ЦИКЛИЧЕСКИЕ БОРОНОВЫЕ КИСЛОТНО-ЭФИРНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ТЕРАПИИ Российский патент 2016 года по МПК C07F5/02 A61K31/69 A61P31/04 

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Данная заявка претендует на приоритет временных заявок США №№61/372296, поданной 10 августа 2010 г., и 61/488655, поданной 20 мая 2011 г., которые обе целиком включены сюда в качестве ссылок.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к антимикробным соединениям, композициям, их использованию и изготовлению в качестве терапевтических агентов. В частности, настоящее изобретение относится к циклическим бороновым кислотно-эфирным производным.

ИЗВЕСТНЫЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Антибиотики были эффективными средствами лечения инфекционных болезней на протяжении последнего полувека. Со времени разработки антибиотической терапии до конца 1980-х годов в развитых странах был достигнут почти полный контроль над бактериальными инфекциями. Однако в результате чрезмерного использования антибиотиков получили распространение многочисленные механизмы резистентности, которые угрожают клинической применимости антибактериальной терапии. Увеличение количества резистентных к антибиотикам штаммов особенно часто наблюдается в крупных больницах и центрах, предоставляющих услуги по уходу. Последствия увеличения числа резистентных штаммов включают более высокую заболеваемость и смертность, большую продолжительность госпитализации пациентов и увеличение затрат на лечение.

Различные бактерии начали вырабатывать ферменты, дезактивирующие β-лактам, то есть, β-лактамазы, которые препятствуют эффективному действию различных β-лактамов. β-Лактамазы могут быть разделены на 4 класса на основании их аминокислотных последовательностей, а именно - классы A, B, C и D по Ambler. Ферменты классов A, C и D включают сериновые β-лактамазы (содержащие серии в активном центре), а ферменты класса B, встречающиеся реже, являются Zn-зависимыми. Эти ферменты катализируют химическое разложение β-лактамных антибиотиков, делая их неактивными. Некоторые β-лактамазы могут переноситься внутри и между различными бактериальными штаммами и видами. Быстрое распространение бактериальной резистентности и появление полирезистентных штаммов сильно ограничивает доступные варианты лечения β-лактамами.

Рост количества бактериальных штаммов, экспрессирующих β-лактамазы класса D, таких как Acinetobacter baumannii, превратился в растущую угрозу множественной резистентности к лекарственным препаратам. Штаммы A. baumannii экспрессируют β-лактамазы классов A, C и D. β-Лактамазы класса D, такие как семейства OXA, особенно эффективно разрушают β-лактамные антибиотики типа карбапенема, например, имипенем - активный карбапенемный компонент препарата Primaxin® фирмы Merck (Montefour, К. et al. Crit. Care Nurse 2008, 28, 15; Perez, F. et al. Expert Rev. Anti Infect. Ther. 2008, 6, 269; Bou, G., Martinez-Beltran, J. Antimicrob. Agents Chemother. 2000, 40, 428. 2006, 50, 2280; Bou, G. et al., J. Antimicrob. Agents Chemother. 2000, 44, 1556). Это создает требующую принятия неотложных мер угрозу эффективному использованию лекарственных средств этой категории для лечения и профилактики бактериальных инфекций. Действительно, число зарегистрированных сериновых β-лактамаз резко возросло с менее десяти в 1970-е годы до более чем 300 вариантов. Эти проблемы стимулировали разработку пяти "поколений" цефалоспоринов. Будучи впервые выпущены в клиническую практику, цефалоспорины расширенного спектра действия не поддавались гидролизу наиболее распространенными β-лактамазами класса A - TEM-1 и SHV-1. Однако развитие резистентных штаммов по механизму эволюции в результате единичных аминокислотных замещений в TEM-1 и SHV-1 привело к возникновению фенотипа β-лактамаз расширенного спектра действия (ESBL).

В последнее время появились новые β-лактамазы, которые гидролизуют антимикробные средства класса карбапенема, включая имипенем, биапенем, дорипенем, меропенем и эртапенем, а также другие β-лактамные антибиотики. Такие карбапенемазы принадлежат к молекулярным классам A, B и D. Карбапенемазы класса A KPC-типа (карбапенемазы Klebsiella pneumoniae) преимущественно встречаются у Klebsiella pneumoniae, но были также описаны у других Enterobacteriaceae - Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter baumannii. KPC-карбапенемаза была впервые описана в 1996 г. в Северной Каролине, но с тех пор получила широкое распространение в США. Она создала особенно много проблем в регионе Нью-Йорка, где было несколько сообщений о распространении в крупных больницах и о заболеваемости пациентов. Эти ферменты были также в последнее время обнаружены во Франции, Греции, Швеции, Великобритании, и недавно сообщалось о вспышке в Германии. Лечение резистентных штаммов карбапенемами может быть ассоциировано с плохими результатами.

Другой механизм медиируемой β-лактамазой резистентности к карбапенемам связан с комбинацией механизмов проницаемости или оттока в сочетании со сверхпродуцированием бета-лактамаз. Одним из примеров является потеря порина в сочетании со сверхпродуцированием бета-лактамазы ampC, что приводит к резистентности по отношению к имипенему у Pseudomonas aeruginosa. Сверхэкспрессия выкачивающего насоса в сочетании со сверхпродуцированием β-лактамазы ampC может также приводить к резистентности по отношению к карбапенему, такому как меропенем.

Поскольку существует три основных молекулярных класса сериновых β-лактамаз, и каждый из этих классов включает значительное количество вариантов β-лактамаз, ингибирование одной или небольшого числа β-лактамаз вряд ли будет иметь терапевтическую ценность. Наследственные ингибиторы β-лактамаз преимущественно неэффективны по меньшей мере против карбапенемаз класса A, против хромосомальных и плазмидно-медиируемых цефалоспориназ класса C и против многих оксациллиназ класса D. Таким образом, существует потребность в усовершенствованных ингибиторах β-лактамаз.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к антимикробным агентам и их потенцирующим средствам. Некоторые варианты исполнения включают соединения, композиции, фармацевтические композиции, их применение и получение. В частности, некоторые варианты исполнения относятся к циклическим бороновым кислотно-эфирным производным.

Некоторые варианты исполнения включают соединения, имеющие структуру формулы I:

или их фармацевтически приемлемую соль, где:

Y представляет собой содержащую 1-4 атома алкиленовую или содержащую 2-4 атома алкениленовую связующую группу, необязательно замещенную одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из Cl, F, CN, CF₃, -R⁹, -OR⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰ и -C(=O)OR⁹, где указанная алкиленовая или алкениленовая связующая группа необязательно сконденсирована с необязательно замещенным арилом, необязательно замещенным гетероарилом, необязательно замещенным карбоциклическим радикалом, или необязательно замещенным гетероциклическим радикалом;

R¹ выбирают из группы, состоящей из -C_1-9-алкила, -C_2-9-алкенила, -C_2-9-алкинила, -NR⁹R¹⁰, -C_1-9-алкил-R¹¹, -C_2-9-алкенил-R¹¹, -C_2-9-алкинил-R¹¹, -карбоциклический радикал-R¹¹, -CH(OH)C_1-9-алкил-R⁹, -CH(OH)C_2-9-алкенил-R⁹, -CH(OH)C_2-9-алкинил-R⁹, -CH(OH)-карбоциклический радикал-R⁹, -C(=O)R⁹, -С(=O)C_1-9-алкил-R⁹, -С(=O)C_2-9-алкенил-R⁹, -C(=O)C_2-9-алкинил-R⁹, -C(=O)C_2-9-карбоциклический радикал-R⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)OR⁹, -N(R⁹)C(=O)C(=NR¹⁰)R⁹, -N(R⁹)C(=O)C(=CR⁹R¹⁰)R⁹, -N(R⁹)C(=O)C_1-4-алкил-N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=NR¹⁰)R⁹, -C(=NR¹⁰)NR⁹R¹⁰, -N=C(R⁹)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)SO₂R⁹, -N(R⁹)SO₂NR⁹R¹⁰, -N=CHR⁹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;

R⁶ выбирают из группы, состоящей из H, -C_1-9-алкила, C_2-9-алкенила, -C_2-9-алкинила, карбоциклического радикала, -C_1-9-алкил-R¹¹, -C_2-9-алкенил-R¹¹, -C_2-9-алкинил-R¹¹, карбоциклический радикал-R¹¹, -C(=O)OR⁹, -C_1-9-алкил-CO₂R⁹, -C_2-9-алкенил-CO₂R⁹, -C_2-9-алкинил-CO₂R⁹ и -карбоциклический радикал-CO₂R⁹ или, альтернативно:

(i) R⁶ и R⁷ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал,

(ii) R⁶ отсутствует, если атом углерода, к которому он присоединен, является кольцевым атомом арильного или гетероарильного кольца;

каждый R⁷ независимо выбирают из группы, состоящей из Н, галоида, -C_1-9-алкила, -C_2-9-алкенила, -C_2-9-алкинила, -NR⁹R¹⁰, -OR⁹, -C_1-9-алкил-CO₂R⁹, -C_2-9-алкенил-CO₂R⁹, -C_2-9-алкинил-CO₂R⁹ и -карбоциклический радикал-CO₂R⁹, или, независимо:

(i) R⁶ и R⁷ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал,

(ii) R⁷ и R⁸ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал,

(iii) R⁷ и атом углерода в Y вместе с промежуточными атомами образуют замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал,

(iv) выполняется каждое из следующих условий:

(a) Y представляет собой содержащую 3-4 атома алкиленовую или содержащую 3-4 атома алкениленовую связующую группу,

(b) R⁶ отсутствует,

(c) R⁷ и атом углерода в Y вместе с промежуточными атомами образуют замещенный или незамещенный арил или замещенный или незамещенный гетероарил, и

(d) все R⁸, присоединенные к кольцевому атому, являющемуся частью замещенного или незамещенного арила или замещенного или незамещенного гетероарила, образованного R⁷ и Y, отсутствуют;

каждый R⁸ независимо выбирают из группы, состоящей из Н, галоида, -C_1-9-алкила, -C_2-9-алкенила, -C_2-9-алкинила, -NR⁹R¹⁰, -OR⁹, -C_1-9-алкил-CO₂R⁹, -C_2-9-

-C_2-9-алкенил-CO₂R⁹,-C_2-9-алкинил-CO₂R⁹, -карбоциклический радикал-CO₂R⁹, или, независимо:

(i) R⁷ и R⁸ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал,

(ii) геминальные R⁷ и R⁸ вместе образуют -C_2-9-алкениленил-CO₂R⁹, или

(iii) все R⁸, присоединенные к кольцевому атому, являющемуся частью замещенного или незамещенного арила, отсутствуют;

каждый R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из H, -C_1-9-алкила, -C_2-9-алкенила, -C_2-9-алкинила, карбоциклического радикала, -C_1-9-алкил-R¹¹, -C_2-9-алкенил-R¹¹, -C_2-9-алкинил-R¹¹, -карбоциклический радикал-R¹¹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;

каждый R¹⁰ независимо выбирают из группы, состоящей из H, -C_1-9-алкила, -OR⁹, -CH(=NH), -C(=O)OR⁹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;

каждый R¹¹ независимо выбирают из группы, состоящей из замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;

X выбирают из группы, состоящей из H, -CO₂R¹² и изостеров карбоновых кислот;

R¹² выбирают из группы, состоящей из H, C_1-9-алкила, -(CH₂)_0-3-R¹¹, -С(R¹³)₂ОС(O)C_1-9-алкила, -C(R¹³)₂OC(O)R¹¹, -C(R¹³)₂ОС(O)OC_1-9-алкила и -C(R¹³)₂OC(O)OR¹¹;

каждый R¹³ независимо выбирают из группы, состоящей из H и C_1-4-алкила; и

m независимо обозначает нуль или целое число, выбранное из 1-2,

где каждый C_1-9-алкил, C_2-9-алкенил и C_2-9-алкинил независимо является необязательно замещенным.

В некоторых вариантах исполнения, соединение формулы I имеет структуру формулы II:

или ее фармацевтически приемлемой соли, где:

связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой связь, выбранную из группы, состоящей из простой связи и двойной связи, при условии, что пунктирная и сплошная линии могут быть двойной связью только в случае, когда n равен 1;

R² и R⁴ представляют собой водород, а также R² и R⁴ выбирают, например, из группы, состоящей из Cl, F, CN, CF₃, -R⁹, -OR⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰ и -C(=O)OR⁹; или, альтернативно, R² и R⁴ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал;

R³ и R⁵ представляют собой водород, а также R³ и R⁵ выбирают например, из группы, состоящей из Cl, F, CN, CF₃, -R⁹, -OR⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰ и -C(=O)OR⁹, при условии, что если связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой двойную связь, то R³ и R⁵ отсутствуют; и

n независимо обозначает нуль или целое число, выбранное из 1-2.

В некоторых вариантах исполнения, соединение формулы I имеет структуру формулы IIIa или IIIb:

или ее фармацевтически приемлемой соли, где:

связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой связь, выбранную из группы, состоящей из простой связи и двойной связи;

каждый R² и R⁴ представляют собой водород; а также R² и R⁴ выбирают, например, из группы, состоящей из Cl, F, CN, CF₃, -R⁹, -OR⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰ и -C(=O)OR⁹; или, альтернативно, R² и R⁴ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал;

каждый R³ и R⁵ представляют собой водород, а также R³ и R⁵ выбирают, например, из группы, состоящей из Cl, F, CN, CF₃, -R⁹, -OR⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰ и -C(=O)OR⁹, при условии, что если связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой двойную связь, то R³ и R⁵ отсутствуют.

В некоторых вариантах исполнения, соединение формулы I имеет структуру формулы IVa, IVb, или IVc:

или ее фармацевтически приемлемой соли, где:

связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой связь, выбранную из группы, состоящей из простой связи и двойной связи;

каждый R² и каждый R⁴ представляют собой водород; а также R² и R⁴ выбирают, например, из группы, состоящей из Cl, F, CN, CF₃, -R⁹, -OR⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰ и -C(=O)OR⁹; или, альтернативно, R² и R⁴ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал;

каждый R³ и каждый R⁵ представляют собой водород, а также R³ и R⁵ выбирают, например, из группы, состоящей из Cl, F, CN, CF₃, -R⁹, -OR⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰ и -C(=O)OR⁹, при условии, что если связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой двойную связь, то R³ и R⁵, присоединенные к атомам углерода, соединенным этой связью, отсутствуют.

Некоторые варианты исполнения включают фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество любого из описанных выше соединений и фармацевтически приемлемый эксципиент.

Некоторые варианты исполнения включают любые из описанных выше соединений или композиций для использования в повышении чувствительности к бактериальной инфекции β-лактамного антибактериального агента, при лечении или профилактике бактериальной инфекции.

Некоторые варианты исполнения предусматривают способы лечения или профилактики бактериальной инфекции, включающие введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества любого из описанных выше соединений или композиций.

Некоторые варианты исполнения включают использование любого из описанных выше соединений или композиций при изготовлении лекарственного средства для лечения или профилактики бактериальной инфекции.

Некоторые варианты исполнения дополнительно включают введение β-лактамного антибактериального агента и дополнительного лекарственного средства, в отдельной композиции или в той же самой композиции.

В некоторых вариантах исполнения, дополнительное лекарственное средство содержит антибактериальный агент, такой как β-лактам.

В некоторых вариантах исполнения, β-лактам включает амоксициллин, ампициллин (пивампициллин, гетациллин, бакампициллин, метампициллин, талампициллин), эпициллин, карбенициллин (кариндациллин), тикарциллин, темоциллин, азлоциллин, пиперациллин, мезлоциллин, мециллинам (пивмециллинам), сулбенициллин, бензилпенициллин (G), клометоциллин, бензатин бензилпенициллин, прокаин бензилпенициллин, азидоциллин, пенамециллин, феноксиметилпенициллин (V), пропициллин, бензатин феноксиметилпенициллин, фенетициллин, клоксациллин (диклоксациллин, флуклоксациллин), оксациллин, метициллин, нафциллин, фаропенем, биапенем, дорипенем, эртапенем, имипенем, меропенем, панипенем, томопенем, разупенем, цефазолин, цефацетрил, цефадроксил, цефалексин, цефалоглицин, цефалониум, цефалоридин, цефалотин, цефапирин, цефатризин, цефазедон, цефазафлур, цефрадин, цефроксадин, цефтезол, цефаклор, цефамандол, цефминокс, цефоницид, цефоранид, цефотиам, цефпрозил, цефбуперазон, цефуроксим, цефузонам, цефокситин, цефотетан, цефметазол, лоракарбеф, цефиксим, цефтазидим, цефтриаксон, цефкапен, цефдалоксим, цефдинир, цефдиторен, цефетамет, цефменоксим, цефодизим, цефоперазон, цефотаксим, цефпимизол, цефпирамид, цефподаксим, цефсолудин, цефтерам, цефтибутен, цефтиолен, цефтизоксим, фломоксеф, латамоксеф, цефепим, цефозопран, цефпиром, цефквином, цефтобипрол, цефтаролин, CXA-101, RWJ-54428, MC-04,546, ME1036, BAL30072, SYN2416, цефтиофур, цефквином, цефовецин, азтреонам, тигемонам, карумонам, RWJ-442831, RWJ-333441 или RWJ-333442.

В некоторых вариантах исполнения, β-лактам включает цефтазидим, биапенем, дорипенем, эртапенем, имипенем, меропенем или панипенем.

В некоторых вариантах исполнения, β-лактам выбирают из азтреонама, тигемонама, BAL30072, SYN2416 или карумонама.

В некоторых вариантах исполнения, при использовании в качестве β-лактама тигемонама, композиция является пригодной для перорального введения, X обозначает -CO₂R¹² и R¹² выбирают из группы, состоящей из C_1-9-алкила, -(CH₂)_0-3-R¹¹, -C(R¹³)₂OC(O)C_1-9-алкила, -C(R¹³)₂OC(O)R¹¹, C(R¹³)₂OC(O)OC_1-9-алкила и -C(R¹³)₂OC(O)OR¹¹.

В некоторых вариантах исполнения, инфекция, лечение или профилактика которой проводятся, включает бактерии, такие как Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas acidovorans, Pseudomonas alcaligenes, Pseudomonas putida, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Aeromonas hydrophilia, Escherichia coli, Citrobacter freundii, Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia marcescens, Francisella tularensis, Morganella morganii, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Providencia stuartii, Acinetobacter baumannii, Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia intermedia, Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus haemolyticus, Haemophilus parahaemolyticus, Haemophilus ducreyi, Pasteurella multocida, Pasteurella haemolytica, Branhamella catarrhalis, Helicobacter pylori, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Borrelia burgdorferi, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Legionella pneumophila, Listeria monocytogenes, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Kingella, Moraxella, Gardnerella vaginalis, Bacteroides fragilis, Bacteroides distasonis, гомологичная группа Bacteroides 3452A, Bacteroides vulgatus, Bacteroides ovalus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides eggerthii, Bacteroides splanchnicus, Clostridium difficile, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium avium, Mycobacterium intracellulare, Mycobacterium leprae, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium ulcerans, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophytics, Staphylococcus intermedins, Staphylococcus hyicus subsp. hyicus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis или Staphylococcus saccharolyticus.

В некоторых вариантах исполнения, инфекция, лечение или профилактика которой проводятся, включает бактерии, такие как Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Stenotrophomonas maltophilia, Escherichia coli, Citrobacter freundii, Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia marcescens, Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Yersinia entewcolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia intermedia, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus haemolyticus, Haemophilus parahaemolyticus, Helicobacter pylori, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Legionella pneumophila, Listeria monocytogenes, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Moraxella, Bacteroides fragilis, Bacteroides vulgatus, Bacteroides ovalus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides eggerthii или Bacteroides splanchnicus.

Некоторые варианты исполнения включают стерильный контейнер, содержащий любое из описанных выше соединений в твердой форме и антибактериальный агент в твердой форме. В некоторых вариантах исполнения, антимикробный агент представляет собой одно из дополнительных лекарственных средств, описанных выше. Некоторые варианты исполнения включают способ приготовления фармацевтической композиции для введения, включающий восстановление содержимого стерильного контейнера с использованием фармацевтически приемлемого разбавителя. В некоторых вариантах исполнения, восстановленный раствор вводят пациенту внутривенно.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг.1 представляет собой график, изображающий профиль концентрации в плазме циклического боронового кислотно-эфирного производного как функции времени после введения крысам Sprague Dawley.

Фиг.2 представляет собой график, изображающий профиль концентрации в плазме пролекарства циклического боронового кислотно-эфирного производного по Фиг.1 как функции времени после введения крысам Sprague Dawley.

Фиг.3 представляет собой рентгеновскую порошковую дифрактограмму кристаллической формы циклического боронового кислотно-эфирного производного.

Фиг.4 представляет собой график, изображающий наложение результатов дифференциальной сканирующей калориметрии и термогравиметрии для кристаллической формы по Фиг.3.

ДЕТАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ

Настоящее изобретение относится к антимикробным агентам и их потенцирующим средствам. Некоторые варианты исполнения включают соединения, композиции, фармацевтические композиции, их применение, включая способы получения и способы лечения. В частности, настоящее изобретение относится к циклическим бороновым кислотно-эфирным производным.

В некоторых вариантах исполнения, циклические бороновые кислотно-эфирные производные имеют структуры формул I, II, IIIa, IIIb, IVa, IVb или IVc, как описано выше.

Некоторые варианты исполнения соединения формулы II имеют определенную 3,6-цис-стереохимию, изображенную на формуле IIa:

или ее фармацевтически приемлемые соли.

Некоторые варианты исполнения соединения формулы II имеют определенную 3,6-транс-стереохимию, изображенную на формуле IIb:

или ее фармацевтически приемлемые соли.

В одном варианте исполнения соединения формулы II:

R¹ выбирают из группы, состоящей из -C_1-9-алкила, -C_2-9-алкенила, -C_2-9-алкинила, -NR⁹R¹⁰, -C_1-9-алкил-R¹¹, -C_2-9-алкенил-R¹¹, -C_2-9-алкинил-R¹¹, -CH(OH)C_1-9-алкил-R⁹, -CH(OH)C_2-9-алкенил-R⁹, -CH(OH)C_2-9-алкинил-R⁹, -C(=O)R⁹, -C(=O)C_1-9-алкил-R⁹, -С(=O)C_2-9-алкенил-R⁹, -С(=O)C_2-9-алкинил-R⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)OR⁹, -N(R⁹)C(=O)C(=NR¹⁰)R⁹, -N(R⁹)C(=O)C_1-4-алкил-N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=NR¹⁰)R⁹, -C(=NR¹⁰)NR⁹R¹⁰, -N=C(R⁹)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)SO₂R⁹, -N(R⁹)SO₂NR⁹R¹⁰, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;

R⁶ выбирают из группы, состоящей из H, -C_1-9-алкила, C_2-9-алкенила, -C_2-9-алкинила, -C_1-9-алкил-R¹¹, -C_2-9-алкенил-R¹¹, -C_2-9-алкинил-R¹¹, -C(=O)OR⁹ и -C₁₌₈-алкил-CO₂R⁹, -C_2-9-алкенил-CO₂R⁹ и -C_2-9-алкинил-CO₂R⁹ или, альтернативно, R⁶ и R⁷ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал;

каждый R⁷ независимо выбирают из группы, состоящей из H, -NR⁹R¹⁰, -OR⁹ и -C_1-9-алкил-CO₂R⁹, -C_2-9-алкенил-CO₂R₉ и -C_2-9-алкинил-CO₂R⁹ или, независимо, R⁶ и R⁷ или, независимо, R⁷ и R⁸ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал;

каждый R⁸ независимо выбирают из группы, состоящей из H, -NR⁹R¹⁰, -OR⁹ и -C_1-9-алкил-CO₂R⁹, -C_2-9-алкенил-CO₂R⁹ и -C_2-9-алкинил-CO₂R⁹ или, независимо, R⁷ и R⁸ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал;

каждый R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из H, -C_1-9-алкила, -C_2-9-алкенила, -C_2-9-алкинила, -C_1-9-алкил-R¹¹, -C_2-9-алкенил-R¹¹, -C_2-9-алкинил-R¹¹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного -(CH₂)_0-3-карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;

каждый R¹⁰ независимо выбирают из группы, состоящей из H, -C_1-9-алкила, -OR⁹, -CH(=NH), замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала; и

X выбирают из группы, состоящей из H, -CO₂H и изостеров карбоновой кислоты.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул II, IIa или IIb, n равен 1.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул II, IIa или IIb, n равен нулю.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул II, IIa или IIb, n равен 2.

Некоторые варианты исполнения соединений формул IIIa или IIIb имеют 3,7-цис-стереохимию, изображенную на формулах IIIc и IIId:

или их фармацевтически приемлемые соли.

Некоторые варианты исполнения соединений формулы IIIa или IIIb имеют 3,7-транс-стереохимию, изображенную на формулах IIIe и IIIf:

или их фармацевтически приемлемые соли.

Некоторые варианты исполнения соединений формул IVa, IVb или IVc меют 3,8-цис-стереохимию, изображенную на формулах IVd, IVe и IVf:

или их фармацевтически приемлемые соли.

Некоторые варианты исполнения соединений формул IVa, IVb или IVc имеют 3,8-транс-стереохимию, изображенную на формулах IVg, IVh и IVi:

или их фармацевтически приемлемые соли.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, каждый из R², R³, R⁴ и R⁵ обозначает водород.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, по меньшей мере один R² представляет собой замещенный или незамещенный арил.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, по меньшей мере один R⁴ представляет собой замещенный или незамещенный арил.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, по меньшей мере одни R² и R⁴ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют замещенный или незамещенный арил.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой простую связь. В других вариантах исполнения, связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой двойную связь.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R⁶ и все R⁷ и R⁸ обозначают водород.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -NHC(=O)C_1-9-алкил-R¹¹. В некоторых таких вариантах исполнения, R¹¹ представляет собой замещенный или незамещенный арил или замещенный или незамещенный гетероарил. В некоторых таких вариантах исполнения, R¹¹ представляет собой тиен-2-ил.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ обозначает -NHC(=O)C(=NOR⁹)R^9′, где R^9′ выбирают из группы, состоящей из C_1-9-алкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -NHC(=O)C_1-9-алкил-R¹¹. В некоторых таких вариантах исполнения, R¹¹ представляет собой замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -NHC(=O)R^9′, где R^9′ представляет собой замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, замещенный или незамещенный карбоциклический радикал или замещенный или незамещенный гетероциклический радикал.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -NR⁹R¹⁰.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -C_1-9-алкил-R¹¹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -CH(ОН)C_1-9-алкил-R⁹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -CH(OH)C_1-9-алкил-R⁹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -C(=O)NR⁹R¹⁰.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -N(R⁸)C(=O)NR⁹R¹⁰.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -N(R⁹)C(=O)OR⁹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -N(R⁹)C(=O)C_1-4-алкил-N(R⁹)C(=O)R⁹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -N(R⁹)C(=NR¹⁰)R⁹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -C(=NR¹⁰)NR⁹R¹⁰.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -N=C(R⁹)NR⁹R¹⁰.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -C(=O)C(=NR¹⁰)R⁹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -N(R⁹)SO₂R⁹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R¹ представляет собой -N(R⁹)SO₂NR⁹R¹⁰.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, X обозначает -CO₂H.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, X представляет собой изостер карбоновой кислоты. В некоторых таких вариантах исполнения, изостер карбоновой кислоты выбирают из группы, состоящей из -P(O)(OR⁹)₂, -P(O)(R⁹)(OR⁹), -P(O)(OR_12′)₂, -P(O)(R⁹)(OR1^2′), -CON(R⁹)OH, -SO₃H, -SO₂N(R⁹)OH и , где R^12′ выбирают из группы, состоящей из H, R¹¹, -C(R¹³)₂OC(O)C_1-9-алкила, -C(R¹³)₂OC(O)R¹, -C(R¹³)₂ОС(O)OC_1-9-алкила и -C(R¹³)₂OC(O)OR¹¹.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, m равен 1.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R⁶, R⁷ и R⁸ обозначают H.

В некоторых вариантах исполнения соединений формул I, II, IIa, IIIa, IIIb, IIIc, IVa, IVb, IVc, IVd, IVe, IVf, IVg, IVh и IVi, R⁷ обозначает H; R⁸ представляет собой -C_1-9-алкил-CO₂R⁹; и R⁹ обозначает H.

Некоторые варианты исполнения включают соединение, выбранное из группы, состоящей из:

и , или их фармацевтически приемлемые соли.

Некоторые варианты исполнения включают соединения, выбранные из группы, состоящей из:

, и , или их фармацевтически приемлемые соли.

Определения

Термины и заместители имеют свои обычные значения, за исключением случаев, когда указано иное, а их определения могут быть даны при первом использовании в тексте с сохранением их значений во всем объеме данного документа, если не указано иное, и сохраняют приведенные в определениях значения при использовании по отдельности или в составе другой группы, если не указано иное.

В используемом тут значении, "алкил" обозначает разветвленную или линейную насыщенную химическую группу, содержащую только углерод и водород, такую как метил, изопропил, изобутил, втор-бутил и пентил. В различных вариантах исполнения, алкильные группы могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими заместителями, например, галогеном, гидроксилом, замещенным гидроксилом, ацилокси, амино, замещенным амино, амидо, циано, нитро, гуанидино, амидино, меркапто, замещенным меркапто, карбокси, сульфонилокси, карбонилом, бензилокси, арилом, гетероарилом, карбоциклическим радикалом, гетероциклическим радикалом или другой функциональностью, которые могут быть в пригодных случаях заблокированы защитной группой. Типично, алкильные группы будут содержать от 1 до 20 атомов углерода, от 1 до 9 атомов углерода, предпочтительно, от 1 до 6, и наиболее предпочтительно, от 1 до 5 атомов углерода.

В используемом тут значении, "алкенил" обозначает линейную или разветвленную химическую группу, состоящую только из углерода и водорода, и содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, такую как 1-пропенил, 2-пропенил, 2-метил-1-пропенил, 1-бутенил, 2-бутенил и т.п. В различных вариантах исполнения, алкенилы могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими заместителями, например, галогеном, гидроксилом, замещенным гидроксилом, ацилокси, амино, замещенным амино, амидо, циано, нитро, гуанидино, амидино, меркапто, замещенным меркапто, карбокси, сульфонилокси, карбонилом, бензилокси, арилом, гетероарилом, карбоциклическим радикалом, гетероциклическим радикалом или другой функциональностью, которые могут быть в пригодных случаях заблокированы защитной группой. Типично, алкенильные группы будут содержать от 2 до 20 атомов углерода, от 2 до 9 атомов углерода, предпочтительно, от 2 до 6, и наиболее предпочтительно, от 2 до 5 атомов углерода.

В используемом тут значении, "алкинил" обозначает линейную или разветвленную химическую группу состоящую только из углерода и водорода, и содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь, такую как 1-пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил и т.п. В различных вариантах исполнения, алкинилы могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими заместителями, например, галогеном, гидроксилом, замещенным гидроксилом, ацилокси, амино, замещенным амино, амидо, циано, нитро, гуанидино, амидино, меркапто, замещенным меркапто, карбокси, сульфонилокси, карбонилом, бензилокси, арилом, гетероарилом, карбоциклическим радикалом, гетероциклическим радикалом или другой функциональностью, которые могут быть в пригодных случаях заблокированы защитной группой. Типично, алкинильные группы будут содержать от 2 до 20 атомов углерода, от 2 до 9 атомов углерода, предпочтительно, от 2 до 6, и наиболее предпочтительно, от 2 до 5 атомов углерода.

В используемом тут значении, "карбоциклический радикал" обозначает неароматическую циклическую кольцевую систему, содержащую только атомы углерода в основной цепи кольцевой системы, такую как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогексенил. Карбоциклические радикалы могут включать множество сконденсированых колец. Карбоциклические радикалы могут иметь любую степень насыщения, при условии, что по меньшей мере одно кольцо кольцевой системы не является ароматическим. В различных вариантах исполнения, группы карбоциклических радикалов могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими заместителями, например, галогеном, алкокси, ацилокси, амино, амидо, циано, нитро, гидроксилом, меркапто, карбокси, карбонилом, бензилокси, арилом, гетероарилом или другой функциональностью, которые могут быть в пригодных случаях заблокированы защитной группой. Типично, группы карбоциклических радикалов будут содержать от 3 до 10 атомов углерода, предпочтительно, от 3 до 6.

В используемом тут значении, "циклоалкил" обозначает полностью насыщенную карбоциклическую кольцевую систему. Примеры включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.

В используемом тут значении, "циклоалкенил" обозначает карбоциклическую кольцевую систему, имеющую по меньшей мере одну двойную связь. Примером является циклогексенил.

В используемом тут значении, "низший алкил" обозначает подгруппу алкила и, таким образом, представляет собой углеводородный заместитель, который является линейным или разветвленным. Предпочтительные низшие алкилы содержат от 1 до примерно 4 атомов углерода и могут быть разветвленными или линейными. Примеры низших алкилов включают бутил, пропил, изопропил, этил и метил. Аналогично, радикалы с использованием термина "низший" относятся к радикалам, содержащим предпочтительно от 1 до примерно 4 атомов углерода в алкильной части радикала.

В используемом тут значении, "арил" обозначает ароматический радикал, имеющий единственное кольцо (например, фенил) или множество конденсированных колец (например, нафтил или антрил), содержащие только атомы углерода в основной цепи кольца. В различных вариантах исполнения, арильные группы могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими заместителями, например, амино, циано, гидроксилом, низшим алкилом, галоидалкилом, алкокси, нитро, галоидом, меркапто, карбокси, карбонилом, бензилокси, арилом, гетероарилом и другими заместителями. Некоторые варианты исполнения включают замещение алкоксигруппой, которая может быть дополнительно замещена одним или несколькими заместителями, например, амино, циано, гидроксилом, низшим алкилом, галоидалкилом, алкокси, нитро, галоидом, меркапто и другими заместителями. Предпочтительным арилом является фенил.

В используемом тут значении, термин "гетероарил" обозначает ароматический радикал, содержащий один или несколько гетероатомов (например, N, O или S) в основной цепи кольца, и может включают единственное кольцо (например, пиридин) или множество конденсированных колец (например, хинолин). В различных вариантах исполнения, гетероарильные группы могут быть незамещенными или замещенными одним или несколькими заместителями, например, амино, циано, гидроксилом, низшим алкилом, галоидалкилом, алкокси, нитро, галоидом, меркапто, карбокси, карбонилом, бензилокси, арилом, гетероарилом и другими заместителями. Примеры гетероарилов включают тиенил, пиридил, фурил, оксазолил, оксадиазолил, пирролил, имидазолил, триазолил, тиодиазолил, пиразолил, изоксазолил, тиадиазолил, пиранил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, триазинил, тиазолил, хинолинил, хиназолинил и другие.

В этих определениях предусматривается, что замещение на арильном и гетероарильном кольцах входит в объем определенных вариантов исполнения. В случае присутствия замещения, радикал называется замещенным арилом или замещенным гетероарилом. Предпочтительно, в арильном кольце присутствует от одного до трех, наиболее предпочтительно, один или два заместителя. Хотя многие заместители являются пригодными, предпочтительными являются заместители, которые обычно присутствуют в арильных соединениях, такие как алкил, циклоалкил, гидрокси, алкокси, циано, галоид, галоидалкил, меркапто и т.п.

В используемом тут значении, "амид" или "амидо" включает как RNR′CO- (в случае, когда R = алкил, алкаминокарбонил-), так и RCONR′- (в случае, когда R = алкил, алкилкарбониламино-). "Амид" или "амидо" включает группы H-CON-, алкил-CON-, карбоциклический радикал-CON-, арил-CON-, гетероарил-CON- или гетероциклический радикал-CON-, где группы алкила, карбоциклического радикала, арила или гетероциклического радикала имеют описанные тут значения.

В используемом тут значении, термин "сложный эфир" включает как ROCO- (в случае, когда R = алкил, алкокси карбон ил-), так и RCOO- (в случае, когда R = алкил, алкилкарбонилокси-).

В используемом тут значении, "ацил" обозначает группы H-CO-, алкил-СО-, карбоциклический радикал-СО-, арил-СО-, гетероарил-СО- или гетероциклический радикал-СО-, где группы алкила, карбоциклического радикала, арила или гетероциклического радикала имеют описанные тут значения. Предпочтительные ацилы содержат низший алкил. Типичные примеры алкилацильных групп включают формил, ацетил, пропаноил, 2-метилпропаноил, т-бутилацетил, бутаноил и пальмитоил.

В используемом тут значении, "галоид" или "галогенид" представляют собой атомный радикал хлора, брома, фтора или йода. Предпочтительными галогенидами являются хлор и фтор. Термин "галоид" также охватывает термины, иногда называемые "галоген" или "галогенид".

В используемом тут значении, "гетероциклический радикал" обозначает неароматическую циклическую кольцевую систему, содержащую по меньшей мере один гетероатом в основной цепи кольцевой системы. Гетероциклические радикалы могут включать множество сконденсированых колец. Гетероциклические радикалы могут иметь любую степень насыщения, при условии, что по меньшей мере одно кольцо кольцевой системы не является ароматическим. Гетероатом(ы) могут присутствовать в неароматическом или в ароматическом кольце кольцевой системы. В различных вариантах исполнения, гетероциклические радикалы могут быть замещенными или незамещенными одним или несколькими заместителями, например, галогеном, алкокси, ацилокси, амино, амидо, циано, нитро, гидроксилом, меркапто, карбокси, карбонилом, бензилокси, арилом, гетероарилом и другими заместителями, и присоединены к другим группам через любую доступную валентность, предпочтительно, через любой доступный атом углерода или азота. Предпочтительные гетероциклы содержат 5-7 членов. В шестичленных моноциклических гетероциклах, гетероатом(ы) выбирают из от одного до трех O, N или S, и если гетероцикл является пятичленным, он предпочтительно содержит один или два гетероатома, выбранных из O, N или S. Примеры гетероциклических радикалов включают пирролидинил, пиперидинил, азепанил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, оксепанил, тетрагидротиофенил, тетрагидротиопиранил, тиепанил, индолинил и дигидробензофуранил.

В используемом тут значении, "замещенный амино" обозначает амино радикал, который замещен одной или двумя группами алкила, циклоалкила, арила, гетероарила или гетероциклического радикала, где алкил, арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклический радикал имеют указанные выше значения.

В используемом тут значении, "замещенный гидроксил" обозначает RO-группу, в которой R представляет собой группу алкила, арила, гетероарила, циклоалкила или гетероциклического радикала, где алкил, циклоалкил, арил, гетероарил или гетероциклический радикал имеют указанные выше значения.

В используемом тут значении, "замещенный тиол" обозначает RS-группу, в которой R представляет собой группу алкила, арила, гетероарила, циклоалкила или гетероциклического радикала, где алкил, циклоалкил, арил, гетероарил или гетероциклический радикал имеют указанные выше значения.

В используемом тут значении, "сульфонил" обозначает группу алкил-SO₂, арил-SO₂, гетероарил-SO₂, карбоциклический радикал-SO₂ или гетероциклический радикал-SO₂, где алкил, карбоциклический радикал, арил, гетероарил или гетероциклический радикал имеют указанные выше значения.

В используемом тут значении, "сульфамидо" обозначает группу алкил-N-S(O)₂N-, арил-NS(O)₂N-, гетероарил-NS(O)₂N-, карбоциклический радикал-NS(O)₂N или гетероциклический радикал-NC(O)₂N, в которой группы алкила, карбоциклического радикала, арила, гетероарила или гетероциклического радикала имеют описанные тут значения.

В используемом тут значении, "сульфонамидо" обозначает группу алкил-S(O)₂N-, арил-S(O)₂N-, гетероарил-S(O)₂N-, карбоциклический радикал-S(O)₂N- или гетероциклический радикал-S(O)₂N-, в которой группы алкила, карбоциклического радикала, арила, гетероарила или гетероциклического радикала имеют описанные тут значения.

В используемом тут значении, "уреидо" обозначает группу алкил-NCON-, арил-NCON-, гетероарил-NCON-, карбоциклический радикал-NCON-, гетероциклический радикал-NCON-, или группу гетероциклический радикал-CON-, в которой группа гетероциклического радикала присоединена к кольцевому атому азота, и где группы алкила, карбоциклического радикала, арила, гетероарила или гетероциклического радикала имеют описанные тут значения.

В используемом тут значении, "гуанидино" обозначает группу алкил-NC(=NR′)N-, арил-NC(=NR′)N-, гетероарил-NC(=NR′)N-, карбоциклический радикал-NC(=NR′)N- или гетероциклический радикал-NC(=NR′)N-, в которой R′ представляет собой H, замещенный или незамещенный гидроксил, CN, алкил, арил, гетероарил или гетероциклическую группу, где группы алкила, карбоциклического радикала, арила, гетероарила или гетероциклического радикала имеют описанные тут значения.

В используемом тут значении, замещенная группа образуется из незамещенной исходной группы, в которой один или несколько атомов водорода были замещены на другой атом или группу. В случае замещения, группа (группы) заместителя замещена (замещены) одним или несколькими заместителями, индивидуально и независимо выбранными из C₁-C₆-алкила, C₁-C₆-алкенила, C₁-C₆-алкинила, C₃-C₇-карбоцикла (необязательно замещенного галоидом, алкилом, алкокси, карбоксилом, галоидалкилом, CN, -SO₂-алкилом, -CF₃ и -OCF₃), C₁-C₆-гетероалкила, 5-7-членного гетероциклического радикала (например, тетрагидрофурила) (необязательно замещенного галоидом, алкилом, алкокси, карбоксилом, CN, -SO₂-алкилом, -CF₃ и -OCF₃), арила (необязательно замещенного галоидом, алкилом, арилом, необязательно замещенным C₁-C₆-алкилом, арилалкилом, алкокси, карбоксилом, CN, -SO₂-алкилом, -CF₃ и -OCF₃), арилалкила (необязательно замещенного галоидом, алкилом, алкокси, арилом, карбоксилом, CN, -SO₂-алкилом, -CF₃ и -OCF₃), гетероарила (необязательно замещенного галоидом, алкилом, алкокси, арилом, аралкилом, карбоксилом, CN, -SO₂-алкилом, -CF₃ и -OCF₃), гетероарилалкила (необязательно замещенного галоидом, алкилом, алкокси, арилом, карбоксилом, CN, -SO₂-алкилом, -CF₃ и -OCF₃), галоида (например, хлора, брома, йода и фтора), циано, гидрокси, C₁-C₆-алкокси, C₁-C₆-алкоксиалкила (т.е., простого эфира), арилокси, сульфгидрила (меркапто), галоид-(C₁-C₆)-алкила (например, -CF₃), C₁-C₆-алкилтио, арилтио, амино (-NH₂), моно- и ди-(C₁-C₆)-алкиламино, четвертичных аммониевых солей, амино-(C₁-C₆)-алкокси (напр., -O(CH₂)₄NH₂), амино-C₁-C₆)-алкоксиалкила (например, -CH₂O(CH₂)INH₂), гидрокси-(C₁-C₆)-алкиламино, амино-(C₁-C₆)-алкилтио (напр., -S(CH₂)₂NH₂), цианоамино, нитро, карбамила, оксо (=O), карбокси, гликолила, глицила, гидразино, гуанидинила, сульфамила, сульфонила, сульфинила, тиокарбонила, тиокарбокси, C-амида, N-амида, N-карбамата, O-карбамата и мочевины. В тех случаях, когда группа описана как "необязательно замещенная", такая группа может быть замещена вышеперечисленными заместителями.

В некоторых вариантах исполнения, замещенная группа (группы) замещена (замещены) одним или несколькими заместителями, индивидуально и независимо выбранными из C₁-C₆-алкила, C₃-C₇-карбоцикла, амино (-NH₂), амино-(C₁-C₆)-алкокси, карбоксила, оксо (=O), C₁-C₆-алкилтио, амино-(C₁-C₆)-алкилтио, гуанидинила, арила, 5-7-членного гетероциклического радикала, гетероарилалкила, гидрокси, галоида, амино-(C₁-C₆)-алкокси и амино-(C₁-C₆)-алкоксиалкила.

В некоторых вариантах исполнения, замещенная группа (группы) замещена (замещены) одним или несколькими заместителями, индивидуально и независимо выбранными из C₁-C₆-алкила, амино (-NH₂), амино-(C₁-C₆)-алкокси, карбоксила, оксо (=O), C₁-C₆-алкилтио, амино-(C₁-C₆)-алкилтио, гуанидинила, гидрокси, галоида, амино-(C₁-C₆)-алкокси и амино-(C₁-C₆)-алкоксиалкила.

В некоторых вариантах исполнения, замещенная группа (группы) замещена (замещены) одним или несколькими заместителями, индивидуально и независимо выбранными из C₁-C₆-алкила, амино (-NH₂), карбоксила, оксо (=O), гуанидинила, гидрокси и галоида.

Следует понимать, что определенные названия радикалов, в соответствии с принятыми правилами, могут включать монорадикалы или бирадикалы, в зависимости от контекста. Например, в тех случаях, когда заместитель требует две точки присоединения к остальной части молекулы, подразумевается, что заместитель представляет собой бирадикал. Например, заместитель, определенный как алкил, требующий две точки присоединения, включает бирадикалы, такие как -CH₂-, -CH₂CH₂-, -СН₂СН(CH₃)СН₂- и т.п. Другие принятые правила названия радикалов четко указывают, что радикал представляет собой бирадикал. Например, в используемом тут значении, "алкилен" обозначает разветвленную или линейную насыщенную бирадикальную химическую группу, содержащую только углерод и водород, такую как метилен, изопропилен, изобутилен, втор-бутилен и пентилен, которая присоединена к остальной части молекулы через две точки присоединения. В используемом тут значении, "алкенилен" обозначает линейную или разветвленную бирадикальную химическую группу, содержащую только углерод и водород, и имеющую по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, такую как 1-пропенилен, 2-пропенилен, 2-метил-1-пропенилен, 1-бутенилен и 2-бутенилен, которая присоединена к остальной части молекулы через две точки присоединения.

В используемом тут значении, "изостеры" химической группы представляют собой другие химические группы, обладающие такими же или подобными свойствами. Например, тетразол является изостером карбоновой кислоты, потому что он обладает свойствами, близкими к карбоновой кислоте, несмотря на то, что их молекулярные формулы очень сильно различаются. Тетразол является одним из многих возможных изостерных замещений для карбоновой кислоты. Другие предусматриваемые изостеры карбоновых кислот включают -SO₃H, -SO₂HNR⁹, -PO₂(R⁹)₂, -PO₃(R⁹)₂, -CONHNHSO₂R⁹, -COHNSO₂R⁹ и -CONR⁹CN, где R⁹ имеет указанные выше значения. В дополнение к этому, изостеры карбоновых кислот могут включать 5-7-членные карбоциклы или гетероциклы, содержащие любые комбинации CH₂, O, S или N в любом химически устойчивом состоянии окисления, где любые атомы указанной кольцевой структуры необязательно замещены в одном или нескольких положениях. Приведенные далее структуры являются неограничивающими примерами предусматриваемых карбоциклических и гетероциклических изостер. Атомы указанной кольцевой структуры могут быть необязательно замещены в одном или нескольких положениях на R⁹, определенный выше.

Предусматривается также, что в тех случаях, когда к карбоксильному изостеру добавляют химические заместители, соединение сохраняет свойства карбоксильного изостера. Предусматривается, что в тех случаях, когда карбоксильный изостер необязательно замещен одним или несколькими фрагментами, выбранными из R⁹, определенного выше, замещение и положение замещения выбирают так, чтобы соединение не теряло свойства изостера карбоновой кислоты. Аналогично, предусматривается также, что введение одного или нескольких заместителей R⁹ в изостер карбоциклической или гетероциклической карбоновой кислоты не является замещением по одному или нескольким атомам, которые поддерживают или являются неотъемлемыми для изостерных свойств карбоновой кислоты данного соединения, если такой заместитель (заместители) будут приводить к потере соединением свойств изостера карбоновой кислоты.

Также предусматриваются другие изостеры карбоновых кислот, конкретные примеры которых не приведены в данном описании.

Квалифицированному специалисту понятно, что некоторые описанные тут структуры могут быть резонансными формами или таутомерами соединений, которые могут быть представлены другими равноценными химическими структурами, или даже кинетически; специалисту понятно, что такие структуры составляют только очень малую часть образца такого соединения (соединений). Такие соединения считаются входящими в объем изображенных структур, хотя такие резонансные формы или таутомеры не представлены тут.

В некоторых вариантах исполнения, вследствие легкости перестройки структуры сложных бороновых эфиров, описанные тут соединения могут превращаться в или находиться в равновесии с альтернативными формами. Соответственно, в некоторых вариантах исполнения, описанные тут соединения могут существовать в комбинации с одной или несколькими такими формами. Например, Соединение 5 может существовать в комбинации с одной или несколькими из формы с открытой цепью (5a), димерной формы (5b), циклической димерной формы (5c), тримерной формы (5d), циклической тримерной формы (5e) и т.п.

Раскрытые тут соединения могут охватывать различные стереохимические формы. Соединения также охватывают диастереомеры, а также оптические изомеры, например, смеси энантиомеров, включая рацемические смеси, а также индивидуальные энантиомеры и диастереомеры, которые возникают вследствие структурной асимметрии определенных соединений. Разделение индивидуальных изомеров или селективный синтез индивидуальных изомеров осуществляются путем использования различных методов, хорошо известных специалистам-практикам в данной области техники.

Термин "агент" или "тестируемый агент" включает любое вещество, молекулу, элемент, соединение, частицу или их комбинацию. Он включает, без ограничений, например, белок, полипептид, пептид или миметик, малую органическую молекулу, полисахарид, полинуклеотид и т.п. Он может быть природным продуктом, синтетическим соединением или химическим соединением или комбинацией двух или более веществ. Если не указано иное, термины "агент", "вещество" и "соединение" используются тут взаимозаменяемо.

Термин "аналог" используется тут по отношению к молекуле, которая является структурно сходной со сравниваемой молекулой, но которая была целенаправленно и контролируемо модифицирована путем замены конкретного заместителя сравниваемой молекулы на альтернативный заместитель. Квалифицированный специалист в данной области техники будет ожидать, что, по сравнению с исходной молекулой, аналог будет демонстрировать такие же, сходные или улучшенные полезные свойства. Синтез и скрининг аналогов, с целью определения вариантов известных соединений, обладающих улучшенными характеристиками (такими как повышенная аффинность связывания с молекулой-мишенью), являются подходом, хорошо известным в фармацевтической химии.

Термин "млекопитающее" используется в его обычном биологическом значении. Таким образом, он конкретно включает людей, крупный рогатый скот, лошадей, собак, кошек, крыс и мышей, а также включает многие другие виды.

Термин "микробная инфекция" относится к инвазии организма-хозяина, который может быть позвоночным, беспозвоночным, рыбой, растением, птицей или млекопитающим, патогенными микроорганизмами. Это понятие включает чрезмерное размножение микроорганизмов, которые нормально присутствуют внутри или на теле млекопитающего или другого организма. В более общем смысле, микробная инфекция может быть любой ситуацией, в которой присутствие микробной популяции (популяций) является вредным для млекопитающего-хозяина. Таким образом, млекопитающее "страдает" от микробной инфекции, когда внутри или на теле млекопитающего присутствует чрезмерная численность микробной популяции, или когда эффект присутствия микробной популяции (популяций) приводит к повреждению клеток или другой ткани млекопитающего. Конкретнее, данное описание относится к бактериальной инфекции. Отметим, что соединения по предпочтительным вариантам исполнения также являются пригодными для борьбы с бактериальным ростом или загрязнением клеточных культур или других сред или неодушевленных поверхностей или объектов, и ничто в данном описании не должно ограничивать предпочтительные варианты исполнения только лечением высших организмов, за исключением случаев, когда это будет явным образом указано в формуле изобретения.

Термин "фармацевтически приемлемый носитель" или "фармацевтически приемлемый эксципиент" включает любые и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотонические и замедляющие всасывание агенты и т.п. Использование таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ хорошо известно специалистам. За исключением случаев, когда любая обычная среда или агент являются несовместимыми с активным ингредиентом, предусмативается их использование в терапевтических композициях. В состав композиций также могут быть включены дополнительные активные ингредиенты. В дополнение к этому, могут быть включены различные адъюванты, такие как обычно используемые в данной области техники. Эти и другие подобные соединения описаны в литературе, например, в Merck Index, Merck & Company, Rahway, NJ. Соображения, касающиеся включения различных компонентов в фармацевтические композиции, рассмотрены, например, в: Gilman et al. (Eds.) (1990); Goodman and Gilman′s: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th Ed., Pergamon Press.

Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к соли, которая сохраняет биологическую эффективность и свойства соединений по предпочтительным вариантам исполнения, и которая не является биологически или иначе нежелательной. Во многих случаях, соединения по предпочтительным вариантам исполнения способны образовывать соли кислоты и/или основания благодаря присутствию амино и/или карбоксильных групп или подобных им групп. Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты могут быть образованы с неорганическими кислотами и органическими кислотами. Неорганические кислоты, соли которых могут быть получены, включают, например, хлористоводородную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и т.п. Органические кислоты, соли которых могут быть получены, включают, например, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, пировиноградную кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, коричную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, салициловую кислоту и т.п. Фармацевтически приемлемые соли присоединения оснований могут быть образованы с неорганическими и органическими основаниями. Неорганические основания, соли с которыми могут быть получены, включают, например, натрий, калий, литий, аммоний, кальций, магний, железо, цинк, медь, марганец, алюминий и т.п.; особенно предпочтительными являются соли аммония, калия, натрия, кальция и магния. Органические основания, соли с которыми могут быть получены, включают, например, первичные, вторичные и третичные амины, замещенные амины, включая природные замещенные амины, циклические амины, основные ионообменные смолы и т.п., конкретнее, такие как изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин и этаноламин. Многие такие соли известны специалистам, как описано в WO 87/05297, Johnston et al., опубликованной 11 сентября 1987 г. (целиком включена сюда в качестве ссылки).

"Сольват" относится к соединению, образующемуся в результате взаимодействия растворителя и EPI, его метаболиту или соли. Пригодными сольватами являются фармацевтически приемлемые сольваты, включая гидраты.

"Субъект", в используемом тут значении, означает человека или млекопитающее, не являющееся человеком, например, собаку, кошку, мышь, крысу, корову, овцу, свинью, козу, не-человекообразного примата или птицу, например, курицу, а также любых других позвоночных или беспозвоночных.

Терапевтический эффект облегчает, в некоторой степени, один или несколько симптомов инфекции, и включает исцеление инфекции. "Исцеление" означает, что устраняются симптомы активной инфекции, включая устранение чрезмерных количеств жизнеспособных микроорганизмов, принимающих участие в инфекции. Однако, определенные долговременные или постоянные эффекты инфекции могут существовать даже после достижения исцеления (такие как обширное поражение ткани).

"Лечить", "лечение" или "воздействие", в используемом тут значении, относится к введению фармацевтической композиции в профилактических и/или терапевтических целях.

Термин "профилактическое лечение" относится к воздействию на пациента, который еще не инфицирован, но является восприимчивым к, или иначе подвержен риску определенной инфекции, причем лечение уменьшает вероятность того, что у пациента разовьется инфекция. Термин "терапевтическое лечение" относится к проведению курса лечения пациента, уже страдающего от инфекции.

Введение и фармацевтические композиции

Некоторые варианты исполнения включают фармацевтические композиции, содержащие: (a) безопасное и терапевтически эффективное количество к циклического боронового кислотно-эфирного производного или его соответствующего энантиомера, диастереоизомера или таутомера, или фармацевтически приемлемую соль; и (b) фармацевтически приемлемый носитель.

Циклические бороновые кислотно-эфирные производные вводят в терапевтически эффективной дозе, например, дозе, достаточной для проведения лечения болезненных состояний, описанных выше. Хотя уровни дозирования для людей еще должны быть оптимизированы для соединений по предпочтительным вариантам исполнения, в общем, суточная доза для большинства циклических бороновых кислотно-эфирных производных, описанных тут, составляет от примерно 0,25 мг/кг до примерно 120 мг/кг веса тела или больше, от примерно 0.5 мг/кг или меньше до примерно 70 мг/кг, от примерно 1.0 мг/кг до примерно 50 мг/кг веса тела, или от примерно 1.5 мг/кг до примерно 10 мг/кг веса тела. Таким образом, при введении особе весом 70 кг диапазон доз будет составлять от примерно 17 мг в день до примерно 8000 мг в день, от примерно 35 мг в день или меньше до примерно 7000 мг в день или больше, от примерно 70 мг в день до примерно 6000 мг в день, от примерно 100 мг в день до примерно 5000 мг в день, или от примерно 200 мг до примерно 3000 мг в день. Количество активного соединения, используемое для введения, будет, конечно, зависеть от субъекта и болезненного состояния, лечение которого проводится, тяжести болезни, способа и схемы введения, и от суждения лечащего врача.

Введение соединений, раскрытых тут, или их фармацевтически приемлемых солей может быть осуществлено любыми принятыми способами введения агентов, имеющих сходное назначение, включая, без ограничений, пероральный, подкожный, внутривенный, интраназальный, местный, чрескожный, интраперитонеальный, внутримышечный, внутрилегочный, вагинальный, ректальный или внутриглазной. Оральное и парентеральное введение являются обычными при лечении показаний, являющихся предметом предпочтительных вариантов исполнения.

Пригодные соединения, описанные выше, могут быть приготовлены в виде фармацевтических композиций для использования при лечении таких состояний. Используются стандартные методики составления фармацевтических композиций, такие как раскрытые в Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005), целиком включенную сюда в качестве ссылки.

В дополнение к выбранному соединению, пригодному для использования, как описано выше, некоторые варианты исполнения включают композиции, содержащие фармацевтически приемлемый носитель. Термин "фармацевтически приемлемый носитель", в используемом тут значении, означает один или несколько материалов из совместимых твердых или жидких наполнителей, разбавителей или инкапсулирующих веществ, пригодных для введения млекопитающему. Термин "совместимый", в используемом тут значении, означает, что компоненты композиции способны смешиваться с соединением по настоящему изобретению и друг с другом таким образом, чтобы при этом не возникало взаимодействий, которые бы существенно снижали фармацевтическую эффективность композиций в условиях обычного применения. Фармацевтически приемлемые носители должны, конечно, иметь достаточно высокую степень чистоты и достаточно низкую токсичность, делающие их пригодными для введения, предпочтительно, животному, предпочтительно, млекопитающему, лечение которого проводится.

Некоторыми примерами веществ, которые могут использоваться в качестве фармацевтически приемлемых носителей или их компонентов, являются сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как натрия карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и метилцеллюлоза; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; твердые смазывающие вещества, такие как стеариновая кислота и стеарат магния; сульфат кальция; растительные масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и масло какао; полиолы, такие как пропиленгликоль, глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; альгиновая кислота; эмульгаторы, такие как TWEENS; смачивающие агенты, такие как лаурилсульфат натрия; красящие агенты; вкусовые вещества; таблетирующие агенты, стабилизаторы; антиоксиданты; консерванты; апирогенная вода; изотонический солевой раствор; и фосфатные буферные растворы.

Выбор фармацевтически приемлемого носителя для использования в сочетании с соединением по настоящему изобретению в основном определяется тем, каким путем должно вводиться соединение.

Композиции, описанные тут, предпочтительно готовят в виде унифицированных дозированных форм. В используемом тут значении, "унифицированная дозированная форма" представляет собой композицию, содержащую количество соединения, пригодное для введения животному, предпочтительно, млекопитающему, в разовой дозе, в соответствии с добросовестной медицинской практикой. Приготовление разовой или унифицированной дозированной формы, однако, не подразумевает, что дозированную форму вводят один раз в день или один раз за курс лечения. Предусматривается введение таких дозированных форм один, два, три или больше раз в день, и возможно введение в виде инфузии на протяжении определенного периода времени (например, от примерно 30 минут до примерно 2-6 часов) или введение в виде непрерывной инфузии, которое может выполняться более одного раза за курс лечения, хотя однократное введение конкретно не исключается. Квалифицированному специалисту будет понятно, что рецептура композиции не предусматривает конкретно полный курс лечения, и что такие решения остаются на усмотрение квалифицированных специалистов в области лечения, а не составления рецептур.

Композиции, пригодные для использования, как описано выше, могут иметь вид любых из различных форм, пригодных для различных путей введения, например, для орального, назального, ректального, местного (включая трансдермальный), глазного, интрацеребрального, интракраниального, интратекального, внутриартериального, внутривенного, внутримышечного или других парентеральных (parental) путей введения. Квалифицированному специалисту понятно, что композиции для орального и назального введения включают композиции, которые вводят путем ингаляции и изготавливают с использованием доступных методик. В зависимости от конкретного желательного пути введения, могут быть использованы разнообразные фармацевтически приемлемые носители, хорошо известные специалистам. Фармацевтически приемлемые носители включают, например, твердые или жидкие наполнители, разбавители, гидротропные вещества, поверхностно-активные агенты и инкапсулирующие вещества. Могут быть включены необязательные фармацевтически активные материалы, которые существенно не влияют на ингибирующую активность соединений. Количество носителя, используемого в сочетании с соединением, является достаточным для обеспечения практически пригодного количества материала для введения на стандартную дозу соединения. Методики и композиции для изготовления дозированных форм, пригодных для использования в описанных тут способах, приведены в следующих источниках, которые все включены сюда в качестве ссылок: Modern Pharmaceutics, 4th Ed., главы 9 и 10 (Banker & Rhodes, editors, 2002); Lieberman et al., Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (1989); и Ansel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 8th Edition (2004).

Могут быть использованы различные дозированные формы для орального введения, включая такие твердые формы, как таблетки, капсулы, гранулы и недозированные порошки. Такие формы для орального введения содержат безопасное и эффективное количество, обычно, по меньшей мере примерно 5%, максимально примерно 90%, соединения. Таблетки могут быть прессованными, растертыми в порошок (triturates) таблетками, таблетками с энтеросолюбильными покрытиями, с покрытиями из сахара, с пленочными покрытиями или многослойными, и могут содержать пригодные связующие вещества, смазывающие вещества, разбавители, разрыхляющие вещества, красящие агенты, вкусовые вещества, агенты для придания сыпучести и агенты, понижающие температуру плавления. Жидкие дозированные формы для орального введения включают водные растворы, эмульсии, суспензии, растворы и/или суспензии, восстановленные из нешипучих гранул, и шипучие препараты, восстановленные из шипучих гранул, содержащие пригодные растворители, консерванты, эмульгирующие агенты, суспендирующие агенты, разбавители, подсластители, агенты, понижающие температуру плавления, красящие вещества и вкусовые вещества.

Фармацевтически приемлемые носители, пригодные для изготовления унифицированных дозированных форм для перорального введения, хорошо известны специалистам. Таблетки типично содержат обычные фармацевтически совместимые адъюванты в качестве инертных разбавителей, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, маннит, лактозу и целлюлозу; связующие вещества, такие как крахмал, желатин и сахароза; разрыхлители, такие как крахмал, альгиновая кислота и кроскармелоза; смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеариновая кислота и тальк. Вещества, обеспечивающие скольжение, такие как диоксид кремния, могут быть использованы для улучшения характеристик текучести порошкообразной смеси. Красящие вещества, такие как красители FD&C (разрешенные в США для использования в пищевой, фармацевтической и косметической промышленности), могут быть добавлены для обеспечения внешнего вида. Подсластители и вкусовые вещества, такие как аспартам, сахарин, ментол, мятное масло и фруктовые ароматизаторы, являются пригодными адъювантами для жевательных таблеток. Капсулы типично содержат один или несколько твердых разбавителей, раскрытых выше. Выбор компонентов носителя зависит от вторичных соображений, таких как вкус, стоимость и стабильность при хранении, которые не являются критичными, и может быть легко осуществлен квалифицированным специалистом в данной области техники.

Композиции для перорального введения также включают жидкие растворы, эмульсии, суспензии и т.п. Фармацевтически приемлемые носители, пригодные для приготовления таких композиций, хорошо известны специалистам. Типичные компоненты носителей для сиропов, эликсиров, эмульсий и суспензий включают этанол, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, жидкую сахарозу, сорбит и воду. Для суспензии, типичные суспендирующие агенты включают метилцеллюлозу, натрия карбоксиметилцеллюлозу, AVICEL RC-591, трагакант и альгинат натрия; типичные смачивающие агенты включают лецитин и полисорбат 80; и типичные консерванты включают метилпарабен и бензоат натрия. Жидкие композиции для перорального введения также могут содержать один или несколько компонентов, таких как подсластители, вкусовые вещества и красители, раскрытые выше.

Такие композиции могут также иметь покрытия, нанесенные обычными способами, типично, покрытия, поведение которых зависит от рН или времени, так чтобы соединение по настоящему изобретению высвобождалось в желудочно-кишечном тракте поблизости от участка желательного местного применения, или в разные моменты времени для продления желательного действия. Такие дозированные формы типично включают, без ограничений, один или несколько материалов из ацетатфталата целлюлозы, поливинилацетатфталата, фталата гидроксипропилметилцеллюлозы, этилцеллюлозы, покрытий Eudragit, восков и шеллака.

Описанные тут композиции могут необязательно включать другие лекарственные активные вещества.

Другие композиции, пригодные для обеспечения системной доставки соединений по настоящему изобретению, включают сублингвальные, буккальные и назальные дозированные формы. Такие композиции типично содержат одно или несколько растворимых веществ-наполнителей, таких как сахароза, сорбит и маннит; и связующие вещества, такие как гуммиарабик, микрокристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и гидроксипропилметилцеллюлоза. Также могут быть включены вещества, обеспечивающие скольжение, смазывающие вещества, подсластители, красящие вещества, антиоксиданты и вкусовые вещества, раскрытые выше.

Жидкая композиция, предназначенная для местного офтальмического применения, составляется таким образом, чтобы она могла быть введена местно в глаз. Необходимо обеспечить как можно более высокую степень комфортности, хотя иногда рецептурные соображения (например, стабильность лекарственного средства) могут принуждать к пониженной по сравнению с оптимальной степенью комфорта. В случае, когда максимальный комфорт не может быть достигнут, рецептура жидкого средства должна быть составлена так, чтобы жидкость была переносимой для пациента при местном офтальмическом применении. Дополнительно, офтальмически приемлемая жидкость должна или быть упакована для разового применения, или содержать консервант для предотвращения загрязнения при многократном использовании.

Для офтальмического применения, растворы или лекарственные средства часто готовят с использованием физиологического солевого раствора в качестве основного носителя. Офтальмические растворы, предпочтительно, должны поддерживаться при комфортном значении рН с помощью пригодной буферной системы. Композиции могут также содержать обычные фармацевтически приемлемые консерванты, стабилизаторы и поверхностно-активные вещества.

Консерванты, которые могут быть использованы в фармацевтических композициях, раскрытых тут, включают, без ограничений, бензалкония хлорид, РНМВ (полигексаметиленбигуанид), хлорбутанол, тимеросал, фенилртутьацетат и фенилртутьнитрат. Пригодным поверхностно-активным веществом является, например, Tween 80. Аналогично, различные пригодные носители могут быть использованы в офтальмических препаратах, раскрытых тут. Такие носители включают, без ограничений, поливиниловый спирт, повидон, гидроксипропилметилцеллюлозу, полоксамеры, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу и очищенную воду.

Регуляторы тоничности могут быть добавлены, если это необходимо или удобно. Они включают, без ограничений, соли, особенно хлорид натрия, хлорид калия, маннит и глицерин или любые другие пригодные офтальмически приемлемые регуляторы тоничности.

Различные буферы и средства регулировки pH могут быть использованы при условии, что готовый препарат будет офтальмически приемлемым. Для многих композиций, pH будет иметь значение в интервале от 4 до 9. Соответственно, буферы включают ацетатные буферы, цитратные буферы, фосфатные буферы и боратные буферы. Кислоты или основания могут быть использованы для регулировки pH таких композиций при необходимости.

Аналогично, офтальмически приемлемый антиоксидант включает, без ограничений, метабисульфит натрия, тиосульфат натрия, ацетилцистеин, бутилированный гидроксианизол и бутилированный гидрокситолуол.

Другими вспомогательными компонентами, которые могут быть включены в офтальмические препараты, являются хелатирующие агенты. Пригодным хелатирующим агентом является динатрия эдетат, хотя другие хелатирующие агенты также могут быть использованы вместо него или в сочетании с ним.

Для местного применения используются крема, жидкие мази, гели, растворы или суспензии и т.д., содержащие раскрытые тут соединения. Композиции для местного применения могут обычно содержать фармацевтический носитель, сорастворитель, эмульгатор, вещество, усиливающее проницаемость, систему консерванта и умягчитель.

Для внутривенного введения, соединения и композиции, описанные тут, могут быть растворены или диспергированы в фармацевтически приемлемом разбавителе, таком как солевой раствор или раствор декстрозы. Пригодные эксципиенты могут быть включены для достижения желательного pH, включая, без ограничений, NaOH, карбонат натрия, ацетат натрия, HCl и лимонную кислоту. В различных вариантах исполнения, pH готовой композиции имеет значение в интервале от 2 до 8 или, предпочтительно, от 4 до 7. Эксципиенты-антиоксиданты могут включать бисульфит натрия, ацетон-бисульфит натрия, формальдегид натрия, сульфоксилат, тиомочевину и ЭДТА. Другие неограничивающие примеры пригодных эксципиентов, используемых в готовых композициях для внутривенного введения, могут включать фосфаты натрия или калия, лимонную кислоту, винную кислоту, желатин и углеводы, такие как декстроза, маннит и декстран. Дополнительные приемлемые эксципиенты описаны в Powell, et al., Compendium of Excipients for Parenteral Formulations, PDA J Pharm Sci and Tech 1998, 52 238-311 и Nema et al., Excipients and Their Role in Approved Injectable Products: Current Usage and Future Directions, PDA J Pharm Sci and Tech 2011, 65 287-332, которые обе целиком включены сюда в качестве ссылок. Также могут быть включены антимикробные агенты для получения бактериостатического или фунгистатического раствора, включая, без ограничений, фенилртутьнитрат, тимеросал, бензетония хлорид, бензалкония хлорид, фенол, крезол и хлорбутанол. Полученная композиция может быть введена инфузией пациенту на протяжении определенного периода времени. В различных вариантах исполнения, время инфузии составляет от 5 минут до непрерывной инфузии, от 10 минут до 8 часов, от 30 минут до 4 часов, и от 1 часа до 3 часов. В одном варианте исполнения, лекарственное средство вводят инфузией на протяжении периода времени, равного 3 часам. Инфузии могут повторяться с желательными интервалами введения доз, которые могут включать, например, 6 часов, 8 часов, 12 часов или 24 часа.

Композиции для внутривенного введения могут быть предоставлены особам, ухаживающим за больными, в форме одного или нескольких твердых веществ, которые восстанавливают пригодным разбавителем, таким как стерильная вода, солевой раствор или декстроза в воде, незадолго до введения. Восстановленные концентрированные растворы могут быть дополнительно разбавлены для получения растворов для парентерального введения, имеющих объем от примерно 25 до примерно 1000 мл, от примерно 30 мл до примерно 500 мл, или от примерно 50 мл до примерно 100 мл. В других вариантах исполнения, композиции поставляются в виде раствора, готового для парентерального введения. В еще одних вариантах исполнения, композиции поставляются в виде раствора, который дополнительно разбавляют перед введением. В вариантах исполнения, которые включают введение комбинации соединения, описанного тут, и другого агента, комбинация может быть предоставлена особам, ухаживающим за больными, в виде смеси, или особы, ухаживающие за больными, могут смешивать два агента перед введением, или два агента могут быть введены раздельно.

Фактическая доза активных соединений, описанных тут, зависит от конкретного соединения и от состояния, лечение которого должно проводиться; выбор пригодной дозы находится в пределах компетенции специалиста.

Наборы для внутривенного введения

Некоторые варианты исполнения включают набор, содержащий соединение, описанное тут, и дополнительный агент, такой как антимикробный агент. В одном варианте исполнения, оба компонента находятся в одном стерильном контейнере. В случае твердых веществ, нуждающихся в восстановлении, агенты могут быть предварительно смешаны и добавлены в контейнер одновременно, или контейнер может быть заполнен сухими порошками на двух отдельных стадиях. В некоторых вариантах исполнения, твердые вещества представляют собой стерильные кристаллические продукты. В другом варианте исполнения, твердые вещества являются продуктами лиофилизации. В одном варианте исполнения, оба компонента лиофилизируют вместе. Неограничивающие примеры агентов, способствующих лиофилизации, включают фосфаты натрия или калия, лимонную кислоту, винную кислоту, желатин и углеводы, такие как декстроза, маннит и декстран. Один вариант исполнения включает нестерильные твердые вещества, которые подвергают облучению перед или после их помещения в контейнер.

В случае жидкости, агенты могут быть растворены или диспергированы в разбавителе, готовом для введения. В другом варианте исполнения, раствор или дисперсия могут быть дополнительно разбавлены перед введением. Некоторые варианты исполнения включают обеспечение жидкости в пакете для внутривенного вливания. Жидкость может быть заморожена для улучшения стабильности.

В одном варианте исполнения, контейнер содержит другие ингредиенты, такие как регулятор pH, солюбилизатор или диспергент. Неограничивающие примеры регуляторов pH включают NaOH, карбонат натрия, ацетат натрия, HCl и лимонную кислоту.

Молярное отношение соединений, описанных тут, к дополнительному агенту (например, антибактериальному агенту), могут составлять от примерно 10:1 до 1:10, от 8:1 до 1:8, от 5:1 до 1:5, от 3:1 до 1:3, от 2:1 до 1:2, или примерно 1:1. В различных вариантах исполнения, количество соединения, описанного тут, может составлять от 100 мг до 5 г, от 500 мг до 2 г, или примерно 1 г. Аналогично, в различных вариантах исполнения, количество дополнительного агента может составлять от 100 мг до 5 г, от 500 мг до 2 г, или примерно 1 г.

В альтернативном варианте исполнения, два компонента могут находиться в отдельных контейнерах. Каждый контейнер может содержать твердое вещество, раствор или дисперсию. В таких вариантах исполнения, два контейнера могут находиться в одной упаковке или могут поставляться отдельно. В одном варианте исполнения, соединение, описанное тут, поставляется в виде раствора, в то время как дополнительный агент (например, антибактериальный агент) поставляется в виде твердого вещества, готового для восстановления. В одном таком варианте исполнения, раствор соединения, описанного тут, используется в качестве разбавителя для восстановления другого агента.

Способы лечения

Некоторые варианты исполнения настоящего изобретения включают способы лечения бактериальных инфекций соединениями и композициями, содержащими циклические бороновые кислотно-эфирные производные, описанные тут. Некоторые способы включают введение соединения, композиции, фармацевтической композиции, описанных тут, нуждающемуся в этом субъекту. В некоторых вариантах исполнения, субъект может быть животным, например, млекопитающим, человеком. В некоторых вариантах исполнения, бактериальная инфекция включает бактерии, описанные тут. Как понятно из приведенного выше описания, способы лечения бактериальной инфекции включают способы профилактики бактериальной инфекции у субъекта с риском такой инфекции.

Дополнительные варианты исполнения включают введение комбинации соединений нуждающемуся в этом субъекту. Комбинация может включать соединение, композицию, фармацевтическую композицию, описанные тут, с дополнительным лекарственным средством.

Некоторые варианты исполнения включают совместное введение соединения, композиции и/или фармацевтической композиции, описанных тут, с дополнительным лекарственным средством. Под "совместным введением" подразумевается, что два или больше агентов могут присутствовать в кровотоке пациента одновременно, независимо от того, когда или как они были фактически введены. В одном варианте исполнения, агенты вводят одновременно. В одном таком варианте исполнения, введение комбинации осуществляется путем объединения агентов в одной дозированной форме. При объединении агентов в одной дозированной форме, они могут быть физически смешаны (напр., путем совместного растворения или перемешивания всухую) или могут образовывать аддукт или быть ковалентно связаными так, чтобы они разделялись на два или больше активных ингредиентов при введении пациенту. В другом варианте исполнения, агенты вводят последовательно. В одном варианте исполнения, агенты вводят одним и тем же путем, таким как пероральный. В другом варианте исполнения, агенты вводят разными путями, например, один вводят орально и другой вводят внутривенно (i.v.).

Примеры дополнительных лекарственных средств включают антибактериальный агент, противогрибковый агент, антивирусный агент, противовоспалительный агент и противоаллергический агент.

Некоторые варианты исполнения включают совместное введение соединения, композиции или фармацевтической композиции, описанной тут, с антибактериальным агентом, таким как β-лактам. Примеры таких β-лактамов включают амоксициллин, ампициллин (например, пивампициллин, гетациллин, бакампициллин, метампициллин, талампициллин), эпициллин, карбенициллин (кариндациллин), тикарциллин, темоциллин, азлоциллин, пиперациллин, мезлоциллин, мециллинам (пивмециллинам), сулбенициллин, бензилпенициллин (G), клометоциллин, бензатин бензилпенициллин, прокаин бензилпенициллин, азидоциллин, пенамециллин, феноксиметилпенициллин (V), пропициллин, бензатин феноксиметилпенициллин, фенетициллин, клоксациллин (например, диклоксациллин, флуклоксациллин), оксациллин, метициллин, нафциллин, фаропенем, биапенем, дорипенем, эртапенем, имипенем, меропенем, панипенем, томопенем, разупенем, цефазолин, цефацетрил, цефадроксил, цефалексин, цефалоглицин, цефалониум, цефалоридин, цефалотин, цефапирин, цефатризин, цефазедон, цефазафлур, цефрадин, цефроксадин, цефтезол, цефаклор, цефамандол, цефминокс, цефоницид, цефоранид, цефотиам, цефпрозил, цефбуперазон, цефуроксим, цефузонам, цефокситин, цефотетан, цефметазол, лоракарбеф, цефиксим, цефтазидим, цефтриаксон, цефкапен, цефдалоксим, цефдинир, цефдиторен, цефетамет, цефменоксим, цефодизим, цефоперазон, цефотаксим, цефпимизол, цефпирамид, цефподаксим, цефсолудин, цефтерам, цефтибутен, цефтиолен, цефтизоксим, фломоксеф, латамоксеф, цефепим, цефозопран, цефпиром, цефквином, цефтобипрол, цефтаролин, CXA-101, RWJ-54428, MC-04,546, ME1036, BAL30072, SYN2416, цефтиофур, цефквином, цефовецин, азтреонам, тигемонам, карумонам, RWJ-442831, RWJ-333441 и RWJ-333442.

Предпочтительные варианты исполнения включают β-лактамы, такие как цефтазидим, биапенем, дорипенем, эртапенем, имипенем, меропенем, ME1036, томопенем, разупенем и панипенем.

Некоторые варианты исполнения включают совместное введение соединений, композиций и/или фармацевтических композиций, описанных тут, с дополнительным агентом, где дополнительный агент содержит монобактам. Примеры монобактамов включают азтреонам, тигемонам, BAL30072, SYN2416 (BAL19764) и карумонам.

Некоторые варианты исполнения включают совместное введение соединений, композиций и/или фармацевтических композиций, описанных тут, с дополнительным агентом, где дополнительный агент содержит ингибитор бета-лактамазы класса A, B, C или D. Пример ингибитора бета-лактамазы класса B включает ME1071 (Yoshikazu Ishii et al., "In Vitro Potentiation of Carbapenems with ME1071, a Novel Metallo-β-Lactamase Inhibitor, against Metallo-β-Lactamase Producing Pseudomonas aeruginosa Clinical Isolates." Antimicrob. Agents Chemother. doi:10.1128/AAC.01397-09 (July 2010)). Другие примеры ингибиторов бета-лактамаз, вводимых в качестве дополнительного агента, включают клавулановую кислоту, тазобактам, сулбактам, авибактам (NXL-104), MK-7655 и BAL29880. MK-7655 имеет следующую структуру:

Показания

Соединения и композиции, содержащие циклические бороновые кислотно-эфирные производные, описанные тут, могут быть использованы для лечения бактериальных инфекций. Бактериальные инфекции, которые можно лечить соединениями, композициями и способами, описанными тут, могут включать широкий спектр бактерий. Примеры организмов включают грамположительные бактерии, грамотрицательные бактерии, аэробные и анаэробные бактерии, такие как Staphylococcus, Lactobacillus, Streptococcus, Sarcina, Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Pseudomonas, Acinetobacter, Mycobacterium, Proteus, Campylobacter, Citrobacter, Nisseria, Baccillus, Bacteroides, Peptococcus, Clostridium, Salmonella, Shigella, Serratia, Haemophilus, Brucella и другие организмы.

Дополнительные примеры бактериальных инфекций включают Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas acidovorans, Pseudomonas alcaligenes, Pseudomonas putida, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Aeromonas hydrophilia, Escherichia coli, Citrobacter freundii, Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia marcescens, Francisella tularensis, Morganella morganii, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Providencia stuartii, Acinetobacter baumannii, Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia intermedia, Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus haemolyticus, Haemophilus parahaemolyticus, Haemophilus ducreyi, Pasteurella multocida, Pasteurella haemolytica, Branhamella catarrhalis, Helicobacter pylori, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Borrelia burgdorferi, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Legionella pneumophila, Listeria monocytogenes, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Kingella, Moraxella, Gardnerella vaginalis, Bacteroides fragilis, Bacteroides distasonis, гомологичную группу Bacteroides 3452A, Bacteroides vulgatus, Bacteroides ovalus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides eggerthii, Bacteroides splanchnicus, Clostridium difficile, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium avium, Mycobacterium intracellular, Mycobacterium leprae, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium ulcerans, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus intermedius, Staphylococcus hyicus subsp. hyicus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis или Staphylococcus saccharolyticus.

Приведенные далее примеры дополнительно описывают настоящее изобретение и используются только с целью иллюстрации, и не должны рассматриваться как ограничительные.

ПРИМЕРЫ

Общие процедуры

Материалы, используемые для получения циклических бороновых кислотно-эфирных производных, описанные тут, могут быть получены известными способами или являются коммерчески доступными. Квалифицированному специалисту понятно, что способы получения прекурсоров и функциональностей, связанных с заявляемыми тут соединениями, описаны в общем в литературе, включая, например, процедуры, изложенные в US 7271186 и WO 2009064414, каждый из которых целиком включен сюда в качестве ссылки. В таких реакциях могут также использоваться варианты, сами по себе известные рядовым специалистам в данной области техники, но не описанные более подробно. Квалифицированный специалист, используя литературу и данное описание, способен получить любые соединения.

Считается, что квалифицированный специалист в области органической химии может легко провести манипуляции без дополнительных указаний, то есть, проведение таких манипуляций не выходит за пределы знаний и практических навыков квалифицированного специалиста. Они включают восстановление карбонильных соединений до их соответствующих спиртов, реакции окисления, ацилирования, ароматическго замещения, как электрофильного, так и нуклеофильного, этерификации, эстерификации и омыления и т.п. Такие манипуляции описаны в стандартных пособиях, таких как March Advanced Organic Chemistry (Wiley), Carey and Sundberg, Advanced Organic Chemistry (которые целиком включены сюда в качестве ссылок) и т.п.

Квалифицированному специалисту понятно, что определенные реакции лучше проводят, когда другая функциональность в молекуле скрыта или защищена, что позволяет избежать любых нежелательных побочных реакций и/или увеличить выход реакции. Часто, квалифицированный специалист использует защитные группы для достижения таких повышенных выходов или во избежание нежелательных реакций. Такие реакции описаны в литературе и также известны квалифицированным специалистам. Примеры многих таких манипуляций приведены, например, в Т. Greene and P. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, 4th Ed., John Wiley & Sons (2007), которая целиком включена сюда в качестве ссылки.

Описываемые далее примеры схем приведены для сведения читателя и иллюстрируют предпочтительные способы получения соединений, примеры которых указаны тут. Эти способы не являются ограничительными и должно быть понятно, что для получения данных соединений могут быть использованы другие пути синтеза. Конкретнее, такие способы включают методы твердофазной химии, включая комбинаторную химию. Квалифицированный специалист в полной мере подготовлен к тому, чтобы получить такие соединения с использованием способов, приведенных в литературе и в данном описании. Нумерация соединений, используемая в схемах синтеза, приведенных ниже, относится только к данным конкретным схемам и не должна истолковываться как, или быть спутана с, совпадающей нумерацией в других разделах данной заявки.

Торговые марки используются тут только в качестве примеров и отображают иллюстративные материалы, используемые на момент создания изобретения. Квалифицированному специалисту понятно, что следует ожидать расхождений между партиями, изменений технологических процессов и т.п. Поэтому примеры и используемые в них торговые марки являются неограничивающими и не должны рассматриваться как ограничительные, а являются просто иллюстрацией вариантов выбора квалифицированным специалистом способов проведения одного или нескольких вариантов исполнения изобретения.

Измерения спектров (¹H) ядерного магнитного резонанса (ЯМР) проводились в указанных растворителях с помощью ЯМР-спектрометра Bruker (Avance ТМ DRX500, 500 МГц для ¹H) или ЯМР-спектрометра Varian (Mercury 400 BB, 400 МГц для ¹H). Положения пиков выражены в миллионных долях (ppm) низкопольного сдвига по сравнению с тетраметилсиланом. Кратность пиков обозначается следующим образом: s - синглет; d - дублет; t - триплет; q - квартет; quin - квинтет; sex - секстет; sep - септет; non - нонет; dd - дублет дублетов; td - триплет дублетов; m - мультиплет.

Следующие сокращения имеют указанные значения:

н-BuLi (n-BuLi) = н-бутиллитий

т-Bu (t-Bu) = трет-бутил

DCM = дихлорметан

ДМФ (DMF) = N,N-диметилформамид

DIPEA = диизопропилэтиламин

EDCI = 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид

ESBL = β-лактамаза расширенного спектра действия

ESIMS = масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением

EtOAc = этилацетат

EtOH = этанол

HATU = 2-(7-аза-1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат

HCl = хлористоводородная кислота

HOBt = гидроксибензотриазол

Im = имидазол

LiHMDS = лития бис(триметилсилил)амид

MeCN = ацетонитрил

MaHCO₃ = бикарбонат натрия

Na₂SO₄ = сульфат натрия

NMM = N-метилморфолин

ЯМР (NMR) = ядерный магнитный резонанс

Pd/C = палладий на угле

TBDMSCI = трет-бутилдиметилсилилхлорид

TBS = трет-бутилдиметилсилил

TFA = трифторуксусная кислота

ТГФ (THF) = тетрагидрофуран

ТСХ (TLC) = тонкослойная хроматография

TMS = триметилсилил

TPPB = трис(пентафторфенил)борана моногидрат

Следующие примеры схем приведены для сведения читателя и коллективно представляют пример способа получения соединений, указанных тут. Кроме того, другие способы получения соединений, описанных тут, будут очевидными для рядового специалиста в данной области техники в свете описанных ниже схем реакций и примеров. Если не указано иное, все переменные имеют значения, определенные выше.

Соединения формулы I, в которой R¹ обозначает ациламиногруппу и X обозначает карбоновую кислоту, могут быть получены, как изображено на Схеме 1.

Схема 1

Присоединение енолятов к замещенным α,β-ненасыщенным кетонам или альдегидам с образованием β-гидроксисложных эфиров представляет собой хорошо известную реакцию (Схема 1). Заместители R⁷ и R⁸ формулы I могут контролироваться путем использования соответствующих α-моно- или дизамещенных сложных эфиров III. Аналогично, заместители R², R³ и R⁴ могут контролироваться путем использования соответствующих аналогов замещенных α,β-ненасыщенных кетонов или альдегидов II. Прекурсоры структуры IV, в которой R⁶ и R⁷ или R⁸ объединены вместе, могут быть получены в соответствии с известными процедурами [J. Am. Chem. Soc. (1982), 104, 1735-7, Tetrahedron Lett. (2003), 44, 1259-62]. β-Гидроксисложный эфир структуры IV защищают с помощью чувствительной к кислоте защитной группы, получая V; такой выбор обеспечивает одновременное удаление защитных групп сложного боронатного эфира и защитных групп гидроксила на последней стадии, с образованием циклизованного продукта. Пинаколборонат VII получают из замещенного V с использованием иридиевого катализа [Tetrahedron (2004), 60, 10695-700]. Переэтерификация легко проводится с использованием оптически активного пинандиола VIII с образованием IX [Tetrahedron: Asymmetry, (1997), 8, 1435-40]. Переэтерификация также может быть проведена, начиная с аналога катехинового сложного эфира VII. Такие катехиновые сложные эфиры могут быть получены по реакции V с коммерчески доступным катехинбораном [Tetrahedron (1989), 45, 1859-85]. Гомологизация IX с образованием продукта присоединения хлорметилена X с хорошим стереоконтролем может быть достигнута в условиях реакции Маттесона (Matteson) (WO 0946098). Хлорсодержащее производное X может быть использовано для введения замещенной аминогруппы в положение C3 оксаборинан-2-ола. Стереоспецифическое замещение гексаметилдисилазаном дает соответствующий бис(триметилсилил)амид XI, который может быть введен in situ в реакцию с хлорангидридом кислоты с непосредственным образованием аналогов структуры XII. Такие аналоги XII могут также быть получены по реакции сочетания бис-TMS-амина с коммерчески доступными карбоновыми кислотами в типичных условиях амидного сочетания (например, карбодиимидного или HATU-сочетания). Соединения формулы 1, в которой R¹ замещен на -N(R₉)C(=O)C(=NOR⁹)R⁹, могут быть синтезированы из соответствующих карбоновых кислот путем сочетания XI с XII, как изображено на Схеме 1. Такие карбоновые кислоты могут быть получены в соответствии с процедурами, описанными в патенте США №5888998, публикации заявки США №2004/0019203 и патенте США №4822786, которые все целиком включены сюда в качестве ссылок. Одновременное удаление защитных групп пинанового сложного эфира, трет-бутилдиметилсилилоксигруппы и группы трет-бутилового сложного эфира и сопутствующая циклизация достигаются путем нагревания с разбавленной HCl, с образованием желательных производных оксаборинана структуры XIII. Такое превращение также может быть осуществлено путем обработки BCl₃ или BBr₃. Альтернативно, удаление защитных групп может быть проведено путем переэтерификации изобутилбороновой кислотой в присутствии разбавленной HCl (WO 09064413).

Схема 2

Соединения структуры XVI, в которой R¹ формулы I представляет собой алкильную, аралкильную или аминоарильную группу, могут быть получены из бромсодержащего промежуточного соединения XIV, как показано на Схеме 2 [J. Organomet. Chem. (1992), 437, 255-70]. Такие бромсодержащие производные могут быть получены по аналогии с хлорсодержащими соединениями на Схеме 1, с использованием дибромметана [J. Am. Chem. Soc. (1990), 112, 3964-969]. Замещение группы брома в XIV может быть проведено с помощью α-алкоксизамещенных алкиллитиевых агентов [J. Am. Chem. Soc. (1989), 111, 4399-402; J. Am. Chem. Soc. (1988), 110, 842-53] или магнийорганических реагентов (WO0946098) или с помощью натриевой соли алкил- или арилкарбаматных производных [J. Org. Спет.(1996), 61, 7951-54], с образованием XV. Циклизация XV с образованием XVI может быть проведена в условиях, указанных на Схеме 1.

Схема 3

Соединения формул XIII и XVI представляют собой смеси 3,6-цис- и 3,6-транс-изомеров. Такие аналоги могут быть получены в энантиомерно чистой форме в виде отдельных изомеров, при проведении реакции, начиная с (как на Схеме 1) отдельного энантиомера (XVII), как показано на Схеме 3. Различные способы получения таких энантиомерно чистых β-гидроксисложных эфиров описаны в литературе, например, путем разделения [Org. Lett, (2008), 10, 3907-09] или стереоселективного синтеза [Tetrahedron, (2000), 56, 917-47]. Такие отдельные изомеры дают энантиомерно чистые цис-соединения XIII или XVI при использовании в последовательности, изображенной на Схемах 1 и 2.

Схема 4

Последовательность, изображенная на Схеме 1, также позволяет получить кольца разных размеров в формуле I, такие как 7- и 8-членные кольца. Например, семичленный аналог XX, в котором n=1, может быть получен путем использования в качестве исходного материала соответствующего аллильного промежуточного соединения (XIX) (Схема 4). Аллильные производные, такие как XIX, могут быть получены с использованием одного из нескольких хорошо известных способов получения β-гидроксисложных эфиров [Tetrahedron (2007), 63, 8336-50]. Промежуточное соединение XIX, где n=2, может быть получено, как описано в Схеме 1, с образованием соответствующего 8-членного соединения структуры XX, начиная с пент-4-ен-1-аля [J. Med. Chem. (1998), 41 (6), 965-972].

Схема 5

Соединения формулы XXVI и XXVII могут быть получены в соответствии с последовательностью, изображенной на Схеме 5. Реакция обмена с замыканием кольца с борированныи олефинами (XXI) и олефин-замещенными β-гидроксисложными эфирами (XXII) дает циклические боронаты формулы XXIII. Такие циклические боронаты (XXIII) легко подвергаются эстерификации (+)-пинандиолом с образованием необходимых прекурсоров реакции Маттесона при защите образующегося спирта такими группами, как т-бутилдиметилсилил- или бензил или тритил. Гомологизация Маттесона с последующим образованием амида дает соединения формулы XXV с высокой стереоселективностью, как описано выше. Медиируемый кислотой гидролиз соединений XXV дает, после удаления защитных групп, циклический боронат (XXVI). Замещение двойной связи XXVI может быть дополнительно модифицировано до получения других аналогов, таких как насыщенный циклический боронат (XXVII), путем каталитического гидрирования. Вышеописанная последовательность может быть использована для получения 7- или 8-членных колец с двойной связью в желательном положении путем изменения значений p и q в XXI и XXII.

Схема 6

Соединения формулы I, в которой R² и R⁴ вместе образуют арильное кольцо, могут быть получены из коммерчески доступных замещенных арильных прекурсоров, таких как XXVIII. Замещение атома брома боронатным сложным эфиром может быть проведено в условиях катализа палладием [Tetrahedron (2002), 58, 9633-95]. Стадии образования гидроксисложного эфира, получения α-амидобороната и циклизации могут быть осуществлены путем проведения стадий синтеза, аналогичных представленным на Схеме 1, с образованием соединения XXIX.

Схема 7

Соединения формулы I, в которой R⁷ и R⁸ замещены на малеат (XXXV) или сукцинат (XXXVI), могут быть получены в соответствии с последовательностью, изображенной на Схеме 7. Малеатные промежуточные соединения, такие как XXXII, могут быть превращены в аналоги XXXV аналогично стадиям на Схеме 1. Аналоги XXXV могут быть далее трансформированы в соответствующие янтарные кислоты структуры XXXVI путем каталитического гидрирования. Малеатное промежуточное соединение XXXII может быть получено из промежуточного соединения XXXI путем последовательного удаления защиты TBS-группы, окисления до альдегида, присоединения винила по Гриньяру и повторного введения защитной группы простого эфира TBS. Промежуточное соединение XXXI может быть получено из защищенного пропаргилового спирта XXX в соответствии со способами, описанными в литературе [Tetrahedron, (2002), 58, 6545-54].

Соединения формулы I, в которой X представляет собой изостер карбоновой кислоты, могут быть получены в соответствии с протоколами, описанными в литературе (см. J. Med. Chem. 2011, 54,2529-2591, которая целиком включена сюда в качестве ссылки).

Иллюстративные примеры соединений

Синтез 2-(3R)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусной кислоты. Пример синтеза 1 представлен на Схеме 8 и в Примере 1.

Схема 8

Пример 1

Стадия 1

Круглодонную колбу с [Ir(cod)Cl]₂ (350 мг, 0,52 ммоль) и 1,4-бис(дифенилфосфанил)бутаном (446 мг, 1,04 ммоль) продувают аргоном. Прибавляют последовательно при комнатной температуре DCM (60 мл), пинаколборан (3 мл, 21 ммоль) и трет-бутил-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-пент-4-еноат XXXVII [J. Org. Chem., (1994), 59(17), 4760-4764] (5 г, 17,48 ммоль) в 5 мл DCM. Смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакцию гасят с помощью МеОН (3 мл) и воды (10 мл), продукт экстрагируют эфиром и высушивают.

Хроматография на силикагеле (100% DCM→50% EtOAc/DCM дает трет-бутил-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диокса-боролан-2-ил)пентаноат XXXVIII (5,5 г, 13,2 ммоль, выход 75,5%).

Стадия 2

К раствору трет-бутил-3-(трет-бутилдиметилсилилокси)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пентаноата XXXVIII (5,4 г, 13 ммоль) в ТГФ (25 мл) прибавляют (1S,2S,3R,5S)-2,6,6-триметилбицикло[3.1.1]гептан-2,3-диола (2,4 г, 14,3 моль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч и затем концентрируют под вакуумом. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (100% гексан→40% EtOAc/гексан), получая 1-(трет-бутокси)-3-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-1-оксо-6[(2S,6R)-2,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гексан-3-ил XXXIX (5,5 г, 11 ммоль, выход 84,6%).

Стадия 3

К раствору DCM (1,5 мл, 23,6 ммоль) в ТГФ (30 мл) при -100°C медленно прибавляют 2,5 М н-бутиллитий в гексане (5,19 мл, 1298 ммоль) под азотом, наливая его по внутренней стенке колбы, поддерживая при этом температуру ниже -90°C. Образующийся белый осадок перемешивают в течение 30 минут перед прибавлением 1-(трет-бутокси)-3-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-1-оксо-6-[(2S,6R)-2,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан4-ил]гексан-3-ила XXXIX (5,5 г, 11 ммоль) в ТГФ (10 мл) при -90°C. Затем прибавляют к реакционной смеси при -90°C хлорид цинка (23,6 мл, 0,5 М в диэтиловом эфире, 11,86 ммоль), и затем реакции позволяют нагреться до комнатной температуры, после чего ее перемешивают в течение 16 ч. Реакцию гасят с помощью насыщенного раствора хлорида аммония и фазы разделяют. Водную фазу затем экстрагируют диэтиловым эфиром (3×50 мл) и объединенные органические экстракты осушают над Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Концентрированный материал затем подвергают хроматографии (100% гексан→50% EtOAc/гексан), получая 6-(трет-бутокси)-4-[(трет-бутилдиметил-силил)окси]-1-хлор-6-оксо1-[(2S,6R)-2,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло-[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гексил XL (5,6 г, 10,5 ммоль, выход 95,4%).

Стадии 4-5

Хлорсодержащее промежуточное соединение XL (1,2 г, 2,33 ммоль) в ТГФ (10 мл) охлаждают до -78°C под азотом. Медленно прибавляют раствор LiHMDS (2,33 мл, 1,0 М в ТГФ, 2,33 ммоль) и реакционной колбе позволяют затем нагреться до комнатной температуры, при которой ее перемешивают в течение 16 ч. Метод A: Полученный материал охлаждают до -78°C и прибавляют 5-тиофенацетилхлорид и раствор перемешивают при -78°C в течение 1,5 ч. Затем охлаждающую баню убирают и раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1,5 ч. Реакцию гасят с помощью воды и экстрагируют дважды EtOAc. Органические слои объединяют, промывают водой, рассолом, осушают (Na₂SO₄) и концентрируют in vacuo, получая сырой продукт в виде бледно-желтого твердого вещества. Остаток подвергают хроматографии на колонке с диоксидом кремния (100% DCM→40% EtOAc/DCM), получая 570 мг 6-(трет-бутокси)-4-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-6-оксо-1-(тиофен-2-илацет-амидо)-1-[(2S,6R)-2,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]-гексилидина XLII в виде белого твердого вещества (570 мг, 0,92 ммоль, выход 39,5%).

Стадия 6

Метод D: К раствору амида XLII (250 мг, 0,40 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) прибавляют 10 мл 3 N HCl. Смесь нагревают до 110°C в течение 90 мин. Раствор охлаждают и разводят 10 мл воды и экстрагируют дважды 10 мл диэтилового эфира. Водный слой концентрируют с образованием сырого продукта в виде липкого остатка. Остаток промывают 5 мл воды, растворяют в 10% MeCN-воде и лиофилизируют, получая 2-((3R)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{1}$$ в виде белого порошка (100 мг, 0,337 ммоль, выход 84,1%). ¹H ЯМР (CD₃OD)δ ppm 0,94-1,35 (m, 1Н), 1,35-1,54 (m, 1Н), 1,54-1,68 (m, 1Н), 1,68-2,00 (m, 1Н), 2,20-2,67 (m, 3H), 3,93 (s, 1Н), 3,98 (s, 1Н), 4,02-4,23 (m, 2Н), 6,98-7,05 (m, 2Н), 7,32-7,36 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₂H₁₆BNO₅S m/z 280 (100%) (M-H₂O)⁺.

Альтернативные процедуры для Стадий 5 и 6 изображены на Схеме 9.

Схема 9

Стадия 5, Метод B

К раствору кислоты (0,36 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°C под азотом прибавляют EDCI (86 мг, 0,45 ммоль) и НОВТ (48 мг, 0,36 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение 30 минут прибавляют последовательно при 0°C раствор бис-силиламидного промежуточного соединения XLI (0,3 ммоль) в DCM (2 мл), а затем N-метилморфолин (65 мкл, 0,6 ммоль). Реакционной колбе затем позволяют нагреться до комнатной температуры. После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи, реакционную смесь промывают водой, затем рассолом, осушают (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют под вакуумом. Остаток очищают хроматографией на колонке, получая промежуточное соединение XLIII.

Стадия 5, Метод C

Раствор бис-силиламида XLI (0,5 ммоль) и кислоты в сухом DCM (10 мл) охлаждают до 0°C. Потом прибавляют по каплям DIPEA (1,5 ммоль), а затем HATU (0,75 ммоль). Смеси затем позволяют нагреться до комнатной температуры. После того, как ТСХ покажет полное превращение исходных материалов (ок. 3 ч), реакцию дополнительно разводят DCM (20 мл). Реакционную смесь промывают водой (3×5 мл), рассолом (10 мл) и осушают над Na₂SO₄. После удаления растворителя, остаток подвергают флеш-хроматографии на колонке, получая промежуточное соединение XLIII.

Стадия 6, Метод E

К раствору амида (XLIII) (0,1 ммоль) в дихлорэтане (2 мл) при 0°C прибавляют предварительно охлажденную 90% водн. TFA (4 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь испаряют in vacuo, подвергают азеотропной перегонке с MeCN (3×5 мл) и остаток тритурируют с эфиром (5 мл). Выделенный продукт фильтруют, растворяют в смеси диоксан-вода и высушивают вымораживанием с получением конечного продукта XLIV в виде пушистого твердого вещества.

Следующие соединения получают в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1 выше, с использованием методов A и D.

2-((3R)-2-Гидрокси-3-(2-фенилацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусная кислота $$\underset{\_}{2}$$ . ¹H ЯМР (CD3OD) δ ppm 0,82-1,33 (m, 1Н), 1,33-1,51 (m, 1Н), 1,51-1,68 (m, 1Н), 1,69-2,00 (m, 1Н), 2,14-2,34 (m, 1Н), 2,34-2,69 (m, 2Н), 3,74-3,76 (m, 2Н), 3,98-4,20 (m, 1Н), 7,22-7,41 (m, 5Н); ESIMS, определено для C₁₄H₁₈BNO₅ m/z 274 (100%) (M-H₂O)⁺.

2-((3R)-3-Ацетамидо-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусная кислота $$\underset{\_}{3}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,07-1,36 (m, 1Н), 1,36-1,59 (m, 1Н), 1,59-1,73 (m, 1Н), 1,73-2,09 (m, 1Н), 2,15-2,16 (d, 3H), 2,35-2,69 (m, 3H), 4,01-4,23 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₈H₁₄BNO₅ m/z 198 (100%) (M-H₂O)⁺.

2-((3R)-3-(Циклопропанкарбоксамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусная кислота $$\underset{\_}{4}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 0,98-1,32 (m, 5Н), 1,32-1,67 (m, 2Н), 1,67-2,06 (m, 2Н), 2,27-2,66 (m, 3H), 3,98-4,16 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₀H₁₆BNO₅ m/z 224 (100%) (M-H₂O)⁺.

Следующие соединения получают, исходя из энантиомерно чистого (R)-трет-бутил-3-гидроксипент-4-еноата (J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 4175-4177) в соответствии с процедурой, описанной выше в Примере 1.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусная кислота $$\underset{\_}{5}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 0,97-1,11 (q, 1Н), 1,47-1,69 (m, 2Н), 1,69-1,80 (m, 1Н), 2,21-2,33 (td, 1Н), 2,33-2,41 (dd, 1Н), 2,58-2,67 (m, 1Н), 3,97 (s, 2Н), 4,06-4,14 (m, 1Н), 6,97-7,04 (m, 1Н), 7,04-7,08 (m, 1Н), 7,34-7,38 (dd, 1Н); ESIMS, определено для C₁₂H₁₆BNO₅S m/z 280 (100%) (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(2-фенилацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусная кислота $$\underset{\_}{6}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 0,86-1,02 (m, 1Н), 1,44-1,53 (dd, 1Н), 1,53-1,66 (td, 1Н), 1,68-1,78 (m, 1Н), 2,17-2,26 (dd, 1Н), 2,26-2,36 (dd, 2Н), 3,75 (s, 2H), 4,02-4,12 (m, 1H), 7,22-7,40 (m, 5H); ESIMS, определено для C₁₄H₁₈BNO₅ m/z 274 (100%) (M-H₂O)⁺.

Следующие соединения получают в соответствии с процедурой, описанной выше в Примере 1, начиная с энантиомерно чистого (R)-трет-бутил-3-гидроксипент-4-еноата (J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 4175-4177) с использованием методов B и D.

2-((3R,6S)-3-((3)-2-Амино-2-фенилацетамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{33}$$ выделяют в виде HCl соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,24-1,27 (m, 1Н), 1,51-1,72 (m, 3H), 2,45-2,50 (dd, J=5 Гц, J=5 Гц, 1H), 2,55-2,63 (dd, J=2 Гц, J=3 Гц, 1H), 3,66-3,71 (m, 1Н), 4,38-4,53 (m, 1Н), 4,99-5,09 (d, 1H), 7,48-7,56 (m, 5H); ESIMS, определено для C₁₄H₁₉BN₂O₅ m/z 289 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(3-Аминопропанамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусную кислоту $$\underset{\_}{34}$$ выделяют в виде HCl соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,24-1,29 (td, J=13 Гц, J=3 Гц, 1H), 1,55-1,62 (td, J=14 Гц, J=4 Гц, 1H), 1,68-1,72 (m, 1Н), 1,79-1,82 (m, 1Н), 2,43-2,47 (dd, J=6 Гц, J=6 Гц, 2H), 2,70-2,74 (m, 2H), 2,83-2,86 (t, J=7 Гц, 2H), 3,26-3,29 (t, J=7 Гц, 1H), 4,10-4,16 (m, 1H); ESIMS, определено для C₉H₁₇BN₂O₅ m/z 227 (M-H₂O)⁺.

(S)-2-Амино-5-((3R,6S)-6-(карбоксиметил)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-3-ил-амино)-5-оксопентановую кислоту $$\underset{\_}{35}$$ выделяют в виде HCl соли. ₁H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,50-1,66 (m, 2Н), 1,66-1,84 (m, 2Н), 2,10-2,20 (sex, J=8 Гц, 1Н), 2,20-2,29 (m, 1Н), 2,40-2,47 (m, 2Н), 2,55-2,59 (q, J=7 Гц, 1Н), 2,69-2,75 (m, 1Н), 2,94-2,98 (td, J=9 Гц, J=2 Гц, 1Н), 3,99-4,12 (m, 2Н); ESIMS, определено для C₁₁H₁₉BN₂O₇ m/z 302.8 (M+H).

2-((3R,6S)-3-(2-Амино-4-(метилтио)бутанамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{41}$$ выделяют в виде HCl соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,45-1,65 (m, 1Н), 1,65-1,75 (m, 1Н), 1,75-1,86 (m, 1Н), 1,86-2,05 (m, 1Н), 2,09-2,20 (m, 4Н), 2,46-2,73 (m, 6Н), 2,84-2,86 (t, J=6 Гц, 1Н), 3,99-4,02 (t, J=7 Гц, 1Н), 4,38-4,46 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₁H₂₁BN₂O₅S m/z 287 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(2-(3,5-Дифторфенил)ацетамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6 -ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{66}$$ выделяют в виде HCl соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 0,98-1,07 (q, J=13 Гц, 1Н), 1,55-1,68 (m, 2Н), 1,73-1,79 (dd, J=6 Гц, J=3 Гц, 1Н), 2,22-2,26 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1Н), 2,33-2,38 (dd, J=13 Гц, J=7 Гц, 1Н), 2,62-2,63 (m, 1Н), 3,78 (s, 2Н), 4,05-4,12 (m, 1Н), 6,88-5,93 (tt, J=5 Гц, J=2 Гц, 1Н), 6,97-7,01 (dd, J=5 Гц, J=2 Гц, 2Н); ESIMS, определено для C₁₄H₁₆BF₂NO₅ m/z 310,1 (M-H₂O)⁺.

Следующие соединения получают в соответствии с процедурой, описанной выше в Примере 1, начиная с энантиомерно чистого (R)-трет-бутил-3-гидроксипент-4-еноата (J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 4175-4177) с использованием методов A и E.

2-((3R,6S)-3-Бензамидо-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусная кислота $$\underset{\_}{37}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,10-1,19 (q, J=11 Гц, 1Н), 1,60-1,65 (dd, J=14 Гц, J=3 Гц, 1Н), 1,71-1,80 (td, J=9 Гц, J=3 Гц, 1Н), 1,91-1,96 (d, J=14 Гц, 1Н), 2,32-2,38 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1Н), 2,44-2,49 (dd, J=15 Гц, J=7 Гц, 1Н), 2,82-2,84 (d, J=4 Гц, 1Н), 4,10-4,17 (m, 1Н), 7,57-7,60 (t, J=8 Гц, 2Н), 7,70-7,73 (t, J=8 Гц, 1Н), 8,00-8,02 (d, J=8 Гц 2Н); ESIMS, определено для C₁₃H₁₆BNO₅ m/z 260 (M-H₂O)⁺.

Следующие соединения получают в соответствии с процедурой, описанной выше в Примере 1, начиная с энантиомерно чистого (R)-трет-бутил-3-гидроксипент-4-еноата (J. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 4175-4177) с использованием методов B и E.

2-((Z)-1-(2-Аминотиазол-4-ил)-2-((3R,6S)-6-(карбоксиметил)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-3-иламино)-2-оксоэтилиденаминоокси)-2-метилпропановую кислоту $$\underset{\_}{36}$$ выделяют в виде трифторацетатной (TFA) соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,60 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,62-1,75 (m, 2Н), 1,77-1,82 (m, 1Н), 1,86-1,91 (m, 1Н), 2,55-2,58 (t, J=6 Гц, 2Н), 2,90-2,94 (t, J=6 Гц, 2Н), 4,37-4,42 (m, 1Н), 7,11 (s, 1Н); ESIMS, определено для C₁₅H₂₁BN₄O₈S m/z 411 (М-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(3-фенилпропанамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусная кислота $$\underset{\_}{38}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 0,78-0,87 (q, J=13 Гц, 1Н), 1,40-1,46 (dd, J=10 Гц, J=3 Гц, 1Н), 1,54-1,62 (dt, J=8 Гц, J=4 Гц, 1Н), 1,63-1,70 (d, J=13 Гц, 1Н), 2,24-2,29 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1H), 2,36-2,40 (dd, J=8 Гц, J=3 Гц, 1H), 2,53-2,56 (d, J=3,2 Гц, 1H), 2,74-2,78 (t, J=7 Гц, 2H), 2,98-3,01 (t, J=6 Гц, 2H), 3,90-4,03 (m, 1H), 7,18-7,23 (m, 1H), 7,25-7,33 (m, 4H); ESIMS, определено для C₁₅H₂₀BNO₅ m/z 288 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(2-(2-Аминотиазол-4-ил)ацетамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{39}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,25-1,36 (m, 1Н), 1,63-1,76 (m, 3H), 2,40-2,43 (d, J=6 Гц, 2H), 2,68-2,70 (m, 1Н), 3,72 (s, 2Н), 4,17-4,21 (m, 1Н), 6,69 (s, 1Н); ESIMS, определено для C₁₁H₁₆BN₃O₅S m/z 296.1 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-((Z)-2-(2-Аминотиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{40}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,56-1,67 (m, 2Н), 1,76-1,81 (m, 1Н), 1,86-1,90 (m, 1Н), 2,50-2,54 (dd, J=17 Гц, J=6 Гц, 1H), 2,59-2,64 (dd, J=16 Гц, J=7 Гц, 1H), 2,86-2,90 (t, J=7 Гц, 1H), 4,22 (s, 3H), 4,34-4,37 (m, 1Н), 7,86 (s, 1Н); ESIMS, определено для C₁₂H₁₇BN₄O₆S m/z 339,1 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(2-Амино-3-(пиридин-3-ил)пропанамидо)-2-гидрокси-1,2-окса-боринан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{42}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD/CF₃O₂D) δ ppm 1,43-1,56 (m, 2Н), 1,72-1,83 (m, 2Н), 2,37-2,42 (m, 1Н), 2,53-2,57 (t, J=6 Гц, 1Н), 2,89-2,93 (t, J=7 Гц, 1Н), 3,37-3,43 (m, 2Н), 4,17-4,21 (t, J=7 Гц, 1Н), 4,41-4,46 (m, 1Н), 8,06-8,10 (dd, J=6 Гц, J=3 Гц, 1Н), 8,53-8,57 (t, J=M Гц, 1H), 8,80-8,81 (brd, J=4 Гц, 1H), 8,84-8,87 (brd, J=6 Гц, 1H); ESIMS, определено для C₁₄H₂₀BN₃O=m/z 304,2 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(2-(пиридин-3-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусную кислоту $$\underset{\_}{43}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,15-1,20 (m, 1Н), 1,59-1,63 (m, 1Н), 1,68-1,74 (m, 2Н), 2,29-2,34 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 2Н), 2,66-2,68 (m, 1Н), 3,94 (s, 2Н), 4,11-4,18 (m, 1Н), 7,82-7,85 (dd, J=8 Гц, J=6 Гц, 1Н), 8,30-8,32 (d, J=8 Гц, 1Н), 8,68-8,70 (brd, J=5 Гц, 1Н), 8,72-8,75 (brs, 1Н); ESIMS, определено для C₁₃H₁₇BN₂O₅ m/z 275 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-((5)-пиперидин-2-карбоксамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{45}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,44-1,51 (m, 1Н), 1,54-1,80 (m, 5Н), 1,80-1,91 (m, 2Н), 1,91-1,98 (brd, J=12 Гц, 1Н), 2,16-2,21 (dd, J=13 Гц, J=7 Гц, 1Н), 2,49-2,57 (поп, J=7 Гц, 2Н), 2,75-2,78 (t, J=6 Гц, 1Н), 2,98-3,03 (dt, J=13 Гц, J=3 Гц, 1Н), 3,36-3,39 (d, J=13 Гц, 1Н), 3,79-3,82 (dd, J=12 Гц, J=4 Гц, 1Н), 4,34-4,38 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₂H₂₁BN₂O₅ m/z 267 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-((S)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоксамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{46}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,43-1,51 (m, 1Н), 1,56-1,63 (m, 1Н), 1,75-1,83 (m, 1Н), 1,86-1,94 (m, 1Н), 2,46-2,57 (dq, J=16 Гц, J=6 Гц, 2Н), 2,82-2,86 (t, J=7 Гц, 1Н), 3,18-3,24 (dd, J=17 Гц, J=12 Гц, 1Н), 3,36-3,41 (dd, J=17 Гц, J=5 Гц, 1Н), 4,21-4,24 (dd, J=18 Гц, J=13 Гц, 1Н), 4,36-4,40 (m, 1Н), 4,42 (s, 2Н), 7,23-7,25 (m, 1Н), 7,27-7,33 (m, 3H); ESIMS, определено для C₁₆H₂₁BN₂O₅ m/z 315 (M-H₂O)⁺.

После метода E, пока соединение находится еще в 90% водн. трифторуксусной кислоте (10 мл), прибавляют 10% Pd/C (50 мг). Реакционную смесь перемешивают под водородом в течение 6 ч, фильтруют через целит и промывают дихлорэтаном (10 мл). Фильтрат концентрируют под вакуумом и подвергают азеотропной перегонке с дихлорэтаном (2×10 мл). Тритурирование с эфиром дает осадок, который фильтруют и промывают эфиром (5 мл) и высушивают, получая 2-((3R,6S)-3-((R)-2-амино-5-гуанидинопентанамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{47}$$ в виде TFA-соли (50 мг) в виде беловатого твердого вещества. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,39-1,46 (m, 1Н), 1,52-1,58 (m, 1Н), 1,66-1,77 (m, 2Н), 1,77-1,84 (m, 1Н), 1,87-1,95 (m, 3H), 2,34-2,38 (dd, J=M Гц, J=3 Гц, 1Н), 2,63-2,68 (dd, J=17 Гц, J=7 Гц, 1Н), 2,94-2,97 (dd, J=10 Гц, J=6 Гц, 1Н), 3,20-3,24 (dt, J=7 Гц, J=2 Гц, 2Н), 3,86-3,88 (t, J=6 Гц, 1Н), 4,27-4,31 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₂H₂₄BN₅O₅ m/z 312.2 (М-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(2-(2-Аминоэтилтио)ацетамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{48}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,38-1,46 (m, 1Н), 1,46-1,54 (m, 1Н), 1,71-1,78 (m, 1Н), 1,84-1,92 (m, 1Н), 2,30-2,34 (dd, J=16 Гц, J=4 Гц, 1Н), 2,56-2,61 (dd, J=16 Гц, J=6 Гц, 1Н), 2,80-2,83 (t, J=6 Гц, 1Н), 2,89-2,97 (поп, J=7 Гц, 2Н), 3,17-3,24 (поп, J=5 Гц, 2Н), 3,37 (s, 2Н), 4,15-4,20 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₀H₁₉BN₂O₅S m/z 273 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(2-(пиридин-4-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусную кислоту $$\underset{\_}{49}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,17-1,27 (m, 1H), 1,60-1,67 (m, 1H), 1,67-1,76 (m, 2H), 2,32-2,43 (m, 2H), 2,68-2,70 (t, J=4 Гц, 2H), 3,22-3,26 (t, J=7 Гц, 1H), 4,15-4,21 (m, 1H), 7,94-7,96 (d, J=7 Гц, 2H), 8,75-8,79 (d, J=6 Гц, 2H); ESIMS, определено для C₁₃H₁₇BN₂O₅ m/z 275,1 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(2-(4-Аминоциклогексил)ацетамидо)-2-гидрокси-1,2-окса-боринан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{50}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,15-1,25 (m, 1Н), 1,44-1,88 (m, 10H), 2,05-2,13 (m, 1Н), 2,19-2,21 (d, J=8 Гц, 1Н), 2,30-2,36 (dd, J=6 Гц, 1Н), 2,38-2,47 (m, 3H), 2,61-2,63 (brd, J=3 Гц, 1Н), 3,18-3,22 (t, J=7 Гц, 1Н), 4,04-4,11 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₄H₂₅BN₂O₅ m/z 295,1 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(2-(1-Аминоциклогексил)ацетамидо)-2-гидрокси-1,2-окса-боринан-6-ил)уксусную кислоту 51 выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,23-1,34 (m, 1Н), 1,34-1,48 (m, 1Н), 1,48-1,86 (m, 12Н), 2,40-2,50 (m, 2Н), 2,65-2,83 (m, 2Н), 3,22-3,26 (t, J=7 Гц, 1Н), 4,11-4,18 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₄H₂₅BN₂O₅ m/z 295 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(2-((R)-пиперидин-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{52}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,27-1,37 (m, 1Н), 1,49-1,80 (m, 7Н), 1,86-2,00 (brdd, J=11 Гц, 3H), 2,44-2,46 (d, J=6 Гц, 2Н), 2,61-2,65 (m, 1Н), 2,72-2,73 (d, J=6 Гц, 1Н), 3,03-3,09 (t, J=13 Гц, 1Н), 3,41-3,45 (d, J=13 Гц, 1Н), 3,47-3,56 (m, 1Н), 4,15-4,21 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₃H₂₃BN₂O₅ m/z 281 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(2-((3)-пиперидин-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{53}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,26-1,35 (m, 1Н), 1,48-1,59 (m, 1Н), 1,59-1,68 (m, 2Н), 1,68-1,81 (m, 3H), 1,87-2,00 (m, 3H), 2,45-2,47 (d, J=7 Гц, 2Н), 2,65-2,67 (t, J=4 Гц, 1Н), 2,74-2,76 (t, J=6 Гц, 2Н), 3,03-3,08 (dt, J=13 Гц, J=3 Гц, 1Н), 3,42-3,46 (brd, J=13 Гц, 1Н), 3,47-3,55 (m, 1Н), 4,12-4,19 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₃H₂₃BN₂O₅ m/z 298,1 (М+Н).

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(2-(2-фенил-1Н-имидазол-1-ил)ацетамидо)-1,2-окса-боринан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{54}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,36-1,44 (m, 1Н), 1,44-1,54 (m, 1Н), 1,66-1,80 (m, 2Н), 2,15 (s, 1Н), 2,48-2,51 (m, J=6 Гц, 1Н), 2,72-2,75 (t, J=7 Гц, 1Н), 4,33-4,39 (m, 1Н), 4,94-5,05 (m, 2Н), 7,65-7,76 (m, 7Н); ESIMS, определено для C₁₇H₂₀BN₃O₅ m/z 358,2 (M+H).

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(3-(2-метил-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)пропан-амидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусная кислота $$\underset{\_}{55}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 0,92-1,00 (m, 1Н), 1,47-1,53 (m, 1Н), 1,58-1,62 (m, 2Н), 2,31-2,33 (d, J=7 Гц, 2Н), 2,50-2,52 (t, J=4 Гц, 1Н), 2,97 (s, 3H), 3,08-3,20 (m, 2Н), 4,04-4,10 (m, 1Н), 4,77-4,81 (t, J=6 Гц, 2Н), 7,61-7,68 (m, 2Н), 7,75-7,78 (d, J=7 Гц, 1Н), 7,93-7,95 (d, J=7 Гц, 1Н); ESIMS, определено для C₁₇H₂₂BN₃O₅ m/z 342,2 (М-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(4-((1Н-Тетразол-1-ил)метил)бензамидо)-2-гидрокси-1,2-окса-боринан-6-ил)уксусная кислота $$\underset{\_}{56}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,10-1,21 (m, 1Н), 1,58-1,64 (m, 1Н), 1,70-1,79 (m, 1Н), 1,89-1,96 (m, 1Н), 2,31-2,36 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1Н), 2,41-2,47 (m, 1Н), 2,80-2,83 (brd, J=4 Гц, 1Н), 4,11-4,17 (m, 1Н), 5,83 (s, 2Н), 7,53-7,55 (d, J=8 Гц, 2Н), 8,02-8,05 (d, J=8 Гц, 2Н), 9,30 (s, 1Н); ESIMS, определено для C₁₅H₁₈BN₅O₅ m/z 342,0 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(2-(пиридин-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусную кислоту $$\underset{\_}{57}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,21-1,32 (m, 1Н), 1,59-1,67 (m, 2Н), 1,67-1,75 (m, 2Н), 2,29-2,40 (m, 3H), 2,67-2,72 (m, 1Н), 4,14-4,21 (m, 1Н), 7,62-7,66 (t, J=6 Гц, 1Н), 7,70-7,73 (d, J=8 Гц, 1Н), 8,14-8,18 (t, J=8 Гц, 1Н), 8,65-8,67 (d, J=5 Гц, 1Н); ESIMS, определено для C₁₃H₁₇BN₂O₅ m/z 275,1 (M-H₂O)⁺.

Следующие соединения получают в соответствии с процедурой, описанной выше в Примере 1, с использованием методов C и E.

2-((3R,6S)-3-(1-Циклопропил-6-фтор-4-оксо-7-(пиперазин-1-ил)-1,4-дигидро-хинолин-3-карбоксамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{58}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,14-1,29 (m, 3H), 1,39-1,44 (brd, J=7 Гц, 2Н), 1,56-1,63 (dd, J=14 Гц, J=3 Гц, 1Н), 1,70-1,80 (m, 1Н), 1,92-1,99 (d, J=14 Гц, 1Н), 2,33-2,38 (dd, J=15 Гц, J=Q Гц, 1Н), 2,43-2,48 (dd, J=15 Гц, J=7 Гц, 1Н), 2,85-2,86 (d, J=3 Гц, 1H), 3,46-3,52 (m, 4H), 3,59-3,64 (m, 4H), 3,73-3,79 (m, 1H), 4,08-4,15 (m, 1H), 7,66-7,67 (d, J=7 Гц, 1H), 8,00-8,03 (d, J=13 Гц, 1H), 8,81 (s, 1H); ESIMS, определено для C₂₃H₂₈BFN₄O₆ m/z 469,2 (M-H₂O)⁺.

2-[(3R,6S)-2-Гидрокси-3-[(2S,3S,5R)-3-метил-4,4,7-триоксо-3-(1Н-1,2,3-триазол-1-илметил)-4λ⁶-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-амидо]-1,2-оксаборинан-6-ил]уксусная кислота $$\underset{\_}{59}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,43 (s, 3H), 1,49-1,57 (m, 1Н), 1,72-1,81 (m, 3H), 2,51-2,56 dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1Н), 2,62-2,67 (dd, J=15 Гц, J=8 Гц, 1Н), 2,80-2,84 (m, 1Н), 3,41-3,44 (dd, J=17 Гц, J=2 Гц, 1Н), 3,63-3,67 (dd, J=16 Гц, J=5 Гц, 1Н), 4,37-4,44 (m, 1Н), 4,61 (s, 1Н), 4,90-4,94 (dd, J=5 Гц, J=2 Гц, 1Н), 5,16-5,19 (d, J=15 Гц, 1Н), 5,25-5,28 (d, J=15 Гц, 1Н), 7,77 (s, 1Н), 8,07 (s, 1Н); ESIMS, определено для C₁₆H₂₂BN₅O₈S m/z 438 (М-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(3-(5-фенил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пропанамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусная кислота $$\underset{\_}{60}$$ . ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,10-1,21 (m, 1Н), 1,50-1,58 (dd, J=14 Гц, J=3 Гц, 1Н), 1,59-1,68 (dt, J=11 Гц, J=5 Гц, 1Н), 1,74-1,81 (brd, J=13 Гц, 1Н), 2,22-2,26 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1Н), 2,30-2,34 (dd, J=15 Гц, J=7 Гц, 1Н), 2,63-2,64 (d, J=4 Гц, 1Н), 3,01-3,12 (sex, J=7 Гц, 2Н), 3,33-3,43 (sex, J=7 Гц, 2Н), 4,03-4,09 (m, 1Н), 7,54-7,62 (m, 3H), 8,03-8,05 (d, J=8 Гц, 2Н); ESIMS, определено для C₁₇H₂₀BN₃O₆ m/z 356,1 (M-H₂O)⁺.

2-((3R,6S)-3-(2-(2-Аминопиридин-4-ил)ацетамидо)-2-гидрокси-1,2-окса-боринан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{61}$$ выделяют в виде TFA-соли. ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,58-1,66 (m, 1H), 1,67-1,78 (m, 3H), 2,31-2,36 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1H), 2,39-2,44 (dd, J=15 Гц, J=7 Гц, 1H), 2,65-2,68 (t, J=4 Гц, 1H), 4,12-4,19 (m, 1H), 6,85-6,87 (d, J=7 Гц, 1H), 6,99 (s, 1H), 7,81-7,82 (d, J=7 Гц, 1H); ESIMS, определено для C₁₃H₁₈BN₃O₅ m/z 290,1 (M-H₂O)⁺.

После метода E, реакционную смесь испаряют in vacuo, подвергают азеотропной перегонке с MeCN (3×5 мл) и остаток тритурируют с эфиром (5 мл). Осадок фильтруют, растворяют в смеси диоксан-вода и высушивают вымораживанием, получая 2-((3R)-3-((2)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-((1,5-дигидрокси-4-оксо-1,4-дигидропиридин-2-ил)метоксиимино)ацетамидо)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{62}$$ как TFA-соль (25 мг) в виде пушистого твердого вещества. ESIMS, определено для C₁₇H₂₀BN₅O₉S m/z 464,0 (M-H₂O)⁺.

Синтез 2-((3R)-3-амино-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусной кислоты гидрохлорида 7. Пример синтеза 7 изображен на Схеме 10 и в Примере 2.

Схема 10

Пример 2

Стадия 1

6-(трет-Бутокси)-4-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-1-хлор-6-оксо-1-[(28,6Р)-2,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.02,6]декан-4-ил]гексан XLI (515 мг, 0,97 ммоль) в ТГФ (5 мл) охлаждают до -78°C под азотом. Медленно прибавляют раствор LiHMDS (1 мл, 1,0 М в ТГФ, 1 ммоль, 1,0 экв.) и реакционной колбе затем позволяют нагреться до комнатной температуры, при которой смесь перемешивают в течение 16 ч. Желтый раствор концентрируют при пониженном давлении, получая маслянистую жидкость. После прибавления к маслянистой жидкости гексана (10 мл) образуется осадок. Его затем фильтруют через целит и фильтрат концентрируют при пониженном давлении с образованием 1-[бис(триметилсилил)амино]-6-(трет-бутокси)-4-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-6-оксо-1-[(2S,6R)-2,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]-гексила XLII.

Стадия 2

Процедура идентична приведенной в Примере 1, Метод D. Соединение $$\underset{\_}{7}$$ выделяют в виде белого порошка (120 мг, 0,573 ммоль, выход 59,1%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,43-1,66 (m, 1Н), 1,66-1,79 (m, 1Н), 1,79-1,97 (m, 1Н), 1,97-2,30 (m, 1Н), 2,40-2,71 (m, 3H), 4,34-4,54 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₆H₁₂BNO₄ m/z 174 (63%) (M+H).

Синтез 2-((3R)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборепан-7-ил)уксусной кислоты $$\underset{\_}{63}$$ . Пример синтеза $$\underset{\_}{63}$$ представлен на Схеме 11 и в Примере 3.

Схема 11

Пример 3

Стадия 1

К раствору трет-бутил-3-гидроксипент-4-еноата XLVI (674 мг, 3,92 ммоль) в DCM (15 мл) прибавляют диизопропилаллилборонат XLV (2 г, 11,76 ммоль) через шприц. К смеси затем прибавляют катализатор Граббса первого поколения (260 мг, 0,31 ммоль, 7,5% мол.) и сосуд продувают аргоном. Реакцию нагревают при 65°C под азотом в течение 18 ч. Смесь концентрируют под вакуумом и остаток очищают флеш-хроматографиею на колонке (100% гексан→30% EtOAc/гексан), получая трет-бутил-2-(2-гидрокси-3,6-дигидро-2Н-1,2-оксаборинин-6-ил)ацетат XLVII (770 мг, 3,63 ммоль, выход 92,7%).

Стадия 2

К раствору трет-бутил-2-(2-гидрокси-3,6-дигидро-2Н-1,2-оксаборинин-6-ил)-ацетата XLVII (670 мг, 3,16 ммоль) в EtOAc (45 мл) прибавляют 10% Pd/C (135 мг). Сосуд откачивают путем подведения вакуума и продувают газообразным водородом. Реакцию перемешивают под водородом в течение 2 ч. Смесь фильтруют через слой целита, который промывают дополнительным количеством EtOAc (15 мл). Концентрирование фильтрата дает чистый трет-бутил-2-(2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)ацетат XLVIII (641 мг, 3,00 ммоль, выход 94,8%).

Стадия 3

К раствору трет-бутил-2-(2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)ацетата XLVIII (641 мг, 3,00 ммоль) в ТГФ (20 мл) прибавляют (1S,2S,3R,5S)-2,6,6-триметилбицикло[3.1.1]гептан-2,3-диол (509 мг, 3 моль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч и концентрируют под вакуумом. Остаток очищают хроматографией на колонке (100% гексан→40% EtOAc/гексан) на силикагеле, получая трет-бутил-3-гидрокси-6-[(1R,2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гексаноат XLIX (790 мг, 2,16 ммоль, выход 71,9%).

Стадия 4

К раствору спирта XLIX (790 мг, 2,16 ммоль) в ДМФ (7,5 мл) прибавляют имидазол (548 мг, 8,06 ммоль) а затем TBDMSCI (580 мг, 3,87 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч и концентрируют под вакуумом. Белую суспензию растворют в 100 мл EtOAc и промывают насыщенным раствором NaHCO₃ (20 мл), водой (2×10 мл) и осушают (Na₂SO₄). Органический экстракт концентрируют под вакуумом и остаток очищают хроматографией на колонке (100% гексан→30% EtOAc/гексан) на силикагеле, получая трет-бутил-3-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-6-[(1R,2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гексаноат L (1 г, 2,08 ммоль, выход 96,3%).

Стадия 5

К раствору DCM (0,26 мл, 4,16 ммоль) в ТГФ (5 мл) при -100°C медленно прибавляют под азотом по внутренней стенке колбы 2,5 М н-бутиллитий в гексане (1 мл, 2,5 ммоль), поддерживая при этом температуру ниже -90°C. Образующийся белый осадок перемешивают в течение 30 минут перед прибавлением L (1 г, 2,08 ммоль) в ТГФ (3 мл) при -9°C. Затем прибавляют к реакционной смеси хлорид цинка (5 мл, 0,5 М в ТГФ, 2,5 ммоль) при -90°C и затем реакции позволяют нагреться до комнатной температуры, при которой ее перемешивают в течение 16 ч. Реакцию гасят с помощью насыщенного раствора хлорида аммония и фазы разделяют. Водную фазу затем экстрагируют диэтиловым эфиром (2×10 мл) и объединенные органические экстракты осушают над Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Концентрированный материал затем подвергают хроматографии (100% гексан→20% EtOAc-гексан), получая трет-бутил-(78)-3-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-7-хлор-7-[(1R,2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гептаноат LI (740 мг, 1,40 ммоль, выход 67,2%).

Стадия 6

Хлорсодержащее промежуточное соединение LI (727 мг, 1,37 ммоль) в ТГФ (7 мл) охлаждают до -78°C под азотом. Медленно прибавляют раствор 1М LiHMDS в ТГФ (1,37 мл, 1,37 ммоль) при -78°C. После завершения прибавления реакционной колбе позволяют нагреться до комнатной температуры. После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч, реакционную смесь концентрируют под вакуумом и прибавляют гексан (20 мл). Выпавшие в осадок соли лития отделяют фильтрацией через слой целита, промывают дополнительным количеством гексана и объединенные фильтраты концентрируют под вакуумом, получая сырой трет-бутил-(7S)-7-[бис(триметилсилил)амино]-3-[(трет-бутил-диметилсилил)окси]-7-[(1R,2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло-[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гептаноат LII.

Стадия 7

К перемешиваемому раствору 2-тиофенуксусной кислоты (232 мг, 1,64 ммоль) в DCM (45 мл) при 0°C под азотом прибавляют EDCI (391 мг, 2,05 ммоль) и HOBT (221 мг, 1,64 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение 30 минут, прибавляют по очереди при 0°C раствор бис-силиламидного промежуточного соединения LII (1,37 ммоль) в DCM (10 мл), а затем N-метилморфолин (0,3 мл, 2,74 ммоль). После завершения прибавления, реакционной колбе дают нагреться до комнатной температуры. После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи, реакционную смесь промывают водой, осушают и концентрируют под вакуумом. Остаток очищают хроматографией на колонке (100% DCM→50% EtOAc/DCM), получая трет-бутил-(7S)-3-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-7-[(1R,2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гептаноат LIII (340 мг, 0,54 ммоль, выход 39,4% для 2 стадий).

Стадия 8

К раствору амида I-III (300 мг, 0,47 ммоль) в 1,4-диоксане (9 мл) прибавляют 9 мл 3 N HCl. Реакционную смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 90 минут. Охлажденную реакционную смесь затем разводят водой (10 мл) и экстрагируют диэтиловым эфиром (2×10 мл). Водный слой концентрируют с образованием липкого твердого вещества, которое подвергают азеотропной перегонке с MeCN (3×10 мл). Остаток растворяют в 40% диоксане-воде и лиофилизируют, получая 2-((3R)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)-ацетамидо)-1,2-оксаборепан-7-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{63}$$ в виде беловатого твердого вещества (100 мг, 32,1 ммоль, выход 68,4%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,21-1,38 (m, 2Н), 1,42-1,60 (m, 2Н), 1,60-1,72 (m, 1Н), 1,80-1,94 (m, 1Н), 2,32-2,47 (m, 2Н), 2,54-2,58 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1H), 3,97-3,98 (d, J=8 Гц, 1H), 4,05 (s, 2Н), 6,97-7,01 (m, 1Н), 7,02-7,10 (m, 1Н), 7,33-7,37 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₃H₁₈BNO₅S m/z 294,0 (M-H₂O)⁺.

Синтез 2-((3R)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-2,3,4,7-тетрагидро-1,2-оксаборепин-7-ил)уксусной кислоты $$\underset{\_}{64}$$ . Пример синтеза $$\underset{\_}{64}$$ представлен на Схеме 12 и в Примере 4.

Схема 12

Пример 4

Стадия 1

К перемешиваемому раствору трет-бутил-2-(2-гидрокси-3,6-дигидро-2Н-1,2-оксаборинин-6-ил)ацетата XLVII (770 мг, 4,58 ммоль) в ТГФ (25 мл) прибавляют (1S,2S,3R,5S)-2,6,6-триметилбицикло[3.1.1]гептан-2,3-диол (980 мг, 4,58 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч и концентрируют под вакуумом. Остаток очищают хроматографией на колонке (100% гексан→30% EtOAc/гексан) на силикагеле, получая трет-бутил-(4Z)-3-гидрокси-6-[(1R,2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]-гекс-4-еноат LIV (1 г, 2,75 ммоль, выход 59,9%).

Стадия 2

К раствору спирта LIV (650 мг, 1,78 ммоль) в ДМФ (10 мл) прибавляют имидазол (484 мг, 7,12 ммоль), а затем TBDMSCI (534 мг, 3,56 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч и концентрируют под вакуумом. Белую суспензию растворяют в 100 мл EtOAc и промывают водой (2×10 мл), рассолом и осушают (Na₂SO₄). Органический экстракт концентрируют под вакуумом и остаток очищают хроматографией на колонке (100% гексан→20% EtOAc/гексан) на силикагеле, получая трет-бутил-(4Z)-3-[(трет-бутилдиметил-силил)окси]-6-[(1R,2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]-декан-4-ил]гекс-4-еноат LV (800 мг, 1,67 ммоль, выход 93,9%).

Стадия 3

К раствору DCM (0,3 мл, 4,68 ммоль) в ТГФ (8 мл) при -100°C медленно прибавляют 2,5 М н-бутиллития в гексане (1,12 мл, 2,8 ммоль) под азотом и по внутренней стенке колбы, поддерживая при этом температуру ниже -90°C. Образующийся белый осадок перемешивают в течение 30 минут перед прибавлением LV (1,12 г, 2,34 ммоль) в ТГФ (3 мл) при -90°C и реакции позволяют нагреться до комнатной температуры, при которой ее перемешивают в течение 16 ч. Реакцию гасят с помощью насыщенного раствора хлорида аммония и фазы разделяют. Водную фазу затем экстрагируют диэтиловым эфиром (2×10 мл) и объединенные органические экстракты осушают над Na₂SO₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Концентрированный материал затем подвергают хроматографии (100% гексан→20% EtOAc/гексан), получая трет-бутил-(42,75)-3-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-7-хлор-7-[(1Р,2Р,68,8Р)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гепт-4-еноат LVI (820 мг, 1,56 ммоль, выход 66,5%).

Стадия 4

Хлорсодержащее промежуточное соединение LVI (790 мг, 1,49 ммоль) в ТГФ (10 мл) охлаждают до -78°C под азотом. Медленно прибавляют при -78°C раствор 1М LiHMDS в ТГФ (1,5 мл, 1,5 ммоль). После завершения прибавления, реакционной колбе позволяют нагреться до комнатной температуры. После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч, реакционную смесь концентрируют под вакуумом и прибавляют гексан (20 мл). Выпавшие в осадок соли лития фильтруют через слой целита, промывают дополнительным количеством гексана и объединенные фильтраты концентрируют под вакуумом, получая сырой трет-бутил-(4Z,7S)-7-[бис(триметилсилил)амино]-3-[(трет-бутилдиметилсилил)-окси]-7-[(1R,2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гепт-4-еноат LVII.

Стадия 5

К перемешиваемому раствору 2-тиофенуксусной кислот (252 мг, 1,78 ммоль) в DCM (35 мл) при 0°C под азотом прибавляют EDCI (426 мг, 2,23 ммоль) и HOBT (240 мг, 1,78 ммоль). После перемешивания при 0°C в течение 30 минут прибавляют поочередно при 0°C раствор неочищенного промежуточного соединения бис-силиламида LVII в DCM (10 мл), а потом N-метилморфолин (0,32 мл, 3 ммоль). После завершения прибавления, реакционной колбе позволяют нагреться до комнатной температуры. После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи, реакционную смесь промывают водой, осушают и концентрируют под вакуумом. Остаток очищают хроматографией на колонке (100% DCM→25% EtOAc/DCM), получая трет-бутил-(4Z,7S)-3-[(трет-бутилдиметилсилил)-окси]-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-7-[(1R)2R,6S,8R)-6,9,9-триметил-3,5-диокса-4-боратрицикло[6.1.1.0^2,6]декан-4-ил]гепт-4-еноат LVIII (600 мг, 0,95 ммоль, выход 63,7% для 2 стадий).

Стадия 6

Раствор амида LVIII (100 мг, 0,15 ммоль) в анизоле (5 мл) при 0°C обрабатывают предварительно охлажденной 90% водн. трифторуксусной кислотой (10 мл). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. Смесь испаряют in vacuo, подвергают азеотропной перегонке с MeCN (3×5 мл). Остаток озвучивают в воде (10 мл) и эфире (10 мл). Водную фазу отделяют, промывают эфиром (2×5 мл) и высушивают вымораживанием, получая твердое пушистое вещество 2-((3R)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-2,3,4,7-тетрагидро-1,2-оксаборепин-7-ил)уксусную кислоту 64 (15 мг, 0,05 ммоль, выход 32,3%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 2,23-2,35 (m, 2Н), 2,40-2,61 (m, 2Н), 2,76-2,83 (m, 1Н), 3,96-4,03 (m, 1Н), 4,10 (s, 2Н), 5,34-5,40 (m, 1 Н), 5,53-5,74 (m, 1Н), 6,97-7,08 (m, 2Н), 7,32-7,39 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₃H₁₆BNO₅S m/z 292 (M-H₂O)⁺.

Синтез этил-2-((3R,6S)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)ацетата $$\underset{\_}{65}$$ . Пример синтеза 65 представлен на Схеме 13 и в Примере 5.

Схема 13

Пример 5

Стадия 1

К раствору 5 (400 мг, 1,35 ммоль) в 4 мл абсолютного этанола прибавляют безводную 1М HCl в EtOAc (4 мл, 4 ммоль). Реакцию перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь затем концентрируют и подвергают азеотропной перегонке с ацетонитрилом (3×10 мл) с образованием липкого твердого вещества. К подвергнутому азеотропной перегонке липкому твердому веществу прибавляют эфир (10 мл) и образующийся осадок фильтруют. Отфильтрованное твердое вещество промывают дополнительным количеством эфира (5 мл) и высушивают, получая этил-2-((3R,6S)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)ацетат 65 (300 мг, 0,92 ммоль, выход 68,5%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 0,98-1,09 (q, J=U Гц, 1Н), 1,23-1,26 (t, J=7 Гц, 3H), 1,49-1,54 (dd, J=14 Гц, J=3 Гц, 1Н), 1,57-1,64 (dt, J=11 Гц, J=7 Гц, 1Н), 1,72-1,78 (brd, J=14 Гц, 1Н), 2,24-2,28 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1Н), 2,34-2,39 (dd, J=15 Гц, J=8 Гц, 1Н), 2,63 (brs, 1Н), 3,99 (s, 2Н), 4,07-4,13 (q, J=4 Гц, 3H), 6,99-7,01 (t, J=4 Гц, 1Н), 7,05-7,06 (d, J=3 Гц, 1Н), 7,35-7,36 (dd, J=5 Гц, J=1,3 Гц, 1Н); ESIMS, определено для C₁₄H₂₀BNO₅S m/z 308,1 (M-H₂O)⁺.

Синтез 2-((3R,7R)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-2,3,4,7-тетрагидро-1,2-оксаборепин-7-ил)уксусной кислоты 67. Пример синтеза 67 представлен на Схеме 14 и в Примере 6.

Схема 14

Пример 6

Стадия 1

Получают, исходя из энантиомерно чистого (R)-трет-бутил-3-гидроксипент-4-еноата [J. Am. Chem. Soc. (2007), 129, 4175-4177] в соответствии с процедурой, описанной выше для Стадии 1 Примера 3

Стадии 2-7

Получают в соответствии с процедурой, описанной выше для Стадий 1-6 Примера 4.

Белое твердое пушистое вещество (23 мг, 0,074 ммоль, выход 47%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 2,29-2,31 (m, 1Н), 2,40-2,68 (m, 4Н), 4,10 (m, 2Н), 4,74-4,82 (m, 1Н), 5,35-5,38 (m, 1Н), 5,53-5,58 (m, 1Н), 6,98-7,05 (m, 2Н), 7,32-7,36 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₃H₁₆BNO₅S m/z 292 (M-H₂O)⁺.

Синтез 2-((3R,7S)-2-гидрокси-3-(2-(тиофен-2-ил)ацетамидо)-2,3,4,7-тетрагидро-1,2-оксаборепин-7-ил)уксусной кислоты $$\underset{\_}{68}$$ . Пример синтеза $$\underset{\_}{68}$$ представлен на Схеме 15 и в Примере 7.

Схема 15

Пример 7

Стадия 1

Получают, исходя из энантиомерно чистого (S)-трет-бутил-3-гидроксипент-4-еноата [J. Med. Chem., (2010), 53, 4654-4667] в соответствии с процедурой, описанной выше для Стадии 1 Примера 3

Стадии 2-7

Получают в соответствии с процедурой, описанной выше для Стадий 1-6 Примера 4.

Белое твердое пушистое вещество (45 мг, 0,146 ммоль, выход 39%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 2,15-2,18 (m, 1Н), 2,29-2,38 (m, 2Н), 2,66-2,72 (m, 2Н), 3,88-3,91 (m, 1Н) 4,00 (s, 2Н), 5,24-5,27 (m, 1 Н), 5,57-5,63 (m, 1Н), 6,87-6,96 (m, 2Н), 7,24-7,28 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₃H₁₆BNO₅S m/z 292 (M-H₂O)⁺.

Синтез 2-((3R,6S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусной кислоты $$\underset{\_}{69}$$ . Пример синтеза $$\underset{\_}{69}$$ редставлен на Схеме 16 и в Примере 8.

Схема 16

Пример 8

Стадия 1

Раствор бис-силиламида XLI (0,2 ммоль) в DCM (5 мл) охлаждают до 0°C и прибавляют бензилхлорформиат (0,056 мл, 0,4 ммоль). Затем охлаждающую баню убирают и раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 16 ч. Реакцию гасят с помощью воды и экстрагируют дважды EtOAc. Органические слои объединяют, промывают водой, рассолом, осушают (Na₂SO₄) и концентрируют in vacuo с образованием сырого продукта в виде бледно-желтой маслянистой жидкости. Остаток подвергают хроматографии на колонке с диоксидом кремния (100% DCM →40% EtOAc/DCM) с образованием карбамата LXIII (90 мг, 0,143 ммоль, выход 71,5%).

Стадия 2

Раствор карбамата LXIII (70 мг, 0,11 ммоль) в анизоле (5 мл) при 0°C обрабатывают предварительно охлажденной 90% водн. трифторуксусной кислотой (10 мл). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. Смесь испаряют in vacuo, подвергают азеотропной перегонке с MeCN (3×5 мл). Остаток озвучивают в воде (10 мл) и эфире (10 мл). Водную фазу отделяют, промывают эфиром (2×5 мл) и высушивают вымораживанием, получая 2-((3R,6S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2-гидрокси-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусную кислоту $$\underset{\_}{69}$$ в виде твердого пушистого вещества (10 мг, 0,033 ммоль, выход 29,6%). ESIMS, определено для C₁₄H₁₈BNO₆S m/z 289,9 (M-H₂O)⁺.

Следующее соединение получают в соответствии с процедурой, описанной выше в Примере 8.

2-((3R,6S)-2-Гидрокси-3-(изобутоксикарбониламино)-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусная кислота $$\underset{\_}{70}$$ в виде беловатого твердого вещества (20 мг, 0,073 ммоль, выход 27%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 0,95 (d, J=7 Гц, 6Н), 1,62-1,67 (m, 1Н), 1,70-1,75 (m, 2Н), 1,87-1,90 (m, 2Н), 2,42-2,60 (m, 3H), 3,77-3,86 (m, 2Н), 4,35-4,38 (m, 1Н); ESIMS, определено для C₁₁H₂₀BNO₆S m/z 256 (M-H₂O)⁺.

Синтез 2-((3R,6S)-2-гидрокси-3-(фенилсульфонамидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусной кислоты $$\underset{\_}{71}$$ . Пример синтеза $$\underset{\_}{71}$$ представлен на Схеме 17 и в Примере 9.

Схема 17

Пример 9

Стадия 1-2

Получают в соответствии с процедурой, описанной выше для Стадий 1-2 Примера 8.

Беловатое твердое вещество (30 мг, 0,096 ммоль, выход 43%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,57-1,83 (ряд m, 4Н), 2,49-2,71 (ряд m, 3H), 4,35-4,89 (m, 1Н), 7,51-7,59 (m, 3H), 7,85-7,89 (m, 2Н); ESIMS, определено для C₁₂H₁₆BNO₆S m/z 296,1 (M-H₂O)⁺.

Синтез 2-((3R,6S)-2-гидрокси-3-(3-фенилуреидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)-уксусной кислоты $$\underset{\_}{72}$$ . Пример синтеза $$\underset{\_}{72}$$ представлен на Схеме 18 и в Примере 10.

Схема 18

Пример 10

Стадия 1

К раствору бис-силиламида XLI (0,2 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°C прибавляют раствор TFA в гексане (0,6 ммоль). Реакцию перемешивают при 0°C в течение 20 мин. перед прибавлением фенилизоцианата (0,04 мл, 0,4 ммоль), а затем N,N-диизопропилэтиламина (0,18 мл, 1 ммоль). Охлаждающую баню затем удаляют и раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 16 ч. Реакцию гасят с помощью воды и экстрагируют дважды EtOAc. Органические слои объединяют, промывают водой, рассолом, осушают (Na₂SO₄) и концентрируют in vacuo с образованием бледно-желтого сырого продукта в виде маслянистой жидкости. Остаток подвергают хроматографии на колонке с диоксидом кремния (100% DCM→25% EtOAc/DCM), получая чистую мочевину (50 мг, 0,081 ммоль, выход 40,7%).

Стадия 2

Удаление защитных групп осуществляют в соответствии с процедурой, описанной выше на Стадии 2 Примера 8, с образованием 2-((3R,6S)-2-гидрокси-3-(3-фенилуреидо)-1,2-оксаборинан-6-ил)уксусной кислоты 72 в виде белого твердого вещества (20 мг, 0,068 ммоль, выход 86%). ¹H ЯМР (CD₃OD) δ ppm 1,24-1,31 (m, 1Н), 1,56-1,64 (m, 2Н) 1,78-1,81 (m, 1Н), 2,36-2,40 (dd, J=15 Гц, J=6 Гц, 1Н), 2,46-2,58 (dd, J=13 Гц, J=7 Гц, 1Н), 2,68-2,71 (m, 1Н), 4,07-4,12 (m, 1Н), 7,15-7,18 (m, 1Н), 7,34-7,37 (m, 4Н); ESIMS, определено для C₁₃H₁₇BN₂O₅ m/z 275,1 (M-H₂O)⁺.

Иллюстративные соединения формулы (I) приведены в Таблице 1. Некоторые структуры изображены с определенными конфигурациями в выбранных стереоцентрах, но приведенные стереохимии не следует рассматривать как ограничительные и все возможные стереоизомеры изображенных структур считаются включенными в настоящее изобретение. Соединения любых абсолютных и относительных конфигураций в стереоцентрах, а также смеси энантиомеров и диастереоизомеров любых данных структур также охвачены настоящим изобретением.

Таблица 1 Пример Структура Пример Структура 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121    

Пример 11

Активность и спектр действия ингибиторов β-лактамаз определяют путем оценки их активности потенцирования антибиотиков.

Эффект потенцирования проявляется в снижении минимальной ингибирующей концентрации β-лактамных антибиотиков в присутствии ингибиторов β-лактамаз (BLI). Активность BLI в комбинации с цефтазидимом или биапенемом оценивают с помощью анализа методом "шахматной доски" (Antimicrobial Combinations, в книге: Antibiotics in Laboratory Medicine, Ed. Victor Lorian, M.D., Fourth edition, 1996, pp.333-338) с использованием метода микроразведений в бульоне, выполняемого в соответствии с рекомендациями NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards (Национальный комитет по стандартам для клинических лабораторий)). 1997. Methods for Dilution of Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically - Fourth Edition; Approved Standard. NCCLS Document M7-A4, Vol.17 No.2). В данном анализе проводят испытания множественных разведений двух лекарственных средств, а именно, BLI и β-лактама (цефтазидима или биапенема), по отдельности и в комбинации, в концентрациях, равных, выше и ниже их соответствующих минимальных ингибирующих концентраций (MIC). BLI солюбилизируют в 10% ДМСО в концентрации 10 мг/мл. Маточные растворы дополнительно разбавляют, в соответствии с требованиями конкретного анализа, в бульоне Мюллера-Хинтона (МНВ). Маточный раствор может храниться при -80°C.

Анализ методом "шахматной доски" (CB) проводят на микротитровальных планшетах. Цефтазидим или биапенем разбавляют по оси x, каждая колонка содержит одинаковую концентрацию антибиотика. BLI разбавляют по оси y, каждый ряд содержит равные концентрации BLI. В результате таких манипуляций каждая лунка микротитровального планшета содержит уникальную комбинацию концентраций двух агентов. Анализ проводят в МНВ с заключительным бактериальным инокулятом 5×10⁵ КОЕ/мл (с раннелогарифмической фазы культуры). Микротитровальные планшеты инкубируют в течение 20 ч при 35°C и считывают с помощью ридера для микротитровальных планшетов (Molecular Devices) при 650 нм, а также проводят визуальный осмотр с помощью зеркального устройства с инвертированной оптикой для чтения микротитровальных планшетов. MIC определяют как наименьшую концентрацию антибиотиков в комбинации, при которой видимый рост микроорганизмов полностью ингибируется. Активность BLI приводится в виде MPC8, или минимальной потенцирующей концентрации, снижающей MIC антибиотика в 8 раз.

Потенцирование цефтазидима исследуют на штаммах различных бактерий, резистентных к цефтазидиму вследствие экспрессии ферментов, гидролизующих β-лактамазы. Панель штаммов, используемых в экспериментах по методу "шахматной доски", включает β-лактамазы, принадлежащие ко всем известным классам этих ферментов: A, B, C и D. Активность соединения 1 тестируют при максимальной концентрации, равной 40 мкг/мл. В такой концентрации оно демонстрирует отсутствие ингибирования роста любых исследуемых бактерий, однако при концентрации всего 0,6 мкг/мл оно снижает MIC цефтазидима в 8 раз для некоторых бактерий (Таблица 2). Результаты анализов методом "шахматной доски" показывают, что 1 обладает широким спектром активности потенцирования β-лактама против штаммов, экспрессирующих β-лактамазы. Соединение 1 было наиболее активным против штаммов, экспрессирующих KPC и другие ферменты класса A (CTX-M-3) и некоторые ферменты класса C (MIR-1, CMY-2) и класса D (OXA-2).

Таблица 2 Штамм Организм Описание PCR Класс МРС8 КР1005 Klebsiella pneumoniae ESBL СТХ-М-14 A Z КР1009 Klebsiella pneumoniae ESBL СТХ-М-15 A Y ЕС1008 Escherichia coli ESBL СТХ-М-3 A X КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 A X КР1008 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 A X ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 A X КР1010 Klebsiella pneumoniae ESBL SHV-12 A Y KP1012 Klebsiella pneumoniae ESBL SHV-18 A Y ec306 Escherichia coli Первая описанная ESBL SHV-2 A Y ec307 Escherichia coli Обычная SHV ESBL SHV-4 A Y ec308 Escherichia coli Обычная SHV ESBL SHV-5 A Y EC1009 Escherichia coli ESBL TEM-10 A Z ec302 Escherichia coli ESBL, распространенная в США TEM-10 A Z EC1012 Escherichia coli ESBL TEM-12 A Y ec303 Escherichia coli ESBL, распространенная в США TEM-12 A Y EC1011 Escherichia coli ESBL TEM-26 A Z ec304 Escherichia coli ESBL, распространенная в США TEM-26 A Z ec303 Escherichia coli ESBL, распространенная во Франции TEM-3 A Y ec301 Escherichia coli ESBL TEM-6 A Z CF1000 Citrobacter freundii Гиперэкспрессия AmpC   С Y ECL003 Enterobacter cloacae Гиперэкспрессия AmpC   С Z ec310 Escherichia coli Е. cloacae-подобный Amp-C ACT-1 С X EC1004 Escherichia coli pAmpC CMY-2 С X EC1010 Escherichia coli pAmpC CMY-6 С Y EC1014 Escherichia coli pAmpC DHA-1 С Z EC1006 Escherichia coli pAmpC FOX-5 С Y EC1016 Escherichia coli pAmpC FOX-5 С Z ec309 Escherichia coli Е. cloacae-подобный Amp-C MIR-1 С X KP1007 Klebsiella pneumoniae ESBL OXA-10, D Y       qnrB4     КХ1000 Klebsiella oxytoca ESBL OXA-2 D X X = МРС8, равная 2,5 мкг/мл или меньше. Y = МРС8 от более 2,5 мкг/мл до 10 мкг/мл. Z = МРС8 более 10 мкг/мл.

Затем тестировали активность потенцирования цефтазидима для нескольких циклических бороновых кислотно-эфирных производных с использованием большей панели штаммов, экспрессирующих ферменты, гидролизующие β-лактамазы. Значения MIC определяли для одного цефтазидима и в присутствии фиксированных концентраций различных циклических бороновых кислотно-эфирных производных. Большинство соединений тестировали при 10 мкг/мл. Циклические бороновые кислотно-эфирные производные были способны снижать значения MIC цефтазидима от 4- до >64-кратно в зависимости от β-лактамазы (Таблица 3).

Таблица 3 Штамм Организм Описание PCR Класс MIC цефтазидима (пг/мл) в присутствии или без циклических бороновых кислотно-эфирных производных           один 3 при 10 пг/мл 4 при 10 пг/мл 5 при 10 пг/мл 6 при 10 пг/мл 7 при 10 пг/мл КР1005 Klebsiella pneumoniae ESBL CTX-M-14 A Z Z Z Z Z Z КР1009 Klebsiella pneumoniae ESBL CTX-M-15 A Z Z Z Z Z Z КР1006 Klebsiella pneumoniae ESBL CTX-M2 A Y X X X X ND ЕС1008 Escherichia coli ESBL CTX-M3 A Z Y Y Y Y Z ра1063 Pseudomon as aeruginosa ESBL GES-1 A Z Z Z Z Z Z КР1004 Klebsiella pneumoniae у Сериновая карбапенем аза КРС-2 А Z Y Y Y Y Z КР1008 Klebsiella oneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А Y X X X X Z ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А Z X X X X Z КР1010 Klebsiella pneumoniae ESBL SHV-12 А Z Z Z Y Y Z КР1012 Klebsiella pneumoniae ESBL SHV-18 А Z Z Z Y Y Z ec306 Escherichia coli Первая описанная ESBL SHV-2 А Z Z Z Z Z Z ес307 Escherichia coli Обычная SHV ESBL SHV-4 А Z Z Z Y Z Z ес308 Escherichia coli Обычная SHV ESBL SHV-5 А Z Z Z Z Z Z КР1011 Klebsiella pneumoniae ESBL SHV-5 А Y X X X X ND ЕС1009 Escherichia coli ESBL ТЕМ-10 А Z Z Z Z Z Z ес302 Escherichia coli ESBL, распространенная в США ТЕМ-10 А Z Z Z Z Z Z ЕС1012 Escherichia coli ESBL ТЕМ-12 А Z Z Z Y Y Z ec303 Escherichia coli ESBL, распространенная в США ТЕМ-12 А Z Z Z Y Y Z ЕС1011 Escherichia coli ESBL ТЕМ-26 A Z Z Z Z Z Z ec300 Escherichia coli ESBL, распространенная во Франции ТЕМ-3 A Z Z Z Y Z Z ес301 Escherichia coli ESBL ТЕМ-6 А Z Z Z Z Z Z КР1014 Klebsiella pneumoniae Металло-β-лактамаза Vim-1 В Z Z Z Z Z ND CF1000 Citrobacter freundii Гиперэкспрессия AmpC   С Z Z Z Y Y Z CF1001 Citrobacter freundii Гиперэкспрессия AmpC   С Z Z Z Y Y ND ECL1002 Enterobactei cloacae Гиперэкспрессия AmpC   С Z Z Y Y Y Z ECL1003 Enterobacter cloacae Гиперэкспрессия AmpC   С Z Z Z Z Z ND ec310 Escherichia coli Е.cloacae-подобная Amp-C АСТ-1 С Z Y Y X X Z ЕС1004 Escherichia coli pAmpC CMY-2 С Z Y Y Y Y Z SA1000 Salmonella pAmpC CMY-2 С Z Z Y Y X ND КР1013 Klebsiella pneumoniae pAmpC CMY-2 С Z Z Y Y Y ND ЕС1010 Escherichia coli pAmpC CMY-6 С Z Z Y Y Y Z ЕС1014 Escherichia coli pAmpC DHA-1 С Z Y Y X X Z ЕС1006 Escherichia coli pAmpC FOX-5 С Z Y Z Y Y Z ЕС1016 Escherichia
coli pAmpC FOX-
5 С Z Z Z Z Z ND ес309 Escherichia coli E. cloacae-подобная Amp-C MIR-1 С Z Y Y X X Z РАМ2005 Pseudomon as aeruginosa ampC   С Z Z Z Z Z Z РАМ2035 Pseudomon as aeruginosa ampC mexA:tet   С Z Z Z Y Y Z КР1007 Klebsiella pneumoniae ESBL ОХА10 D Z Z Z Y Y Z КХ1000 Klebsiella oxytoca ESBL ОХА-2 D Z Z Y Y Y Y АВ1054 Acinetobact erbaumanni OXA-карбапенемаза ОХА-23 D Z Z Z Z Z Z АВ1052 Acinetobact erbaumanni OXA-карбапенемаза ОХА-24 D Z Z Z Z Z ND АВ1057 Acinetobact erbaumanni OXA-карбапенемаза ОХА-58 D Z Z Z Z Z Z X = MIC, равная 1 мкг/мл или меньше. Y = MIC от более 1 мкг/мл до 8 мкг/мл. Z = MIC более 8 мкг/мл. ND = нет данных.

Биапенем представляет собой карбапенемовый β-лактам; только выбранные β-лактамазы придают резистентность к этому классу антибиотиков. К ним относятся сериновые карбапенемазы (carbapemenases), принадлежащие к классу A и классу D. Потенцирование биапенема исследовали на штаммах, экспрессирующих различные карбапенемазы этих классов с использованием метода "шахматной доски". Различные циклические бороновые кислотно-эфирные производные продемонстрировали значительное потенцирование биапенема против штаммов, экспрессирующих карбапенемазы класса A: значения MPC8 (минимальная потенцирующая концентрация циклического боронового кислотно-эфирного производного (мкг/мл), снижающая MIC биапенема в 8 раз) менялись в интервале от 0,02 мкг/мл до 0,16 мкг/мл (Таблица 4). Циклические бороновые кислотно-эфирные производные были способны к снижению значений MIC биапенема до 1000-кратного (Таблица 4).

Таблица 4 Штамм Организм Описание PCR Класс Соединение MPC8 ECL1004 Enterobacter cloacae Сериновая карбапенемаза NMC-A А 1 Y ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А 1 X КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А 1 Y SM1000 Serratia marcescens Сериновая карбапенемаза SME-2 А 1 Y ECL1004 Enterobacter cloacae Сериновая карбапенемаза NMC-A А 2 Y ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А 2 X КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А 2 X SM1000 Serratia marcescens Сериновая карбапенемаза SME-2 А 2 Y ECL1004 Enterobacter cloacae Сериновая карбапенемаза NMC-A А 3 X ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А 3 X КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А 3 X КР1008 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А 3 X SM1000 Serratia marcescens Сериновая карбапенемаза SME-2 А 3 Y АВ1052 Acinetobacter baumannii OXA-карбапенемаза ОХА-24 D 3 Z АВ1054 Acinetobacter baumannii OXA-карбапенемаза ОХА-23 D 3 Z АВ1057 Acinetobacter baumannii OXA-карбапенемаза ОХА-58 D 3 Z ECL1004 Enterobacter cloacae Сериновая карбапенемаза NMC-A А 4 X ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А 4 X КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А 4 X КР1008 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А 4 X SM1000 Serratia marcescens Сериновая карбапенемаза SME-2 А 4 X АВ1052 Acinetobacter baumannii ОХА-карбапенемаза ОХА-24 D 4 Z АВ1054 Acinetobacter baumannii ОХА-карбапенемаза ОХА-23 D 4 Z АВ1057 Acinetobacter baumannii ОХА-карбапенемаза ОХА-58 D 4 Z ECL004 Enterobacter cloacae Сериновая карбапенемаза NMC-A А 5 Y ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А 5 X КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А 5 X SM1000 Serratia marcescens Сериновая карбапенемаза SME-2 А 5 Y АВ1052 Acinetobacter baumannii OXA-карбапенемаза ОХА-24 D 5 Z АВ1054 Acinetobacter baumannii OXA-карбапенемаза ОХА-23 D 5 Z АВ1057 Acinetobacter baumannii ОХА-карбапенемаза ОХА-58 D 5 Z ECL1004 Enterobacter cloacae Сериновая карбапенемаза NMC-A А 6 Y ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А 6 X КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А 6 X SM1000 Serratia marcescens Сериновая карбапенемаза SME-2 А 6 Y АВ1052 Acinetobacter baumannii ОХА-карбапенемаза ОХА-24 D 6 Z АВ1054 Acinetobacter baumannii ОХА-карбапенемаза ОХА-23 D 6 X АВ1057 Acinetobacter baumannii ОХА-карбапенемаза ОХА-58 D 6 Z X = MPC8 менее 0,16 мкг/мл Y = MPC8 от 0,16 мкг/мл до 1 мкг/мл Z = MPC8 более 1 мкг/мл

Пример 12

Была исследована способность ингибиторов β-лактамаз ингибировать гидролиз цефтазидима и биапенема. Готовили лизаты из бактерий, экспрессирующих различные β-лактамазы, для использования в качестве источника ферментов. Бактериальные лизаты готовят следующим образом. Отдельную колонию с чашки свежей ночной культуры переносят в 5 мл бульона LB и выращивают до OD₆₀₀=0,6-0,8. Затем эту культуру переносят в 500 мл среды LB и выращивают до OD₆₀₀=0,7-0,9. Осадок клеток собирают центрифугированием при 5000 об/мин (ротор JA-14) в течение 15 минут при комнатной температуре. Осадок ресуспендируют в 10 мл PBS. Затем проводят пять циклов замораживания-оттаивания путем помещения клеток при температуре -20°C и оттаивания их при комнатной температуре. После последней стадии оттаивания клетки осаждают центрифугированием при 18000×g (18 K) в течение 30 минут и собирают супернатант. Этот лизат хранят при -20°C.

После этого, активность бактериальных лизатов оптимизируют для гидролиза цефтазидима и биапенема следующим образом. Прибавляют в каждую лунку 96-луночного УФ-прозрачного планшета 50 мкл буфера A (50 мМ фосфата натрия, pH=7; 0,5% глюкозы, 1 мМ MgCl₂). Титруют вертикально по колонкам 96-луночного планшета 50 мкл лизата, получая 2-кратные разведения лизата. Прибавляют в каждую лунку 100 мкл буфера A, помещают в планшет-ридер при 37°C и инкубируют в течение 15 минут. Прибавляют в каждую лунку 50 мкл 50 мкг/мл растворов цефтазидима или биапенема в буфере A (предварительно инкубированные при 37°C в течение 15 минут). Гидролиз цефтазидима и биапенема измеряют при 250 нм и 296 нм, соответственно. Этот эксперимент используют для определения оптимального разбавления лизата, которое давало бы линейную кривую относительного УФ-сигнала, снижающегося до приблизительно OD=0,3-0,5 на протяжении 1 часа.

Наконец, определяют активность циклического боронового кислотно-эфирного производного при ингибировании гидролиза цефтазидима и биапенема бактериальными лизатами. Прибавляют в каждую лунку 96-луночного УФ-прозрачного планшета 100 мкл буфера A (50 мМ фосфата натрия, pH=7; 0,5% глюкозы, 1 мМ MgCl₂). Титруют вертикально по колонкам 96-луночного планшета 50 мкл 6× раствора циклического боронового кислотно-эфирного производного в буфере для получения 3-кратных разбавлений. Прибавляют 50 мкл разбавленного лизата в буфере A (оптимальное разбавление определено в эксперименте, описанном выше) и планшет инкубируют в планшет-ридере при 37°C в течение 15 минут. Затем прибавляют в каждую лунку 50 мкл 50 мкг/мл растворов цефтазидима или биапенема в буфере Ф (предварительно инкубированных при 37°C в течение 15 минут) и гидролиз цефтазидима или биапенема регистрируют при 250 нм и 296 нм, соответственно. Величину ЕС50 ингибирования определяют по графику зависимости скорости гидролиза цефтазидима или биапенема от концентрации циклического боронового кислотно-эфирного производного.

Результаты этих экспериментов представлены в Таблице 5 и Таблице 6. Эти эксперименты демонстрируют, что описанные соединения являются ингибиторами с широким спектром активности по отношению к различным β-лактамазам.

Таблица 5 Штамм Организм Описание PCR Класс IC₅₀ (мкг/мл) ингибирования гидролиза цефтазидима Тазобактам 3 4 5 6 7 КР1005 Klebsiella pneumoniae ESBL СТХ-М-14 А X Z Z X Y Z КР1009 Klebsiella pneumoniae ESBL СТХ-М-15 А X Z Z X Y Y pa1063 Pseudomonas aeruginosa ESBL GES-1 А Y Z Y X Y Y КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А Z X X X X Z КР1008 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А Z Y X X X Z ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А Z Y X X X Z КР1010 Klebsiella pneumoniae ESBL SHV-12 А X Z Z Y Z Z КР1012 Klebsiella pneumoniae ESBL SHV-18 А X Z Z Y Y Z ec306 Escherichia coli Первая описанная ESBL SHV-2 А Y Z Z Y Y Z ес308 Escherichia coli Обычная SHV ESBL SHV-5 А X Z Z Z Z Z ес302 Escherichia coli ESBL, распространенная в США ТЕМ-10 А X Y Z X Y Y ec303 Escherichia
coli ESBL,
распространенная в США ТЕМ-12 А X Z Z Y Z Y ес304 Escherichia coli ESBL, распространенная в США ТЕМ-26 А X Z Z Y Y Y ec300 Escherichia coli ESBL, распространенная во Франции ТЕМ-3 А X Z Z Y Z Z ес301 Escherichia coli ESBL ТЕМ-6 А X Z Z Y Y Y ECL1003 Enterobacter cloacae Гиперэкспрессия AmpC   С ND Z Z Y Z Z ЕС1014 Escherichia coli pAmpC DHA-1 С ND Z Z Y Z Z КР1007 Klebsiella pneumoniae ESBL ОХА-10 D Y Z Z Y Z Z КХ1000 Klebsiella oxytoca ESBL ОХА-2 D X Z Z X Y Z X = IC₅₀ менее 0,1 мкг/мл. Y = IC₅₀ от 0,1 мкг/мл до 1 мкг/мл. Z = IC₅₀ более 1 мкг/мл. ND = нет данных.

Таблица 6 Штамм Организм Описание PCR Класс IC₅₀ (мкг/мл) ингибирования гидролиза биапенема Тазобактам 3 4 5 6 7 ЕС1007 Escherichia coli Сериновая карбапенемаза КРС-3 А Z Y Y X X Z КР1004 Klebsiella pneumoniae Сериновая карбапенемаза КРС-2 А Z Z Y X Y ND КР1008 Klebsiella
pneumoniae Сериновая
карбапенемаза КРС-2 А Z Z Z Y Y ND SM1000 Serratia marcescens Сериновая карбапенемаза SME-2 А Y Z Y X Y Z X = IC₅₀ менее 0,1 мкг/мл. Y = IC₅₀ от 0,1 мкг/мл до 1 мкг/мл. Z = IC₅₀ более 1 мкг/мл. ND = нет данных.

Активность и спектр действия ингибиторов β-лактамазы также определяют путем оценки их активности потенцирования азтреонама с помощью анализа потенцирования методом титрования дозы с использованием штаммов различных бактерий, резистентных к азтреонаму вследствии экспрессии различных β-лактамаз. Азтреонам представляет собой монобактамовый антибиотик и, аналогично цефтазидиму, гидролизуется большинством бета-лактамаз, принадлежащих к классам A, C или D (но не классу B). Эффект потенцирования наблюдается как способность соединений BLI ингибировать рост в присутствии субингибирующей концентрации азтреонама. MIC исследуемых штаммов меняется от 32 мкг/мл до >128 мкг/мл. Азтреонам присутствует в исследуемой среде в концентрации 4 мкг/мл. Соединения тестируют при наибольшей концентрации, равной 40 мкг/мл. В данном анализе, активность соединений определяют как концентрацию BLI, ингибирующую рост бактерий в присутствии 4 мкг/мл азтреонама (MPC_@4). В Таблицах 7, 8 и 9 приведены данные по способности BLI потенцировать азтреонам (MPC_@4) для различных штаммов, сверхэкспрессирующих бета-лактамазы класса A (ESBL), класса A (КРС) и класса C и класса D, соответственно. Также приведена величина MIC азтреонама для каждого штамма. В Таблице 7 приведены данные по активности BLI при потенцировании азтреонама против штаммов, экспрессирующих ESBL класса A. Таблица 8 описывает активность BLI по потенцированию азтреонама против штаммов, экспрессирующих КРС класса А. Таблица 9 содержит данные по активности BLI при потенцировании азтреонама против штаммов, экспрессирующих ферменты классов C и D.

Таблица 7 MIC азтреонама (мкг/мл) >128 >128 64 >128 32 128 >128 64   AZT MPC₄ CTX-М-14 КР1005 AZT MPC₄ CTX-M-15 КР1009 AZT MPC₄ SHV-5 ес308 AZT MPC₄ SHV-12 КР1010 AZT МРС₄ SHV-18 КР1012 AZT MPC₄ ТЕМ-10 ЕС1009 AZT MPC₄ ТЕМ-10 ес302 AZT МРС₄ TEM-26 ес304 Клавулановая кислота 1,25 1,25 0,08 0,04 0,04 0,16 0,3 0,04 Тазобактам 10 20 10 1,25 1,15 2,5 5 0,6 3 Z Z Z Z Z Z Z Z 4 Z Z Z Z Z Z Z Z 5 Z Y Y Y X Y Z Y 6 Z Z Z Y Y Y Z Y 7 Z Z Z Z Y X Y Y 33 Z Z Z Z Z Z Z Z 34 Z Z Z Z Z Z Z Z 35 Z Z Z Z Z Z Z Z 36 Z Z Z Y Y Z Z Y 37 Z Z Z Y X Y Z Y 38 Z Z Z Y Z Z Z Z 39 Z Z Z Z Y Z Z Y 40 Z Z Z Y Z Z Z Z 41 Z Z Z Z Z Z Z Z 42 Z Z Z Z Z Z Z Z 43 Z Z Z Y Y Y Z Y 45 Z Z Z Z Z Z Z Z 46 Z Z Z Z Z Z Z Z 47 Z Z Z Z Z Z Z Z 48 Z Z Z Z Z Z Z Z 49 Z Z Z Z Y Z Z Z 50 Z Z Z Z Z Z Z Z 51 Z Z Z Z Y Y Z Z 52 Z Z Z Z Z Z Z Z 53 Z Z Z Z Z Z Z Z 54 Z Z Z Z Z Z Z Z 55 Z Z Z Z Z Z Z Y 56 Z Z Z Z Z Z Z Z 57 Z Z Z Z Y Z Z Z 58 Z Z Z Z Z Z Z Z 59 Z Z Z Z Z Z Z Z 60 Z Z Z Z Z Z Z Z 61 Z Z Z Y Y Z Z Z 62 X X X X X X Y X 63 Y Y Y X X Y Z Y 64 Y Y X X X Y Y X 65 Z Z Z Z Z Z Z Z 66 Z Z Z Z Z Z Z Z X = МРС_@4 менее 5 мкг/мл. Y = МРС_@4 от 5 мкг/мл до 20 мкг/мл. Z = МРС_@4 более 20 мкг/мл. ND = Нет данных.

Таблица 8 MIC азтреонама >128 64 >128 MIC азтреонама >128 64 >128   AZT MPC₄ КРС-2 КР1004 AZT MPC₄ КРС-2 КР1008 AZT MPC₄ КРС-3 ЕС1007   AZT MPC₄ КРС-2 КР1004 AZT MPC₄ КРС-2 КР1008 AZT МРС₄ KPC-3 ЕС1007 Клавулановая кислота >40 20 40 Клавулановая кислота >40 20 40 Тазобактам >40 >40 >40 Тазобактам >40 >40 >40 3 X X X 48 X X X 4 X X X 49 X X X 5 X X X 50 X X X 6 X X X 51 X X X 33 X X X 52 Y X X 34 X X X 53 Y X X 35 Y X X 54 Z X Y 36 Z Z Z 55 Y X X 37 X X X 56 Y X X 38 Z X X 57 X X X 39 Y X X 58 Z Z Z 40 Z Y Z 59 Z Z Z 41 Y X X 60 Z Y Y 42 Y X X 61 X X X 43 X X X 62 Y X Y         63 Z Y Y 45 Z Y X 64 Z X Y 46 X X X 65 Z Z Z 47 Z Y Y 66 Y X X X = МРС_@4 менее 5 мкг/мл. Y = МРС_@4 от 5 мкг/мл до 20 мкг/мл. Z = МРС_@4 более 20 мкг/мл. ND = Нет данных.

Таблица 9 Класс С С С D D MIC азтреонама 64 >128 32 128 128   AZT МРС_@4 ECL1002 AZT МРС_@4 CMY-6 ЕС1010 AZT МРС_@4 РАМ2035 AZT МРС_@4 ОХА-10, qnrB4 КР1007 AZT МРС_@4 ОХА-2, КРХ1001 Клавулановая кислота >40 40 >40 0,08 5 Тазобактам >40 20 20 5 >40 3 Z Z Z Z Z 4 Y Y Z Z Z 5 Y Y X X Y 6 Y Z Y Y Z 33 Z Z Z Z Z 34 Z Z Z Z Z 35 Z Z Z Z Z 36 Z Z Z Y Z 37 Z Z Z Z X 38 Z Z Z Z Z 39 Z Z Z Z Z 40 Z Z Z Z Z 41 Z Z Z Z Z 42 Z Z Z Z Z 43 Y Y Y Z Y 45 Z Z Z Z Z 46 Z Z Z Z Z 47 Z Z Z Z Z 48 Z Z Z Z Z 49 Z Z Y Z Y 50 Z Z Z Z Y 51 Z Z Z Z Y 52 Z Z Z Z Z 53 Z Z Z Z Y 54 Z Z Z Z Z 55 Z Z Z Z Z 56 Z Z Z Z Y 57 Z Z Z Z Z 58 Z Z Z Z Z 59 Z Z Z Z Z 60 Z Z Z Z Z 61 Y Y Y Y Y 62 Z X X X Y 63 Y Y Y Y Y 64 Y Z Y X Y 65 Z Z Z Z Z 66 Z Z Z Z Z X = МРС_@4 менее 5 мкг/мл. Y = МРС_@4 от 5 мкг/мл до 20 мкг/мл. Z = МРС_@4 более 20 мкг/мл. ND = Нет данных.

Активность и спектр действия ингибиторов β-лактамаз также определяют путем оценки их активности потенцирования биапенема с помощью анализа потенцирования методом титрования доз с использованием штаммов, экспрессирующих сериновые карбапенемазы (carbapemenases) (такие как KPC). Эффект потенцирования наблюдают как способность соединений BLI ингибировать рост в присутствии субингибирующей концентрации биапенема. Величины MIC исследуемых штаммов изменялись от 4 мкг/мл до >1 мкг/мл. Биапенем присутствует в исследуемой среде в концентрации 1 мкг/мл. Соединения тестируют при наибольшей концентрации, равной 40 мкг/мл. В данном анализе, активность соединений определяют как концентрацию BLI, ингибирующую рост бактерий в присутствии 1 мкг/мл биапенема (MPC_@1). В Таблице 10 приведены данные по активности BLI при потенцировании биапенема (MPC_@1). Также указано значение MIC биапенема для каждого штамма.

Таблица 10 MIC биапенема >8 8 4 8 MIC биапенема >8 8 4 8   BPM МРС_@1 КР1004 КРС-2 BPM МРС_@1 КР1008 КРС-2 BPM МРС_@1 ЕС1007 КРС-3 BPM МРС_@1 ECL1004 NMC-A   BPM МРС_@1 КР1004 КРС-2 BPM МРС_@1 КР1008 КРС-2 BPM МРС_@1 ЕС 1007 КРС-3 BPM МРС_@1 ECL1004 NMC-A Тазобактам 40 0,3 5 0,6 Тазобактам 40 0,3 5 0,6 3 X X X Y 48 X X X X 4 X X X X 49 X X X X 5 X X X X 50 X X X X 6 X X X X 51 X X X Y 33 X X X X 52 X X X Y 34 X X X Y 53 X X X Y 35 X X X Y 54 X X X X 36 Z X Y X 55 X X X X 37 X X X X 56 X X X X 38 X X X X 57 X X X X 39 X X X X 58 Z Z Z Z 40 Y X Y Y 59 Y X X X 41 X X X Y 60 X X X X 42 X X X Y 61 X X X X 43 X X X X 62 X X X X           63 Y X Y Y 45 Y X X Z 64 Y X X X 46 X X X X 65 Y X Y Z 47 Y X X Z 66 X X X X X = MPC_@1 менее 1 мкг/мл. Y = MPC_@1 от 1 мкг/мл до 5 мкг/мл. Z = МРС_@1 более 5 мкг/мл. ND = Нет данных.

Некоторые бактериальные лизаты также были оптимизированы для гидролиза азтреонама и нитроцефина. Величину EC50 ингибирования определяют по графику зависимости скорости гидролиза азтреонама или нитроцефина от концентрации BLI. Результаты этих экспериментов представлены в Таблице 11. Эти эксперименты подтверждают, что описанные соединения являются ингибиторами с широким спектром активности по отношению к различным β-лактамазам.

Таблица 11   IC₅₀ AZT КР1005 СТХ-М-14 IC₅₀ AZT КР1009 СТХ-М-15 IC₅₀ AZT ес302 ТЕМ-10 IC₅₀ AZT ес304 ТЕМ-26 IC₅₀ AZT КР1004 КРС-2 IC₅₀ AZT КР1008 КРС-2 IC₅₀ AZT ЕС 1007 КРС-3 IC₅₀ AZT КР1007 OXA10 IC₅₀ AZT KPX1001 ОХА-2 IC₅₀ NCF ЕС1010 pAmpC (CMY-6) Клавулановая кислота 0,0548 0,247 0,027 0,027 0,74 2,22 1,48 1,48 0,08 ND Тазобактам <0,0274 0,027 0,055 0,027 0,74 2,22 0,74 4,44 0,0274 ND 3 X Z Z Z X Y X Z Z Z 4 X Y Z Z X X X Z Z Z 5 X Y Z Z X X X Z X Z 6 X X Z Z X X X Z Y Z 33 X Z Z Z Y Y X Z Y Z 34 Z Z Z Z Y Y X Z Z Z 35 Z Z Z Z Z Z X Z Z Z 36 X X X X Y Y X Z Z Z 37 X X Z Z X X X Y Y X 38 X Y Z Y X X X Z Y Y 39 Y Y Z Y X Y X Z Y Z 40 X X Z Y Y Z Y Y X Y 41 Z Z Z Z X X X Z Z Z 42 Z Z Z Z X X X Z Z Z 43 Y Z Z Z X X X Z Y Z 45 Z Z Z Z Y Y X Z Z Z 46 Z Z Z Z X X X Z Z Z 47 Z Z Z Z Y Y X Z Z Z 48 Y Z Z Z X Y X Z Y Z 49 Y Z Z Z X X X Z Y Z 50 Y Z Z Z X X X Z Z Z 51 Z Z Z Z X X X Z Y Z 52 Z Z Z Z X Y Y Z Z Z 53 Z Z Z Z X Y Y Z Y Z 54 X Z Z Z X X X Z Y Y 55 Y Z Z Y X X X Z Y Z 56 X Y Z Z X X X Z Y Y 57 X Z Z Z X X X Z Z Z 58 Y Z Z Z X X X Z Z Z 59 Z Z Z Z Y X Y Z Y Z 60 Y Y Z Z X X X Z Y Y 61 Y Z Z Z X X X Z Y Z 62 Y Y Z Y Y X X Z Z Z 63 Y Y Z Z Y Y Y Z Y Y 65 Y Z Z Z Y Y Z Z Y Z 66 Y Z Z Z X X X Z X Z X = IC₅₀ менее 0,5 мкг/мл. Y = IC₅₀ от 0,5 мкг/мл до 2 мкг/мл. Z = IC₅₀ более 2 мкг/мл. ND = Нет данных.

Пример 13

Выбранные ингибиторы β-лактамаз также тестировали на их способность потенцировать монобактам тигемонам. Эффект потенцирования наблюдают как способность соединений BLI ингибировать рост в присутствии субингибирующей концентрации тигемонама. Величины MIC исследуемых штаммов менялись в пределах от 8 мкг/мл до >128 мкг/мл. Тигемонам присутствует в исследуемой среде в концентрации 4 мкг/мл. Соединения тестируют при наивысшей концентрации, равной 40 мкг/мл. В данном анализе, активность соединений определяют как концентрацию BLI, ингибирующую рост бактерий в присутствии 4 мкг/мл азтреонама (МРС_@4). В Таблицах 12 и 13 приведены результаты определения способности BLI потенцировать тигемонам (МРС_@4) к различным штаммам, сверхэкспрессирующим бета-лактамазы класса A (ESBL), класса C и класса D, соответственно. Также указана величина MIC тигемонама для каждого штамма. В Таблице 12 приведена активность BLI по потенцированию тигемонама против штаммов, экспрессирующих ESBL класса A. В Таблице 13 приведена активность BLI по потенцированию тигемонама (aztreonam) против штаммов, экспрессирующих ферменты классов C и D.

Таблица 12 MIC тигемонама (мкг/мл) 512 256 >512 256 64 256 >512 512   MPC₄ СТХ-М-14 КР1005 MPC₄ СТХ-М-15 КР1009 MPC₄ SHV-5 ес308 MPC₄ SHV-12 КР1010 MPC₄ SHV-18 КР1012 MPC₄ TEM-10 ЕС1009 MPC₄ TEM-10 ес302 MPC₄ TEM-26 ес304 Тазобактам 10 10 5 1,25 1,25 2,5 5 1,25 Клавулановая кислота 2,5 1,25 <=0,6 <=0,6 <=0,6 <=0,6 2,5 <=0,6 5 Z Z Z Z Z Z Z Z 9 Z Z Z Z Z Z Z Z 18 X X Y X X X Y Y 37 Z Z Z Z Z Z Z Z 48 Z Z Z Z Z Z Z Z 63 Z Y Z Y Y Z Z Z 64 Z Y Y X Y Y Z Z 67 Z Y Z Y Y Z Z Z 68 Y Y Y X X Y Y Y X = МРС_@4 менее 2 мкг/мл. Y = МРС_@4 от 2 мкг/мл до 10 мкг/мл. Z = МРС_@4 более 10 мкг/мл. ND = Нет данных.

Таблица 13 Класс С С С D S MIC тигемонама (мкг/мл) 32 16 8 256 8   MPC₄ ECL1002 MPC₄ CMY-6, ЕС1010 MPC₄ РАМ2035 MPC₄ ОХА-10, КР1007 MPC₄ ОХА-2, КРХ1001 Тазобактам 10 2,5 5 5 40 Клавулановая
кислота >40 40 >40 <=0,6 1,25 5 Y X X Z X 9 Y Y Y Z X 18 Y X X Y Y 37 X X X Z X 48 Y X Y Z X 63 Y X Y Y X 64 X X Y X Y 67 Y X X Z X 68 Y X Y X X X = МРС_@4 менее 2 мкг/мл. Y = МРС_@4 от 2 мкг/мл до 10 мкг/мл. Z = МРС_@4 более 10 мкг/мл. ND = Нет данных.

Пример 14

Анализы методом "шахматной доски" были использованы для оценки способности соединения 5 потенцировать различные карбапенемы (биапенем, дорипенем, эртапенем, имипенем и меропенем) против штаммов, экспрессирующих КРС, отдельно или в комбинации с дополнительными бета-лактамазами. Наибольшая концентрация соединения 5 составляла 10 мг/л. Результаты представлены в Таблице 14. Соединение 5 было способно значительно потенцировать различные карбапенемы.

Таблица 14     Концентрация соединения 5 (мг/л), потенцирующая карбапенем (мг/л) Организм Штамм Ферменты Антибиотик 0 0,16 0,31 0,625 1,25 2,5 5 10 Klebsiella pneumoniae KP1004 КРС-2 Биапенем Z X X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1004 КРС-2 Дорипенем Y Y X X X X X X Klebsiella
pneumoniae KP1004 КРС-2 Эртапенем Z Z Y Y X X X X Klebsiella pneumoniae KP1004 KPC-2 Имипенем Z X X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1004 KPC-2 Меропенем Z Y Y X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1008 KPC-2 Биапенем Z X X X X X NG NG Klebsiella pneumoniae KP1008 KPC-2 Дорипенем Y X X X X X NG NG Klebsiella pneumoniae KP1008 KPC-2 Эртапенем Z X X X X X NG NG Klebsiella pneumoniae KP1008 KPC-2 Имипенем Y X X X X X NG NG Klebsiella pneumoniae KP1008 KPC-2 Меропенем Y X X X X X NG NG Klebsiella pneumoniae KP1082 KPC-2, SHV-1 Биапенем Y X X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1082 KPC-2, SHV-1 Дорипенем Y X X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1082 KPC-2, SHV-1 Эртапенем Y X X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1082 KPC-2, SHV-1 Имипенем Y X X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1082 KPC-2, SHV-1 Меропенем Y X X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1087 KPC-2, CTX-M-15, SHV-11, TEM-1 Биапенем Z Z Z Z Y Y X X Klebsiella pneumoniae KP1087 KPC-2, CTX-M-15, SHV-11, TEM-1 Дорипенем Z Z Z Z Z Y Y X Klebsiella pneumoniae KP1087 KPC-2, CTX-M-15, SHV-11, TEM-1 Эртапенем Z Z Z Z Z Z Y Y Klebsiella pneumoniae KP1087 KPC-2, CTX-M-15, SHV-11, TEM-1 Имипенем Z Y Y Y Y Y X X Klebsiella pneumoniae KP1087 KPC-2, CTX-M-15, SHV-11, TEM-1 Меропенем Z Z Z Z Z Y Y X Klebsiella oxytoca KX1019 KPC-2, OXA-2 Биапенем Z Y Y Y Y Y X X Klebsiella oxytoca KX1019 KPC-2, OXA-2 Дорипенем Y Y Y Y X X X X Klebsiella oxytoca KX1019 KPC-2, OXA-2 Эртапенем Z Y Y Y Y Y X X Klebsiella oxytoca KX1019 KPC-2, OXA-2 Имипенем Y Y Y Y X X X X Klebsiella oxytoca KX1019 KPC-2, OXA-2 Меропенем Y Y Y X X X X X Klebsiella oxytoca KX1017 KPC-2, OXA-2, SHV-30 Биапенем Y Y Y X X X X X Klebsiella oxytoca KX1017 KPC-2, OXA-2, SHV-30 Дорипенем Y Y Y Y X X X X Klebsiella oxytoca KX1017 KPC-2, OXA-2, SHV-30 Эртапенем Z Y Y Y Y X X X Klebsiella oxytoca KX1017 KPC-2, OXA-2,
SHV-30 Имипенем Z Y X X X X X X Klebsiella oxytoca KX1017 KPC-2, OXA-2, SHV-30 Меропенем Y Y Y X X X X X Klebsiella oxytoca KX1018 KPC-2, SHV-40, OXY-1 Биапенем Z X X X X X NG NG Klebsiella oxytoca KX1018 KPC-2, SHV-40, OXY-1 Дорипенем Y X X X X X NG NG Klebsiella oxytoca KX1018 KPC-2, SHV-40, OXY-1 Эртапенем Z X X X X X NG NG Klebsiella oxytoca KX1018 KPC-2, SHV-40, OXY-1 Имипенем Y X X X X X NG NG Klebsiella oxytoca KX1018 KPC-2, SHV-40, OXY-1 Меропенем Y X X X X X NG NG Escherichia coli EC1007 KPC-3 Биапенем Z X X X X X X X Escherichia coli EC1007 KPC-3 Дорипенем Y X X X X X X X Escherichia coli EC1007 KPC-3 Эртапенем Z X X X X X X X Escherichia coli EC1007 KPC-3 Имипенем Z X X X X X X X Escherichia coli EC1007 KPC-3 Меропенем Y X X X X X X X Enterobacter cloacae ECL058 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Биапенем Z Y Y Y X X X X Enterobacter
cloacae ECL058 KPC-3,
SHV-11, TEM-1 Дорипенем Z Y Y Y Y X X X Enterobacter cloacae ECL1058 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Эртапенем Z Z Z Z Y Y X X Enterobacter cloacae ECL058 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Имипенем Z Y Y Y X X X X Enterobacter cloacae ECL058 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Меропенем Z Y Y Y Y X X X Enterobacter cloacae ECL059 KPC-3, SHV-12, TEM-1 Биапенем Y X X X X X X X Enterobacter cloacae ECL059 KPC-3, SHV-12, TEM-1 Дорипенем Y X X X X X X X Enterobacter cloacae ECL059 KPC-3, SHV-12, TEM-1 Эртапенем Y X X X X X X X Enterobacter cloacae ECL059 KPC-3, SHV-12, TEM-1 Имипенем Y X X X X X X X Enterobacter cloacae ECL059 KPC-3, SHV-12, TEM-1 Меропенем Y X X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1083 KPC-3, SHV-1, TEM-1 Биапенем Z Y X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1083 KPC-3, SHV-1, TEM-1 Дорипенем Z Y X X X X X X Klebsiella
pneumoniae KP1083 KPC-3,
SHV-1, TEM-1 Эртапенем Z Y X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1083 KPC-3, SHV-1, TEM-1 Имипенем Z Y X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1083 KPC-3, SHV-1, TEM-1 Меропенем Z Y X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1084 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Биапенем Z Z Z Z Z Y X X Klebsiella pneumoniae KP1084 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Дорипенем Z Z Z Z Y Y Y X Klebsiella pneumoniae KP1084 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Эртапенем Z Z Z Z Z Z Y Y Klebsiella pneumoniae KP1084 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Имипенем Z Z Z Y Y Y X X Klebsiella pneumoniae KP1084 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Меропенем Z Z Z Z Z Y Y X Klebsiella pneumoniae KP1088 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Биапенем Z Y X X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1088 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Дорипенем Y Y Y X X X X X Klebsiella pneumoniae KP1088 KPC-3, SHV-11, TEM-1 Эртапенем Z Z Y X X X X X Klebsiella
pneumoniae KP1088 KPC-3,
SHV-11, ТЕМ-1 Имипенем Z Y X X X X X X Klebsiella pneumoniae КР1088 КРС-3, SHV-11, ТЕМ-1 Меропенем Z Y Y X X X X X X = MIC менее 0,5 мг/л. Y = MIC от 0,5 мг/л до 4 мг/л. Z = MIC более 4 мг/л. NG = отсутствие роста.

Пример 15

Для оценки фармакокинетических характеристик разовой дозы и абсолютной биодоступности при пероральном введении исследуемого соединения может быть использована in vivo модель. Как описано более конкретнее ниже, исследуемое соединение вводят крысам Sprague-Dawley (SD) внутривенно или перорально по схеме перекрестного исследования и измеряют наблюдаемые фармакокинетические свойства и биодоступность при пероральном введении.

При внутривенном введении, самцам крыс делают 30-минутную внутривенную инфузию дозы 20 или 50 мг/кг соединения 5 через канулю в бедренную вену. Образцы плазмы (0,3 мл) берут через канюлю из яремной вены в моменты времени 0,17, 0,33, 0,47, 0,58, 0,68, 0,75, 1, 2, 3, 4 и 6 ч после введения дозы. При пероральном введении, самцам крыс вводят 50 мг/кг соединения 5 (в солевом растворе) или соединения 62 (в 100% этаноле) перорально с помощью зонда. Образцы плазмы берут у каждой крысы в моменты времени 0,08, 0,17, 0,25, .33, .50, .75, 1, 2, 3, 4 и 6 ч после введения дозы.

Концентрации соединений в плазме определяют методом LC/MS/MS с низшим пределом количественного определения 10 нг/мл для Соединения 5 и 100 нг/мл для Соединения 62. Экстракция: объемы плазмы 50 мкл из образцов и стандартов экстрагируют с помощью 200 мкл метанола со 100 мМ ацетата аммония, 2 мкг/мл гатифлоксацина (внутренний стандарт для Соединения 62) и 2 мкг/мл Соединения 38 (внутренний стандарт для Соединения 5). Образцы перемешивают и центрифугируют в течение 30 мин. при 3000×g. Отбирают 150 мкл супернатанта и прибавляют к 450 мкл воды.

ВЭЖХ - масс-спектрометрия: Для разделения и количественного определения используют насос Agilent 1100 ВЭЖХ, автоматический пробоотборник НТС PAL и масс-спектрометр Sciex 3200Q. Соединение 62 и его внутренний стандарт детектируют с использованием +ESI. Соединение 5 и его внутренний стандарт детектируют с использованием -ESI. LC/MS/MS: 1) Колонка: Chromolith FastGradient RP-18e, 50×2 мм; 2) Подвижная фаза A: Вода с 0,1% TFA, Органическая фаза B: Ацетонитрил с 0,1% TFA; Скорость подачи: 600 мкл/мин.; Объем ввода пробы: 10 мкл; Градиент ВЭЖХ: 5% B→60% B, 0,01→1,5 мин.; 60% B, 1,5→1,6 мин.; 60% B→5% B, 1,6→1,7 мин.; 5% B, 1,7→2,7 мин.

Концентрации в плазме моделируют с помощью программы WinNonlin^® (Pharsight Corp, Mountain View, CA).

В данном эксперименте, трем самцам крыс Sprague Dawley вводили Соединение 5 внутривенным или оральным путем. В заданные моменты времени берут образцы крови и анализируют. Как показано выше в Таблице 15 и на Фигуре 1, Соединение 5 демонстрирует линейную РК (фармакокинетику) у крыс. Однако Соединение 5 не всасывается при пероральном введении.

Таблица 15 Путь введения Доза (мг/кг) T_1/2 (ч) Cmax (мг/л) CL/F (л/ч/кг) AUC (мг·ч/л) IV 20 1,56 19,82 1,65 12,15 IV 50 4,53 45,93 1,77 28,19 PO 50 1,55 0,29 60,38 0,81

В данном эксперименте, трем самцам крыс Sprague Dawley вводили Соединение 5 внутривенно или Соединение 62 (форма пролекарства Соединения 5) перорально. Образцы плазмы берут в заданные моменты времени и анализируют на присутствие соединения 5. Эти исследования были предназначены для определения биодоступности при пероральном введении соединения 62-формы пролекарства соединения 5. Самцам крыс (без голодания) перорально вводят 50 мг/кг пролекарства Соединения 62. Как изображено на Фигуре 2, пролекарство соединения 5 имеет биодоступность при пероральном введении более 80%.

Полиморфы могут быть детектированы, идентифицированы, классифицированы и охарактеризованы с использованием хорошо известных методов, таких как, без ограничений, дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК), термогравиметрия (ТГА) и порошковая рентгеновская дифрактометрия (PXRD).

Пример 16

Кристаллическую структуру соединения 5 анализируют с помощью рентгеновских порошковых дифрактограмм ("PXRD"). Данные рентгеновского дифракционного анализа получают при комнатной температуре с использованием дифрактометра PANalytical X'Pert Pro (Cu-Kα излучение), оснащенного автоматическим устройством смены образцов, тета-тета гониометром, щелями с автоматической регулировкой расхождения пучка, вторичным монохроматором и сцинтилляционным счетчиком. Образцы готовят для анализа путем набивки порошка в полость диаметром 12 мм и глубиной 0,25 мм, вырезанную в кремниевой (Si) пластине держателя образца с нулевым фоном. Образец вращается во время облучения медными K-альфа 1 рентгеновскими лучами (длина волны = 1,5406 ангстрем) с помощью рентгеновской трубки, работающей при 45 кВ/40 мА. Анализы проводят при работе гониометра в непрерывном режиме с 5-секундным подсчетом на шаг, равный 0,02°, в интервале углов два тета от 2° до 55°. Иллюстративный пример порошковой рентгеновской дифрактограммы для Соединения 5 приведен на Фигуре 3.

Как будет понятно квалифицированному специалисту в области кристаллографии, относительные интенсивности различных пиков, приведенных на Фигуре 3, могут меняться под воздействием ряда факторов, таких как эффект ориентации кристаллов в рентгеновском пучке или степень чистоты анализируемого материала или степень кристалличности образца. Положения пиков также могут сдвигаться при вариациях толщины образца, но положения пиков останутся по существу такими, как указано на Фигуре 3. Квалифицированному специалисту в области кристаллографии будет также понятно, что измерения с использованием другой длины волны будут приводить к другим величинам сдвигов в соответствии с уравнением Брэгга - nλ = 2d sin θ. Такие дополнительные порошковые рентгеновские дифрактограммы, полученные при использовании альтернативных длин волн, считаются альтернативными представлениями порошковых рентгеновских дифрактограмм кристаллических материалов по настоящему изобретению и, как таковые, входят в объем настоящего изобретения.

В Таблице 16 приведены положения пиков и относительные интенсивности для порошковой рентгеновской дифрактограммы по Фиг.3. Соответственно, некоторые варианты исполнения включают кристаллическую форму соединения 5, имеющую три или больше, четыре или больше, пять или больше, шесть или больше, семь или больше, восемь или больше, девять или больше или десять или больше характеристических рентгеновских дифракционных пиков (длина волны = 1,5406 A), выбранных из значений 2θ, равных 9,0°, 15,7°, 17,3°, 17,6°, 18,1°, 21,3°, 22,4°, 23,5°, 24,9°, 27,2°, 27,4°, 28,1°, 29,1°, 31,2° и 35,7°. Некоторые варианты исполнения включают кристаллическую форму соединения 5, имеющую три или больше, четыре или больше, пять или больше или характеристических рентгеновских дифракционных пиков (длина волны = 1,5406 A), выбранных из значений 2θ, равных 9,0°, 17,3°, 17,6°, 18,1°, 22,4° и 27,2° 2θ. Некоторые варианты исполнения включают кристаллическую форму соединения 5, имеющую характеристические рентгеновские дифракционные пики (длина волны = 1,5406 A) при 9,1°, 17,3°, 17,6° и 18,1° 2θ.

Таблица 16 °2θ Площадь [cts°2θ] Величина межплоскостных расстояний [A] 9,0088 870,8 9,80831 12,0132 29,19 7,36118 13,2369 19,12 6,68332 15,4527 55,73 5,72961 16,6911 41,97 5,30719 17,3464 285,76 5,10815 17,59 171,25 5,03794 18,1212 475,59 4,89145 19,9585 23,95 4,4451 20,1214 18,12 4,40949 21,3328 84,5 4,16175 22,4035 147,38 3,96521 22,9212 39,45 3,87681 23,48 60,99 3,78579 24,8881 77,52 3,5747 26,1352 20,92 3,40689 26,3458 20,23 3,38013 27,2278 162,9 3,27261 27,357 50,29 3,25744 28,0871 54,62 3,17441 29,0644 51,29 3,06985 29,63 30,23 3,01253 30,1989 19,34 2,95706 31,2457 65,66 2,86033 32,1641 32,04 2,78073 33,7983 19,84 2,64992 35,1614 21,23 2,55025 35,6871 57,8 2,51388 36,5979 22 2,45338 37,7599 33,73 2,3805 39,8439 31,99 2,26066

Как хорошо понятно специалистам, в связи с изменением условий экспериментов при измерении рентгеновских дифрактограмм на различных инструментах, положения пиков принято считать одинаковыми, если значения два тета (2θ) совпадают с точностью до 0,2° (т.е., ±0,2°). Например, в Фармакопее США указано, что если угловые положения 10 наиболее сильных дифракционных пиков совпадают с точностью ±0,2° с результатами для эталонного материала, и относительные интенсивности пиков отличаются не более чем на 20%, идентичность считается подтвержденной. Соответственно, положения пиков, совпадающие с точностью до 0,2° с приведенными тут значениями, считаются идентичными.

Пример 17

Метод ДСК измеряет температуры тепловых переходов, при которых кристаллическая форма поглощает или выделяет тепло при изменении ее кристаллической структуры или плавлении. ТГА используется для измерения термической стабильности и доли летучих компонентов в образце путем контроля изменений веса при нагреве образца. При проведении инфракрасной спектроскопии летучих компонентов отходящих газов во время ТГА-анализа псевдополиморфа (ТГА-ИКС) можно определить молекулярный состав псевдополиморфа. Таким образом, эти методики позволяют анализировать твердофазные формы, существующие в виде сольватов и/или гидратов.

Соединение 5 анализировали методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК). Для проведения анализов использовали дифференциальный сканирующий калориметр Q100 фирмы ТА Instruments, оснащенный автоматическим пробоотборником и системой охлаждения при продувке 40 мл/мин. N₂. Каждый образец нагревают от 25 до 300°C со скоростью 15°C в минуту в алюминиевой чашечке с крышечкой, при продувке газообразным азотом. Результаты анализов ДСК зависят от нескольких факторов, включая скорость нагрева, чистоту образца, размеры кристаллов и размер образца. Термограмма ДСК, полученная для образца соединения 5, приведена на Фигуре 4, с наложенной на нее термограммой ТГА. Эти данные показывают наличие одного эндотермического перехода при 155°C.

Термогравиметрический-инфракрасный (TG-IR) анализ проводят с помощью термогравиметрического анализатора Q5000 фирмы ТА Instruments, сопряженного с ИК-Фурье спектрометром Nicolet 6700 (Thermo Electron), оснащенным внешним ТГА-ИКС модулем с проточной газовой ячейкой и DTGS (дейтерированным триглицинсульфатным) детектором. Контроль длин волн ИК-Фурье спектров осуществляют по полистиролу, а в качестве стандартов для калибровки ТГ используют никель и Alumel™. Образец помещают в платиновую или алюминиевую чашечку для образцов и чашечку устанавливают в ТГ-печь. Включают сначала инструмент ТГ, а затем сразу же инструмент ИК-Фурье. ТГ-инструмент работает под потоком гелия при 90 и 10 куб.см/мин. при продувке и при взвешивании, соответственно. Печь нагревают под азотом со скоростью 15°C/минуту до конечной температуры 230°C. ИК-спектры регистрируют приблизительно каждые 32 секунды в течение приблизительно 13 минут. Каждый ИК-спектр состоит из 32 просуммированных сканов, полученных при спектральном разрешении 4 см^-1. Термограмма ТГА, полученная для образца соединения 5, приведена на Фигуре 4, с наложенной термограммой ДСК. Эти данные ТГА и ИК-анализа выделяющихся газов показывают, что исходный материал не сольватирован, но теряет один молярный эквивалент воды в температурном интервале от 135 до 181°C.

Все упоминаемые тут ссылки, включая, без ограничений, опубликованные и неопубликованные заявки, патенты и литературные источники, целиком включены сюда в качестве ссылок и настоящим включаются в данное описание как его часть. В той степени, в которой публикации и патенты или патентные заявки, включенные сюда в качестве ссылок, противоречат содержанию данного описания, описание должно рассматриваться как заменяющее и/или имеющее преимущественное значение по сравнению с любым таким противоречащим материалом.

Термин "содержащий", в используемом тут значении, является синонимичным с "включающий", "вмещающий" или "характеризующийся", и является охватывающим или неограниченным и не исключает дополнительных неперечисленных элементов или стадий способа.

Все числа, описывающие количества ингредиентов, реакционные условия и т.д., используемые в описании, следует понимать как модифицированные во всех случаях термином "примерно". Соответственно, если не указано иное, численные параметры, приведенные тут, являются приближенными значениями, которые могут меняться в зависимости от желательных свойств, которые требуется получить. По меньшей мере и без желания ограничить применение доктрины эквивалентов к объему любых притязаний любой заявки, претендующей на приоритет настоящей заявки, каждый численный параметр должен рассматриваться с учетом числа значащих цифр и обычных подходов к округлению.

Приведенное выше описание раскрывает несколько способов и материалов, которые могут быть подвергнуты модификациям, а также изменениям технологий изготовления и оборудования. Такие модификации будут очевидными квалифицированным специалистам, принимая во внимание данное описание или практику раскрытых тут способов. Вследствие этого, предполагается, что настоящее изобретение не ограничено конкретными вариантами исполнения, раскрытыми тут, а охватывает все модификации и альтернативы, не выходящие за пределы сущности и объема изобретения.

Изобретение относится к соединению, имеющему структуру формулы I:

или его фармацевтически приемлемой соли. Значения радикалов следующие: Y представляет собой содержащую 1-4 атома алкиленовую или содержащую 2-4 атома алкениленовую связующую группу; R¹ выбирают из группы, состоящей из -C_1-9-алкила, -С_2-9-алкенила, -С_2-9-алкинила, -NR⁹R¹⁰, -C_1-9-алкил-R¹¹, -С_2-9-алкенил-R¹¹, -С_2-9-алкинил-R¹¹, -карбоциклический радикал-R¹¹, -CH(OH)C_1-9-алкил-R⁹, -СН(ОН)С_2-9-алкенил-R⁹, -CH(OH)C_2-9-алкинил-R⁹, -СН(ОН)-карбоциклический радикал-R⁹, -C(=O)R⁹, -С(=O)С_1-9-алкил-R⁹, -С(=O)С_2-9-алкенил-R⁹, -С(=O)С_2-9-алкинил-R⁹, -С(=O)С_2-9-карбоциклический радикал-R⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)OR⁹, -N(R⁹)C(=O)C(=NR¹⁰)R⁹, -N(R⁹)C(=O)C(=CR⁹R¹⁰)R⁹, -N(R⁹)C(=O)C_1-4-алкил-N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=NR¹⁰)R⁹, -C(=NR¹⁰)NR⁹R¹⁰, -N=C(R⁹)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)SO₂R⁹, -N(R⁹)SO₂NR⁹R¹⁰, -N=CHR⁹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала; R⁶ представляет собой водород; R⁷ представляет собой водород; R⁸ представляет собой водород; каждый R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из Н, -C_1-9-алкила, С_2-9-алкенила, -С_2-9-алкинила, карбоциклического радикала, -С_1-9-алкил-R¹¹, -С_2-9-алкенил-R¹¹, -С_2-9-алкинил-R¹¹, -карбоциклический радикал-R¹¹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала; каждый R¹⁰ независимо выбирают из группы, состоящей из Н, -C_1-9-алкила, -OR⁹, -CH(=NH), -C(=O)OR⁹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала; каждый R¹¹ независимо выбирают из группы, состоящей из замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала; X представляет собой -CO₂R¹²; R¹² выбирают из группы, состоящей из Н, C_1-9-алкила, -(CH₂)_0-3-R¹¹, -С(R¹³)₂ОС(O)С_1-9-алкила, -C(R¹³)₂OC(O)R¹¹, -С(R¹³)₂ОС(O)ОС_1-9-алкила и -C(R¹³)₂OC(O)OR¹¹; каждый R¹³ независимо выбирают из группы, состоящей из Н и С_1-4-алкила; и m независимо обозначает нуль или целое число, выбранное из 1-2. Также предложены фармацевтическая композиция, способ повышения чувствительности к бактериальной инфекции β-лактамного антибактериального агента, использование соединения для изготовления лекарственного средства, стерильный контейнер, способ приготовления фармацевтической композиции и способ введения раствора. Соединение формулы I используется в качестве терапевтических агентов, особенно, при лечении бактериальных инфекций. 8 н. и 56 з.п. ф-лы, 4 ил., 16 табл., 17 пр.

1. Соединение, имеющее структуру формулы I:

или его фармацевтически приемлемая соль, где
Y представляет собой содержащую 1-4 атома алкиленовую или содержащую 2-4 атома алкениленовую связующую группу;
R¹ выбирают из группы, состоящей из -C_1-9-алкила, -С_2-9-алкенила, -С_2-9-алкинила, -NR⁹R¹⁰, -C_1-9-алкил-R¹¹, -С_2-9-алкенил-R¹¹, -С_2-9-алкинил-R¹¹, -карбоциклический радикал-R¹¹, -CH(OH)C_1-9-алкил-R⁹, -СН(ОН)С_2-9-алкенил-R⁹, -CH(OH)C_2-9-алкинил-R⁹, -СН(ОН)-карбоциклический радикал-R⁹, -C(=O)R⁹, -С(=O)С_1-9-алкил-R⁹, -С(=O)С_2-9-алкенил-R⁹, -С(=O)С_2-9-алкинил-R⁹, -С(=O)С_2-9-карбоциклический радикал-R⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)OR⁹, -N(R⁹)C(=O)C(=NR¹⁰)R⁹, -N(R⁹)C(=O)C(=CR⁹R¹⁰)R⁹, -N(R⁹)C(=O)C_1-4-алкил-N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=NR¹⁰)R⁹, -C(=NR¹⁰)NR⁹R¹⁰, -N=C(R⁹)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)SO₂R⁹, -N(R⁹)SO₂NR⁹R¹⁰, -N=CHR⁹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;
R⁶ представляет собой водород;
R⁷ представляет собой водород;
R⁸ представляет собой водород;
каждый R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из Н, -C_1-9-алкила, С_2-9-алкенила, -С_2-9-алкинила, карбоциклического радикала, -С_1-9-алкил-R¹¹, -С_2-9-алкенил-R¹¹, -С_2-9-алкинил-R¹¹, -карбоциклический радикал-R¹¹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;
каждый R¹⁰ независимо выбирают из группы, состоящей из Н, -C_1-9-алкила, -OR⁹, -CH(=NH), -C(=O)OR⁹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;
каждый R¹¹ независимо выбирают из группы, состоящей из замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;
X представляет собой -CO₂R¹²;
R¹² выбирают из группы, состоящей из Н, C_1-9-алкила, -(CH₂)_0-3-R¹¹, -С(R¹³)₂ОС(O)С_1-9-алкила, -C(R¹³)₂OC(O)R¹¹, -С(R¹³)₂ОС(O)ОС_1-9-алкила и -C(R¹³)₂OC(O)OR¹¹;
каждый R¹³ независимо выбирают из группы, состоящей из Н и С_1-4-алкила; и
m независимо обозначает нуль или целое число, выбранное из 1-2,
где каждый С_1-9-алкил, С_2-9-алкенил и С_2-9-алкинил независимо опционально замещен одним или более заместителями: галогеном, гидроксилом, С_1-4 ацилокси, амино, амидо, циано, нитро, гуанидино, амидино, меркапто, карбокси, сульфонилокси, карбонил, бензилокси, арил, гетероарил, карбоциклическим радикалом и гетероциклическим радикалом;
где арил представляет фенил, нафтил или антрил, причем арил независимо опционально замещен одним или более заместителями: амино, циано, гидроксил, С_1-4-алкил, галоидалкил, C_1-6-алкокси, нитро, гало, меркапто, карбокси, карбонил, бензилокси, арил, гетероарил и C_1-6- алкокси, замещенный одним или несколькими заместителями: амино, циано, гидроксил, С_1-4-алкил, галоалкил, C_1-6-алкокси, нитро, гало и меркапто;
где гетероарил представляет тиенил, пиридил, фурил, оксазолил, оксадиазолил, пироллил, имидазолил, триазолил, тиодиазолил, пиразолил, изоксазолил, тиадиазолил, пиранил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, триазинил, тиазолил, причем гетероарил независимо опционально замещен одним или более заместителями: амино, циано, гидроксил, C_1-4-алкил, галоалкил, C_1-6-алкокси, нитро, гало, меркапто, карбокси, карбонил, бензилокси, арил и гетероарил;
где карбоциклический радикал представляет С_3-10-карбоциклический радикал, независимо опционально замещенный одним или более заместителями: галогеном, C_1-6-алкокси, амино, амидо, циано, нитро, гидроксил, меркапто, карбокси, карбонил, бензилокси, арил и гетероарил;
где гетероциклический радикал представляет С_5-7-неароматическое циклическое кольцо, включающее по крайней мере один гетероатом в кольце, причем гетероатом(ы) 6-членного гетероциклического радикала выбирают из указаннной группы: от одного до трех О, N или S; и причем один или более гетероатомов 5-членного гетероциклического радикала выбирают из указанной группы: О, N или S; причем гетероциклический радикал независимо опционально замещен одним или более заместителями; галогеном, С_1-6 алкокси, С_1-4 ацилокси, амино, амидо, циано, нитро, гидроксил, меркапто, карбокси, карбонил, бензилокси, арил и гетероарил.

2. Соединение по п.1, имеющее структуру формулы II:

или его фармацевтически приемлемая соль,где
связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой связь, выбранную из группы, состоящей из простой связи и двойной связи, при условии, что пунктирная и сплошная линии могут быть двойной связью только в случае, когда n равен 1;
R² и R⁴ представляют собой водород;
R³ и R⁵ представляют собой водород,
при условии, что если связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой двойную связь, то R³ и R⁵ отсутствуют; и
n независимо обозначает нуль или целое число, выбранное из 1-2.

3. Соединение по п. 2, имеющее определенную 3,6-цис-стереохимию, изображенную на формуле IIa:

или его фармацевтически приемлемая соль.

4. Соединение по п.2, имеющее определенную 3,6-транс-стереохимию, изображенную на формуле IIb:

или его фармацевтически приемлемая соль.

5. Соединение по любому из пп.2-4, в котором:
R¹ выбирают из группы, состоящей из -С_2-9-алкенила, -NR⁹R¹⁰, -C_1-9-алкил-R¹¹, -С_2-9-алкенил-R¹¹, -С_2-9-алкинил-R¹¹, -CH(OH)C_1-9-алкил-R⁹, -СН(ОН)С_2-9-алкенил-R⁹, -СН(ОН)С_2-9-алкинил-R⁹, -C(=O)R⁹, -C(=O)C_1-9-алкил-R⁹, -С(=O)С_2-9-алкенил-R⁹, -С(=O)С_2-9-алкинил-R⁹, -C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=O)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)C(=O)OR⁹, -N(R⁹)C(=O)-C(=NR¹⁰)R⁹, -N(R⁹)C(=O)C_1-4-алкил-N(R⁹)C(=O)R⁹, -N(R⁹)C(=NR¹⁰)R⁹, -C(=NR¹⁰)NR⁹R¹⁰, -N=C(R⁹)NR⁹R¹⁰, -N(R⁹)SO₂R⁹, -N(R⁹)SO₂NR⁹R¹⁰, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;
каждый R⁹ независимо выбирают из группы, состоящей из Н, -C_1-9-алкила, С_2-9-алкенила, -С_2-9-алкинила, -C_1-9-алкил-R¹¹, -С_2-9-алкенил-R¹¹, -С_2-9-алкинил-R¹¹, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного -(СН₂)_0-3-карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала;
каждый R¹⁰ независимо выбирают из группы, состоящей из Н, -C_1-9-алкила, -OR⁹, -CH(=NH), замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала; и
X представляет собой -СО₂Н.

6. Соединение по любому из пп.2-4, в котором n равен 1.

7. Соединение по п.1, имеющие структуру формулы IIIa или IIIb:

или его фармацевтически приемлемая соль, где
связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой связь, выбранную из группы, состоящей из простой связи и двойной связи;
каждый R² и R⁴ представляет собой водород;
каждый R³ и R⁵ представляет собой водород,
при условии, что если связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой двойную связь, то R³ и R⁵ отсутствуют.

8. Соединение по п.7, имеющее 3,7-цис-стереохимию, изображенную на формулах IIIc и IIId:

или его фармацевтически приемлемая соль.

9. Соединение по п.7, имеющее 3,7-транс-стереохимию, изображенную на формулах IIIe и IIIf:

или его фармацевтически приемлемая соль.

10. Соединение по п.1, имеющее структуру формулы IVa, IVb или IVc:


или его фармацевтически приемлемая соль, где
связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой связь, выбранную из группы, состоящей из простой связи и двойной связи;
каждый R² и каждый R⁴ представляет собой водород;
каждый R³ и каждый R⁵ представляет собой водород,
при условии, что если связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой двойную связь, то R³ и R⁵, присоединенные к атомам углерода, связанным этой связью, отсутствуют.

11. Соединение по п.10, имеющее 3,8-цис-стереохимию, изображенную на формуле IVd, IVe и IVf:


или его фармацевтически приемлемая соль.

12. Соединение по п.10, имеющее 3,8-транс-стереохимию, изображенную на формуле IVg, IVh и IVi:


или его фармацевтически приемлемая соль.

13. Соединение по любому из пп.1-12, в котором связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой простую связь.

14. Соединение по любому из пп.1-12, в котором связь, обозначенная пунктирной и сплошной линиями, представляет собой двойную связь.

15. Соединение по любому из пп.1-14, в котором R¹ представляет собой -NHC(=O)C_1-9-алкил-R¹¹.

16. Соединение по п.15, в котором R¹¹ представляет собой замещенный или незамещенный арил или замещенный или незамещенный гетероарил.

17. Соединение по п.16, в котором R¹¹ представляет собой тиен-2-ил.

18. Соединение по любому из пп.1-17, в котором R¹ представляет собой -NHC(=O)C(=NOR⁹)R⁹, где R⁹ выбирают из группы, состоящей из C_1-9-алкила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного или незамещенного карбоциклического радикала и замещенного или незамещенного гетероциклического радикала.

19. Соединение по любому из пп.1-4 и 6-18, в котором X представляет собой -СО₂Н.
20 Соединение по любому из пп.1-19, в котором m равен 1.

21. Соединение со структурой, которую выбирают из группы, состоящей из:











































и
или его фармацевтически приемлемая соль.

22. Соединение по п.1, имеющее структуру, выбранную из группы, состоящей из:
и
или его фармацевтически приемлемая соль.

23. Фармацевтическая композиция для использования в повышении чувствительности к бактериальной инфекции β-лактамного антибактериального агента, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп.1-22 и фармацевтически приемлемый эксципиент.

24. Композиция по п.23, в которой β-лактам выбирают из амоксициллина, ампициллина (пивампициллина, гетациллина, бакампициллина, метампициллина, талампициллина), эпициллина, карбенициллина (кариндациллина), тикарциллина, темоциллина, азлоциллина, пиперациллина, мезлоциллина, мециллинама (пивмециллинама), сулбенициллина, бензилпенициллина (G), клометоциллина, бензатина бензилпенициллина, прокаина бензилпенициллина, азидоциллина, пенамециллина, феноксиметилпенициллина (V), пропициллина, бензатина феноксиметилпенициллина, фенетициллина, клоксациллина (диклоксациллина, флуклоксациллина), оксациллина, метициллина, нафциллина, фаропенема, биапенема, дорипенема, эртапенема, имипенема, меропенема, панипенема, томопенема, разупенема, цефазолина, цефацетрила, цефадроксила, цефалексина, цефалоглицина, цефалониума, цефалоридина, цефалотина, цефапирина, цефатризина, цефазедона, цефазафлура, цефрадина, цефроксадина, цефтезола, цефаклора, цефамандола, цефминокса, цефоницида, цефоранида, цефотиама, цефпрозила, цефбуперазона, цефуроксима, цефузонама, цефокситина, цефотетана, цефметазола, лоракарбефа, цефиксима, цефтазидима, цефтриаксона, цефкапена, цефдалоксима, цефдинира, цефдиторена, цефетамета, цефменоксима, цефодизима, цефоперазона, цефотаксима, цефпимизола, цефпирамида, цефподаксима, цефсолудина, цефтерама, цефтибутена, цефтиолена, цефтизоксима, фломоксефа, латамоксефа, цефепима, цефозопрана, цефпирома, цефквинома, цефтобипрола, цефтаролина, СХА-101, RWJ-54428, МС-04,546, МЕ1036, BAL30072, SYN 2416, цефтиофур, цефквинома, цефовецина, азтреонама, тигемонама, карумонама, RWJ-442831, RWJ-333441 или RWJ-333442.

25. Композиция по п.23, в которой β-лактам выбирают из цефтазидима, биапенема, дорипенема, эртапенема, имипенема, меропенема или панипенема.

26. Композиция по п.23, в которой β-лактам выбирают из азтреонама, тигемонама, BAL30072, SYN 2416 или карумонама.

27. Композиция по п.26, в которой:
β-лактам представляет собой тигемонам;
композиция является пригодной для перорального введения;
X представляет собой -CO₂R¹²; и
R¹² выбирают из группы, состоящей из C_1-9-алкила, -(CH₂)_0-3-R¹¹, -С(R¹³)₂ОС(O)С_1-9-алкила, -C(R¹³)₂OC(O)R¹¹, -C(R¹³)₂OC(O)OC_1-9-алкила и -C(R¹³)₂OC(O)OR¹¹.

28. Соединение по любому из пп.1-22 для использования в повышении чувствительности к бактериальной инфекции β-лактамного антибактериального агента, при лечении или профилактике бактериальной инфекции.

29. Способ повышения чувствительности к бактериальной инфекции β-лактамного антибактериального агента, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту соединения по любому из пп. 1-22.

30. Способ по п.29, дополнительно включающий введение β-лактамного антибактериального агента

31. Способ по п.30, в котором β-лактам выбирают из амоксициллина, ампициллина (пивампициллина, гетациллина, бакампициллина, метампициллина, талампициллина), эпициллина, карбенициллина (кариндациллина), тикарциллина, темоциллина, азлоциллина, пиперациллина, мезлоциллина, мециллинама (пивмециллинама), сульбенициллина, бензилпенициллина (G), клометоциллина, бензатина бензилпенициллина, прокаина бензилпенициллина, азидоциллина, пенамециллина, феноксиметилпенициллин (V), пропициллина, бензатина феноксиметилпенициллина, фенетициллина, клоксациллина (диклоксациллина, флуклоксациллина), оксациллина, метициллина, нафциллина, фаропенема, биапенема, дорипенема, эртапенема, имипенема, меропенема, панипенема, томопенема, разупенема, цефазолина, цефацетрила, цефадроксила, цефалексина, цефалоглицина, цефалониума, цефалоридина, цефалотина, цефапирина, цефатризина, цефазедона, цефазафлура, цефрадина, цефроксадина, цефтезола, цефаклора, цефамандола, цефминокса, цефоницида, цефоранида, цефотиама, цефпрозила, цефбуперазона, цефуроксима, цефузонама, цефокситина, цефотетана, цефметазола, лоракарбефа, цефиксима, цефтазидима, цефтриаксона, цефкапена, цефдалоксима, цефдинира, цефдиторена, цефетамета, цефменоксима, цефодизима, цефоперазона, цефотаксима, цефпимизола, цефпирамида, цефподаксима, цефсолудина, цефтерама, цефтибутена, цефтиолена, цефтизоксима, фломоксефа, латамоксефа, цефепима, цефозопрана, цефпирома, цефквинома, цефтобипрола, цефтаролина, СХА-101, RWJ-54428, МС-04,546, МЕ1036, BAL30072, SYN 2416, цефтиофура, цефквинома, цефовецина, азтреонама, тигемонама, карумонама, RWJ-442831, RWJ-333441 или RWJ-333442.

32. Способ по п.30, в котором β-лактам выбирают из цефтазидима, биапенема, дорипенема, эртапенема, имипенема, меропенема или панипенема.

33. Способ по п.30, в котором β-лактам выбирают из азтреонама, тигемонама, BAL30072, SYN 2416 или карумонама.

34. Способ по любому из пп.29-33, в котором субъект является млекопитающим.

35. Способ по п.34, в котором млекопитающее является человеком.

36. Способ по любому из пп.29-35, в котором инфекция включает бактерии, выбранные из Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas acidovorans, Pseudomonas alcaligenes, Pseudomonas putida, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Aeromonas hydrophilia, Escherichia coli, Citrobacter freundii, Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia marcescens, Francisella tularensis, Morganella morganii, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Providencia stuartii, Acinetobacter baumannii, Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia intermedia, Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus haemolyticus, Haemophilus parahaemolyticus, Haemophilus ducreyi, Pasteurella multocida, Pasteurella haemolytica, Branhamella catarrhalis, Helicobacter pylori, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Borrelia burgdorferi, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Legionella pneumophila, Listeria monocytogenes, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Kingella, Moraxella, Gardnerella vaginalis, Bacteroides fragilis, Bacteroides distasonis, гомологичной группы Bacteroides 3452A, Bacteroides vulgatus, Bacteroides ovalus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides eggerthii, Bacteroides splanchnicus, Clostridium difficile, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium avium, Mycobacterium intracellulare, Mycobacterium leprae, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium ulcerans, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophytics, Staphylococcus intermedius, Staphylococcus hyicus subsp. hyicus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis или Staphylococcus saccharolyticus.

37. Способ по любому из пп.29-35, в котором инфекция включает бактерии, выбранные из Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Stenotrophomonas maltophilia, Escherichia coli, Citrobacter freundii, Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia marcescens, Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia intermedia, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus haemolyticus, Haemophilus parahaemolyticus, Helicobacter pylori, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Legionella pneumophila, Listeria monocytogenes, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Moraxella, Bacteroides fragilis, Bacteroides vulgatus, Bacteroides ovalus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides eggerthii или Bacteroides splanchnicus.

38. Использование соединения по любому из пп.1-22 при изготовлении лекарственного средства для лечения или профилактики бактериальной инфекции.

39. Использование по п.38, дополнительно включающее использование дополнительного лекарственного средства для лечения или профилактики бактериальной инфекции, представляющего собой β-лактамный антибактериальный агент.

40. Использование по п.39, в котором β-лактам выбирают из амоксициллина, ампициллина (пивампициллина, гетациллина, бакампициллина, метампициллина, талампициллина), эпициллина, карбенициллина (кариндациллина), тикарциллина, темоциллина, азлоциллина, пиперациллина, мезлоциллина, мециллинама (пивмециллинама), сулбенициллина, бензилпенициллина (G), клометациллина, бензатина бензилпенициллина, прокаина бензилпенициллина, азидоциллина, пенамециллина, феноксиметилпенициллина (V), пропициллина, бензатина феноксиметилпенициллина, фенетициллина, клоксациллина (диклоксациллина, флуклоксациллина), оксациллина, метициллина, нафциллина, фаропенема, биапенема, дорипенема, эртапенема, имипенема, меропенема, панипенема, томопенема, разупенема, цефазолина, цефацетрила, цефадроксила, цефалексина, цефалоглицина, цефалониума, цефалоридина, цефалотина, цефапирина, цефатризина, цефазедона, цефазафлура, цефрадина, цефроксадина, цефтезола, цефаклора, цефамандола, цефминокса, цефоницида, цефоранида, цефотиама, цефпрозила, цефбуперазона, цефуроксима, цефузонама, цефокситина, цефотетана, цефметазола, лоракарбефа, цефиксима, цефтазидима, цефтриаксона, цефкапена, цефдалоксима, цефдинира, цефдиторена, цефетамета, цефменоксима, цефодизима, цефоперазона, цефотаксима, цефпимизола, цефпирамида, цефподаксима, цефсолудина, цефтерама, цефтибутена, цефтиолена, цефтизоксима, фломоксефа, латамоксефа, цефепима, цефозопрана, цефпирома, цефквинома, цефтобипрола, цефтаролина, СХА-101, RWJ-54428, МС-04,546, МЕ1036, BAL30072, SYN 2416, цефтиофура, цефквинома, цефовецина, азтреонама, тигемонама, карумонама, RWJ-442831, RWJ-333441 или RWJ-333442.

41. Использование по п.39, в котором β-лактам выбирают из цефтазидима, биапенема, дорипенема, эртапенема, имипенема, меропенема или панипенема.

42. Использование по п.39, в котором β-лактам выбирают из азтреонама, тигемонама, BAL30072, SYN 2416 или карумонама.

43. Использование по любому из пп.38-42, в котором субъект является млекопитающим.

44. Использование по п. 43, в котором млекопитающее является человеком.

45. Использование по любому из пп.38-44, в котором инфекция включает бактерии, выбранные из Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas acidovorans, Pseudomonas alcaligenes, Pseudomonas putida, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Aeromonas hydrophilia, Escherichia coli, Citrobacter freundii, Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia marcescens, Francisella tularensis, Morganella morganii, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Providencia stuartii, Acinetobacter baumannii, Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia intermedia, Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus haemolyticus, Haemophilus parahaemolyticus, Haemophilus ducreyi, Pasteurella multocida, Pasteurella haemolytica, Branhamella catarrhalis, Helicobacter pylori, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Borrelia burgdorferi, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Legionella pneumophila, Listeria monocytogenes, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Kingella, Moraxella, Gardnerella vaginalis, Bacteroides fragilis, Bacteroides distasonis, гомологичной группы Bacteroides 3452A, Bacteroides vulgatus, Bacteroides ovalus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides eggerthii, Bacteroides splanchnicus, Clostridium difficile, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium avium, Mycobacterium intracellulare, Mycobacterium leprae, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium ulcerans, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophytics, Staphylococcus intermedius, Staphylococcus hyicus subsp. hyicus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis или Staphylococcus saccharolyticus.

46. Использование по любому из пп.38-44, в котором инфекция включает бактерии, выбранные из Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Stenotrophomonas maltophilia, Escherichia coli, Citrobacter freundii, Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi, Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia marcescens, Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia intermedia, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus haemolyticus, Haemophilus parahaemolyticus, Helicobacter pylori, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Legionella pneumophila, Listeria monocytogenes, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Moraxella, Bacteroides fragilis, Bacteroides vulgatus, Bacteroides ovalus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides eggerthii или Bacteroides splanchnicus.

47. Стерильный контейнер, содержащий:
соединение по любому из пп.1-22 в твердой форме; и β-лактамный антибактериальный агент в твердой форме.

48. Контейнер по п.47, в котором β-лактам выбирают из амоксициллина, ампициллина (пивампициллина, гетациллина, бакампициллина, метампициллина, талампициллина), эпициллина, карбенициллина (кариндациллина), тикарциллина, темоциллина, азлоциллина, пиперациллина, мезлоциллина, мециллинама (пивмециллинама), сульбенициллина, бензилпенициллина (G), клометоциллина, бензатина бензилпенициллина, прокаина бензилпенициллина, азидоциллина, пенамециллина, феноксиметилпенициллина (V), пропициллина, бензатина феноксиметилпенициллина, фенетициллина, клоксациллина (диклоксациллина, флуклоксациллина), оксациллина, метициллина, нафциллина, фаропенема, биапенема, дорипенема, эртапенема, имипенема, меропенема, панипенема, томопенема, разупенема, цефазолина, цефацетрила, цефадроксила, цефалексина, цефалоглицина, цефалониума, цефалоридина, цефалотина, цефапирина, цефатризина, цефазедона, цефазафлура, цефрадина, цефроксадина, цефтезола, цефаклора, цефамандола, цефминокса, цефоницида, цефоранида, цефотиама, цефпрозила, цефбуперазона, цефуроксима, цефузонама, цефокситина, цефотетана, цефметазола, лоракарбефа, цефиксима, цефтазидима, цефтриаксона, цефкапена, цефдалоксима, цефдинира, цефдиторена, цефетамета, цефменоксима, цефодизима, цефоперазона, цефотаксима, цефпимизола, цефпирамида, цефподаксима, цефсолудина, цефтерама, цефтибутена, цефтиолена, цефтизоксима, фломоксефа, латамоксефа, цефепима, цефозопрана, цефпирома, цефквинома, цефтобипрола, цефтаролина, СХА-101, RWJ-54428, МС-04,546, МЕ1036, BAL30072, SYN 2416, цефтиофура, цефквинома, цефовецина, азтреонама, тигемонама, карумонама, RWJ-442831, RWJ-333441 или RWJ-333442.

49. Контейнер по п.47, в котором β-лактам выбирают из цефтазидима, биапенема, томопенема, дорипенема, эртапенема, имипенема, меропенема или панипенема.

50. Контейнер по п.47, в котором β-лактам выбирают из азтреонама, тигемонама, BAL30072, SYN 2416 или карумонама.

51. Контейнер по любому из пп.47-49, в котором соединение и антибактериальный агент или смешивают, или не смешивают.

52. Контейнер по п.47, в котором соединение находится в кристаллической форме.

53. Контейнер по п.47, в котором антибактериальный агент находится в кристаллической форме.

54. Контейнер по п.47, в котором соединение и антимикробный агент представляют собой лиофилизаты.

55. Контейнер по п.47, в котором молярное отношение соединения к антибактериальному агенту имеет значение в интервале от 1:8 до 8:1.

56. Контейнер по п.47, в котором молярное отношение соединения к антибактериальному агенту имеет значение в интервале от 1:2 до 2:1.

57. Контейнер по п.47, в котором молярное отношение соединения к антибактериальному агенту равно 1:1.

58. Контейнер по п.47, дополнительно содержащий регулятор pH.

59. Контейнер по п.58, в котором регулятор pH содержит NaOH.

60. Контейнер по п.58, в котором регулятор pH содержит лимонную кислоту.

61. Способ приготовления фармацевтической композиции для введения, включающий восстановление содержимого стерильного контейнера по п.47 с использованием фармацевтически приемлемого разбавителя.

62. Способ по п.61, в котором разбавитель содержит солевой раствор.

63. Способ по п.61, в котором разбавитель содержит раствор декстрозы.

64. Способ введения, включающий введение восстановленного раствора по п.61 пациенту внутривенно.