охватывает определения алкила, алкенила, алкинила и соответствующих гетеро-форм, которые присоединены к дополнительному остатку через карбонильную группу.

[0039] «Ароматический» фрагмент относится к моноциклическому или конденсированному бициклическому фрагменту, такому как фенил или нафтил; «гетероароматический» фрагмент также относится к моноциклической или конденсированной бициклической кольцевой системе, содержащей один или более гетероатомов, выбранных из О, S и N. Введение гетероатома охватывает как 5-членные кольца, так и 6-членные кольца. Таким образом, типичные ароматические системы включают пиридил, пиримидил, индолил, бензимидазолил, бензотриазолил, изохинолинил, хинолинил, бензотиазолил, бензофуранил, тиенил, фурил, пирролил, тиазолил, оксазолил, имидазолил, тетразолил, оксадиазолил и тому подобное. Любая моноциклическая или конденсированная кольцевая система, которая обладает признаками ароматичности, в смысле распределения электронов в кольцевой системе включена в это определение. Обычно кольцевая система содержит 5-12 атомов в кольце.

[0040] Подобным образом «аралкил» и «гетероарилалкил» относится к ароматической или гетероароматической системам, которые присоединены к другому остатку через углеродную цепь, включая замещенные или незамещенные, насыщенные или ненасыщенные, углеродные цепи, обычно из 1-6 С. Эти углеродные цепи могут также содержать карбонильную группу, что делает их способными предоставить заместители ацильного фрагмента.

[0041] Необязательные заместители могут быть выбраны из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, алкенила, алкинила, арила, N-арил, NH-ароил, гало, OR, NR₂, SR, -OOCR, -NROCR, RCO, -COOR, -CONR₂, SO₂NR₂, CN, CF₃ и NO₂, где каждый R представляет собой независимо Н или алкил (1-4С).

[0042] В некоторых вариантах осуществления изобретения М=OR₁, R₁ может быть Н или катионом металла, таким как катион щелочного металла или катионом щелочноземельного металла. В некоторых вариантах осуществления изобретения катион металла представляет собой натрий, кальций, калий, магний, алюминий, цинк или катион лития.

[0043] В некоторых вариантах осуществления изобретения, где М=OR₁, R₁ может представлять собой положительно заряженную азотсодержащую группу, которая образует соль с отрицательно заряженным кислородом Формулы IV, такой как аммоний и четвертичные или положительно заряженные соли имидазола, N-метилглюкамина, холина, пиперазина, трометамина, диэтиламино, 4-фенилциклогексиламина или бензатина. В этом контексте «четвертичный» относится к атому азота, имеющему четыре связи и таким образом имеющему чистый положительный заряд, такой как азот с четырьмя группами или связями, например один с двойной связью. В некоторых вариантах осуществления изобретения группы могут представлять собой один или более водородов. В некоторых вариантах осуществления изобретения М представляет собой O-имидазолиевую соль, то есть -О- .

[0044) Фармацевтически приемлемые катионы, отличительные черты которых хорошо известны из уровня техники, представлены в Р.Heinrich Stahl and Camille G.Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use. International Union of Pure and Applied Chemistry, Wiley-VCH 2002, и L.D.Bighley, S.M.Berge, D.C.Monkhouse, in "Encyclopedia of Pharmaceutical Technology'. Eds. J.Swarbrick and J.C.Boylan, Vol.13, Marcel Dekker, Inc., New York, Basel, Hong Kong 1995, pp.453-499.

[0045] В некоторых аспектах соединение не является димером, описанным в заявке на патент США №12/577,089 (подана 9 октября, 2009), который имеет следующую структуру или является фармацевтически приемлемой солью димера:

где R¹a и R¹b каждый независимо может быть выбран из Н и F, при условии, что по меньшей мере один из R¹a и R¹b не является F.

[0046] Het представляет собой необязательно замещенный пяти- или шестичленный гетероцикл, содержащий по меньшей мере один атом N, О или S, например тетразолил или оксадиазолил.

[0047] В некоторых аспектах соединение не является димером, описанным в заявке на патент США №12/699,864 (подана 3 февраля, 2010), то есть:

[0049] Соединения Формулы IV могут быть получены множеством способов, включающих фосфорилирование активного метаболита оксазолидинон-содержащего антибиотика, например, соединения Формулы I. Когда реакция фосфорилирования проводится с двумя или более эквивалентами активного метаболита, такого как соединение Формулы I, образование бис-эфиров, таких как соединение Формулы III, является благоприятным. Однако в некоторых вариантах осуществления изобретения бис-эфиры являются неэффективными антибиотическими агентами, демонстрирующими, что не все фосфатсодержащие соединения являются эффективными. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления изобретения менее двух эквивалентов активного метаболита, такого как соединение Формулы I, используется. Способы фосфорилирования обычно охватывают применение электрофильного фосфор (V) содержащего соединения, такого как оксихлорид фосфора POCl₃ или фосфата в присутствии дегидратирующих агентов, таких как карбодиимид, но другие способы могут быть использованы. Например, соединения Формулы IV могут быть получены путем трансэтерификации фосфатсодержащего эфира, такого как дифосфат-эфир, с активным метаболитом, таким как соединение формулы I. Такие реакции трансэтерификации хорошо известны. Подобным образом соединения Формулы IV могут быть получены с высоким выходом из оксазолидинонсодержащих фосфатов, таких как монофосфат Формулы II, обработкой с дегидратирующим агентом, таким как карбонилдимидазол (CDI).

[0050] В некоторых вариантах осуществления изобретения, соединения Формулы IV имеют ценность в виде водорастворимых пролекарств антибактериальных агентов оксазолидинонсодержащих антибиотиков, таких как соединения Формулы I. В некоторых вариантах осуществления изобретения фосфатные димеры Формулы IV имеют более длинное время полужизни in vivo, чем оксазолидинонсодержащие фосфаты, такие как монофосфат Формулы II. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления изобретения соединения Формулы IV высвобождают активные метаболиты (например, Формулы I) за более длительный период, что продляет in vivo время полужизни антибактериального агента. Более длительное время полужизни увеличивает период в течение которого активное соединение остается выше минимальной ингибиторной концентрации (MIC), и таким образом улучшается эффективность более низкой дозы лекарства. Более длительное время полужизни также снижает максимальную концентрацию, C_max, некоторых вариантов реализации антибактериального средства, снижая, таким образом, побочные эффекты, где С_max представляет собой фармакодинамический фактор.

[0051] Специалист в данной области поймет, что множество пролекарств, солей, гидратов, сольватов и полиморфов может быть получено из соединений, представленных здесь, и что различные замещенные изотопами варианты (например, через замещение водорода на дейтерий, углерода на ¹³С, азота на ¹⁵N или фосфора на ³²Р) могут быть также легко получены. Подразумевается, что все такие производные входят в объем притязаний по данной заявке.

[0052] В другом аспекте настоящее описание относится к фармацевтической композиции, содержащей один или более физиологически приемлемых поверхностно-активных агентов, дополнительных носителей, дилюентов, экципиентов, сглаживающих агентов, суспензионных агентов, пленкообразующих агентов и вспомогательных агентов для формирования покрытия или их комбинации и композиции, описанной здесь. Приемлемые дополнительные носители или дилюенты для терапевтического использования хорошо известны в фармацевтической области и описаны, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990), который приводится здесь для ссылки во всей его целостности. Консерванты, стабилизаторы, красители, подсластители, отдушки, ароматизаторы и тому подобное могут быть представлены в фармацевтической композиции. Например, бензоат натрия, аскорбиновая кислота и эфиры п-гидроксибензойной кислоты могут быть добавлены в качестве консервантов. Дополнительно антиоксиданты и суспендирующие агенты могут быть использованы. В различных вариантах осуществления изобретения спирты, эфиры, сульфатные алифатические спирты и тому подобные могут быть использованы в качестве поверхностно-активных агентов; сахароза, глюкоза, лактоза, крахмал, микрокристаллическая целлюлоза, кристаллическая целлюлоза, маннитол, светлый безводный силикат, алюминат натрия, метасиликат алюминат магния, синтетический силикат алюминия, карбонат кальция, гидрокарбонат натрия, гидрофосфат кальция, кальций карбоксиметил целлюлоза и тому подобное может быть использовано в качестве экципиентов; стеарат магния, тальк, гидрогенизированное масло и тому подобное могут быть использованы в качестве сглаживающих агентов; кокосовое масло, оливковое масло; кунжутное масло, арахисовое масло, соевое масло могут быть использованы в качестве суспензионных агентов или лубрикантов; фталат ацетат целлюлозы в качестве производного углевода, такого как целлюлоза или сахар или метилацетат - метакрилат сополимера в качестве производного поливинила могут быть использованы в качестве суспензионных агентов и пластификаторы, такие как эфир фталаты и тому подобное могут быть использованы в качестве суспензионных агентов.

[0053] Термин «фармацевтическая композиция» относится к смеси соединения, описанного здесь, с другими химическими компонентами, такими как дилюенты или дополнительные носители. Фармацевтическая композиция облегчает введение соединения в организм. Многочисленные техники введения фармацевтической композиции существуют в уровне техники, без ограничения к ним относятся пероральный, инъекционный, аэрозольный, парентеральный и местные способы введения. Фармацевтические композиции могут быть получены взаимодействием диводород фосфата свободной кислоты с неорганическим или органическим основанием, таким как гидроксид натрия или гидроксид магния. В некоторых вариантах осуществления изобретения фармацевтически приемлемые соли описанных здесь соединений (например, полученные in situ во время получения формы для внутривенного введения) представлены.

[0054] Термин «носитель» относится к химическому соединению, которое облегчает введение соединения в клетки или ткани.

[0055] Термин «дилюент» относится к химическому соединению, разбавленному водой, которая будет растворять композицию, а также стабилизировать биологически активную форму соединения. Соли, растворенные в буферных растворах, используются в качестве дилюентов в уровне техники. Одним часто используемым буферным раствором является фосфатный буферный солевой раствор, потому что он имитирует солевой состав человеческой крови. Поскольку буферные соли могут контролировать рН раствора при низких концентрациях, буферный дилюент редко изменяет биологическую активность соединения. Как используется здесь, «эксципиент» относится к инертному веществу, которое добавляют к композиции для придания ей следующих свойств, без ограничения, объема, консистенции, стабильности, связывающей способности, смазки, дезинтегрирующей способности и так далее. «Дилюент» представляет собой вид эксципиента.

[0056] Термин «физиологически приемлемый» относится к носителю или дилюенту, который не затрагивает биологическую активность и свойства соединения.

[0057] Фармацевтическая композиция, описанная здесь, может быть введена пациенту сама по себе, или в составе фармацевтических композиций, где они смешиваются с другими активными ингредиентами в виде комбинированной терапии или подходящих носителей или эксципиентов. В некоторых вариантах осуществления изобретения дозированная форма включает формы, в которых соединение вводится само по себе. Дополнительно дозированная форма может включать фармацевтическую композицию. В любом случае дозированная форма может содержать достаточное количество димера соединения для лечения бактериальной инфекции, как части конкретного протокола по введению лекарства, что понятно специалисту в данной области. Техники создания и введения соединений по настоящему изобретению могут быть обнаружены в источнике "Remington's Pharmaceutical Sciences," Mack Publishing Co., Easton, PA, 18 издание, 1990.

[0058] Подходящие способы введения могут включать, например, пероральный, ректальный, введение через слизистую оболочку, локальный или интестинальный способ; парентеральную доставку, включая внутримышечную, внутривенную, интрамедуллярную инъекцию, также интратекальную, прямую интравентрикулярную, интраперитонеальную, интраназальную или внутриглазную инъекцию. Соединение может быть введено в виде дозированной формы с продолжительным или контролируемым высвобождением, включая инъекцию веществ замедленного всасывания, осмотические насосы, таблетки, трансдермальные (включая электротранспорт) участки и тому подобное, для пролонгированного и/или временного импульсного введения с заранее определенной скоростью.

[0059] Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть изготовлены известным способом, например, с помощью обычного перемешивания, растворения, гранулирования, изготовления драже, растирания в порошок, эмульсификации, капсулирования или таблетирования.

[0060] Фармацевтические композиции могут быть получены обычным способом, используя один или несколько физиологически приемлемых носителей, включающие экципиенты и вспомогательные вещества, которые облегчают подготовку активных соединений для включения в форму, которая может быть использована фармацевтически. Состав зависит от выбранного способа введения. Любая из хорошо известных техник, дилюентов, носителей и эксципиентов могжет быть использована в качестве подходящих и понятных, например, указанные в Remington's Pharmaceutical Sciences, смотреть выше.

[0061] Инъецируемые вещества могут быть получены в обычных формах или в виде жидких растворов или суспензий, твердых формах, подходящих для растворения или суспендирования в жидкости до инъекции или в виде эмульсий. Подходящие эксципиенты представляют собой, например, воду, солевой раствор, декстрозу, маннитол, лактозу, лецитин, альбумин, глютамат натрия, гидрохлорид цистеина и тому подобное. Дополнительно, если желательно, инъецируемые фармацевтические композиции могут содержать небольшие количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как увлажняющие агенты, рН буферные агенты и тому подобное. Физиологически совместимые буферы включают, без ограничения, раствор Хэнкса (Hanks), раствор Ринджера (Ringer) или физиологического солевого раствора. Если желательно, абсорбция, улучшающая изготовление, может быть использована.

[0062] Для введение через слизистую оболочку, проникающие агенты, необходимые для проникновения через барьер, могут быть использованы в формах.

[0063] Фармацевтические формы для парентерального введения, например, с помощью болюсной инъекции или непрерывным вливанием, включает водные растворы активных соединений в водорастворимой форме. Дополнительно, суспензии активных соединений могут быть получены в виде подходящих масляных инъекционных суспензий. Водные инъекционные суспензии могут содержать вещества, которые увеличивают вязкость суспензии, такие как натрий карбоксиметилцеллюлоза, сорбитол или декстран. Необязательно суспензия может также содержать подходящие стабилизаторы или агенты, которые увеличивают растворимость соединений, позволяющих получить высококонцентрированные растворы. Составы для инъекций могут быть представлены в единичной дозированной форме, например в ампулах или контейнерах, содержащих несколько доз, с добавлением консерванта. Композиции могут содержать такие формы в виде суспензий, растворов или эмульсий в масляном или водном наполнителе, и могут содержать агенты для получения состава, например суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Альтернативно перед применением активный ингредиент может быть в виде порошка для получения лекарственной формы с подходящим наполнителем, например стерильной апирогенной водой.

[0064] Для перорального введения композиция может быть составлена комбинированием представляющей интерес композиции и фармацевтически приемлемых носителей, хорошо известных из уровня техники. Такие носители могут быть использованы дополнительно к катионному полимерному носителю, что дает возможность приготовить композиции по изобретению в виде таблеток, пилюль, драже, жидкостей, гелей, сиропов, суспензий и тому подобных для перорального приема пациентами, нуждающимися в лечении. Фармацевтические формы для перорального использования могут быть получены комбинированием активных соединений с твердым экципиентом, необязательным измельчением полученной смеси, и обработкой смеси гранул после добавления подходящих вспомогательных веществ, если желательно, получение таблеток или ядрышек драже. Подходящие эксципиенты представляют собой, в частности, наполнители, такие как сахара, включая лактозу, сахарозу, маннитол или сорбитол; целлюлозные формы, такие как кукурузный крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал, картофельный крахмал, желатин, трагакантовая камедь, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза и/или поливинилпирролидон (PVP), например Povidone. Если желательно, дезинтегрирующие агенты могут быть добавлены, такие как кросс-сшитый поливинилпирролидон (например, Crospovidone), агар или альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия. Ядрышки драже покрываются подходящей оболочкой. Для этой цели концентрированные растворы сахаров могут быть использованы, которые необязательно содержат гуммиарабик, тальк, поливинилпирролидон, карбополь гель, полиэтиленгликоль, и/или диоксид титана, лаковые растворы и подходящие органические растворители или смеси растворителей. Красители или пигменты могут быть добавлены к оболочке таблеток или драже для идентификации или для характеристики различных комбинаций доз активных соединений.

[0065] Фармацевтические формы, которые могут быть использованы перорально, включают push-fit капсулы (твердые капсулы из двух частей), выполненные из желатина, а также мягкие, герметичные капсулы из желатина и пластификатора, такого как глицерол или сорбитол. Твердые капсулы могут содержать активные ингредиенты в смеси с наполнителем, таким как лактоза, связующим веществом, таким как крахмалы и/или лубриканты, такие как тальк или стеарат магния и необязательно стабилизаторы. В мягких капсулах активные соединения могут быть растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как жирные масла, жидкие парафины или жидкие полиэтиленгликоли. Дополнительно стабилизаторы могут быть добавлены. Все составы для перорального введения должны быть в дозировке, подходящей для такого введения.

[0066] Для буккального введения композиции могут быть выполнены в форме таблеток или пастилок обычным способом.

[0067] Для введения ингаляцией композиция может быть обычным образом доставлена в форме аэрозоля из баллончика под давлением или распылителя, с использованием подходящего пропеллента, например дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторэтана, углекислого газа или другого подходящего газа. В случае аэрозоля под давлением дозированная единица может быть определена присутствием клапана для доставки фиксированного количества. Капсулы и картриджи, например, из желатина для использования в ингаляторе или инсуффляторе могут содержать порошковую смесь соединения и подходящей основы, например лактоза или крахмал.

[0068] Также описываемые здесь различные фармацевтические композиции включают хорошо известные в фармацевтической области интраокулярную, интраназальную и интрааурикулярную доставку. Подходящие проникающие агенты для этого применения хорошо известны из уровня техники. Такие подходящие фармацевтические формы чаще всего и предпочтительнее составляют, чтобы они были стерильные, изотонические и буферные для стабильности и комфорта. Фармацевтические композиции для интраназальной доставки могут также включать капли и спреи, часто подготовленные для имитации назальной секреции для того, чтобы гарантировать поддержание нормального цилиарного действия. Как описано в Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990), который приводится здесь для ссылки во всей его целостности и хорошо известен специалистам в данной области, подходящие фармацевтические формы являются чаще всего и предпочтительнее всего изотоническими, буферными для сохранения рН 5.5-6.5, и наиболее часто и предпочтительно содержат антимикробные консерванты и соответствующие стабилизаторы лекарственных средств. Фармацевтические формы для интрааурикулярной доставки включают суспензии и мази для местного применения в ухе. Наиболее распространенными растворителями для таких ушных форм являются глицерин и вода.

[0069] Композиции могут также представлять собой ректальные композиции, такие как суппозитории или удерживающая клизма, например, содержащая обычную основу для суппозитория, такую как масло какао или другие глицериды.

[0070] Дополнительно к формам, описанным предварительно, композиции могут быть также составлены в виде форм с веществами замедленного всасывания. Такие долго действующие формы могут быть введены имплантацией (например, подкожно или внутримышечно) или внутримышечной инъекцией. При этом, например, соединения могут быть смешаны с подходящими полимерными или гидрофобными материалами (например, в виде эмульсии в приемлемом масле) или ионобменными смолами или труднорастворимыми производными, например в виде труднорастворимой соли.

[0071] Для гидрофобных соединений подходящий фармацевтический носитель может представлять собой систему сорастворителей, содержащую бензиловый спирт, неполярное поверхностно-активное вещество (ПАВ), водорастворимый органический полимер и водную фазу. Распространенная система представляет собой систему сорастворителей VPD, которая содержит раствор 3% вес/объем бензилового спирта, 8% вес/объем неполярного ПАВ POLYSORBATE 80™ и 65% вес/объем полиэтиленгликоля 300, доведенных до объема абсолютным этанолом. Естественно, пропорции системы сорастворителей могут значительно изменяться без нарушения характеристик их растворимости и токсичности. Более того, идентичность компонентов сорастворителей может изменяться: например, другие низкотоксичные ПАВ могут использоваться вместо POLYSORBATE 80™; количество полиэтиленгликоля может изменяться; другие биосовместимые полимеры могут заменить полиэтиленгликоль, например поливинилпирролидон и другие сахара или полисахариды могут заменить декстрозу.

[0072] Способы лечения бактериальных инфекций могут включать введение терапевтически эффективного количества соединения, описанного здесь. Лечение бактериальной инфекции может также включать профилактическое введение терапевтических соединений для предотвращения инфекции или распространения инфекции у пациента при неминуемом риске, например у пациента, только что перенесшего хирургическое вмешательство, или у пациента с ослабленным иммунитетом или у пациента в зоне риска, если соединение не было введено. Соединения демонстрируют ингибиторную активность против широкого спектра бактерий, против метициллин резистентной Staphylococcus aureus (MRSA) и ванкомицин резистентной Enterococci (VRE) и имеют относительную антибиотическую активность с относительно низкой концентрацией или in vivo. Также соединения по настоящему изобретению могут проявлять потенциально антибактериальную активность против различных человеческих и животных патогенов, включая грамположительные бактерии, такие как Staphylococi, Enterococci и Streptococi, анаэробные микроорганизмы, такие как бактериоды и Clostridia, и кислотостойкие микроорганизмы, такие как Mycobacterium tuberculosis и Mycobacterium avium. В одном варианте осуществления изобретения бактериальная инфекция, которая может быть подвергнута лечению или состояние пациента с этой инфекцией может быть улучшено, представляет собой MRSA.

[0073] Композиции или фармацевтические композиции, описанные здесь, могут быть введены пациенту без каких-либо подходящих средств. Примеры, не ограничивающие объем притязаний, включают, среди прочего, (а) введение через пероральные способы, когда вводится капсула, таблетка, гранула, спрей, сироп или другие такие формы; (b) введение не пероральными способами, такие как ректальный, вагинальный, интрауретральный, интраокулярный, интраназальный или интрааурикулярный, где вводится водная суспензия или масляная форма или тому подобное или капли, спрей, суппозиторий, бальзам, мазь или тому подобное; (с) введение через инъекцию, подкожно, интраперитонеально (внутрибрюшинно), внутривенно, внутримышечно, внутрикожно, интраорбитально, внутрисуставно, интраспинально, интрастернально или тому подобное, включая доставку инфузионным насосом; также (d) локальное введение; как понятно специалисту в данной области для приведения активного соединения в контакт с живой тканью.

[0074] Фармацевтические композиции, подходящие для введения, включают композиции, где активные ингредиенты присутствуют в количестве эффективном для достижения заявленного назначения. В некоторых вариантах осуществления изобретения терапевтически эффективное количество соединения - это количество, эффективное для лечения бактериальной инфекции, например, у млекопитающего (человека). Терапевтически эффективное количество соединений, описанное здесь и необходимое в качестве дозы, будет зависеть от способа введения, вида животного, включая человека, которое необходимо подвергнуть лечению, и физических характеристик конкретного рассматриваемого животного. Дозировка может быть подобрана для достижения желаемого эффекта, но она также будет зависеть от таких факторов, как вес, диета, параллельный медицинский курс и другие факторы, которые специалист в данной области легко выявит. В частности, терапевтически эффективное количество означает количество соединения, эффективное для предотвращения или облегчения симптомов заболевания или улучшения состояния или продления жизни пациента. Определение терапевтически эффективного количества находится в рамках возможностей специалиста в данной области, в частности в свете детального описания, представленного здесь.

[0075] Как очевидно специалисту в данной области, полезная in vivo доза для введения и конкретный режим введения будут изменяться в зависимости от возраста, веса и вида млекопитающих, конкретных используемых соединений и конкретного назначения, для которого эти соединения используются. Определение уровня эффективной дозы, необходимой для достижения желаемого результата, может быть осуществлено специалистом в данной области, используя обычные фармакологические способы. Обычно клинические испытания на человеке начинают с низким уровнем доз, с постепенным увеличением до достижения желаемого эффекта. Альтернативно приемлемые исследования in vivo могут быть использованы для установления полезных доз и способов введения композиций, идентифицируемых настоящими методами, используя установленные фармакологические методы.

[0076] У животных (не человека) испытания потенциальных продуктов осуществляют с дозами более высокого уровня, с постепенным снижением доз до уровня, до тех пор, пока желаемый эффект больше не будет достигаться, а противоположный эффект не исчезнет. Дозировка может изменяться достаточно широко, в зависимости от желаемых эффектов и терапевтического назначения. Обычно дозировки могут быть равны приблизительно 10 микрограмм/кг до приблизительно 100 мг/кг веса тела, предпочтительно 100 микрограмм/кг до приблизительно 10 мг/кг веса тела. Дозировки могут быть основаны и рассчитаны исходя из площади поверхности пациента, что понятно специалисту в данной области.

[0077] Точная форма, способ введения и дозировка фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть выбрана индивидуальным медицинским специалистом с точки зрения состояния пациента. (См., например, Fingl и другие, 1975, в "The Pharmacological Basis of Therapeutics", которая приводится здесь для ссылки во всей ее целостности, с конкретной отсылкой на Главу 1, страницу 1). Обычно диапазон доз композиции, вводимой пациенту, может составлять приблизительно от 0.5 до 1000 мг/кг веса тела пациента. Дозировка может быть единичной или представлять собой серию из двух или более приемов в течение одного или более дней, как необходимо пациенту. В случае, когда дозировка для человека была установлена, по меньшей мере, для некоторого состояния, настоящее изобретение будет использовать те же самые дозы или дозы, которые составляют от 0.1% до приблизительно 500%, более предпочтительно от 25% до 250% установленной человеческой дозы. Там, где доза для человека не установлена, поскольку бывает случаи новых фармацевтических композиций, подходящая человеческая дозировка может быть подобрана от ED₅₀ или ID₅₀ значений или других подходящих значений, выведенных из in vitro или in vivo исследований, как определено исследованиями токсичности и эффективности у животных.

[0078] Необходимо отметить, что практикующий врач знает, как и когда прекратить, прервать или изменить лечение из-за токсичности или дисфункции органов. Наоборот практикующий врач также будет знать, как изменить лечение до более высокого уровня доз, если клинический ответ не является ожидаемым (исключая токсичность). Величина вводимой дозы будет изменяться в зависимости от серьезности состояния больного и способа введения. Серьезность состояния может, например, быть оценена частично, стандартными прогностическими методами оценки. Доза и возможно частота доз будут также изменяться согласно возрасту, весу тела и отклику индивидуального пациента. Программа, сравнимая с обсуждаемой выше, может быть использована в ветеринарии.

[0079] Хотя точная дозировка будет определена только в зависимости от конкретного лекарственного средства, в большинстве случаев некоторые общие правила, касающиеся дозировки, могут быть сформулированы. Режим ежедневного приема для взрослого пациента может представлять, например, пероральную дозу приблизительно от 0.1 мг - 2000 мг каждого активного ингредиента, предпочтительно от 1 мг до 500 мг, например от 5 до 200 мг. В других вариантах осуществления изобретения внутривенная, подкожная или внутримышечная доза каждого активного ингредиента составляет приблизительно от 0.01 мг - 100 мг, предпочтительно от 0.1 мг до 60 мг, например, от 1 до 40 мг. В случаях введения фармацевтически приемлемой соли дозировки могут быть рассчитаны для свободного основания. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция вводится от 1 до 4 раз в день. Альтернативно композиции по изобретению могут быть введены непрерывным внутривенным вливанием, предпочтительно с дозой каждого активного ингредиента до 1000 мг в день. Как понятно специалисту в данной области, в некоторых ситуациях необходимо ввести соединения, описанные здесь, в количествах, которые превышают или даже значительно превышают указанный выше, предпочтительный диапазон доз для того, чтобы эффективно и интенсивно вылечить конкретное заболевание или инфекцию. В некоторых вариантах осуществления изобретения соединения будут вводиться в течение периода непрерывной терапии, например в течение недели или более или месяцев или лет.

[0080] Количество и интервал могут быть подобраны индивидуально для обеспечения уровней плазмы активного фрагмента, которые являются достаточными для поддержания модулирующих эффектов или минимальной эффективной концентрации (МЕС). МЕС будет изменяться для каждого соединения, но может быть оценена на основании данных in vitro. Дозы, необходимые для достижения МЕС, будут зависеть от индивидуальных характеристик и способа введения. Однако ВЭЖХ исследования или биоисследования могут быть использованы для определения концентраций в плазме.

[0081] Диапазон доз может быть также определен, используя значение МЕС. Композиции должны быть введены, используя режим, который поддерживает уровни в плазме выше МЕС в течение 10-90% времени, предпочтительно между 30-90% и наиболее предпочтительно 50-90%.

[0082] В случаях местного введения или селективного потребления эффективная локальная концентрация лекарственного средства может не относиться к концентрации в плазме.

[0083] Количество введенной композиции может зависеть от пациента, от веса пациента, серьезности инфекции, способа введения и назначения, предписанного врачом.

[0084] Композиции, описанные здесь, могут быть оценены на эффективность и токсичность, используя известные способы. Например, токсикология соединения может быть установлена определением in vitro токсичности по отношению к клеточной линии, например, млекопитающего или предпочтительно человека. Результаты таких исследований часто прогнозируют токсичность у животных, таких как млекопитающие или, в частности, у человека. Альтернативно токсичность конкретных соединений на животной модели, такой как мыши, крысы, кролики или обезьяны, может быть определена, используя известные способы. Эффективность конкретного соединения может быть установлена, используя различные признанные способы, такие как in vitro способы, животные модели или клинические исследования на человеке. Признанные in vitro модели существуют почти для каждого класса состояний. Подобным образом приемлемые животные модели могут быть использованы для установления эффективности химических соединений для лечения таких состояний. При выборе модели для определения эффективности специалист сможет руководствоваться состоянием уровня техники для выбора соответствующей модели, дозы и способа введения, режима. Конечно, клинические испытания на человеке могут быть использованы для определения эффективности соединения на человеке.

[0085] Композиции, если желательно, могут быть представлены в упаковке или дозаторе, который может содержать одну или более дозированную форму с активным ингредиентом. Упаковка может содержать, например, металлическую или пластиковую фольгу, например блистерная упаковка. Упаковка или дозатор может содержать инструкцию по введению. Упаковка или дозатор может также содержать уведомление, связанное с контейнером в форме, предписанной правительственным агентством, регулирующим производство, использование или продажу лекарственного средства, это уведомление отражает одобрение формы лекарственного средства для введения человеку или его применение в ветеринарии. Такое уведомление, например, может быть маркировкой, одобренной Администрацией США по надзору в сфере лекарств и пищевых продуктов или одобренным продуктом вкладышем. Композиции, содержащие соединение по изобретению, с совместимым фармацевтическим носителем могут быть также получены, помещены в соответствующий контейнер и маркировка для лечения указанного состояния должна быть нанесена.

[0086] В некоторых вариантах осуществления изобретения в фармацевтической промышленности считается стандартной практикой использовать преимущественно чистый материал при получении фармацевтических композиций. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления изобретения «преимущественно чистый» относится к степени чистоты, требуемой для получения лекарственных форм, которые могут включать, например, небольшое количество аморфного материала или другого материала, где материал еще может достигать значительной степени текучести, отсутствию гигроскопичности и чистоты, подходящей для фармацевтического применения. В некоторых вариантах осуществления изобретения преимущественно чистое соединение содержит, по меньшей мере, около 96% соединения по весу, например, по меньшей мере, 96.1%, 96.2%, 96.3%, 96.4%, 96.5%, 96.6%, 96.7%, 96.8%, 96.9%, 97%, 97.1%, 97.2%, 97.3%, 97.4%, 97.5%, 97.6%, 97.7%, 97.8%, 97.9%, 98%, 98.1%, 98.2%, 98.3%, 98.4%, 98.5%, 98.6%, 98.7%, 98.8%, 98.9%, 99%, 99.1%, 99.2%, 99.3%, 99.4%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8%, 99.9% или 100% соединения.

[0087] Термины "приблизительно, "около" и "по существу" при их использовании здесь для указания количества, близкого к заявляемому, при котором все еще выполняется желаемая функция или достигается желаемый результат. Например, термины "приблизительно, "около" и "по существу" могут относиться к количеству, которое отличается от заявляемого значения в пределах менее 10%, менее 5%, менее 1%, менее 0.1% и менее 0.01%.

Примеры

Пример 1. Получение фосфат моноводород диэфира, Формула III

[0088] В этом и следующих примерах «Формула III» относится к соединению, где Z представляет собой: и М=ОН.

[0089] В 1-литровую, трехгорлую круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой, входным/выходным отверстиями для азота и термопарой было загружено соединение Формулы Ia, представленной ниже (16.0 г, 0.0499 моль), ТГФ (320 мл, 20 объемов) и Et₃N (21.9 г, 0.216 моль, 5.0 эквивалентов):

[0090] POCl₃ (3.31 г, 0.0216 моль, 0.5 эквивалентов) был по каплям добавлен через шприц за 5 минут. Температура реакции поддерживалась ниже 25°С. Смесь была оставлена на 16 часов при комнатной температуре, затем ВЭЖХ анализ (XBridge, С18) показал, что реакция завершена. Реакционный сосуд был затем погружен на ледяную баню, 500-мл капельная воронка с 320 мл Н₂О была присоединена к реакционному сосуду. Когда температура реакции достигла 2.7°С, H₂O была по каплям добавлена за 30 минут. Температура реакции поддерживалась ниже 10°С. По завершению добавления H₂O ледяная баня была убрана и смесь оставлена на 3 часа. Раствор был перенесен в 2-литровую круглодонную колбу и сконцентрирован при пониженном давлении на роторном испарителе. После удаления большинства ТГФ из раствора водная смесь была экстрагирована 5 1-литровыми порциями CH₂C₂:MeOH (9:1). Слои CH₂Cl₂ были объединены и сконцентрированы до темного масла. Этот материал был очищен на 200 г силикагеля, элюент 10% MeOH/CH₂Cl₂ до 20% 2 н. NH] в MeOH/CH₂Cl₂. Фракции, содержащие больше всего бис-эфира (оценено с помощью ТСХ Rf=0.3 элюент 20% 2 н. NH] в MeOH/CH₂Cl₂), были объединены и сконцентрированы при пониженном давлении на роторном испарителе, в результате образовался белый осадок. Колба, содержащая суспензию, была снята с роторного испарителя и снабжена магнитной мешалкой, затем оставлена перемешиваться с охлаждением до комнатной температуры за 3 часа, за это время суспензия загустела. Осадок был отфильтрован и высушен в вакуумной печи при 45°С в течение 16 часов с получением 3.55 г бис-эфира в виде серовато-белого твердого вещества (20% выход). ВЭЖХ анализ (Способ А): 99.0% (AUC), tR=16.3 мин. Эта реакция была повторена и объединенные партии соединения Формулы III (6.7 г) были суспендированы в 100 мл МеОН (15 объемов). Суспензия была нагрета до 40°С в течение 30 минут и затем оставлена охлаждаться до комнатной температуры за 1 час. Серовато-белый твердый остаток был отфильтрован и высушен в вакуумной печи при 40°С за 16 часов с получением 6.15 г соединения Формулы III (92% выход). ¹Н ЯМР нализ продукта соответствовал заявленной структуре. ВЭЖХ анализ (Способ А): 99.0% (AUC), tR=16.3 мин.

Пример 2. Получение диэфира диводород фосфата, Формула IV

[0091] В Примерах 2-5 «Формула IV» относится к соединению, где Z представляет собой: , n=0 и М=O-имидазолиум соль.

[0092] В 250-мл трехгорлую круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой, входным/выходным отверстиями для азота и термопарой было загружено соединение Формулы IIа, представленное ниже (5.0 г, 11.1 ммоль), карбонилдиимидазол (890 мг, 5.55 ммоль, 0.5 эквивалентов) и ДМФА (100 мл, 20 объемов):

[0093] Суспензия была нагрета при 50°С и выдержана при этой температуре в течение 4 часов, в этой точке ВЭЖХ анализ (XBridge, С 18) показал, что реакция завершена. Реакционная смесь была отфильтрована при 50°С и высушена в вакуумной печи при 50°С в течение 24 часов с получением 5.15 г имидазолиум соли (то есть соединение Формулы IV) в виде серовато-белого твердого осадка (98% выход). ¹Н ЯМР анализ продукта соответствует заявленной структуре. ВЭЖХ анализ (Способ А): 94.5% (AUC), tR=14.6 мин (см. табл. 1):

Таблица 1 Способ A (Waters XBridge С18 Колонка) Время (мин) Скорость (мл/мин) %А %В 0.0 1.0 98.0 2.0 15.0 1.0 5.0 95.0 25.0 1.0 5.0 95.0 27.0 1.0 98.0 2.0 30.0 1.0 98.0 2.0 А = 87% 25 мМ раствора бикарбоната аммония в воде/13% ацетонитрила
В = Ацетонитрил
Длина волны = 300 нм

Пример 3. Фармакокинетические исследования

[0094] Женские особи Balb/c (лабораторные белые) мышей, 6-7 недельного возраста (~20 г) были случайным образом разделены на группы из трех животных. Фармакокинетика каждого из тестируемых соединений была оценена. Тестируемые соединения (10 мг/кг) были введены через хвостовую вену или перорально изучаемым мышам. Кровь была отобрана через пункцию сердца на 5 (только для внутривенно введенных соединений), 15, 30 минуте и 1, 4, 6, 8, 12 и 24 часе (n=3 в каждый момент времени). Концентрация в плазме каждого из соединений Формулы Ia, III (как определено в Примере 1), и IV (как определено в Примере 2) была проанализирована путем использования утвержденного ВЭЖХ/УФ метода. Данные представлены на Фигуре 1 и Фигуре 2 (см. табл. 1-4):

Таблица 2 Фармакокинетические данные как для пролекарств, так и для активных компонентов, когда пролекарства Формулы IV (как определено в Примере 2) и Формуле III (как определено в Примере 1) введены мышам Введенное соединение Измеряемое соединение Rsq τ _1/2 (ч) T_max (ч) C_max (мкг/мл) AUC_0-24h (мкг ч/мл) Vz_obs (L/кг) CL_obs (L/ч/кг) внутривенно Формула IV 10 мг/кг Формула IV 1.00 0.77 0.08 4.30 7.00 1.53 1.39 внутривенно Формула IV 10 мг/кг Формула Ia 0.97 3.74 4.00 4.06 36.40 1.46 0.27 Перорально Формула IV 10 мг/кг Формула Ia 0.99 3.89 6.00 1.70 18.3 3.01 0.54 внутривенно Формула III 10 Ю мг/кг Формула III 0.93 3.05 0.08 5.79 1.14 33.43 7.61 внутривенно Формула III 10 10 мг/кг Формула Ia 0.58 12.04 4.00 0.17 1.16 48.65 2.80 Таблица 3 Фармакокинетические данные как для пролекарств родственной Формулы IV (как определено в Примере 2). так и для активного антибактериального агента Формулы Ia, когда соединение Формулы IV вводят или перорально или внутривенно в количестве 10 мг/кг (все концентрации в нг/мл). Время (час) Пероральный способ Формула Ia конц. Пероральный способ Формула IV конц. Внутривенный способ Формула Ia конц. Внутривенный способ Формула IV конц. 0.08 ND ND 984.41 4300 0.25 381.22 ND 1439.02 1515 0.5 821.29 ND 1588.67 3450 1 1053.56 ND 2692.21 2661 4 1520.58 ND 4059.94 157 6 1697.18 ND 2341.86 ND 8 1029.09 ND 896.47 ND 12 667.74 ND 1385.48 ND 24 65.26 ND 84.06 ND ND: Не обнаружено, потому что количество соединения ниже пределов обнаружения. Таблица 4 Фармакокинетические данные как для пролекарства родственной Формулы III (как определено в Примере 1). так и для активного антибактериального агента Формулы Ia, когда пролекарство Формулы III (как определено в Примере 1) вводят внутривенно в количестве 10 мг/кг (все концентрации в нг/мл) Время (ч) Внутривенное введение Формула III конц. Внутривенное введение Формула la конц. 0.08 5794.47 124.18 0.25 749.02 78.46 0.5 210.06 90.85 1 81.05 123.76 2 53.78 167.77 4 39.49 174.61 6 ND 131.45 8 ND 138.71 ND: Не обнаружено, потому что количество соединения ниже пределов обнаружения.

Пример 4. Определения минимальной ингибиторной концентрации

[0095] Минимальные ингибиторные концентрации были определены микродилюцией питательной микросреды в соответствии со способами (М7-А7), одобренными Институтом Клинических и Лабораторных Стандартов (CLSI), и интерпретированы, используя Alamar Blue для визуализации клеточной жизнеспособности клетки. Дилюции каждого из соединений были протестированы против S. aureus (золотистого стафилококка) штамм Смита или S. aureus плюс 20% мышиная сыворотка (см.табл.5):

Таблица 5 MIC результаты (в мкг/мл)   S. aureus Смит S. aureus Смит + 20% мышиная сыворотка Формула IIb (TR-701) >64 4 Формула III (как определено в Примере 1) >64 >64 Формула IV (как определено в Примере 2) >64 32

Пример 5

Тест на эффективность: модель мышиной септицемии

[0096] Женские особи Balb/c (лабораторные белые) мышей, 6-7- недельного возраста (~20 г) были случайным образом разделены на группы из 10 животных. Staphylococcus ayreus штамм Смита АТСС# 13709 был культивирован в течение ночи на BHI среде (сердечно-мозговой экстракт) при 37°С. Клетки были повторно разбавлены 1:10 и оставлены расти в течение 5 часов. Инокулум, использованный для заражения мыши, был получен разведением культуры в 5% свиной желудочной слизи/фосфатно-буферном растворе до концентрации 1×10⁶ КОЕ/мл. 100 мкл культуры/слизи было сохранено для подсчета первоначального КОЕ/мл последовательным разбавлением и выращиванием культуры. Мыши были заражены 500 мкл инокулума до введения лекарства. Лекарства были введены через 15 минут после заражения.

[0097] Мыши получили внутривенную дозу каждого из тестируемых соединений в концентрации, представленной в Таблицах 6 и 7, на основании рассчитанного среднего веса всех мышей (~20 г). 48 часов спустя после заражения количество выживших мышей было определено.

Таблица 6 Выживание женских особей белых мышей Balb/c, внутривенное введение. 200 мкл доза соединения Формулы III (как определено в Примере 1), 10 мышей были обработаны в каждой группе. Группа Лечение Концентрация, мг/кг Концентрация, мг/м² 48 ч выживание 1 Формула III 10 0.2 1/10 2 Формула III 5 0.1 1/10 3 Формула III 2.5 0.05 0/10 4 Формула III 1.25 0.025 1/10 5 инфекционный контроль -   1/10

[0098] Данные в Таблице 6 указывают, что соединение Формулы III является неэффективным в качестве антибиотика, потому что выжившие мыши были подобны инфекционному контролю, таким образом было продемонстрировано, что не все фосфатсодержащие соединения являются эффективными.

Таблица 7 Выживание женских особей белых мышей Balh/c, внутривенное введение, 200 мкл доза соединения Формулы IV (как определено в Примере 2), 10 мышей были обработаны в каждой группе Группа Лечение Концентрация мг/кг Концентрация мг/м² 48 ч выживание Группа 1 Формула IV 10 0.2 10/10 10/10 2 Формула IV 5 0.1 10/10 10/10 3 Формула IV 2.5 0.05 8/10 7/10 4 Формула IV 1.25 0.025 5/10 2/10 5 инфекционный контроль -   2/10 1/10

[0099] Данные, представленные в Таблице 7, показывают 100% (то есть 10/10), степень выживания спустя 24- и 48-часовой интервал при дозах 10 и 5 мг/кг. Не претендуя ни на какую теорию, можно отметить, что, видимо, присутствие дополнительного фосфата в Формуле IV увеличивает пространство между Z фрагментами в сравнении с Формулой III, позволяющей фосфатазе освободить фосфат более легко. Таким образом, ожидается, что присутствие дополнительных фосфатных групп между Z фрагментами действовало бы так же, как дифосфат.

Таблица 8 Сравнение выживания женских особей белых мышей Balb/c, внутривенное введение соединения Формулы IV (как определено в Примере 2) и соли динатрий фосфата Формулы Ia (TR-701), доза 200 мкл, 10 мышей были обработаны в каждой группе Концентрация, мг/кг % Выживания - 10 мышей на группу   20 10 5 2.5 1.25 инфекционный контроль 24 ч TR701 100 100 90 60 60   24 ч димер   100 100 80 50   0 лечение           20 48 ч TR701 100 100 90 40 50   48 ч димер   100 100 70 20   0 лечение 48           10

[0100] Те же процедуры были использованы, что и в описании Проверки Эффективности Примера 5. Данные в таблице 8 демонстрируют, что уровень выживания неожиданно увеличился при внутривенном введении соединения формулы IV (как определено в Примере 2) в сравнении с TR-701 (соль динатрий фосфата Формулы Ia) в количестве 5 и 2.5 мг/кг, как показано в Таблице 8.

Изобретение относится к медицине и описывает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество соединения, имеющего следующую структуру:

где соединение в фармацевтической композиции присутствует в количестве, эффективном для лечения или профилактики антибактериальной инфекции у млекопитающего субъекта. Способы получения и применения этих дозированных форм или фармацевтических композиций также представлены. 5 н. и 10 з.п. ф-лы, 8 табл., 5 пр., 4 ил.

1. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество соединения, имеющего следующую структуру:

где каждое Z представляет собой:

где * является точкой соединения Z с Р;
где М представляет собой OR_l;
где R^la и R^lb независимо друг от друга выбираются из Н и F, при условии, что как
минимум одно из R^la и R^lb представляет собой F; и
где R_l представляет собой Н или фармацевтически приемлемый катион.

2. Фармацевтическая композиция по п.. 1, в которой R_l представляет собой фармацевтически приемлемый катион.

3. Фармацевтическая композиция по п. 2, в которой R_l представляет собой катион натрия.

4. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой каждая Z представляет собой:

5. Фармацевтическая композиция по п. 4, в которой каждая Z представляет собой:

6. Фармацевтическая композиция по п. 1, дополнительно включающая фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или наполнитель.

7. Фармацевтическая композиция по п. 5, в которой R_l представляет собой катион натрия.

8. Фармацевтическая композиция по п. 5, в которой R_l представляет собой Н.

9. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой указанное соединение представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

10. Фармацевтическая композиция по п. 9, в которой указанное соединение представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

11. Способ получения соединения в фармацевтической композиции по п. 1, включающий стадию обработки соединения, имеющего структурную формулу Z-H, фосфорилирующим агентом,
где Z-H представляет собой:

где R^la и R^lb независимо друг от друга выбираются из Н и F, при условии, что как минимум одно из R^la и R^lb представляет собой F.

12. Способ получения соединения в фармацевтической композиции по п. 1, включающий стадию обработки соединения, имеющего структурную формулу Z-P′, дегидратирующим агентом, где Z-P′ представляет собой:

где Р′ представляет собой моно- или диводород фосфатную группу; и
где R^la и R^lb независимо друг от друга выбираются из Н и F, при условии, что как
минимум, одно из R^la и R^lb представляет собой F.

13. Способ по п. 11, в котором фосфорилирующий агент представляет собой РОС1₃.

14. Способ лечения бактериальной инфекции, включающий назначение фармацевтической композиции по п. 1 нуждающемуся в этом пациенту.

15. Способ лечения бактериальной инфекции, включающий назначение фармацевтической композиции по п. 9 нуждающемуся в этом пациенту.