СПОСОБ РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ Российский патент 2016 года по МПК G01N33/48 G01N33/50 G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, в частности к ранней диагностике синдрома эндогенной интоксикации (СЭИ), для его выявления и интегральной оценки развития основных его патогенетических механизмов на донозологическом этапе различных заболеваний. Возможно применение этого метода у практически здоровых людей, в том числе у доноров.

Под синдромом эндогенной интоксикации (СЭИ) подразумевается комплекс симптомов патологических состояний органов и систем организма, обусловленных накоплением в тканях и биологических жидкостях эндотоксинов. Эндогенную интоксикацию (ЭИ) можно определить как неспецифический по большинству клинико-биохимических проявлений синдром несоответствия между образованием и выведением как продуктов нормального обмена, так и веществ нарушенного метаболизма. Приоритетное значение при этом приобрела концепция ЭИ как отражения последствий нарушения макроциркуляции и микроциркуляции, реологии, газообмена и кислородного бюджета, иммунитета и противоинфекционной защиты, а также управления интеграцией этих процессов [24, 25, 26, 28, 33].

Значение этой концепции важно, потому что ЭИ рассматривается с позиций общих закономерностей формирования полиорганных нарушений, неотъемлемую составную часть которых она составляет. Наряду с этим понятие ЭИ базируется на концепции, представляющей детоксикацию ни как совокупность функционирования отдельных органов - печени, почек, легких, желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), а как систему трех взаимосвязанных, филогенетически обусловленных составных частей: монооксидозную систему, иммунную систему, выделительную систему [3, 5, 6, 9, 10, 21, 22].

В этом аспекте деятельность монооксигеназной системы микросомального окисления и иммунитета сопряжены и функционально скоординированы для обеспечения первого этапа детоксикации - распознавания токсинов - с последующей сорбцией и экскрекцией их печенью, почками, кожей, легкими, ЖКТ. Понять этот процесс позволяет теория так называемого неинфекционного иммунитета, основанная на признании роли иммунологических механизмов в системе химического гомеостаза. При этом иммунная система рассматривается как составная часть системы детоксикации, метаболизирующая разнообразные чужеродные токсины, осуществляя метаболический гомеостаз [24].

Выделяют лабораторные критерии нескольких уровней [24]:

- маркеры острого отравления или эндогенной интоксикации, если они четко очерчены в данной клинической ситуации;

- лабораторные критерии, характеризующие вторичную токсическую аутоагрессию, ориентированные на оценку реакции организма данного больного на первичную и вторичную интоксикацию, а также позволяющие определять динамику токсичности компонентов внутренней среды и стадию эндотоксикоза;

- показатели, характеризующие работу ФСД, органов и систем жизнеобеспечения организма.

ЭИ - это ответная реакция организма на действие токсинов эндогенной или экзогенной природы, которая принимает универсальный характер и отягощает течение основного заболевания, обусловливает недостаточную эффективность лечения и высокую летальность практически при всех критических состояниях [1, 29, 8, 18, 17]. ЭИ имеет доминирующее влияние на исход при многих патологических состояниях [13, 23].

Причинные факторы возникновения СЭИ разнообразны и сложны по своей природе, но в подавляющем большинстве случаев синдром развивается при патологических состояниях, связанных с деструкцией тканей, нарушениями обмена веществ на фоне гипоксии, некроза, воспаления, снижения функциональной активности систем естественной детоксикации [11, 12, 24].

В патогенезе СЭИ выделяют три основных звена, которые определяют тяжесть состояния больных и выраженность клинической симптоматики: токсемию, тканевую гипоксию и угнетение функции собственных детоксицирующих и защитных систем организма [24].

В настоящее время все имеющиеся методы диагностики СЭИ можно условно разделить на три группы: специфические, условно-специфические и неспецифические. Специфические тесты включают методы апробации различных токсинов непосредственно на организм животных, не применяют на людях. К условно-специфическим относят морфологические методы, характеризующие качественную и количественную реакцию форменных элементов на интоксикацию. К неспецифическим методам относятся самые различные биохимические и иммунологические тесты [10, 35, 32].

Разработанные в настоящее время различные методологические подходы к клинико-биохимическому мониторингу тяжести ЭИ у больных при неотложных состояниях, предусматривающие применение шкал и расчетных критериев [2, 15, 19, 7]. Для построения индексных зависимостей выбираются маркерные гематологические и различные биохимические тесты.

Одними из расчетных показателей, характеризующих степень выраженности эндотоксикоза, являются многочисленные индексы интоксикации, в том числе лейкоцитарные (например, лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) по Кальф-Калифу). Использование интегральных иммунологических показателей позволяет оценить активность воспалительных процессов [30, 22, 23]. Достоинством их является возможность перевода гемограмм в числовые показатели, отражающие ЭИ, прежде всего при неотложных состояниях (сепсисе, перитоните, гнойном остром панкреатите и холецистите). Однако использование только одного этого параметра не дает полной оценки степени СЭИ, а отражает, в основном, степень воспалительного ответа организма.

При введении доказательных оценочных клинико-биохимических подходов изучения метаболизма организма хирургических больных с абдоминальной патологией при неотложных состояниях одной из наиболее распространенных форм служит использование индексных параметров. Анализируя представленные в литературе индексы оценки тяжести ЭИ и состояния больных, необходимо отметить те, в которых использованы параметры, оценивающие особенности выведения токсинов, молекул средней массы (МСМ), продуктов нарушенного метаболизма (например, креатинин, МСМ 254).

Известен способ диагностики ЭИ при тяжелой механической травме (патент РФ №2195652) по показателям крови и бальной оценке шокогенности травмы, который заключается в том, что измеряют хемилюминесценцию цельной крови и хемилюминесценцию популяции моноцитов и определяют индекс интоксикации (ИИ) по формуле, включающей в себя балл шокогенности травмы; хемилюминесценцию цельной крови и моноцитов, индуцированных зимозаном.

Основным недостатком способа является его трудоемкость, применение дорогостоящих реактивов, использование метода хемилюминесценции, осуществимого только в лаборатории с соответствующим оборудованием.

Способ диагностики тяжести ЭИ при острых гнойно-септических заболеваниях у детей (патент РФ №2122739) путем электрофоретического исследования сыворотки крови. При наличии на электрофореграмме белковых компонентов с молекулярной массой менее 12 к Да диагностируют тяжелую эндогенную интоксикацию с формированием органной недостаточности.

Способ длителен в исполнении и выполним не в каждой лаборатории, так как необходимо специальное техническое оснащение.

Известный способ оценки ЭИ организма (патент РФ №2082971) путем изучения и подсчета форменных элементов периферической крови, заключающийся в исследовании эритроцитов и определении индекса интоксикации (ИИ) по формуле, включающей в себя количество эхиноцитов, пойкилоцитов, гемолизирующих форм, дискоцитов, стоматоцитов.

Данный способ также сложен в исполнении, достаточно субъективен и трудоемок, что в совокупности является его недостатком.

Известен биохимический способ определения ЭИ [4], заключающийся в определении уровня молекул средней массы (МСМ) в сыворотке крови, являющихся интегральным биохимическим маркером ЭИ [3].

Данный способ включает забор крови натощак, отделение сыворотки от форменных элементов крови путем центрифугирования, получение безбелковой пробы путем прибавления к 1 мл сыворотки крови 0,5 мл 10% трихлоруксусной кислоты и центрифугирования в течение 30 минут при 3000 об/мин. Далее к 0,5 мл надосадочной жидкости прибавляют 4,5 мл дистиллированной воды и определяют оптическую плотность пробы на спектрофотометре при длине волны 254 нм. По величине оптической плотности пробы определяют содержание молекул средней массы и по их уровню судят о наличии ЭИ.

Этот метод длителен в исполнении (центрифугирование осуществляется в течение 30 минут), трудоемок и требует для исследования большого количества сыворотки крови (1 мл), которое навсегда можно получить у больного, особенно в практике экспресс-лабораторий отделений реанимации и интенсивной терапии, когда перед клиницистом встает вопрос о выборе необходимого комплекса лабораторных тестов. Все это является ограничением применения данного способа.

Другие авторы предложили [34] при остром панкреатите индекс эндогенной интоксикации (ИЭИ) по следующим параметрам: уровню общего белка крови (Б) (г/л); мочевины (М) (ммоль/л); веществ средней молекулярной массы пептидной природы (МСМ) (по Лоури); аланинаминотрансферазы(АлАТ) (ммоль/ч·л):

Недостатком этого индекса эндогенной интоксикации (ИЭИ) является следующее: в расчетную формулу включены параметры, имеющие разные единицы измерения. В данном случае требуется перевод значений используемых клинико-лабораторных тестов в относительные величины, например, путем деления величины каждого показателя на его норму (при этом единицы измерения сокращаются).

В способе [14] был предложен ряд индексов интоксикации.

Индекс интоксикации 1, который включает в себя показатели катаболизма белка, функциональной активности печени, количество лейкоцитов и лимфоцитов в крови и отражает такую функцию организма, как детоксикационная. Для оценки состояния формулы периферической крови использован индекс интоксикации 2. Состояние антиоксидантного статуса в крови и уровень транспортной функции альбумина характеризует индекс интоксикации 3. Индекс интоксикации 4 объединяет параметры, входящие в состав индексов интоксикации 2 и 3.

Таким образом, все вышеперечисленные методы не могут быть ранними способами диагностики ЭИ и использоваться на донозологическом этапе заболеваний. Все способы предлагались для неотложных состояний, сопровождающихся грубой патологией со стороны органов детоксикации, их функциональными и структурными нарушениями. Также перечисленные способы достаточно трудоемки и длительны.

Аналогом заявляемого нами способа интегральной оценки эндогенной интоксикации может служить интегральный индекс (ИнтИ). М.Н. Тарелкина предложила интегральную оценку интоксикации при шокогенной травме, включив в расчетную формулу реальные значения трех показателей - молекул средней массы (МСМ), определяемых по Н.И. Габриэлян [4] при длине волны 254 нм, креатинина крови (унифицированный метод) и лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) по Кальф-Калифу. Предложенный авторами способ осуществляют следующим образом:

где 0,24 - средний уровень МСМ 254 (молекул средней массы) в норме у лиц группы сравнения, определяемых по Н.И. Габриэлян при длине волны 254 нм, ед.опт. плотности;

110,5 - средний уровень креатинина сыворотки крови в норме у лиц группы сравнения, мкмоль/л;

1,2 - средний показатель лейкоцитарный индекс интоксикации по Кальф-Калифу в норме у лиц группы сравнения;

МСМ 254 - уровень молекул средней массы, определяемых по Н.И. Габриэлян при длине волны 254 нм, ед. опт. плотности;

Кр - уровень креатинина сыворотки крови, мкмоль/л;

ЛИИ - лейкоцитарный индекс интоксикации по Кальф-Калифу.

Дисперсии величин равны 0,044 для МСМ 254, 9,3 для креатинина, 0,177 для ЛИИ.

Из представленной формулы следует, что если содержание МСМ 254, креатинина и показания ЛИИ близки к норме, то величина данного индекса приближается к «0», но увеличивается при возрастании значений показателей. В основу расчетов положена формула Евклидова пространства, в которой учитываются дисперсии признаков и средние величины их нормальных значений.

Однако данный метод имеет ряд существенных недостатков:

1. Для его расчета используются разные биологические материалы, забор и исследование которых происходит обычно разным медперсоналом и в разных отделах клинико-диагностических лабораторий (КДЛ). Трудно синхронизировать выполнение общего анализа крови с подсчетом лейкоформулы и расчетом ЛИИ с биохимическим исследованием крови.

2. Как было сказано выше, метод определения МСМ 254 по Н.И. Габриэлян является длительным и трудоемким. Тем более, что используемый раствор трихлоруксусной кислоты требует постоянной стандартизации концентрации, например, путем титрования. При отсутствии данной процедуры в лаборатории могут быть получены весьма противоречивые, плохо воспроизводимые результаты. Для выполнения метода требуется спектрофотометр, который в КДЛ используется в основном только для данного теста, а следовательно, имеется не во всех лабораториях.

3. Метод определения МСМ 254 не имеет метода для контроля качества, а значит, может иметь различную степень точности и воспроизводимости.

4. Метод не может быть использован для ранней диагностики СЭИ. Так, повышение таких параметров, как МСМ 254 и креатинина, происходит при нарушении основных органов детоксикации - печени и почек [22, 16] - уже в стадию ЭИ, сопровождающуюся полиорганной недостаточностью, а ЛИИ изменяется при островоспалительном ответе при явном патологическом процессе с максимумом на 2-3 сутки.

Задачей заявляемого изобретения является предложить комплексную систему оценки развития ЭИ у практически здоровых людей, доноров, пациентов на донозологическом этапе развития различных заболеваний на основе исследования высокочувствительных маркеров основных патогенетических процессов так называемой компенсаторной фазы СЭИ.

В основу расчета раннего интегрального индекса интоксикации (РИИ) положена формула, предложенная М.Н. Тарелкиной [31]:

где Ар - реальные значения i-го признака, Ан - среднее значение i-го признака у доноров, δ - дисперсия i-го признака у доноров.

Предложенный расчетный показатель - ранний интегральный индекс интоксикации (РИИ) выявляет ЭИ в первую латентную фазу развития патологического процесса, при котором наблюдается повышение концентрации веществ низкой и средней молекулярной массы (ВН и МСМ) на эритроцитах без значительного или отсутствия роста в плазме крови. В этой фазе (компенсации) наблюдается элиминация поступающих токсинов из очага агрессии в организме. Поэтому данную фазу называют компенсаторной, при которой не наблюдаются клинические проявления, отсутствует летальность [22].

Способ позволяет более доказательно охарактеризовать ЭИ по совокупному вкладу отдельных параметров: маркера нарушения метаболических процессов в организме (гомоцистеина), выявления раннего маркера почечной дисфункции (цистатина С) как одного из основных органов детоксикации и иммунологической реакции организма (высокочувствительного СРБ).

Гомоцистеин был взят для расчета как маркер нарушения метаболических процессов в организме, повышение которого запускает ряд патологических процессов, имеющих прогностическое значение при различных видах патологии.

Серосодержащие аминокислоты - цистин, цистеин, метионин, гомоцистеин (продукт метаболизма метионина), дают максимум экстинций в зоне длин волн 220-255 нм в слабокислой среде, таким образом, относятся к ВН и МСМ [22, 23]. Гипергомоцистеинемия - нарушение метаболизма метионина, является для организма эндогенным токсином. Возникает вследствие мутаций генов, связанных с фолатным циклом, и (или) дефицита в организме витаминов группы В (фолиевой кислоты, В₆ и В₁₂) [27]. Гипергомоцистеинемия повышает риск раннего атеросклероза, тромбоза коронарных, церебральных и периферических артерий, независимо от традиционных факторов риска. Гипергомоцистеинемия является прогностическим маркером летального исхода. Даже в небольших концентрациях гомоцистеин обладает выраженной цитотоксической активностью по отношению к эндотелию, ингибируя их циклооксигеназную активность и уменьшая таким образом продукцию простоциклина, усиливая продукцию тромбоксана. При этом повышается агрегационная готовность тромбоцитов. Гипергомоцистеинемия снижает активность естественных антикоагулянтов. В крови здоровых взрослых людей уровень гомоцистеина составляет 5-15 мкмоль/л. Этот показатель зависит от возраста, пола, социальной группы, этнической принадлежности, характера питания, образа жизни, что необходимо учитывать при получении референтных значений в каждой отдельной лаборатории.

Цистатин С в настоящее время признан мировым медицинским сообществом [37, 38, 39, 40, 41, 42], как:

1) самый точный эндогенный маркер скорости клубочковой фильтрации (СКФ), по своим диагностическим характеристикам значительно превосходящий креатинин;

2) высокочувствительный маркер тяжести сердечно-сосудистых событий, независимый от таких кардиомаркеров, как кардиальные тропонины, натрийуретические пептиды, С-реактивный белок и др.;

3) ранний маркер преэклампсии;

4) перспективный маркер инвазивности некоторых злокачественных заболеваний.

При патологии его уровень в крови повышается. Чем тяжелее ренальная патология, тем хуже цистатин С фильтруется в почках и тем выше его уровень в крови.

С-реактивный белок (СРБ) - белок, синтезирующийся в печени и участвующий в двух типах воспалительных реакций. Во-первых, в островоспалительных процессах, связанных с системными инфекциями, некрозом тканей (при ожогах, злокачественных опухолях, инфаркте миокарда) [27]. При этом его уровень возрастает от 10 мг/л и выше - в острофазном воспалительном диапазоне, отражая этиологию, тяжесть и динамику системной воспалительной реакции.

Определяя СРБ в высокочувствительном диапазоне, т.е. определяя базовую концентрацию белка, выявляемую у практически здоровых лиц и пациентов при отсутствии острого воспалительного процесса или вне обострения заболевания, можно диагностировать вялотекущий воспалительный процесс, идущий в эндотелии. Эндотелиальная дисфункция, вызванная внутрисосудистым воспалением, в развитии которого принимает участие СРБ, связана с атерогенезом и атеротромбозом, поэтому используется как предиктор сердечно-сосудистых событий. В связи с этим, вчСРБ использован при расчете РИИ как более ранний иммунологический показатель реакции организма в ответ на ЭИ. Он повышается раньше количественных и качественных изменений периферической крови, выявляемых в общем анализе крови (например, количество лейкоцитов, СОЭ, соотношение различных лейкоцитарных фракций в лейкоформуле и, следовательно, в многочисленных расчетных индексах, таких как ЛИИ по Кальф-Калифу, индекс инфицированности и др.)

Расчет РИИ служит начальным, предикторным этапом применения методологии доказательной клинико-биохимической оценки эндотоксикоза у практически здоровых людей, в том числе доноров.

Данный способ позволяет использовать РИИ у доноров, практически здоровых людей, с профилактической целью, прежде всего для предупреждения сердечно-сосудистой патологии, если рассчитать его с включением параметром вчСРБ в диапазоне 0,05-10 мг/л. Если использовать значения СРБ от 10 мг/л и выше (вплоть до 1000 мг/л), РИИ следует рассчитывать для раннего выявления СЭИ, сопровождающего острофазный воспалительный ответ, отражающий тяжесть и динамику системной воспалительной реакции, связанной с системными инфекциями, некрозом тканей (например, при ожогах, злокачественных опухолях, при инфаркте миокарда). Таким образом, выявлять инфекционные, воспалительные и онкологические заболевания на донозологическом этапе их развития и не обнаруживаемые рутинными методами диагностики. Это имеет особую важность при обследовании доноров перед сдачей крови, плазмы и т.д.

Метод пригоден как для однократного применения, так и для мониторинга основных патогенетических процессов СЭИ в процессе лечебных или профилактических мер.

Выполнение предлагаемого метода становится возможным, учитывая то, что в различных современных клиниках, особенно на станциях переливания крови, имеются высокотехнологичные биохимические, иммуноферментные анализаторы, тестирующие в автоматическом режиме биоматериал и требующие небольшое количество не только сыворотки, но и реагентов.

Новизной способа является его высокая чувствительность, комплексность и универсальность, так как рассчитывается РИИ, как самый ранний интегральный способ диагностики ЭИ с помощью высокочувствительных методов (гомоцистеин, вчСРБ, цистатин С), оценивающих разные патогенетические процессы ЭИ, имеющих прогностическое значение, ранее не применявшихся для оценки данного синдрома, у практически здоровых людей, в том числе у доноров. Исключительно важно применение данного метода у доноров, причем не столько с профилактической целью, сколько для выявления наличия инфекционных процессов в серонегативном периоде, не выявляемых общепринятыми методами обследования доноров, указанных в нормативных документах.

Сущность изобретения: рассчитывают ранний интегральный индекс интоксикации (РИИ), для чего у обследуемого одновременно, в один и тот же день, определяют уровень высокочувствительного С-реактивного белка (СРБ), гомоцистеина, цистатина Св сыворотке крови.

Для этого у обследуемого забирают периферическую кровь, которую получают путем венепункции локтевой вены, центрифугируют при 1500 об/мин 15 мин.

В сыворотке крови определяют уровень высокочувствительного С-реактивного белка (вчСРБ), гомоцистеина, цистатина С общепринятыми методами (иммуноферментным, биохимическим, иммунохемилюминесцентным).

РИИ рассчитывают по формуле:

где - средний уровень гомоцистеина в сыворотке крови у здоровых

людей контрольной группы, мкмоль/л;

С - средний уровень цистатина С в сыворотке крови у здоровых людей контрольной группы, мг/л;

ХвчСРБ- средний уровень вчСРБ в сыворотке крови у здоровых людей контрольной группы, мг/л;

Х_iгмц - уровень гомоцистеина в сыворотке крови обследуемого, мкмоль/л;

Х_iцист. С - уровень цистатина С в сыворотке крови обследуемого, мг/л;

Х_iвчСРБ - уровень вчСРБ в сыворотке крови обследуемого, мг/л.

Дисперсии величин равны среднеквадратическим отклонениям σгмц для гомоцистеина, σцист. С для цистатина С, σвчСРБ для вчСРБ.

Так как гомоцистеин и цистатин С имеют разные нормы для мужчин и женщин и являются ранними и чувствительными показателями различных процессов, характеризующих СЭИ, то лучше рассчитывать для различных методов определения и для двух контрольных групп: здоровых мужчин и женщин. Более точным вариантом было бы рассчитать его для различных возрастов, так как нормы гомоцистеина увеличиваются с возрастом.

Так, например, РИИ для мужчин рассчитывался по формуле:

где 10,35 - средний уровень гомоцистеина в сыворотке крови в норме у здоровых мужчин контрольной группы, мкмоль/л;

0,49 - средний уровень цистатина С в сыворотке крови в норме у здоровых мужчин контрольной группы, мг/л;

2,97 - средний уровень вчСРБ в сыворотке крови в норме у здоровых мужчин контрольной группы, мг/л;

Гомоцист. - уровень гомоцистеина в сыворотке крови обследуемого мужчины, мкмоль/л;

Цист. С - уровень цистатина С в сыворотке крови обследуемого мужчины, мг/л;

вчСРБ - уровень вчСРБ в сыворотке крови обследуемого мужчины, мг/л; дисперсии величин равны 2,21 для гомоцистеина, 0,23 для цистатина С, 2,23 для вчСРБ.

Соответственно, для женщин РИИ рассчитывался аналогично по формуле с использованием других средних величин и дисперсии:

где 8,94 - средний уровень гомоцистеина в сыворотке крови в норме у здоровых женщин контрольной группы, мкмоль/л;

0,41 - средний уровень цистатина С в сыворотке крови в норме у здоровых женщин контрольной группы, мг/л;

3,29 - средний уровень вчСРБ в сыворотке крови в норме у здоровых женщин контрольной группы, мг/л;

Гомоцист. - уровень гомоцистеина в сыворотке крови обследуемой женщины, мкмоль/л;

Цист. С - уровень цистатина С в сыворотке крови обследуемой женщины, мг/л;

вчСРБ - уровень вчСРБ в сыворотке крови обследуемой женщины, мг/л; дисперсии величин равны 2,34 для гомоцистеина, 0,17 для цистатина С, 2,21 для вчСРБ.

При значениях РИИ выше 4,01 у мужчин и 4,39 у женщин можно диагностировать развитие СЭИ. При уровне вчСРБ выше 10 мг/л, что уже свидетельствует о воспалительном процессе, даже при нормальных значениях гомоцистеина и цистатина С, уже при значениях РИИ выше 3,15 у мужчин и 3,04 у женщин можно диагностировать развитие СЭИ.

Было проведено клинико-лабораторное обследование, в том числе с помощью предлагаемого способа, 167 доноров ГБУЗ Пензенская областная станция переливания крови, подписавших информированное согласие. В исследование были включено 95 мужчин и 68 женщин в возрасте от 18 до 60 лет. Среди доноров преобладали мужчины и доноры самой молодой (18-31 год) возрастной группы. Доноры плазмы обследовались те, которые пришли на донацию после перерыва (отдыха) от одного месяца и более. Все доноры крови были первичные. Биохимические параметры определялись на автоматических анализаторах: гомоцистеиниммунохемилюминесцентным методом на анализаторе ARCHITECT, цистатин С иммунологическим на автоматическом биохимическом анализаторе Сапфир, С-реактивный белок иммуноферментным методом на планшетном анализаторе StatFax. Но данные параметры могли быть исследованы все одним из двух методов: или иммуноферментным методом, или иммуноферментным на одном анализаторе соответственно методу. Контролем служили диапазоны анализируемых тестов, указанных в инструкциях к наборам реагентов. РИИ может быть вычислен в автоматическом режиме с помощью компьютерных программ локальных информационных систем (ЛИС), имеющихся во многих лабораториях ЛПУ и всех станций переливания крови РФ.

После проведения лабораторного тестирования крови доноров они были поделены на группы по полу (группа мужчин (n=95) и женщин (n=68)). В каждой были выделены контрольные группы и группы доноров (1 - мужчины (n=50), и 2 - женщины (n=38)), у которых один или более показателей ЭИ выходили за пределы нормальных значений согласно инструкций к наборам реагентов. Для каждой контрольной группы были рассчитаны среднее арифметическое и среднее квадратическое отклонение показателей ЭИ, т.е. величины, используемые для составления формул расчета РИИ отдельно для мужчин и женщин (Таблица 1).

В группе 1 у мужчин из общего количества изменения в одном или более показателях имели 52,6% обследуемых, в группе 2 изменения были у 55,9% обследуемых женщин. Патологические сдвиги в показателях хотя бы одного из них приводили к значительному увеличению РИИ. В подтверждение этому приводим пример 1 для мужчин (Таблица 2 и 3) и пример 2 для женщин (Таблица 4 и 5).

Пример 1.

Как видно из примеров 1 и 2, даже у доноров, т.е. практически здоровых людей, при развитии патологических сдвигов ранних показателей ЭИ новый интегральный тест РИИ увеличивается в 2-5 и более раз.

Таким образом, заявляемый способ ранней диагностики ЭИ путем расчета раннего интегрального индекса интоксикации (РИИ), включающего результаты определения биохимических показателей СЭИ (высокочувствительного С-реактивного белка (СРБ), гомоцистеина, цистатина С), отражающих различные звенья его патогенеза на ранних этапах развития. Изобретение позволяет выявить СЭИ у практически здоровых людей, доноров, пациентов на донозологическом этапе развития различных заболеваний, т.е. до начала клинических проявлений, появления жалоб и изменений показателей общего анализа крови, данных инструментальных методов исследований, визуализирующих изменения со стороны структуры и функции органов детоксикации.

Источники информации

1. Баламутова М.Н. Хирургия центральной нервной системы / М.Н. Баламутова, Г.П. Горячкина. - Л., 1974. - С. 622-634.

2. Васильков В.Г., Сафронов А.И. Синдромная оценка и интенсивная терапия критических состояний (часть I). - Пенза: ПГИУВ, 1999. - 105 с.

3. Владыка А. С, Левицкий Э. Р., Поддубная Л. П., Габриэлян Н. И. Средние молекулы и проблема эндогенной интоксикации при критических состояниях различной этиологии // Анестезиология и реаниматология. - 1987.-№2. - С. 37-42.

4. Габриэлян И.И., Левицкий Э.Р., Дмитриев А.А. и др. Скрининговый метод определения средних молекул в биологических жидкостях: Метод, рекомендации. - Москва, 1985. - 18 с.

5. Габриэлян Н.И., Дмитриев А. А., Кулаков Г. П. Диагностическая ценность определения средних молекул в плазме крови при нефрологических заболеваниях // Клинич. медицина. - 1981. - №10. - С. 38-42.

6. Галактионов С.Г., Цейтин В.М., Леонова В. И. и др. Пептиды группы «средних молекул» // Биоорганическая химия. - 1984. - Т. 10, №1. - С. 5-17.

7. Гельфанд Е.Б., Гологорский В.А., Гельфанд Б.Р. Абдоминальный сепсис: интегральная оценка тяжести состояния больных и полиорганной дисфункции // Анестезиология и реаниматология. - 2000. - №3. - С. 29-33.

8. Долгов A.M. Критерии неблагоприятного течения менингоэнцефалитов риногенной природы / A.M. Долгов // Журн. невропатол. и психиатр. - 2000. - Т. 100. - №8. - С. 49-50.

9. Ершов А. Л. Диагностика стадий эндогенной интоксикации при послеоперационных осложнениях в абдоминальной хирургии // Эндогенные интоксикации. - СПб.: СПбМАПО, 1994. - С. 70-71.

10. Ерюхин И. А., Шашков Б. В. Эндотоксикоз в хирургической клинике. - СПб.: Логос, 1995. - 304 с.

11. Каган В.Е. Механизмы структурно-функциональной модификации биомембран при перекисном окислении липидов: Автореф. дис…докт. мед. наук / В.Е. Каган. - М., 1981. - 38 с.

12. Каджая Н.В. Клинико-биохимические особенности повторной черепно-мозговой травмы / Н.В. Каджая, Н.Ф. Пономарева, Г.М. Яхненко // III съезд нейрохирургов России: Материалы съезда. - С.-П., 2002. - С. 27.

13. Камарницкий С.В. Некоторые факторы, определяющие исход у больных с травматическим сдавлением головного мозга / С.В. Камарницкий, Н.Е. Полищук, А.Л. Литвиненко // III съезд нейрохирургов России: Материалы съезда. - С.-П., 2002.

14. Келина Н.Ю. Комплексная биохимическая оценка эндогенной интоксикации у больных с деструктивно-воспалительными заболеваниями органов брюшной полости: Автореф. дис…докт. биол. наук. / Н.Ю. Келина. - М, 2001. - 40 с.

15. Келина Н.Ю., Васильков В.Г., Безручко Н.В. Методология доказательной биохимической оценки развития эндотоксикоза // Вестник интенсивной терапии. - 2002. - №4. - С. 13-17.

16. Кулюцина Е.Р. Лабораторные критерии прогнозирования течения и исхода черепно-мозговой травмы: Автореф. дис…канд. мед. наук. / Е.Р. Кулюцина. - Саратов, 2004. - 23 с.

17. Лабораторная диагностика интоксикации в практике интенсивной терапии: Методич. пособие / Сост.: М.Я. Малахова, СВ. Оболенский. - С.-П.: МАПО, 1993. - 16 с.

18. Лабораторная оценка тяжести синдрома эндогенной интоксикации и выбор метода детоксикации у хирургических больных / В.Н. Иванова, А.Н. Обедин, Ю.В. Первушин и др. // Клин. лаб. диагн - 1999. - №11 - С. 33-34.

19. Лаврентьева Е.В., Миронов П.И., Хунафин С.Н., Лаврентьев Ю.А., Берестов А.Л. К оценке степени тяжести больных с острым панкреатитом // Вестник интенсивной терапии. - 2003. - Приложение к №5. - С 26-27.

20. Малахова М. Я. Метод регистрации эндогенной интоксикации.- СПб: СПбМАПО, 1995. - 35 с.

21. Марусанов В. Г., Михайлович В. А., Доманская И. А., Гуло С.Л. Характеристика стадии эндогенной интоксикации // Эфферентная терапия. - 1995.- Т. 1, №2. - С. 26-30.

22. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. Медицинские лабораторные технологии. Том 2. / Под ред. проф. А. П. Карпищенко. - СПб: Интермедика, 1999. - 656 с.

23. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. Медицинские лабораторные технологии / Под редакцией проф. А.И. Карпищенко. - СПб: Интермедика, 2002. - Том 1. - 408 с.

24. Николайчик В.В. Молекулярные механизмы развития эндогенной интоксикации и совершенствование путей детоксикации: Автореф. дис…докт. мед. наук / В.В. Николайчик. - Минск, 1984. - 40 с.

25. Оболенский С. В., Малахова М. Я., Ершов А. Л. Диагностика стадий эндогенной интоксикации и дифференцированное применение методов эфферентной терапии // Вести хирургии. - 1991. - Т. 146, №3. - С. 95-100.

26. Оболенский СВ., Малахова М. Я., Ершов А. Л. Метаболический статус организма, методы регистрации и интерпретации результатов // Экстремальные состояния и постреанимационная патология.- Новосибирск, 1989. - С. 79-86.

27. Первичная тромбопрофилактика у детей Алтайского края на основе выявления и модификации постоянных и временных факторов тромбогенного риска: Методические рекомендации / А.П. Момот, Л.А. Строзенко, Л.П. Цывкина, Е.В. Ройтман и др.; под научн. ред. д-ра мед. наук, профессора А.П. Момота. - Барнаул: Изд-во АГМУ, 2013. - 83 с.

28. Рыбачков В. В., Малафеева Э. В. Природа и механизмы действия эндогенной интоксикации // Клиника и лечение эндоинтоксикации при острых хирургических заболеваниях. - Ярославль, 1986. - С. 5-43.

29. Сергиенко В.И. Математическая статистика в клинических исследованиях / В.И. Сергиенко, И.Б. Бондарева - М.:ГЭОТАР-МЕД, 2001. - 256 с.

30. Справочник по лабораторным методам исследования / Под ред. Л.А. Даниловой. - С.-П.: Питер, 2003. - 736 с.

31. Тарелкина М.Н. Параметрическая оценка интоксикации при шокогенной травме // Теоретические и практические аспекты проблемы травматического шока. Республиканский сборник научных трудов. - Л.: изд. Лен. НИИ скорой помощи им. И.И.Джанедлизе. - 1991. - С. 85-88.

32. Туликова З.А. Метаболические эффекты веществ средней молекулярной массы при заболеваниях различной этиологии // Эндогенные интоксикации. Материалы Международного симпозиума.- С.-П. - 1994. - С. 52.

33. Ханевич М.Д. Патогенетическое и клиническое значение молекул средней массы и перекисного окисления липидов в развитии синдрома эндогенной интоксикации при разлитом перитоните / М.Д. Ханевич. Автореф. дис…канд. мед. наук - Л., 1987. - 14 с.

34. Хубутия М. Ш. Гомоцистеин при коронарной болезни сердца и сердечного трансплантата: монография / М. Ш. Хубутия, О. П. Шевченко. М.: Реафарм, 2004. - 272 с.

35. Шугаев А.И., Розенталь В.В. Критерий оценки эндогенной интоксикации при остром панкреатите // Эндогенные интоксикации. Тезисы Международного симпозиума 14-16 июня 1994 г. - С.-П. - 1994. - С. 87.

36. Эндогенные интоксикации / Тез. Междунар. симпоз.- СПб, 1994.-280 с.

37. Grubb A, Björk J, Lindstrom V et al. A cystatin C-based formula without anthropometric variables estimates glomerular filtration rate better than creatinine clearance using the Cockcroft-Gault formula. Scand J Clin Lab Invest. 2005;65(2):153-62.

38. Roos JF, Doust J, Tett SE et al. Diagnostic accuracy of cystatin С compared to serum creatinine for the estimation of renal dysfunction in adults and child-ren-a meta-analysis. ClinBiochem. 2007;40(5-6):383-91.

39. Herget-Rosenthal S, Bokenkamp A, Hofmann W et al.. How to estimate GFR-serum creatinine, serum cystatin С or equations? ClinBiochem. 2007;40(3-4):153-61.

40. Tidman M, Sjöström P, Jones I. et al.A Comparison of GFR estimating formulae based upon s-cystatin С and s-creatinine and a combination of the two. Nephrol Dial Transplant. 2008; 23(1): 154-60.

41. Stevens LA, Coresh J, Schmid CH et al. Estimating GFR using serum cystatin С alone and in combination with serum creatinine: a pooled analysis of 3,418 individuals with CKD. Am J Kidney Dis. 2008;51(3): 395-406.

42. Sterner G, Björk J, Carlson J et al. Validation of a new plasma cystatin C-based formula and the Modification of Diet in Renal Disease creatinine-based formula for determination of glomerular filtration rate. Scand J UrolNephrol. 2009; 43(3):242-9.

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ ранней диагностики эндогенной интоксикации путем расчета раннего интегрального индекса интоксикации (РИИ), отличающийся тем, что РИИ для мужчин рассчитывается по формуле:

а РИИ для женщин рассчитывается по формуле:

где Гомоцист. - уровень гомоцистеина в сыворотке крови, мкмоль/л; Цист. С - уровень цистатина С в сыворотке крови, мг/л; вчСРБ - уровень вчСРБ в сыворотке крови, мг/л; причем увеличение РИИ в 2-5 раз и более по сравнению с практически здоровыми людьми свидетельствует о развитии СЭИ. Изобретение обеспечивает увеличение точности диагностики и позволяет ускорить постановку диагноза. 5 табл., 2 пр.

Способ ранней диагностики эндогенной интоксикации путем расчета раннего интегрального индекса интоксикации (РИИ), отличающийся тем, что с целью ранней диагностики используются результаты определения биохимических показателей синдрома эндогенной интоксикации (СЭИ) (высокочувствительного С-реактивного белка (вчСРБ), гомоцистеина, цистатина С), отражающих различные звенья его патогенеза, и позволяющий выявить СЭИ у практически здоровых людей, доноров и пациентов на донозологическом этапе различных заболеваний, при этом РИИ для мужчин рассчитывается по формуле:

где 10,35 - средний уровень гомоцистеина в сыворотке крови в норме у здоровых мужчин контрольной группы, мкмоль/л;
0,49 - средний уровень цистатина С в сыворотке крови в норме у здоровых мужчин контрольной группы, мг/л;
2,97 - средний уровень вчСРБ в сыворотке крови в норме у здоровых мужчин контрольной группы, мг/л;
Гомоцист. - уровень гомоцистеина в сыворотке крови обследуемого, мкмоль/л;
Цист. С - уровень цистатина С в сыворотке крови обследуемого, мг/л;
вчСРБ - уровень вчСРБ в сыворотке крови обследуемого мужчины, мг/л; дисперсии величин для мужчин 2,21 для гомоцистеина, 0,23 для цистатина С, 2,23 для вчСРБ; а для женщин по формуле:

где 8,94 - средний уровень гомоцистеина в сыворотке крови в норме у здоровых женщин контрольной группы, мкмоль/л;
0,41 - средний уровень цистатина С в сыворотке крови в норме у здоровых женщин контрольной группы, мг/л;
3,29 - средний уровень вчСРБ в сыворотке крови в норме у здоровых женщин контрольной группы, мг/л;
Гомоцист. - уровень гомоцистеина в сыворотке крови обследуемой, мкмоль/л;
Цист. С - уровень цистатина С в сыворотке крови обследуемой женщины, мг/л;
вчСРБ - уровень вчСРБ в сыворотке крови обследуемой женщины, мг/л;
дисперсии величин для женщин равны 2,34 для гомоцистеина, 0,17 для цистатина С, 2,21 для вчСРБ, причем увеличение РИИ в 2-5 раз и более по сравнению с практически здоровыми людьми свидетельствует о развитии СЭИ.