N, N'-замещенные 3, 7-диазабицикло[3.3.1]нонаны, фармацевтические композиции на их основе и их применение Российский патент 2017 года по МПК C07D471/08 A61K31/439 A61P25/28 

Данное изобретение относится к новым N,N'-замещенным 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонанам, обладающим свойствами аллостерической модуляции АМРА рецепторов, которые могут быть использованы для лечения болезни Альцгеймера (БА), болезни Паркинсона (БП), хореи Хантингтона, бокового амиотрофического склероза, болезни Нимана-Пика, болезни эпилепсия и эпилептический статус, болезни шизофрения, биполярное расстройство, сумеречное сознание, мигрень, интеллектуально-мнестические расстройства, гипоксия головного мозга, ишемии головного мозга (в том числе инсульт) и других заболеваний нервной системы. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения и их применению для лечения вышеуказанных заболеваний.

АМРА-рецептор (рецептор α-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты, AMPAR) - ионотропный рецептор глутамата, который передает быстрые возбуждающие сигналы в синапсах нервной системы позвоночных. АМРА-рецепторы обнаружены практически во всех структурах головного мозга.

Глутаматергическая система, к которой относятся и АМРА рецепторы, является основной возбуждающей нейромедиаторной системой в мозге млекопитающих и в том числе и человека и участвует в реализации целой серии физиологических и патологических процессов. Известно, что широкий круг психо-неврологических заболеваний, таких, как БП, БА и подобные им нейродегенеративные расстройства, связан с нарушением регуляции этих процессов [Doble A. Pharmacology and Therapeutics. 1999, V. 81, N3, pp. 163-221; Kew J.N.C., Kemp J.A. Psychopharmacology. 2005. V. 179. P. 4-29; O'Neill M.J., Witkin J.M. Curr. Drug. Targets. 2007. V. 8. pp. 603-620].

AMPA рецепторы неравномерно распределены в головном мозге. Высокая концентрация этих рецепторов была обнаружена в поверхностных слоях новой коры (неокортексе) и в гиппокампе [Monaghan, Brain Res., 1984, V. 324, рр. 160-164; Hollmann М., Hienemann S. Ann. Rev. Neurosci. 1994. V. 17. P. 31-108; Stephen F.Т., Lonnie P.W. Pharmacol Rev. V. 2010. 62. P. 405-496]. Исследования на животных и человеке показали, что эти структуры в основном обеспечивают сенсомоторные процессы и представляют собой матрицу для высокоповеденческих реакций. Таким образом, за счет АМРА рецепторов осуществляется передача сигналов в нейросетях мозга, ответственных за совокупность когнитивных процессов [ Н., Egebjerg J., Nielsen Е. et al., J. Med. Chem., 2000, V. 43, №14, p. 2609-2626; Danysz W. Curr. Opin. Investig. Drugs, 2002, V. 3, p. 1062-1066].

По причинам, изложенным выше, лекарства, усиливающие функционирование АМРА рецепторов, участвуют в регуляции процессов, формирующих память, а также процессов, отвечающих за восстановление нервных клеток. В экспериментах было показано [Arai, Brain Res., 1992, V. 598, рр. 173-184; Murray Т.K., Whalley K.J. Pharmacol. Exp. Ther, 2003, V. 306, p. 752-762.; Lynch G., Gall C.M. Trends Neurosci., 2006, V. 29, p. 554-562.], что усиление AMPA - опосредованного синаптического ответа увеличивает индукцию долговременного потенцирования (LTP). LTP - это увеличение прочности синаптических контактов, которое сопровождает постоянную физиологическую активность в мозге, типичную во время процессов обучения. Вещества, которые усиливают функционирование АМРА рецепторов, содействуют индукции LTP [Granger, Synapse, 1993, V. 15, рр. 326-329; Arai, Brain Res., V. 638, pp. 343-346; Bleakman D., Alt A., Witkin J.M. CNS, Neurol. Disord. Drug Targets, 2004, V. 6. p. 117-126; O'Neill M.J., Bleakman D. CNS, Neurol. Disord. Drug Targets, 2004, V. 3. p. 181-194].

Существует много доказательств того, что LTP является физиологической основой памяти. Например, вещества, которые блокируют LTP, препятствуют механизмам запоминания у животных и людей [Cerro, Neuroscience, 1992, V. 46, pp. 1-6].

Было установлено экспериментально, что интенсивный ионный ток, который вызван действием таких аллостерических модуляторов на АМРА-рецепторы с последующей деполяризацией постсинаптической мембраны, запускает механизм экспрессии генов, отвечающих за синтез нейротропинов NGF (nerve growth factor) и BDNF (brain-derived neurotrophic factor) - факторов роста нервной ткани. [Legutko В., Neuropharmacology, 2001, V. 40, pp. 1019-1027; Ebadi, Neurochemistry International, 2000, V. 30, pp. 347-374; Lauterborn J.C., Lynch G.J., Neurosci., 2000, V. 20, p. 8-21; Dicou E., Rangon C.M. Brain Res., 2003, V. 970, p. 221-225]. Процесс экспрессии генов, ответственных за синтез нейротропина, имеет огромное значение при лечении нейродегенеративных расстройств и других психоневрологических заболеваниях. Так было показано [Siuciak, Brain Research, 1994, V. 633, pp. 326-330], что BDNF имеет антидепрессантный эффект в поведенческих моделях отчаяния и уменьшает концентрацию глюкозы в крови у мышей, страдающих сахарным диабетом [Ono, J. Biochem. and Bioph. Res. Commun., 1997, Vol. 238, pp. 633-637].

На данный момент известно много соединений, активирующих АМРА рецепторы, например, анирацетам [Ito, J. Physiol., 1990, V. 424, рр. 533-543]. Анирацетам усиливает синаптический сигнал на нескольких сайтах гиппокампа, никак не действуя на NMDA - опосредованные сигналы [Staubli, 1990, Psychobiology, V. 18, рр. 377-381; Xiao, Hippocampus, 1991, V. 1, рр. 373-380]. Анирацетам имеет свойства «быстрой атаки», но он непригоден для длительного применения из-за отсутствия продолжительного эффекта, что является характерной особенностью для «поведенчески-значимых (релевантных)» лекарств. Это лекарство работает только в больших концентрациях (0.1 мМ) и, как было показано [Guenzi, J. Chromatogr., 1990, V. 530, рр. 397-406], при периферийном применении, он превращается в анизоил-GABA (около 80% лекарства), который уже не имеет анирацетам-подобных эффектов. К сожалению, в большинстве случаев соединения, обладающие нейропротекторной активностью, либо действуют в больших дозах, либо обладают повышенной токсичностью.

Известен довольно широкий класс веществ, которые по своему физиологическому действию являются аллостерическими модуляторами АМРА рецепторов, которые являются более стабильными и более эффективными, чем известные ранее (см., например, URSULA STAIBLI, Centrally active modulators of glutamate receptors facilitate the induction of long-term potentiation in vivo, Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 1994, Vol. 91, pp. 11158-11162, Neurobiology; O'Neill M.J., Murray Т.K., Eur. J. Pharmacol., 2004, V. 486, p. 163-174; Lynch G. Curr. Opin. Pharmacol., 2004, V. 4. p. 4-11; Arai A.C., Kessler M. Curr. Drug Targ., 2007, V. 8, p. 583-602, WO 2005072345 A2). Гетероарилзамещенные диазабициклоалканы описываются в US 20040147505 А1, как cns-модуляторы, и в WO 200144243 А2 в качестве холинергических лигандов никотиновых рецепторов ацетилхолина. ЕА 10298 В1 описывает производные бензофурана, которые могут иметь диазабициклогексановый заместитель, в качестве модуляторов 5НТ₆ рецепторов. Указанные соединения могут быть полезны для лечения заболеваний или расстройств центральной нервной системы (ЦНС), заболеваниями или нарушениями, связанные с мускулатурой, эндокринными заболеваниями или расстройствами, с нейродегенеративными болезнями или расстройствами, при заболеваниях или расстройствах, связанных с воспалением, болью и симптомами вызванными прекращением злоупотребления химическими веществами. Наиболее близкими к предлагаемым соединениям являются N,N'-замещенные 3,7-диазабицикло[3,3,1]нонаны, описанные в патенте RU 2417082 в качестве средства для восстановления утраченной памяти, и в патенте RU 2333211, в качестве модуляторов АМРА-рецепторов.

Задачей настоящего изобретения является изыскание новых эффективных аллостерических модуляторов АМРА, которые могут быть использованы при заболеваниях или патологиях ЦНС. Соединения настоящего изобретения обладают способностью при различных концентрациях вызывать положительное аллостерическое модулирование АМРА-рецептора или антагонистическое действие, являются стабильными и малотоксичными. Это дает основание рассматривать настоящие соединения с одной стороны как положительные аллостерические модуляторы, с когнитивно-усиливающими свойствами, с другой - как потенциальные блокаторы АМРА рецепторов при более высоких концентрациях.

Поставленная задача решается созданием новых производных N,N'-замещенных 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонанов в виде оснований или их солей с фармакологически приемлемыми кислотами. Соединения настоящего изобретения соответствуют общей формуле (1):

в которой

Е представляет карбонильную группу, -СН₂-группу;

R₁ представляет низший алкил;

R₂ выбирается из группы, соответствующей формулам (1.1а), (1.2а):

R8 представляет Н, низший алкил;

R₅, R₅', R₆, R₆', R₇ и R₇' могут быть одинаковыми или различными и каждый независимо представляет Н, низший алкил;

R₃ и R₃', R₄ и R₄' представляют Н.

Используемый в приведенных выше определениях и последующем описании термин "низший алкил" означает алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 10 атомов углерода, примерами которой являются метил, этил, изопропил, трет-бутил, изопентил и аналогичные.

Термин "алкокси" означает группу AlkO-, в которой алкильный фрагмент является таким, как определенная выше алкильная группа. Примеры алкоксигрупп включают метокси, бутокси, изопропилокси и аналогичные группы.

Термин "фармакологически приемлемые кислоты" охватывает все фармакологически приемлемые кислоты, как неорганические (например, соляную, серную, фосфорную и т.д.); так и органические (например, муравьиную, уксусную, щавелевую, лимонную, винную, малеиновую, янтарную, n-толуол-сульфокислоту, метилсерную и т.д.).

Среди соединений формулы (1), составляющих один из объектов настоящего изобретения, предпочтительными являются следующие группы соединений, который могут быть представлены формулами (1.1), (1.2), приведенными ниже

1.1. N,N'-замещенные 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонаны общей формулы (1.1):

1.2. N,N'-замещенные 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонаны общей формулы (1.2):

в которых:

Е, R₁, R₃, R₃', R₄, R₄', R₅, R₅', R₆, R₆', R₇, R₇' и R₈ имеют значения, определенные выше для формулы (1).

Наиболее предпочтительным соединением формулы (1.1) (в виде фармакологически приемлемых солей и/или свободных оснований) является:

3,7-бис(2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(7-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(4-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(6-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она.

Наиболее предпочтительным соединением формулы 1.2 (в виде фармакологически приемлемых солей и/или свободных оснований) является:

3,7-бис(3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(7-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(6-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(4-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она.

Предлагается также фармацевтическая композиция, обладающая свойством модулировать активности АМРА-рецепторов, содержащая соединение общей формулы (1) в эффективном количестве, и способ воздействия на АМРА-рецепторы введением эффективного количества соединения общей формулы 1.

Предлагается применение соединений формулы 1 для получения лекарственного средства для лечения деменции различной этиологии, в том числе при таких заболеваниях как болезнь Альцгеймера (БА), Паркинсона (БП), хорея Хантингтона, боковой амиотрофический склероз, Нимана-Пика, эпилепсия и эпилептический статус, шизофрения, биполярное расстройство, сумеречное сознание, мигрень, интеллектуально-мнестические расстройства, гипоксия головного мозга, ишемии головного мозга (в том числе инсульт) и других заболеваний нервной системы

Ниже изобретение описывается более подробно с помощью примеров получения конкретных соединений, но не ограничивает притязаний заявителя.

Исходные реагенты получаются известными в литературе способами и являются промышленно доступными.

Схемы синтеза целевых соединений представлена ниже:

Схема 1:

Схема 2:

в которых:

Е, R₁, R₂, R₃, R₃', R₄ и R₄' имеют значения, определенные выше для формулы (1);

Rʺ в случае схемы (1) представляет собой галоген или гидрокси-группу, а в случае схемы 2 Rʺ представляет собой галоген.

Структуры полученных соединений подтверждались данными химического, спектрального анализов и физико-химическими характеристиками.

Приведенные ниже примеры иллюстрируют, но не ограничивают данное изобретение.

Общая методика синтеза целевого продукта:

Способ №1 (схема 2). К раствору 0,2 моль соответствующего галоидангидрида дигидрофуранкарбоновой кислоты или дигидрохроменкарбоновой кислоты в абсолютном ацетонитриле или хлороформе в присутствии 0,5 моль сухого карбоната калия прибавляли по каплям при перемешивании 0,1 моль соединения Б, при этом наблюдали легкий разогрев смеси. Интенсивное перемешивание смеси продолжали в течение 3 часов. После этого отфильтровывали осадок, отгоняли растворитель и вели очистку с помощью колоночной хроматографии.

Способ №2 (схема 1). К раствору 0,2 моль соответствующей кислоты в абсолютном ацетонитриле в атмосфере аргона прибавляли при перемешивании и охлаждении на ледяной бане 0.22 моль КДИ (карбонилдиимидазол;) или ДЦК (дициклогексилкарбодиимид). Перемешивание осуществляли в среднем 2 ч, после чего к реакционной смеси добавляли 0,1 моль соединения A, продолжали перемешивание (3 ч) до полного исчезновения исходных соединений (по данным ТСХ). Также можно использовать дигидрохлорид соединения А в смеси с ДБУ (1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен), но в большинстве случаев это значительно увеличивает время реакции (до 10 часов) и приводит к меньшему выходу целевого продукта.

Способ №3 (схема 1). К раствору 0,2 моль соответствующего галоидангидрида или метилгалогенида в абсолютном ацетонитриле или хлороформе в присутствии 0,5 моль сухого карбоната калия прибавляли по каплям при перемешивании 0,1 моль соединения А. Интенсивное перемешивание смеси продолжали в течение 1,5 часов. После этого отфильтровывали осадок, отгоняли растворитель и вели очистку с помощью колоночной хроматографии (описание см. ниже).

Остаток наносили на хроматографическую колонку с силикагелем. В качестве элюента использовали CHCl₃, затем - элюирующую смесь CHCl₃-EtOH (50:1). Отбирали фракцию с R_f=0.4 в системе CHCl₃-EtOH (50:1). Отгоняли растворитель и получали прозрачное масло.

Сущность изобретения поясняется примерами конкретного выполнения.

Пример 1. Получение 3,7-бис(2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она (соединение 1, соответствующее общей формуле 1.1). Способ осуществляют согласно схеме 2, с использованием в качестве исходных соединений хлорангидрида 2,3-дигидробензофуранкарбоновой кислоты и 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она. Процесс проводят в среде хлороформа.

ПМР-спектр (CDCl₃ δ, м.д.): 0.91 с. (6Н); 2.58 д. (2Н, J 12 Гц); 2.92 д. (2Н, J 12 Гц); 3.27 уш. с. (4Н); 3.84 д. (2Н, J 12 Гц), 4.51 д. (2Н, J 12 Гц); 4.63 уш. с. (4Н); 6.79 д. (2Н, J 8.08 Гц); 7.16 д. (2Н, J 8.34 Гц); 7.40 с. (2Н).

Пример 2. 3,7-бис(7-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она (соединение 2, соответствующее общей формуле 1.1). Получают аналогично примеру 1, используя в качестве исходных соединений 7-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонилхлорид и 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-он.

ПМР-спектр (CDCl₃ δ, м.д.): 0.91 с. (6Н); 2.58 д. (2Н, J 12 Гц); 2.92 д. (2Н, J 12 Гц); 3.27 уш. с. (4Н); 3.84 д. (2Н, J 12 Гц); 3.92 с. (6Н); 4.51 д. (2Н, J 12 Гц); 4.63 уш. с. (4Н); 7.16 с. (2Н); 7.40 с. (2Н).

Пример 3. 3,7-бис(4-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она (соединение 3, соответствующее общей формуле 1.1). Получают согласно схеме 1 (способ 2), используя в качестве исходных соединений 4-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбоновую кислоту и 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она. Процесс ведут в присутствии конденсирующего агента КДИ.

ПМР-спектр (CDCl₃ δ, м.д.): 0.91 с. (6Н); 2.58 д. (2Н, J 12 Гц); 2.92 д. (2Н, J 12 Гц); 3.27 уш. с. (4Н); 3.84 д. (2Н, J 12 Гц); 4.46 с. (6Н); 4.58 д. (2Н, J 12 Гц); 4.63 уш. с. (4Н); 6.79 д. (2Н, J 8.08 Гц); 7.16 д. (2Н, J 8.34 Гц).

Пример 4. 3,7-бис(6-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она (соединение 4, соответствующее общей формуле 1.1). Осуществляют получение согласно схеме 1 (способ 3), используя в качестве исходных агентов 6-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонилбромид и 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-он в среде ацетонитрила.

ПМР-спектр (CDCl₃ δ, м.д.): 0.91 с. (6Н); 2.58 д. (2Н, J 12 Гц); 2.92 д. (2Н, J 12 Гц); 3.27 уш. с. (4Н); 3.84 д. (2Н, J 12 Гц); 3.92 с. (6Н); 4.51 д. (2Н, J 12 Гц); 4.63 уш. с. (4Н); 6.79 с. (2Н); 7.40 с. (2Н).

Пример 5. 3,7-бис(3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она (соединение 5, соответствующее общей формуле 1.2). Получают согласно схеме 1 (способ 2), используя в качестве исходных соединений 3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбоновую кислоту и 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-он, в качестве конденсирующего агента ДЦК

ПМР-спектр (CDCl₃ δ, м.д.): 0.91 с. (6Н); 2.58 д. (2Н, J 12 Гц); 2.92 д. (2Н, J 12 Гц); 2.16 уш. с. (4Н); 3.12 уш. с. (4Н); 3.84 д. (2Н, J 12 Гц); 4.51 д. (2Н, J 12 Гц); 4.27 уш. с. (4Н); 6.79 д. (2Н, J 8.08 Гц); 7.16 с. (2Н); 7.40 с. (2Н).

Пример 6. 3,7-бис(7-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она (соединение 6, соответствующее общей формуле 1.2). Получают согласно схеме 1 (способ 3), используя в качестве исходных агентов 7-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонилхлорид и 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-он. Процесс ведут в среде хлороформа.

ПМР-спектр (CDCl₃ δ, м.д.): 0.91 с. (6Н); 2.58 д. (2Н, J 12 Гц); 2.92 д. (2Н, J 12 Гц); 2.16 уш. с. (4Н); 3.12 уш. с. (4Н); 3.84 д. (2Н, J 12 Гц); 3.73 с. (6Н); 4.51 д. (2Н, J 12 Гц); 4.27 уш. с. (4Н); 7.16 с. (2Н); 7.40 с. (2Н).

Пример 7. 3,7-бис(6-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она (соединение 7, соответствующее общей формуле 1.2). Процесс проводят согласно схеме 1 (способ 2), используя в качестве исходных соединений 6-метокси-3,4-дигадро-2H-хромен-6-илкарбонилкарбоновую кислоту и 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-он в смеси с ДБУ.

ПМР-спектр (CDCl₃ δ, м.д.): 0.91 с. (6Н); 2.58 д. (2Н, J 12 Гц); 2.92 д. (2Н, J 12 Гц); 2.16 уш. с. (4Н); 3.12 уш. с. (4Н); 3.84 д. (2Н, J 12 Гц); 3.97 с. (6Н); 4.51 д. (2Н, J 12 Гц); 4.27 уш. с. (4Н); 7.16 с. (2Н); 7.40 с. (2Н).

Пример 8. 3,7-бис(4-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она (соединение 8, соответствующее общей формуле 1.2). Процесс проводят согласно схеме 1 (способ 3), используя в качестве исходных соединений 4-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбоновую кислоту и 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-он. Процесс проводят в присутствии КДИ.

ПМР-спектр (CDCl₃ δ, м.д.): 0.91 с. (6Н); 2.58 д. (2Н, J 12 Гц); 2.92 д. (2Н, J 12 Гц); 2.16 уш. с. (4Н); 3.12 уш. с. (4Н); 3.84 д. (2Н, J 12 Гц); 3.96 с. (6Н); 4.51 д. (2Н, J 12 Гц); 4.27 уш. с. (4Н); 7.16 с. (2Н); 7.40 с. (2Н).

Аналогично получают соединения формулы 1, где Е означает СН₂-группу, используя 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан вместо 1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она, указанные выше.

Используя в качестве исходных продуктов соответствующие 3,4-дигидро-2H-хромен-6-илметилгалогениды вместо галоидангидридов 3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбоновой кислоты, или 2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илметилгалогениды вместо галоидангидридов 2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбоновой кислоты получают соответствующие по схеме 1 (способ 3), получают соответствующие соединения формулы 1 с группами, соответствующими общим формулам 1.3а и 1.4а.

Изучение специфической когнитивно-стимулирующей, нейропротекторной активности и оценка потенцирующих АМРА-рецепторы свойств соединений общей формулы 1, позволяющих им влиять на глутаматергическую медиаторную систему ЦНС.

Исследование фармакологической активности соединений проводилось в опытах с использованием стандартных методов, применяемых для оценки эффектов нейропсихотропных препаратов согласно методическим рекомендациям (Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с).

Статистическую обработку проводили с определением среднего значения и стандартной ошибки среднего значения, которые вместе со n (количество вариант в группе) представлены в итоговых таблицах. Использовался пакет статистических программ Statistica 6.0 (StatSoft, USA, номер лицензии: 31415926535897). Различия определялись как статистически значимые при уровне р≤0,05. Для определения статистической значимости различий между группами использовали ранговый однофакторный анализ Kruskal-Wallis. Если различия были достоверны (Р≤0,05), проводилось попарное сравнение по непараметрическому критерию U Mann-Whitney, Стьюденту, а при анализе альтернативной формы учета использовался метод χ² или точный метод Фишера (пакет программ Biostat).

Пример. Изучение биологического действия соединений общей формулы 1, показывающее способность соединений модулировать активность АМРА-рецепторов.

Для определения потенцирующего эффекта новых соединений использовали каинат-вызванные трансмембранные токи в нейронах Пуркинье мозжечка крыс с целью направленного поиска соединений, способных потенцировать ответы АМРА-рецепторов и тем самым вызывать улучшение памяти и когнитивных функций.

Метод оценки потенцирующих АМРА-рецепторы свойств соединений, позволяющих им влиять на глутаматергическую медиаторную систему ЦНС.

Эксперименты по оценке действия веществ на АМРА-рецепторы были проведены методом patch-clamp на свежеизолированных нейронах Пуркинье, выделенных из мозжечков крыс (12-15 дневных). Для выделения использовали модифицированный метод Kaneda et al., 1988. Срезы мозжечка толщиной 400-600 мкм помещались в термостатируемую камеру объемом 10 мл. Раствор для выделения имел следующий состав (в мМ): NaCl 150.0, KCl 5.0, CaCl₂ 2.0, MgSO₄×7H₂O 2.0, HEPES 10.0, глюкоза 15.0, рН 7.42. Срезы инкубировались в этом растворе в течение 60 минут, после чего этот раствор заменяли аналогичным раствором, содержащим проназу (2 мг/мл) и коллагеназу (1 мг/мл), и инкубировали в течение 70 минут. После отмывки первоначальным раствором в течение 20 минут срезы помещались в чашку Петри и разъединялись механическим способом при помощи пастеровской пипетки. Растворы непрерывно продувались 100% O₂ при t° 34°С. Нейроны Пуркинье помещались в рабочую камеру объемом 0.6 мл. Рабочий раствор имел состав (в мМ): NaCl 150.0, KCl 5.0, CaCl₂ 2.6, MgSO₄×7H₂O 2.0, HEPES 10.0, глюкоза 15.0, рН 7.36.

Трансмембранные токи вызывались активацией АМРА-рецепторов аппликацией растворов агониста этих рецепторов - каиновой кислоты (КК) методом быстрой суперфузии. Каиновая кислота является агонистом АМРА-рецепторов и используется для изучения свойств АМРА-рецепторов, поскольку сама АМРА вызывает слишком сильную десенситизацию рецепторов и в таких экспериментах не используется. Регистрация токов была осуществлена при помощи боросиликатных микроэлектродов (сопротивление 2.5-4.5 мОм) заполненных следующим составом (в мМ): KCl 120.0, EGTA 11.0, CaCl₂ 1.0, MgCl₂ 1.0, HEPES 10.0, ATP 5.0, рН 7.2.

Для регистрации использовали прибор ЕРС-9 (HEKA, Germany). Запись токов осуществлялась на жесткий диск ПК Pentium-4 при помощи программы Pulse, также закупленной в фирме HEKA. Обработка результатов осуществлялась при помощи программы Pulsefit (HEKA).

Аппликация КК вызывает в нейронах Пуркинье трансмембранные входящие токи. Добавление в перфузируемый раствор соединений формулы I вызывает увеличение амплитуды токов. Это увеличение зависит от соединения, его концентрации, времени, прошедшего после начала аппликации вещества.

Пример 1. Соединение 1 в дозе 0.00001 мкМ вызывает увеличение каинат-вызванных токов на 50%, в дозе 0.0001 мкМ - на 70-80%, в дозе 0.001 мкМ - на 80-120%, в дозе 0.01 мкМ - на 10-20%, а в дозе 0.1 мкМ - 0-10%). Отмывка в течение 4-6 минут возвращает амплитуду ответов к контрольному значению.

Пример 2. Соединение 2 в дозе 0.001 мкМ вызывает увеличение каинат-вызванных токов на 10-20%, в дозе 0.01 мкМ - на 30-40%, в дозе 0.1 мкМ - на 0%, а в дозе 1 мкМ - блок на - 20-40%. Отмывка в течение 3-5 минут возвращает амплитуду ответов к контрольному значению.

Пример 3. Соединение 3 в дозе 0.0001 мкМ вызывает увеличение каинат-вызванных токов на 0-20%, в дозе 0.001 мкМ - на 10-30%, в дозе 0.01 мкМ - на 10-40%, а в дозе 0.1 мкМ - на 0-10%. Отмывка в течение 3-5 минут возвращает амплитуду ответов к контрольному значению.

Пример 4. Соединение 4 в дозе 0.0001 мкМ вызывает увеличение каинат-вызванных токов на 0%, в дозе 0.001 мкМ - на 0-10%, в дозе 0.01 мкМ - на 10-20%, а в дозе 0.1 мкМ - на 0%. Отмывка в течение 3-5 минут возвращает амплитуду ответов к контрольному значению.4

Пример 5. Соединение 5 в дозе 0.0001 мкМ вызывает увеличение каинат-вызванных токов на 0-10%, в дозе 0.001 мкМ - на 0-30%, в дозе 0.01 мкМ - на 10-30%, а в дозе 0.1 мкМ - на 0-20%. Отмывка в течение 3-5 минут возвращает амплитуду ответов к контрольному значению.

Пример 6. Соединение 6 в дозе 0.0001 мкМ вызывает увеличение каинат-вызванных токов на 0%, в дозе 0.001 мкМ - на 0-10%, в дозе 0.01 мкМ - на 0-30%, а в дозе 0.1 мкМ - на 0-10%. Отмывка в течение 3-5 минут возвращает амплитуду ответов к контрольному значению.

Пример 7. Соединение 7 в дозе 0.0001 мкМ вызывает увеличение каинат-вызванных токов на 0%, в дозе 0.001 мкМ - на 10-20%, в дозе 0.01 мкМ - на 10-40%, а в дозе 0.1 мкМ - на 0-10%. Отмывка в течение 3-5 минут возвращает амплитуду ответов к контрольному значению.

Пример 8. Соединение 8 в дозе 0.0001 мкМ вызывает увеличение каинат-вызванных токов на 0-10%, в дозе 0.001 мкМ - на 20-40%, в дозе 0.01 мкМ - на 10-20%, а в дозе 0.1 мкМ - на 0-10%. Отмывка в течение 3-5 минут возвращает амплитуду ответов к контрольному значению.

Полученные результаты представлены в таблице 1.

Как видно из представленной таблицы 1 соединения общей формулы 1 обладают свойствами потенцировать токи, вызываемые активацией АМРА-рецепторов. Соединения превосходят по активности сравниваемое вещество Мемантин в 30000-3000000 раз по тесту потенцирования АМРА ответов, что делает их ценными для применения в медицине, особенно при лечении нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера.

Пример. Исследование специфической когнитивно-стимулирующей и нейропротекторной активности соединений общей формулы 1 (на прогеартрических моделях (хроническая скополаминовая модель на крысах).

Известно, что в основе функциональных расстройств, наблюдаемых при болезни Альцгеймера, лежат поражение холинергической системы мозга, которое приводит к развитию нарушения пространственной ориентации. При развитии болезни помимо нарушений памяти наблюдается неврологический дефицит - нарушение межой моторики, координации движений, развивается замедленность движений.

При БА в структурах переднего мозга происходит снижение активности основного фермента синтеза ацетилхолина, холин-ацетилтрансферазы, и повышение активности фермента, разрушающего ацетилхолин, ацетилхолинэстеразы, и, как следствие, уменьшение содержания ацетилхолина. Также при БА наблюдается активная деградация нейронов холинергической системы, тесно связанная со снижением количества в тканях мозга, в особенности гиппокампа, ростовых факторов. Транспорт таких важных факторов осуществляется по нейронам холинергической системы, поэтому деградация этих нейронов влечет за собой развитие дефицита ростовых факторов. С другой стороны, недостаток ростовых факторов провоцирует гибель нейронов холинергической системы. Таким образом, недостаток ростовых факторов приводит к процессу гибели нейронов, развивающемуся по принципу положительной обратной связи.

Дефицит холинергической системы является наиболее ярким проявлением патогенеза БА, он возникает на ранней стадии болезни и имеет четкую корреляцию со степенью развития деменции. Именно недостаточностью холинергической системы определяется дефицит когнитивных и поведенческих функций при БА. Поэтому и ранее, и в настоящее время для лечения БА широко используются холиномиметические средства, которые усиливают холинергическую нейропередачу, среди которых наиболее широко применяются ингибиторы ацетилхолинэстеразы (Barril et al., 2002; Pomponi et al., 1990). Кроме того, для коррекции мнестических нарушений при деменциях применяются с нейропротективной активностью препараты.

Антагонисты холинергической системы, в частности скополамин, вызывают в эксперименте нарушения памяти, сходные с тем, которые наблюдаются при БА (Camps, Munos-Torrero, 2002; Voronina, 1994). Поэтому одной из наиболее часто используемых экспериментальных моделей БА или ускоренного старения являются методики, использующие повторное введение скополамина.

Для моделирования у животных БА была использована методика хронического введения скополамина (Ю.В. Буров и соавт., (1991), Т.А. Воронина, Р.У. Островская, Т.Л. Гарибова, 2012). Методика основана на воспроизведении холинергического дефицита, который является одним из основных патогенетических механизмов развития БА и приводит к нарушению мнестических функций.

Моделирование холинергического дефицита у крыс путем длительного введения скополамина и изучение когнитивных функций (обучение условному рефлексу активного избегания, УРАИ) и брадикинезии (Pole test)

В исследовании использовались следующие вещества: 8 исследуемых соединений и холиноблокатор скополамин (Sigma). Опыты проводились на самцах белых крыс линии Wistar массой 200-210 в начале эксперимента 300-330 при его завершении. Экспериментальные животные были получены из Центрального питомника лабораторных животных «Столбовая», Московская область. Животные содержались на постоянном доступе к корму и воде - использовался полный рацион экструдированного брикетированного корма (ГОСТ на корм Р 50258-92) и питьевая вода. Содержание животных соответствовало правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ 351.000.3-96 и 51000.4-96), приказу МЗ РФ №276 от 19.06.2003 г. Эксперименты проводили с 10 до 16 часов.

Животные содержались в виварии при температурном режиме 20-22°С, при световом режиме - 12 часов свет / 12 часов темнота, в отдельных пластмассовых клетках с решетчатыми крышками из нержавеющей стали, с подстилкой обеспыленной из деревянной стружки по 8 особей в каждой клетке. За 2-3 часа до введения препаратов животные лишались корма. Раствор тестируемых соединений в 2-х дозах (0,25 и 0,5 мг/кг) и контрольный раствор (дистиллированная вода плюс 3 капли ДМСО) вводили крысам внутрь из расчета 0,2 мл на 100 г массы тела животного с 21 по 30 день эксперимента. Скополамин (Sigma) вводили внутрибрюшинно (внб) ежедневно один раз в сутки в дозе 1,5 мг/кг в течение 20 дней. Затем крысам внутрь вводили исследуемые соединения с 21 по 30 день. Обучение УРАИ всех групп крыс проводили с 31 по 35 день эксперимента, определение неврологического статуса с использованием Pole-теста - с 36 по 38 день (Табл. 2).

Метод исследования УРАИ

Модель двустороннего избегания негативного воздействия в челночной камере (шаттл-бокс) - вариант УРАИ, который широко применяется для оценки действия веществ на процесс обучения.

В исследовании использовалась челночная камера (шаттл-бокс) фирмы "Ugo Basile" (Италия), состоящая из двух одинаковых отделений размером 19×21 см с электродным полом. Отделения были разделены перегородкой с отверстием диаметром 9 см и со стенками высотой 22 см. Длительность изолированного действия условного светового и звукового сигналов была 10 с, после чего добавлялось электроболевое подкрепление длительностью 10 с. Как только крыса перебегала в соседнее отделение, раздражители, - свет, звук и ток, - выключались, т.е. максимально возможная длительность действия условных раздражителей была 20 с, в том числе 10 с совместно с электрическим током. Силу электроболевого раздражения подбирали индивидуально для каждого животного. Использовалась пороговая сила тока, вызывающая двигательную реакцию крысы (попытки избавления). Интервалы между сочетаниями были 40 с. Избавлением (безусловный рефлекс) считалось перебежка животного в соседний отсек в ответ на удар током, избеганием (условный рефлекс) - перебежка животного в соседний отсек после включения условного сигнала света и звука до подачи электроболевого раздражителя. Кроме того, регистрировалось количество отказов от выполнения рефлекса. Обучение продолжалось в течение 5 дней по 8 сочетаний в день. Критерием обученности считалось - 6 реакции избегания (условного рефлекса) из 8 предъявлений (75%). Если животное не достигало критерия в течение всего периода обучения, то оно считалось не обучившимся. Регистрировалось количество животных достигших безусловного и условного рефлексов, количество отказов в процентах к общему числу крыс в группе.

Результаты изучения влияния исследуемых соединений при введении внутрь на обучение УРАИ у крыс с холинергическим дефицитом

Перед началом обучения УРАИ в течение 5-минутного периода обследования камеры животные из всех групп быстро находили отверстие и проводили примерно равное количество времени в обеих камерах. Затем для каждого животного индивидуально подбирали силу тока. Показателем оптимальности болевого раздражения было отсутствие замирания или беспорядочного бега и прыжков.

Введение крысам контрольной группы в течение всего эксперимента только воды (пассивный контроль) в 1-й и 2-й дни обучения критерию обученности условному рефлексу активного избегания не достигло ни одно животное, а количество отказов от выполнения рефлекса составило, соответственно 67 и 50% (табл. 3, 4, 5, 6, 7), первый и второй дни обучения). На третий день обучения в группе пассивного контроля критерия обученности (шесть условных реакций из 8 предъявлений) достигло 25% животных при полном отсутствии отказов. На 4-й и 5-й дни условному рефлексу активного избегания обучились около 40% животных при минимальных отказах от выполнения рефлексов (12%) (табл. 3, 4, 5, 6, 7, третий, четвертый и пятый дни обучения).

У животных группы активного контроля (которым вводился скополамин) обучение УРАИ проходило значительно медленнее. Так, на протяжении всего времени эксперимента динамика формирования рефлекса у этих животных отставала от динамики крыс пассивного контроля и на пятый день обучения только 11% крыс достигли критерия обученности условному рефлексу активного избегания (табл. 5; 1-й - 5-й дни обучения).

Крысам, которым вводились исследуемые соединения в дозе 0,25 мг/кг внутрь на фоне дефицита холинергической системы к пятому дню обучения критерия обученности достигли 57-77% животных, в то время как у животных активного контроля этот показатель составлял только 11%. При этом на фоне исследуемых соединений начиная с 4-го дня обучения не отмечалось отказов от выполнения животными условного рефлекса активного избегания (табл. 6; 1-й - 5-й дни обучения).

Исследуемые соединения в дозе 0,5 мг/кг при введении крысам внутрь существенно улучшали обучение крыс с дефицитом холинергической системы, вызванным скополамином. Позитивная динамика наблюдалась начиная с 3-его дня обучения, а на 4-й и 5-й дни критерия обученности достигли соответственно, 56% и 67-77% крыс при полном отсутствии отказов от выполнения рефлекса (табл. 5).

В результате проведенных исследований показано, что исследуемые соединения в дозах 0,25 мг/кг и 0,5 мг/кг обладают выраженными позитивными эффектами у крыс с дефицитом холинергического системы, корректируя нарушения обучения и памяти, вызванные длительным введением холиноблокатора скополамина. Эффект вещества характеризовался развитием безусловных реакций на ранних этапах формирования УРАИ, на смену которым нарастало количество условнорефлекторных избеганий в челночной камере, особенно на 4-й и 5-й дни обучения. К концу эксперимента (4-й и 5-й дни), показатели крыс в группах, которым вводились исследуемые соединения превосходили показатели у животных пассивного контроля, получавших воду, как по количеству реакций избегания, так и по показателю количества животных достигших критерия обученности. На фоне исследуемых соединений у животных при выполнении рефлекса отмечалось значительно меньше отказов от выполнения адекватных реакций в сравнении с активным контролем с холинергическим дефицитом. Это свидетельствует о том, что предлагаемые соединения при введении внутрь способно оптимизировать процесс обучения вне зависимости от воздействия патологических факторов. Наиболее эффективной была доза исследуемых соединений равная 0,5 мг/кг.

Метод исследования неврологических нарушений

Для изучения у крыс психоневрологического статуса, неврологических нарушений использовали методику «Pole-test» (Pole-тест) (Ogawa N, Hirose Y, Ohara S, Ono T, Watanabe Y A simple quantitative bradykinesia test in MPTP-treated mice. Res Commun Chem Pathol Pharmacol: V. 50, №3, P. 435-441; 1985). Крысу помещали на вершину металлического стержня (1 м высотой и 3 см в диаметре, обернутого бинтом с пробковым набалдашником диаметром 5 см) носом вверх, и замеряли время необходимое животному для ориентирования - поворота головой вниз (t-поворота) и спуска вниз по стержню (t-спуска). Стержень крепится к основе, которая устанавливается в «домашнем» боксе крысы. Животным, с неврологическими нарушениями, требуется гораздо больше времени для правильной ориентации в пространстве и спуска. Перед тестированием крыс обучали в течение 2 дней (предъявляя по 3 пробы в день). В день тестирования осуществляли одну посадку на вершину стержня. Если крыса упала со стержня или не смогла спуститься в одной (или более) попыток, то использовали наибольшее время, полученное при выполнении других попыток.

Результаты изучения влияния исследуемых соединений при введении внутрь на брадикинезию у крыс с холинергическим дефицитом

Изучение нейропротективного действия изучаемых соединений проводили в опытах на крысах с холинергическим дефицитом, вызванным длительным введением скополамина с использованием Pole-теста. Определяли степень нарушения неврологического статуса, характеризующегося брадикинезией - увеличением времени поворота головы и спуска с шеста в момент посадки крысы на его вершину.

Установлено, что у крыс группы активного контроля на фоне холинергического дефицита (скополамин) по сравнению с пассивным контролем (вода) отмечалось существенное увеличение времени выполнения рефлекса поворота головы и спуска животного с шеста, то есть наблюдалась брадикинезия (табл. 8). Исследуемые соединения в дозе 0,5 мг/кг при введении внутрь животным с холинергическим дефицитом способствовали уменьшению времени выполнения Pole-теста по обоим показателям до уровня показателей в группе крыс пассивного контроля (табл. 8). В дозе 0,25 мг/кг предлагаемые соединения обеспечивали уменьшение времени спуска с шеста, но эти результаты были статистически не достоверными (табл. 8).

Экспериментальное исследование предлагаемых соединений выявило его способность существенно ослаблять нарушения памяти у животных с холинергическим дефицитом, вызванным длительным введением холиноблокатора скополамина. Эффект вещества, особенно в дозе 0,5 мг/кг, характеризуется значительным улучшением выработки нарушенного у крыс, получавших скополамин, условного рефлекса активного избегания по показателям скорости формирования рефлекса и количества обучившихся животных.

Позитивное когнитивное действие у исследуемых соединений сочетается с выявленным с помощью Pole-теста нейропротективным эффектом у крыс с холинергическим дефицитом, которое характеризуется ослаблением у них брадикинезии. Исследуемые соединения в дозе 0,5 мг/кг при введении внутрь животным с холинергическим дефицитом уменьшали время выполнения Pole-теста по обоим показателям до уровня значений в группе крыс пассивного контроля.

Таким образом, исследуемые соединения при введении крысам внутрь обладают когнитивно-позитивным и нейропротективным действием в опытах на крысах с холинергическим дефицитом, вызванным длительным введением скополамина. Как это обычно принято в медицине, соединения формулы 1 согласно настоящему изобретению рекомендуется применять в виде композиций, которые являются также объектом настоящего изобретения. Фармацевтическая композиция согласно изобретению приготавливается с помощью общепринятых в данной области техники приемов и включает фармакологически эффективное количество активного агента, представляющего соединение формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль (называемые далее "активное соединение"), составляющее обычно от 5 до 30 вес. %, в сочетании с одной или более фармацевтически приемлемыми вспомогательными агентами, такими как носители, наполнители, разбавители, связующие, разрыхляющие агенты, адсорбенты, ароматизирующие вещества, вкусовые агенты. В соответствии с известными методами фармацевтические композиции могут быть представлены различными жидкими или твердыми формами.

Примеры твердых лекарственных форм включают, например, таблетки, пилюли, желатиновые капсулы и др.

Примеры жидких лекарственных форм для инъекций и парентерального введения включают растворы, эмульсии, суспензии и др.

Композиции, как правило, получают с помощью стандартных процедур, предусматривающих смешение активного соединения с жидким или тонко измельченным твердым носителем.

Композиции согласно изобретению в форме таблеток содержат от 5 до 30% активного соединения и наполнитель(и) или носитель(и). В качестве таковых для таблеток применяются: а) разбавители: свекловичный сахар, лактоза, глюкоза, натрия хлорид, сорбит, маннит, гликоль, фосфат кальция двузамещенный; б) связующие вещества: магниевый силикат алюминия, крахмальная паста, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и поливинил пиррол и дон; в) разрыхлители: декстроза, агар, альгиновая кислота или ее соли, крахмал, твин.

ПРИМЕР 1.

100 мг таблетки, содержащие по 0.1 мг соединения 2

Соединение 2 0.1 мг Лактоза 54.9.0 мг Альгиновая кислота 20.0 мг Лимонная кислота 5.0 мг Трагакант 20.0 мг

Таблетка может быть сформирована посредством прессовки или формовки активного ингредиента с одним или более дополнительными ингредиентами.

Получение прессованных таблеток осуществляется на специальной установке. Активный ингредиент в свободной форме, такой, как порошок или гранулы, в количестве 10 г (количество вещества, необходимое для получения 10000 таблеток) перемешивается со связующим веществом - трагакантом (200 г), смешивается с разбавителем - лактозой (590 г), в смесь добавляется разрыхляющее вещество - альгиновая кислота (200 г) и отдушка - лимонная кислота (50 г).

Для желатиновых капсул обычно используются дополнительно красители и стабилизаторы. В качестве красителей используются: тетразин, индиго; в качестве стабилизаторов могут быть представлены: натрия метабисульфит, натрия бензоат. Предлагаемые желатиновые капсулы содержат от 1 до 20% активного ингредиента.

ПРИМЕР 2.

500 мг капсулы, содержащие по 0.5 мг соединения 2

Соединение 2 0.5 мг Глицерин 100.0 мг Сахарный сироп 339.5 мг Мятное масло 40.0 мг Натрия бензоат 10.0 мг Аскорбиновая кислота 5.0 мг Тетразин 5.0 мг

5 г активного вещества (соединения 2) (количество, необходимое для приготовления 10000 капсул) тонко измельчают и смешивают в смесителе с глицерином (1000 г) и сахарным сиропом (3490 мг). После перемешивания в смесь добавляют мятное масло (400 г), бензоат натрия (100 г), аскорбиновую кислоту (50 г) и тетразин (50 г). Желатиновые капсулы приготовляют капельным методом. Этот метод позволяет осуществлять одновременное капельное дозирование раствора лекарственного вещества и нагретой желатиновой массы (900 г желатина) в охлажденное вазелиновое масло. В результате образуются бесшовные шарообразные желатиновые капсулы, заполненные лекарственной смесью, полностью готовые к употреблению, содержащие 50 мг активного вещества.

Инъекционные формы композиции предпочтительно представляют собой изотонические растворы или суспензии. Вышеуказанные формы могут стерилизоваться и содержать добавки, такие как консерванты: натрия метабисульфит, бензойная кислота, натрия бензоат, смесь метилпарабена и пропилпарабена; стабилизаторы: абрикосовая и аравийская камедь, декстрин, крахмальный клейстер, метилцеллюлоза, твин; соли, регулирующие осмотическое давление (хлорид натрия), или буферы. Кроме того, они могут содержать другие терапевтически полезные вещества.

ПРИМЕР 3.

2 мл ампулы, содержащие по 1 мг соединения 1

Соединение 1 1.0 мг Натрия хлорид 0.9% раствор 1.6 мл Бензойная кислота 10.0 мг Метилцеллюлоза 10.0 мг Мятное масло 0.4 мл

Для приготовления инъекционных форм активное соединение 1 (1 г; количество, необходимое для изготовления 1000 ампул) тонко измельчают и смешивают в смесителе с мятным маслом (400 мл), затем добавляют метилцеллюлозу (10 г), смешивают с 0,9% раствором хлорида натрия (1600 мл) и добавляют бензойную кислоту (10 г). Полученный раствор фасуют в ампулы по 2 мл и стерилизуют паром в течение 30 мин.

Следующий аспект изобретения составляет способ воздействия на АМРА-рецепторы введением эффективного количества соединения общей формулы 1.

Назначаемая для приема доза активного компонента (соединения формулы 1 или его фармацевтически приемлемых солей) варьирует в зависимости от многих факторов, таких как возраст, пол, вес пациента, симптомы и тяжесть заболевания, конкретно назначаемое соединение, способ приема, форма препарата, в виде которой назначается активное соединение.

Обычно, общая назначаемая доза составляет от 0.1 до 40 мг в день. Общая доза может быть разделена на несколько доз, например, для приема от 1 до 4 раз в день. При оральном назначении интервал общих доз активного вещества составляет от 0.1 до 40 мг в день, предпочтительно, от 0.1 до 10 мг. При парентеральном приеме интервал назначаемых доз составляет от 0.5 до 20 мг в день, предпочтительно, от 0.5 до 10 мг, а при внутривенных инъекциях - от 0.05 до 5.0 мг в день, предпочтительно, от 0.05 до 2.5 мг. Точная доза может быть выбрана лечащим врачом.

Настоящее изобретение относится к N,N'-замещенным 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонанам общей формулы (1) , обладающим свойствами положительных модуляторов активности АМРА-рецепторов, а также к фармацевтической композиции на их основе, их применению при профилактике и лечении заболеваний нервной системы, в частности нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, при утрате памяти и др. В общей формуле (1) Е представляет карбонильную группу, -СН₂-группу; R₁ представляет низший алкил; R₂ в совокупности выбирается из групп, соответствующих общим формулам (1.1а), (1.2а):

, ,

R₈ представляет H, низший алкил; R₅, R₅', R₆, R₆', R₇ и R₇' могут быть одинаковыми или различными и каждый независимо представляет Н, низший алкил; R₃ и R₃', R₄ и R₄' представляют Н. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 8 табл., 18 пр.

1. N,N'-замещенные 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонаны общей формулой (1):

в которой:

Е представляет карбонильную группу, -СН₂-группу;

R₁ представляет низший алкил;

R₂ в совокупности выбирается из групп, соответствующих общим формулам (1.1а), (1.2а):

R₈ представляет H, низший алкил;

R₅, R₅', R₆, R₆', R₇ и R₇' могут быть одинаковыми или различными и каждый независимо представляет Н, низший алкил;

R₃ и R₃', R₄ и R₄' представляют Н;

в виде фармакологически приемлемых солей и/или свободных оснований.

2. Соединения по п. 1, представляющие N,N'-замещенные 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонанов общей формулы (1.1):

в которых:

Е, R₁, R₃, R₃', R₄, R₄', R₅, R₅', R₆, R₆' и R₈ имеют значения, определенные выше для формулы 1.

3. Соединения по п. 1, представляющие N,N'-замещенные 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонанов общей формулы (1.2):

в которых:

E, R₁, R₃, R₃', R₄, R₄', R₅, R₅', R₆, R₆', R₇, R₇' и R₈ имеют значения, определенные выше для формулы 1.

4. Соединение по п. 2, представляющее:

3,7-бис(2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(7-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(4-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(6-метокси-2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она.

5. Соединение по п. 2, представляющее:

3,7-бис(3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(7-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(6-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она;

3,7-бис(4-метокси-3,4-дигидро-2H-хромен-6-илкарбонил)-1,5-диметил-3,7-диазабицикло[3.3.1]нонан-9-она.

6. Соединения по п. 1, обладающие свойством положительного модулирования активности АМРА-рецепторов.

7. Фармацевтическая композиция, обладающая свойством модулировать активности АМРА-рецепторов, содержащая соединение общей формулы I по любому из пп. 1-6 в эффективном количестве и фармацевтически приемлемый наполнитель, носитель или разбавитель.

8. Способ воздействия на АМРА-рецепторы введением эффективного количества соединения по п. 1.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что введение эффективного количества соединения по п. 1 осуществляют в дозе от 0,1 до 40 мг в день.

10. Применение соединений по п. 1 для получения лекарственного средства для лечения или профилактики заболеваний, опосредованных активностью АМРА-рецепторов.

11. Применение по п. 10 для лечения деменции различной этиологии, в том числе при болезнях Альцгеймера (БА), Паркинсона (БП), хорея Хантингтона, бокового амиотрофического склероза, Нимана-Пика, эпилепсии и эпилептического статуса, шизофрении, биполярного расстройства, сумеречного сознания, мигрени, интеллектуально-мнестических расстройств, гипоксии головного мозга, ишемии головного мозга (в том числе инсульт) и других заболеваниях нервной системы.