Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым производным 3-ацилингенола и их производным и их применению в качестве лекарственных средств в терапии. Изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения, и способам лечения заболеваний указанными соединениями.
Уровень техники изобретения
Ингенол-3-ангелат (PEP005, мебутат ингенола) является дитерпеновым сложным эфиром семейства ингенола, который выделяют из различных видов Euphorbia, в частности, из Euphorbia peplus. Данное соединение в настоящее время является предметом клинической разработки для применения при лечении старческого кератоза и немеланомного рака кожи.
Ряд других ингенол-3-ацилатов, в основном длинноцепочечных насыщенных и ненасыщенных алифатических жирных кислот, были выделены из различных видов Euphorbia [H. Gotta, Z. Naturforschung, (1984), 39b, 683-94; K. Abo, Fitoterapia, (1988), 244-46, S. Zayed, J. Cancer Res. Clin. Oncol. (2001), 127, 40-47]. Кроме того, малое число ингенол-3-ацилатов было получено полусинтетическим способом (B. Sorg et al., Z. Naturforsch., (1982), 37b, 748-56). Некоторые из этих производных ингенола были описаны и испытаны в качестве сильных раздражающих средств и сильных стимулирующих рост опухолей агентов [B. Sorg et al., Naturforsch., (1982), 37b, 748-56; B. Sorg et al., Carcinogenesis, (1987), 8, 1-4].
Помимо алифатических сложных эфиров ингенола, известны также ароматические сложные эфиры ингенола. Описан миллиамин С, производное ингенол-3-антранилата (Marston, A. Planta Medica, (1983), 47, 141-47). Описан также ингенол-3-бензоат (Sorg, B.; Z Naturforschung, (1982), 37b, 748-56).
Ангеликовая кислота и эфиры ангеликовой кислоты, когда присутствуют в ингенол-3-ангелате, имеют склонность к изомеризации (двойной связи) с образованием эфира тиглиновой кислоты, в частности, при основном значении рН [Beeby, P., Tetrahedron Lett. (1977), 38, 3379-3382, Hoskins, W.М., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, (1977), 538-544, Bohlmann, F. et al., Chem. Ber. (1970), 103, 561-563].
Кроме того, известно, что ингенол-3-ацилаты являются нестабильными, поскольку они подвергаются перегруппировке, образуя при этом ингенол-5-ацилаты и ингенол-20-ацилаты [Sorg, B. et al., Z. Naturforsch., (1982), 37В, 748-756].
В WO99/08994 описывается выделение соединений из растения Euphorbia и их применение при лечении рака и других опухолевых заболеваний, при старческом кератозе или лучевом кератозе. В WO01/93883 описываются производные ингенола, отличающиеся от производных ингенола настоящего изобретения, применяемые для профилактики РКС-связанного состояния или нарушения у субъекта. Заболеваниями, указываемыми в WO01/93883, являются астма, атеросклероз, атопический дерматит, аутоиммунное заболевание, биполярное расстройство, заболевание крови, сердечная гипертрофия, депрессия, диабет, гипертензия, гиперпластический дерматоз, рассеянный склероз, ишемия миокарда, остеоартрит, псориаз, ревматоидный артрит, трансплантация и латентное вирусное заболевание. В WO01/93884 описываются производные ингенола, отличающиеся от производных ингенола настоящего изобретения, и их применение при лечении воспалительных заболеваний, таких как заболевания, являющиеся результатом заражения патогенными микроорганизмами, вирусами, дрожжами, грибами, червями, насекомыми, паукообразными, нематодами, амебами и т.д. В WO01/93885 описываются производные ингенола, отличающиеся от производных ингенола настоящего изобретения и применяемые для иммуностимуляции. В WO08/131491 описываются производные ингенола, отличающиеся от производных ингенола настоящего изобретения и применяемые для лечения инфекционных заболеваний, вызванных HPV-вирусом. В WO06/063382 описываются производные ингенола, отличающиеся от производных ингенола настоящего изобретения и применяемые для лечения солидных опухолей. В AU 2006201661 описывается способ лечения острого миелоидного лейкоза с применением ингенол-3-ангелата. В WO02/11743 описывается конкретное применение при лечении рака предстательной железы и мочевого пузыря. Производные ингенола описываются в WO07/059584 для применения с целью стимуляции заживления ран. В WO2010/091472 описывается использование ингенолов и производных при других косметических применениях.
Считается, что ингенол-3-ангелат, имеет двойной способ действия: 1) индуцирование гибели клеток непосредственным цитотоксичным действием или индуцирование апоптоза и 2) иммуностимулирующее действие, вызванное рекрутментом и активацией нейтрофилов (Rosen, R.H., et al., J. Am. Acad. Derm. (2011), e-published Nov 2011; Ersvaer, E., et al., Toxins, (2010), 2, 174-194). Наномолярные концентрации такого агента вызывают активацию и модуляцию протеинкиназы С (РКС) классических и новых изоформ, особенно значительно формы PKCдельта. Посредством активации PKCдельта агент индуцирует апоптоз у чувствительных клеток. (Hampson, P., et al., Blood, (2005), 106, 1362-1368; Cozzi, S.J., et al., Cancer Res., (2006), 66, 10083-10091). Быстрое цитотоксическое действие на раковые клетки наблюдается при высоких микромолярных концентрациях (Ogbourne, S.М., et al., Cancer Res. (2004), 64, 2833-2839). Посредством активации различных изоформ PKC агент индуцирует также провоспалительные действия, в том числе высвобождение провоспалительных медиаторов (Challacombe, J.M., et al., J. Immunol. (2006), 177, 8123-8132, активацию эндотелия сосудов (Hampson, P. et al., Cancer Immunol Immunother., (2008), 57, 1241-1251); хемоаттракцию нейтрофилов посредством индуцирования интерлейкина 8 в кератиноцитах и развитие определенных противораковых иммунных ответных реакций на CD8+-клетки посредством адъювантных свойств на животных моделях (Le, T.T., et al., Vacccine, (2009), 27, 3053-3062).
Соединения, проявляющие двойной способ действия индуцированием гибели клеток непосредственным цитотоксичным действием или индуцированием апоптоза и иммуностимулирующим действием, включающим рекрутмент и активацию нейтрофилов, могут быть применимы для лечения состояний, связанных с гиперплазией или неоплазией. Соединения, вызывающие гибель клеток первичным и/или вторичным некрозом, и соединения, проявляющие проапоптотическое действие, могут уменьшить нежелательный рост клеток и удалить нежелательные клетки, и, кроме того, стимуляция врожденного иммунного ответа и адъювантных эффектов может повысить биологическую реакцию против аберрантных или трансформированных клеток.
Соединения, индуцирующие гибель клеток первичным и/или вторичным некрозом, могут быть применимы для лечения косметических состояний, так как эти соединения могут уничтожать или удалять нежелательную ткань или клетки.
Существует потребность в получении новых производных ингенола с аналогичной или улучшенной биологической активностью по сравнению с ингенол-3-ангелатом. Кроме того, существует потребность в получении новых производных ингенола, которые вызывают гибель клеток путем цитотоксичности или апоптоза и/или индуцируют иммуностимулирующее действие.
Настоящее изобретение предоставляет разветвленные или замещенные производные 3-О-ацилингенола, применимые для лечения состояний, ассоциированных с применением ингенол-3-ангелата, или применимые для лечения состояний, которые аффектированы индуцированием гибели клеток посредством цитотоксичности или индуцирования апоптоза и/или иммуностимулирующим действием.
Соединения настоящего изобретения стимулируют окислительный взрыв нейтрофилов, который является частью врожденной иммунной реакции.
Соединения настоящего изобретения стимулируют высвобождение IL-8 кератиноцитов, таким образом вызывая иммуностимулирующее действие.
Некоторые соединения настоящего изобретения вызывают быстрый некроз.
Соединения настоящего изобретения проявляют подходящую стабильность.
Некоторые соединения настоящего изобретения проявляют улучшенную активность в анализе окислительного взрыва нейтрофилов по сравнению с ингенол-3-ангелатом.
Некоторые соединения настоящего изобретения проявляют улучшенную активность в анализе высвобождения IL-8 по сравнению с ингенол-3-ангелатом.
Некоторые соединения настоящего изобретения проявляют улучшенную активность в анализе некроза по сравнению с ингенол-3-ангелатом.
Сущность изобретения
В варианте осуществления изобретение относится к соединению общей формулы I
где R представляет собой (C1-C7)алкил, (C2-C7)алкенил или (C2-C7)алкинил; где R замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из R1; где R1 представляет собой
(а) фтор, циано или гидрокси; или
(b) (C1-C4)алкил, циклоалкил, циклоалкенил, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил или (C3-C6)циклоалкилиден, каждый из которых может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из R2, где R2 представляет собой галоген, циано, гидрокси, (C1-C4)алкил, (C2-C4)алкенил, галоген(C1-C4)алкил, -NRaCORb, -COORc, -OCORa, -CONRaRb, -OCONRaRb, -NRaCOORb, -NRaCONRaRb, -NRaSO2Rb, -NRaSO2NRaRb, -SO2NRaRb, -SO2Ra, -S(О)Ra, -ORa, -SRa, =N-ORa, =О; или
(с) -NRaCORb, -COORc, -OCORa, -CONRaRb, -OCONRaRb, -NRaCOORb, -NRaCONRaRb, -NRaSO2Rb, -NRaSO2NRaRb, -SO2NRaRb, -SO2Ra, -S(О)Ra, -ORa, -SRa, =N-ORa, -NRaRb или =О;
и где
Ra и Rb независимо представляют собой водород, (C1-C4)алкил, галоген(C1-C4)алкил, (C1-C4)алкокси(C1-C4)алкил, гидрокси(C1-C4)алкил, циано(C1-C4)алкил или арил;
и где
Rc представляет собой (C1-C4)алкил, галоген(C1-C4)алкил, (C1-C4)алкокси(C1-C4)алкил, гидрокси(C1-C4)алкил или циано(C1-C4)алкил,
и его фармацевтически приемлемым солям, пролекарствам, гидратам и сольватам;
при условии, что, когда R1 представляет собой алкил или алкенил, общая длина цепи R и R1 не превышает длину цепи из 7 атомов углерода,
и при условии, что R и R1 в сочетании не могут быть прямой неразветвленной или незамещенной алкильной цепью или прямой неразветвленной или незамещенной алкенильной цепью,
и при условии, что R не может быть или R и R1 в сочетании не могут быть транс-2-бутен-2-илом.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, применяемому в качестве лекарственного средства в терапии.
В варианте осуществления изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I или его фармацевтически приемлемый стереоизомер, соль или гидролизуемый in vivo сложный эфир в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем.
В варианте осуществления изобретение относится к фармацевтической композиции, подходящей для местного введения и содержащей соединение формулы I или его фармацевтически приемлемый стереоизомер, соль или гидролизуемый in vivo сложный эфир вместе с фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, применяемому при лечении, предотвращении, уменьшении интенсивности симптомов или профилактике физиологических нарушений или заболеваний, связанных с гиперплазией или неоплазией.
В варианте осуществления изобретение относится к применению соединения формулы I для приготовления лекарственного средства для лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, связанных с гиперплазией или неоплазией.
В варианте осуществления изобретение относится к способу предотвращения, лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, связанных с гиперплазией или неоплазией, путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, применяемому при лечении или уменьшении интенсивности симптомов косметических показаний.
В варианте осуществления изобретение относится к применению соединения формулы I для приготовления лекарственного средства для лечения или уменьшения интенсивности симптомов косметических показаний.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения или уменьшения интенсивности симптомов косметических показаний путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I или его фармацевтически приемлемый стереоизомер, соль или гидролизуемый in vivo сложный эфир в сочетании с одним или несколькими другими терапевтически активными агентами.
Подробное описание изобретения
В варианте осуществления изобретение относится к указанному выше соединению формулы I, где R представляет собой (C1-C7)алкил, (C2-C7)алкенил или (C2-C7)алкинил; где R является замещенным одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из R1, где R1 представляет собой
(а) фтор, циано или гидрокси; или
(b) (C1-C4)алкил, циклоалкил, циклоалкенил, арил, гетероарил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, каждый из которых может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из R2, где R2 представляет собой галоген, циано, гидрокси, (C1-C4)алкил, (C2-C4)алкенил, галоген(C1-C4)алкил, -NRaCORb, -COORc, -OCORa, -CONRaRb, -OCONRaRb, -NRaCOORb, -NRaCONRaRb, -NRaSO2Rb, -NRaSO2NRaRb, -SO2NRaRb, -SO2Ra, -S(О)Ra, -ORa, -SRa, =N-ORa, =О; или
(с) -NRaCORb, -COORc, -OCORa, -CONRaRb, -OCONRaRb, -NRaCOORb, -NRaCONRaRb, -NRaSO2Rb, -NRaSO2NRaRb, -SO2NRaRb, -SO2Ra, -S(О)Ra, -ORa, -SRa, =N-ORa,
и где
Ra и Rb представляют собой водород, (C1-C4)алкил, галоген(C1-C4)алкил, (C1-C4)алкокси(C1-C4)алкил, гидрокси(C1-C4)алкил, циано(C1-C4)алкил,
и где
Rc представляет собой (C1-C4)алкил, галоген(C1-C4)алкил, (C1-C4)алкокси(C1-C4)алкил, гидрокси(C1-C4)алкил, циано(C1-C4)алкил,
при условии, что, когда R1 представляет собой алкил или алкенил, общая длина цепи R и R1 не превышает длину цепи из 7 атомов углерода,
при условии, что R и R1 в сочетании не могут быть неразветвленной или незамещенной алкильной или алкенильной цепью,
при условии, что R не может быть или R и R1 в сочетании не могут быть транс-2-бутен-2-илом.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R1 расположен в альфа- или бета-положении относительно карбонильной группы.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R замещен R1 в альфа- или бета-положении относительно карбонильной группы.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R замещен R1 в альфа-положении относительно карбонильной группы.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R представляет собой (С1-С7)алкил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R представляет собой этил, пропил, трет-бутил, изопропил, 2-бутил или 3-пентил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R представляет собой этил, пропил, трет-бутил, изопропил, 2-бутил, 3-пентил или изобутил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R представляет собой (С2-С7)алкенил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R представляет собой пропенил, этенил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R представляет собой пропенил или этенил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R1 представляет собой (С1-С4)алкил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R1 представляет собой С1-С4-алкил, арил, циклоалкил, циклоалкилиден, =N-ORa, =O, -NRaRb, -COORc или циано.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R1 представляет собой этил или метил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R1 представляет собой этил, метил, фенил, циклогексил, =N-OCH3, -N(CH3)(C6H5), -COOCH3 или циклогексилиден.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R1 представляет собой метил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, где R2 представляет собой метил.
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, причем соединение представляет собой
ингенол-3-(2-метилакрилат),
ингенол-3-(3-метилбутеноат),
ингенол-3-(2,3-диметилбутеноат),
ингенол-3-(2-метиленбутират),
ингенол-3-(2-метилпропаноат),
ингенол-3-(3-метилбутаноат),
ингенол-3-(2RS-метилбутаноат),
ингенол-3-(3,3-диметилбутаноат),
ингенол-3-(2-этилбутаноат),
ингенол-3-(2R-метилбутаноат),
ингенол-3-тиглат,
ингенол-3-(фенилацетат),
ингенол-3-(2Z-(метоксикарбонил)акрилат),
ингенол-3-(2-циклогексилпропаноат),
ингенол-3-((2Z)-2-метоксиимино-2-фенилацетат),
ингенол-3-((2Е)-2-метоксиимино-2-фенилацетат),
ингенол-3-((Z)-2-метил-3-(п-толил)проп-2-еноат),
ингенол-3-((E)-2-фенилбут-2-еноат),
ингенол-3-(2,2-дифенилацетат),
ингенол-3-(2-циано-2-циклогексилиденацетат) или
ингенол-3-(2-(метил(фенил)амино)-2-оксоацетат).
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, причем указанное соединение является ингенол-3-(2-метиленбутиратом).
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, причем указанное соединение является ингенол-3-((Z)-2-метил-3-(п-толил)проп-2-еноатом).
В варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, причем указанное соединение является ингенол-3-(2,3-диметилбутеноатом).
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, причем указанное соединение является ингенол-3-(2-этилбутаноатом).
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, причем указанное соединение является ингенол-3-(2-циклогексилпропаноатом).
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I, причем указанное соединение является ингенол-3-((Е)-2-фенилбут-2-еноатом).
Определения
В данном контексте термин "(Са-Cb)алкил", где а и b равны целым числам, относится к алкильному радикалу с прямой или разветвленной цепью, имеющему от а до b атомов углерода. Так, когда а равно 1 и b равно 7, термин, например включает метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, гексил, изогексил и гептил.
Термин "карбоциклический" относится к моно-, би- или трициклическому радикалу, содержащему до 13 атомов кольца, все из которых являются атомами углерода, и включающему арил, циклоалкил и циклоалкенил.
Термин "циклоалкил" относится к моно-, би- или трициклическому насыщенному циклоалкановому радикалу, содержащему 3-13 атомов углерода и включающему, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, бицикло[2.2.1]гептанил и адамантил.
Термин "(Са-Cb)алкенил", где а и b равны целым числам, относится к моно-, ди- или триненасыщенному алкенильному радикалу с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющему от а до b атомов углерода. Так, когда а равно 1 и b равно 7, например такой термин включает, например, этенил, аллил, пропенил; 1-, 2- или 3-бутенил; 1-, 2-, 3- или 4-пентенил; 1-, 2-, 3-, 4- или 5-гексенил.
Термин "циклоалкенил" относится к моно-, ди- или триненасыщенным неароматическим циклическим углеводородным радикалам, включающим полициклические радикалы, содержащим 3-13 атомов углерода и включающим, например, циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил или циклогексенил.
Термин "(Са-Cb)алкинил", где а и b равны целым числам, относится к углеводородному радикалу с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющему от а до b атомов углерода и содержащему 1-2 С-С-тройные связи. Так, когда а равно 1 и b равно 7, термин, например включает этинил, пропинил, бутинил, пентинил или гексинил.
Термин "гетероциклический" относится к карбоциклическому радикалу, который имеет указанные выше значения, содержит 1-4 гетероатома, выбранные из О, N или S, и включает гетероарил, гетероциклоалкил и гетероциклоалкенил.
Термин "гетероциклоалкил" относится к циклоалкильному радикалу, имеющему указанные выше значения, включающему полициклические радикалы, необязательно конденсированные с карбоциклическими кольцами, и содержащему 1-4 гетероатома, выбранные из О, N или S, например тетрагидрофуранилу, пирролидинилу, диоксоланилу, морфолинилу, имидазолидинилу, пиперидинилу или 5-оксабицикло[2.2.2]октану.
Термин "гетероциклоалкенил" относится к циклоалкенильному радикалу, имеющему указанные выше значения, включающему полициклические радикалы, необязательно конденсированные с карбоциклическими кольцами, и содержащему 1-4 гетероатома, выбранные из О, N или S, например дигидропиранилу.
Термин "арил" относится к радикалу ароматических карбоциклических колец, содержащих 6-10 атомов углерода, в частности фенилу, и необязательно конденсированных карбоциклических колец, по меньшей мере с одним ароматическим кольцом. Таким образом, термин включает, например, фенил, нафтил, инденил или инданил.
Термин "гетероарил" относится к радикалам гетероциклических ароматических колец, необязательно конденсированных с карбоциклическими кольцами или гетероциклическими кольцами, содержащими 1-4 гетероатома, выбранные из О, S и N, и 1-12 атомов углерода, в частности 5- или 6-членными кольцами с 1-4 гетероатомами, или необязательно конденсированными бициклическими кольцами, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим. Таким образом, термин включает, например, пиридил, хинолил, изохинолил, индолил, тетразолил, фурил, тиазолил, имидазолил, имидазо[1,2-а]пиримидинил, пирролил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, 1,2,4-триазолил, тиенил, пиразинил, пиримидинил, 1,2,3-триазолил, изотиазолил, имидазо[2,1-b]тиазолил, бензимидазолил, бензофуранил, бензофуранил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензооксазолил, индазолил.
Предполагается, что термин "галоген" означает заместитель из 7-ой основной группы периодической таблицы, предпочтительно фтор, хлор и бром.
Предполагается, что термин "алкокси" означает радикал формулы -OR, где R представляет собой алкил, имеющий указанные выше значения, например, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, бутокси и т.д.
Предполагается, что термин "гидроксиалкил" означает первичный, вторичный или третичный радикал формулы -R-OH, где R представляет собой алкил, имеющий указанные выше значения, например, гидроксиметил или гидроксиэтил.
Предполагается, что термин "цианоалкил" означает первичный, вторичный или третичный радикал формулы -R-CN, где R представляет собой алкил, имеющий указанные выше значения, например, цианометил или цианоэтил.
Предполагается, что термин "галогеналкил" означает первичный, вторичный или третичный радикал формулы -R-X(1-3), где R представляет собой алкил, имеющий указанные выше значения, и Х представляет собой галоген, имеющий указанные выше значения, например, трифторметил, 2,2,2-трифторэтил или дифторметил.
Предполагается, что термин "алкоксиалкил" означает алкильный радикал, имеющий указанные выше значения, который замещен алкоксирадикалом, имеющим указанные выше значения, то есть -R-O-R, где каждый R представляет собой алкил, причем алкилы являются одинаковыми или разными и имеют указанные выше значения, например, метоксиметил, этоксиметил.
Предполагается, что в настоящем контексте термин "циклоалкилиден" означает двухвалентный радикал циклоалкила, такой как циклогексилиден, циклопентилиден или циклобутилиден, как показано ниже:
Предполагается, что в настоящем контексте термин "транс-2-бутен-2-ил" означает радикал указанной ниже структуры
Предполагается, что в данном контексте замещенный алкил, замещенный алкенил или замещенный алкинил означает алкильную, алкенильную или алкинильную часть, которая замещена одним или несколькими группами-заместителями, присоединенными к такой алкильной, алкенильной или алкинильной части.
Предполагается, что термин "замещенный", применяемый для любой части контекста, означает замещение совместимыми заместителями.
Предполагается, что в данном контексте прямая неразветвленная алкильная цепь означает неразветвленную алкильную часть, такую как этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил или н-гептил.
Предполагается, что в данном контексте прямая неразветвленная алкенильная цепь означает неразветвленную алкенильную часть, такую как этенил, аллил, пропен-1-ил, бутен-1-ил, пентен-1-ил, гексен-1-ил или гептен-1-ил.
Предполагается, что в данном контексте незамещенная алкильная цепь означает неразветвленную алкильную часть без заместителей, присоединенных к алкильной части, такую как этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил или н-гептил.
Предполагается, что в данном контексте незамещенная алкенильная цепь означает неразветвленную алкенильную часть без заместителей, присоединенных к алкенильной части, такую как этенил, аллил, пропен-1-ил, бутен-1-ил, пентен-1-ил, гексен-1-ил или гептен-1-ил.
Предполагается, что в данном контексте заместитель (R1) в альфа-положении относительно карбонильной группы означает заместитель (R1) в альфа-положении к карбонильной части, как показано ниже
Предполагается, что в данном контексте заместитель (R1) в бета-положении относительно карбонильной группы означает заместитель (R1) в бета-положении к карбонильной части, как показано ниже
Предполагается, что термин "фармацевтически приемлемая соль" означает соли, полученные взаимодействием соединения формулы I, содержащего основную часть, с подходящей неорганической или органической кислотой, такой как хлористоводородная, бромистоводородная, йодистоводородная, серная, азотная, фосфорная, муравьиная, уксусная, 2,2-дихлоруксусная, холиновая, адипиновая, аскорбиновая, L-аспарагиновая, L-глутаминовая, галактаровая, молочная, малеиновая, L-яблочная, фталевая, лимонная, пропионовая, бензойная, глутаровая, глюконовая, D-глюкуроновая, метансульфоновая, салициловая, янтарная, малоновая, винная, бензолсульфоновая, этан-1,2-дисульфоновая, 2-гидроксиэтансульфоновая, толуолсульфоновая, сульфаминовая или фумаровая кислота. Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I, содержащих кислотную часть, можно получить также реакцией с подходящим основанием, таким как гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид магния, гидроксид кальция, аммиак или подходящие нетоксичные амины, такие как низшие алкиламины, например, триэтиламин, гидрокси(низший алкил)амины, например, 2-гидроксиэтиламин, бис-(2-гидроксиэтил)амин, циклоалкиламины, например дициклогексиламин, или бензиламины, например Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин и дибензиламин, или L-аргинин или L-лизин.
Настоящее изобретение включает также пролекарства соединений общей формулы I, такие как сложные эфиры, ацетали, кетали или другие производные, которые подвергаются биопревращению in vivo перед проявлением их фармакологических действий.
Предполагается, что термин “сольват” означает тип соединения, образующегося в результате взаимодействия между соединением, например соединение формулы I, и растворителем, например спиртом, глицерином или водой, где указанный тип соединения находится в твердой форме. Когда растворителем является вода, тип соединения называют гидратом.
Соединения формулы I можно получить в кристаллической форме либо непосредственно концентрированием из органического растворителя, либо кристаллизацией или перекристаллизацией из органического растворителя или смеси такого растворителя и сорастворителя, который может быть органическим или неорганическим, таким как вода. Кристаллы можно выделить по существу в свободной от растворителей форме или в виде сольвата, такого как гидрат. Изобретение охватывает все кристаллические модификации и формы, а также их смеси.
Предполагается, что термин “рак” в контексте настоящего изобретения охватывает рак кожи, такой как немеланомный рак кожи, злокачественную меланому, рак клеток Меркеля, плоскоклеточный рак, базально-клеточный рак. Базально-клеточный рак включает также поверхностно-локализованный базально-клеточный рак, так же как узелковый базально-клеточный рак. Плоскоклеточный рак охватывает внутриэпителиальную форму плоскоклеточного рака (болезнь Боуэна), инвазивный плоскоклеточный рак, кожный плоскоклеточный рак, плоскоклеточный рак слизистой оболочки, плоскоклеточный рак головы и шеи. Другие типы рака включают гематологический рак, такой как миелоидные раковые заболевания, в частности такие, как острый миелоидный лейкоз и хронический миелоидный лейкоз; рак предстательной железы и мочевого пузыря, включая доброкачественную гиперплазию предстательной железы, интраэпителиальную карциному при простатите, карциному мочевого пузыря, аденокарциному предстательной железы и рак почки. Другое раковое заболевание включает рак, связанный со СПИД, невриному слухового нерва, аденоидно-кистозный рак, адренокортикальный рак, идиопатическую миелоидную метаплазию, алопецию, альвеолярную саркому мягкой части, рак анального канала, ангиосаркому, апластическую анемию, астроцитому, атаксию-телеангиэктазию, базально-клеточный рак (bcc), рак мочевого пузыря, рак костей, рак кишечника, глиому ствола мозга, раковые болезни головного мозга и ЦНС, рак молочной железы, раковые заболевания ЦНС, карциноидные раковые заболевания, рак шейки матки, раковые заболевания головного мозга у детей, рак у детей, саркомы мягких тканей детей, хондросаркому, хориокарциному, колоректальные виды рака, кожную Т-клеточную лимфому, набухающие дерматофибросаркомы, десмопластический мелкокруглоклеточный рак, рак протоков, эндокринные раковые болезни, рак эндометрия, эпендимому, рак пищевода, саркому Юинга, внепеченочный рак желчных протоков, рак глаз, глазные болезни: меланому, ретинобластому, рак маточных труб, анемию Фанкони, фибросаркому, рак желчного пузыря, рак желудка, раковые болезни желудочно-кишечного тракта, желудочно-кишечный карциноидный рак, раковые болезни мочеполовой системы, раковые болезни зародышевых клеток, гестационную трофобластическую болезнь, глиому, гинекологические раковые болезни, гематологические злокачественные новообразования, в том числе острый миелоидный лейкоз, рак головы и шеи, печеночно-клеточный рак, наследственный рак молочной железы, гистиоцитоз, болезнь Ходжкина, болезнь вируса папилломы человека, хорионаденому, гиперкальциемию, рак подглоточника, внутриглазную меланому, рак Т-клеточных островков, саркому Капоши, рак почки, гистоцитоз клеток Лангерганса, рак гортани, лейомиосаркому, синдром рака Фромени, рак губы, липосаркому, рак печени, рак легких, лимфедему, лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, рак груди мужчин, злокачественный рабдоидный рак почки, медуллобластому, мезотелиому, метастатический рак, рак ротовой полости, множественную эндокринную неоплазию, грибовидный микоз, миелодиспластические синдромы, миелому, миелопролиферативные заболевания, рак носа, рак носоглотки, нефробластому, нейробластому, нейрофиброматоз, синдром Ниймегена, немелкоклеточный рак легких (nsclc), рак глаз, рак пищевода, рак ротовой полости, рак ротоглотки, остеосаркому, рак яичников стомы, рак поджелудочной железы, параназальный рак, рак паращитовидной железы, рак околоушной железы, рак полового члена, периферические нейроэктодермальные виды рака, рак гипофиза, истинную полицитемию, рак простаты, редкие раковые болезни и связанные с ними нарушения, ретинобластому, рабдомиосаркому, синдром Ротмунда-Томсона, рак, саркому, шванному слюнных желез, синдром Сезари, мелкоклеточной рак легких (sclc), рак тонкой кишки, саркому мягких тканей, раковые болезни спинного мозга, рак желудка, синовиальную саркому, рак яичек, рак вилочковой железы, рак щитовидной железы, рак переходных клеток (мочевого пузыря), рак переходных клеток (почечной лоханки/мочеточника), трофобластический рак, рак уретры, рак мочевой системы, рак уроплателая, саркому матки, рак матки, рак влагалища, рак вульвы, макроглобулинемию Вальденстрема и рак Вильмса. Солидный рак, который лечат с применением способов настоящего изобретения, может быть первичным поражением или может быть результатом метастаза первичного рака. Кроме того, если солидный рак является метастазом первичного рака, первичный рак может быть либо первичным солидным раком, как описано выше, или может быть диспергированным первичным раком.
В варианте осуществления настоящего изобретения "рак" является раком кожи. В вариантах осуществления изобретения рак кожи является немеланомным раком кожи, злокачественной меланомой, клеточным раком Меркеля, плоскоклеточным раком, плоскоклеточным раком, базально-клеточным раком, таким как поверхностный базально-клеточный рак или узелковый базально-клеточный рак.
Предполагается, что термин "фототравмированная кожа" в контексте настоящего изобретения включает тонкие линии, морщины и УФ-старение. УФ-старение часто проявляется повышением толщины эпидермиса или эпидермальной атрофией и наиболее заметно солнечным эластозом, накоплением эластинсодержащего материала непосредственно под кожно-эпидермальным соединением. Коллагеновые и эластичные волокна становятся фрагментированными и дезорганизованными. В косметических случаях это можно наблюдать как покраснение и/или утолщение кожи, приводящее по внешнему виду к жесткой коже, хрупкости и неравномерной пигментации, потерю тона и эластичности, а также появление морщин, сухости, веснушек и образование глубоких морщин.
Предполагается, что термин "вирусные инфекции" в контексте настоящего изобретения охватывает HPV-инфекции, приводящие к образованию наростов (бородавок) на теле, например на коже, половых органах и полости рта. HPV относится к вирусу папилломы человека. Другие вирусы выбраны из аденовирусов, паповавирусов, вирусов герпеса (например, простого герпеса), ветряной оспы, вируса Эпштейна-Барра, CMV-вируса, поксвируса (такого как вирус натуральной оспы), вируса коровьей оспы, вирусов гепатита A, гепатита В, гепатита C, риновирусов, вирусов полиомиелита, краснухи, арбовируса, вирусов бешенства, гриппа А и В, кори, паротита и ВИЧ, HTLV I и II. В варианте осуществления изобретения HPV-инфекция относится к обычным бородавкам или остроконечным кондиломам.
Предполагается, что термин "бактериальные инфекции" в контексте настоящего изобретения охватывает прокариотические и эукариотические бактериальные инфекции и грамположительные, грамотрицательные и грамвариабельные бактерии, и внутриклеточные бактерии. Примеры бактерий включают Treponema, Borrelia, Neisseria, Legionella, Bordetella, Escherichia, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Yersinia, Vibrio, Hemophilus, риккетсии, хламидии, микоплазмы, стафилококки, стрептококки, палочковидные бактерии, клостридии, коринебактерии, Proprionibacterium, микобактерии, Ureaplasma и Listeria. В частности бактерии следующих видов: Treponema pallidum (бледная спирохета), Borrelia Burgdorferi, Neisseria gonorrhoea, Legionella pneumophila, Bordetella pertussis, кишечная палочка, Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Shigella dysenteriae, Klebsiella pneumoniae, Yersinia Pestis, Vibrio cholerae, Hemophilus influenza, Rickettsia rickettsii, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma pneumonia, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Bacillus anthracis, Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Clostridium perfringens, Corynebacterium diphteriae, Proprionibacterium acne, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae и Listeriare monocytogenes. Низший эукариотический организм включает дрожжи и грибы, такие как Pneumocystis nerinii, Candida albicans, Aspergillus, Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis, Cryptococcus neoformans, Trichophyton и Microsporum. Комплексный эукариотический организм включает червей, насекомых, пауков, нематод, амеб, Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Trichonomonas vaginalis, Trypanosoma brucei gembiense, Trypanosoma cruzi, Blantidium coli, Toxoplasma gondii, Cryptosporidium или Leishmania.
Предполагается, что фраза "физиологические нарушения или заболевания, связанные с гиперплазией или неоплазией" в контексте настоящего изобретения охватывает такие нарушения или заболевания, как кожные бородавки, включающие обычные бородавки (Verruca vulgaris), подошвенные бородавки (Verruca plantaris) и плоские бородавки (verruca plana); остроконечные бородавки (condyloma acuminatum), пиогенную гранулему, гемангиому, склеродерму; раковые заболевания и предраковые поражения, такие как старческий кератоз, плоскоклеточный рак, включающий внутриэпителиальную форму плоскоклеточного рака (болезнь Боуэна), инвазивный плоскоклеточный рак, плоскоклеточный рак кожи, плоскоклеточный рак слизистой оболочки, плоскоклеточный рак головы и шеи; базально-клеточный рак, включающий поверхностный базально-клеточный рак и узелковый базально-клеточный рак; рак мочевого пузыря, лентиго злокачественный, дисплазию шейки матки, дисплазию вульвы и анальную дисплазию, внутриэпителиальную первичную меланому, рак головы и шеи, кожные метастазы любого рака, саркому Капоши, кератоакантому, опухолевые клетки Меркеля, рак предстательной железы, грибовидный микоз, интраэпителиальную неоплазию, в том числе анальный рак, рак шейки матки, протоков, полости рта, заднего прохода, предстательной железы, полового члена, вагинальную неоплазию и интраэпителиальную неоплазию женских наружных половых органов.
Предполагается, что термин "косметические показания" в контексте настоящего изобретения включает такие показания, как фототравмированная кожа, себорейный кератоз, рубцы, келоиды, меланодермия, пойкилодермия Civatte, удаление татуировки, невус, мягкие бородавки.
В контексте настоящего изобретения термин "заживление ран" означает уменьшение или минимизации рубцовой ткани или улучшение косметического или функционального результата при уменьшении ран и шрамов, когда рана является кожной, хронической или, например, связанной с диабетом, и включает порезы и рваные раны, хирургические разрезы, проколы, царапины, раны сжатия, ссадины, раны трения, хронические раны, язвы, раны термического действия, химические раны, раны, являющиеся результатом патогенных инфекций, трансплантации/пересадки кожи доноров и участков реципиента, состояний иммунных ответов, ран полости рта, желудка или кишечника, повреждения хряща или кости, ампутации конечностей и поражения роговицы.
Соединения настоящего изобретения предполагается применять при лечении рака, старческого кератоза, себорейного кератоза, вирусных инфекций, бактериальных инфекций, при заживлении ран и при лечении фототравмированной кожи.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении поверхностного базально-клеточного рака (BCC), узелкового BCC, плоскоклеточного рака или внутриэпителиальной формы плоскоклеточного рака (SCCIS).
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении старческого кератоза.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении себорейного кератоза.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении фототравмированной кожи.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении повреждений, вызванных HPV-инфекцией.
В варианте осуществления изобретения повреждениями являются обычные бородавки или остроконечные кондиломы.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении внутриэпителиальной формы плоскоклеточного рака или инвазивного плоскоклеточного рака.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении плоскоклеточного рака кожи, плоскоклеточного рака слизистой оболочки или плоскоклеточного рака головы и шеи.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении поверхностного базально-клеточного рака или узелкового базально-клеточного рака.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении кожных бородавок или остроконечных кондилом.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении обычных бородавок, подошвенных бородавок и плоских бородавок.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении злокачественного лентиго.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении цервикальной интраэпителиальной неоплазии, анальной интраэпителиальной неоплазии или интраэпителиальной неоплазии вульвы.
В варианте осуществления изобретения соединения изобретения предполагается применять при лечении острого миелоидного лейкоза.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения рака, старческого кератоза, себорейного кератоза, вирусных инфекций, бактериальных инфекций, заживления ран и лечения фототравмированной кожи путем введения нуждающемуся в этом субъекту соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения старческого кератоза путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения себорейного кератоза путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения фототравмированной кожи путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения поражений, вызванных HPV-инфекцией, путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения обычных бородавок или остроконечных кондилом путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения плоскоклеточного рака кожи, плоскоклеточного рака слизистой оболочки или плоскоклеточного рака головы или шеи путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения обычных бородавок, подошвенных бородавок и плоских бородавок путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения злокачественного лентиго путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения цервикальной интраэпителиальной неоплазии, анальной интраэпителиальной неоплазии или интраэпителиальной неоплазии вульвы путем введения нуждающемуся в этом субъекту указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения острого миелоидного лейкоза путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к применению указанного выше соединения формулы I для приготовления фармацевтической композиции для лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов.
В варианте осуществления изобретение относится к применению указанного выше соединения формулы I для приготовления фармацевтической композиции для лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов.
В варианте осуществления изобретение относится к применению указанного выше соединения формулы I для приготовления фармацевтической композиции для лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к индуцированию некроза.
В варианте осуществления изобретение относится к способу предотвращения, лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, восприимчивых к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов, путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу предотвращения, лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, восприимчивых к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов, путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к способу профилактики, лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, восприимчивых к индуцированию некроза, путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к указанному выше соединению формулы I для применения при лечении или уменьшении интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов.
В варианте осуществления изобретение относится к указанному выше соединению формулы I для применения при лечении или уменьшении интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов.
В варианте осуществления изобретение относится к указанному выше соединению формулы I для применения при лечении или уменьшении интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к индуцированию некроза.
В варианте осуществления изобретение относится к способу лечения острого миелоидного лейкоза путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, указанного выше соединения формулы I.
В варианте осуществления изобретение относится к указанному выше соединению формулы I для применения при лечении, предотвращении, уменьшении интенсивности симптомов или профилактике физиологических нарушений или заболеваний, связанных со старческим кератозом, себорейным кератозом, раком, фототравмированной кожей или повреждениями, вызванными HPV-инфекцией.
В варианте осуществления изобретение относится к применению соединения формулы I для приготовления лекарственного средства для лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, связанных со старческим кератозом, себорейным кератозом, раком, фототравмированной кожей или повреждениями, вызванными HPV-инфекцией.
В варианте осуществления изобретение относится к способу предотвращения, лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, связанных со старческим кератозом, себорейным кератозом, раком, фототравмированной кожей или повреждениями, вызванными HPV-инфекцией, путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения формулы I.
Фармацевтические композиции
Для применения в терапии соединения настоящего изобретения обычно находятся в форме фармацевтической композиции. Таким образом, изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы I вместе с фармацевтически приемлемым наполнителем или носителем. Наполнитель должен быть "приемлемым" в смысле совместимости с другими ингредиентами композиции и не должен оказывать вредное воздействие на его реципиент.
Фармацевтические композиции изобретения могут быть в дозированной лекарственной форме, такой как таблетки, пилюли, капсулы, порошки, гранулы, эликсиры, сиропы, эмульсии, ампулы, суппозитории или парентеральные растворы или суспензии, для перорального, парентерального, офтальмического, чрескожного, внутрисуставного, местного, легочного, назального, буккального или ректального введения или любого другого способа, подходящего для введения соединений изобретения и в соответствии с принятыми практиками, такими как практики, описанные в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed., 2000, Lippincott Williams & Wilkins.
Для перорального введения в форме таблетки или капсулы соединение формулы I можно подходящим образом смешать с оральным нетоксичным фармацевтически приемлемым носителем, таким как этанол, глицерин, вода или тому подобное. Кроме того, к смеси при необходимости можно добавить подходящие связывающие вещества, смазывающие вещества, дезинтегрирующие агенты, корригенты и красители. Подходящие связывающие вещества включают, например, лактозу, глюкозу, крахмал, желатин, аравийскую камедь, трагакантовую камедь, альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски или тому подобное. Смазочные вещества включают, например, олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия или тому подобное. Дезинтегрирующие агенты включают, например, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь или тому подобное. Дополнительные наполнители для капсул включают макроголи или липиды.
Для получения твердых композиций, таких как таблетки, активное соединение формулы I смешивают с одним или несколькими наполнителями, такими как наполнители, описанные выше, и другими фармацевтическими разбавителями, такими как вода, чтобы получить твердую предварительно образованную композицию, содержащую гомогенную смесь соединения формулы I. Понятно, что термин "гомогенный" означает, что соединение формулы I равномерно диспергировано по всей композиции, так что композицию можно легко разделить на равно эффективные дозированные лекарственные формы, такие как таблетки или капсулы.
В форме стандартной дозы соединение можно вводить один или несколько раз в день с подходящими интервалами времени между ними, всегда зависящими, однако, от состояния пациента, и в соответствии с предписанием, сделанным практикующим врачом. Стандартная доза препарата преимущественно содержит от 0,01 мг до 200 мг, предпочтительно от 0,01 до 20 мг, например, 0,01-5 мг соединения формулы I.
Подходящая доза соединения настоящего изобретения будет зависеть, среди прочего, от возраста и состояния пациента, тяжести заболевания, подвергаемого лечению, и других факторов, хорошо известных практикующему врачу. Соединение можно вводить либо перорально, парентерально, либо местно согласно различным схемам применения лекарственного средства, например, ежедневно или с недельными интервалами. Обычно разовая доза будет в диапазоне от 0,01 до 200 мг/кг массы тела. Соединение можно вводить в виде болюса (т.е. всю суточную дозу можно вводить сразу) или в виде разделенных доз два или более раз в день.
Если лечение включает введение другого терапевтически активного соединения, рекомендуется получить консультации из публикации Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Ed., J.G. Hardman and L.E. Limbird (Eds.), McGraw-Hill 1995 в отношении применимых доз указанных соединений. Введение соединения настоящего изобретения с одним или несколькими другими активными соединениями можно проводить либо одновременно, либо последовательно.
Жидкие препараты либо для перорального, либо для парентерального введения соединения изобретения включают, например, водные растворы, сиропы, водные или масляные суспензии и эмульсии со съедобными маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло. Подходящие диспергирующие или суспендирующие агенты для водных суспензий включают синтетические или природные камеди, такие как трагакант, альгинат, гуммиарабик, декстран, натрий-карбоксиметилцеллюлоза, желатин, метилцеллюлоза или поливинилпирролидон.
Для парентерального введения, например для внутримышечной, внутрибрюшинной, подкожной или внутривенной инъекции или инфузии, фармацевтическая композиция предпочтительно содержит соединение формулы I, растворенное или солюбилизированное в подходящем фармацевтически приемлемом растворителе. Для парентерального введения композиция изобретения может включать стерильный водный или неводный растворитель, в частности воду, изотонический солевой раствор, изотонический раствор глюкозы, буферный раствор или другой растворитель, обычно используемый для парентерального введения терапевтически активных веществ. Композицию можно стерилизовать, например, фильтрованием через задерживающий бактерии фильтр, добавлением стерилизующего агента к композиции, облучением композиций или нагреванием композиции. Альтернативно, соединение изобретения может быть представлено в виде стерильного твердого препарата, например лиофилизированного порошка, который растворяют в стерильном растворителе непосредственно перед использованием. Композиция, предназначенная для парентерального введения, может дополнительно содержать общепринятые добавки, такие как стабилизаторы, буферы или консерванты, например антиоксиданты, такие как метилгидроксибензоат или тому подобное.
Композиции для ректального введения могут быть в форме суппозитория, включающего активный ингредиент и носитель, такой как масло какао, или в форме клизмы. Композиции, подходящие для внутрисуставного введения, могут быть в форме стерильного водного препарата активного ингредиента, который может быть в микрокристаллической форме, например, в форме водной микрокристаллической суспензии. Липосомные препараты или биоразлагаемые полимерные системы можно также применять как для внутрисуставного, так и офтальмического введения активного ингредиента.
Композиции, подходящие для местного введения, в том числе для офтальмического лечения, включают жидкие или полужидкие препараты, такие как линименты, лосьоны, гели, аппликаторы, эмульсии типа масло-в-воде или вода-в-масле, такие как кремы, мази или пасты; или растворы или суспензии, такие как капли. Композиции для офтальмического лечения могут предпочтительно дополнительно содержать циклодекстрин. Композиции, пригодные для введения в носовую или ротовую полость или для ингаляции, включают порошок, самодвижущиеся препараты и распыляемые препараты, такие как аэрозоли и пульверизаторы.
Кожа человека, в частности наружный слой, роговой слой эпидермиса, обеспечивает эффективный барьер против проникновения микробных патогенов и токсичных химических веществ. Хотя это свойство кожи обычно является полезным, оно затрудняет кожное введение фармацевтических препаратов, так что большое количество, если не большая часть, активного ингредиента, нанесенного на кожу пациента, страдающего кожным заболеванием, не может проникнуть в жизнеспособные слои кожи, где оно проявляет свою активность.
Проникновению в кожу способствует добавление усилителей проницаемости, которые включают изопропиловый спирт, сульфоксиды, азоны, пирролидины, алканолы и гликоли. В вариантах осуществления изобретения усилители проникновения включают ДМСО, лаурокапрам, 2-пирролидон, деканол и пропиленгликоль. В одном варианте осуществления изобретения усилителем проникновения является изопропиловый спирт.
В вариантах осуществления изобретения терапевтически активное соединение растворяют в подходящем растворителе. Подходящими растворителями являются гликоли, кетоны, ацетаты и простые эфиры. Было показано, что производные ингенола имеют хорошую стабильность в спиртах, таких как бензиловый спирт и изопропиловый спирт. Ранее было показано, что в общем производные ингенола имеют хорошую стабильность при низком значении рН. В вариантах осуществления настоящего изобретения значение рН фармацевтического препарата ниже 7. В вариантах осуществления настоящего изобретения значение рН фармацевтического препарата ниже 6. В вариантах осуществления настоящего изобретения значение рН фармацевтического препарата ниже 4,5. В вариантах осуществления настоящего изобретения значение рН фармацевтического препарата ниже 4,0. В вариантах осуществления настоящего изобретения значение рН фармацевтического препарата ниже 4,5 и не ниже 2,5. В вариантах осуществления настоящего изобретения значение рН фармацевтического препарата ниже 4,0 и не ниже 2,5. Предпочтительный диапазон значений рН можно получить включением в препарат подходящего буфера. В одном варианте осуществления изобретения буфером является ацетатный буфер. В вариантах осуществления изобретения применяют цитратный буфер. В вариантах осуществления изобретения применяют смешанный цитрат-фосфатный буфер.
В одном варианте осуществления композиция представляет собой мазь. Согласно существующей классификации FDA мазь является полутвердой лекарственной формой, которая может содержать воду и летучие вещества в количестве до 20% масс. и которая содержит более 50% масс. углеводородов, восков или полиолов в наполнителе. Таким образом, согласно изобретению мазь может быть композицией типа вода-в-масле, в этом случае к липофильным компонентам композиции можно добавить наносуспензию как таковую, так чтобы композиция содержала до 10% масс. или предпочтительно до 5% масс. водной фазы. Альтернативно, композиция может быть неводной мазью, которая содержит примерно менее 2%, предпочтительно менее 1% свободной воды от массы композиции.
Носитель мази может содержать в приемлемом случае парафин, выбранный из парафинов, состоящих из углеводородов с длиной цепи C5-60 и их смесей. Часто используемым носителем мази является вазелин или белый мягкий парафин, который состоит из углеводородов различной длины цепи и с максимальной длиной цепи приблизительно C40-44, или смесь вазелина и жидкого парафина (состоящего из углеводородов с различными длинами цепей с максимумом при C28-40). Хотя вазелин обеспечивает окклюзию обработанной поверхности кожи, уменьшение трансдермальной потери воды и усиление терапевтического действия активного ингредиента в композиции, он имеет тенденцию придавать ощущение жирной и/или липкой поверхности, которое сохраняется в течение некоторого времени после нанесения, и его нелегко распределить по поверхности. Поэтому может быть предпочтительным использование парафинов, состоящих из углеводородов с несколько более короткой длиной цепи, таких как парафины, состоящие из углеводородов с длиной цепи максимум C14-16, С18-22, С20-26, или их смеси. Было обнаружено, что такие парафины являются более косметически приемлемыми в том смысле, что они являются менее липкими и/или жирными при нанесении и более легко распределяются по поверхности. Поэтому предполагается, что это приведет к лучшему соблюдению пациентом терапевтических рекомендаций. Подходящие парафины этого типа производятся Sonneborn и продаются под торговым названием Sonnecone, например Sonnecone CM, Sonnecone DM1, Sonnecone DM2 и Sonnecone HV. Эти парафины дополнительно описаны и охарактеризованы в WO 08/141078, которая включена в контекст посредством ссылки. (Углеводородный состав парафинов определяли методом газовой хроматографии).
Для придания желаемой вязкости композиции в нее можно соответственно включить липофильный повышающий вязкость ингредиент, такой как воск. Воском может быть минеральный воск, состоящий из смеси углеводородов с высокой молекулярной массой, например, насыщенных С35-70-алканов, такой как микрокристаллический воск. Кроме того, воск может быть растительным или животным воском, например, может состоять из сложных эфиров C14-32-жирных кислот и C14-32-жирных спиртов, таким как пчелиный воск. Количество повышающего вязкость ингредиента может варьировать в зависимости от способности такого ингредиента придавать вязкость, но обычно его содержание может быть в интервале приблизительно 1-20% масс. композиции. Когда повышающим вязкость ингредиентом является микрокристаллический воск, он обычно присутствует в количестве в диапазоне приблизительно 5-15% масс., например, приблизительно 10% масс. композиции.
Для поддержания хорошей физической стабильности композиции, в частности чтобы избежать разделения в ней водной и липидной фаз, может быть целесообразно включение эмульгатора для эмульсии типа вода-в-масле с величиной HLB (водно-липофильный баланс) 3-8. Примерами таких эмульгаторов являются полиоксиэтилен-C8-22алкиловые эфиры, например полиоксиэтиленстеариловый эфир, полиоксиэтиленцетиловый эфир, полиоксиэтиленолеиловый эфир или полиоксиэтиленлауриловый эфир. Количество эмульгатора обычно находится в диапазоне 2-10% масс./масс. композиции. В другом варианте осуществления композиция представляет собой крем, который может содержать компоненты, аналогичные компонентам мази, но который обычно представляет собой эмульсию типа масло-в-воде, содержащую значительное количество воды.
Композиция может также содержать другие компоненты, обычно используемые в кожных препаратах, например антиоксиданты (например, альфа-токоферол), консерванты, такие как бензиловый спирт, эдетат натрия, пигменты, смягчающие кожу агенты, заживляющие кожу агенты и агенты кондиционирования кожи, такие как мочевина, аллантоин или бисаболол, ср. CTFA Cosmetic Ingredients Handbook, 2nd Ed., 1992. В одном варианте осуществления изобретения консервантом является бензиловый спирт.
В варианте осуществления композиция является гелем. Подходящие желатинирующие агенты включают водорастворимые, полученные из целлюлозы полимеры, такие как гидроксиалкилцеллюлозные полимеры. В вариантах осуществления изобретения такими полимерами являются гидроксиметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза и гидроксипропилметилцеллюлоза. Другими желатинирующими агентами являются такие целлюлозы, как карбоксиметилцеллюлоза, метилгидроксиэтилцеллюлоза и метилцеллюлоза, карбомер, такой как карбопол и каррагинан. В вариантах осуществления изобретения желатинирующий агент получают из целлюлозы. В вариантах осуществления изобретения целлюлозой является гидроксиалкилцеллюлоза, такая как гидроксиэтилцеллюлоза.
В варианте осуществления изобретения композиция содержит активное соединение, усилитель проникновения, консервант, желатинирующий агент и буфер при рН менее 4 и не менее 2,5. Для местного введения соединение формулы I обычно присутствует в количестве от 0,001 до 20% масс. композиции, например от 0,01% до приблизительно 10%. В вариантах осуществления настоящего изобретения активное соединение присутствует в количестве 0,05-1%. В варианте осуществления настоящего изобретения активное соединение присутствует в количестве 0,01-0,5%. В варианте осуществления настоящего изобретения активное соединение присутствует при концентрации приблизительно 0,1%. В варианте осуществления изобретения композиция содержит 0,005-0,1% активного соединения, 20-40% изопропилового спирта, 0,5-10% бензилового спирта, 0,5-5% гидроксиэтилцеллюлозы и цитратный буфер до 100%.
Препарат производных ингенола в виде геля для местного применения описан в WO07/068963, которая включена в качестве ссылки.
Способы получения
Соединения формулы I можно, например, получить с применением реакций и методик, приведенных ниже, вместе со способами, известными в области синтетической органической химии, или их вариантами, применяемыми специалистами в данной области. Предпочтительные способы включают, но без ограничения, способы, описанные ниже. Реакции проводят в растворителях, подходящих для реагентов и веществ, применяемых и подходящих для осуществления превращений. Кроме того, в синтетических способах, описанных ниже, как должно быть понятно, все предложенные условия реакций, включающие выбор растворителя, атмосферу реакции, температуру реакции, продолжительность эксперимента и процедур обработки, выбирают так, чтобы они были стандартными для данной реакции и могли быть легко определены специалистом в данной области техники. Не все соединения, относящиеся к данному классу, могут быть совместимы с некоторыми из условий реакции, требуемых в некоторых из описанных способов. Такие ограничения для заместителей, которые являются совместимыми с условиями реакции, будут легко очевидны специалистам в данной области техники, можно также применять альтернативные способы. Соединения настоящего изобретения или любой промежуточный продукт при необходимости можно очистить с использованием стандартных способов, хорошо известных специалисту синтетической органической химии, например способами, описанными в публикации W. Armarego "Purification of Laboratory Chemicals", Butterworth-Heinemann, 6th ed. 2009. Исходные вещества являются либо известными соединениями, коммерчески доступными, либо их можно получить обычными синтетическими способами, хорошо известными специалисту в данной области техники.
Соединения изобретению можно, например получить согласно следующим неограничивающим общим способам и примерам.
Схема 1
Схема 2
Соединения общей формулы I можно, например, синтезировать согласно схеме 1 или 2 реакцией ингенола с гидроксилзащищающим агентом или дигидроксилзащищающим агентом с получением защищенных производных ингенола а или с согласно способам, описанным, но не ограниченным публикацией "Protective Groups in Organic Synthesis", 4th ed. P.G.M. Wuts; T.W. Greene, John Wiley, 2007 или P.J. Kocienski, "Protecting Groups", 3rd ed. G. Thieme, 2003 и в ссылках публикации.
Например, соединение а, где защитная группа (Pg) представляет собой трифенилметил, можно синтезировать реакцией ингенола с трифенилметилсодержащим реагентом, таким как фторборат трифенилметилпиридиния или трифенилметилхлорид, в подходящем растворителе, таком как пиридин, Ν,Ν-диметилформамид или дихлорметан, в присутствии или в отсутствие основания (например, Opferkuch et al., Z. Naturforschung, (1981), 36В, 878). Соединение а, где защитная группа (Pg) представляет собой силил, например, можно синтезировать реакцией ингенола с силилхлоридом, таким как трет-бутилдиметилсилилхлорид, трет-бутилдифенилсилилхлорид или триизопропилсилилхлорид, в подходящем растворителе, таком как N,N-диметилформамид, пиридин, дихлорметан, тетрагидрофуран или ацетонитрил, в присутствии подходящего основания, такого как имидазол, триэтиламин, N,N-диизопропилэтиламин или 4-(N,N-диметиламино)пиридин (см., например, Sorg, B. et al., Z. Naturforsch., (1982), 37В, 1640-47), или реакцией соединения (II) с силилтрифлатом, таким как трет-бутилдиметилсилилтрифторметансульфонат, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, в присутствии подходящего основания, такого как триэтиламин.
Соединение а, где Pg представляет собой 2-тетрагидропиранил, например можно синтезировать реакцией ингенола с дигидропираном в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или ацетонитрил, в присутствии подходящей кислоты, такой как п-толуолсульфокислота. Соединение с, где защитная группа (Pg) представляет собой ацеталь, такой как бензилиденацеталь, можно, например получить реакцией ингенола с бензальдегидом или диметилацеталем бензальдегида в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или N,N-диметилформамид, в присутствии подходящей кислоты такой как п-толуолсульфоновая кислота. Соединение с, где защитная группа (Pg) представляет собой кеталь, такой как изопропилиденкеталь, например можно синтезировать реакцией ингенола с кетоном, таким как ацетон, или диметоксикеталем, таким как 2,2-диметоксипропан, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или Ν,Ν-диметилформамид, в присутствии подходящей кислоты, такой как п-толуолсульфоновая кислота (см., например, B. Sorg, Z. Naturforsch. (1982), 37b, 748-756). Ацетон и 2,2-диметоксипропан могут также действовать в качестве растворителей.
Как показано на схемах 1 и 2, защищенные производные ингенола а или с можно этерифицировать с получением соединений общей формулы b или d согласно методам этерификации гидроксильных групп, описанным, но не ограниченным публикацией "Esterification", J. Otera, Wiley-VCH, 2003 и в ссылках в ней. Соединение b или d можно, например, синтезировать реакцией соединения а или с с активированным производным кислоты, таким как галогенангидрид кислоты, таким как хлорангидрид кислоты. Этерификацию реакцией с хлорангидридом кислоты можно проводить в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или толуол, без активатора, или ее можно проводить в присутствии основания, такого как пиридин, триэтиламин или 4-(N,N-диметиламино)пиридин (см., например, В. Sorg, Z. Naturforsch, (1982), 37b, 748-756).
Соединение b или d можно, например синтезировать реакцией соединения а или с с активированным производным кислоты, таким как ангидрид кислоты. Этерификацию реакцией с ангидридом кислоты можно проводить без катализатора (см., например, Opferkuch et al., Z. Naturforschung, (1981), 36В, 878) или в присутствии кислотного катализатора, в качестве которого применяют такую кислоту, как хлорная кислота или кислота Льюиса, такая как трифлат скандия(III) или трифлат висмута(III), или в присутствии основания, такого как гидрокарбонат натрия или триэтиламин.
Соединение b или d можно, например, синтезировать взаимодействием соединения а или с с активированным производным кислоты, таким как смешанный ангидрид кислоты, такой как трихлорбензойная кислота. Этерификацию путем реакции со смешанным ангидридом можно проводить в подходящем растворителе без катализатора или в присутствии кислотного катализатора с использованием такой кислоты, как перхлорная кислота или кислота Льюиса, такая как трифлат скандия(III) или трифлат висмута(III), или в присутствии основания, такого как гидрокарбонат натрия или триэтиламин. Соединение b или d можно, например, синтезировать взаимодействием соединения а или с с кислотой в присутствии реагента сочетания, такого как карбодиимид, такой как дициклогексилкарбодиимид или N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимид, в присутствии или в отсутствие основания, такого как 4-(N,N-диметиламино)пиридин, и без катализаторов или с катализаторами, таким как 4-(N,N-диметиламино)пиридин, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан (см., например, Appendino et al., Eur. J. Org. Chem. (1999), 3413). На стадии этерификации можно также применять реагенты сочетания на твердых носителях [Nam, N.-H., Journal of Combinatorial Chemistry, (2003), 5, 479-545 или “Esterification” by J. Otera, Wiley-VCH, 2003].
Соединения формулы I можно получить селективным удалением защитных групп Pg у соединений общей структуры b или d согласно методам для удаления защитных групп у гидроксил- или дигидроксилзащищенных групп, которые описаны в публикации "Protective Groups in Organic Synthesis", 4th ed. P.G.M. Wuts; T.W. Greene, John Wiley, 2007 или в P.J. Kocienski, "Protecting Groups", 3rd ed. G. Thieme, 2003 и ссылках в них, но не ограничиваются этими описанными методами.
Соединения общей формулы I можно, например, получить из соединений общей формулы d, где Pg представляет собой ацеталь, такой как бензилиденацеталь, или кеталь, такой как изопропилиденкеталь, отщеплением защитной группы в присутствии подходящей кислоты, такой как водный хлорид водорода, уксусная кислота, трифторуксусная кислота или п-толуолсульфоновая кислота, в подходящем растворителе, таком как метанол или водный тетрагидрофуран. Соединения общей формулы I можно, например, получить из соединений общей формулы b, где Pg представляет собой алкоксиалкил, такой как 2-тетрагидропиранил, отщеплением ацетальной части, например, путем катализируемого кислотой отщепления в присутствии подходящей кислоты, такой как п-толуолсульфоновая кислота, в подходящем растворителе, таком как метанол. Соединения общей формулы I можно, например, получить из соединений общей формулы b, где Pg представляет собой силил, такой как трет-бутилдиметилсилил, путем взаимодействия соединения b с подходящей кислотой, такой как хлорид водорода, в подходящем растворителе, таком как метанол, или реакцией с источником фторида, таким как фторид тетра-н-бутиламмония или тетрафторсилан, в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран или ацетонитрил. Соединения общей формулы I можно, например получить из соединений общей формулы b, где Pg представляет собой трифенилметил, путем взаимодействия соединения b с подходящей кислотой, такой как муравьиная кислота или трифторуксусная кислота, в подходящем растворителе, таком как простой эфир, метанол или дихлорметан.
Соединения формул b, d или I указанной выше схемы 1 или 2, можно, например, синтезировать ферментативной этерификацией путем реакции соединения а, с или ингенола с донором ацилов, таким как ангидрид кислоты, сложный эфир, такой как виниловый сложный эфир или тиоэфир, в присутствии фермента, такого как липаза или эстераза.
Примеры
Общие положения
Все применяемые исходные вещества являются коммерчески доступными, если не описано иначе. Для спектров 1Н ядерного магнитного резонанса (ЯМР) указываются величины химических сдвигов (δ) (в м.д.); причем тетраметилсилан (δ=0,00) является стандартом. Указываются величины определенного дублета (д), триплета (т), квартета (кв.) или мультитета (м). Химические сдвиги взаимозаменяемых протонов (часто уширенные синглеты (ушир. с)) иногда трудно обнаружить в спектре. Все применяемые органические растворители были безводными, если не указано иначе. Флэш-хроматографию проводили на силикагеле. Подходящие смеси этилацетата и гептана применяли в качестве элюентов, если не указано иначе. Соединения детектировали на пластинках ТСХ с проявлением водным раствором перманганата калия.
Ингенол-5,20-ацетонид
Ингенол (1,00 г, 2,30 ммоль) растворяли в растворе моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты в ацетоне (0,47 мг/мл, 22,5 мл). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 25 мин. К этому раствору добавляли насыщенный водный раствор NaHCO3 (0,2 мл). Полученную смесь концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в насыщенным растворе соли и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали флэш-хроматографией (гептан/этилацетат 19:1 → гептан/этилацетат 1:0), получая при этом указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (616 мг, 69%). (См. также Opferkuch, H. J. et al., Z. Naturforsch., (1981), 86b, 878-887).
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 5,91 (кв., J=1,5 Гц, 1H), 5,79 (м, 1H), 4,25 (д, J=4,5 Гц, 1H), 4,20-4,07 (м, 3H), 3,93 (с, 1H), 3,51 (с, 1H), 2,57-2,41 (м, 2H), 2,25 (ддд, J=15,7, 8,4, 2,9 Гц, 1H), 1,85 (д, J=1,5 Гц, 3H), 1,77 (дт, J=15,8, 5,9 Гц, 1H), 1,41 (с, 3H), 1,35 (с, 3H), 1,13 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 1,00-0,87 (м, 4H), 0,70 (тд, J=8,4, 6,4 Гц, 1H).
Общие процедуры получения соединений общей формулы II
Процедура а
Смесь карбоновой кислоты (0,100 ммоль) дициклогексилкарбодиимида (0,100 ммоль), 4-(N,N-диметиламино)пиридина (0,0025 ммоль) и ингенол-5,20-ацетонида (0,050 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в дихлорметане в течение 20-24 час. Эту смесь смешивали с этилацетатом, фильтровали и промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушили сульфатом натрия, концентрировали в вакууме и очищали флэш-хроматографией (гептан → гептан/этилацетат 7:3), получая при этом указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.
Процедура b
Смесь ацилхлорида (0,0625 ммоль), диизопропилэтиламина (0,075 ммоль), 4-(N,N-диметиламино)пиридина (0,070 ммоль) и ингенол-5,20-ацетонида (0,050 ммоль) перемешивали при 55°С в тетрагидрофуране в течение 6-20 час. Эту смесь смешивали с этилацетатом, фильтровали и промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушили сульфатом натрия, концентрировали в вакууме и очищали флэш-хроматографией (гептан → гептан/этилацетат 7:3), получая при этом указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.
Процедура с
Смесь карбоновой кислоты (0,100 ммоль), дициклогексилкарбодиимида (0,100 ммоль), 4-(N,N-диметиламино)пиридина (0,025 ммоль) и ингенол-5,20-ацетонида (0,050 ммоль) перемешивали в микроволновой печи при 150°С в ацетонитриле в течение 5 мин. Эту смесь смешивали с этилацетатом, фильтровали и промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия, концентрировали в вакууме и очищали флэш-хроматографией (гептан → гептан/этилацетат, 7:3), получая при этом указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.
Процедура d
Смесь ацилхлорида (0,125 ммоль), диизопропилэтиламина (0,250 ммоль), 4-(N,N-диметиламино)пиридина (0,025 ммоль) и ингенол-5,20-ацетонида (0,050 ммоль) перемешивали в микроволновой печи при 150°С в ацетонитриле в течение 20 мин. Смесь смешивали с этилацетатом, фильтровали и промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушили сульфатом натрия, концентрировали в вакууме и очищали флэш-хроматографией (гептан → гептан/этилацетат, 7:3), получая при этом указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.
Общая процедура получения соединений общей формулы I
Процедура е
Ингенол-5,20-ацетонид-3-ацилат (0,10 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (0,47 мл) в атмосфере аргона. Добавляли водный раствор HCl (4 М, 4,7 мкл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 20-27 часов. Раствор концентрировали в вакууме. Остаток очищали флэш-хроматографией (гептан/этилацетат 5:1 → гептан/этилацетат, 3:7), получая при этом указанное в заголовке соединение.
Получение соединения 201
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2-метилакрилат) (соединение 201)
Соединение 201 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: 2-метилакриловая кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,12-6,11 (м, 1Н), 6,05 (м, 1Н), 5,79-5-77 (м, 1Н), 5,62 (с, 1Н), 5,60 (м, 1Н), 4,25-4,11 (м, 3H), 4,02 (с, 1Н), 3,14 (с, 1Н), 2,61-2,54 (м, 1Н), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,97 (м, 3H), 1,81-1,72 (м, 4H), 1,47 (с, 3H), 1,42 (с, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,99 (д, 3H), 0,94-0,88 (м, 1Н), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Получение соединения 202
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(3-метилбутеноат) (соединение 202)
Соединение 202 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: 3-метилбутеновая кислота.
Получение соединения 203
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2,3-диметилбутеноат) (соединение 203)
Соединение 203 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: 2,3-диметилбутеновая кислота.
Получение соединения 204
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(метиленбутаноат) (соединение 204)
Соединение 204 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: 2-метиленбутановая кислота.
Получение соединения 205
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2-метилпропаноат) (соединение 205)
Соединение 205 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: 2-метилпропановая кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,05-6,04 (м, 1Н), 5,78-5,76 (м, 1Н), 5,54 (с, 1Н), 4,24-4,10 (м, 3H), 4,00 (с, 1Н), 3,09 (с, 1Н), 2,65-2,54 (м, 2H), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,80-1,71 (м, 4H), 1,45 (с, 3H), 1,41 (с, 3H), 1,21 (д, 3H), 1,19 (д, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,98 (д, 3H), 0,93-0,87 (м, 1Н), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Получение соединения 206
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(3-метилбутаноат) (соединение 206)
Соединение 206 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: 3-метилбутановая кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,04-6,03 (м, 1Н), 5,79-5,77 (м, 1Н), 5,55 (с, 1Н), 4,24-4,10 (м, 3H), 4,00 (с, 1Н), 3,15 (с, 1Н), 2,60-2,52 (м, 1Н), 2,32-2,04 (м, 4H), 1,80-1,71 (м, 4H), 1,45 (с, 3H), 1,41 (с, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,99 (д, 6H), 0,98 (д, 3H), 0,94-0,87 (м, 1Н), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Получение соединения 207
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2(RS)-метилбутаноат) (соединения 207а и 207b)
Соединения 207а и 207b получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: (RS)-3-метилбутановая кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,05-6,03 (м, 1Н), 5,79-5,76 (м, 1Н), 5,55 (с, 1Н), 4,24-4,10 (м, 3H), 4,00 (с, 1Н), 3,12 (с, 1Н), 2,61-2,53 (м, 1Н), 2,48-2,40 (м, 1Н), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,80-1,66 (м, 5H), 1,56-1,47 (м, 1Н), 1,46 (с, 3H), 1,41 (с, 3H), 1,20-1,16 (2×д, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,99-0,87 (м, 7H), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Получение соединения 208
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(3,3-диметилбутаноат) (соединение 208)
Соединение 208 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: 3,3-диметилбутановая кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,04-6,02 (м, 1Н), 5,78-5,77 (м, 1Н), 5,55 (с, 1Н), 4,24-4,10 (м, 3H), 4,00 (с, 1Н), 3,15 (с, 1Н), 2,62-2,55 (м, 1Н), 2,30-2,20 (м, 1Н), 2,27 (с, 2H), 1,78-1,69 (м, 4H), 1,45 (с, 3H), 1,41 (с, 3H), 1,10 (с, 3H), 1,06 (с, 9H), 1,05 (с, 3H), 0,97 (д, 3H), 0,93-0,87 (м, 1Н), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Получение соединения 209
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2-этилбутаноат) (соединение 209)
Соединение 209 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: 2-этилбутановая кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,05-6,03 (м, 1Н), 5,78-5,76 (м, 1Н), 5,56 (с, 1Н), 4,25-4,10 (м, 3H), 4,01 (с, 1Н), 3,16 (с, 1Н), 2,64-2,54 (м, 1Н), 2,31-2,21 (м, 2H), 1,78-1,48 (м, 8H), 1,46 (с, 3H), 1,41 (с, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,98 (д, 3H), 0,94 (т, 3H), 0,93 (т, 3H), 0,93-0,87 (м, 1Н), 0,72-0,65 (м, 1Н).
Получение соединения 210
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2R-метилбутаноат) (соединение 210)
Соединение 210 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: (R)-2-метилбутановая кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,05-6,03 (м, 1Н), 5,79-5,76 (м, 1Н), 5,55 (с, 1Н), 4,24-4,10 (м, 3H), 4,00 (с, 1Н), 3,12 (с, 1Н), 2,61-2,53 (м, 1Н), 2,50-2,39 (м, 1Н), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,79-1,66 (м, 5H), 1,59-1,47 (м, 1Н), 1,45 (с, 3H), 1,41 (с, 3H), 1,19-1,16 (д, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,99-0,87 (м, 7H), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Получение соединения 211
Ингенол-5,20-ацетонид-3-тиглат (соединение 211)
Соединение 211 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: тиглиновая кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,90-6,82 (м, 1Н), 6,05-6,04 (м, 1Н), 5,78-5,76 (м, 1Н), 5,62 (с, 1Н), 4,24-4,11 (м, 3H), 4,01 (с, 1Н), 3,17 (с, 1Н), 2,61-2,56 (м, 1Н), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,86-1,72 (м, 10H), 1,45 (с, 3H), 1,42 (с, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 1,00 (д, 3H), 0,94-0,88 (м, 1Н), 0,73-0,63 (м, 1Н).
Получение соединения 212
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(фенилацетат) (соединение 212)
Соединение 212 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: фенилуксусная кислота.
Получение соединения 213
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2Z-(метоксикарбонил)акрилат) (соединение 213)
Соединение 213 получали согласно процедуре а.
Исходное вещество: монометиловый эфир фумаровой кислоты.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,93 (д, 1Н), 6,85 (д, 1Н), 6,09 (м, 1Н), 6,80-6,78 (м, 1Н), 5,62 (с, 1Н), 4,26-4,09 (м, 3H), 4,02 (с, 1Н), 3,82 (с, 3H), 3,59-3,53 (м, 1Н), 2,29-2,20 (м, 1Н), 2,82-2,73 (м, 4H), 1,47 (с, 3H), 1,43 (с, 3H), 1,27 (ушир.с, 1Н), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 1,00 (д, 3H), 0,94-0,85 (м, 1Н), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Получение соединения 214
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2-циклогексилпропаноат) (соединение 414)
Соединение 214 получали согласно процедуре с.
Исходное вещество: 2-циклогексилпропановая кислота.
Получение соединения 215
Ингенол-5,20-ацетонид-3-((2Z)-2-метоксиимино-2-фенилацетат) (соединение 215)
Соединение 215 получали согласно процедуре с.
Исходное вещество: (2Z)-2-метоксиимино-2-фенилуксусная кислота.
Получение соединения 216
Ингенол-5,20-ацетонид-3-((2Е)-2-метоксиимино-2-фенилацетат) (соединение 216)
Соединение 216 получали согласно процедуре с.
Исходное вещество: (2Е)-2-метоксиимино-2-фенилусусная кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,47-7,36 (м, 5H), 6,03-6,02 (м, 1Н), 5,78-5,76 (м, 1Н), 5,70 (с, 1Н), 4,23-4,09 (м, 3H), 4,05 (с, 3H), 4,01 (с, 1Н), 3,32 (с, 1Н), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,77 (д, 3H), 1,68-1,57 (м, 1H), 1,45 (с, 3H), 1,41 (с, 3H), 1,10 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,92-0,86 (м, 1H), 0,81 (д, 3H), 0,70-0,62 (м, 1H).
Получение соединения 217
Ингенол-5,20-ацетонид-3-((Z)-2-метил-3-(п-толил)проп-2-еноат) (соединение 217)
Соединение 217 получали согласно процедуре с.
Исходное вещество: (Z)-2-метил-3-(п-толил)проп-2-еновая кислота.
Получение соединения 218
Ингенол-5,20-ацетонид-3-((Е)-2-фенилбут-2-еноат) (соединение 218)
Соединение 218 получали согласно процедуре с.
Исходное вещество: (Е)-2-фнилбут-2-еновая кислота.
Получение соединения 219
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2,2-дифенилацетат) (соединение 219)
Соединение 219 получали согласно процедуре с.
Исходное вещество: 2,2-дифенилуксусная кислота.
Получение соединения 220
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2-циано-2-циклогексилиденацетат) (соединение 220)
Соединение 220 получали согласно процедуре d, но с продлением времени реакции до 40 мин.
Исходное вещество: 2-циано-2-циклогексилиденацетилхлорид, полученный из 2-циано-2-циклогексилиденуксусной кислоты реакцией с 1,25 экв. оксалилхлорида в дихлорметане и капле N,N-диметилформамида при комнатной температуре в течение 30 мин с последующим выпариванием летучих компонентов в вакууме.
Получение соединения 221
Ингенол-5,20-ацетонид-3-(2-(метил(фенил)амино)-2-оксоацетат) (соединение 221)
Соединение 221 получали согласно процедуре с.
Исходное вещество: 2-(метил(фенил)амино)-2-оксоуксусная кислота.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,41-7,24 (м, 5H), 5,99-5,98 (м, 1Н), 5,76-5,73 (м, 1Н), 5,39 (с, 1Н), 4,19-4,02 (м, 3H), 3,87-3,86 (м, 1Н), 3,36 (с, 3H), 2,75 (с, 1Н), 2,46-2,41 (м, 1Н), 2,24-2,15 (м, 1Н), 1,79-1,67 (м, 1Н), 1,51 (д, 3H), 1,36 (с, 3H), 1,32 (с, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 0,94 (д, 3H), 0,91-0,84 (м, 1Н), 0,72-0,64 (м, 1Н).
Пример 101
Ингенол-3-(2-метилакрилат) (соединение 101)
Соединение 101 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 201.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,15 (с, 1Н), 6,06-6,04 (м, 2H), 5,65-5,64 (м, 1Н), 5,56 (с, 1Н), 4,20-4,11 (м, 3H), 4,05 (с, 1Н), 3,49 (ушир.с, 1Н), 2,9-2,7 (ушир.с, 2H), 2,55-2,50 (м, 1Н), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,99 (с, 3H), 1,79 (д, 3H), 1,80-1,72 (м, 1Н), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,98 (д, 3Н), 0,98-0,91 (м, 1Н), 0,74-0,65 (м, 1Н).
Пример 102
Ингенол-3-(3-метилбутеноат) (соединение 102)
Соединение 102 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 202.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,05 (д, 1Н), 6,02-6,01 (м, 1Н), 5,77-5,76 (м, 1Н), 5,51 (с, 1Н), 4,15-4,09 (м, 3H), 4,03 (с, 1Н), 3,48 (ушир.с, 1Н), 2,79 (ушир.с, 2H), 2,54-2,49 (м, 1Н), 2,30-2,20 (м, 1Н), 2,20 (д, 3H), 1,94 (д, 3H), 1,88-1,72 (м, 1Н), 1,78 (д, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,98-0,91 (м, 4H), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 103
Ингенол-3-(2,3-диметилбутеноат) (соединение 103)
Соединение 103 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 203.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,07-6,05 (д, 1Н), 6,03-6,02 (м, 1Н), 5,50 (с, 1Н), 4,15-4,09 (м, 3H), 4,05 (с, 1Н), 3,47 (ушир.с, 1Н), 2,55-2,48 (м, 1Н), 2,30-2,21 (м, 1Н), 2,07 (м, 3H), 1,89 (м, 3H), 1,85 (с, 3H), 1,80 (м, 3H), 1,99-1,55 (м, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,96-0,88 (д, 4H), 0,74-0,65 (м, 1Н).
Пример 104
Ингенол-3-(2-метиленбутират) (соединение 104)
Соединение 104 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 204.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,19 (с, 1Н), 6,06-6,04 (м, 2H), 5,61 (м, 1Н), 5,57 (с, 1Н), 4,20-4,11 (м, 3H), 4,05 (с, 1Н), 3,5 (ушир.с, 1Н), 2,9 (ушир.с, 2H), 2,55-2,50 (м, 1Н), 2,39-2,22 (м, 3H), 1,79 (д, 3H), 1,80-1,72 (м, 1Н), 1,11 (т, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,98 (д, 3H), 0,97-0,91 (м, 1Н), 0,74-0,65 (м, 1Н).
Пример 105
Ингенол-3-(2-метилпропаноат) (соединение 105)
Соединение 105 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 205.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,05-6,02 (м, 2H), 5,45 (с, 1Н), 4,19-4,11 (м, 3H), 4,03 (с, 1Н), 3,45 (ушир.с, 1Н), 2,65 (м, 1Н), 2,54-2,49 (м, 1Н), 2,5 (ушир.с, 1Н), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,81-1,71 (м, 1Н), 1,77 (д, 3H), 1,23 (д, 3H), 1,21 (д, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,97 (д, 3H), 0,97-0,86 (м, 2H), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 106
Ингенол-3-(3-метилбутаноат) (соединение 106)
Соединение 106 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 206.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,05-6,02 (м, 2H), 5,43 (с, 1Н), 4,19-4,11 (м, 3H), 4,03 (с, 1Н), 3,49 (ушир.с, 1Н), 2,6-2,4 (ушир.с, 1Н), 2,53-2,45 (м, 1Н), 2,31-2,23 (м, 3H), 2,17-2,04 (м, 1Н), 1,81-1,71 (м, 1Н), 1,78 (д, 3H), 1,27 (ушир.с, 1Н), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 1,00 (д, 6H), 0,97 (д, 3H), 0,97-0,86 (м, 1Н), 0,73-0,66 (м, 1Н).
Пример 107
Ингенол-3-(RS-2-метилбутаноат) (соединение 107а и соединение 107b)
Соединения 107а и 107b получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединения 207а и 207b.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,06-6,02 (м, 2H), 5,46 (с, 1Н), 4,19-4,11 (м, 3H), 4,03 (с, 1Н), 3,45 (ушир.с, 1Н), 2,6 (ушир.с, 1Н), 2,54-2,41 (м, 2H), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,78 (д, 3H), 1,80-1,64 (м, 2H), 1,57-1,47 (м, 1Н), 1,28 (ушир.с, 1Н), 1,21-1,18 (м, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,98-0,85 (м, 7H), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 108
Ингенол-3-(3,3-диметилбутаноат) (соединение 108)
Соединение 108 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 208.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,06-6,02 (м, 2H), 5,47 (с, 1Н), 4,19-4,11 (м, 3H), 4,03 (с, 1Н), 3,51 (с, 1Н), 2,6-2,4 (ушир.с, 1Н), 2,54-2,49 (м, 1Н), 2,30 (с, 2H), 2,30-2,21 (м, 1Н), 1,78 (д, 3H), 1,77-1,70 (м, 1Н), 1,27 (ушир.с, 1Н), 1,09 (с, 3H), 1,06 (с, 9H), 1,05 (с, 3H), 0,96 (д, 3H), 0,98-0,88 (м, 1Н), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 109
Ингенол-3-(2-этилбутаноат) (соединение 109)
Соединение 109 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 209.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,06-6,03 (м, 2H), 5,43 (с, 1Н), 4,19-4,11 (м, 3H), 4,04 (с, 1Н), 3,50 (с, 1Н), 2,6-2,4 (ушир.с, 1Н), 2,54-2,49 (м, 1Н), 2,34-2,22 (м, 2H), 1,78 (д, 3H), 1,79-1,51 (м, 5H), 1,27 (ушир.с, 1Н), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,98-0,89 (м, 10H), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 110
Ингенол-3-(2R-метилбутаноат) (соединение 110)
Соединение 110 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 210.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,06-6,02 (м, 2H), 5,46 (с, 1Н), 4,19-4,11 (м, 3H), 4,03 (с, 1Н), 3,46 (ушир.с, 1Н), 2,6-2,4 (ушир.с, 1Н), 2,54-2,44 (м, 2H), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,78 (д, 3H), 1,80-1,66 (м, 2H), 1,57-1,48 (м, 1Н), 1,27 (ушир.с, 1Н), 1,19 (д, 3H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,98-0,86 (м, 7H), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 111
Ингенол-3-тиглат (соединение 111)
Соединение 111 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 211.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,95-6,88 (м, 1Н), 6,05-6,03 (м, 2H), 5,51 (с, 1Н), 4,14-4,11 (м, 3H), 4,05 (с, 1Н), 3,47 (ушир.с, 1Н), 2,77 (ушир.с, 2H), 2,54-2,49 (м, 1Н), 2,30-2,21 (м, 1Н), 1,87-1,72 (м, 10H), 1,09 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,98 (д, 3H), 0,98-0,91 (м, 1Н), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 112
Ингенол-3-(фенилацетат) (соединение 112)
Соединение 112 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 212.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,36-7,25 (м, 5H), 6,00-5,98 (м, 2H), 5,53 (с, 1Н), 4,16-4,00 (м, 3H), 3,94 (с, 1Н), 3,72 (с, 2H), 3,14 (ушир.с, 1Н), 2,3-1,9 (ушир.с, 1Н), 2,23-2,18 (м, 1Н), 2,09-1,99 (м, 1Н), 1,74 (д, 3H), 1,69-1,59 (м, 1Н), 1,27 (ушир.с, 1Н), 1,05 (с, 6H), 0,93-0,85 (м, 4H), 0,70-0,62 (м, 1Н).
Пример 113
Ингенол-3-(2Z-(метоксикарбонил)акрилат) (соединение 113)
Соединение 113 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 213.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,95 (д, 1Н), 6,88 (д, 1Н), 6,09 (м, 1Н), 6,05 (д, 1Н), 5,65 (с, 1Н), 4,54 (д, 1Н), 4,20-4,13 (м, 3H), 4,05 (д, 1Н), 3,83 (с, 3H), 3,57 (с, 1Н), 2,54-2,43 (м, 2H), 2,31-2,22 (м, 1Н), 1,81-1,72 (м, 4H), 1,07 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,97 (д, 3H), 0,95-0,89 (м, 1Н), 0,74-0,65 (м, 1Н).
Пример 114
Ингенол-3-(2-циклогексилпропаноат) (соединение 114)
Соединение 114 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 214.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,06-6,02 (м, 2H), 5,46 (д, 1Н), 3,32 (т, 1Н), 4,19-4,11 (м, 3H), 4,04-4,03 (м, 1Н), 3,52 (с, 1Н), 2,55-2,47 (м, 1Н), 2,39-2,23 (м, 2H), 1,80-1,60 (м, 10H), 1,30-0,86 (м, 19H), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 115
Ингенол-3-((2Z)-2-метоксиимино-2-фенилацетат) (соединение 115)
Соединение 115 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 215.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,70-7,66 (м, 2H), 7,45-7,38 (м, 3H), 6,12-6,11 (м, 1Н), 6,09 (с, 1Н), 6,07-6,05 (м, 1Н), 4,22-4,12 (м, 4H), 4,07 (с, 3H), 4,00 (д, 1Н), 3,58 (д, 1Н), 2,41-2,36 (м, 1Н), 2,29-2,18 (м, 2H), 1,83 (д, 3H), 1,80-1,73 (м, 1Н), 1,12 (с, 3H), 1,07 (с, 3H), 0,96-0,86 (м, 4H), 0,75-0,67 (м, 1Н).
Пример 116
Ингенол-3-((2Е)-2-метоксиимино-2-фенилацетат) (соединение 116)
Соединение 116 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 216.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,70-7,66 (м, 2H), 7,45-7,38 (м, 3H), 6,12-6,05 (м, 3H), 4,22-4,09 (м, 4H), 4,07 (с, 3H), 4,00 (д, 1Н), 3,60 (д, 1Н), 2,41-2,36 (м, 1Н), 2,29-2,20 (м, 2H), 1,83 (д, 3H), 1,80-1,73 (м, 1Н), 1,12 (с, 3H), 1,07 (с, 3H), 0,99-0,92 (м, 4H), 0,75-0,67 (м, 1Н).
Пример 117
Ингенол-3-((Z)-2-метил-3-(п-толил)проп-2-еноат (соединение 117)
Соединение 117 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 217.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,70 (с, 1Н), 7,32 (д, 2H), 7,21 (д, 2H), 6,07-6,05 (м, 2H), 5,60 (с, 1Н), 4,44 (д, 1Н), 4,17-4,08 (м, 4H), 3,55 (с, 1Н), 2,61-2,49 (м, 2H), 2,38 (с, 3H), 2,31-2,23 (м, 1Н), 2,15 (д, 3H), 1,83 (д, 3H), 1,80-1,73 (м, 1Н), 1,09 (с, 3H), 1,04 (с, 3H), 1,01 (д, 3H), 0,98-0,92 (м, 1Н), 0,74-0,66 (м, 1Н).
Пример 118
Ингенол-3-((Е)-2-фенилбут-2-еноат) (соединение 118)
Соединение 118 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 218.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,39-7,30 (м, 3H), 7,24 (кв, 1Н), 7,20-7,15 (м, 2H), 5,99-5,96 (м, 1Н), 5,95-5,93 (м, 1Н), 5,57 (с, 1Н), 4,16-3,93 (м, 4H), 3,80 (д, 1Н), 3,19 (с, 1Н), 2,34 (т, 1Н), 1,95-1,83 (м, 2H), 1,78 (с, 3H), 1,77 (д, 3H), 1,57-1,46 (м, 1Н), 1,05 (с, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,93-0,85 (м, 1Н), 0,76 (д, 3H), 0,65-0,58 (м, 1Н).
Пример 119
Ингенол-3-(2,2-дифенилацетат) (соединение 119)
Соединение 119 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 219.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,35-7,25 (м, 10H), 6,01-5,96 (м, 2H), 5,62 (с, 1Н), 5,12 (с, 1Н), 4,13-3,93 (м, 5H), 3,14 (с, 1Н), 2,34 (т, 1Н), 2,12-2,05 (м, 1Н), 2,04-1,93 (м, 1Н), 1,72 (д, 3H), 1,61-1,52 (м, 1Н), 1,05 (с, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,91-0,83 (м, 4H), 0,67-0,59 (м, 1Н).
Пример 120
Ингенол-3-(2-циано-2-циклогексилиденацетат) (соединение 120)
Соединение 120 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 220.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6,12-6,10 (м, 1Н), 6,08-6,06 (м, 1Н), 5,67 (с, 1Н), 4,20-4,02 (м, 5H), 3,56 (с, 1Н), 3,02 (т, 2H), 2,71-2,63 (м, 3H), 2,32-2,23 (м, 1Н), 2,13-2,08 (м, 1Н), 1,85-1,65 (м, 10H), 1,09 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 1,00 (д, 3H), 0,96-0,88 (м, 1Н), 0,75-0,67 (м, 1Н).
Пример 121
Ингенол-3-(2-(метил(фенил)амино-2-оксоацетат) (соединение 121)
Соединение 121 получали согласно процедуре е.
Исходное вещество: соединение 221.
1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7,43-7,33 (м, 3H), 7,28-7,24 (м, 2H), 6,00-5,98 (м, 2H), 5,52 (с, 1Н), 4,16-4,02 (м, 3H), 3,84 (с, 2H), 3,37 (с, 3H), 3,29 (с, 1Н), 2,38-2,32 (м, 2H), 2,24-2,14 (м, 1Н), 1,81-1,69 (м, 1Н), 1,50 (д, 3H), 1,08 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 0,96 (д, 3H), 0,93-0,87 (м, 1Н), 0,73-0,65 (м, 1Н).
Пример 1
Анализ окислительного взрыва нейтрофилов
PMN (полиморфно-ядерные лейкоциты) выделяли и очищали из свежих лейкоцитарных пленок последовательным осаждением, центрифугированием в градиенте плотности и лизисом загрязняющих эритроцитов. Лейкоцитарные пленки инкубировали с 2% метоцела в течение 30-45 мин для дифференциального осаждения эритроцитов. Обогащенный лейкоцитами супернатант переносили в пробирки для лимфопрепаратов для удаления мононуклеарных клеток центрифугированием в градиенте плотности (400 × g, 30 мин). Осадок ресуспендировали и любые оставшиеся эритроциты лизировали с применением 0,2% раствора NaCl в течение 30 сек перед восстановлением изотоничности добавлением 1,2% NaCl. Эту стадию повторяли до тех пор, пока осадок клеток не оказывался относительно свободным от эритроцитов. Клетки ресуспендировали в DPBS (физиологический раствор, забуференный фосфатом Дульбекко) (без Ca2+, Mg2+) и концентрацию доводили до 1,4×106 клеток/мл в HBSS (сбалансированном солевом растворе Хэнкса) (с Ca2+, Mg2+), содержащем 0,1% BSA (бычьего сывороточного альбумина) и 5 мМ глюкозу, непосредственно перед началом анализа. Титрованный эталон и испытуемые соединения предварительно смешивали с НЕ (гидроэтидином) (до конечной концентрации анализа 10 мкМ) перед добавлением к 96-луночным планшетам, содержащим 2,5×105 клеток. После 40 мин инкубации при комнатной температуре изменения в респираторном бурсте оценивали измерением флуоресценции при 579 нм (возбуждение: 485 нм) при помощи аппарата для прочтения планшетов Envision.
Кривые титрования испытуемых соединений подгоняли к 4-параметрической сигмоидальной кривой после нормализации действия испытуемого соединения относительно действия позитивного контроля (5×10-7 М РЕР0005). Rel ЕС50 означает концентрацию испытуемого соединения, продуцирующего действие, которое является средним между подогнанным верхним и нижним действием. Abs ЕС50 является концентрацией испытуемого соединения, которая вызывает реакцию, соответствующую 50% максимального действия, связанного с позитивным контролем (5×10-7 М РЕР0005).
Пример 2
Анализ высвобождения цитокинов НеКа (IL-8)
Первичные эпидермальные кератиноциты человека, НеКа, высевали (10000 клеток/лунка) в 96-луночных планшетах за день до анализа. Испытуемые соединения разводили в ДМСО (диметилсульфоксиде) и далее разводили в среде для проведения анализа и переносили пипеткой в лунки 96-луночных планшетов, содержащие клетки НеКа. Планшеты инкубировали в течение 6 час при 37°С в увлажненном воздухе с 5% СО2. Планшеты кратковременно центрифугировали для осаждения клеток при 4°С, супернатант удаляли и анализировали с использованием анализа цитокинов по 4-пятнам с применением мезо-шкалы обнаружения (MSD) (провоспалительный ультрачувствительный набор II, MSD, MD, USA). В анализе MSD применяли формат сэндвич-иммуноанализа, где антитела захвата покрывали в массиве определенного паттерна на дне лунок 4-Spot-Multi-MSD-планшета. Стандартные образцы также инкубировали в MULTI-SPOT-планшетах, и цитокин (IL-8) связывался с его соответствующим пятном захвата антитела. Уровень цитокинов количественно определяли на визуализаторе SECTORTM с применением цитокинспецифической детекции антитела, меченного MSD SULFO-TAGTM-реагентом.
Кривые титрования испытуемого соединения подгоняли к 4-параметрической сигмоидальной кривой после нормализации действия испытуемого соединения относительно действия позитивного контроля (1,5×10-7 М РЕР0005). Rel ЕС50 означает концентрацию испытуемого соединения, продуцирующего действие, которое является средним между подогнанным верхним и нижним действием. Abs ЕС50 является концентрацией испытуемого соединения, которая вызывает реакцию, соответствующую 50% максимального действия, связанного с позитивным контролем (1,5×10-7 М РЕР0005).
Пример 3
Анализ некроза
Клетки HeLa (ATCC CCL-002) выращивали в минимальной эссенциальной среде (каталог Invitrogen № 42360), содержащей 10% фетальную телячью сыворотку, 100 МЕ/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. 4000-6000 клеток высевали в 96-луночных черных планшетах ViewPlates с прозрачным дном (Perkin Elmer) в 100 мкл среды и инкубировали на протяжении ночи. Соединения растворяли и предварительно разводили в ДМСО в 96-луночных полипропиленовых планшетах (Greiner) при диапазоне концентраций от 15 мкМ до 600 мкМ. Во время эксперимента планшеты с клетками помещали на блоки нагревания при 37°С, среду удаляли и 40 мкл свежей, предварительно нагретой среды добавляли на каждую лунку. Клетки инкубировали в течение 15 мин перед добавлением соединений. Параллельно 3 мкл соединений разводили 197 мкл питательной среды на устройстве для пипетирования Tecan freedom-EVO с применением скорости пипетирования 250 мкл/сек для гарантирования эффективного смешивания высококонцентрированных растворов соединений с водной фазой. Эти предварительно разбавленные смеси планшетов затем уравновешивали при нагревании на блоках нагревания при 37°С в течение 10 мин. 80 мкл предварительно разведенного соединения переносили вручную в соответствующие лунки, содержащие клетки HeLa, с получением концентрации соединения от 10 мкΜ до 400 мкΜ. Контрольными условиями были 1% ДМСО в питательной среде (100% жизнеспособности) и 400 мкΜ мебутат ингенола в питательной среде (0% жизнеспособности). Планшеты инкубировали на блоках нагревания при 37°С в течение 30 мин. В конце инкубирования к каждой лунке добавляли 10 мкл реагента PrestoBlue (Invitrogen), планшеты герметизировали черным уплотнителем с последующей инкубацией при 37°С в течение 10 мин при осторожном встряхивании (150 об./мин). Затем планшеты выдерживали при комнатной температуре в течение 20-30 мин. Планшеты сразу считывали на флуоресцентном аппарате для прочтения планшетов Envision (Perkin Elmer) с возбуждением при 535 нм и излучением при 630 нм. Кривые титрования испытуемых соединений подгоняли к сигмоидальной кривой с четырьмя параметрами после нормализации действия испытуемого соединения относительно действия позитивного контроля (4×10-4 М PEP0005/мебутат ингенола). AbsEC50 означает концентрацию испытуемого соединения, продуцирующую 50% действия.
Соединения настоящего изобретения испытывали в анализе окислительного взрыва нейтрофилов согласно описанию в примере 1, в анализе высвобождения цитокинов НеКа согласно описанию в примере 2 и в анализе некроза согласно описанию в примере 3.
Диапазоны величин Rel EC50 окислительного взрыва нейтрофилов:
* указывает, что величины Rel EC50≥100 нМ,
** указывает, что величины Rel EC50≥20 нМ и <100 нМ,
*** указывает, что величины Rel EC50<20 нМ.
Диапазоны величин Rel EC50 (IL-8) высвобождения цитокинов HeKa
* указывает, что величины Rel EC50≥100 нМ
** указывает, что величины Rel EC50≥20 нМ и <100 нМ,
*** указывает, что величины Rel EC50<20 нМ.
Диапазоны величин ЕС50 некроза HeLa
* указывает, что величины EC50≥350 мкМ,
** указывает, что величины EC50≥150 мкМ и <350 мкМ,
*** указывает, что величины EC50<150 мкМ.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ИНГЕНОЛ-3-АЦИЛАТЫ III И ИНГЕНОЛ-3-КАРБАМАТЫ | 2011 |
|
RU2572549C2 |
| 3-АЦИЛИНГЕНОЛЫ II | 2011 |
|
RU2575350C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ БЕНЗОАЗЕПИНЫ В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ TOLL-ПОДОБНОГО РЕЦЕПТОРА | 2010 |
|
RU2580320C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ 1,2,4-ТРИАЗОЛА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ СИГМА РЕЦЕПТОРА | 2007 |
|
RU2451015C2 |
| СИНТЕЗ ЛАКТОНОВ РЕЗОРЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ В КАЧЕСТВЕ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ АГЕНТОВ | 2009 |
|
RU2534527C2 |
| ДИАРИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ С МОСТИКОВОЙ СВЯЗЬЮ | 2002 |
|
RU2297409C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ 2-ЗАМЕЩЕННЫХ ФЕНИЛ-5, 7-ДИГИДРОКАРБИЛ-3, 7-ДИГИДРОПИРРОЛО [2, 3-d] ПИРИМИДИН-4-ОНОВ, ИХ ПОЛУЧЕНИЕ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ | 2004 |
|
RU2323220C2 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНГЕНОЛ-3-АНГЕЛАТА | 2011 |
|
RU2586975C2 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ, СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ И КОМПОЗИЦИИ ЦИКЛОАЛКИЛМЕТИЛАМИНОВ | 2007 |
|
RU2462451C2 |
| ПИРАЗОЛОПИРИМИДИНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ-ИНГИБИТОРЫ JAK И СПОСОБЫ | 2009 |
|
RU2539568C2 |
Изобретение относится к соединению структурной формулы I, которое может быть использовано для предотвращения, лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания или состояния, восприимчивого к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов, восприимчивого к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов или восприимчивого к индуцированию некроза. В формуле (I) R представляет собой (C1-C7)алкил или (С2-С7)алкенил, где R замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из R1; где R1 представляет собой циано или (C1-C4)алкил, (С6)циклоалкил или (С6)арил, каждый из которых может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из R2, где R2 представляет собой (С1-С4)алкил или -COORc или =N-ORa, -NRaRb или =O; Ra и Rb независимо представляют собой (C1-C4)алкил или (С6)арил; Rc представляет собой (C1-C4)алкил. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей указанное соединение. 8 н. и 16 з.п. ф-лы, 121 пр.
1. Соединение общей формулы I
где R представляет собой (C1-C7)алкил или (С2-С7)алкенил, где R замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из R1; где R1 представляет собой
(a) циано; или
(b) (C1-C4)алкил, (С6)циклоалкил или (С6)арил, каждый из которых может быть необязательно замещен одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из R2, где R2 представляет собой (С1-С4)алкил или -COORc; или
(c)=N-ORa, -NRaRb или =O;
и где Ra и Rb независимо представляют собой (C1-C4)алкил или (С6)арил;
и где Rc представляет собой (C1-C4)алкил, и его фармацевтически приемлемые соли;
при условии, что, когда R1 представляет собой алкил или алкенил, общая длина цепи R и R1 не превышает длину цепи из 7 атомов углерода,
и при условии, что R и R1 в сочетании не могут быть прямой неразветвленной или незамещенной алкильной цепью или прямой неразветвленной или незамещенной алкенильной цепью,
и при условии, что R не может быть или R и R1 в сочетании не могут быть транс-2-бутен-2-илом.
2. Соединение по п. 1, где R замещен R1 в альфа- или бета-положении относительно карбонильной группы.
3. Соединение по п. 1, где R замещен R1 в альфа-положении относительно карбонильной группы.
4. Соединение по п. 1, где R представляет собой С1-С7алкил.
5. Соединение по п. 4, где R представляет собой этил, пропил, трет-бутил, изопропил, 2-бутил, 3-пентил или изобутил.
6. Соединение по п. 1, где R представляет собой С2-С7алкенил.
7. Соединение по п. 6, где R представляет собой пропенил или этенил.
8. Соединение по любому из пп. 1-7, где R1 представляет собой С1-С4алкил, (С6)арил, (С6)циклоалкил или циано.
9. Соединение по любому из пп. 1-7, где R1 представляет собой этил, метил, фенил, циклогексил.
10. Соединение по любому из пп. 1-7, где R1 представляет собой метил.
11. Соединение по любому из пп. 1-7, где R2 представляет собой метил.
12. Соединение по любому из пп. 1-7, представляющее собой
ингенол-3-(2-метилакрилат),
ингенол-3-(3-метилбутеноат),
ингенол-3-(2,3-диметилбутеноат),
ингенол-3-(2-метиленбутират),
ингенол-3-(2-метилпропаноат),
ингенол-3-(3-метилбутаноат),
ингенол-3-(2RS-метилбутаноат),
ингенол-3-(3,3-диметилбутаноат),
ингенол-3-(2-этилбутаноат),
ингенол-3-(2R-метилбутаноат),
ингенол-3-тиглат,
ингенол-3-(фенилацетат),
ингенол-3-(2Z-(метоксикарбонил)акрилат),
ингенол-3-(2-циклогексилпропаноат),
ингенол-3-((2Z)-2-метоксиимино-2-фенилацетат),
ингенол-3-((2Е)-2-метоксиимино-2-фенилацетат),
ингенол-3-((Z)-2-метил-3-(п-толил)проп-2-еноат),
ингенол-3-((Е)-2-фенилбут-2-еноат),
ингенол-3-(2,2-дифенилацетат),
ингенол-3-(2-циано-2-циклогексилиденацетат) или
ингенол-3-(2-(метил(фенил)амино)-2-оксоацетат)
и их фармацевтически приемлемые соли.
13. Соединение по любому из пп. 1-7 для применения в качестве лекарственного средства при терапии для предотвращения, лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания или состояния, восприимчивого к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов, восприимчивого к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов или восприимчивого к индуцированию некроза.
14. Применение соединения по любому из пп. 1-12 для приготовления фармацевтической композиции для лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов.
15. Применение соединения по любому из пп. 1-12 для приготовления фармацевтической композиции для лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов.
16. Применение соединения по любому из пп. 1-12 для приготовления фармацевтической композиции для лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к индуцированию некроза.
17. Способ предотвращения, лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, восприимчивых к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов, путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения по любому из пп. 1-12.
18. Способ предотвращения, лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, восприимчивых к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов, путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения по любому из пп. 1-12.
19. Способ предотвращения, лечения, уменьшения интенсивности симптомов или профилактики физиологических нарушений или заболеваний, восприимчивых к индуцированию некроза, путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения по любому из пп. 1-12.
20. Соединение по любому из пп. 1-7 для применения при лечении или уменьшении интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов.
21. Соединение по любому из пп. 1-7 для применения при лечении или уменьшении интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов.
22. Соединение по любому из пп. 1-7 для применения при лечении или уменьшении интенсивности симптомов заболевания, нарушения или состояния, восприимчивого к индуцированию некроза.
23. Фармацевтическая композиция для предотвращения, лечения или уменьшения интенсивности симптомов заболевания или состояния, восприимчивого к стимуляции окислительного взрыва нейтрофилов, восприимчивого к стимуляции высвобождения IL-8 кератиноцитов или восприимчивого к индуцированию некроза, содержащая соединение по любому из пп. 1-12 или его фармацевтически приемлемый стереоизомер или соль вместе с фармацевтически приемлемым наполнителем или эксципиентом.
24. Фармацевтическая композиция по п. 23, где композиция является подходящей для местного введения.
| МНОГОРЕЖИМНОЕ ЦИФРОАНАЛОГОВОЕ УСТРОЙСТВО УПРАВЛЕНИЯ УГЛОВЫМ ДВИЖЕНИЕМ ПО ТАНГАЖУ БЕСПИЛОТНОГО ЛЕТАТЕЛЬНОГО АППАРАТА | 2014 |
|
RU2541903C1 |
| ВОДЯНОЙ ДВИГАТЕЛЬ | 1928 |
|
SU9669A1 |
| S.M | |||
| OGBOURNE ET AL., Antitumor activity of 3-ingenyl angelate: Plasma membrane and mitochondrial disruption and necrotic cell death, Cancer Research, 64, 2004, p.2833-2839. | |||
