ГИДРАЗОНЫ НИТРОТЕТРАЗОЛ-5-КАРБАЛЬДЕГИДА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВОГРИБКОВОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 2017 года по МПК C07D257/04 A61K31/41 

Изобретение относится к серии новых биологически активных соединений гидразонов нитротетразол-5-карбальдегида общей формулы I а-п

I a R=С₆Н₅; б R=СН₃; в R=С₆Н₅СН₂; г R=4-СН₃ОС₆Н₄; д R=СН₃; е R=С₆Н₅СН₂; ж R=С₆Н₅; з R=СН₃; и R=С₆Н₅СН₂; к R=4-СН₃ОС₆Н₄; л R=СН₃; м R=С₆Н₅СН₂; н R=4-СН₃ОС₆Н₄; о R=СН₃; п R=С₆Н₅СН₂. проявляющих противогрибковую активность.

Известны 3-арил-4,4(5H)-дикарбонитрил-5-фенилизоксазолины, обладающие противогибковой активностью [Тырков А.Г., Носачев С.Б., Дегтярев О.В., Жижикина В.В. Хим.-фарм. журнал. 2010. Т. 44. Вып. 9. С. 26-27; Тырков А.Г., Носачев С.Б., Дегтярев О.В., Жижикина В.В. Патент РФ №2412174], однако в качестве гетероциклического фрагмента в этих соединениях выступает изоксазолиновый цикл.

Известна серебряная соль N-(6-метил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидро-5H-пиримидинсульфон)-N¹-изоникотиноилгидразида, проявляющая иммунотропную, противомикробную, противогрибковую активности [Раснецов Л.Д., Шварцман Я.Ю., Яшнова O.K., Мельнкова Н.Б., Чудетская Ю.В., Волков А.А. Патент РФ №2368609], однако в этом соединении в качестве гетероциклических фрагментов выступают пиримидиновое и пиридиновое кольца.

Известны производные пирроло [1,2-a][1,4]диазепина [Строганова Т.А., Бутин А.В., Василин В.К., Неволина Т.А., Крапивин Г.Д. Патент РФ №2323939], однако по данным авторов эти соединения проявляют экспериментально не подтвержденную (потенциальную) противогрибковую активность.

Из литературы известно, что наличие общей системы сопряжения азагетероцикла, двойной связи, нитро- или карбонильной групп обеспечивает проявление соединениями фунгицидной активности [Шевцова И.А. Дисс. канд. хим. наук. Астрахань. 2009. С. 111].

Целью изобретения является исследование у новых гидразонов нитро тетразол-5-карбальдегида противогрибковой активности.

Технический результате достигается соединениями формулы I а-п, обладающими высокой противогрибковой активностью.

Указанные соединения получают реакцией несимметрично замещенных гидразинов с производными изомерными 5-тринитрометилтетразола, при 25°С в среде осушенного этоксиэтана [Тырков А.Г. Патент РФ №2522437; Тырков А.Г., Абдельрахим М.А., Сухенко Л.Т., Дегтярев О.В. Хим.-фарм. журнал. 2013. Т. 47. Вып. 11. С. 19-22].

Сущность изобретения иллюстрируется следующим примером.

Пример 1. Противогрибковую активность соединений I а-п изучали в условиях in vitro в соответствии со стандартом M 27 методом серийных разведений NCCLS в жидкой и плотной среде Сабуро, где каждое последующее разведение уменьшало дозу активного вещества в два раза. В качестве тест-культур использовали микроорганизмы Candida albicans 1029/13, Microsporum canis 1173 и Trichophyton rubrum 1220. Степень чувствительности исследуемых микроорганизмов к данным препаратам (фунгицидное действие) определяли визуально по подавлению роста микроорганизмов на 50%. Препаратом сравнения служил флуконазол (капсулы по 50 мг, ООО РЕПЛЕК ФАРМ Скопье, Республика Македония), обладающий широким спектром антигрибкового действия. Исследование состояло из пяти серий экспериментов, к серийно разведенному препарату в диметилсульфоксиде в пробирках добавляли микробную взвесь, пробирки термостатировали при 24°±3°С в течение 7 суток (Candida albicans) и 30 суток (Microsporum canis и Trichophyton rubrum) и определяли минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) вещества, способную подавлять рост тест-культуры. С целью изучения характера противогрибкового действия производили высевы на чашке Петри с суслом-агаром из всех пробирок, чашки помещали в термостат на 7 суток (Candida albicans) и 30 суток (Microsporum canis и Trichophyton rubrum) при 24°±3°С. Острую суточную токсичность (ЛД₅₀) соединений определяли на белых беспородных мышах массой 20-25 г при внутрибрюшинном введении в 3-х дозах. Группы животных были составлены из 6 особей, продолжительность наблюдений 6 суток. Перед опытом животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания в течение 10 дней. Результаты исследований противогрибковой активности сведены в таблице.

При определении острой суточной токсичности доза соединений составляла от 400 до 5000 мг/кг. ЛД₅₀ рассчитывали по методу Миллера и Тейнтера, Гаддема. Результаты подвергались статистической обработке с использованием t-критерия Стьюдента.

Из данных, приведенных в таблице, видно, что соединения I а-п малотоксичны и обладают различной антифунгальной активностью 40-320 мкг/мл. Наиболее активными по силе противогрибкового действия, из серии исследованных соединений, статистически сопоставимыми с флуконазолом по отношению к Candida albicans оказались соединения I а, I к, I н - фунгицидное действие; по отношению к Microsporum canis - соединения I г, I ж, I к, I н - фунгицидное действие; по отношению к Trichophyton rubrum - соединения I г, I к, I л, I н - фунгицидное действие (отличия не достоверны, приближены к контролю, р≥0,01). Остальные вещества оказывали противогрибковое действие в отношении тест-культур в разных концентрациях, достоверно отличных от фунгицидного препарата флуконазола (р≤0,001). По нашему мнению эти соединения (I б - I и, I м - I п) обладали фунгистатическим действием. Причем, в результате серии исследований, наиболее активное соединение I к по силе противогрибкового действия статистически не отличалось, а иногда было активнее флуконазола.

Изобретение относится к гидразону нитротетразол-5-карбальдегида формулы Iн

.

Технический результат: получен, с высоким выходом, новый гидразон нитротетразол-5-карбальдегида, обладающий высокой противогрибковой активностью. 1 табл., 1 пр.

Гидразон нитротетразол-5-карбальдегида формулы Iн

полученный с высоким выходом (82%) и обладающий высокой, по сравнению с другими представителями серии гидразонов нитротетразол-5-карбальдегида, противогрибковой активностью (40 мкг/мл).