ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ ПИЩЕВАЯ КОМПОЗИЦИЯ Российский патент 2015 года по МПК A61K31/375 A61K31/352 A61K31/734 

Лечебно-профилактическая пищевая композиция

Изобретение относится к медицинской и пищевой промышленности, в частности к производству препаратов, изготовленных из морских гидробионтов, витаминов и растительного сырья и используемых в качестве пищевой добавки и элемента лечебно-профилактического питания.

В мире, и в частности в России, сложилась неблагоприятная эпидемиологическая ситуация по так называемым «болезням цивилизации», в первую очередь, по сердечно-сосудистым заболеваниям и ишемической болезни сердца, сахарному диабету 2-го типа, ожирению и артериальной гипертензии, которые часто сочетаются друг с другом, составляя сложный симтомокомплекс, получивший название «метаболический синдром». Одной из главных причин сердечно-сосудистой патологии и сосудистых катастроф, таких как инфаркт миокарда и инсульт головного мозга, является атеросклероз, ведущим патогенетическим механизмом которого служит окислительная модификация липопротеинов низкой плотности и хронический воспалительный ответ в области атероматозных поражений сосудистой стенки. Хронические воспалительные процессы индуцируют инсулинорезистентность и ведут к формированию диабета 2-го типа. Ключевыми звеньями патогенеза метаболического синдрома, воспалительных процессов, сердечно-сосудистых заболеваний и множества ишемических расстройств − в частности инфарктов миокарда и ишемических поражений головного мозга, считаются активация перекисных процессов и окислительный стресс. Соответственно, в качестве компонентов пищи, направленных на лечение и профилактику упомянутых «болезней цивилизации» и ишемических расстройств в настоящее время используют антиоксиданты.

На сегодняшний день антиоксиданты заняли значительное место в клинической практике в профилактике преждевременного старения, сердечно-сосудистых заболеваний и сосудистых катастроф. Первоначально наиболее широкое распространение получили витамины с антиоксидантными свойствами, такие как α-токоферол, β-каротин, ретинол, аскорбиновая кислота. В настоящее время в качестве антиоксидантов внимание исследователей и клиницистов все больше привлекают растительные флавоноиды. Флавоноиды проявляют высокую антиоксидантную активность in vitro, нейтрализуя активные метаболиты кислорода, азота и хлора, такие как супероксид, гидроксильный радикал, пероксильные радикалы, гипохлорная кислота, пероксинитрит и др. Кроме того, они хелатируют ионы металлов, часто снижая прооксидантную активность последних [1]. Поэтому логично предполагать, что флавоноиды могут быть эффективными лечебно-профилактическими средствами.

Один из самых мощных природных антиоксидантов прямого действия, наиболее широко используемый при создании новых комплексных лекарственных препаратов, косметических средств и пищевых продуктов - биофлавоноид дигидрокверцетин (3,3,4,5,7-пентагидроксифлавонон). В качестве антиоксидантного нутрицевтика дигидрокверцетин применяют при сердечно-сосудистых заболеваниях, возраст-ассоциированных нарушениях и хронических воспалительных процессах [2]. За счет антиоксидантной активности это соединение проявляет капилляропротективные свойства, ограничивает развитие микроангиопатий при сахарном диабете, снижает уровень сахара в крови, улучшает показатели микроциркуляции, центральной и периферической гемодинамики при ишемической болезни сердца и инфаркте миокарда, оказывает антиатерогеный и антивоспалительный эффекты.

Антиоксиданое оздоровительное действие дигидрокверцетина продемонстрировано в большом количестве исследований [2]. Тем не менее широкое внедрение в клиническую практику антиоксидантов должно быть обосновано методами доказательной медицины. Несмотря на, казалось бы, очевидную пользу от применения антиоксидантов, мета-анализ результатов множества клинических исследований показал отсутствие реальной эффективности антиоксидантных препаратов и даже их вред при применении в высоких дозах [3, 4, 5, 6, 7]. Использование витаминных антиоксидантов, как бы оно ни казалось экспериментально привлекательным, фактически противоречит данным кохрановских отчетов. Аналогичные данные существуют в отношении флавоноидов. В условиях in vivo и в клеточных культурах антиоксидантные эффекты флавоноидов обнаруживаются далеко не всегда. Более того, во многих работах демонстрируются их прооксидантные эффекты [8, 9].

Данные о способности дигидрокверцетина вести себя как прооксидант подтверждаются в литературе [10, 11, 12] и объясняются тем, что в водных растворах флавоноиды могут окисляться и в присутствии металлов с переменной валентностью вызывать образование высокореактивных гидроксильных радикалов. Также они могут служить субстратом для пероксидаз и металлоферментов, приводящих к формированию прооксидантов или алкилирующих продуктов типа хинонов и метиленхинонов [13].

Одним из механизмов ингибирования флавоноид-индуцированной генерации активных кислородных метаболитов in vitro и in vivo может быть присутствие в плазме крови или межклеточной среде достаточных концентраций антиоксидантов других групп, например аскорбиновой кислоты [14]. Известно, что аскорбиновая кислота предохраняет и усиливает антиоксидантную и антимутагенную активность флавоноидов типа кверцетина, восстанавливая их окисленные формы, и таким образом регенерируя их антиоксидантные функции [15, 16]. С другой стороны, окисленная аскорбиновая кислота восстанавливается флавоноидами, поэтому в комплексе с ними антиоксидантное действие аскорбата многократно возрастает. Mikstacka с соавт. показали [17], что кверцетин и другие флавоноиды могут оказывать неаддитивный, синергичный антиоксидантный эффект. По данным Мельниковой и Иоффе [18] дигидрокверцетин и аскорбиновая кислота в растворе ингибируют окисление друг друга и взаимоусиливают антиоксидантные эффекты.

Известна композиция, обладающая общеукрепляющим и антиоксидантным действием, содержащая дигидрокверцетин, аскорбиновую кислоту и дополнительно - микрокристаллическую целлюлозу, пектин, сорбит, экстракт шиповника сухой, заменитель сахара и кальция или магния стеарат в следующих соотношениях, вес.%: дигидрокверцетин - 0,5-7,0, МКЦ - 6,0-42,2, кислота аскорбиновая - 1,0-30,0, пектин - 1,0-15,0, сорбит - 5,0-30,0, экстракт шиповника сухой - 10,0-50,0, заменитель сахара - 0,2-1,0, кальция или магния стеарат - 0,1-1,0 (RU 2187319, МПК А61К 35/78, А61Р 39/06, А61К 35/78, А61К 31:351, А61К 31:047, А61К 33:06, А61К 31:375, опубл. 20.08.2002). Недостатками данного средства являются многокомпонентность состава, его направленность на общеукрепляющее воздействие на организм и низкая лечебно-профилактическая активность в отношении таких компонентов метаболического синдрома, как гиперхолестеринемия, артериальная гипертензия и ожирение.

Известна биологически активная добавка к пище на основе дигидрокверцетина, отличающаяся тем, что она содержит хитозан, аскорбиновую кислоту и экстракт зеленого чая (RU 2410979, МПК A23L 1/30, A23L 1/302, опубл. 10.02.2011). Данная добавка обладает антиоксидантными, антивоспалительными и адаптогенными свойствами, однако она позиционируется как общеукрепляющее средство, не имеет отчетливой лечебно-профилактической направленности и не способна снижать повышенное артериальное давление и избыточную массу тела, характерные для метаболического синдрома.

Известно гемореологическое средство (RU 2150282, МПК A61K 35/78, A61K 31/375, опубл. 10.06.2000), содержащее диквертин (дигидрокверцетин с примесью его биогенетических предшественников) и аскорбиновую кислоту. Средство направлено на снижение вязкости крови и торможение агрегации эритроцитов, но не предназначено для терапии метаболического синдрома и ишемических расстройств.

Известна биологически активная добавка к пище «Мигикальгин» (RU 2342857, МПК A23L 1/30, A61K 36/02, A23L 1/333, опубл. 10.01.2009), состоящая из альгината кальция, белкового гидролизата моллюсков и, в качестве дополнительных ингредиентов - аскорбиновой кислоты и глюкозы. Эта биологически активная добавка предназначена для употребления в качестве энтеросорбента, источника кальция и легкоусвояемых аминокислот. Недостатки данной биологически активной добавки - слабая лечебно-профилактическая направленность в плане ишемических расстройств и заболеваний, являющихся компонентами метаболического синдрома.

Наиболее близким по совокупности существенных признаков к предлагаемой композиции является биологически активная добавка «Виталарикс Кардио» (RU 2357746, МПК A61K 36/15, A61K 31/4415, A61K 31/375, A61P 9/00, A61P 37/00, опубл. 10.06.2009), содержащая биофлавоноидный комплекс (дигидрокверцетин, дигидрокемпферол, нарингенин), витамин B6, кобамамид, фолиевую кислоту, аскорбиновую кислоту и наполнитель, направленная на профилактику сердечно-сосудистых и воспалительных заболеваний и на нейтрализацию пищевых, алкогольных и наркотических отравлений. Недостатком данной биологически активной добавки являются противопоказания к применению у лиц с рисками онкозаболеваний, из-за наличия фолиевой кислоты, одним из таких факторов риска считается метаболический синдром.

Задачей заявленного изобретения является улучшение лечебно-профилактических свойств композиции дигидрокверцетина и аскорбиновой кислоты, а также композиции альгината и аскорбиновой кислоты.

Технический результат данного изобретения заключается в создания лечебно-профилактической пищевой композиции, обладающей антиоксидантными, антидиабетическими, гипогликемическими, липидснижающими, антигипертензивными, антиатерогенными и антивоспалительными свойствами, которые помогают эффективно бороться с ишемическими нарушениями и заболеваниями, ассоциированными с метаболическим синдромом.

Технический результат достигается за счет создания лечебно-профилактической пищевой композиции, характеризующейся тем, что представляет собой смесь дигидрокверцетина, альгината и аскорбиновой кислоты при следующем соотношении компонентов, вес.ч.:

Дигидрокверцетин 1-10 Альгинат 1-10 Аскорбиновая кислота 1-2

Дополнительно данная смесь может содержать воду, а также экстракт из растений или любой из соков, выбранный из группы: ягодный, фруктовый, овощной, березовый.

Выбор соотношения компонентов композиции основывался на желании предотвратить прооксидантное поведение дигидрокверцетина добавлением аскорбиновой кислоты. Было показано, что относительно небольшие дозы аскорбиновой кислоты (~1/10-1/5 от дигидрокверцетина) отменяют прооксидантные эффекты и достаточны для отчетливого антиоксидантного эффекта этой пары соединений, а при увеличении доли аскорбиновой кислоты до 50% (дигидрокверцетин:аскорбиновая кислота=1:1) антиоксидантный эффект остается высоким. Выбор доли альгината в композиции основывался на литературных данных, которые свидетельствовали о том, что для проявления его фармакологических свойств, в т.ч. антиадипогенных (антилипогенных) эффектов, его доля не должна быть меньше 1/3 общей массы композиции. Эффективность заявленных соотношений подтверждается результатами экспериментов, приведенных ниже.

В отличие от уже известных лечебно-профилактических пищевых композиций в состав заявляемой композиции входит полисахарид морских водорослей - альгиновая кислота, представляющая собой линейный гетерополисахарид с выраженными свойствами энтеросорбента и используемая в виде альгината. В хорошо контролируемых исследованиях установлено, что этот ингредиент заявляемой композиции снижает вызванную приемом пищи гипергликемию и способствует поддержанию уровня инсулина и глюкозы крови на нормальном уровне [19, 20, 21]. Тем самым альгинат эффективно снижает риск развития и прогрессирования диабета 2-го типа и как самостоятельного заболевания, и как компонента метаболического синдрома [22]. Одновременно альгинат индуцирует ряд механизмов, снижающих потребление пищи и адипогенез (липогенез). Показано, что альгинат вызывает чувство насыщения и снижение аппетита, значительно уменьшает всасывание жиров и общий калораж пищи, при курсовом приеме приводит к избавлению от ожирения и к снижению избыточной массы тела [23, 24, 25, 26, 27]. Наряду с этим альгиновая кислота и ее соли являются эффективными сорбентами холестерина и жирных кислот, уменьшают энтерогепатическую циркуляцию холестерина и снижают уровень холестерина и триглицеридов крови [28]. Ряд экспериментальных исследований свидетельствует об очень эффективном антигипертензивном действии олигосахаридов альгиновой кислоты [29, 30, 31]. Олигосахариды альгината стимулируют рост бифидобактерий, молочнокислых бактерий и бактероидов, тем самым нормализуя состав микрофлоры кишечника [32] и усиливая продукцию пропионата, индуктора глюкозо-зависимого инсулинотропного полипептида (Glucose-dependentInsulinotropicPolypeptide), который служит ключевым модулятором секреции инсулина и метаболизма глюкозы [33]. Альгинат нормализует моторику кишечника, улучшает переваривание пищи, снимает диспепсические явления, препятствует развитию гепатопатий. Хелатирующие свойства альгината обеспечивают связывание и выведение из организма тяжелых металлов и радионуклидов, в том числе катионов алюминия, свинца, меди, ртути, кадмия, бария, цезия, стронция. Связывание катионов металлов, а также активность карбоксильных групп олигосахаридов альгиновой кислоты лежат в основе значительного антиоксидантного потенциала альгината [34]. Таким образом, применение альгинатов оказывает лечебно-профилактическое действие в отношении всех патологических состояний, кластеризующихся в метаболический синдром, включая инсулинорезистентность, абдоминальное ожирение, гиперлипидемию и артериальную гипертензию [35], а дезинтоксикационная активность альгината и его антиоксидантные эффекты, как и эффекты других антиоксидантов, способны оказывать самое разностороннее оздоровительное действие. Наконец, альгинаты уменьшают пищевую аллергическую нагрузку на организм и противостоят аутоиммунным и иммуновоспалительным патологическим процессам [36], однако при этом стимулируют неспецифический иммунный ответ, повышая противоинфекционную резистентность организма [37, 38, 39, 40].

Биологическая активность заявленного изобретения иллюстрируется следующими примерами исследований.

Пример 1.

На фиг. 1 показано влияние разных доз дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС), альгината натрия (альг) и их комбинаций на содержание ТБК-активных продуктов в плазме крови мышей ICR с системным воспалением, индуцированным введением липополисахаридов (ЛПС). Препараты вводили в водном растворе ежедневно внутрижелудочно в течение 7 сут. На 8-е сут. внутрибрюшинно однократно вводили ЛПС E.Coli 0111:B4 в дозе 0,5 мг/кг массы тела; кровь для исследования забирали через 4,5 ч после инъекции ЛПС. Результаты выражены в % по отношению к группе интактных животных; цифра возле названия препарата означает дозу в мг/кг массы тела животного.

Как показало исследование, сочетание дигидрокверцетина с аскорбиновой кислотой приводит к антиоксидантному эффекту. Введение альгината в композицию дигидрокверцетин - аскорбиновая кислота делало антиоксидантный эффект еще более значительным, хотя антиоксидантное влияние альгината само по себе отмечалось лишь на уровне тенденции. Мощное антиоксидантное действие композиции дигидрокверцетин - аскорбиновая кислота - альгинат позволяет говорить о заявляемой композиции как об эффективном средстве для коррекции нарушенного баланса про- и антиоксидантов при самой разной патологии.

Пример 2.

Для оценки действия заявляемой композиции на уровень воспалительного ответа готовили сухие порошки, состоящие из дигидрокверцетина, витамина C и альгината в весовых соотношениях, соответственно, 1:2:10, 5:1:10 и 10:2:1, в течение 1 нед. скармливали их животным в указанных ниже дозах (фиг.4), затем вызывали эндотоксинемию и оценивали содержание в плазме крови фактора некроза опухоли альфа (ФНО-α). Как показано на фиг.4, дигидрокверцетин и (в меньшей степени) витамин C проявляют провоспалительное действие (соответственно, P<0,001 и P<0,05), тогда как применение сочетания этих соединений оказывает отчетливый (P<0,01) антивоспалительный эффект. Сочетание в одном препарате альгината и витамина С также вызывало достоверное (P<0,05) снижение продукции ФНО-α в плазме крови. Наиболее выраженное (P<0,001) антивоспалительное действие наблюдалось при одновременном использовании в одной композиции дигидрокверцетина, витамина C и альгината. Приведенный пример действия заявляемой композиции свидетельствует, что сочетание входящих в нее компонентов оказывает синергичный антивоспалительный эффект.

На фиг. 2 показано влияние дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (вит C), альгината натрия (альг) и их комбинаций на содержание фактора некроза опухоли альфа (ФНО-α) в плазме крови мышей ICR с системным воспалением, индуцированным введением ЛПС. Препараты вводили (скармливали) ежедневно в течение 7 сут. На 8-е сут. внутрибрюшинно однократно вводили ЛПС E.Coli 0111:В4 в дозе 0,5 мг/кг массы тела; кровь для исследования забирали через 4,5 ч после инъекции ЛПС. Результаты выражены в пг/мл; цифра возле названия препарата означает дозу в мг/кг массы тела животного.

Пример 3.

Поскольку заявляемая композиция предназначена для лечебно-профилактического воздействия при патологических процессах, связанных с окислительным стрессом, с атеросклеротическими и постатеросклеротическими изменениями, с нарушениями липидного баланса, было исследовано влияние композиции и ее ингредиентов на окисляемость липопротеинов низкой плотности (ЛПНП). Окислительная модификация ЛПНП считается ключевым событием в атерогенезе, и снижение резистентности ЛПНП к окислению является индикатором и патогенетическим фактором развития дислипопротеинемий, сердечно-сосудистых заболеваний, ишемической болезни сердца, диабета, диффузных заболеваний печени, нарушений детоксикации, неспецифической защиты в системе крови, ишемических расстройств и антиоксидантной протекции биологических структур [41]. Оценку влияния заявляемой композиции и ее ингредиентов на резистентность ЛПНП к окислению проводили по методу Esterbauer и соавт. [42] в модификации Рагино и соавт [43]. Сыворотку крови для исследования получали в клинике ФГБУ НИИТП СО РАМН, г. Новосибирск.

На фиг. 3 показано влияние дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС), альгината натрия и их композиций на показатели резистентности ЛПНП к окислению. Липопротеины низкой плотности, выделенные из сыворотки крови больных с явлениями метаболического синдрома, окисляли при 37°С в присутствии 50 мкмоль CuSO₄ и через определенные промежутки времени определяли концентрацию ТБК-реактивных продуктов. Концентрация ДГК - 5 мкг/мл, витС - 1 мкг/мл, альгината - 1 мкг/мл. Результаты выражены в нмоль МДА/мг белка ЛПНП.

Анализ эффектов заявленной композиции и композиций на основе дигидрокверцетина, витамина С и альгината показал, что заявленная композиция увеличивает резистентность ЛПНП к окислению наиболее выраженно. Это позволяет заключить, что данная композиция может использоваться в профилактике и комплексной терапии атеросклеротического процесса, гиперлипидемий, воспалительных заболеваний и патологических расстройств, ассоциированных с окислительным стрессом.

Пример 4.

Наряду с антиоксидантной активностью оценивали гипогликемическое действие заявляемой композиции и ее ингредиентов. С этой целью у мышей линии ICR проводили тест толерантности к глюкозе.

На фиг. 4 показано влияние композиций на основе дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС) и альгината натрия на результаты теста толерантности к глюкозе у мышей ICR. Воду или препараты вводили внутрижелудочно 1 раз в день в течение 8 дней в следующих дозах: ДГК - 100 мг/кг, витС - 10 мг/кг, альгинат натрия - 50 мг/кг. Тест осуществляли введением натощак 10% раствора D-глюкозы внутрибрюшинно в дозе 3,3 г/кг, с последующим измерением ее уровня в крови каждые 30 мин. Измерение концентрации глюкозы в крови осуществляли прижизненно с помощью глюкометра «OnetouchUltra» (LifeScan, США). Результаты выражены в ммоль/л.

Анализ показал, что различия между средними значениями уровня глюкозы в контрольной группе животных и в группах животных, получавших ДГК, ДГК+витС и альгинат+витС достоверно отличаются. Гипогликемический эффект заявляемой композиции был наиболее значительным и достоверно превосходил эффекты прототипных сочетаний ДГК+витС и альг+витС. Ускоренное восстановление уровня глюкозы в циркулирующей крови свидетельствует о повышении ее потребления тканями. Это означает возможность использования предлагаемой композиции в комплексной терапии сахарного диабета 2-го типа в качестве лечебно-профилактического средства.

Пример 5.

Влияние заявляемой композиции на липидный обмен оценивали у мышей в экспериментальной модели гиперлипидемии, вызванной введением полоксамера 407. Мышам ежедневно в течение 7 дней внутрижелудочно вводили питьевую воду (контрольная группа) или препараты, на 6-е сутки животные получали однократную внутрибрюшинную инъекцию полоксамера 407 (1 г/кг), на 8-е сутки животных выводили из эксперимента и получали плазму крови, в которой определяли содержание триглицеридов и холестерина.

На фиг. 5 показано влияние композиций на основе дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС) и альгината натрия (альг) на содержание триглицеридов в плазме крови мышей C57Bl/6 с полоксамер-индуцированной гиперлипидемией. Дозы вводимых препаратов: ДГК - 100 мг/кг, витС - 10 мг/кг, альгинат натрия - 50 мг/кг. Содержание триглицеридов определялось ферментативным колориметрическим методом с помощью наборов «ОльвексДиагностикум» (Россия). Результаты выражены в ммоль/л.

На фиг. 6 показано влияние композиций на основе дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС) и альгината натрия (альг) на содержание холестерина в плазме крови мышей C57Bl/6 с полоксамер-индуцированной гиперлипидемией. Дозы вводимых препаратов: ДГК - 100 мг/кг, витС - 10 мг/кг, альгинат натрия - 50 мг/кг. Содержание холестерина определялось ферментативным колориметрическим методом с помощью наборов «ОльвексДиагностикум» (Россия). Результаты выражены в ммоль/л.

Полученные данные по оценке влияния композиций на основе дигидрокверцетина, витамина С и альгината натрия на полоксамер-индуцированную гиперхолестеринемию и гипертриглицеридемию продемонстрировали, что заявляемая композиция оказывает максимальный гиполипидемический эффект. Сделан вывод, что данная композиция может служить лечебно-профилактическим средством в комплексной терапии нарушений липидного обмена, связанных с развитием гиперлипидемий.

Пример 6.

В экспериментах на генетически гипертензивных крысах было исследовано влияние композиций на основе дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС) и альгината (альг) на величину артериального давления. Крысы-самки линии НИСАГ в течение 14 дней получали внутрижелудочно воду (контрольная группа) или исследуемые препараты. Артериальное давление измерялось неинвазивным методом с помощью аппарата CODAMonitor (KentScientificCorp.).

На фиг. 7 показано влияние композиций на основе дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС) и альгината натрия (альг) на уровень артериального давления у крыс линии НИСАГ через 14 дней после ежедневного внутрижелудочного приема препаратов. Дозы препаратов: ДГК - 100 мг/кг, витС - 10 мг/кг, альгинат натрия - 50 мг/кг. Темные колонки - систолическое давление, светлые - диастолическое. Результаты выражены в мм. рт. ст.

Согласно полученным результатам альгинат-содержащие препараты оказывают достоверное антигипертензивное действие, причем заявляемая композиция имеет наиболее выраженный эффект. Очевидно, данная композиция может быть эффективным компонентом профилактики и комплексной терапии артериальной гипертензии.

Пример 7.

Влияние заявляемой композиции на ишемическое поражение ткани оценивали у крыс в модели глобальной ишемии головного мозга, вызванной билатеральной экстравазальной окклюзией общих сонных артерий в сочетании с системной гипотензией согласно рекомендациям [44]. Крысам-самцам породы Вистар в течение 14 сут. ежедневно внутрижелудочно вводили исследуемые препараты или воду. Затем животных атропинизировали, под наркозом (Золетил+Ксилазин) с обеих сторон препарировали общие сонные артерии, накладывали на них лигатуры, операционную рану обрабатывали антисептиком, послойно зашивали и далее в течение 4 часов вызывали ортостатическую гипотонию. Лигатуры снимали через 24 часа. Степень поражения оценивали через 72 часа после операции по числу выживших животных (фиг. 7) и по площади некроза, выявляемого на тотальных срезах ткани мозга, окрашенных 2,3,5-трифенилтетразолием хлоридом (фиг. 8).

На фиг. 8 показано влияние композиций на основе дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС) и альгината натрия (альг) на выживание животных через 72 ч после острой ишемии головного мозга (ИГМ). Дозы вводимых препаратов: ДГК - 100 мг/кг, витС - 10 мг/кг, альгинат натрия - 50 мг/кг. Число выживших животных выражено в процентах от исходного количества в группе.

На фиг. 9 показано влияние композиций на основе дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (витС) и альгината натрия (альг) на выживание животных через 72 ч после острой ишемии головного мозга (ИГМ). Дозы вводимых препаратов: ДГК - 100 мг/кг, вит C - 10 мг/кг, альгинат натрия - 50 мг/кг. Число выживших животных выражено в процентах от исходного количества в группе.

На фиг. 10 показано влияние композиций на основе дигидрокверцетина (ДГК), аскорбиновой кислоты (вит C) и альгината натрия (альг) на степень ишемического поражения головного мозга (ИГМ), вызванного у крыс Вистар билатеральной окклюзией общих сонных артерий в сочетании с постуральной гипотонией. Дозы вводимых препаратов: ДГК - 100 мг/кг, вит C - 10 мг/кг, альгинат натрия - 50 мг/кг. Через 72 ч после операции мозг животных извлекали, получали фронтальные срезы органа, окрашивали их 1% трифенилтетразолием и морфометрически оценивали зону поражения. Результаты выражали в процентах по отношению к общей площади среза.

Согласно полученным результатам альгинат-содержащие препараты оказывают достоверное антигипертензивное действие, причем заявляемая композиция имеет наиболее выраженный эффект. Очевидно, данная композиция может быть эффективным компонентом профилактики и комплексной терапии артериальной гипертензии.

Таким образом, заявленная лечебно-профилактическая пищевая композиция обладает антидиабетическими, гипогликемическими, гиполипидемическими, антигипертензивными, антиадипогенными (антилипогенными), антивоспалительными и антиоксидантными свойствами и позволяет эффективно бороться с ишемическими расстройствами и проявлениями метаболического синдрома.

Литература

1. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. / Меньшикова Е.Б., Панкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь И.А., Круговых Н.Ф., Труфакин В.А. - М.: фирма «Слово», 2006. - 556 с.

2. Weidmann А.Е. Dihydroquercetin: more than just an impurity? European Journal of Pharmacology, 2012, 684: 19-26.

3. Miller III E.R. et al. Meta-Analysis: High-Dosage Vitamin E Supplementation May Increase All-Cause Mortality. Ann Intern Med. 2005; 142: 37-46.

4. Lonn E, Bosch J, Yusuf S, Sheridan P, Pogue J, Arnold JM, Ross C, Arnold A, Sleight P, Probstfield J, Dagenais GR; HOPE and HOPE-TOO Trial Investigators. Effects of long-term vitamin E supplementation on cardiovascular events and cancer: a randomized controlled trial. JAMA 2005; 293(11): 1338-1347.

5. Kris-Etherton PM, Lichtenstein AH, Howard BV, Steinberg D, Witztum JL; Nutrition Committee of the American Heart Association Council on Nutrition, Physical Activity, and Metabolism. Antioxidant vitamin supplements and cardiovascular disease. Circulation 2004; 110(5): 637-641.

6. Eidelman RS, Hollar D, Hebert PR, Lamas GA, Hennekens CH. Randomized trials of vitamin E in the treatment and prevention of cardiovascular disease. Arch Intern Med 2004; 164(14): 1552-1556.

7. Seifried H.E., McDonald S.S., Anderson D.E., Greenwald P., and Milner J.A. The antioxidant conundrum in cancer. Cancer Research, 2003. 63, 4295-4298.

8. Middleton Jr. E., Kandaswami C. and Theoharides T.C. The Effects of Plant Flavonoids on Mammalian Cells: Implications for Inflammation, Heart Disease, and Cancer. Pharmacological Reviews, 2000, 52(4): 673-751.

9. Halliwell B., Rafter J., and Jenner A. Health promotion by flavonoids, tocopherols, tocotrienols, and other phenols: direct or indirect effects? Antioxidant or not? Am J ClinNutr 2005; 81 (suppl):268S-76S.

10. Sergedieneç E., Jönsson K., Szymusiak H., Tyrakowska B., Rietjens I.M.C.M., Cénas N. Prooxidant toxicity of polyphenolic antioxidants to HL-60 cells: description of quantitative structure-activity relationships. FEBS Letters, 1999, 462: 392-396.

11. Shatalina Yu.V. and Shmarev A.N. Oxidation of Lecithin in the Presence of Dihydroquercetin and Its Complex with Divalent Iron Ions. Biophysics, 2010, Vol.55, No. 1, pp. 59-66.

12. Metodiewa D., Jaiswal A.K., Cenas N., Dickancaite E., Segura-Aguilar J. Quercetin may act as a cytotoxic prooxidantafter its metabolic activation to semiquinone and quinoidal product //Free radical biology and medicine. 1999. V. 26.P. 107-116.

13. Galati G., Sabzevari O., Wilson J.X., O'Brien P.J. Prooxidant activity and cellular effects of the phenoxylradicals of dietary flavonoids and other polyphenolics. Toxicology (2002) 177: 91-104.

14. Ratty A.K., Das N.P. Effects of flavonoids on nonenzymatic lipid peroxidation: structure-activity relationship, Biochem Med MetabBiol 39 (1988) 69-79.

15. Kandaswami C, Perkins E, Soloniuk D S, Drzewiecki E & Middleton F, Ascorbic acid-enhanced antiproliferative effect of flavonoid on squamous cell carcinoma in vitro. Anti-Cancer Drugs, 4 (1993) 91.

16. Geetha T., Malhotra V., Chopra K. & Kaur I.P. Antimutagenic and antioxidant/prooxidant activity of quercetin. Indian J Experim Biol., 2005, Vol.43, pp. 61-67.

17. Mikstacka, R., Rimando, A.M., Ignatowicz, E. 2010. Antioxidant Effect of trans-Resveratrol, Pterostilbene, Quercetin and Their Combinations in Human Erythrocytes In Vitro. Plant Foods for Human Nutrition. 65:57-63.

18. Мельникова Н.Б., Иоффе И.Д. Биосовместимость дигидрокверцетина с липофильным и гидрофильным фрагментами биомембраны. Влияние ионов металлов и аскорбиновой кислоты. Химия Растительного Сырья. 2002. №2. С. 93-103.

19. Scientific Opinion on the substantiation of health claims related to sodium alginate and reduction of post-prandial glycaemic responses (ID 1868, 1881) pursuant to Article 13(1) of Regulation (EC) No 1924/20061. EFSA Panel on Dietetic Products, Nutrition and Allergies (NDA). EFSA Journal, 2011;9(6):2261: 1-15.

20. Ohta A, Taguchi A, Takizawa T, Adachi T, Kimura S, Hashizume N. The alginate reduce the postprandial glycaemic response by forming a gel with dietary calcium in the stomach of the rat. Int J VitamNutr Res. 1997; 67(1): 55-61.

21. Williams JA, Lai CS, Corwin H, Ma Y, Maki KC, Garleb KA, Wolf BW. Inclusion of guar gum and alginate into a crispy bar improves postprandial glycemia in humans. J Nutr 2004; 134: 886-889.

22. Harden C.J., Richardson J.C., Dettmar P.W., Corfe B.M., Paxman J.R. An ionic-gelling alginate drink attenuates postprandial glycaemia in males. Journal of Functional Food 4(1):122-128.

23. Paxman J.R, Richardson J.C., Dettmar P.W., and Corfe B.M. Daily ingestion of alginate reduces energy intake in free-living subjects. Appetite, 2008, 51, 713-719.

24. Paxman J.R., Richardson J.C., Dettmar P.W. and Corfe B.A. Alginate reduces the increased uptake of cholesterol and glucose in overweight male subjects: a pilot study. Nutrition Research, 2008, 28(8), 501-505.

25. Jensen G., Knudsen J.C., Viereck N., Kristensen M., Astrup A. Functionality of alginate based supplements for application in human appetite regulation. Food Chemistry, 2012, 132(2): 823-829.

26. Jensen M.G., Kristensen M., and Astrup A. Effect of alginate supplementation on weight loss in obese subjects completing a 12-wk energy-restricted diet: a randomized controlled trial. Am. J. Clin. Nutr., 2012, 96(1) 5-13.

27. Jensen GM, Pedersen C, Kristensen M, Frost G, Astrup A. Review: efficacy of alginate supplementation in relation to appetite regulation and metabolic risk factors: evidence from animal and human studies. Obes Rev. 2013;14:129-144.

28. Seal CJ, Mathers JC. Comparative gastrointestinal and plasma cholesterol responses of rats fed on cholesterol-free diets supplemented with guar gum and sodium alginate. Br J Nutr. 2001 Mar; 85(3):317-24.

29. Moriya C, Shida Y, Yamane Y, Miyamoto Y, Kimura M, Huse N, et al. Subcutaneous administration of sodium alginate oligosaccharides prevents salt-induced hypertension in Dahl salt-sensitive rats. ClinExpHypertens. 2013. doi:10.3109/10641963.2013.776568.

30. Ueno M., Tamura Y., Toda N., Yoshinaga M., Terakado S., Otsuka K., Numabe A., Kawabata Y., Murota I., Sato N., Uehara Y. Sodium alginate oligosaccharides attenuate hypertension in spontaneously hypertensive rats fed a low-salt diet. Clinical and Experimental Hypertension, 2012; 34(5): 305-310.

31. Terakado S., Ueno M., Tamura Y., Toda N., Yoshinaga M., Otsuka K., Numabe A., Kawabata Y., Murota I., Sato N., Uehara Y. Sodium alginate oligosaccharides attenuate hypertension and associated kidney damage in Dahl salt-sensitive rats fed a high-salt diet. Clinical and Experimental Hypertension, 2012, Vol.34, No. 2: Pages 99-106.

32. Gupta S, Abu-Ghannam N. Bioactive potential and possible health effects of edible brown seaweeds. Trends Food Sci Technol. 2011; 22:315-26.

33. Lin HV, Frassetto A, Kowalik Jr EJ, Nawrocki AR, Lu MM, Kosinski JR, et al. Butyrate and propionate protect against dietinduced obesity and regulate gut hormones via free fatty acid receptor 3-independent mechanisms. PLoS One. 2012;7:e35240.

34. http://books.google.ru/books?id=lo8pALcgIFIC&pg=RA1-PA15&lpg=RA1-PA15&dq=sodium+alginate+antioxidant&source=bl&ots=LSkZWx4TgB&sig=be4_PVYpOEFwEfH-v3kaUUHRqV8&hl=ru&sa=X&ei=2hqAU4zYNY7Q4QS5woH4Bg&ved=0CEMQ6AEwCA#v=onepage&q=sodium%20alginate%20antioxidant&f=false] [Murat S-en n, HanifeAtik The antioxidantpropertiesofoligosodiumalginatespreparedby radiation-induceddegradationinaqueousandhydrogenperoxidesolutions 2012.

35. Jensen GM, Pedersen C, Kristensen M, Frost G, Astrup A. Review: efficacy of alginate supplementation in relation to appetite regulation and metabolic risk factors: evidence from animal and human studies. Obes Rev. 2013;14:129-144] [Kumar S.A. & Brown L. Seaweeds as potential therapeutic interventions for the metabolic syndrome. Rev EndocrMetabDisord., 2013, 14: 299-308].

36. Sarithakumari C.H., Renju G.L., Kurup G.M. Anti-inflammatory and antioxidant potential of alginic acid isolated from the marine algae, Sargassumwightii on adjuvant-induced arthritic rats. Inflammopharmacology 11/2012.

37. Xu X., Bi D., Wu X., Wang Q., Wei G., Chi L., Jiang Z., Oda T., and Wan M. Unsaturated guluronate oligosaccharide enhances the antibacterial activities of macrophages. FASEB J, Jun 2014; 28: 2645-2654.

38. Xu X., Wu X., Wang Q., Cai N., Zhang H., Jiang Z., Wan M., and Oda T. Immunomodulatory effects of alginate oligosaccharides on murine macrophage RAW264.7 cells and their structure-activity relationships. J. Agric. Food Chem., 2014, 62(14): 3168-3176.

39. Son EW1, Yang KH, Rhee DK, Pyo S. Immunomodulatory function of murine NK cell activity by alginate. Arch Pharm Res. 2005 Nov;28(11):1282-1286.

40. Arya V. and Gupta V.K. A review on marine immunomodulators. Int. J. of Pharm. &LifeSci., 2011, 2(5): 751-758.

41. Рагино Ю.И. Окислительная резистентность и структурная гетерогенность липопротеинов низкой плотности при ишемической болезни сердца и гиперхолестеринемии: автореф. дис. д-ра мед.наук: 14.00.06. - Новосибирск, 2002.

42. Esterbauer H., Striegl G., Puhl H., Rotheneder М. Continuous monitoring of in vitro oxidation of human low density lipoprotein //Free Radic. Res. Commun.- 1989.-V.6.- P. 67-75.1993.

43. Патент RU 2151403.

44. Manual of stroke models in rats (Ed. Y.Wang-Fischer) CRC Press, 2009.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к лечебно-профилактической пищевой композиции. Лечебно-профилактическая пищевая композиция, содержащая смесь дигидрокверцетина, альгината натрия и аскорбиновой кислоты при определенном соотношении компонентов. Вышеописанная лечебно-профилактическая пищевая композиция обладает повышенными антидиабетическими, гипогликемическими, гиполипидемическими, антигипертензивными, антиадипогенными, антивоспалительными и антиоксидантными свойствами. 2 з.п. ф-лы, 10 ил., 7 пр.

1. Лечебно-профилактическая пищевая композиция, характеризующееся тем, что содержит смесь дигидрокверцетина, альгината натрия и аскорбиновой кислоты при следующем соотношении компонентов, вес.ч.:
Дигидрокверцетин 1-10 Альгинат натрия 1-10 Аскорбиновая кислота 1-2

2. Лечебно-профилактическая пищевая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что дополнительно может содержать воду.

3. Лечебно-профилактическая пищевая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что дополнительно может содержать экстракт из растений или любой из соков, выбранный из группы: ягодный, фруктовый, овощной, березовый.