СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИСХОДА СУБКЛИНИЧЕСКОГО МАСТИТА У ЛАКТИРУЮЩИХ КОРОВ Российский патент 2016 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к области ветеринарной медицины, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть использовано для прогнозирования перехода острого течения субклинического мастита лактирующих коров в клинически выраженное, наступления самовыздоровления или перехода его в хроническое течение.

Актуальность предлагаемого способа определяется высокой частотой заболеваемости лактирующих коров субклиническим маститом, которая в последнее время имеет тенденцию к росту и составляет по данным различных авторов от 20 до 80% [1, 2].

Основными факторами, способствующими возникновению и развитию мастита, являются техническое несовершенство доильных установок, нарушение технологии и правил машинного доения коров. Вначале возникает раздражение, которое при многократном повторении переходит в скрытое асептическое воспаление. Снижается общая и локальная резистентность, создаются условия для проникновения и размножения в тканях молочной железы различной условно-патогенной и патогенной микрофлоры, обусловливающей воспаление различных форм от субклинической, протекающей самостоятельно на протяжении одной, двух лактаций и приводящей долю к атрофии, или трансформирующейся в клинически выраженный (серозный, катаральный, гнойно-катаральный и др.) мастит.

Для лечения мастита в основном применяются препараты, содержащие антибиотики и другие антимикробные средства, обладающие отрицательным действием на организм животных и качественный состав молока.

На сегодняшний день не существует единого мнения по поводу сроков лечения субклинического мастита. Одни авторы [3, 4] предлагают проводить лечение сразу после его диагностики, другие [5, 6] - во время запуска, третьи [7] - только после двукратных цитологических исследований и положительных результатов бактериологических исследований. В то же время известно, что при отсутствии лечения субклинического мастита, у больных животных падает молочная продуктивность на 10÷15%, ухудшается качество и питательная ценность молока, которое становится небезопасным при употреблении его в пищу для людей и молодняка сельскохозяйственных животных, так как в нем содержатся патогенные микроорганизмы и их токсины, не разрушающиеся даже при термической обработке [8; 9; 10; 11]. Вместе с тем даже фронтальная обработка всех больных животных не дает ожидаемого эффекта вследствие низкой терапевтической эффективности антибиотиков из-за образования лекарственно устойчивых штаммов микроорганизмов, вызывающих развитие воспалительного процесса [2; 11].

Из уровня техники не известен какой-либо способ прогнозирования исхода субклинического мастита у лактирующих коров.

Изобретение решает задачу разработки такого способа прогнозирования исхода субклинического мастита у лактирующих коров при отсутствии терапевтического вмешательства, который позволил бы в случае необходимости своевременно начать лечение.

Для решения поставленной задачи предложен способ прогнозирования исхода субклинического мастита у лактирующих коров, включающий двукратное выявление уровня бактериальной обсемененности патологического секрета молочной железы с интервалом 7÷40 дней, причем при возрастании бактериальной обсемененности в 10 и более раз прогнозируют переход скрытого воспаления в клинически выраженное, при снижении в 10 и более раз - самовыздоровление, при сохранении первоначального уровня обсемененности - хроническое течение воспалительного процесса.

Способ осуществляется следующим образом.

1. Исследуемый материал (секрет вымени) забирают в стерильные пробирки и засевают на чашки с кровяным агаром, мясо-пептонный агар (МПА), пробирки с мясо-пептонным бульоном (МПБ).

2. Пробирки инкубируют в термостате при температуре 37°C в течение 24÷48 часов.

3. С МПБ делают рассев на среды: эндо, молочно-солевой стафилококковый агар, энтерококковый агар.

4. Изучают морфологию культур микроорганизмов при окраске их по Грамму.

5. Высевают чистую культуру микроорганизмов на скошенный агар и идентифицируют до вида с использованием сред Гиса для определения биохимических свойств микроорганизмов, при идентификации кокков дополнительно используют Стреп-тест A, В, С, G и Стаф-тест «Научно-производственного объединения АКВАПАСТ».

Проверка способа прогнозирования исхода субклинического мастита у лактирующих коров без терапевтического вмешательства была проведена на 48 больных субклиническим маститом коровах, находящихся на 2÷3 месяце лактации. У всех включенных в опыт животных с интервалом 3÷4 дня проводили обследование молочной железы (клинически и с диагностическим реактивом). По результатам этих исследований животные были разделены на три группы: 1) заболевшие клинически выраженным маститом, 2) животные, у которых наступило самовыздоровление и третья группа - животные с хроническим течением воспалительного процесса. От 6-ти животных каждой группы получен биологический материал (кровь и секрет молочной железы) для лабораторного анализа до и в конце опыта.

Результаты проведенных исследований биохимического и иммунологического исследования крови свидетельствуют о том, что переход субклинического мастита в клинически выраженное воспаление сопровождается дальнейшим угнетением защитных реакций организма, что проявлялось снижением содержания количества эритроцитов на 12,9% (с 5,75 до 5,01*10¹²/л), лейкоцитов - на 8,9% (с 8,8 до 8,1*10⁷ л), моноцитов - на 34,2%, (с 4,1 до 2,59%), сегментоядерных нейтрофилов - на 25,3% (с 31,0 до 24,6%), бактерицидной активности сыворотки крови - на 11,7% (с 80,36 до 70,96%), фагоцитарной активности лейкоцитов - на 34,6% (с 72,3 до 47,3%), фагоцитарного индекса - на 18,7% (с 2,83 до 2,30 м.к./фагоцит), фагоцитарного числа - на 36,1% (с 5,82 до 3,74 м.к./акт.фагоцит) и повышением уровня циркулирующих иммунных комплексов - на 37,7% (с 0,377 до 0,519 г/л). Усиливаются также явления эндогенной интоксикации и нарушения в функционировании системы ПОЛ-АОЗ, проявляющиеся повышением содержания молекул средней массы на 65,9%, (с 0,370 до 0,614 у.е.), малонового диальдегида на 33,6% (с 1,34 до 1,79 мкМ/л), при снижении активности каталазы на 9,9% (с 21,09 до 19,01 мкМ/л. мин), ГПО на 15,2% (с 12,14 до 10,29 мкМ/л. мин).

При сохранении воспалительной реакции в молочной железе на исходном уровне и длительной антигенной нагрузке у животных отмечено снижение количества лейкоцитов на 11,2% (с 8,9 до 7,9*10⁹/л), возрастание содержания палочкоядерных нейтрофилов на 10,7% (с 2,8 до 3,1%), моноцитов на 7,3% (с 4,1 до 3,8%), свидетельствующее о высокой напряженности клеточного звена неспецифической резистентности организма на фоне понижения резервных возможностей гуморального звена, о чем свидетельствует снижение показателей лизоцимной активности сыворотки крови на 15,6% (с 0,525 до 0,443 мг/%). Отмечается и усиление эндогенной интоксикации организма, проявляющееся возрастанием содержания малонового диальдегида - на 12,7% (с 1,33 до 1,51 мкМ/л) и молекул средней массы - на 10,8%, (с 0,370 до 0,410 у.е.), при снижении активности каталазы - на 8,1% (с 21,09 до 19,39 мкМ/л.·мин).

Процесс самовыздоровления животных сопровождался нормализацией ряда показателей обмена веществ: снижением содержания лейкоцитов на 9,4% (с 8,9 до 8,06%), в том числе эозинофилов - на 28,7% (с 9,4 до 7,3%), палочкоядерных нейтрофилов - на 64,3% (с 2,8 до 1,8%), моноцитов - на 56,1% (с 4,1 до 2,3%) и γ-глобулиновой фракции белка - на 27,6% (с 21,56 до 21,50%), при одновременном повышении содержания сегментоядерных нейтрофилов на 18,7% (с 31,0 до 36,79%), свидетельствующем о снижении воспалительной реакции.

Кроме того, при самовыздоровлении коров, больных субклиническим маститом, отмечается рост бактерицидной активности сыворотки крови на 9,9% (с 80,36 до 88,4%), фагоцитарного индекса - на 27,6% (с 2,83 до 3,61 м.к./фагоцит), и снижение лизоцимной активности сыворотки крови на 45,7% (с 0,525 до 0,2852 мг/%), содержания циркулирующих иммунных комплексов на 20,9% (с 0,377 до 0,298 г/л), что отражает снижение антигенной нагрузки на организм. Одновременно отмечена нормализация пероксидации липидов, о чем свидетельствует снижение содержания в крови малонового диальдегида на 9,7% (с 1,34 до 1,21 мкМ/л), оксида азота 27,6% (с 86,05 до 62,6 мкМ/л), повышение активности каталазы на 18,3% (с 21,09 до 24,94 мкМ/л·мин) и ГПО на 26,8% (с 12,14 до 15,39 мкМ/л·мин).

Из секрета молочной железы больных субклиническим маститом коров выделены в основном патогенные микроорганизмы (Staph, aureus, Str. agalactiae), условно-патогенная микрофлора (Ent. faecium) выделена лишь в ассоциации с патогенными возбудителями.

При хроническом течении воспалительного процесса в молочной железе при сохранении этиологической роли патогенных возбудителей уровень бактериальной обсемененности секрета вымени достоверно не изменился.

При переходе скрытого воспаления в клинически выраженное катаральное из секрета молочной железы выделены те же патогенные микроорганизмы (Staph, aureus, Str. agalactiae), но бактериальная обсемененность при этом возросла в 10,4 раза.

У животных, у которых отмечено самовыздоровление, в 80% случаев выделена сапрофитная микрофлора (Ent. faecalis, Ent. aerogenes) и в 20% - патогенный агалактийный стрептококк.

Полученные данные свидетельствуют о том, что в этиологии мастита как субклинического, так и клинически выраженного, основная роль принадлежит патогенным микроорганизмам (Staph, aureus, Str. agalactiae).

При остром субклиническом мастите общая бактериальная обсемененность секрета пораженной четверти молочной железы составляла от 3,36×10² до 6,50×10⁴ КОЕ/мл (в среднем 4,15×10³ КОЕ/мл), при переходе скрытого воспаления в клинически выраженное контаминация секрета вымени составила 2,8×10⁴÷6,24×10⁵ КОЕ/мл (1,74×10⁵ КОЕ/мл) или возросла в 41,9 раза, при самовыздоровлении животных она снизилась до 0,36×10²÷7,85×10³ КОЕ/мл (в среднем 2,88×10² КОЕ/мл) или в 14,4 раза, у животных с хроническим течением воспаления уровень бактериальной обсемененности секрета вымени достоверно не изменился и находился на уровне 1,71×10³÷6,35×10⁵ (в среднем 1,28×10⁴).

Литература

1. Париков В.А., Слободяник В.И., Климов Н.Т. и др. Этиологические и патогенетические аспекты мастита у коров, методы и средства его профилактики и терапии // Эколого-адаптационная стратегия здоровья и продуктивности животных в современных условиях: Монография-Воронеж. 2001. - С. 105-113.

2. Шабунин С.В., Климов Н.Т., Нежданов А.Г., Ефанова Л.И. Актуальные проблемы терапии и профилактики мастита у коров // Ветеринария. - 2011. - №12. - С. 3-6.

3. Олейник, 2006, Олейник А. Мастит, мастит, мастит / А. Олейник // Молочное и мясное скотоводство. - 2006. - №7. - С. 26-29.

4. Шакиров О.Ф. Новая противомаститная программа от компании «Байер» / О. Шакиров // Молочное и мясное скотоводство. - 2007. - №2. - С 39-42.

5. В.М. Новиков 1983, Новиков В.М. Профилактика мастита у коров / В.М. Новиков // Ветеринария. - 1983. - №5. - С. 51-52.

6. Филпот В.Н., Никерсон, Ш.С. Как победить мастит. - GEA Farm Technologies. - 2012. - 239 с.

7. Krukowski H. Intramammary infections caused by environmental pathogens in cows / Н. Krukowski // Med. Weter. - 2005. - Vol. 62, №2. - P. 189-192.

8. Данкверт А. Пути улучшения качества молока / А. Данкверт, Л. Зернаева // Молочное и мясное скотоводство. - 2003. - №8. - С. 2-7.

9. Демидова Л.Д. Влияние лечения коров, больных эндометритом, на санитарное качество молока / Л.Д. Демидова // Диагностика, терапия и профилактика акушерско-гинекологической патологии у животных: Сб. науч. работ МВА. - М., 1994. - С. 117-120.

10. Ивашура А.И. Система мероприятий по борьбе с маститами коров / А.И. Ивашура. - М.: Росагропромиздат, 1991. - 240 с.

11. Париков В.А. Разработка и совершенствование методов диагностики, терапии и профилактики мастита у коров: Дис. в форме научного доклада…д-ра вет. наук / В.А. Париков; Воронеж, 1990. - 52 с.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для прогнозирования перехода острого течения субклинического мастита лактирующих коров в клинически выраженное, наступление самовыздоровления или перехода его в хроническое течение. Двукратно выявляют уровень бактериальной обсемененности патологического секрета молочной железы с интервалом 7÷10 дней. При возрастании бактериальной обсемененности в 10 и более раз прогнозируют переход скрытого воспаления в клинически выраженное. При снижении в 10 и более раз - самовыздоровление. При сохранении первоначального уровня обсемененности - хроническое течение воспалительного процесса. Заявленный способ позволяет быстро и точно спрогнозировать исход субклинического мастита. 1 пр.

Способ прогнозирования исхода субклинического мастита у лактирующих коров, включающий двукратное выявление уровня бактериальной обсемененности патологического секрета молочной железы с интервалом 7÷10 дней, причем при возрастании бактериальной обсемененности в 10 и более раз прогнозируют переход скрытого воспаления в клинически выраженное, при снижении в 10 и более раз - самовыздоровление, при сохранении первоначального уровня обсемененности - хроническое течение воспалительного процесса.