ДИАРИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ С МОСТИКОВОЙ СВЯЗЬЮ Российский патент 2007 года по МПК C07C323/62 C07C323/63 A61K31/10 A61P3/00 

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к соединениям, которые могут использоваться для диагностики и лечения нарушений обмена веществ, воспалительных заболеваний и новообразований и вызванных ими осложнений.

ОБОСНОВАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Некоторые независимые факторы риска связаны с сердечно-сосудистым заболеванием. Такие факторы включают гипертензию, повышенные уровни фибриногена, высокие уровни триглицеридов, высокое содержание холестерина липопротеинов низкой плотности (LDL), высокое общее содержание холестерина и низкие уровни холестерина липопротеинов высокой плотности (HDL). Ингибиторы HMG-CoA редуктазы (например, статины) могут использоваться для лечения состояний, характеризующихся высокими уровнями холестерина LDL. Показано, что снижения уровня холестерина LDL не достаточно для снижения риска сердечно-сосудистого заболевания у некоторых пациентов, в особенности у пациентов с нормальными уровнями холестерина LDL. Кровяное депо такой группы характеризуется независимым фактором риска в отношении уровней холестерина HDL. Проблема повышенного риска сердечно-сосудистого заболевания, связанного с низкими уровнями холестерина HDL, еще недостаточно успешно решается с помощью лекарственной терапии (например, в настоящее время отсутствуют в продаже лекарственные средства, подходящие для повышения содержания холестерина HDL). Смотри, например, Bisgaier et al. (1998) Curr. Pharm. Des. 4:53-70.

Объекты направления разработок терапевтических средств для сердечно-сосудистых заболеваний, болезней, вызванных сердечно-сосудистым заболеванием, таких как синдром X (включая метаболический синдром), и других патологий, таких как диабет, ожирение и рак, включают факторы транскрипции, вовлеченные в регуляцию липоидного обмена и гомеостаза.

Активированные пероксисомальными пролифераторами рецепторы (PPAR) являются трансдуцерами белков, принадлежащими к суперсемейству стероидных/тироидных/ретиноидных рецепторов. PPAR были первоначально идентифицированы как orphan-рецепторы, без установленных лигандов, и названы за их способность опосредовать прейотропные эффекты жирной кислоты пероксисомальными пролифераторами.

Выделено три PPAR млекопитающих: PPARγ, PPARα и PPARδ (PPARβ, NUC1). Эти рецепторы действуют как лиганд-регулируемые факторы транскрипции, которые регулируют экспрессию ген-мишеней,связывая чувствительную последовательность ДНКв виде гетеродимеров с RXR. Ген-мишени кодируют ферменты, вовлеченные в липоидный обмен и дифференциацию адипоцитов.

Показано, что экспрессия PPARγ осуществляется специфическим для жировой ткани образом. Такая экспрессия первоначально индуцируется в ходе дифференциации некоторых преадипоцитных клеточных линий. Дополнительными исследованиями продемонстрировано, что PPARγ играет решающую роль в липогенном каскаде сигналов. PPARγ также регулирует ob/leptin ген, который вовлечен в регуляцию энергетического гомеостаза и дифференциацию адипоцитов, что, как показано, представляет решающую ступень для целенаправленного воздействия в целях борьбы с ожирением и диабетом.

Для выяснения роли PPARγ некоторые исследователи сосредоточили усилия на идентификации активаторов PPARγ. Было продемонстрировано, что один из классов соединений, тиазолидиндионы, которые, как известно, оказывают липогенные действия на преадипоцитные и мезенхимальные стволовые клетки in vitro ипротиводиабетическое воздействие на модели инсулиннезависимого сахарного диабета (NIDDM) у животных, также являются PPARγ-селективными лигандами (Lehmann et al. (1995) J. Biol. Chem. 270:12953-12956). Совсем недавно было показано, что соединения, селективно активирующие PPARγ мышей, обладают противодиабетической активностью in vivo у мышей.

Клинически было показано, что активаторы PPARγ, такие как троглитазон, усиливают действие инсулина, снижают содержание глюкозы в сыворотке и оказывают незначительное, но существенное влияние на снижение уровней триглицеридов в сыворотке у пациентов с NIDDM диабетом. Смотри, например, Kelly et al. (1998) Curr. Opin. Endocrinol. Diabetes 5(2):90-96, Johnson etal. (1997) Ann. Pharmacother. 32(3):337-348 и Leutenegger et al. (1997) Curr. Ther. Res. 58(7):403-416. Механизм такого снижения уровней триглицеридов, по видимому, состоит, главным образом, в усиленном выведении липопротеинов очень низкой плотности (VLDL) через индукцию экспрессии липопротеинлипазного (LPL) гена. Смотри, например, B. Staels etal. (1997) Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 17(9):1756-1764.

Фибраты являются классом лекарственных соединений, которые могут снижать содержание триглицеридов в сыворотке на 20-50%, снижать содержание холестерина LDL на 10-15%, изменять размер частиц LDL, от более атерогенного с малой плотностью до LDL с нормальной плотностью, и повышать содержание холестерина HDL на 10-15%. Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что действие фибратов на сывороточные липиды опосредуется через активацию PPARα. Смотри, например, Staels et al. (1997) Pharm. Des. 3(1):1-14. Активация PPARα приводит к транскрипции ферментов, что повышает катаболизм жирных кислот и снижает синтез жирных кислот de novo в печени, вызывая снижение синтеза триглицеридов и продуцирования/секреции VLDL. Вдобавок, активация PPARα снижает продуцирование apoC-III. Снижение количества apoC-III, ингибитора активности LPL, повышает клиренс VLDL. Смотри, например, Auwerx et al. (1996) Atherosclerosis, (Shannon, Irel.) 124(Suppl.):S29-S37.

Данные подтверждают, что PPARδ также регулирует пероксисомальный путь бета-окисления жирных кислот. Установлено, что активаторы PPARδ промотируют обратный транспорт холестерина, что может повышать уровни холестерина HDL. Смотри Oliver et al. (2001) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98(9):5306-5311. Также показано, что активаторы PPARδ ингибируют образование индуцируемой медиатором воспаления оксидазотсинтазы(iNOS) и фактора некроза опухоли (TNF). Смотримеждународную патентную заявку № WO 02/28434 to Buchan et al. Кроме того, показано, что PPARδ, в отличие от PPARγ или PPARα, представляет собой β-катенин/Tcf-4 мишень, особо важную для химиопрофилактики (He et al. (1999) Cell. 99:335-345).

Идентификация соединений, модулирующих PPARδ, дает возможность исследования опосредованных PPARδ процессов и открытия новых терапевтических средств в отношении состояний и вызванных ими заболеваний, таких как сердечно-сосудистое заболевание, атеросклероз, диабет, ожирение, синдром X и рак.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение касается соединений, которые могут использоваться при лечении нарушений обмена веществ, сердечно-сосудистых заболеваний, воспалительных состояний и новообразований. Хотя полного понимания механизма действия соединений не требуется для практического применения настоящего изобретения, установлено, что соединения оказывают действие посредством модуляции PPARδ. Изобретение также представляет фармацевтические композиции, включающие указанные соединения, и способы применения рассматриваемых соединений и композиций в целях лечения нарушений обмена веществ, сердечно-сосудистых заболеваний, воспалительных состояний и новообразований.

Представленные здесь соединения имеют формулу (Ia):

где

X выбран из группы, включающей: O, S(O)_m, CR'R" и SO₂NR";

Y означает O или CR'R";

Z¹ и Z² независимо выбраны из группы, включающей: O, S(O)_m, (CR'R")_n, N(R"), C(O)NR" и CR'R"C(O)NR"';

альтернативно, Z¹ и Z² вместе могут образовывать

(C₂-C₄)алкенил;

Ar¹ и Ar² независимо означают ароматическую группу;

Ar³ означает арил;

каждый из R', R" и R'" независимо выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

R¹ выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₈)алкил и арил(C₁-C₄)алкил;

R^a и R^b независимо выбраны из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

нижний индекс m означает целое число от 0 до 2,

нижний индекс n означает целое число от 1 до 2;

при условии, что указанным соединением не является

3-амино-4-[4-(фенилметокси)фенокси]феноксилуксусная кислота,

4-[3,5-дийод-4-(фенилметокси)фенокси]-3,5-дийодбензолпропановая кислота или

4-[4-(бензилокси)-3-йодфенокси]-3,5-дийодгидрокоричная кислота.

Также представлены соединения, имеющие формулу (Ib):

где

X выбран из группы, включающей: O, S(O)_m, CR'R" и SO₂NR";

Y означает O или CR'R";

Z¹ и Z² независимо выбраны из группы, включающей: O, S(O)_m, (CR'R")_n, N(R"), C(O)NR" и CR'R"C(O)NR"';

альтернативно, Z¹ и Z² вместе могут образовывать

(C₂-C₄)алкенил;

Ar³ означает арил;

R¹ выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₈)алкил и арил(C₁-C₄)алкил;

R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбраны из группы, включающей: водород, галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₅-C₆)циклоалкил, фтор(C₁-C₄)алкил, OR', арил, арил(C₁-C₄)алкил, NO₂, NR'R", C(O)R', CO₂R', C(O)NR'R", N(R")C(O)R', N(R")CO₂R', N(R")C(O)NR'R", S(O)_mNR'R", S(O)_mR', CN и N(R")S(O)_mR';

альтернативно, любые две смежные R группы, выбранные из группы, включающей R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹, могут вместе с атомами углерода, к которым указанные группы присоединены, образовывать конденсированное ароматическое или циклоалкановое кольцо;

каждый из R', R" и R'" независимо выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

альтернативно, когда R' и R" присоединены к одному и тому же атому азота, R' и R" могут вместе с атомом азота образовывать 5-, 6- или 7-членный цикл, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей N, O и S;

R^a и R^b независимо выбраны из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

нижний индекс m означает целое число от 0 до 2 и

нижний индекс n означает целое число от 1 до 2;

при условии, что, когда X означает O, Z¹ означает O, Z² означает CH₂ и Ar³ означает незамещенный фенил, Y отличен от O или CH₂.

Кроме того, представлены соединения, имеющие формулу (Ib):

где

X выбран из группы, включающей: S(O)_m, CR'R" и SO₂NR";

Y означает O или CR'R";

Z¹ и Z² независимо выбраны из группы, включающей: O, S(O)_m, (CR'R")_n, N(R"), C(O)NR" и CR'R"C(O)NR"';

альтернативно, Z¹ и Z² вместе могут образовывать (C₂-C₄)алкенил;

Ar³ означает арил;

R¹ выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₈)алкил и арил(C₁-C₄)алкил;

R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбраны из группы, включающей: водород, галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₅-C₆)циклоалкил, фтор(C₁-C₄)алкил, OR', арил, арил(C₁-C₄)алкил, NO₂, NR'R", C(O)R', CO₂R', C(O)NR'R", N(R")C(O)R', N(R")CO₂R', N(R")C(O)NR'R", S(O)_mNR'R", S(O)_mR', CN и N(R")S(O)_mR';

альтернативно, любые две смежные R группы, выбранные из группы, включающей R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹, могут вместе с атомами углерода, к которым указанные группы присоединены, образовывать конденсированное ароматическое или циклоалкановое кольцо;

каждый из R', R" и R'" независимо выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

альтернативно, когда R' и R" присоединены к одному и тому же атому азота, R' и R" могут вместе с атомом азота образовывать 5-, 6- или 7-членный цикл, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей N, O и S;

R^a и R^b независимо выбраны из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

нижний индекс m означает целое число от 0 до 2 и

нижний индекс n означает целое число от 1 до 2.

Подразумевается, что представленные приведенными выше формулами соединения включают все соответствующие фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты и пролекарства.

Некоторые фармацевтические композиции по изобретению содержат фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель в комбинации с соединением формулы (Ia):

где

X выбран из группы, включающей: O, S(O)_m, CR'R" и SO₂NR";

Y означает O или CR'R";

Z¹ и Z² независимо выбраны из группы, включающей: O, S(O)_m, (CR'R")_n, N(R"), C(O)NR" и CR'R"C(O)NR"';

альтернативно, Z¹ и Z² вместе могут образовывать (C₂-C₄)алкенил;

Ar¹ и Ar² независимо означают ароматическую группу;

Ar³ означает арил;

каждый из R', R" и R'" независимо выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

R¹ выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₈)алкил и арил(C₁-C₄)алкил;

R^a и R^b независимо выбраны из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

нижний индекс m означает целое число от 0 до 2 и

нижний индекс n означает целое число от 1 до 2.

Также представлены фармацевтические композиции, содержащие фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель в комбинации с соединением формулы (Ib):

где

X выбран из группы, включающей: O, S(O)_m, CR'R" и SO₂NR";

Y означает O или CR'R";

Z¹ и Z² независимо выбраны из группы, включающей: O, S(O)_m, (CR'R")_n, N(R"), C(O)NR" и CR'R"C(O)NR"';

альтернативно, Z¹ и Z² вместе могут образовывать (C₂-C₄)алкенил;

Ar³ означает арил;

R¹ выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₈)алкил и арил(C₁-C₄)алкил;

R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбраны из группы, включающей: водород, галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₅-C₆)циклоалкил, фтор(C₁-C₄)алкил, OR', арил, арил(C₁-C₄)алкил, NO₂, NR'R", C(O)R', CO₂R', C(O)NR'R", N(R")C(O)R', N(R")CO₂R', N(R")C(O)NR'R", S(O)_mNR'R", S(O)_mR', CN и N(R")S(O)_mR';

альтернативно, любые две смежные R группы, выбранные из группы, включающей R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹, могут вместе с атомами углерода, к которым указанные группы присоединены, образовывать конденсированное ароматическое или циклоалкановое кольцо;

каждый из R', R" и R'" независимо выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

альтернативно, когда R' и R" присоединены к одному и тому же атому азота, R' и R" могут вместе с атомом азота образовывать 5-, 6- или 7-членный цикл, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей N, O и S; и

R^a и R^b независимо выбраны из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил;

нижний индекс m означает целое число от 0 до 2 и

нижний индекс n означает целое число от 1 до 2.

Также представлены способы лечения нарушений обмена веществ, сердечно-сосудистого заболевания, воспалительного состояния, новообразований, иммунного нарушения, состояния шока, нарушения желудочно-кишечной моторики или нарушений центральной нервной системы, включающие введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одного из вышеуказанных соединений или композиций.

Кроме того, изобретение представляет способы лечения состояния или заболевания, опосредованного PPARδ, и способы лечения состояния или заболевания, восприимчивого к модуляции PPARδ.

Изобретение также представляет способы лечения состояния или заболевания, опосредованного iNOS или TNF, и способы лечения состояния или заболевания, восприимчивого к модуляции iNOS или TNF.

Кроме того, изобретение представляет способы повышения уровней холестерина HDL.

Далее, изобретение представляет способы снижения уровней холестерина LDL.

Кроме того, изобретение представляет способы снижения уровней триглицеридов.

Изобретение также представляет способы лечения диабета, атеросклероза или состояний, связанных с синдромом Х, снижения резистентности к инсулину, понижения кровяного давления и лечения ожирения.

Изобретение также представляет способы модуляции PPARδ.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

ФИГ. 1a и 1b представляют иллюстративные примеры структур предпочтительных соединений по изобретению.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Сокращения и определения

За исключением особо оговоренных случаев используемые здесь сокращения являются общепринятыми.

Подразумевается, что термины "лечить", "лечение" и "обработка", как использованы здесь, включают:

(1) облегчение или устранение заболевания и/или сопутствующих симптомов;

(2) защиту субъекта от возникновения заболевания;

(3) снижение у субъекта риска возможного возникновения заболевания;

(4) снижение вероятности или устранение вероятности приобретения заболевания;

(5) предупреждение заболевания, т.е. предупреждение развития клинических симптомов заболевания у млекопитающего, подвергавшегося опасности заражения либо предрасположенного к заболеванию, но до сих пор не испытывающего или не проявляющего симптомов заболевания;

(6) сдерживание заболевания, т.е.задержка или ослабление развития заболевания или клинических симптомов заболевания; или

(7) избавление от заболевания, т.е.обеспечение ремиссии заболевания или ослабления клинических симптомов заболевания.

Термин "терапевтически эффективное количество" означает количество соединения, вводимого в степени, достаточной для предупреждения развития или смягчения в некоторой степени одного или более симптомов требующего лечения состояния или нарушения, а также для облегчения или устранения самого заболевания.

Термин "модулировать" означает способность соединения усиливать или снижать функцию и/или экспрессию PPARδ, где функция PPARδ может включать транскрипцию регуляторной активности и/или связывание с белком. Модуляция может осуществляться in vitro или in vivo. Указанная модуляция включает антагонизм, сродство к рецептору, частичный антагонизм и/или частичный агонизм функции или характеристики, связанной с PPARδ, либо прямо, либо опосредованно, и/или повышающую регуляцию или понижающую регуляцию экспрессии PPARδ, либо прямо, либо опосредованно. Агонистами являются соединения, которые, например,при связывании стимулируют, увеличивают, начинают, возбуждают, облегчают, усиливают активацию, активируют, повышают чувствительность или повышают регуляцию трансдукции сигнала. Антагонистами являются соединения, которые, например, при связывании частично или полностью блокируют стимуляцию, снижают, предотвращают, ингибируют, замедляют активацию, инактивируют, десенсибилизируют или понижают регуляцию трансдукции сигнала. Модулятор предпочтительно ингибирует функцию PPARδ и/или понижает регуляцию экспрессии PPARδ. Более предпочтительно, модулятор ингибирует или активирует функцию PPARδ и/или понижает регуляцию или повышает регуляцию экспрессии PPARδ. Наиболее предпочтительно, модулятор активирует функцию PPARδ и/или повышает регуляцию экспрессии PPARδ. Кроме того, в предпочтительном варианте выполнения модуляция является прямой. Способность соединения ингибировать функцию PPARδ может быть продемонстрирована путем испытания на связывание или испытанием на клеточной основе, например,транзиторным трансфекционным анализом.

Как использовано здесь, "диабет" означает сахарный диабет типа I (ювенильный диабет, инсулинзависимый сахарный диабет или IDDM) или сахарный диабет типа II (инсулиннезависимый сахарный диабет или NIDDM), предпочтительно, NIDDM.

Как использовано здесь, "синдром X" означает совокупность аномальных состояний, включающих гиперинсулинемию, ожирение, повышенные уровни триглицеридов, мочевой кислоты, фибриногена, частиц LDL низкой плотности и ингибитора активатора плазмогена 1 (PAI-1) и пониженные уровни холестерина HDL. Кроме того, подразумевается, что синдром X включает метаболический синдром.

Как использовано здесь, термин "нарушение, касающееся питания" означает эмоциональное и/или поведенческое патологическое отклонение, связанное с избыточным снижением массы тела и/или неадекватными попытками избежать нарастания массы, напримерголодание, самопроизвольную рвоту, неправильное употребление слабительных или мочегонных средств. Характерные примеры нарушений, касающихся питания, включают нервную анорексию и булимию.

Как использовано здесь, термин "ожирение" означает избыточное накопление телесного жира. Ожирение может иметь генетическую, экзогенную (например, расходование меньшей энергии, чем потребляется) и регуляторную детерминанты. Ожирение включает экзогенное, гиперинсулинарное, гиперплазматическое, гипотиреоидное, гипоталамическое, симптоматическое, детское, относящееся к верхней части тела, алиментарное, гипогонадное, простое и общее ожирение, гипофизарное ожирение и гиперфагию. Сердечно-сосудистые нарушения, такие как гипертензия и болезнь коронарных артерий, и нарушения обмена веществ, такие как гиперлипидемия и диабет, обычно сопутствуютожирению.

Как использовано здесь, термин "PPARδ-восприимчивое состояние или нарушение" означает состояние или нарушение, которое благоприятно отзывается на модуляцию активности PPARδ. Благоприятный отклик на модуляцию PPARδ включает облегчение или устранение заболевания и/или сопутствующих симптомов, сдерживание заболевания, т.е.задержку или ослабление развития заболевания или клинических симптомов заболевания и регрессию заболевания или клинических симптомов заболевания. PPARδ-восприимчивое состояние или заболевание может полностью или частично отзываться на PPARδ-модуляцию. PPARδ-восприимчивое состояние или нарушение может быть связано с неадекватной, напримерболее низкой или более высокой, чем нормальная, PPARδ-активностью. Неадекватная функциональная активность PPARδ может возникать в результате экспрессии PPARδ в клетках, которые в нормальном состоянии не осуществляют экспрессии PPARδ, пониженной экспрессии PPARδ (приводящей, например, к липоидным и метаболическим нарушениям и заболеваниям) или пониженной экспрессии PPARδ. PPARδ-восприимчивое состояние или заболевание может включать PPARδ-опосредованное состояние или заболевание.

Как использовано здесь, термин "PPARδ-опосредованное состояние или нарушение" и схожие термины и фразы означают состояние или нарушение, характеризующееся неадекватной, напримерболее низкой или более высокой, чем нормальная, PPARδ-активностью. Неадекватная функциональная активность PPARδ может возникать в результате экспрессии PPARδ в клетках, которые в нормальном состоянии не осуществляют экспрессии PPARδ, пониженной экспрессии PPARδ (приводящей, например, к метаболическим и воспалительным нарушениям и заболеваниям) или повышенной экспрессии PPARδ. PPARδ-опосредованное состояние или заболевание может быть полностью или частично опосредовано неадекватной функциональной активностью PPARδ. Тем не менее, PPARδ-опосредованное состояние или заболевание - это такое, при котором модуляция PPARδ приводит к некоторому воздействию на лежащее в основе состояние или нарушение (например, агонист PPARδ приводит к некоторому улучшению здоровья пациента, по крайней мере, у некоторых пациентов).

Как использовано здесь, термины "iNOS-восприимчивое состояние или нарушение", "TNF-восприимчивое состояние или нарушение" и схожие термины и фразы означают состояние или нарушение, которое благоприятно отзывается на модуляцию активности iNOS или TNF, соответственно. Благоприятный отклик на модуляцию iNOS или TNF включает облегчение или устранение заболевания и/или сопутствующих симптомов, сдерживание заболевания, т.е.задержку или ослабление развития заболевания или клинических симптомов заболевания и регрессию заболевания или клинических симптомов заболевания. iNOS- или TNF-восприимчивое состояние или заболевание может полностью или частично отзываться на модуляцию iNOS или TNF. iNOS- или TNF-восприимчивое состояние или нарушение может быть связано с неадекватной, напримерболее низкой или более высокой, чем нормальная, активностью iNOS или TNF. Неадекватная функциональная активность iNOS или TNF может возникать как результат сверхсинтезаоксида азота (NO), экспрессии iNOS или TNF в клетках, которые в нормальном состоянии не осуществляют экспрессии iNOS или TNF, пониженной экспрессии iNOS или TNF (приводящей, например, к липоидным и метаболическим нарушениям и заболеваниям) или повышенной экспрессии iNOS или TNF. iNOS- или TNF-восприимчивое состояние или заболевание может включать iNOS- или TNF-опосредованное состояние или заболевание.

Как использовано здесь, термины "iNOS-опосредованное состояние или нарушение", "TNF-опосредованное состояние или нарушение" и схожие термины и фразы означают состояние или нарушение, характеризующееся неадекватной, напримерболее низкой или более высокой, чем нормальная, активностью iNOS или TNF, соответственно. Неадекватная функциональная активность iNOS или TNF может возникать как результат сверхсинтезаNO посредством iNOS, экспрессии iNOS или TNF в клетках, которые в нормальном состоянии не осуществляют экспрессии iNOS или TNF, пониженной экспрессии iNOS или TNF или повышенной экспрессии iNOS или TNF. iNOS- или TNF-опосредованное состояние или заболевание может быть полностью или частично опосредовано неадекватной функциональной активностью iNOS или TNF. Тем не менее, iNOS- или TNF-опосредованное состояние или заболевание - это такое, при котором модуляция iNOS или TNF приводит к некоторому воздействию на лежащее в основе состояние или нарушение (например, ингибитор iNOS или TNF приводит к некоторому улучшению здоровья пациента, по крайней мере, у некоторых пациентов).

Термин "алкил", как самостоятельный или как часть другого заместителя, означает, если не оговорено особо, линейный или разветвленный, либо циклический углеводородный радикал, или комбинацию указанных радикалов, которые могут быть полностью насыщенными, моно- или поли-ненасыщенными и могут включать ди- или поли-валентные радикалы с указанным числом углеродных атомов (например,C₁-C₁₀ соответствует числу атомов углерода от 1 до 10). Примеры насыщенных углеводородных радикалов включают группы, такие как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил, циклогексил, (циклогексил)метил, циклопропилметил, гомологи и изомеры, например, н-пентил, н-гексил, н-гептил, н-октил и тому подобное. Ненасыщенная алкильная группа означает группу с одной или более двойными связями или тройными связями. Примеры ненасыщенных алкильных групп включают винил, 2-пропенил, кротил, 2-изопентил, 2-(бутадиенил), 2,4-пентадиенил, 3-(l,4-пентадиенил), этинил, 1- и 3-пропинил, 3-бутинил и высшие гомологи и изомеры. Подразумевается, что термин "алкил", если не оговорено особо, также включает производные алкила, описанные более подробно ниже, такие как "гетероалкил," "циклоалкил" и "алкилен." Термин "алкилен", как самостоятельный или как часть другого заместителя, означает двухвалентный радикал, образованный из алкана, примером которого является -CH₂CH₂CH₂CH₂-. Типичная алкильная группа содержит от 1 до 24 атомов углерода, при этом группы с 10 или менее атомами углерода по настоящему изобретению являются предпочтительными. "Низший алкил" или "низший алкилен" означает более короткую алкильную или алкиленовую группу, обычно содержащую восемь или менее углеродных атомов.

Термин "гетероалкил", как самостоятельный или в сочетании с другим термином, означает, если не оговорено особо, стабильный линейный или разветвленный, либо циклический углеводородный радикал, или комбинации указанных радикалов, содержащих указанное числа углеродных атомов и от одного до трех гетероатомов, выбранных из группы, включающей O, N, Si и S, и где атомы азота или серы могут необязательно быть окислены и гетероатом азота необязательно может быть кватернизованным. Гетероатом(ы) O, N и S могут быть размещены в любой внутренней позиции гетероалкильной группы. Гетероатом Si может быть размещен в любой позиции гетероалкильной группы, включая положение, по которому алкильная группа соединяется с остатком молекулы. Примеры включают -CH₂-CH₂-O-CH₃, -CH₂-CH₂-NH-CH₃, -CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃, -CH₂-S-CH₂-CH₃, -CH₂-CH₂-S(O)-CH₃, -CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃, -CH=CH-O-CH₃, -Si(CH₃)₃, -CH₂-CH=Н-OCH₃ и -CH=CH-N(CH₃)-CH₃. Может быть до двух гетероатомов подряд, как, например, в -CH₂-NH-OCH₃ и -CH₂-O-Si(CH₃)₃. Также в термин "гетероалкил" включены такие, описанные более подробно ниже, радикалы, как "гетероалкилен" и "гетероциклоалкил." Термин "гетероалкилен", как самостоятельный или как часть другого заместителя, означает двухвалентный радикал, образованный из гетероалкила, примером которого являются -CH₂-CH₂-S-CH₂CH₂- и -CH₂-S-CH₂-CH₂-NH-CH₂-. Что касается гетероалкиленовых групп, гетероатомы могут также занимать одно из двух либо оба концевых положения цепи. Кроме того, для алкиленовых и гетероалкиленовых мостиковых групп предполагается отсутствие ориентации связующей группы.

Термины "циклоалкил" и "гетероциклоалкил", как самостоятельные или в сочетании с другими терминами, означают, если не оговорено особо, циклические варианты "алкила" и "гетероалкила", соответственно. Таким образом, подразумевается, что термины "циклоалкил" и "гетероциклоалкил" включены в термины "алкил" и "гетероалкил", соответственно. Вдобавок, что касается гетероциклоалкила, гетероатом может занимать позицию, по которой гетероцикл соединен с остатком молекулы. Примеры циклоалкила включают циклопентил, циклогексил, 1-циклогексенил, 3-циклогексенил, циклогептил и тому подобное. Примеры гетероциклоалкила включают 1-(1,2,5,6-тетрагидропиридил), 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил, 4-морфолинил, 3-морфолинил, тетрагидрофуран-2-ил, тетрагидрофуран-3-ил, тетрагидротиен-2-ил, тетрагидротиен-3-ил, 1-пиперазинил, 2-пиперазинил и тому подобное.

Термины "гало" или "галоген", как самостоятельные или как часть другого заместителя, означают, если не оговорено особо, атом фтора, хлора, брома или йода. Кроме того, подразумевается, что термины, такие как "галогеналкил", включают алкил, замещенный атомами галогена, которые могут быть одинаковыми или различными, в количестве, изменяющемся в пределах от одного до (2m'+1), где m' означает общее число атомов углерода в алкильной группе. Например, подразумевается, что термин "галоген(C₁-C₄)алкил" включает трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 4-хлорбутил, 3-бромпропил и тому подобное. Таким образом, термин "галогеналкил" включает моногалогеналкил (алкил, замещенный одним атомом галогена) и полигалогеналкил (алкил, замещенный атомами галогена, в количестве, изменяющемся в пределах от двух до (2m'+1) атомов галогена, где m' означает общее число атомов углерода в алкильной группе). Подразумевается, что термин "пергалогеналкил" означает, если не оговорено особо, алкил, замещенный (2m'+1) атомами галогена, где m' означает общее число атомов углерода в алкильной группе. Например, подразумевается, что термин "пергалоген(C₁-C₄)алкил" включает трифторметил, пентахлорэтил, 1,1,1-трифтор-2-бром-2-хлорэтил и тому подобное.

Термин "арил", используемый в отдельности или в сочетании с другими терминами (например, арилокси, арилтиокси, арилалкил), означает, если не оговорено особо, ароматический заместитель, который может представлять собой отдельный цикл или многократные циклы (до трех циклов), которые конденсированы вместе или соединены ковалентной мостиковой связью. Каждый из циклов может содержать от нуля до четырех гетероатомов, выбранных из группы, включающей N, O и S, где атомы азота и серы необязательно окислены и атом(ы) азота необязательно кватернизованы. Арильная группа, которая содержит гетероатомы, может называться "гетероарил" и быть присоединена к остатку молекулы через гетероатом. Нелимитирующие примеры арильных групп включают фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, 4-дифенил, 1-пирролил, 2-пирролил, 3-прролил, 3-пиразолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, пиразинил, 2-оксазолил, 4-оксазолил, 2-фенил-4-оксазолил, 5-оксазолил, 3-иоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 2-тиазолил, 4-тазолил, 5-тиазолил, 2-фурил, 3-фурил, 2-тиенил, 3-тиенил, 2-придил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидил, 4-пиримидил, 5-бензотиазолил, пуринил, 2-бензимидазолил, 5-индолил, 1-изохинолил, 5-изохинолил, 2-хиноксалинил, 5-хиноксалинил, 3-хнолил и 6-хинолил. Заместители для каждой из вышеуказанных арильных циклических систем выбраны из указанной ниже группы приемлемых заместителей.

Подразумевается, что термин "арилалкил" включает те радикалы, в которых арильная группа присоединена к алкильной группе (например, бензил, фенетил, пиридилметил и тому подобное) или гетероалкильной группе (например, феноксиметил, 2-пиридилоксиметил, 3-(l-нафтилокси)пропил и тому подобное).

Подразумевается, что каждый из вышеуказанных терминов (например, "алкил," "гетероалкил" и "арил") включает как замещенную, так и незамещенную форму указанного радикала. Предпочтительные заместители для каждого типа радикала приведены ниже.

Заместители для алкильного и гетероалкильного радикалов (включающие такие часто упоминаемые группы, как алкилен, алкенил, гетероалкилен, гетероалкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил и гетероциклоалкенил) могут быть выбраны из группы, включающей: -OR', =О, =NR', =NOR', -NR'R", -SR', -галоген, -SiR'R"R'", -OC(O)R', -C(O)R', -CO₂R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R''', -NR"C(O)₂R', -NH-C(NH₂)=NH, -NR'C(NH₂)=NH, -NH-C(NH₂)=NR', -S(O)R', -S(O)₂R', -S(O)₂NR'R", -CN и -NO₂, - в количестве, изменяющемся в пределах от нуля до (2N+1), где N означает общее число атомов углерода в таком радикале. Каждый из R', R" и R'" независимо означает водород, незамещенный (C₁-C₈)алкил и гетероалкил, незамещенный арил, арил, замещенный 1-3 галогенами, незамещенный алкил, алкокси- или тиоалкокси- группы или арил-(C₁-C₄)алкильные группы. Когда R' и R" присоединены к одному и тому же атому азота, указанные группы вместе с атомами углерода, через которые эти группы соединены с атомом азота, образуют 5-, 6- или 7-членный цикл, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей N, O и S. Например, подразумевается, что -NR'R" включает 1-пирролидинил и 4-морфолинил. Из приведенного выше описания заместителей для каждого специалиста в данной области очевидно, что термин "алкил", как подразумевается, включает группы, такие как галогеналкил (например, -CF₃ и -CH₂CF₃) и ацил (например, -C(O)CH₃, -C(O)CF₃, -C(O)CH₂OCH₃ и тому подобное).

Так же, заместители для арильных групп варьируются и могут быть выбраны из группы, включающей: -галоген, -OR', -OC(O)R', -NR'R", -SR', -R', -CN, -NO₂, -CO₂R', -CONR'R", -C(O)R', -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR"C(O)₂R', -NR'-C(O)NR"R'", -NH-C(NH₂)=NH, -NR'C(NH₂)=NH, -NH-C(NH₂)=NR', -S(O)R', -S(O)₂R', -S(O)₂NR'R", -N₃, -CH(Ph)₂, фтор(C₁-C₄)алкокси и фтор(C₁-C₄)алкил, - в количестве, изменяющемся в пределах от нуля до общего числа открытых валентностей на ароматической циклической системе; и где каждый из R', R" и R'" независимо выбран из группы, включающей: водород, (C₁-C₈)алкил и гетероалкил, незамещенный арил, (незамещенный арил)-(C₁-C₄)алкил и (незамещенный арил)окси-(C₁-C₄)алкил.

Два заместителя на смежных атомах арильного цикла, необязательно, могут быть заменены заместителем формулы

-T-C(O)-(CH₂)_q-U-, где T и U независимо означают -NH-, -O-, -CH₂- или простую связь, и q означает целое число от 0 до 2. Альтернативно, два заместителя на смежных атомах арильного цикла, необязательно, могут быть заменены заместителем формулы

-A-(CH₂)_r-B-, где A и B независимо означают -CH₂-, -O-, -NH-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂-, -S(O)₂NR'- или простую связь, и r означает целое число от 1 до 3. Одна из простых связей нового образованного таким образом цикла может, необязательно, быть заменена двойной связью. Альтернативно, два заместителя на смежных атомах арильного цикла, необязательно, могут быть заменены заместителем формулы -(CH₂)_s-X-(CH₂)_t, где s и t независимо означают целые числа от 0 до 3, и X означает -O-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)₂- или -S(O)₂NR'-. Заместитель R' в -NR'- и -S(O)₂NR'- выбраны из водорода и незамещенного (C₁-C₆)алкила.

Подразумевается, что термин "гетероатом", как использован здесь, включает кислород (O), азот (N), серу (S) и кремний (Si).

Подразумевается, что термин "фармацевтически приемлемые соли" включает соли активных соединений, которые получают со сравнительно нетоксическими кислотами или основаниями, в зависимости от конкретных заместителей, находящихся на указанных здесь соединениях. Когда соединения по настоящему изобретению содержат относительно кислотные функциональные группы, основно-аддитивные соли могут быть получены приведением в контакт нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством указанного основания, либо в чистом виде, либо в присутствии инертного растворителя. Примеры фармацевтически приемлемых основно-аддитивных солей включают соль натрия, калия, кальция, аммония, органического амина, магния или тому подобную соль. Когда соединения по настоящему изобретению содержат относительно основные функциональные группы, кислотно-аддитивные соли могут быть получены приведением в контакт нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством указанной кислоты, либо в чистом виде, либо в присутствии инертного растворителя. Примеры фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей включают соли, полученные из неорганических кислот, таких как хлористоводородная, бромистоводородная, азотная, угольная, моногидрокарбоновая, фосфорная, моногидрофосфорная, дигидрофосфорная, серная, моногидросерная, йодистоводородная или фосфористая кислоты и тому подобные, а также соли, полученные из сравнительно нетоксических органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, изомасляная, щавелевая, малеиновая, малоновая, бензойная, янтарная, субериновая, фумаровая, миндальная, фталевая, бензолсульфоновая, п-толилсульфоновая, лимонная, винная, метансульфоновая и тому подобное. Также включены соли аминокислот, такие как аргинат и тому подобное, и соли органических кислот, таких как глюкуроновая или галактуроновая кислоты и тому подобных (смотри, например, Berge et al. (1977) J. Pharm. Sci. 66:1-19). Некоторые конкретные соединения по настоящему изобретению содержат как основные, так и кислотные функциональные группы, которые позволяют превращать соединения как в основно-, так и кислотно-аддитивные соли.

Нейтральные формы соединений могут быть регенерированы при контактировании соли с основанием или кислотой и выделении первоначального соединения общепринятым способом. Первоначальная форма соединения отличается от различных форм солей некоторыми физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, но в других отношениях соли эквивалентны первоначальной форме соединения для целей настоящего изобретения.

В дополнение к солевым формам настоящее изобретение представляет соединения, составляющие форму пролекарств. Пролекарствами указанных здесь соединений являются те соединения, которые легко подвергаются химическим превращениям в физиологических условиях, образуя соединения по настоящему изобретению. Кроме того, пролекарства могут быть преобразованы в соединения по настоящему изобретению химическими или биохимическими способами в среде ex vivo. Например, пролекарства могут подвергаться медленному преобразованию в соединения по настоящему изобретению при размещении в резервуаре трансдермального пластыря с подходящим ферментом или химическим реагентом. По настоящему изобретению в особенности предпочтительными пролекарствами являются гидролизуемые сложные эфиры.

Соединения с биоизостерическими замещениями по CO₂H, присоединенному к CR^aR^b, такие как приведены в обзоре Patani et al. (1996) Chem. Rev. 96(8):3147-3176, рассматриваются настоящим изобретением и считаются входящими в рамки объема настоящего изобретения и приложенных пунктов.

Некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать не только в несольватированных формах, но и в сольватированных формах, включая гидратированные формы. Обычно сольватированные формы эквивалентны несольватированным формам и считаются входящими в рамки объема настоящего изобретения и приложенных пунктов. Некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать в многочисленных кристаллических или аморфных формах. В большинстве случаев все физические формы эквивалентны для употребления по настоящему изобретению и считаются входящими в рамки объема настоящего изобретения и приложенных пунктов.

Некоторые соединения по настоящему изобретению содержат асимметрические углеродные атомы (оптические центры) или двойные связи; рацематы, энантиомеры, диастереомеры, геометрические изомеры и индивидуальные изомеры - все охватываются рамками объема настоящего изобретения и приложенных пунктов. Такие изомеры могут быть разделены или получены асимметрическим синтезом на основе общепринятых методик и называются "оптически чистыми" изомерами, т.е. по существу свободными от других изомеров; предпочтительно, 85%, 90%, 95% или 97% ee.

Соединения по настоящему изобретению могут также содержать искусственно созданные количественные соотношения атомных изотопов по одному или более атомам, составляющим указанное соединение. Например, в соединения может быть введена радиоактивная метка с помощью радиоактивных изотопов, таких как, например, тритий (³H), йод-125 (¹²⁵I) или углерод-14 (¹⁴C). Меченные радиоактивным изотопом соединения могут использоваться в качестве терапевтических средств, напримерпротивораковых терапевтических средств, средств для исследований, напримерреагентов для анализа и диагностических средств, например, агентов визуализации in vivo. Подразумевается, что все варианты изотопов соединений по настоящему изобретению, радиоактивные либо нет, входят в рамки объема настоящего изобретения и приложенных пунктов.

Варианты выполнения изобретения

Обнаружен класс соединений, взаимодействующих с PPARδ. В зависимости от биологической среды (например, типа клеток, патологического состояния хозяина и т.д.)такие соединения могут активировать или блокировать действия PPARδ. Установлено, что благодаря активации рецептора PPARδ соединения могут применяться как терапевтические средства, способные к модуляции состояний или нарушений, опосредованных PPARδ или восприимчивых к модуляции PPARδ. Как указано выше, примеры таких заболеваний или нарушений включают нарушения обмена веществ, сердечно-сосудистые заболевания, воспалительные состояния и новообразования. Кроме того, соединения могут использоваться для лечения осложнений, сопровождающих такие заболевания или нарушения (например, невропатии, ретинопатии и гломерулосклероза). Хотя считается, что соединения по настоящему изобретению оказывают свое действие через модуляцию PPARδ, механизм действия соединений не охватывает все варианты выполнения настоящего изобретения. Например, соединения по изобретению могут взаимодействовать с другими изотипами рецепторов PPAR, напримерPPARα.

Соединения

Согласно одному из аспектов, настоящее изобретение относится к соединениям, имеющим формулу (Ia):

или их фармацевтически приемлемым солям или пролекарствам,

где X означает O, S(O)_m, CR'R" и SO₂NR";

Y означает O или CR'R";

Z¹ и Z² независимо означают O, S(O)_m, (CR'R")_n, N(R"), C(O)NR" или CR'R"C(O)NR"'; либо Z¹ и Z² вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, могут образовывать (C₂-C₄)алкенил (например, -CH=CH-). Подразумевается, что когда Z¹ и Z² объединены, образуется стабильная группа -Z¹-Z²-. Например, имеется в виду, что соединения, где -Z¹-Z²- означает -O-O- (пероксиды) и тому подобное, не входят в рамки объема изобретения и приложенных пунктов.

Ar¹ и Ar² независимо означают ароматическую группу. Предпочтительно, Ar¹ и Ar² независимо означают бензол, нафталин, пиррол, имидазол, пиразин, оксазол, тиазол, фуран, тиофен, пиридин, пиримидин, бензотиазол, бензимидазол, индол, изохинолин или хинолин.

Ar³ означает арил. Предпочтительно, Ar³ означает фенил, нафтил, пирролил, имидазолил, пиразинил, оксазолил, тиазолил, фурил, тиенил, пиридинил, пиримидинил, бензотиазолил, бензимидазолил, индолил, изохинолил или хинолил. Примеры Ar³ включают, но не в порядке ограничения, фенил, 2-тифторметилфенил, 3-трифторметилфенил, 4-трифторметилфенил, 4-оксазолил, 5-тиазолил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-бензимидазолил, 4-хинолил, 5-хинолил и 6-хинолил.

R¹ означает водород, (C₁-C₈)алкил или арил(C₁-C₄)алкил.

R^a и R^b независимо выбраны из группы, включающей: водород, (C₁-C₄)алкил, арил и арил(C₁-C₄)алкил.

Каждый из R', R" и R'" независимо означает водород, (C₁-C₄)алкил, арил или арил(C₁-C₄)алкил.

Нижний индекс m означает целое число от 0 до 2 и нижний индекс n означает целое число от 1 до 2, при условии, что указанным соединением не является 3-амино-4-[4-(фенилметокси)фенокси]феноксилуксусная кислота, 4-[3,5-дийод-4-(фенилметокси)фенокси]-3,5-дийодбензолпропановая кислота или 4-[4-(бензилокси)-3-йодфенокси]-3,5-дийодгидрокоричная кислота.

В предпочтительном варианте выполнения Ar¹ и Ar² оба означают бензол. В особенно предпочтительных вариантах выполнения Ar¹ и Ar² независимо означают бензол-1,4-диил, который незамещен или замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из группы, включающей: галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₅-C₆)циклоалкил, фтор(C₁-C₄)алкил, OR', арил, арил(C₁-C₄)алкил, NO₂, NR'R", C(O)R', CO₂R', C(O)NR'R", N(R")C(O)R', N(R")CO₂R', N(R")C(O)NR'R", S(O)_mNR'R", S(O)_mR', CN и N(R")S(O)_mR', либо двумя смежными заместителями, которые вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное ароматическое или циклоалкановое кольцо.

Одна из групп предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой (Ib):

где R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбраны из группы, включающей: водород, галоген, (C₁-C₄)алкил, (C₅-C₆)циклоалкил, фтор(C₁-C₄)алкил, OR', арил, арил(C₁-C₄)алкил, NO₂, NR'R", C(O)R', CO₂R', C(O)NR'R", N(R")C(O)R', N(R")CO₂R', N(R")C(O)NR'R", S(O)_mNR'R", S(O)_mR', CN и N(R")S(O)_mR', или любые две смежные R группы, выбранные из R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ (например, R² и R³, R⁴ и R⁵, R⁶ и R⁷ или R⁸ и R⁹), могут быть объединены с атомами углерода, к которым они присоединены, образуя конденсированное ароматическое или циклоалкановое кольцо.

Другая группа предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой Ib, при условии, что, когда X означает O, Z¹ означает O, Z² означает CH₂ и Ar³ означает незамещенный фенил, Y отличен от O или CH₂.

Еще одна группа предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой Ib, где X означает S(O)_m, CR'R" или SO₂NR".

В рамках каждой из указанных групп предпочтительные варианты выполнения составляют некоторые другие предпочтительные группы, указанные ниже.

X предпочтительно означает S(O)_m, CR'R" или SO₂NR". Когда X означает CR'R", то R' и R" предпочтительно оба означают водород или (C₁-C₄)алкил. Характерные примеры значений CR'R" включают CH₂ и C(CH₃)₂. Более предпочтительно, X означает S(O)_m. Наиболее предпочтительно, X означает S.

Y предпочтительно означает O или CR'R". Когда Y означает CR'R", то R' и R" предпочтительно оба означают водород или (C₁-C₄)алкил. Характерные примеры значений для CR'R" включают CH₂ и C(CH₃)₂. Более предпочтительно, Y означает O.

Ar³ предпочтительно означает фенил или пиридил. Более предпочтительно, Ar³ означает замещенный фенил. Наиболее предпочтительно, Ar³ означает фенил, замещенный по меньшей мере одним фтор(C₁-C₄)алкилом.

R¹ предпочтительно означает водород или (C₁-C₄)алкил. Более предпочтительно, R¹ означает водород.

R^a и R^b предпочтительно оба означают водород или (C₁-C₄)алкил. Более предпочтительно, R^a и R^b оба означают водород или метил. Наиболее предпочтительно, R^a и R^b оба означают водород.

Предпочтительно, Z¹ и Z² независимо означают O, (CR'R")_n, N(R") или CR'R"C(O)NR"'. Более предпочтительно, Z¹ и Z² независимо означают O, (CR'R")_n или N(R")". В особенно предпочтительных вариантах выполнения Z¹ означает O и Z² означает (CR'R")_n. Характерные примеры значений для -Z¹-Z²- включают -O-CH₂- и -O-(CH₂)₂-. В отдельных, но особенно предпочтительных вариантах выполнения Z¹ означает (CR'R")_n и Z² означает O. Характерные примеры значений для -Z¹-Z²- включают -CH₂-O- и -(CH₂)₂-O-. В других отдельных, но особенно предпочтительных вариантах выполнения Z¹ означает (CR'R")_n и Z² означает N(R"). Характерные примеры значений для -Z¹-Z²- включают -CH₂-NH-, -CH₂-N(CH₃)-, -(CH₂)₂-NH-, -(CH₂)₂-N(CH₃)- и -(CH₂)₂-N(CH₂CH₃)-. В еще одних отдельных, но особенно предпочтительных вариантах выполнения Z¹ означает N(R") и Z² означает (CR'R")_n. Характерные примеры значений для -Z¹-Z²- включают -NH-CH₂-, -N(CH₃)-CH₂-, -NH-(CH₂)₂- и -N(CH₃)-(CH₂)₂-. В других отдельных, но особенно предпочтительных вариантах выполнения Z¹ означает O и Z² означает CR'R"C(O)NR'". Характерные примеры значений для -Z¹-Z²- включают -O-CH₂C(O)NH-, -O-CH₂C(O)N(CH₃)-, -CH₂C(O)N(CH₂CH₃)- и -O-CH₂C(O)N(CH₂C₆H₅)-.

Также особенно предпочтительными являются те варианты выполнения, которые объединяют каждую из таких предпочтительных групп. Таким образом, одна из групп особенно предпочтитетльных вариантов выполнения представлена формулой (II):

где R^1', R^2', R^3', R^4' и R^5' независимо выбраны из группы, включающей: водород, галоген, (C₁-C₄)алкил, фтор(C₁-C₄)алкил, OR', арил, арил(C₁-C₄)алкил, NO₂, NR'R", C(O)R', CO₂R', C(O)NR'R", N(R")C(O)R', N(R")CO₂R', N(R")C(O)NR'R", S(O)_mNR'R", S(O)_mR', CN и N(R")S(O)_mR'. X, Y, Z¹, Z², R^a, R^b, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R', R" и R'" имеют значения и предпочтительные расположения, указанные выше. Предпочтительно, по меньшей мере, один из R^1', R^2', R^3', R^4' и R^5' отличен от водорода. Более предпочтительно, по меньшей мере, один из R^1', R^2', R^3', R^4' и R^5' означает фтор(C₁-C₄)алкил. Еще более предпочтительно, R^3' означает CF₃, R^4' означает CF₃ или R^5' означает CF₃.

Другая группа особенно предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой (IV):

где R^2', R^3', R^4' и R^5' независимо выбраны из группы, включающей: водород, галоген, (C₁-C₄)алкил, фтор(C₁-C₄)алкил, OR', арил, арил(C₁-C₄)алкил, NO₂, NR'R", C(O)R', CO₂R', C(O)NR'R", N(R")C(O)R', N(R")CO₂R', N(R")C(O)NR'R", S(O)_mNR'R", S(O)_mR', CN и N(R")S(O)_mR'. X, Y, Z^l, Z², R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R^a, R^b R', R" и R'" имеют значения и предпочтительные расположения, указанные выше.

В еще одной группе особенно предпочтительных вариантов выполнения X означает S и Y означает O. В рамках этой группы предпочтительные соединения представлены формулой (V):

где Ar³, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R', R" и R'" имеют значения и предпочтительные расположения, указанные выше.

Другая группа особенно предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой V, где Ar³ означает фенил, замещенный, по меньшей мере, одним фтор(C₁-C₄)алкилом.

Еще одна группа особенно предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой (VII):

где X, Y, Ar³, R^a, R^b, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R', R" и R'" имеют значения и предпочтительные расположения, указанные выше.

Еще одна группа особенно предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой (VIII):

где X, Y, Ar³, R^a, R^b, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R', R" и R'" имеют значения и предпочтительные расположения, указанные выше.

Еще одна группа особенно предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой (IX):

где X, Y, Ar³, R^a, R^b, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R', R" и R'" имеют значения и предпочтительные расположения, указанные выше.

Другая группа особенно предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой (X):

где X, Y, Ar³, R^a, R^b, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R', R" и R'" имеют значения и предпочтительные расположения, указанные выше.

Другая группа особенно предпочтительных вариантов выполнения представлена формулой (XI):

где X, Y, Ar³, R^a, R^b, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R', R" и R'" имеют значения и предпочтительные расположения, указанные выше.

Иллюстративные примеры предпочтительных соединений представлены на ФИГ. 1.

Суммируя сказанное, изобретение охватывает новые соединения, новые фармацевтические композиции и/или новые способы применения. Хотя некоторые раскрытые соединения доступны из промышленных источников, фармацевтические композиции или способы применения таких соединений являются новыми. Если не оговорено особо, подразумевается, что изобретение включает те соединения, которые являются новыми, а также фармацевтические композиции, различные способы (например, способы лечения некоторых PPARδ-опосредованнных состояний и заболеваний) и тому подобное, включающие как новые соединения по изобретению, так и выпускаемые промышленно композиции. Характерные примеры промышленно доступных соединений включают: 3-амино-4-[4-(фенилметокси)фенокси]феноксилуксусную кислоту, 4-[3,5-дийод-4-(фенилметокси)фенокси]-3,5-дийодбензолпропановую кислоту и 4-[4-(бензилокси)-3-йодфенокси]-3,5-дийодгидрокоричную кислоту.

Получение соединений

Приведенные ниже схемы 1-13 представляют характерные примеры синтетических способов получения соединений по настоящему изобретению. Специалисту в данной области понятно, что дополнительные способы также пригодны. Другими словами, соединения по изобретению могут быть получены путем общепринятых органических синтезов с использованием исходных материалов, реагентов и взаимодействий, хорошо известных в данной области.

Термины "головная группа" и "концевая группа", как использованы здесь, относятся к указанным группам соединений, представленным формулами Ia и Ib:

Некоторые соединения по изобретению удобно получать общепринятым способом, схематически представленным на схеме 1, где бис-фенол A последовательно алкилируют α-галогензамещенным сложным эфиром B в присутствии ненуклеофильного основания, такого как K₂CO₃, Cs₂CO₃, NaH или Et₃N, или другого аминового основания, и арил(C₁-C₄)алкилгалогенидом D. Альтернативно, алкилирование может быть осуществлено путем реакции Мицунобу (Mitsunobu) через взаимодействие спиртов вместо галогенидов B и D. Сложные эфиры E легко могут быть подвергнуты, по желанию, реакции омыления до карбоновой кислоты.

Вариант приведенной выше схемы полезен для получения серии соединений по изобретению. Фенол C, где R^c означает трет-бутил, получен по схеме 1. Второе алкилирование может быть выполнено с использованием нанесенного на полимерную подложку TBD (1,5,7-триазабицикло[4.4.0]дец-5-ен)а в качестве основания. Сложный трет-бутиловый эфир может быть расщеплен обработкой с помощью TFA, и избыток реагентов может быть удален путем обработки N-(2-меркаптоэтил)аминометилполистиролом и MP-карбонатными смолами. Преимущества такого варианта для синтеза серии соединений состоят в легкости удаления побочных продуктов путем фильтрования или выпаривания при пониженном давлении.

Ряд симметричных бис-фенолов формулы A, т.е. бис-фенолов, где R^c и R^d одинаковые, выпускается промышленно. Что касается несимметричных бис-фенолов, т.е. бис-фенолов, где R^c и R^d различные, соединения по изобретению получают согласно приведенной ниже схеме 3. Головная группа арилоксиуксусной кислоты может быть получена алкилированием соответственно замещенного арилового спирта F. Хлорсульфирование с последующим восстановлением сульфонилхлоридной группы дает тиофенол H. Тиофенолы формулы H полезны для получения ряда соединений по изобретению.

Концевая группа также может быть получена алкилированием соответственно замещенного арилового спирта I (смотри схему 4). Полученный простой эфир J может быть непосредственно присоединен к тиолу, получаемому с применением [бис(трифторацетокси)йод]бензола в гексафторизопропаноле (Kita et al. (1995) J. Org. Chem. 60:7144-7148). Если R^a означает подходящий галоген (например, Br, I), диарилсульфиды K могут быть получены способом по типу реакции Ульмана, катализируемым медью (Palomo et al. (2000) Tetrahedron Lett. 41:1283-1286). Специалисту-практику известно, что ряд реакций присоединения, катализируемых палладием, никелем или медью, полезен для получения диарильных промежуточных соединений с мостиковой связью, таких как K (схема 4) или A (схема 1); смотри Hartwig (1998) Acc. Chem. Res. 31:852-860 и приведенные там ссылки. После сочетания сложный эфир K может быть подвергнут омылению до карбоновой кислоты L.

Соединения по изобретению, не доступные через бис-фенольные промежуточные соединения, такие как A, могут быть получены нуклеофильным ароматическим замещением с использованием сульфида H. Взаимодействие H (смотри схему 5) с соответственно замещенным ароматическим альдегидом (M) в основных условиях в диполярном, ароматическом растворителе, приводит к диарильному сульфиду N. Альдегид может быть восстановлен и концевая группа присоединена по реакции Мицунобу (Mitsunobu (1981) Synthesis 1-28).

Альтернативно, альдегид N может быть восстановлен и концевая группа присоединена путем реакции алкилирования.

Схема 6 иллюстрирует пример получения соединений, содержащих алкилен в головной группе, из альдегида R путем взаимодействия с эфиром диэтилфосфоноуксусной кислоты и последующим восстановлением с помощью Mg.

Схема 7 иллюстрирует пример получения соединений, содержащих алкилен в концевой группе, из альдегида N путем взаимодействия с диэтилбензилфосфонатом.

Соединения по изобретению, содержащие сульфонамидный мостик, могут быть получены, как показано на схеме 8. Алкилирование нитрозамещенного арилового спирта с последующим восстановлением нитрогруппы дает ариламиносоединение X. Взаимодействие X с сульфонилхлоридом Y (полученным хлорсульфированием производного арилоксиуксусной кислоты G, как указано выше) приводит к сульфонамиду Z. Эфир карбоновой кислоты может быть затем, по желанию, подвергнут омылению.

Если желательно, дальнейшее замещение сульфонамидного азота алкилирование промежуточного соединения Z может быть выполнено, как иллюстрируется схемой 9. После алкилирования, если желательно, эфир карбоновой кислоты может быть подвергнут омылению.

Сульфонилхлориды Y также используются для взаимодействия с другими классами аминов, помимо анилинов. Для иллюстрации на схеме 10 приведено получение ряда N-арилпиперазинов. Взаимодействие сульфонилхлоридов Y с N-арилпиперазинами AA промотируют с помощью основания Хюнига на полимерной подложке. После удаления реагента на полимерной подложке сложный эфир, при необходимости, может быть расщеплен.

Соединения по изобретению, включающие карбоксамид, могут быть получены из промежуточного соединения A, как схематически представлено на схеме 11. Полное алкилирование A с помощью сложного α-галогенэфира с последующим омылением дает дикислоту BB. Дикислоту затем присоединяют к соответствующему амину.

Альтернативно, дикислота BB может быть нанесена на твердый носитель и остающаяся в таком виде свободная кислота соединена с рядом аминов. Отщепление соединения от твердого носителя дает требуемые кислотные продукты CC. Такой способ удобен для получения ряда аналогов (схема 12).

Схема 13 иллюстрирует пример получения соединений, содержащих аминометиловый мостик в концевой группе. Гидроаминирование альдегида N (смотри схему 5) замещенным анилином с последующим сложноэфирным гидролизом дает такие типы соединения.

При рассмотрении молекулярных структур, представленных выше на схемах 1-13, специалист в данной области сразу поймет, что для практического осуществления методик синтеза могут быть использованы предшественники и промежуточные соединения с арильными группами, отличными от фенила, например нафтилом. Кроме того, понятно, что группы R^c, R^d и R^e указывают, в очень общем значении, заместители на арильной и/или пиперазинильной группах. R^c, R^d и R^e могут быть одинаковыми или различными. R^c, R^d и R^e могут быть представлены отдельным заместителем или множественными заместителями. Когда R^c, R^d и/или R^e представлены множественными заместителями, каждый из R^c, R^d и R^e может быть одинаковым или различным.

Очевидно также, что каждая из групп, O-P и L, означает, в общем смысле, карбоксильную защитную группу, которая может быть удалена в основных условиях (например, сложный алкиловый эфир), смотри, например, Greene et al. (1991) Protective Groups in OrganicSynthesis, 2^nd Edition, New York: Wiley and Kocienski (1994) Protecting Groups, New York: Thieme, pp.224-276, и уходящую группу (например, галоген, сульфонат и тому подобное), соответственно.

Описанные здесь характерные способы и примеры являются иллюстративными для данного изобретения и не рассматриваются как ограничивающие рамки объема настоящего изобретения и приложенных пунктов формулы изобретения.

Композиции

Согласно другому аспекту, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель и одно или более соединений по настоящему изобретению.

Один из вариантов выполнения относится к рассматриваемым соединениям в комбинации с фармацевтически приемлемым наполнителем, таким как стерильный физиологический раствор, растворы метилцеллюлозы,растворы детергентовили другая среда, вода, желатин, масла и т.д. Соединения или композиции могут быть введены в отдельности или в комбинации с любым обычным носителем, разбавителем и т.д., и такое введение может осуществляться в разовой или многократной дозах. Композиции являются стерильными, в особенности, когда используются для парентерального введения. Кроме того, пероральные стандартные лекарственные формы должны быть стерильны. Подходящие носители включают водорастворимые и нерастворимые в воде твердые вещества, жирные кислоты, мицеллы, инверсные мицеллы, липосомы и полутвердые или жидкие среды, включающие водные растворы и нетоксичные органические растворители. Все вышеуказанные составы могут быть обработаны ультразвуком, размешаны, смешаны, перемешаны при высокой деформации сдвига, нагреты, измельчены, размолоты, переведены в аэрозольную форму, распылены, лиофилизованы и т.д. с целью получения фармацевтически приемлемых композиций.

При получении фармацевтических композиций из соединений по настоящему изобретению фармацевтически приемлемые носители могут быть либо твердыми, либо жидкими. Препараты в твердой форме включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, облатки, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердый носитель может состоять из одного или более веществ, которые могут также действовать как разбавители, корригенты, связывающие вещества, консерванты, дезинтегрирующие средства для таблеток или инкапсулирующее средство.

В порошках носитель является тонко измельченным твердым веществом, которое находится в смеси с тонко измельченным активным компонентом. В таблетках активный компонент смешан с носителем, обладающим необходимыми связывающими характеристиками, в подходящих пропорциях и спрессован, для придания требуемой формы и размера.

Порошки и таблетки, предпочтительно, содержат от 5% или 10% до 70% активного соединения. Подходящими носителями являются карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактоза, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагокантовая камедь, метилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, низкоплавкий воск, масло какао и тому подобное. Подразумевается, что термин "получение" включает формулирование активного соединения с инкапсулирующим веществом, таким как носитель, обеспечивающий капсулу, в которой активный компонент, в присутствии или отсутствие других носителей, окружен носителем, находящимся, таким образом, в ассоциации с указанным активным соединением. Подобным образом, включенными являются облатки и лепешки. Таблетки, порошки, капсулы, пилюли, облатки и лепешки могут быть использованы в качестве твердых лекарственных форм, подходящих для перорального введения.

Для получения суппозиториев низкоплавкий воск, такой как смесь глицеридов жирных кислот или масло какао, первоначально расплавляют и диспергируют в нем активный компонент, например, перемешиванием. Расплавленную гомогенную смесь выливают затем в формы подходящих размеров, оставляют охлаждаться и затвердевать.

Препараты в жидкой форме включают растворы, суспензии и эмульсии, например растворы в воде или в смеси вода/пропиленгликоль. Жидкие препараты для парентеральной инъекции могут быть формулированы в раствор в водном растворе полиэтиленгликоля.

Водные растворы, подходящие для перорального применения, могут быть получены растворением активного компонента в воде и добавлением, по желанию, подходящих красителей, корригентов, стабилизаторов и загустителей. Водные суспензии, подходящие для перорального применения, могут быть получены диспергированием тонко измельченного активного компонента в воде с использованием вязкого вещества, такого как природные или синтетические камеди, смолы, метилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза и другие хорошо известные суспендирующие средства.

Также предложены твердые формы препаратов, которые предназначены для превращения, незадолго до применения, в препараты жидкой формы для перорального введения. Такие жидкие формы включают растворы, суспензии и эмульсии. Эти препараты могут содержать, в дополнение к активному компоненту, красители, корригенты, стабилизаторы, буферные смеси, искусственные и природные подсластители, диспергаторы, загустители, солюбилизаторы и тому подобное.

Фармацевтический препарат, предпочтительно, находится в стандартной лекарственной форме. В такой форме препарат подразделен на дозы, содержащие соответствующие количества активного компонента. Стандартная лекарственная форма может представлять собой препарат в упаковке, упаковка содержит дискретные количества препарата, такие как упакованные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Также стандартной лекарственной формой может быть сама капсула, таблетка, облатка или лепешка, либо это может быть соответствующее число указанных форм в упаковке.

Количество активного компонента в стандартной дозе препарата можно варьировать или подбирать в пределах от 0,1 мг до 1000 мг, предпочтительно, от 1,0 мг до 100 мг в соответствии с конкретным применением и эффективностью активного компонента. Композиция может, по желанию, также содержать другие совместимые терапевтические средства.

Фармацевтические композиции и способы по настоящему изобретению могут дополнительно включать другие указанные здесь терапевтически активные соединения, полезные для лечения нарушений обмена веществ, сердечно-сосудистых заболеваний, воспалительных состояний или новообразований и сопровождающих их патологий (например, диабетической невропатии), или другие вспомогательные вещества. Во многих случаях композиции, включающие соединение по изобретению и альтернативный агент, оказывают при введении аддитивное или синергическое действие.

Способы применения

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способам лечения нарушения обмена веществ, сердечно-сосудистого заболевания, воспалительного состояния или новообразования, включающим введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества, по меньшей мере, одного соединения по настоящему изобретению.

Согласно еще одному аспекту настоящее изобретение относится к способам лечения состояния или нарушения, опосредованного PPARδ. Такие способы включают введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению. Термин "субъект" определяется как охватывающий животных, таких как млекопитающие, включая, но не в порядке ограничения, приматов (например, человека), коров, овец, коз, лошадей, собак, кошек, кроликов, крыс, мышей и тому подобное.

Согласно еще одному аспекту изобретение относится к способам лечения состояния или нарушения, восприимчивого к модуляции PPARδ, включающим введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению.

Настоящее изобретение также относится к способам повышения уровней холестерина HDL, способам снижения уровней холестерина LDL и способам снижения уровней триглицеридов, каждый из которых включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению.

Кроме того, изобретение относится к способам модуляции PPARδ, включающим контактирование клетки с соединением по настоящему изобретению. Предпочтительно соединение является агонистом PPARδ.

Настоящими соединениями и композициями можно лечить заболевания и состояния, связанные с липоидным обменом, воспалением и пролиферацией клеток. Согласно одной группе вариантов выполнения изобретения, заболевания или состояния, включая хронические заболевания, людей или других видов млекопитающих можно лечить с помощью активаторов функции PPARδ. Такие заболевания или состояния включают: (1) нарушения обмена веществ, такие как гиперхолестеринемия, гиперлипидемия, дислипидемия (например, повышенное содержание холестерина LDL, повышенное общее содержание холестерина, низкое содержание холестерина HDL), смешанная дислипидемия, гипертриглицеридемия, гипергликемия, диабет, ожирение, синдром X, нарушения, касающееся питания, резистентность к инсулину и гиперинсулинемия, (2) сердечно-сосудистые заболевания, включающие, но не в порядке ограничения, аневризм, атеросклероз, артериосклероз, кардиомиопатию, застойную сердечную недостаточность, болезнь коронарных артерий, гипертензию, ишемию/реперфузию, рестеноз и васкулярный стеноз, (3) воспалительные состояния или заболевания, такие как атеросклероз, ревматоидный артрит, остеоартрит, простетическое воспаление суставов, аллергические заболевания (например, общую анафилактическую реакцию, лекарственную аллергию, аллергическую реакцию на укус насекомого и пищевую аллергию), воспалительные болезни кишечника (например,болезнь Крона, неспецифический язвенный колит, илеит, энтерит, гастрит и воспаление слизистой оболочки по причине инфекции, энтеропатия, спровоцированная нестероидными противовоспалительными лекарственными средствами), вагинит, псориаз и воспалительный дерматоз (например, дерматит, экзема, атопический дерматит, аллергический контактный дерматит, крапивница и ожоговое поражение), васкулит, спондилоартропатия, склеродермия, астма и респираторные аллергические заболевания (например, аллергический ринит, аллергические заболевания легких, синдром расстройства дыхания у взрослых, кистозный фиброз и тому подобное), (4) аутоиммунные болезни (например, ревматоидный артрит, псориатический артрит, рассеянный склероз, системную красную волчанку, диабет типа I, гломерулонефрит и тому подобное), (5) отторжение трансплантата (включая отторжение аллотрансплантата и реакцию трансплантат против хозяина) и вызванные ими состояния, (6) воспаление вследствие вирусных или бактериальных инфекций, включающее септический шок, (7) другие болезни, при которых следует подавлять нежелательные воспалительные реакции, напримератеросклероз, миозит, нейродегенеративные болезни (например, болезнь Альцгеймера), энцефалит, менингит, гепатит, нефрит, сепсис, саркоидоз, конъюнктивит, отит, хроническое обструктивное заболевание легких, синусит, миокардит, глаукому и синдром Бехчета, (8) новообразования, такие как солидные опухоли, рак кожи, меланома, лимфома и эндотелиальный рак, например рак молочной железы, рак легкого, колоректальный рак, рак предстательной железы, рак почек, рак печени, рак желудка, рак мочевого пузыря, рак яичников и рак желудочно-кишечного тракта, и (9) другие состояния или болезни, которые чувствительны или восприимчивы к модуляции функции PPARδ.

Активаторы функции PPARδ также могут быть использованы для лечения заболеваний или состояний, восприимчивых к модуляции iNOS или TNF или опосредованных iNOS или TNF, включающих (1) воспалительные состояния и иммунные нарушения, например ревматоидный артрит, остеоартрит, простетическое воспаление суставов, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона и другие воспалительные болезни кишечника, гастрит и воспаление слизистой оболочки по причине инфекции, энтеропатию, спровоцированную нестероидными противовоспалительными лекарственными средствами, синдром расстройства дыхания у взрослых, астму, кистозный фиброз или хроническое обструктивное заболевание легких, миокардит, рассеянный склероз, сахарный диабет и связанные с ним осложнения, гломерулонефрит, дерматит, псориаз, экзему, крапивницу, глаукому, отторжение трансплантированного органа, системную красную волчанку, воспаление вследствие вирусных или бактериальных инфекций, атеросклероз, повреждение после гипоксического или ишемического инсульта (с реперфузией или без), например церебральное или кардиальное, (2) шоковые состояния, напримерсептический шок, геморрагический шок, травматический шок или шок, вызванный молниеносной печеночной недостаточностью или терапией с помощью цитокинов, таких как TNF, IL-1 и IL-2, или терапией с помощью цитокининдуцирующих средств, например, 5,6-диметилксантенонуксусной кислоты, (3) нарушения желудочно-кишечной моторики, например кишечную непроходимость, и (4) нарушения центральной нервной системы (CNS), напримермигрень, психоз, состояние тревоги, шизофрению, бессонницу, ишемию головного мозга, CNS-травму, эпилепсию, рассеянный склероз, СПИД-деменцию, хронические нейродегенеративные заболевания, такие как системная деменция Леви, болезнь Хантингтона, болезнь Паркинсона или Альцгеймера, острая и хроническая боль и состояния, вызывающие неадренергический нехолинергический невроз, такие как приапизм, ожирение и гиперфагия.

В зависимости от излечиваемого заболевания и состояния субъекта соединения и композиции по настоящему изобретению могут быть введены пероральным, парентеральным (например, внутримышечно, интраперитонеально, внутривенно, интрадуоденально, ICV, интрацистернальной инъекцией или инфузией, подкожной инъекцией или имплантацией), ингаляционным, назальным, вагинальным, ректальным, подъязычным, трансдермальным или местным способами введения и могут быть формулированы, по отдельности или вместе, в подходящие стандартные лекарственные препараты, содержащие общепринятые нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, вспомогательные средства и растворители, подходящие для каждого способа введения. Настоящее изобретение также рассматривает введение соединений по данному изобретению в препарате пролонгированного действия, из которого активный ингредиент высвобождается за определенный период времени.

При терапевтическом применении в целях лечения указанных здесь нарушений обмена веществ, сердечно-сосудистых заболеваний, воспалительных состояний, новоообразований, иммунных нарушений, шоковых состояний, нарушений желудочно-кишечной моторики или CNS-заболеваний соединения, используемые в фармацевтическом способе по изобретению, могут быть введены при начальных дозах приблизительно от 0,001 мг/кг до 100 мг/кг в день. Суточная доза в пределах от 0,1 мг/кг до 10 мг/кг является предпочтительной. Однако дозы могут варьироваться в зависимости от потребностей пациента, тяжести излечиваемого состояния и предназначенного для использования соединения. Оценка предпочтительной дозы в конкретной ситуации относится к компетенции практикующего специалиста. Обычно лечение начинают с меньших доз, которые ниже, чем оптимальная доза соединения. После чего дозу повышают малым приращением до достижения оптимального эффекта в каждом случае. При желании, для удобства, суточная доза может быть подразделена на порции, вводимые в течение дня.

Вышеуказанные соединения и композиции могут быть удобным образом объединены с атомами углерода, к которым они присоединены, и/или использованы в комбинации со средствами, которые используются для лечения нарушений обмена веществ, сердечно-сосудистых заболеваний, воспалительных состояний, новоообразований, иммунных нарушений, шоковых состояний, нарушений желудочно-кишечной моторики или CNS-заболеваний и связанных с ними патологий (например, диабетической невропатии). Во многих случаях введение рассматриваемых соединений или композиций в сочетании с такими альтернативными средствами повышает эффективность указанных средств. Следовательно, в ряде случаев, настоящие соединения и композиции, когда объединены через атомы углерода, по которым соединяются, либо введены в комбинации, например, с противодиабетическими средствами, могут быть использованы в дозах, которые ниже количеств, установленных для раздельного применения, или ниже количеств, рассчитанных для комбинированной терапии.

Например, для лечения воспаления настоящие соединения могут быть использованы в сочетании с противовоспалительным или обезболивающим средством, таким как опиатный агонист, ингибитором липоксигеназы, таким как ингибитор 5-липоксигеназы, ингибитором циклооксигеназы, таким как ингибитор циклооксигеназы-2, антагонистом рецептора интерлейкина, таким как антагонист рецептора интерлейкина-1, антагонистом рецептора NMDA, ингибитором оксида азота или ингибитором синтеза оксида азота, нестероидным противовоспалительным средством или цитокин-супрессирующим противовоспалительным средством, например, с таким соединением как ацетаминофен, аспирин, кодеин, фентанил, ибупрофен, индометацин, кеторолак, морфин, напроксен, фенацетин, пироксикам, стероидный анальгетик, суфентанил, сулиндак, тенидап и тому подобное. Также настоящие соединения могут быть введены с болеутоляющим средством; потенцирующим средством, таким как кофеин, H2-антагонист, симетикон, гидроксид алюминия или магния; противозастойным средством, таким как фенилефрин, фенилпропаноламин, псевдофедрин, оксиметазолин, эфинефрин, нафазолин, ксилометазолин, пропилгекседрин или леводезоксиэфедрин; противокашлевыми средствами, такими как кодеин, гидрокодон, карамифен, карбетапентан или декстраметорфан; диуретиком и седативным или неседативным антигистамином. Каждое из вышеуказанных средств может быть введено способом и в количестве, обычно применимыми, одновременно или последовательно, с соединением по настоящему изобретению. Когда соединение по настоящему изобретению используют одновременно с одним или более другими лекарственными средствами, в некоторых случаях может быть предпочтительна фармацевтическая композиция, содержащая такие другие лекарственные средства в дополнение к соединению по настоящему изобретению. Следовательно, фармацевтические композиции по настоящему изобретению включают также те композиции, которые содержат один или более других активных ингредиентов в дополнение к соединению по настоящему изобретению. Примеры других активных ингредиентов, способных присоединяться к соединению по настоящему изобретению через атомы углерода, вводимых либо раздельно, либо в тех же самых фармацевтических композициях, включают, но не в порядке ограничения: (a) антагонисты VLA-4, (b) кортикостероиды, такие как беклометазон, метилпреднизолон, бетаметазон, преднизон, преднизолон, дексаметазон, фьютиказон и гидрокортизон, и кортикостероидные аналоги, такие как будезонид; (c) иммунодепрессанты, такие как циклоспорин (циклоспорин A, Sandimmune®, Neoral®), такролимус (FK-506, Prograf®), рапамицин (сиролимус, Rapamune®) и другие иммунодепрессанты типа FK-506, и микофенолят, напримермикрофенолятмофетил (CellCept®); (d) антигистамины (антагонисты H1-гистамина), такие как бромофенирамин, хлорфенирамин, дексхлорфенирамин, трипролидин, клемастин, дифенгидрамин, дифенилпиралин, трипеленнамин, гидроксизин, метдилазин, прометазин, тримепразин, азатадин, ципрогептадин, антазолин, фенирамин, пириламин, астемизол, терфенадин, лоратадин, цетиризин, фексофенадин, дезкарбоэтоксилоратадин и тому подобное; (e) нестероидные противоастматические средства, такие как β2-агонисты (например, тербуталин, метапротеренол, фенотерол, изоэтарин, альбутерол, битолтерол и пирбутерол), теофиллин, кромолиннатрий, атропин, ипратропийбромид, лейкотриеновые антагонисты(например, зафирлюкаст, монтелюкаст, пранлюкаст, иралюкаст, побилюкаст и SKB-106.203), ингибиторы биосинтеза лейкотриена (зилеутон, BAY-1005); (f) нестероидные противовоспалительные средства (NSAIDs), такие как производные пропионовой кислоты (например, альминопрофен, беноксапрофен, буклоксовую (bucloxic) кислоту, карпрофен, фенбуфен, фенопрофен, флупрофен, флурбипрофен, ибупрофен, индопрофен, кетопрофен, миропрофен, напроксен, оксапрозин, пирпрофен, пранопрофен, супрофен, тиапрофеновую кислоту и тиоксапрофен), производные уксусной кислоты (например, индометацин, ацеметацин, алклофенак, клиданак, диклофенак, фенклофенак, фенклозовую (fenclozic) кислоту, фентиазак, фурофенак, ибуфенак, изоксепак, окспинак, сулиндак, тиопинак, толметин, зидометацин и зомепирак), производные фенамовыекислоты (например, флуфенамовую кислоту, меклофенамовую кислоту, мефенамовую кислоту, нифлумовую кислоту и толфенамовую кислоту), производные бифенилкарбоновой кислоты (например, дифлунизал и флуфенизал), оксикамы (например, изоксикам, пироксикам, судоксикам и теноксикам), салицилаты (например, ацетилсалициловую кислоту и сульфазалазин) и пиразолоны (например, апазон, безпиперилон, фепразон, мофебутазон, оксифенбутазон и фенилбутазон); (g) ингибиторы циклооксигеназы-2 (COX-2), такие как целекоксиб (Celebrex®) и рофекоксиб (Vioxx®); (h) ингибиторы фосфодиэстеразы типа IV (PDE-IV); (i) другие агонисты PPARов, в особенности, PPARα и PPARγ; (j) агенты, снижающие содержание холестерина, такие как ингибиторы HMG-CoA редуктазы (ловастатин, симвастатин, правастатин, флувастатин, аторвастатин и другие статины), вещества, усиливающие экскрецию желчной кислоты(например, холестирамин и колестипол), никотиновую кислоту (ниацин), производные фибровой кислоты (гемфиброзил, клофибрат, фенофибрат и бензафибрат), пробукол и нитроглицерин; (k) противодиабетические средства, такие как инсулин, сульфонилкарбаматы (например, глибурид, меглинатид), бигуаниды, напримерметформин (Glucophage®), ингибиторы α-глюкозидазы (акарбозу), соединения тиазолидиндиона, напримеррозиглитазон (Avandia®), троглитазон (Rezulin®), циглитазон, пиоглитазон (Actos®) и энглитазон; (l) препараты на основе интерферона бета (интерферон β-l α, интерферон β-l β); (m) этанерцепт, (n) терапевтические препараты на основе антител, такие как ортоклон (OKT3), даклизумаб (Zenapax®), базиликсимаб (Simulect®) и инфликсимаб (Remicade®), (o) терапевтические средства от рассеянного склероза, такие как интерферон β-lβ (Betaseron®), интерферон β-lα (Avonex®), азатиоприн (Imurek®, Imuran®), глатирамерацетат (Capoxone®), глюкокортикоид (например, преднизолон) и циклофосфамид, (p) β3-адренергические рецепторные агонисты, лептин или его производные и нейропептид Y (например, NPY5) антагонисты; (q) другие соединения, такие как 5-аминосалициловая кислота и соответствующие пролекарства, (r) химиотерапевтические средства, такие как ДНК-алкилирующие средства (например, циклофосфамид, ифосфамид), антиметаболиты (например, азатиопрен, 6-меркаптопурин, метотрексат, фолатовыйантагонист и 5-фторурацил, пиримидиновый антагонист), разрушающие микротрубочки средства (например, винкристин, винбластин, паклитаксел, доцетаксел, колхицин, нокодазол и винорелбин), интеркалирующие ДНК агенты (например, доксорубицин, дауномицин и цисплатин), ингибиторы синтеза ДНК, такие как гидроксикарбамид, перекрестносшивающие ДНК агенты, например, митомицин C, (s) гормональные терапевтические средства (например,тамоксифен и флутамид), (t) ингибитор оксидазотсинтазы (NOS) (например,ингибитор iNOS или nNOS) и (u) ингибитор высвобождения или действия α-фактора некроза опухоли (TNF α). Массовое соотношение соединения по настоящему изобретению и второго активного ингредиента может варьироваться и зависит от эффективной дозы каждого ингредиента. Обычно следует использовать для каждого эффективную дозу. Так, например, когда соединение по настоящему изобретению, когда объединено через атомы углерода, по которым соединяется с NSAID, массовое соотношение соединения по настоящему изобретению и NSAID обычно должно быть приблизительно в пределах от 1000:1 до 1:1000, предпочтительно, приблизительно от 200:1 до 1:200. Комбинации соединения по настоящему изобретению и других активных ингредиентов также должны быть в вышеуказанных пределах, но в каждом случае следует использовать эффективную дозу активного ингредиента.

Следующие примеры представляют способ иллюстрации и не рассматриваются как ограничивающие рамки объема изобретения и приложенных пунктов.

ПРИМЕРЫ

Используемые ниже реагенты и растворители могут быть получены из промышленных источников, таких как Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wisconsin, USA). Спектр ¹Н-ЯМР (¹Н-NMR) снимают на Bruker DPX 300 МГц ЯМР-спектрометре, JEOL JNM-A 300 МГц ЯМР-спектрометре, Varian Gemini 400 МГц ЯМР-спектрометре, Bruker ARX 400 МГц ЯМР-спектрометре или Varian INNOVA 400 МГц ЯМР-спектрометре. Характеристические пики сведены в таблицу в следующем порядке: число протонов, мультиплетность (s, синглет (с); d, дублет (д); t, триплет (т); q, квартет (кв); m, мультиплет (м); br s, уширенный синглет (уш.с)) и константа взаимодействия(взаимодействий) в герцах (Гц). Масс-спектр электронной ионизации (EI) снимают на Hewlett Packard 5989A масс-спектрометре. Результаты масс-спектрометрии представлены как соотношение массы и заряда, с последующим относительным содержанием каждого иона (в круглых скобках). В таблицах отдельное значение m/e приводится для M+H (или, как указано, M-H) иона, содержащего наиболее общие атомные изотопы. Модели изотопов соответствуют во всех случаях предполагаемой формуле. Масс-спектрометрический анализ с ионизацией электрораспылением (ESI) проводят на Hewlett-Packard 1100 MSD спектрометре с электрораспылением, используя HP 1100 HPLC для доставки образца. Обычно анализируемый образец растворяют в метаноле при 0,1 мг/мл и впрыскивают 1 микролитр (мкл) с доставляющим растворителем в масс-спектрометр, сканирующий в пределах от 100 до 1500 дальтон. Все соединения анализируют в положительной ESI моде, используя в качестве доставляющего растворителя смесь 1:1 ацетонитрил/вода с 1% уксусной кислотой. Представленные ниже соединения анализируют также в отрицательной ESI моде, используя в качестве доставляющего растворителя смесь 2мМ NH₄OAc в ацетонитриле/воде. LCMS осуществляют на Agilent 1100 сериях LC/MSD.

Пример 1

Данный пример иллюстрирует получение {2-метил-4-[3-метил-4-(4-трифторметилбензилокси)фенилсульфанил]фенокси}уксусной кислоты (1).

трет-Бутиловый эфир [4-(4-гидрокси-3-метилфенилсульфанил)-2-метилфенокси]уксусной кислоты (1.1). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 100 мл помещают бис-(4-гидрокси-3-метилфенил)сульфид (8,6 г, 34,9 ммоль), тонко измельченный Cs₂CO₃ (11,9 г, 36,7 ммоль) и безводный ДМФА (35 мл). После чего добавляют по каплям трет-бутилбромацетат (5,2 мл, 34,9 ммоль, Aldrich) и реакционную смесь энергично перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в 500 мл воды и экстрагируют 3 x 50 мл метиленхлорида. Объединенные органические экстракты промывают 2 x 150 мл воды, сушат над Na₂SO₄ и концентрируют до слегка желтоватого масла. Затем смесь очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60, элюируют 10% гексаном в DCM-5% гексаном в DCM-100% DCM). Фракции, содержащие только требуемый продукт 1.1, объединяют и концентрируют до белого твердого вещества (3,5 г). Смешанные фракции объединяют, концентрируют и вновь очищают в тех же самых хроматографических условиях, получая дополнительно 2,0 г чистого 1.1. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,13 (2H, м); 7,06 (2H, м); 6,70 (1H, д, J=8,3 Гц); 6,59 (1Н, д, J=8,4 Гц); 4,50 (2H, с); 2,23 (3H, с); 2,20 (3H, с); 1,48 (9H, с).

{2-Метил-4-[3-метил-4-(4-трифторметилбензилокси)-фенилсульфанил]фенокси}уксусная кислота (1). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 100 мл помещают соединение 1.1 (400 мг, 1,1 ммоль), тонко измельченный Cs₂CO₃ (405 мг, 1,2 ммоль) и безводный ДМФА (2 мл). Добавляют 4-(трифторметил)бензилбромид (298 мг, 1,1 ммоль, Aldrich) и реакционную смесь энергично перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в 60 мл воды и экстрагируют 3 x 20 мл метиленхлоридом. Объединенные органические экстракты промывают 2 x 50 мл воды, сушат над Na₂SO₄ и концентрируют до слегка желтоватого масла (422 мг). Полученный сырой продукт растворяют в метиленхлориде (2,5 мл) и медленно добавляют трифторуксусную кислоту (1,2 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 4 ч, после чего летучие компоненты удаляют в вакууме, получая в остатке сырое масло розового цвета. Сырое масло розового цвета очищают, используя флэш-хроматографию (SiO₂ гель 60, элюируют смесью 60% EtOAc/гексан), и полученный белый твердый продукт перекристаллизовывают из смеси метиленхлорид/гексан, получая мелкие белые кристаллы (213 мг). МС ESI m/e: 461,1 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,65 (2H, д, J=8,4 Гц); 7,54 (2H, д, J=8,4 Гц); 7,20 (1H, с); 7,17-7,14 (2H, д, м); 7,10 (1H, дд, J=13,0, 2,4 Гц); 6,77 (1H, д, J=8,4 Гц); 6,65 (1H, д, J=8,4 Гц); 5,12 (2H, с); 4,66 (2H, с); 2,25 (3H, с); 2,24 (3H, с).

Пример 4

Данный пример иллюстрирует получение 4-[[3-метил-4-(4-трифторметилбензилокси)фенил]сульфанил]-2-пропилфеноксиуксусной кислоты (4).

2-Метил-1-(4-трифторметилбензилокси)бензол (4.1). 2-Метилфенол (12,53 г, 115,9 ммоль) растворяют в ДМФА (60 мл) и перемешивают при 0°C. К раствору добавляют K₂CO₃ (24,03 г, 173,9 ммоль) и 4-трифторметилбензилбромид (23,08 г, 96,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляют воду и продукт дважды экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме, получая сырой остаток. Сырой остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (смесь гексан/EtOAc = 30/1), что дает 4.1 (25,1 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,64 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,56 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,18-7,08 (2H, м); 6,90 (1H, т, J=7,2 Гц); 6,84 (1H, д, J=8,1 Гц); 5,14 (2H, с); 2,30 (3H, с).

Этиловый эфир2-пропилфеноксиуксусной кислоты (4.2). 2-Пропилфенол (15,0 г, 110 ммоль) растворяют в ДМФА (70 мл) и перемешивают при 0°C. К раствору добавляют K₂CO₃ (30,43 г, 220,2 ммоль) и этил-2-бромацетат (13,43 мл, 121,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3,5 ч. Реакционную смесь разбавляют водой и продукт дважды экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат над Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме, получая остаток. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (смесь гексан/EtOAc = 30/1), что дает 4.2 (25,4 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,18-7,08 (2H, м); 6,91 (1H, т, J=7,4 Гц); 6,71 (1H, д, J=8,1 Гц); 4,62 (2H, с); 4,25 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,68-2,57 (2H, м); 1,70-1,60 (2H, м); 1,29 (3H, т, J=7,1 Гц); 0,95 (3H, т, J=7,4Гц).

Этиловый эфир 4-хлорсульфонил-2-пропилфеноксиуксусной кислоты (4.3). Хлорсульфоновую кислоту (36,59 мл, 550,5 ммоль) охлаждают до 0°C в атмосфере аргона. Охлажденную хлорсульфоновую кислоту добавляют по каплям к соединению 4.2 (24,5 г, 110,1 ммоль), используя капельную воронку. Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 30 мин и при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь выливают в ледяную воду и медленно перемешивают при 0°C в течение 20 мин. Выпавшие кристаллы собирают и сушат в вакууме, используя сушильный шкаф при 40°C, что дает 4.3 (30,8 г) в виде бледно-желтых кристаллов. ¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 7,90-7,79 (2H, м); 6,81 (1H, д, J=8,4 Гц); 4,75 (2H, с); 4,28 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,79-2,67 (2H, м); 1,77-1,60 (2H, м); 1,30 (3H, т, J=7,1 Гц); 0,97 (3H, т, J=7,3 Гц).

Этиловый эфир 4-меркапто-2-пропилфеноксиуксусной кислоты (4.4). Соединение 4.3 (43,27 г, 134,9 ммоль) растворяют в этаноле (168,6 мл). К раствору добавляют олово (80,1 г, 674,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин, затем охлаждают до 0°C. К реакционной смеси добавляют по каплям при 0°C раствор 4 н. HCl/диоксан (168,6 мл, 674,5 ммоль). Затем реакционную смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в течение 3,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрируют в вакууме и фильтруют для удаления нерастворимых соединений, фильтрат концентрируют в вакууме, получая остаток. Полученный остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (смесь гексан/EtOAc = 10/1), что дает 4.4 (27,2 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,13 (1H, д, J=2,3 Гц); 7,09 (1H, дд, J=2,4, 8,4 Гц); 6,60 (1H, д, J=8,4 Гц); 4,59 (2H, с); 4,25 (2H, кв., J=7,1 Гц); 3,32(1H, с); 2,63-2,55 (2H, м); 1,68-1,57 (2Н, м); 1,28 (3Н, т, J=7,1 Гц); 0,95 (3H, т, J=7,4 Гц).

Этиловый эфир 4-[[3-метил-4-(4-трифторметилбензилокси)-фенил]сульфанил]-2-пропилфеноксиуксусной кислоты (4.5). Соединение 4.4 (5,0 г, 19,66 ммоль) растворяют в 1,1,1,3,3,3-гексафтор-2-пропаноле (30 мл) в атмосфере аргона. К раствору добавляют соединение 4.1 (5,23 г, 19,66 ммоль) и [бис(трифторацетокси)йод]бензол (10,14 г, 23,59 ммоль) медленно, поддерживая реакционную температуру в пределах от 10°C до 17°C. После перемешивания в течение 15 мин реакционную смесь концентрируют в вакууме, получая остаток, который очищают хроматографией на колонке с силикагелем (смесь гексан/EtOAc = 20/1), что дает 4.5 (6,11 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,64 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,54 (2H, д, J=8,1 Гц); 7,20-7,06 (4H, м); 6,76 (1H, д, J=8,4 Гц); 6,62 (1H, д, J=8,4 Гц); 5,11 (2H, с); 4,60 (2H, с); 4,25 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,63-2,56 (2H, м); 2,24 (3H, с); 1,67-1,55 (2H, м); 1,28 (3H, т, J=7,1 Гц); 0,92 (3H, т, J=7,4 Гц).

4-[[3-Метил-4-(4-трифторметилбензилокси)фенил]сульфанил]-2-пропилфеноксиуксусная кислота (4). Соединение 4.5 (32,7 г, 63,0 ммоль) растворяют в ТГФ (250 мл). К раствору добавляют 4 н. LiOH (31,5 мл, 126 ммоль), реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после указанного времени добавляют воду (31,5 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин. Затем к реакционной смеси добавляют 2 н. HCl (70 мл) и ТГФ удаляют в вакууме. Остаток разбавляют гексаном (250 мл) при перемешивании, выпавшие кристаллы собирают фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси EtOAc - гексан, получая 4 (24,12 г). МС APSI m/e: 489 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 12,90 (1H, ушир.с); 7,76 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,67 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,20-7,05 (4H, м); 6,99 (1H, д, J=8,6 Гц); 6,81 (1H, д, J=8,4 Гц); 5,23 (2H, с); 4,68 (2H, с); 2,56-2,47 (2H, м); 2,18 (3H, с); 1,60-1,47 (2H, м); 0,85 (3H, т, J=7,4 Гц).

Пример 5

Данный пример иллюстрирует получение 4-[[2-метил-4-(4-трифторметилбензилокси)фенил]сульфонил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (5).

Этиловый эфир 4-[[2-метил-4-(4-трифторметил-бензилокси)фенил]сульфонил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (5). Соединение 5.1 (90 мг, 0,18 ммоль), полученное способом, аналогичным описанному для соединения 4.5 (смотри пример 4, выше), растворяют в дихлорметане (2,0 мл). К раствору добавляют 70-75% м-хлорпербензойную кислоту (100 мг, 41-44 ммоль) при 0°C и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К смеси добавляют насыщенный раствор NaHCO₃ (5,0 мл) и NaS₂O₃ (100 мг), перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Продукт экстрагируют дихлорметаном (5,0 мл) и органический экстракт последовательно промывают 1 н. раствором NaOH (5 мл) и насыщенным раствором соли (5 мл), сушат над и Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме, получая остаток, который очищают хроматографией на колонке с силикагелем (элюируют смесью 0-30% AcOEt/гексан), что дает 5.2 (86 мг). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 8,12 (1H, м, J=8,8 Гц), 7,70-7,60 (3H, м), 7,60 (1H, с), 7,52 (2H, д, J=8,0 Гц), 6,89 (1H, дд, J=2,5, 8,8 Гц), 6,79 (1H, д, J=2,2 Гц), 6,71 (1H, д, J=8,6 Гц), 5,15 (2H, с), 4,68 (2H, с), 4,25 (2H, кв., J=7,1 Гц), 2,42 (3H, с), 2,28 (3H, с), 1,28 (3H, т, J=7,1 Гц).

4-[[2-Метил-4-(4-трифторметилбензилокси)фенил]сульфонил]-2-метилфеноксиуксусная кислота (5). Соединение 5.2 (82 мг) омыляют способом, аналогичным описанному для соединения 4 (смотри пример 4, выше), получая 5 (68 мг). МС APSI m/e: 493 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 13,00 (1H, ушир.с); 8,02 (2H, д, J=8,8 Гц); 7,76 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,67-7,59 (4H, м); 7,10 (1H, дд, J=2,6, 8,8 Гц); 7,02-7,00 (2H, м); 5,29 (2H, с); 4,81 (2H, с); 2,36 (3H, с); 2,22 (3H, с).

Пример 7

Данный пример иллюстрирует получение 4-[[4-[(4-трифторметилфенокси)метил]фенил]сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (7).

Этиловый эфир 4-[(4-формилфенил)сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (7.1). Осуществляют реакцию связывания соединения 10.3 (17,6 г, 77,8 ммоль) и 4-фторбензальдегида (10,6 г, 85,4 ммоль) способом, аналогичным описанному для соединения 10.4 (смотри пример 10, ниже). Сырой продукт очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н. элюируют смесью AcOEt/гексан = 1/4). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют до слегка желтоватого масла (19,4 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 9,89 (1Н, с); 7,69 (2H, д, J=8,3 Гц); 7,40-7,30 (2H, м); 7,15 (2H, д, J=8,3 Гц); 6,74 (1H, д, J=8,2 Гц); 4,69 (2H, с); 4,28 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,31 (3H,с); 1,30 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир 4-[(4-гидроксиметилфенил)сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (7.2). Соединение 7.1 (32,9 г, 99,6 ммоль) восстанавливают способом, аналогичным описанному для соединения 10.5 (смотри, пример 10, ниже). Сырой продукт очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н. элюируют смесью AcOEt/гексан = 1/2). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют до слегка желтоватого масла (30,0 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,30-7,20 (4Н, м); 7,18 (2Н, д, J=8,2 Гц); 6,67 (1Н, д, J=8,4 Гц); 4,64 (2H, с); 4,63 (2H, д, J=5,9 Гц); 4,26 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,26 (3H, с); 1,61 (1H, т, J=5,9 Гц); 1,30 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир 4-[(4-хлорметилфенил)сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (7.3). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 1 л помещают соединение 7.2 (30,0 г, 90,2 ммоль) и хлороформ (300 мл) и смесь охлаждают до 0°C. Добавляют по каплям при 0°C тионилхлорид (7,90 мл, 107 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме,получая 7.3 в виде слегка желтоватого масла (33,5 г), которое используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,30-7,20 (4H, м); 7,12 (2H, д, J=8,3 Гц); 6,68 (1H, д, J=8,4 Гц); 4,65 (2H, с); 4,53 (2H, с); 4,27 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,27 (3H, с); 1,30 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир 4-[[4-[(4-трифторметилфенокси)метил]фенил]-сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (7.4). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 500 мл помещают сырой 7.3 (полученный из 7.2 (30,0 г, 90,2 ммоль)) и ДМФА (200 мл) и охлаждают до 0°C. Затем добавляют 4-гидроксибензотрифторид (17,5 г, 108 ммоль) и K₂CO₃ (24,9 г, 180 ммоль) при 0°C и реакционную смесь нагревают до 70-80°C и перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь выливают в ледяную воду (400 мл) и продукт экстрагируют толуолом (400 мл). Органический слой последовательно промывают водой (2 x 300 мл) и насыщенным раствором соли (400 мл), сушат над MgSO₄ и концентрируют,получая слегка желтоватое масло, которое очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н., элюируют смесью AcOEt/гексан = 1/6). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют до слегка желтоватого масла (40,9 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,53 (2H, д, J=8,6 Гц); 7,30-7,20 (4H, м); 7,17 (2H, д, J=8,4 Гц); 7,00 (2H, д, J=8,7 Гц); 6,68 (1H, д, J=8,4 Гц); 5,04 (2H, с); 4,66 (2H, с); 4,27 (2Н, кв., J=7,1 Гц); 2,27 (3H, с); 1,30 (3H, т, J=7,1 Гц).

4-[[4-[(4-Трифторметилфенокси)метил]фенил]сульфанил]-2-метилфеноксиуксусная кислота (7). В круглодонную колбу на 1 л помещают соединение 7.4 (40,9 г, 85,8 ммоль), ТГФ (100 мл) и MeOH (100 мл). Затем добавляют по каплям 2 н. NaOH (86 мл, 172 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Раствор нейтрализуют 2 н. HCl (86 мл) и органический растворитель выпаривают, получая водный раствор и нерастворимое масло. Остаток разбавляют AcOEt (300 мл) и 1 н. HCl (300 мл) и распределяют между несмешивающимися растворителями. Органическую фазу последовательно промывают водой (400 мл) и насыщенным раствором соли (400 мл), сушат над MgSO₄ и концентрируют,получая белые кристаллы. Перекристаллизация из 520 мл смеси AcOEt/гексан (3/10) дает соединение 7 (33,4 г) в виде белых кристаллов. МС APSI m/e: 447 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 13,0 (1H, ушир.с); 7,64 (2H, д, J=8,8 Гц); 7,38 (2H, д, J=8,3 Гц); 7,30-7,20 (2H, м); 7,16 (4H, д, J=8,3 Гц); 6,89 (1Н, д, J=8,5 Гц); 5,14 (2H, с); 4,74 (2H, с); 2,19 (3H, с).

Пример 8

Соединение 8 получают из соединения 10.3 и 4-трифторметилбензилоксибензола по способу примера 4. МС APSI m/e: 447 (M-H). ¹H ЯМР (300 МГц) (ДМСО-d₆) δ 13,11 (1H, ушир.с); 7,76 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,66 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,25 (2H, д, J=8,8 Гц); 7,17 (1Н, д, J=2,0 Гц); 7,11 (1H, дд, J=2,0, 8,4 Гц); 7,01 (2H, д, J=8,8 Гц); 6,81 (1H, д, J=8,4 Гц); 5,21 (2H, с); 4,69 (2H, с); 2,15 (3H, с).

Пример 9

Соединение 9 получают по способу примера 4.МС APSI m/e: 497 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 13,12 (1Н, ушир.с); 8,28 (2H, т, J=8,9 Гц); 7,75 (2H, д, J=8,2 Гц); 7,65-7,60 (5H, м); 7,13 (1H, д, J=2,0 Гц); 6,98 (1H, дд, J=2,0, 8,6 Гц); 6,92 (2H, дд, J=2,0, 8,2 Гц); 5,18 (2H, с); 4,93 (2H, с); 2,14 (3H, с).

Пример 10

Данный пример иллюстрирует получение 4-[[2-хлор-4-[(4-трифторметилфенокси)метил]фенил]сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (10).

Этиловый эфир 2-метилфеноксиуксусной кислоты (10.1). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 300 мл помещают 2-метилфенол (15,0 г, 139 ммоль), тонко измельченный K₂CO₃ (38,3 г, 277 ммоль) и безводный ДМФА (60 мл) и полученный раствор охлаждают до 0°C. Затем добавляют по каплям этилбромацетат (18,5 мл, 167 ммоль) при 0°C и реакционную смесь энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают, используя баню с ледяной водой, добавляют воду (180 мл) и продукт дважды экстрагируют AcOEt (200 мл и 100 мл). Объединенные органические экстракты последовательно промывают 2 x 100 мл воды и 100 мл насыщенного раствора соли, сушат над Na₂SO₄ и концентрируют,получая слегка желтоватое масло, которое затем очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н., элюируют смесью 5% AcOEt/гексан - 10% AcOEt/гексан). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют, получая соединение 10.1 в виде бесцветного масла (29,3 г). ¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 7,26-7,13 (2H, м); 6,90 (1H, т, J=7,3 Гц); 6,71 (1H, д, J=8,0 Гц); 4,63 (2H, с); 4,27 (2H, кв., J=6,9 Гц); 2,30 (3H, с); 1,30 (3H_, т, J=6,9 Гц).

Этиловый эфир 4-хлорсульфонил-2-метилфеноксиуксусной кислоты (10.2). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 200 мл помещают хлорсульфоновую кислоту (18,5 мл, 167 ммоль). В токе N₂ добавляют по каплям, используя канюлю, соединение 10.1 (29,3 г, 139 ммоль), при 0°C, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Реакционную смесь выливают в 300 мл ледяной воды. Выпавшие кристаллы собирают, промывают 3 x 100 мл ледяной воды и сушат в вакууме, получая указанное в заголовке соединение 10.2 (37,3 г). ¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 7,86-7,84 (2H, м); 6,80 (1Н, т, J=9,5 Гц); 4,76 (2H, с); 4,29 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,37 (3H, с); 1,31 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир 4-меркапто-2-метилфеноксиуксусной кислоты (10.3). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 1 л помещают соединение 10.2 (37,3 г, 127 ммоль), тонко измельченное олово (74,3 г, 626 ммоль) и EtOH (157 мл) и раствор охлаждают до 0°C. Затем добавляют по каплям при 0°C смесь 4 н. HCl/диоксан (157 мл, 628 ммоль) и реакционную смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в течение 2,5 ч. Реакционную смесь концентрируют и образовавшийся осадок фильтруют и промывают 300 мл хлороформа. Объединенные фильтрат и промывную воду концентрируют до слегка желтоватого масла, которое затем очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н., элюируют смесью 10% AcOEt/гексан - 20% AcOEt/гексан). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют до бесцветного масла 10.3 (26,1 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,14 (1H, д, J=1,8 Гц); 7,09 (1H, дд, J=2,3, 8,5 Гц); 6,59 (1H, д, J=8,4 Гц); 4,59 (2H, с); 4,25 (2H, кв., J=7,1 Гц); 3,32 (1H, с); 2,24 (3H, с); 1,29 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир 4-[(2-хлор-4-формилфенил)сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (10.4). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 500 мл помещают тонко измельченный K₂CO₃ (31,8 г, 230 ммоль) и безводный ДМФА (104 мл). Затем добавляют по каплям при 90°C раствор соединения 10.3 (26,1 г, 115 ммоль) и 3,4-дихлорбензальдегид (21,0 г, 120 ммоль) в безводном ДМФА (52 мл) и реакционную смесь энергично перемешивают при той же температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь выливают в 468 мл ледяной воды и экстрагируют 3 x 200 мл AcOEt. Объединенные органические экстракты последовательно промывают 2 x 200 мл воды и 100 мл насыщенного раствора соли, сушат над Na₂SO₄ и концентрируют до желтого масла, которое затем очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н., элюируют смесью 10% AcOEt/гексан - 20% AcOEt/гексан). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют до слегка желтоватого масла (34,9 г). ¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 9,85 (1H, с); 7,81 (1H, д, J=1,5 Гц); 7,50 (1H, дд, J=1,8, 8,1 Гц); 7,37-7,35 (2H, м); 6,80-6,74 (2H, м); 4,71 (2H, с); 4,30 (2H, кв., J=7,2 Гц); 2,32 (3H, с); 1,32 (3H, т, J=7,2 Гц).

Этиловый эфир 4-[(2-хлор-4-гидроксиметилфенил)сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (10.5). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 500 мл помещают соединение 10.4 (34,9 г, 95,7 ммоль), EtOH (175 мл) и ТГФ (17,5 мл). Затем добавляют 3 порциями при 0°C натрийборгидрид (1,10 г, 29,1 ммоль) и реакционную смесь энергично перемешивают при 0°C в течение 1 ч. Реакционную смесь выливают в 463 мл 0,25 н. HCl при 0°C и продукт экстрагируют 3 x 200 мл AcOEt. Объединенные органические экстракты последовательно промывают 2 x 200 мл воды и 100 мл насыщенного раствора соли, сушат над Na₂SO₄ и концентрируют до желтого масла, которое затем очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н., элюируют смесью 20% AcOEt/гексан - 30% AcOEt/гексан). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют до слегка желтоватого масла (33,5 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,37 (1H, д, J=1,5 Гц); 7,31-7,28 (2H, м); 7,05 (1H, дд, J=1,8, 8,2 Гц); 6,77 (1H, д, J=8,2 Гц); 6,72 (1H, д, J=8,3 Гц); 4,67 (2H, с); 4,61 (2H, д, J=5,9 Гц); 4,28 (2H, кв., J=7,2 Гц); 2,29 (3H, с); 1,66 (1H, т, J=5,9 Гц); 1,31 (3H, т, J=7,2 Гц).

Этиловый эфир 4-[[2-хлор-4-[(4-трифторметилфенокси)метил]-фенил]сульфанил]-2-метилфеноксиуксусной кислоты (10.6). В высушенную в сушильном шкафу круглодонную колбу на 1 л помещают соединение 10.5 (33,5 г, 91,3 ммоль), 4-гидроксибензотрифторид (16,3 г, 101 ммоль), трифенилфосфин (28,7 г, 109 ммоль) и ТГФ (335 мл). Затем добавляют по каплям при 0°C диэтилазодикарбоксилат (17,0 мл, 110 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрируют и очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н., элюируют смесью 10% AcOEt/гексан - 15% AcOEt/гексан - 20% AcOEt/гексан). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют до слегка желтоватого масла (43,4 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,54 (2H, д, J=8,8 Гц); 7,42 (1H, д, J=1,6 Гц); 7,34-7,30 (2H, м); 7,09 (1H, дд, J=1,8, 8,2 Гц); 6,99 (2H, д, J=8,8 Гц); 6,76-6,72 (2H, м); 5,00 (2H, с); 4,68 (2H, с); 4,28 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,29 (3H, с); 1,31 (3H, т, J=7,2 Гц).

4-[[2-Хлор-4-[(4-трифторметилфенокси)метил]фенил]-сульфанил]-2-метилфеноксиуксусная кислота (10). В круглодонную колбу на 1 л помещают соединение 10.6 (43,4 г, 84,9 ммоль) и EtOH (386 мл). Затем добавляют по каплям 4 н. NaOH (42 мл, 168 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем реакционную смесь нейтрализуют, используя 343 мл 0,5 н. HCl, выпавшие кристаллы собирают, промывают 2 x 100 мл воды и сушат в вакууме. Перекристаллизация из 508 мл смеси AcOEt/гексан (2/8) дает указанное в заголовке соединение 10 (31,1 г) в виде белых кристаллов. МС APSI m/e: 481 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 12,98 (1H, ушир.с); 7,65 (2H, д, J=8,7 Гц); 7,58 (1H, с); 7,36-7,29 (3H, м); 7,17 (2H, д, J=8,6 Гц); 6,96 (1H, д, J=8,4 Гц); 6,74 (1H, д, J=8,2 Гц); 5,14 (2H, с); 4,77 (2H, с); 2,21 (3H, с).

Пример 11

Соединение 11 получают по способу примера 10. МС APSI m/e: 461 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 12,94 (1H, ушир.с); 7,64 (2H, д, J=8,7 Гц); 7,33 (1H, с); 7,27 (1H, д, J=8,5 Гц); 7,20-7,10 (3H, м); 6,98 (1Н, д, J=2,8 Гц); 6,82 (1Н, дд, J=2,8, 8,5 Гц); 6,66 (1H, д, J=8,0 Гц); 5,10 (2H, с); 4,70 (2H, с); 2,34 (3H, с); 2,26 (3H, с).

Пример 13

Следующие соединения получают способами, подобными способам, описанным в примерах 1, 4 и 5.

Пример 14

Следующие соединения получают способами, подобными способам, описанным в примерах 1 и 4.

Пример 15

Следующие соединения получают способами, подобными способам, описанным в примерах 7 и 10.

Пример 16

Следующие соединения получают способами, подобными способам, описанным в примерах 7 и 10.

Пример 17

Следующие соединения получают способом, схематически приведенном на схеме 11.

Пример 18

Следующие соединения получают способом, подобным способу, описанному в примере 10.

Пример 19

Следующие соединения получают способами, подобными способам, описанным в примере 7 и схематически приведенным на схемах 6 и 7.

Пример 20

Следующие соединения получают способами, подобными способам, описанным в примерах 1, 7 и 10.

Пример 21

Данный пример иллюстрирует получение 2,5-диметил-4-[[2-метил-4-[(4-трифторметилфениламино)метил]фенил]сульфанил]-феноксиуксусной кислоты (21).

Этиловый эфир 2,5-диметилфеноксиуксусной кислоты (21.1). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.1, используя 2,5-диметилфенол в качестве исходного материала.¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,03 (1H, д, J=7,5 Гц); 6,72 (1Н, д, J=7,5 Гц); 6,52 (1H, с); 4,62 (2H, с); 4,27 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,30 (3H, с); 2,25 (3H,с); 1,30 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир 4-хлорсульфонил-2,5-диметилфеноксиуксусной кислоты (21.2). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.2, используя соединение 21.1 в качестве исходного материала.¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,86 (1H, с); 6,61 (1H, с); 4,74 (2H, с); 4,30 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,71 (3H, с); 2,31 (3H, с); 1,32 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир 2,5-диметил-4-меркаптофеноксиуксусной кислоты (21.3). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.3, используя соединение 21.2 в качестве исходного материала.¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 7,11 (1Н, с); 6,54 (1H, с); 4,59 (2H, с); 4,26 (2H, кв., J=7,2 Гц); 3,10 (1H, с); 2,29 (3H, с); 2,21 (3H, с); 1,30 (3H, т, J=7,2 Гц).

Этиловый эфир 4-[(4-формил-2-метилфенил)сульфанил]-2,5-диметилфеноксиуксусной кислоты (21.4). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 7.1, используя соединение 21.3 и4-хлор-3-метилбензальдегид в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 9,86 (1H, с); 7,62 (1H, с); 7,44 (1H, д, J=8,1 Гц); 7,33 (1H, с); 6,70 (1H, с); 6,62 (1H, д, J=8,1 Гц); 4,68 (2H, с); 4,29 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,46 (3H, с); 2,29 (3H, с); 2,26 (3H, с); 1,32 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир 2,5-диметил-4-[[2-метил-4-[(4-трифторметилфениламино)метил]фенил]сульфанил]феноксиуксусной кислоты (21.5). К перемешиваемому раствору соединения 21.4 (13,5 г, 37,7 ммоль) в CHCl₃ (135 мл) последовательно добавляют 4-(трифторметил)анилин (6,07 г, 37,7 ммоль) и AcOH (3,24 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин реакционную смесь охлаждают до 0°C, добавляют натрийтриацетоксиборгидрид (12,0 г, 56,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь выливают в 150 мл ледяной воды и продукт экстрагируют 2 x 50 мл CHCl₃. Органические экстракты последовательно промывают 150 мл водного NaHCO₃ и 150 мл насыщенного раствора соли, сушат над MgSO₄ и концентрируют до желтого масла, которое затем очищают флэш-хроматографией (SiO₂ гель 60 н., элюируют смесью 10% EtOAc/гексан - 20% EtOAc/гексан). Фракции, содержащие только требуемый продукт, объединяют и концентрируют, получая неокрашенный твердый продукт (18,7 г). ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,38 (2Н, д, J=8,5 Гц); 7,20 (1H, с); 7,14 (1Н, с); 6,97 (1H, д, J=8,1 Гц); 6,70-6,50 (4H, м); 4,66 (2H, с); 4,40-4,20 (5H, м); 2,38 (3H, с); 2,30 (3H, с); 2,22 (3H, с); 1,31 (3H, т, J=7,1 Гц).

2,5-Диметил-4-[[2-метил-4-[(4-трифторметилфениламино)-метил]фенил]сульфанил]феноксиуксусная кислота (21). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 7, используя соединение 21.5 в качестве исходного материала. МС APSI m/e: 474 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 12,86 (1H, ушир.с); 7,33 (2H, д, J=8,6 Гц); 7,21 (1H, с); 7,12 (1H, с); 7,05 (1H, д, J=8,1 Гц); 6,87 (1H, с); 6,85 (1H, т, J=5,6 Гц); 6,65 (2H, д, J=8,6 Гц); 6,62 (1H, д, J=8,1 Гц); 4,72 (2H, с); 4,22 (2H, д, J=5,6 Гц); 2,30 (3H, с); 2,23 (3H, с); 2,11 (3H, с).

Пример 22

Данный пример иллюстрирует получение (4-{2-хлор-4-[(4-трифторметилфениламино)метил]фенилсульфанил}-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси)уксусной кислоты (22).

Этиловый эфир (5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси)уксусной кислоты (22.1). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.1, используя 5,6,7,8-тетрагидро-1-нафтол в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 7,02 (1H, т, J=7,7 Гц); 6,73 (1H, д, J=7,3 Гц); 6,51 (1H, д, J=8,l Гц); 4,61 (2H, с); 4,26 (2H, кв., J=7,3 Гц); 2,77-2,73 (4H, м); 1,81-1,76 (4H, м); 1,30 (3H, т, J=7,3 Гц).

Этиловый эфир (4-хлорсульфонил-5,6,7,8-тетрагидро-нафталин-1-илокси)уксусной кислоты (22.2). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.2, используя соединение 22.1 в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,93 (1H, д, J=8,9 Гц); 6,62 (1H, д, J=9,0 Гц); 4,73 (2H, с); 4,29 (2H, кв., J=7,1 Гц); 3,27-3,24 (2H, м); 2,81-2,78 (2H, м); 1,85-1,82 (4H, м); 1,32 (3H, т, J=7,2 Гц).

Этиловый эфир (4-меркапто-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси)уксусной кислоты (22.3). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.3, используя соединение 22.2 в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 7,11 (1Н, д, J=8,5 Гц); 6,46 (1H, д, J=8,4 Гц); 4,59 (2H, с); 4,26 (2H, кв., J=7,1 Гц); 3,10 (1H, с); 2,76-2,65 (4H, м); 1,82-1,74 (4H, м); 1,30 (3Н, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир [4-(2-хлор-4-формилфенилсульфанил)-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси]уксусной кислоты (22.4). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.4, используя соединение 22.3 и3,4-дихлорбензальдегид в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 9,84 (1H, с); 7,82 (1H, д, J=1,8 Гц); 7,49 (1Н, дд, J=1,8, 8,4 Гц); 7,40 (1H, д, J=8,4 Гц); 6,63 (1H, д, J=8,4 Гц); 6,59 (1Н, д, J=8,0 Гц); 4,70 (2H, с); 4,30 (2H, кв., J=7,0 Гц); 2,82-2,70 (4H, м); 1,77-1,70 (4H, м); 1,32 (3H, т, J=7,0 Гц).

Этиловый эфир (4-{2-хлор-4-[(4-трифторметилфениламино)-метил]фенилсульфанил}-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси)-уксусной кислоты (22.5). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 21.5, используя соединение 22.4 в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (300 МГц) (CDCl₃) δ 7,38 (2H, д, J=8,6 Гц); 7,34 (1H, д, J=8,6 Гц); 7,33 (1H, с); 6,99 (1H, дд, J=1,5, 7,9 Гц); 6,58 (3H, д, J=7,1 Гц); 6,49 (1H, д, J=8,2 Гц); 4,67 (2H, с); 4,37 (1H, ушир.т); 4,28 (2H, кв., J=7,2 Гц); 4,28 (2H, д, J=4,5 Гц); 2,78-2,74 (4H, м); 1,74-1,72 (4H, м); 1,31 (3H, т, J=7,1 Гц).

(4-{2-Хлор-4-[(4-трифторметилфениламино)метил]-фенилсульфанил}-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси)уксусная кислота (22). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 7, используя соединение 22.5 в качестве исходного материала. МС APSI m/e: 520 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 13,03 (1H, ушир.с); 7,43 (1H, с); 7,35 (2H, д, J=8,6 Гц); 7,31 (1H, д, J=8,5 Гц); 7,16 (1H, д, J=8,2 Гц); 6,98 (1H, т, J=6,0 Гц); 6,78 (1H, д, J=8,6 Гц); 6,64 (2H, д, J=8,6 Гц); 6,48 (1Н, д, J=8,2 Гц); 4,75 (2H, с); 4,26 (2H, д, J=5,9 Гц); 2,66-2,63 (4H, м); 1,66-1,65 (4H, м).

Пример 23

Данный пример иллюстрирует получение {4-[2-хлор-4-(4-трифторметилфеноксиметил)фенилсульфанил]-5,6,7,8-тетрагидро-нафталин-1-илокси}уксусной кислоты (23).

Этиловый эфир [4-(2-хлор-4-гидроксиметилфенилсульфанил)-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси]уксусной кислоты (23.1). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.5, используя соединение 23.4 в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,37 (1H, д, J=1,6 Гц); 7,35 (1H, д, J=8,4 Гц); 7,02 (1H, дд, J=1,6, 8,2 Гц); 6,59 (1H, д, J=8,4 Гц); 6,52 (1H, д, J=8,2 Гц); 4,67 (2H, с); 4,60 (2H, с); 4,29 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,80-2,72 (4H, м); 1,75-1,69 (4H, м); 1,32 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир {4-[2-хлор-4-(4-трифторметилфеноксиметил)-фенилсульфанил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси}уксусной кислоты (23.2). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.6, используя соединение 23.1 в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,54 (2H, д, J=8,7 Гц); 7,42 (1H, д, J=1,7 Гц); 7,37 (1H, д, J=8,5 Гц); 7,06 (1H, дд, J=1,8, 8,2 Гц); 6,99 (2H, д, J=8,7 Гц); 6,59 (1H, д, J=8,5 Гц); 6,52 (1H, д, J=8,2 Гц); 4,99 (2H, с); 4,68 (2H, с); 4,29 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,80-2,73 (4H, м); 1,76-1,70 (4H, м); 1,32 (3H, т, J=7,2 Гц).

{4-[2-Хлор-4-(4-трифторметилфеноксиметил)фенилсульфанил]-5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси}уксусная кислота (23). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 7, используя соединение 23.2 в качестве исходного материала. МС APSI m/e: 521 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 13,04 (1H, ушир.с); 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц); 7,59 (1H, д, J=1,6 Гц); 7,37 (1H, д, J=8,5 Гц); 7,29 (1H, дд, J=1,6, 8,2 Гц); 7,17 (2H, д, J=8,6 Гц); 6,81 (1H, д, J=8,6 Гц); 6,51 (1H, д, J=8,2 Гц); 5,12 (2H, с); 4,77 (2H, с); 2,67-2,64 (4H, м); 1,67-1,66 (4H, м).

Пример 24

Данный пример иллюстрирует получение {4-[2-хлор-4-(4-трифторметилфеноксиметил)фенилсульфанил]-2,5-диметилфенокси}-уксусной кислоты (24).

Этиловый эфир [4-(2-хлор-4-формилфенилсульфанил)-2,5-диметилфенокси]уксусной кислоты (24.1). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.4, используя соединение 22.3 и 3,4-дихлорбензальдегид в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 9,85 (1H, с); 7,82 (1H, д, J=1,7 Гц); 7,49 (1H, дд, J=1,7, 8,2 Гц); 7,36 (1H, с); 6,70 (1H, с); 6,58 (1H, д, J=8,2 Гц); 4,71 (2H, с); 4,31 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,31 (3H, с); 2,27 (3H, с); 1,33 (3H, т, J=7,1 Гц).

Этиловый эфир [4-(2-хлор-4-гидроксиметилфенилсульфанил)-2,5-диметилфенокси]уксусной кислоты (24.2). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.5, используя соединение 24.1 в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,36 (1H, д, J=1,6 Гц); 7,33 (1H, с); 7,01 (1H, дд, J=1,9, 8,1 Гц); 6,67 (1H, с); 6,50 (1H, д, J=8,2 Гц); 4,68 (2H, с); 4,60 (2H, с); 4,30 (2H, кв., J=7,2 Гц); 2,31 (3H, с); 2,25 (3H, с); 1,67 (1H, ушир.с); 1,32 (3H, т, J=7,2 Гц).

Этиловый эфир {4-[2-хлор-4-(4-трифторметилфеноксиметил)-фенилсульфанил]-2,5-диметилфенокси}уксусной кислоты (24.3). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 10.6, используя соединение 24.2 в качестве исходного материала. ¹H ЯМР (400 МГц) (CDCl₃) δ 7,54 (2H, д, J=8,8 Гц); 7,42 (1Н, д, J=1,6 Гц); 7,34 (1H, с); 7,06 (1H, дд, J=1,8, 8,2 Гц); 6,99 (2H, д, J=8,7 Гц); 6,67 (1H, с); 6,51 (1H, д, J=8,2 Гц); 4,99 (2H, с); 4,68 (2H, с); 4,30 (2H, кв., J=7,1 Гц); 2,31 (3H, с); 2,25 (3H, с); 1,32 (3H, т, J=7,2 Гц).

{4-[2-Хлор-4-(4-трифторметилфеноксиметил)фенилсульфанил]-2,5-диметилфенокси}уксусная кислота (24). Указанное в заголовкесоединение получают по способу, описанному для получения соединения 7, используя соединение 24.3 в качестве исходного материала. МС APSI m/e: 495 (M-H). ¹H ЯМР (400 МГц) (ДМСО-d₆) δ 12,97 (1H, ушир.с); 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц); 7,59 (1H, д, J=1,5 Гц); 7,35 (1H, с); 7,28 (1H, дд, J=1,4, 8,0 Гц); 7,17 (2H, д, J=8,8 Гц); 6,97 (1H, с); 6,49 (1H, д, J=8,0 Гц); 5,12 (2H, с); 4,78 (2H, с); 2,24 (3H, с); 2,17 (3H, с).

Пример 29

Данный пример описывает испытания in vitro, используемые для оценки соединений по изобретению.

Транзиторный трансфекционный анализ

Клетки CV-1 высевают на 96-луночный планшет (Costar) в DME-среду, пополненную 10% сывороткой теленка, очищенной активированным углем (HyClone), при плотности 24000 клеток на ячейку, за 16-24 ч до трансфекции. Приблизительно 16 нг плазмиды с люциферазным репортером, 8 нг контрольного β-галактозидаза-экспрессирующего вектора (pCMVβ, Clontech) и 2-8 нг PPAR-экспрессирующей плазмиды смешивают с носителем ДНК (pBluescript, Stratagene) до общей концентрации 80 нг на ячейку в OptiME среде объемом 10 мкл (GIBCO BRL). К полученной смеси добавляют вторую смесь, содержащую 10 мкл OptiME среды и 0,7 мклLipoFectamine (GIBCO BRL). После инкубации в течение 30 мин добавляют еще 80 мкл OptiME среды и полученный раствор затем используют для клеток. Спустя 16 ч среду заменяют DME-средой, пополненной 10% дилипидированнойоколоплодной сывороткой теленка (Sigma) и испытуемым соединением [концентрации изменяются в пределах от 10 мкМ до 0,1 нМ]. После инкубации в течение еще 24 ч клетки лизируют и определяют активность как люциферазы, так и β-галактозидазы. Активность люциферазы нормализуют по эффективности трансфекции, используя в качестве стандарта β-галактозидазу, полученную из котрансфицированной pCMVβ плазмиды.

Плазмиды

Плазмиды с репортером DR1_3x tk-luc содержат три копии общих типичных элементов структуры, прямо повторяющих чувствительный элемент 1 (DR1) PPAR [TATCA AGGTCA A AGGTCA TCTAG], введенного в обратном направлении минимального тимидинкиназного промотора герпетической лихорадки в плазмиду со светящимся люциферазным репортером pGL3 (Invitrogen).

G5 tk-luc содержат 5 копий центра связывания GAL4, введенного в обратном направлении минимального тимидинкиназного промотора герпетической лихорадки в плазмиду со светящимся люциферазным репортером pGL3.

pSG5huPPARδ и pSG5muPPARδ содержат нуклеотидные последовательности гена PPARδ человека и мышей, введенного в pSG5 экспрессирующий вектор (Stratagene).

Плазмиды, содержащие нуклеотидные последовательности, кодирующие домены лигандного связывания PPARα и PPARγ, введенные C-терминально в домен связывания ДНК GAL4 подходящего клонирующего вектора домена связывания ДНК GAL4, могут быть получены по общепринятым методикам.

Испытание на связывание

Соединения могут быть исследованы на способность связывать PPARα, PPARγ или PPARδ с помощью сцинтилляционного неконтактного анализа (SPA). Покрытые полилизином SPA-гранулына основе силиката иттрия (Amersham) могут быть восстановлены добавлением 200 нг гранул к 40 мкл буфера для анализа [20 мМ фосфатный буфер, pH 7,1, 50 мМ хлорид натрия, 2 мМ EDTA, 10% (об/об) глицерин и 2 мМ 3-[(3-холамидопропил)диметиламмоний]-1-пропансульфонат (CHAPS)]. К суспензии гранул добавляют 80-280 нг GST-PPAR белка и смесь инкубируют в течение 2 ч при 4°C. 40 мкл суспензии гранул добавляют к 10 мкл раствора испытуемого соединения (концентрации изменяются в пределах от 10 мкМ до 0,1 нМ). После инкубации в течение 1 ч при комнатной температуре добавляют 50 мкл 20-40 нМ раствора радиолиганда в буфере для анализа. После инкубации в течение еще 1 ч при комнатной температуре осуществляют количественный анализ смеси, используя Topcount (Packard).

Радиолиганды

Для испытаний на связывание PPARδ и PPARα может быть использована меченная радиоактивным изотопом 2-(4-(3-(l-((2-хлор-6-фторфенил)этил)-3-(2,3-дихлорфенил)уреидо)пропенил)-фенокси)-2-метилпропионовая кислота (Brown et al. (1997) Chem. Biol. 12:909-918). Для испытания на связывание PPARγ может быть использован меченный радиоактивным изотопом 5-{4-[2-(метил-пиридин-2-иламино)этокси]бензил}тазолидин-2,4-дион (описанный в патенте США № 5902726).

Белки

Что касается GST-PPARα и GST-PPARγ, кодирующие кДНК аминокислоты 167-468 для PPARα и аминокислоты 175-475 для PPARγ, соответственно, могут быть введены в бактериальный вектор экспрессии 2T pGEX (Pharmacia). Что касается GST-PPARδ, кодирующие кДНК аминокислоты 138-440 могут быть введены в бактериальный вектор экспрессии 6P-1 pGEX (Pharmacia). Белок домена лигандного связывания GST-PPAR может быть экспрессирован в клетках BL21 (DE3) (Stratagene).

Испытание на ингибирование iNOS

Соединения можно исследовать на способность ингибировать активность и/или экспрессию iNOS, используя липополисахарид (LPS), чтобы индуцировать экспрессию iNOS в клеточной линии макрофагов мышей, J774. Смотри, например, международную патентную заявку № WO 02/28434 to Buchan et al.

Измерение активности iNOS

LPS-индуцируемую активность iNOS можно измерить, используя следующие условия испытания: J774 клетки высевают при плотности 35000-50000 тысяч клеток на ячейку, в черный, с прозрачным дном, 96-луночный планшет, за 24 ч до использования. Разбавления культуры клеток и лекарственного средствавыполняют с помощью полной среды, состоящей из DMEM (модифицированной по способу Дульбекко среды Игла), содержащей околоплодную сыворотку теленка (10%), глутамин (2 мМ), пенициллин (100 ед/мл) и стрептомицин (100 мкг/мл). J774 клетки предварительно обрабатывают активаторами PPARδ или растворителем, в течение 6 ч до и в течение 24 ч после добавления LPS. Спустя двадцать четыре часа после добавления LPA измеряют активность iNOS, используя следующую методику: полученные разбавлениемсредой/лекарственным средством растворы культуры клеток забирают и клетки промывают D-PBS (модифицированным по способу Дульбекко фосфатно-солевым буферным раствором). Затем D-PBS удаляют и заменяют D-PBS, содержащей DAF-2 (4,5-диаминофлуоресцеин; 5 мкМ) и L-аргинин (500 мкМ). После инкубации при 37°C в течение 3 ч измеряют содержание флуоресцеина в каждой ячейке при длине волны возбуждения 485 нм и длине волны эмиссии 530 нм. После чего может быть рассчитана способность LPS индуцировать активность iNOS в присутствии или отсутствии активатора PPARδ.

Оценка ингибирования iNOS mRNA

LPS-индуцируемая экспрессия iNOS mRNA может быть оценена при использовании следующих условий испытания: J774 клетки высевают в 6-луночные планшеты (10⁶ клетки/лунка) за 24 ч до использования. Клетки предварительно обрабатывают активатором PPARδ или растворителем для контроля, в течение 6 ч перед добавлением LPS, который инкубируют в течение еще 24 ч совместно с активатором PPARδ/контролем. По окончании инкубационного периода культуральную среду удаляют отсасыванием с помощью аспиратора и клетки промывают D-PBS. После удаления D-PBS общеклеточная RNA может быть выделена из каждого образца использованием промышленно выпускаемого набора для выделения RNA. Первоначальный синтез цепи кДНК проводят согласно инструкциям, прилагаемым к системе обратной транскрипции (RT) AMV. Аликвотную пробу (100 нг) RNA добавляют к смеси, содержащей (конечные концентрации) MgCl₂ (5 мМ), Tris-HCl (10 мМ; pH 8,8), KCl (50 мМ), Triton X-100 (0,1%), dNTP (1 мМ), rRNasin (1 Ед/мкл), обратную транскриптазуAMV (0,75 Ед/мкл), oligo(dT)₁₅(25 нг/мкл). Полученную смесь инкубируют в термоблоке для проведения реакцийпри 42°C в течение 30 мин, после чего при 95°C в течение 15 мин и, наконец, при 4°C до момента переноса в холодильник (-20°C) с целью хранения.

Для использования в PCR могут применяться наборы с затравками, чувствительными к iNOS мышей, нечувствительными к iNOS мышей и нечувствительными к GAPDH мышей, такими как использованы в международной патентной заявке № WO 02/28434 to Buchan et al. PCR может быть выполнен в 50-мкл реакционном объеме, содержащем 5 мкл RT реакционной смеси, чувствительные и нечувствительные затравки для iNOS/GAPDH (0,4 пмоль/мкл), dNTPs (160 мМ), KCl (50 мМ), Tris-HCl (10 мМ; pH 9,0), Triton X-100 (0,1%), MgCl₂ (2 мМ) и Taq DNA полимеразу (0,04 Ед/мкл) (конечные концентрации). PCR осуществляют в термоблоке для проведения реакций, используя следующие условия: 95°C в течение 60 сек, с последующими 28 циклами при 94°C в течение 30 сек, 55°C в течение 60 сек, 72°C в течение 90 сек. После конечной стадии удлинения при 72°C в течение 5 мин образцы выдерживают при 4°C до анализа на агарозном геле. Анализ sybr-зеленых окрашенных гелей методом денситометрии выполняют, используя систему фторвизуализации fluorimager Storm'a (молекулярные устройства).

Измерение активности TNF

LPS-индуцируемую активность iNOS и экспрессию TNF можно измерить, используя следующие условия испытания: J774 клетки высевают при плотности 35000-50000 тысяч клеток на ячейку, в черный, с прозрачным дном, 96-луночный планшет. Разбавления культуры клеток и лекарственного средствавыполняют с помощью полной среды, состоящей из DMEM (модифицированной по способу Дульбекко среды Игла), содержащей околоплодную сыворотку теленка (10%), глутамин (2 мМ), пенициллин (100 ед/мл) и стрептомицин (100 мкг/мл). J774 клетки предварительно обрабатывают активаторами PPARδ или растворителем, в течение 6 ч до и в течение 24 ч после добавления LPS. Спустя двадцать четыре часа после добавления LPS измеряют активность iNOS по следующей методике: полученные разбавлениемсредой/лекарственным средством растворы культуры клеток забирают для определения концентраций TNF и осуществляют количественный анализ, используя промышленно выпускаемую ELISAсистему. Клетки могут быть промыты D-PBS. Затем D-PBS удаляют и заменяют D-PBS, содержащей DAF-2 (4,5-диаминофлуоресцеин; 5 мкМ) и L-аргинин (500 мкМ). Активность iNOS измеряют, как описано выше.

Пример 30

Данный пример описывает анализ in vivo, используемый для оценки соединения.

Анализ на холестерин HDL у крыс, получающих пищу с высоким содержанием холестерина

Самцам Sprague-Dawley крыс (BW: 100-120 г) дают пищу с высоким содержанием холестерина (1,25% холестерина, 0,5% холевая кислота и 10% кокосовое масло) в течение 14 дней. Животным вводят перорально испытуемые соединения, суспендированные в 0,5% растворе метилцеллюлозы, однократно в течение 7 дней. Характерные дозы испытуемых соединений составляют 1-30 мг/кг/день.

После 7 дней обработки определяют концентрацию холестерина HDL в сыворотке крови, отобранной путем спуска крови через хвост. Определение холестерина HDL выполняют на Hitachi 7170 автоматическом анализаторе. Данные для выбранных соединений по изобретению суммированы в таблице 9.

Таблица 9
Уровни холестерина HDL в сыворотке
(% увеличения), установленные для выбранных соединений по изобретениюСоединение% увеличения при 30 мг/кг1++2++3+4++5+6++7+8++9+10+11++21++22+25++26+27+

++ означает свыше 100%

+ означает 100% или менее

Уровень холестерина HDL (% увеличения) в сыворотке означает степень увеличения HDL по отношению к растворителю и определяется следующим образом:

содержание холестерина HDL в присутствии испытуемого соединения (мг/дл) - содержание холестерина HDL в присутствии растворителя (мг/дл)x 100содержание холестерина HDL в присутствии растворителя (мг/дл)

Все упомянутые в данном описании публикации и патентные заявки считаются включенными в данное описание в качестве ссылок, как если бы каждая отдельная публикация или патентная заявка была конкретно и индивидуально указана в виде отдельной ссылки. Хотя описанное выше изобретение описано достаточно подробно с помощью иллюстраций и примеров для более ясного понимания, очевидно, что специалист в данной области может осуществить некоторые изменения и модификации в свете положений данного изобретения, не выходящие за рамки объема изобретения и приложенных пунктов.

Настоящее изобретение относится к диарильным соединениям с мостиковой связью общей формулы Ia или их фармацевтически приемлемым солям

где Х - S(O)_m;

Y означает О;

Z¹ и Z² независимо выбраны из группы, включающей: О, (CR′R′′)n и N(R′′);

Ar¹ и Ar² независимо означают нафтил или фенил, необязательно замещенные алкилом или галогеном;

Ar³ - фенил, замещенный трифторметилом;

R¹ - водород;

R^a и R^b - водород;

каждый R′ и R′′ - водород;

m - целое число от 0 до 2 и n - целое число от 1 до 2. Соединения настоящего изобретения могут быть использованы для лечения нарушений обмена веществ. Описаны также фармацевтическая композиция и способ повышения уровня холестерина HDL. 3 н. и 30 з.п. ф-лы, 2 ил., 9 табл.

1. Соединение, имеющее формулу (la):

или его фармацевтически приемлемая соль, где Х выбран из группы, включающей S(O)_m;

Y означает О;

Z¹ и Z² независимо выбраны из группы, включающей О, (CR'R′′)_n и N(R′′);

Ar¹ и Ar² независимо означают нафтил или фенил, необязательно замещенные алкилом или галогеном;

Ar³ означает фенил, замещенный трифторметилом;

R¹ представляет собой водород;

R^a и R^b представляет собой водород;

каждый R' и R′′ представляет собой водород;

нижний индекс m означает целое число от 0 до 2 и нижний индекс n означает целое число от 1 до 2.

где R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген и (С₁-С₄)алкил;

необязательно, любые две смежные R группы, выбранные из группы, включающей R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹, могут вместе с атомами углерода, к которым указанные группы присоединены, образовывать конденсированное бензольное или циклоалкановое кольцо.

где R¹' R²', R³', R⁴' и R⁵' независимо выбраны из группы, включающей водород и трифторметил, причем по меньшей мере один из R¹', R²', R³', R⁴' и R⁵' представляет трифторметил.

-Z¹-Z² - выбран из группы, включающей -O-СН₂-, -O-(СН₂)₂-, -СН₂-O-, -NH-CH₂- и -CH₂-NH-;

Ar³ выбран из группы, включающей 2-трифторметилфенил, 3-трифторметилфенил и 4-трифторметилфенил;

R², R³, R⁴, R⁶ и R⁷ независимо выбраны из группы, включающей водород, хлор, метил, этил, н-пропил и изопропил;

необязательно, R² и R³, вместе с атомами углерода, к которым указанные группы присоединены, образуют конденсированное бензольное или циклогексановое кольцо;

необязательно, R⁶ и R⁷, вместе с атомами углерода, к которым указанные группы присоединены, образуют конденсированный бензольный цикл;

каждый из R⁵, R⁸ и R⁹ означает водород;

Приоритет по пунктам и признакам: