КРИСТАЛЛИЧЕСКИЕ ФОРМЫ 1-(5'-(5-(3,5-ДИХЛОРО-4-ФТОРФЕНИЛ)-5-(ТРИФТОРМЕТИЛ)-4,5-ДИГИДРОИЗОКСАЗОЛ-3-ИЛ)-3'Н-СПИРО[АЗЕТИДИН-3,1'-ИЗОБЕНЗОФУРАН]-1-ИЛ)-2-(МЕТИЛСУЛЬФОНИЛ)ЭТАНОНА Российский патент 2017 года по МПК C07D491/107 A61K31/4155 A61P33/00 

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к новым кристаллическим формам 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, конкретно к Форме А, к способам их получения, к композициям, содержащим указанные кристаллические формы, и к использованию указанных кристаллических форм в качестве антипаразитных агентов для лечения животных, нуждающихся в них. Данное изобретение также охватывает применение аморфного (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из Формы А для композиций, и способам их применения в качестве антипаразитного агента.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Хиральное соединение 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон имеет следующую структуру:

Формула (1), которая в данной заявке также называется Соединение 1, «*» представляет собой хиральный атом углерода.

Соединение 1 и его получение описано в WO 2012/120399 (которая полностью включена в данную заявку), Пример 9. В WO публикации дополнительно описано, что соединение Формулы (1) является хиральным и может быть использовано как антипаразитный агент для использования при лечении животных с паразитарной инфекцией или заражения паразитами. При применении многостадийного способа соединение высвобождалось как осадитель, содержащий приблизительно 90% аморфного S-энантиомера и приблизительно 10% аморфного R-энантиомера. Аморфный S-энантиомер получали осаждением эквимолярных количеств S- и R-энантиомеров, т.е., рацемата. Дополнительно рацемат отделяли при помощи хиральной ВЭЖХ. S- и R-энантиомеры, получаемые из препаратов, характеризовали при помощи ВЭЖХ (время элюирования), 1Н-ЯМР анализа и масс-спектрометрии.

Если соединение должно быть разработано в качестве фармацевтического или ветеринарного агента, важно обеспечить такую форму, чтобы соединение (обычно известное как лекарственное вещество или активный фармацевтический ингредиент/ активный ветеринарный агент) можно было надежно получать и очищать в большем масштабе, и оно не разлагалось бы при хранении. Поэтому желательна кристаллическая форма, и предпочтительно форма соединения с высокой температурой плавления, так как кристаллические твердые вещества с высокой температурой плавления, как правило, легко очистить посредством кристаллизации, и они более стабильны, чем некристаллическая (аморфная) форма.

Кристаллические формы 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона ранее не описаны или не охарактеризованы. Различные твердотельные формы фармацевтического или ветеринарного соединения могут иметь фактически разные физические свойства. Такие различия в физических свойствах могут иметь влияние, например, на то, каким образом получают фармацевтическое или ветеринарное соединение, как его обрабатывают, составляют или вводят. Например, кристаллическая форма одного соединения может иметь очень разные свойства, а именно растворимость, скорость растворения, стабильность суспензии, стабильность в процессе измельчения, давление пара, оптические и механические свойства, гигроскопичность, размер кристалла, фильтрационные свойства, осушка, плотность, температура плавления, устойчивость к распаду, стабильность против фазового превращения в другие кристаллические формы, цвет, и даже химическая реакционная способность. Соответственно, желательно выявление новых твердотельных форм (т.е., кристаллических или полиморфных форм) 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, которые обеспечивают преимущество по сравнению с другими твердотельными формами при получении, обработке, рецептурном производстве или введении соединения.

Как описано выше, твердотельное хиральное Соединение 1 составляет приблизительно 90:10 (S:R) при синтезе. Разделение твердотельного (кристалл) рацемата (эквимолярные части S- и R-энантиомеры) приводит к получению почти чистого аморфного S энантиомера, приблизительно 80% от первоначально синтезированного соединения, которое затем может легко кристаллизоваться в почти чистое (-/+97%) кристаллическое состояние. S- и R энантиомеры рацемата может быть дополнительно разделены с помощью хиральной ВЭЖХ и кристаллизованы.

При кристаллизации каждый из S- и R-энантиомеров 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона образуют безводную монокристаллическую форму. Кристаллическая форма S-энантиомера обозначена как Форма А. Кристаллическая форма R-энантиомера аналогична Форме А и твердотельная кристаллическая форма S/R рацемата обозначается как "кристаллический рацемат".

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к новым кристаллическим формам 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона (т.е., Соединение 1 Формулы 1;) показанного ниже,

«*» представляет собой хиральный атом углерода.

В одном аспекте данного изобретения заявлена кристаллическая форма А 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона.

В другом аспекте данного изобретения заявлена кристаллическая форма (R)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, которая аналогична кристаллической Форме Формы А (S-энантиомер).

В другом аспекте данного изобретения заявлена кристаллическая форма рацемата, (S/R)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона.

В другом аспекте данного изобретения представлен аморфный S-энантиомер 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученный из кристаллической Формы А.

В другом аспекте данного изобретения представлен аморфный (S)- 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, его композиции, и способы применения при лечении паразитарной инфекции и заражения у животного, которое нуждается в этом.

В предпочтительном аспекте данное изобретение представляет конкретные кристаллические формы Соединения 1. Каждая из этих кристаллические формы имеет уникальную трехмерную кристаллическую конфигурацию, которая может быть охарактеризована, например, при помощи дифракции электромагнитного излучения в кристаллической решетке (например, порошковая рентгенография (PXRD или pxrd) и инфракрасная спектроскопия с преобразованием Фурье (FT-IR)), и ее характеристик плавления (например, с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК)). Для удобства, каждой из этих кристаллических форм был присвоен дескриптор для характеристики, хотя данные дескрипторы не имеют собственного технического значения. Как описано в данной заявке, кристаллические Формы 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона включают Форму А, которая кристаллизуется из S-энантиомера, и твердотельную кристаллическую Форму рацемата. Кристаллическая форма R-энантиомера подобна таковой в Форме А. Форма А является предпочтительной кристаллической формой (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона.

Форма А в результате порошковой рентгеновской дифракции проявляет значительные характеристики, как показано на Фиг. 1. Характеристические пики Формы А, выраженные в градусах 2θ [2-Тета°] (±0,2°), межплоскостные расстояния (d-расстояние), и относительные интенсивности (%) отображены в Таблице 1 ниже. Специалист в данной области должен понимать, что интенсивности пиков на дифрактограмме являются функцией ориентации кристаллов в образце, таким образом, физические модификации, такие как размол или измельчение вручную, или кристаллизация из другого растворителя, могут влиять на интенсивность пиков, в то время как их положение остается неизменным, для той же самой кристаллической Формы.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно при одном или более из следующих положений: 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 17,18, 18,83, 19,12, 20,07, 20,97, 21,42, 22,03, 22,54, 23,62 и 28,42, все из которых имеют относительную интенсивность по меньшей мере 30%. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно при одном или более из следующих положений: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54 и 28,42, все из которых имеют относительную интенсивность по меньшей мере 40%. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно при одном или более из следующих положений: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42 и 28,42, все из которых имеют относительную интенсивность по меньшей мере 50%. В еще одном аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно при одном или более из следующих положений: 17,18, 18,83, и 20,07, все из которых имеют относительную интенсивность по меньшей мере 58%. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, и 20,07. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83 и 20,07, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°), выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 22,03, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, и 20,07, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°), выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 21,42 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях. 17,18, 18,83, 20,07, и 21,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54, и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54, и 28,42 и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°), выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 22,03, и 23,62. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 4,70, 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 4,70, 9,39, 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 4,70, 9,39, 17,18, 18,83, 19,12, 20,07, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 4,70, 9,39, 14,10, 17,18, 18,83, 19,12, 20,07, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 17,18, 18,83, 19,12, 20,07, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 17,18, 18,83,19,12, 20,07, 20.97, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 17,18, 18,83, 19,12, 20,07, 20,97, 21,42, 22,03, 22,54, 23,62 и 28,42.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет инфракрасный спектр с преобразованием Фурье (FT-IR) при 1800-600 см^-1 диапазоне фактически как показано на Фиг. 2. Характеристические FT-IR пики Формы А показаны в Таблице 2 ниже.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические FT-IR пики при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне в одном или более из следующих положений: 1662, 1459, 1352, 1304, 1191, 1166, 1133, 1023, 984, 912, 815, 757, 721, 659 и 625 см^-1.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические FT-IR пики при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне в одном или более из следующих положений: 1662, 1459, 1352, 1304, 1191, 1166, 1133, 1023, 984, 912, 815, 757, 721, 659 и 625 см^-1, и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно одном или более из следующих положений: 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 17,18, 18,83, 19,12, 20,07, 20,97, 21,42, 22,03, 22,54, 23,62 и 28,42.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические FT-IR пики при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне в одном или более из следующих положений: 1662, 1459, 1352, 1304, 1191, 1166, 1133, 1023, 984, 912, 815, 757, 721, 659 и 625 см^-1, и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, и 20,07, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°), выбранный из группы, состоящей из пиков в приблизительно следующих положениях: 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 22,03, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические FT-IR пики при 1800 - 600 см^-1 спектральном диапазоне в одном или более из следующих положений: 1662, 1459, 1352, 1304, 1191, 1166, 1133, 1023, 984, 912, 815, 757, 721, 659 и 625 см^-1, и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, и 20,07, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°) выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 21,42 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические FT-IR пики при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне в одном или более из следующих положений: 1662, 1459, 1352, 1304, 1191, 1166, 1133, 1023, 984, 912, 815, 757, 721, 659 и 625 см^-1, и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические FT-IR пики при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне в одном или более из следующих положнений: 1662, 1459, 1352, 1304, 1191, 1166, 1133, 1023, 984, 912, 815, 757, 721, 659 и 625 см^-1, и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические FT-IR пики при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне в одном или более из следующих положений: 1662, 1459, 1352, 1304, 1191, 1166, 1133, 1023, 984, 912, 815, 757, 721, 659 и 625 см^-1, и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54, и 28,42 и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°) выбранный из группы, состоящей из пиков в приблизительно следующих положениях: 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 22,03 и 23,62.

В другом аспекте данного изобретения для кристаллической Формы А также наблюдается термограмма дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) термограмму фактически как показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет ДСК термограмму фактически как показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С с началом эндотермы при приблизительно 135,26°С.

В другом аспекте данного изобретения для кристаллической Формы А также наблюдается ДСК термограмма фактически как показано на Фиг. 3.2, которая отображает четыре различные пробы кристаллической Формы А, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 144,01, 144,82, 146,32 и 146,92°С с началом эндотермы при приблизительно 133.95, 136.29, 137,54 и 137,96°С соответственно. В среднем, ДСК термограмма четырех проб характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,52°С с началом эндотермы при приблизительно 136,44°С.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет ДСК термограмму (Фиг. 3.2) с началом эндотермы при приблизительно 133.95, 136.29, 137,54, и 137.96°С, соответственно. В среднем, ДСК термограмма четырех проб характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,52°С с началом эндотермы при приблизительно 136,44°С.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии фактически как показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С или как фактически показано на Фиг. 3.2, на которой отображен диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С, и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно при одном или более из следующих положений: 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 17,18, 18,83, 19,12, 20,07, 20,97, 21,42, 22,03, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет ДСК термограмму фактически как показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53Х или как фактически показано на Фиг. 3.2, которая отображает диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, и 20,07, и дополнительно содержащие по меньшей мере один дополнительный пик дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 22,03, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет ДСК термограмму фактически как показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С или как фактически показано на Фиг. 3.2, которая отображает диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С, и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°), в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, и 20,07, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°) выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 21,42 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет ДСК термограмму фактически как показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С или, как фактически показано на Фиг. 3.2, которая отображает диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42 и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет ДСК термограмму фактически как показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С или, как фактически показано на Фиг. 3.2, которая отображает диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54, и 28,42. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А также проявляет ДСК термограмму фактически как показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С или, как фактически показано на Фиг. 3.2, которая отображает диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С и имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54, и 28,42 и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°), выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 22,03, и 23,62.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83, и 20,07, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°), выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 22,03, 21,42, 22,54, 23,62 и 28,42 и характеристические FT-IR пики как фактически показано на Фиг. 2 и характеристические ДСК термограммы как фактически показано на Фиг. 3.1, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С или как фактически показано на Фиг. 3.2, которая отображает диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С. В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) в приблизительно следующих положениях: 17,18, 18,83 и 20,07, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°), выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 21,42, 22,54, и 28,42 и характеристические FT-IR пики как фактически показано на Фиг. 2 и характеристические ДСК термограммы как фактически показано на Фиг. 3.1, которые характеризуются преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С или, как фактически показано на Фиг. 3.2, которая отображает диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С.

В другом аспекте данного изобретения кристаллическая Форма А проявляет характеристические FT-IR пики как фактически показано на Фиг. 2 и характеристические ДСК термограммы как фактически показано на Фиг. 3.1, характеризующиеся преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 145,53°С или как фактически показано на Фиг. 3.2, которая отображает диапазон преобладающих эндотермических пиков при приблизительно 144,01-146,92°С.

В другом аспекте данного изобретения монокристаллы Формы А проявляют основную кристаллическую структуру, которая является моноклинной и имеет пространственную группу Р2(1). Характеристические данные кристаллической структуры кристаллической Формы А показаны в Таблице 3 ниже.

Другой аспект данного изобретения представляет собой рацемат кристаллической Формы 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, обозначенный как рацемат. Рацемат представляет собой кристаллическое состояние рацемической смеси осажденных приблизительно эквимолярных S- и R-энантиомеров. Кристаллический рацемат проявляет PXRD образец фактически как показано на Фиг. 4.

Характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции кристаллического рацемата выраженные в градусах 2θ (±0,2° 8), межплоскостных расстояниях (d), и и относительных интенсивностях (%) отображена в Таблице 4, ниже.

В еще одном аспекте данного изобретения кристаллический рацемат имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°θ), в одном или более из следующих положений: 3,4, 4,47, 4,74, 5,23, 17,03, 18,94, 19,77, 20,18, 21,17, 22,63 и 24,18.

В еще одном аспекте данного изобретения кристаллический рацемат имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°θ), приблизительно в одном или более из следующих положений: 3,4, 4,47, 4,74, 18,94, 19,77, 20,18, и 22,63, все из которых имеют относительную интенсивность по меньшей мере 30%. В еще одном аспекте данного изобретения кристаллический рацемат имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°θ), приблизительно в одном или более из следующих положений: 3,40, 4,47, 4,74, 18,94 и 20,18, все из которых имеют относительную интенсивность по меньшей мере 50%. В еще одном аспекте данного изобретения кристаллический рацемат имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°9) приблизительно в одном или более из следующих положений: 3,40, 18,94 и 20,18, все из которых имеют относительную интенсивность по меньшей мере 75%. В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2°θ), приблизительно в одном или более из следующих положений: 3,40, 18,94, и 20,18, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 28 (±0,2°θ), выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно в одном и более следующих положений: 4,47 и 4,74. В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 28 (±0,2°θ) приблизительно в одном или более из следующих положений: 3,40, 18,94, и 20,18, и дополнительно содержит по меньшей мере один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°θ), выбранный из группы, состоящей из пиков в приблизительно одном и более следующих положений: 4,47, 4,74, 19,77 и 22,63. В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат имеет характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции, выраженные в градусах 2θ (±0,2° θ) приблизительно в одном или более из следующих положений: 3,40, 18,94 и 20,18, и дополнительно содержит, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°θ) выбранный из группы, состоящей из пиков в приблизительно одном и более следующих положений: 4,47, 4,74, 5,23, 17,03, 19,77, 21,17, 22,63 и 24,18.

В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат также проявляет FT-IR спектр при 1800-600 см^-1 диапазоне фактически как показано на Фиг. 5. Характеристические FT-IR пики кристаллического рацемата показаны в Таблице 5 ниже.

В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат проявляет характеристические FT-IR пики при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне в одном или более из следующих положений: 1662, 1465, 1352, 1301, 1190, 1175, 1132, 1024, 983, 912, 811, 757, 722, 686 и 658 см^-1.

В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат также проявляет ДСК термограмму фактически как показано на Фиг. 6, которая характеризуется преобладающим эндотермическим пиком при приблизительно 241,77°С с началом эндотермы при приблизительно 233,63°С.

В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат характеризуется пиками PXRD, выраженными в градусах 2θ (±0,2°θ) при одном или более из следующих положений: 3,4, 4,47, 4,74, 5,23, 17,03, 18,94, 19,77, 20,18, 21,17, 22,63 и 24,18; и с характеристическими FT-IR пиками при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне при одном или более из следующих положений: 1662, 1465, 1352, 1301, 1190, 1175, 1132, 1024, 983, 912, 811, 757, 722, 686 и 658 см^-1; и с преобладающим пиком эндотермы при приблизительно 241,77°С с началом эндотермы при приблизительно 233,63°С.

В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат характеризуется пиками PXRD, выраженными в градусах 2θ (±0,2° θ) при одном или более из следующих положений: 3,4, 4,47, 4,74, 18,94, 19,77, 20,18, и 22,63; и с характеристическими FT-IR пиками при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне при одном или более из следующих положений: 1662, 1465, 1352, 1301, 1190, 1175, 1132, 1024, 983, 912, 811, 757, 722, 686, и 658 см^-1; и с преобладающим пиком эндотермы при приблизительно 241,77°С с началом эндотермы при приблизительно 233,63°С.

В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат характеризуется пиками PXRD, выраженными в градусах 2θ (±0,2°θ) при одном или более из следующих положений: 3,40, 4,47, 4,74, 18,94 и 20,18; и с характеристическими FT-IR пиками при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне при одном или более из следующих положений: 1662, 1465, 1352, 1301, 1190, 1175, 1132, 1024, 983, 912, 811, 757, 722, 686, и 658 см^-1; и с преобладающим пиком эндотермы при приблизительно 241.77°С с началом эндотермы при приблизительно 233,63°С.

В другом аспекте данного изобретения кристаллический рацемат характеризуется пиками PXRD, выраженными в градусах 2θ (±0,2°θ) при одном или более из следующих положений: 3,40, 18,94, и 20,18; и с характеристическими FT-IR пиками при 1800-600 см^-1 спектральном диапазоне при одном или более из следующих положений: 1662, 1465, 1352, 1301, 1190, 1175, 1132, 1024, 983, 912, 811, 757, 722, 686, и 658 см^-1; и с преобладающим пиком эндотермы при приблизительно 241,77°С с началом эндотермы при приблизительно 233,63°С.

В другом аспекте данного изобретения заявлена композиция, содержащая терапевтически эффективное количество кристаллической Формы А и фармацевтически или ветеринарно приемлемый наполнитель, разбавитель, носитель или их смесь.

В другом аспекте данного изобретения заявлена композиция содержащая терапевтически эффективное количество (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы А, и фармацевтически или ветеринарноприемлемый наполнитель, разбавитель, носитель или их смесь.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлена композиция содержащая терапевтически эффективное количество аморфного (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы А, и фармацевтически или ветеринарно приемлемый наполнитель, разбавитель, носитель или их смесь.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлена композиция содержащая терапевтически эффективное количество кристаллической Формы А и аморфный (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, полученный из кристаллической Формы А, и фармацевтически или ветеринарноприемлемый наполнитель, разбавитель, носитель или их смесь.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлена композиция содержащая терапевтически эффективное количество кристаллической Формы А, аморфный (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, полученный из кристаллической Формы А, (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, полученный из кристаллической Формы А, или кристаллический рацемат 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, или их любую смесь, и фармацевтически или ветеринарноприемлемый наполнитель, разбавитель, носитель или их смесь.

В еще одном аспекте данного изобретения композиция является фармацевтически или ветеринарноприемлемой композицией.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлен способ лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, включающий введение животному, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллической Формы А.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлен способ лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, включающий введение животному, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)-этанона, полученного из кристаллической Формы А.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлен способ лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, включающий введение животному, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества аморфного (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы А.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлен способ лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, включающий введение животному, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллической Формы А и аморфного (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы А.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлен способ лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, включающий введение животному, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллической Формы А, аморфного (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы A, (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы А, или кристаллического рацемата 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил) этанона, или их любой смеси.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлено применение медикамента содержащего терапевтически эффективное количество соединения кристаллической Формы А, аморфный (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы A, (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы А, или рацемата 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил) этанона, или их любой смеси, для лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, которое нуждается в этом.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлена фармацевтическая или ветеринарная композиция содержащая терапевтически эффективное количество кристаллической Формы А в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным ветеринарным агентом, и по меньшей мере одним фармацевтически или ветеринарно приемлемым наполнителем, носителем, разбавителем или их смесью.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлена фармацевтическая или ветеринарная композиция содержащая терапевтически эффективное количество (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы А, в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным ветеринарным агентом, и по меньшей мере одним фармацевтически или ветеринарноприемлемым наполнителем, носителем, разбавителем или их смесью.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлена фармацевтическая или ветеринарная композиция содержащая терапевтически эффективное количество аморфного (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученного из кристаллической Формы А, в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным ветеринарным агентом, и по меньшей мере одним фармацевтически или ветеринарноприемлемым наполнителем, носителем, разбавителем или их смесью.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлена фармацевтическая или ветеринарная композиция содержащая терапевтически эффективное количество кристаллической Формы А и аморфный (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, полученный из кристаллической Формы А, в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным ветеринарным агентом, и по меньшей мере одним фармацевтически или ветеринарноприемлемым наполнителем, носителем, разбавителем или их смесью.

В еще одном аспекте данного изобретения заявлена фармацевтическая или ветеринарная композиция содержащая терапевтически эффективное количество кристаллической Формы А, аморфный (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, полученный из кристаллической Формы A, (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, полученный из кристаллической Формы А, или рацемата 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, или их любую смесь, в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным ветеринарным агентом, и по меньшей мере одним фармацевтически или ветеринарноприемлемым наполнителем, носителем, разбавителем или их смесью.

В еще одном аспекте данного изобретения дополнительный ветеринарный агент выбирают из группы, состоящей из абамектина, селамектина, моксидектина, ивермектина, эмамектина, дорамектина, эприномектина, пирантела, амитраза, альбендазола, камбендазола, фенбендазола, флубензадола, мебендазола, фебантела, октадепсипептидов, оксфендазола, оксибендазола, парагерквамида, парбендазола, празиквантела, тиабендазола, тетрамизола, триклабендазола, левамизола, оксантела, новалурона, морантела, мильбемицина, мильбемициноксима, демидитраза, диэтилкарбамазина, фипронила, гидропрена, кинопрена, метопрена, метафлумизона, никлозамида, перметрина, пиретрина, пирипроксифена, спиносада, аминоацетонитрильного производного(ых) или любой их смеси.

В еще одном аспекте данного изобретения дополнительный ветеринарный агент выбирают из моксидектина или пирантела, или их смеси. В еще одном аспекте данного изобретения дополнительный ветеринарный агент выбирают из селамектина. В еще одном аспекте данного изобретения дополнительный ветеринарный агент выбирают из оксидектина, пирантела, и празиквантела, или их любой смеси. В еще одном аспекте данного изобретения дополнительный ветеринарный агент выбирают из пирантела и милбемицин оксима, или их смеси. В еще одном аспекте данного изобретения дополнительный ветеринарный агент представляет собой производное аминоацетонитрила.

В еще одном аспекте данного изобретения животное представляет собой домашних животных, сельскохозяйственных животных или птиц. В еще одном аспекте данного изобретения домашним животным является лошадь, собака или кошка. В еще одном аспекте данного изобретения скот представляет собой крупный рогатый скот, свинью или овцу.

В еще одном аспекте данного изобретения композицию вводят перорально, местно или в виде инъекций. В еще одном аспекте данного изобретения композицию вводят перорально. В еще одном аспекте данного изобретения композицию вводят местно. В еще одном аспекте данного изобретения композицию вводят путем инъекции. В еще одном аспекте данного изобретения инъекции являются подкожными, внутримышечными или внутривенными инъекциями.

В еще одном аспекте данного изобретения Форма А может быть получена путем кристаллизации 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона из растворителя, включая этанол, н-гептан или смешанные изомеры гептанов, н-бутанола, этил или изопропилацетата, или их любую смесь. Дополнительно, Форма А может быть получена диффузией паров метанола и диизопропилового эфира. В еще одном аспекте данного изобретения заявлен способ получения кристаллической Формы А 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона.

Форму А получали путем добавления аморфного (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона в реакционный сосуд, содержащий этилацетат (5%), н-гептан (35%), и этанол (60%). Реакционную смесь нагревали до приблизительно 60°С и затем охлаждали до приблизительно 45°С в течение периода приблизительно 15-20 минут. Зародыши кристаллической Формы А могут быть затем добавлены в смесь. Зародыши получали путем растворения аморфного (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона в метаноле и диффузией паров внешнего уровня диизопропилового эфира чтобы медленно преобразовать аморфную форму в Форму А в течение приблизительно 5 дней при комнатной температуре. Следует выдерживать реакционную смесь при приблизительно 45°С в течение приблизительно 2-часов, а затем охладите до приблизительно 30°С при скорости приблизительно 1,5°С в час, а затем охлаждали до 10°С в течение трех часов, линейно, а затем выдерживали при 10°С в течение приблизительно 4,5 часов. Охладите белую суспензию до приблизительно 0-1°С в течение 20 минут и выдерживайте всю ночь (приблизительно 23 часа) при приблизительно 0-1°С. Альтернативно, реакционная смесь может быть охлаждена до приблизительно 20°С в течение 12,5 часов (приблизительно 2°С/ч) линейно, а затем выдерживали при 20°С при добавлении н-гептана в течение 1 часа.

Выдерживают смесь при 20°С в течение приблизительно 1 часа и затем охлаждают, а потом охлаждают до -10°С в течение 10 часов и удерживают при -10°С в течение 3 часов. Добавьте смесь в предварительно охлажденный стеклянный фильтр и фильтр под вакуумом. Промыть оставшиеся твердые частицы смесью смеси растворителей, содержащей приблизительно 40/60 до приблизительно 20/80 этанол / н-гептан. Смесь-растворитель может быть предварительно охлажденной до приблизительно 0°С. Остальные твердые частицы могут быть снова промыты н-гептаном. Этанол, используемый в процедуре, описанный в данной заявке, денатурируют 0,5% толуолом. Твердые вещества затем могут быть высушены в вакууме в течение приблизительно 1 часа при комнатной температуре, а затем в вакууме при 40°С в течение ночи. Альтернативно, твердые вещества могут быть высушены в вакуумной печи при 30°С в течение 2,5 дней, при давлении приблизительно 150-160 торр с током азота. Полученные в результате твердые вещества представляют собой Форму А 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, как подтверждено ДСК.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На Фиг. 1 изображена иллюстративная рентгенограмма кристаллической Формы А.

На Фиг. 2 изображен иллюстративный FT-IR спектр кристаллической Формы А.

На Фиг. 3.1 изображена иллюстративная ДСК термограмма одной партии кристаллической Формы А.

На Фиг. 3.2 изображена иллюстративная ДСК термограмма 4-партий кристаллической Формы А.

На Фиг. 4 изображена иллюстративная рентгенограмма кристаллического рацемата.

На Фиг. 5 изображен иллюстративный FT-IR спектр кристаллического рацемата.

На Фиг. 6 изображена иллюстративная ДСК термограмма кристаллического рацемата.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Специалист в данной области кристаллизации твердотельных форм фармацевтического или ветеринарного активного соединения (S)/агента(ов) поймет, что общий подход заключается в нахождении условий, при которых желательно чтобы, активный фармацевтический/ветеринарный агент был растворим, и другие условия в которых также соединение не растворяется, и изменении условий так, что растворимость уменьшается и кристаллы растут. Способы включают изменения температуры, добавление анти-растворителя, добавление концентрированного раствора в соединение с анти-растворителяем для модификации рН, перегонку растворителя, или какую-либо их комбинацию. Зародыши могут быть добавлены, чтобы стимулировать кристаллизацию. Общие методы могут быть найдены в распространенной литературе, например, Crystallization, 4th Ed, J.W. Mullin, Butterworth-Heinemann, 2001, or Crystallization of Organic Compounds: An Industrial Perspective, by H.-H. Tung et al., 2009, Wiley-AIChE. Таким образом, специалист в данной области может найти такие различные процессы, с помощью которых кристаллическая форма и кристаллический рацемат могут быть получены, а также в том числе и другие потенциальные кристаллические формы.

То, что соединение имеет твердотельную форму, может фактически повлиять на физические свойства соединения, включая: (1) упаковочные свойства, такие как молярный объем, плотность и гигроскопичность, (2) термодинамические свойства, такие как температура плавления, давление пара и растворимость, (3) кинетические свойства, такие как скорость растворения и стабильность (в том числе стабильность в условиях окружающей среды, особенно при воздействии влаги и в условиях хранения), (4) поверхностные свойства, такие как площадь поверхности, смачиваемость, межфазное натяжение и форма, (5) механические свойства, такие как твердость, прочность на растяжение, уплотняемость, обработка, расход и смешиваемость; или (6) фильтрационные свойства. Выбор и введение твердотельной формы является особенно важным для соединений, которые должны быть использованы в качестве фармацевтического или ветеринарного агента. Тщательный отбор и контроль твердотельной формы может уменьшить проблемы синтеза, обработки, составления, и/или введения, связанные с соединением.

Кристаллизацию соединения Формула (1), как ожидается, проводят с помощью ряда соответствующих растворителей и анти-растворителей, и их смесей, либо путем охлаждения, посредством добавления осадителя или путем перегонки растворителя. Неограничивающие примеры растворителей включают: метанол, этанол, другие спирты, ацетон, метил этил кетон, метил изобутил кетон, другие кетоны, этилацетат, пропилацетат, бутил ацетат, другие ацетаты, толуол, ацетонитрил, тетрагидрофуран, 2-метил тетрагидрофуран, уксусную кислоту, дихлорметан, 1,2-этан 2,2,2-трихлорэтанол, другие хлорированные органические растворители, и т.п. Не ограничивающие примеры антирастворителей включают: воду, гептан, гексан, октан, трет-амиловый спирт, циклогексан, трет-бутил метил эфир, диизопропиловый эфир, этиловый эфир, и другие эфиры и другие алканы.

Было обнаружено, что конкретная кристаллическая Форма, Форма A, (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона в соответствии с данным изобретением проявляет полезные свойства во время обработки в органическом материале по сравнению с кристаллическим рацематом или индивидуальными аморфными энантиомерами 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона.

Растворимость кристаллического рацемата составляет менее 10 мг/мл в ацетоне при комнатной температуре (то есть, приблизительно 22°С). В отличие от этого, растворимость кристаллической Формы А более чем 300 мг/мл в ацетоне. Дополнительно, растворимость кристаллического рацемата и Формы А в метил-трет-бутиловом эфире составляет <1 мг/мл и 11 мг/мл, соответственно. Это различие в растворимости характерно также для других растворителей.

Эта огромная разница в растворимости имеет несколько преимуществ. Во-первых, разделение рацемата с энантиомерно чистым S-энантиомером выполняют путем фильтрации рацемата из раствора. Чистота энантиомера, таким образом, повышается от приблизительно 80% энантиомерного избытка (90:10) до приблизительно 98% энантиомерного избытка (99:1). Во-вторых, более высокая растворимость S-энантиомера позволяет значительно большие концентрации растворов для составления любой жидкой композиции. Например, при получении путем распылительной сушки дисперсии S-энантиомера требуется растворение кристаллической Формы А. Чем выше растворимость, тем меньше продолжительность обработки, и тем меньше растворителя требуется. В-третьих, поскольку Форма А является гораздо более растворимой, чем кристаллический рацемат, это может кореллировать с большей биодоступностью.

Еще одно важное отличие между кристаллическим рацематом и кристаллической Формой А представляет размер частиц. Кристаллический рацемат производит очень маленькие первичные частицы, обычно менее 1 микрона, которые агломерированы. Эти частицы очень трудно фильтровать, из-за малого размера первичных частиц. Вспомогательный фильтрующий материал, такой как целит, часто используется для фильтрации кристаллического рацемата. Кристаллическая Форма А кристаллизуется в виде крупных частиц, размер первичных частиц превышает 10 микрон, даже более 100 микрон на длинной оси. Не требуется фильтра или специального оборудования, такого как центрифуги, чтобы фильтровать эти частицы из суспензий в, например, смеси этанол/гептан или н-бутанол. Использование фильтра для выделения готовой Формы А будет представлять большие проблемы касательно удаления фильтра из активного ингредиента (т.е., Формы А). В то время как размер частиц является функцией того, как быстро кристаллы формируются, используемая система растворителей, зародыши, и другие факторы, огромная разница в размерах частиц между кристаллическим рацематом и кристаллической Формы А сохраняется в многочисленных кристаллизациях. В отличие от аморфного состояния выделенного путем выпаривания растворителя, в результате чего образуется вспененное твердое вещество, кристаллическая Форма А представляет собой текучий порошок. Кристаллическая Форма также имеет более высокую температуру плавления, чем в аморфном состоянии, и плавится при 112-1240С, при рассмотрении микроскопии горячей стадии и, следовательно, легче высушить остаточные растворители.

Сокращения и определения

Аббревиатура "ДСК" относится к дифференциальной сканирующей калориметрии.

Аббревиатура "PXRD" или "pxrd" относится к порошковой дифракции рентгеновских лучей, и также может упоминаться как порошковая рентгеновская дифракция (XRPD).

Аббревиатура "FT-IR" относится к ИК-Фурье спектроскопии. "Дополнительный ветеринарный агент(ы)", используемый в данной заявке, если не указано иное, относится к другим ветеринарным и фармацевтическим соединениям или продуктам, которые обеспечивают терапевтически эффективное (фармакологически и/или антипаразитно активное) количество указанного агента(ов), которые могут быть использованы для лечения или контроля паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, как описано в данной заявке.

"Животное", как используется в данной заявке, если не указано иное, относится к отдельному животному, которое является млекопитающим, птицей, или рыбой. В частности, млекопитающее относится к позвоночным животным, являющимся человеком и не человеком, которые являются членами таксономического класса Mammalia. Неисключающие примеры млекопитающих, кроме человека, включают животных-компаньонов и домашний скот. Неисключающие примеры домашних животных включают: собаку, кошку, ламу, и лошадь. Предпочтительными домашними животными являются собаки, кошки, и лошади. Более предпочтительным является собака. Неисключающие примеры скота включают: свиней, верблюдов, кроликов, коз, овец, оленей, лосей, крупный рогатый скот (КРС), и бизона. Предпочтительным скотом является крупный рогатый скот и свиньи. В частности, птица относится к позвоночным животным таксономического класса Aves. Птицы являются птицами с оперением, крылатыми, двуногими, эндотермичными, и яйцекладущими. Неисключающие примеры птицы включают домашних птиц (например, куры, индейки, утки, и гуси), всех из них также называют в данной заявке птицы. В частности, рыба относится к таксономическому классу Chondrichthyes (хрящевые рыбы, например, акулы и скаты) и Osteichthyes (костистые рыбы), которые живут в воде, имеют жабры или слизь, покрыты кожей для дыхания, плавники, и могут иметь чешую. Неисключающие примеры рыб представляют собой акулу, лосося, форель, сига, сома, тилапию, морского окуня, тунца, палтуса, калкана, камбалу, морского языка, полосатого окуня, угря, сериолу, окуня и т.п.

"Хиральный", как использовано в данной заявке, если не указано иное, относится к структурной характеристике молекулы, которая делает невозможным наложение ее на зеркальное отражение (например, R- и S-энантиомеры). Этот термин также обозначен звездочкой (т.е. *) в некоторых Примерах и Приготовлениях.

"Соединение(я) в соответствии с данным изобретением", как использовано в данной заявке, если не указано иное, относится к кристаллическим формам 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, в данной заявке кристаллическая Форма и кристаллический рацемат. Эта фраза также относится к аморфной S-энантиомерной форме соединения, которое впоследствии получают из кристаллической Формы А, например, когда они присутствуют в твердой композиции в результате применения распылительной сухой дисперсии.

"Кристаллическая форма", как использовано в данной заявке, если не указано иное, относится к конкретным твердотельных формам 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метил сульфонил) этанона, где молекулы расположены с образованием различимой кристаллической решетки (I), включающей различимые элементарные ячейки, и (II) с получением различимых пиков дифракции при воздействии рентгеновского излучения.

"Форма А", как используется в данной заявке, если не указано иное, относится к конкретной кристаллической форме в твердом состоянии (S)-энантиомера 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, где молекулы расположены с образованием различимых кристаллической решетки (I), включающей различимые элементарные ячейки, и (II) с получением различимых пиков дифракции при воздействии рентгеновского излучения.

"Кристалл рацемат" или "кристаллический рацемат", как используется в данной заявке, если не указано иное, относится к конкретной кристаллической форме в твердом состоянии (S/R) рацемата 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, где молекулы расположены с образованием различимых кристаллической решетки (I), включающей различимые элементарные ячейки и (II), дающие отличительные пики дифракции при воздействии рентгеновского излучения.

"Паразит(ы)", используемый в данной заявке, если не указано иное, относится к эндопаразитам и эктопаразитам. Эндопаразиты - это паразиты, которые живут в теле своего хозяина и включают гельминтов (например, трематод, цестод, и нематод) и простейших. Эктопаразиты являются организмами типа членистоногих (например, паукообразные и насекомые), которые питаются через или на коже своего хозяина. Предпочтительные паукообразные имеют порядок Acarina, например, клещи и зудени.

Предпочтительные насекомые представляют собой мошек, блох, комаров, жалящих мух (жигалка осенняя, жигалка коровья малая, муха мясная синяя, слепень, и т.п.), постельные клопы, и вши. Соединения в соответствии сданным изобретением могут быть использованы для лечения паразитов, т.е. лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами.

"Терапевтически эффективное количество", как используется в данной заявке, если не указано иное, относится к количеству соединения в соответствии с данным изобретением индивидуально или в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным ветеринарным агентом, который (I) лечит конкретные паразитарные инфекции или заражения паразитами, (II) ослабляет, облегчает или устраняет один или более симптомов конкретно паразитарной инфекции или заражения паразитами, или (III) предотвращает или задерживает начало одного или более симптомов конкретной паразитарной инфекции или заражения паразитами, описанных в данной заявке.

"Лечение", и т.п., как использовано в данной заявке, если не указано иное, относится к обращению, облегчению или ингибированию паразитарной инфекции, инвазии, или состояния. Как используется в данной заявке, эти термины также охватывают, в зависимости от состояния животного, предотвращение возникновения заболевания или состояния, или симптомов, связанных с расстройством или состоянием, в том числе снижение тяжести заболевания или состояния или симптомов, связанных с ним, до заболевания указанной инфекцией или заражением паразитами. Таким образом, лечение может относиться к введению соединений в соответствии с данным изобретением животному, которое в момент введения не поражено инфекцией или заражено паразитами. Лечение включает также предотвращение повторения инфекции или заражения паразитами или симптомов, связанных с ними, а также ссылки на "контроль" (например, убийство, ликвидацию, исключение, выведение из строя, сдерживание, устранение,, облегчение, уменьшение, и искоренение).

"Ветеринарный (или его фармацевтически) приемлемый", как используется в данной заявке, если не указано иное, означает, что вещество (например, наполнитель, носителем, разбавитель или их смесь) должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, содержащимися в композиции, составе, и/или животным, подлежащим лечению ними, и не оказывать вредного воздействия на животных. Для наполнителя, носителя, разбавителя, термины относятся к любому приемлемому ингредиенту, кроме соединения в соответствии с данным изобретением, или любому дополнительному ветеринарному агенту, используемому для составления готовой лекарственной формы, например, таблеток, местного раствора или суспензии, или раствора для впрыскивания.

Характеристика кристаллических Форм

Кристаллическое состояние соединения может быть охарактеризовано несколькими кристаллографическими параметрами, такими как структура единичного кристалла, а также спектры порошковой рентгеновской дифракции (PXRD), инфракрасной абсорбционной спектроскопии с пеобразованием Фурье (FT-IR) и дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК).

Рентгеноструктурный анализ

Кристаллическая структура монокристалла Формы А была определена путем рентгеноструктурного анализа. Данные получали с помощью дифрактометра Bruker APEX при комнатной температуре. Структура расшифрована прямым методом с использованием SHELX - набора программного обеспечения, в пространственной группе Р2(1). Структура была впоследствии уточнена методом наименьших квадратов полной матрицы. Все неводородные атомы были обнаружены и охарактеризованы с помощью анизотропных параметров смещения. Атомы водорода, локализованные на азоте и кислороде, были найдены из разностной карты Фурье и оптимизированы как свободные. Остальные атомы водорода были помещены в рассчитанные положения, и им было разрешено находиться на своих атомах - носителях. Окончательное уточнение включало изотропные параметры смещения для всех атомов водорода. Анализ абсолютной конфигурации была выполнен путем экспертизы параметра Флэка. В этом случае параметр =0,002 с предполагаемым стандартным отклонением 0,0018; в пределах диапазона для определения абсолютной конфигурации. Окончательный R-индекс составлял 3,7%. Конечное отличие по методу Фурье не выявило отсутствия или смещенной плотности электронов.

Инструмент и метод ИК-спектроскопии с преобразованием Фурье

(FT-IR) FT-IR спектр кристаллической Формы А и кристального рацемата, как описано в данной заявке, были получены с помощью Bruker FT-IR Vertex 70-спектрометра, оснащенного Pike Technologies MIRacle ATR аксессуаром однократного отражения ATR (Германиевая пластина однократного отражения). Спектры были собраны при 4 см^-1 разрешении с совместным добавлением 16 сканирований. Поскольку спектры ИК-Фурье были записаны с помощью однократного отражения ATR, подготовка образцов не требуется. С использованием ATR FT-IR получены относительные интенсивности инфракрасных полос, отличающиеся от тех, которые наблюдали в FT-IR спектре пропускания, используя КВr диск или образцы препаратов, являющиеся суспензией в вазелиновом масле. Из-за природы ATR FT-IR полосы с низким волновым числом являются более интенсивными, чем при более высоких волновых числах.

Из спектров были вычтены фона и атмосферная компенсация, и вектор нормализации был сформирован.

Инструмент и метод порошковой рентгеновской дифракции (PXRD)

Кристаллические структуры кристаллической Формы А и кристаллического рацемата, как описано в данной заявке, были проанализированы с использованием порошковой рентгеновской дифракции (PXRD). Порошковые дифрактограммы были получены с использованием Bruker AXS [Coventry, UK] Endeavor D4, оснащенным детектором LYNXEYE с управлением, с фиксированной щелью и источником Си, работающим при 40 кВ и 40 мА, К2А волны 1,5406 ангстрем. Дифрактограмма был получена в области от 3 до 50 градусов два-тета. Размер стадии был 0,020 градусов два-тета, и время экспозиции на стадию составляло 0,5 секунд. Во время накопления держатель образца вращали со скоростью 20 оборотов в минуту. Образцы для анализа готовили путем распределения свободных твердых частиц по нулевому фону кремнеземных пластин таким образом, чтобы обеспечить ровную поверхность для анализа. Данные были проанализированы в EVA пакете программного обеспечения, полученном от Bruker AXS.

Как будет понятно специалисту в области кристаллографии, относительные интенсивности различных пиков, приведенных в Таблицах и Фигурах в данной заявке, могут варьироваться в зависимости от целого ряда факторов, таких как эффекты ориентации кристаллов в рентгеновском луче или чистота материала, который анализируют, и степени кристалличности образца. PXRD положения пиков могут также смещаться для вариации по высоте образца, но положения пиков будут оставаться фактически, как определено в Таблицах 1 и 4, для кристаллической Формы А и кристаллического рацемата, соответственно.

Специалисту в области кристаллографии также будет понятно, что измерения с использованием другой длины волны приведут к различным сдвигам в соответствии с уравнением Брэгга nA,=2ci sin θ. Такие дополнительные PXRD образцы, созданные с использованием альтернативных длин волн, считаются альтернативными представлениями PXRD образцов кристаллических материалов в соответствии с данным изобретением и, как таковые, входят в объем данного изобретения.

Инструмент и способ дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК)

Анализ проводили на Mettler Toledo ДСК 823е в 40 мкл алюминиевой чаше с соответствующим опорным поддоном. Образец нагревали на 10°С в минуту от 25°С до достаточно высокой температуре, чтобы достичь плавления образца. Оценка данных была завершена в пакете StarE программного обеспечения версии 11.

Общая схема получения

В схеме получений и примерах, приведенных ниже, следующие катализаторы/реагенты и смешанные аббревиатуры включают: подвижная фаза (MP); Ν,Ν-диметил формамид (DMF); этанол (ЕtOН); метил-трет-бутиловый эфир (МТВЕ); метанол (МеОН), тетрагидрофуран (THF); этилацетат (ЕtOАс); трифторуксусную кислоту (TFA); 1,3-бис(дифенилфосфино)пропан (DPPP); амидкарбонилдиимидазол (COi); изопропилмагний хлорид лития (iPrMgCl-LiCl); трет-бутилоксикарбонил (ВОС); палладий (II) ацетат (Pd(OAc)2); литийборгидрид (LiBH4); трет-бутил метиловый эфир (ТВМЕ); и 1,2 дихлорэтан (DCE).

Соединение Формулы (1), 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метил сульфонил) этанон, может быть получено в соответствии с получением и процедурами, описанными в WO 2012/120399. Альтернативная, но похожая схема получения показана ниже.

Стадия 1: Получение халькона

Стадия 2: Синтез ассиметричного изоксазолина

Стадия 3: Снятие защитной группы ВОС

Стадия 4: Амидная конденсация

Синтез 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона.

Халькон является ахиральным. Хиральный катализатор фазового перехода использован для закрытия 5-членного цикла таким образом, что получают приблизительно 90% S-энантиомера и приблизительно 10% R-энантиомера. Снятие защитной bос группы (трет-бутоксикарбонила) происходит в присутствии бензолсульфоновой кислоты и метанола, где сохраняется хиральная чистота. Нейтрализованный амин затем конденсируют с 2-(метилсульфон)уксусной кислотой с обеспечением желаемого соединения содержащего приблизительно 90% S-энантиомера и приблизительно 10% R-энантиомера. Рацемат кристаллизуется, например, эквимолярные количества S- и R-энантиомера. Которые отфильтровывают при помощи фильтра (целит) таким образом оставляя энантиомерно чистый S-энантиомер как аморфное твердое вещество.

Фармацевтические/ветеринарные композиции

Соединения в соответствии с данным изобретением могут быть введены отдельно или в композиции соответствующей для конкретного предусмотренного использования, конкретным видам животного-хозяина, подлежащего лечению и паразита. Как правило, их будет вводить в виде композиции в сочетании с одним или несколькими фармацевтически или ветеринарноприемлемыми наполнителями, разбавителями, носителями или их смесью. Термин "наполнитель", "разбавитель" или "носитель" используют в данной заявке для описания любого ингредиента, отличного от соединения в соответствии с данным изобретением, или каких-либо дополнительных ветеринарных (например, противопаразитарных) агентов. Выбор наполнителя, разбавителя, или носителя в значительной степени зависит от таких факторов, как конкретный способ введения, влияние наполнителя, носителя, разбавителя или их смеси, на растворимость и стабильность, и природу лекарственной формы. В дополнение к наполнителям, вводимое количество соединения в соответствии с данным изобретением, и режим дозировки для лечения состояния или расстройства соединением, зависит от множества факторов, в том числе от возраста, веса, пола и медицинского состояния животного, тяжести заболевания, способа и частоты введения, и, таким образом, может изменяться в широких пределах.

В одном аспекте фармацевтическая композиция содержит форму и фармацевтически или ветеринарно приемлемый наполнитель, носитель, разбавитель или их смесь. В другом аспекте фармацевтическая композиция содержит аморфную форму (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, который получали из кристаллической Формы А, и фармацевтически приемлемого наполнителя, носителя, разбавителя или их смеси. Диапазон концентрации будут варьироваться в зависимости от состава (например, перорального, местного или для инъекций).

Пероральные диапазоны доз активного (т.е. Формулы (1) соединения) составляют приблизительно от 0,1 до 50 мг/кг, предпочтительно от приблизительно 0,5 до 25 мг/кг, и даже более преимущественно от приблизительно 0,5 до 10 мг/кг, и наиболее предпочтительно от приблизительно от 1 до 5 мг/кг. Для дозирования, предполагается 1 мг/кг, 2 мг/кг, 3 мг/кг, 4 мг/кг, и 5 мг/кг режим, в том числе дробные количества. Для местного раствора диапазон активного соединения составляет приблизительно от 0,1 до 1000 мг/мл, и предпочтительно, от приблизительно 0,5 до 500 мг/мл, и более предпочтительно от приблизительно 1 до 250 мг/мл, и даже более преимущественно от приблизительно 2 до 200 мг/мл. Предполагается, что местная доза будет находиться в диапазоне от приблизительно 1 до 50 мг/кг с предпочтительной дозой приблизительно от 2 до 40 мг/кг, и более предпочтительно от приблизительно 5 до 30 мг/кг, при еще более предпочтительной дозе приблизительно от 10 до 25 мг/кг. В зависимости от конечных объемов местного раствора (ов), концентрация активного вещества может отличаться от описанной выше. Как правило, дозы для впрыскивания имеют тенденцию, но не всегда, быть ниже по концентрации.

Композиция может быть получена с использованием обычного растворения и смешивания. Такие композиции и способы их получения можно найти, например, в '"Remington's Veterinary Sciences', 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995; и "Veterinary Dosage Forms: Tablets, Vol.1", by H. Lieberman andachman, Marcel Dekker, N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918- X). Типичная композиция может быть получена путем смешивания формы А 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона с фармацевтически или ветеринарно приемлемым наполнителем, носителем, разбавителем или их смесью. Типичные композиции также могут быть получены путем смешивания аморфного S-энантиомера соединения, полученного из кристаллической Формы А с фармацевтически или ветеринарноприемлемым наполнителем, носителем, разбавителем или их смесью. Подходящие наполнители, носители, и разбавители хорошо известны специалистам в данной области и включают материалы, такие как углеводы, воски, растворимые в воде и/или набухающие в воде полимеры, гидрофильные или гидрофобные материалы, желатин, масла, растворители, воду, и т.п.. Конкретные наполнители, носители, разбавители, их смеси, будет зависеть от средств и цели, для которой соединение в соответствии с данным изобретением применяют. Растворители обычно выбирают на основе растворителей, признанных специалистами в данной области безопасными при введении животному. Композиции могут также включать один или несколько буферов, стабилизирующих агентов, поверхностно-активных веществ, смачивающих агентов, смазывающих агентов, эмульгаторов, суспендирующих агентов, консервантов, антиоксидантов, глушителей, скользящих веществ, технологически добавок, красителей, подсластителей, отдушек, ароматизаторов и других известных добавок для обеспечения наглядного представления препарата (то есть, соединения в соответствии с данным изобретением или его ветеринарной композиции) или помощи в производстве ветеринарной продукции (т.е. лекарственного средства). Соединение в соответствии с данным изобретением, как правило, составляют в ветеринарные лекарственные формы, чтобы обеспечить предоставить легко контролируемую форму, для введения.

Кроме того, кристаллическая Форма 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона или аморфный S-энантиомер соединения, полученного из кристаллической Формы А, может быть использован в распылительной сушке с образованием дисперсии твердых аморфных дисперсий. Соединения в соответствии с данным изобретением могут существовать в твердой аморфной дисперсии в чистой фазе, в виде твердого раствора препарата, равномерно распределенного в полимере или любой комбинации этих состояний или тех состояний, которые являются промежуточными между ними. Дисперсия предпочтительно фактически однородная, так что аморфный препарат диспергируют однородно, насколько это возможно в полимере. Как используется в данной заявке, "фактически однородный" означает, что часть препарата, который присутствует в относительно чистых аморфных участках в твердой дисперсии, составляет относительно мало, на порядок меньше, чем 20%, и предпочтительно менее чем 10% от общего объема количество лекарственного средства. Под "аморфным" подразумевается лишь то, что лекарственное средство в дисперсии находится в некристаллическом состоянии. Эта аморфная дисперсия твердого вещества затем может быть использована для составления соединения в соответствии с данным изобретением с другими фармацевтически или ветеринарноприемлемыми наполнителями, носителями, разбавителями или их смесью.

Методы, с помощью которых соединения в соответствии с данным изобретением могут быть введены, включают пероральное, местное, и при помощи инъекций (например, парентеральное и подкожное) введение.

Соединения в соответствии с данным изобретением могут быть введены перорально как капсулы, болюс, таблетка, порошки, лепешки, жевательные резинки, поли- и наночастицы, гели, твердый раствор, пленки, спреи или жидкая форма. Это является предпочтительным способом введения и, таким образом, желательно разработать соединение для перорального введения. Такие композиции могут быть использованы в качестве наполнителей в мягких или твердых капсулах, мягких или твердых жевательных резинках, которые, как правило, содержат носитель, например, воду, этанол, полиэтиленгликоль, N-метил пиррол идон, пропиленгликоль, метилцеллюлозу или подходящие масла, и один или более эмульгирующих агентов, ароматизаторов, и/или суспендирующих агентов. Жидкие формы включают суспензии, растворы, сиропы, эликсиры и кисели. Жидкие композиции также могут быть получены путем растворения твердого вещества, например, из саше. Пероральные жидкие композиции обычно получают путем растворения или суспендирования соединения в соответствии с данным изобретением в подходящей среде (например, триэтиленгликоль, бензиловый спирт, и т.п.). Соединение в соответствии с данным изобретением также может быть составлено с пищевым веществом, например, с диетическими добавками (пищевые гранулы или порошок для птиц).

Соединения в соответствии с данным изобретением могут быть введены местно в кожу или слизистую оболочку, то есть дермально или трансдермально. Это предпочтительный способ введения и, таким образом, желательно разработать соединение в соответствии с данным изобретением, чтобы он подходило к таким композициям, например, жидкие формы.

Типичные композиции для этой цели включают выливные, точечные, многоточечные, наносимые на полосы, на расчески, на валики, дезинфицирующие растворы, спреи, муссы, шампуни, порошковые композиции, гели, гидрогели, лосьоны, растворы, кремы, мази, присыпки, перевязочные материалы, пены, пленки, кожные пластыри, облатки, имплантаты, губки, волокна, бандажи и микроэмульсии. Также можно использовать липосомы. Типичные носители включают спирт, воду, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, глицерин, N-метил формамид, гликоля монометил эфиры, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, и т.п. Усилители проникновения могут быть также включены - см., например, J Pharm. Sci, 88 (10). 955-958 by Finnin and Morgan (October 1999).

Композиции для разбрызгивания или точесной обработки могут быть получены путем растворения активных ингредиентов в жидком носителе, например приемлемом бутил диголе, жидком парафине или быстроиспаряемом эфире, необязательно с добавлением летучего компонента, такого как пропан-2-ол или гликолевый эфир. Альтернативно, выливные композиции, композиции для точечного нанесения или композиции для распыления могут быть получены путем инкапсуляции, чтобы сохранить остаток активного агента на поверхности животного, этот эффект может гарантировать, что соединение в соответствии с данным изобретением имеет повышенную устойчивость к действию и является более прочным, например, может быть более влагопрочным.

Соединения в соответствии с данным изобретением также могут быть введены местно с помощью опорной матрицы, например, синтетических или природных смол, пластмассы, ткани, кожи, или других подобных полимерных систем в форме воротника или бирки с проушиной. Указанный воротник или бирка с проушиной могут быть с покрытием, пропитанными, слоистыми, с помощью любых средств, с тем, чтобы обеспечить ветеринарноприемлемое количество соединения в соответствии с данным изобретением отдельно, или с ветеринарноприемлемым наполнителем, разбавителем или носителем, и необязательно дополнительным ветеринарным агентом, или ветеринарноприемлемой солью. Такие композиции получают обычным способом в соответствии со стандартной лекарственной или ветеринарной практикой. Дополнительно, эти композиции будут варьироваться в отношении массы активного соединения, содержащегося в них, в зависимости от вида животного-хозяина, подлежащего лечению, серьезности и типа инфекции или заражения паразитами, и массы тела животного. Объем нанесенной композиции может составлять от приблизительно 0,2 мл/кг до 5 мл/кг, предпочтительно от приблизительно 1 мл/кг до 3 мл/кг.

Агенты могут быть добавлены к композициям в соответствии с данным изобретением, чтобы улучшить устойчивость таких композиций на поверхности животного, на которые их наносят, например, для улучшения их стойкости на коже животного. В частности, предпочтительно включать такие агенты, в композицию, которая должна быть нанесена разбрызгиванием или композиции точечной обработки. Примеры таких агентов включают акриловые сополимеры и, в частности фторированные акриловые сополимеры. Особо приемлемым реагентом является реагент торговой марки "Foraperle" (Redline Products Inc, Texas, USA). Некоторые актуальные композиции могут содержать невкусовые добавки для минимизации перорального воздействия.

Композиции для впрыскивания (например, подкожные и парентеральные) могут быть получены в форме стерильного раствора, который может содержать другие вещества, например достаточное количество солей или глюкозы, чтобы сделать раствор изотоническим с кровью.

Приемлемые жидкие носители включают растительные масла, такие как кунжутное масло, глицериды, такие как триацетин, сложные эфиры, такие как бензилбензоат, изопропилмиристат и производные жирных кислот пропиленгликоля, а также органические растворители, такие как пирролидин-2-он и глицеринформал. Композиции получают путем растворения или суспендирования соединений в соответствии с данным изобретением отдельно или с дополнительным ветеринарным агентом в жидком носителе таким образом, чтобы конечная композиция содержала от приблизительно 0,01 до 30% по массе активных ингредиентов.

Приемлемые устройства для введения путем инъекций включают игольчатые (в том числе микроигольчатые) форсунки, безигольные форсунки и инфузионные методы. Композиции для инъекций обычно представляют собой водные растворы, которые могут содержать наполнители, такие как соли, углеводы и буферные агенты (предпочтительно до рН от 3 до 9), но для некоторых применений они могут быть более подходящим образом составлены виде стерильного неводного раствора или в виде сухого порошка, которые будут использоваться в сочетании с носителем, таким как подходящая стерильная, апирогенная вода. Получение композиций для инъекций в стерильных условиях, например, путем лиофилизации, может быть легко осуществлено с использованием стандартных ветеринарных методик, хорошо известных специалистам в данной области. Растворимость соединения в соответствии с данным изобретением используется в подготовке раствора для инъекций может быть увеличена за счет использования соответствующих методов составления, таких как включение агентов, увеличивающих растворимость.

Введение соединения в соответствии с данным изобретением предполагается как осуществляемое один раз в месяц. Тем не менее, композиция большой продолжительности может позволить дозирование один раз в два, три, четыре, пять или шесть месяцев. Также предполагается доза, которую вводят один раз в год.

Способ применения

Настоящее изобретение дополнительно включает способы лечения паразитарной инфекции или паразитарной инвазии у животного, имеющего или подверженного такой инфекции, или заражения паразитами, путем введения в организм животного, нуждающегося в этом, терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с данным изобретением.

Соединение, 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон, является полезным в качестве противопаразитарного агента, таким образом, еще один аспект в соответствии с данным изобретением представляет собой использование фармацевтической или ветеринарной композиции, содержащей терапевтически эффективное количество Формы А или аморфного S-энантиомера, который получают из кристаллической Формы А, и необязательно, фармацевтически или ветеринарноприемлемый наполнитель, разбавитель, носитель или их смесь для лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного. Аналогично, Форма А 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, или аморфного S-энантиомера соединения, который получают из кристаллической Формы А, может быть использована в производстве противопаразитарного лекарственного средства для терапевтического применения, описанного в данной заявке.

Соединение в соответствии с данным изобретением, и композиции, содержащие терапевтически эффективное количество указанного соединения и ветеринарноприемлемого наполнителя, разбавителя, носителя или их смеси, могут использоваться в качестве средств против эктопаразитицидов для контроля и лечения инфекций или заражения паразитами, проявляемыми указанными эктопаразитами у животного. Соединение в соответствии с данным изобретением имеет применение в качестве средств против эктопаразитов, в частности, в качестве акарицидов и инсектицидов. Соединение в соответствии с данным изобретением может, в частности, использоваться в областях ветеринарной медицины, животноводства и общественного здравоохранения: против клещей и насекомых, которые паразитируют на позвоночных животных, в частности теплокровных позвоночных, в том числе домашних животных, сельскохозяйственных животных, и птицах. Некоторые не ограничивающие примеры включают эктопаразитов: клещей (например, Ixodes spp.(например, l.scapularis, I. ricinus, I. hexagonus), Rhipicephalus spp.(например, R. sanguineus), Boophilus spp., Amblyomma spp.(например, A. maculatum, A. triste, A. parvum, A. ovale, A. oblongoguttatum, A. aureolatum, A. cajennense, A.americanum), Hyalomma spp., Haemaphysalis spp., Dermacentor spp. (например, D. variabilis, D. andersoni, D. marginatus), Ornithodorus spp., и т.п.); зуденей (например, Dermanyssus spp., Cheyletiella spp., Sarcoptes spp. (например, S. scabiei), Psoroptes spp.(например, P. bovis), Otodectes spp., Chorioptes spp., Demodex spp., (например, D. folliculorum, D. canis, и D. brevis) и т.п.); пухоедов и сосущих вшей (например, Damalinia spp., Linognathus spp., Haematopinus spp., Solenoptes spp., Trichodectes spp., Felicola spp., и т.п.); блох (например, Ctenocephalides spp., и т.п.); гнусов, дергунов, и москитов (например, Tabanus spp., Haematobia spp., Musca spp., Stomoxys spp., Cochliomyia spp., Simuliidae spp., Ceratopogonidae spp., Psychodidae spp., Aedes spp., Culex spp., Anopheles spp., и т.п.); клопов постельных (например, насекомых рода Cimex и семейства Cimicidae); и гусениц (например, Dermatobia spp., Hypoderma bovis, H. lineatum).

Соединения в соответствии с данным изобретением могут быть также использованы для лечения эндопаразитов, например, цестод (солитеры), нематод (круглые черви), и трематод (сосущие). Неисключающие примеры нематод включают круглых червей, анкилостом, власоглавов, и сердечных гельминтов. Неисключающие примеры желудочно-кишечных круглых червей включают: Osmpemagia osmpemagi (включая ингибированные личинки), 0. lyrata, Haemonchus placet, H. similis, H. contortus, Toxascaris leonine, Tokcocara canis, T. cati, Trichostrongylus axei, T.colubriformis, T. longispicularis, Cooperia oncophora, C. pectinata, C. punctata, С.surnabada (син. mcmasteri), С.spatula, Ascaris suum, Hyostrongylus rubidus, 8unostomum phlebotomum, Capillaria bovis, B. trigonocephalum, Strongyloides papillosus, S. ransomi, Oesophagostomum radiatum, O. dentatus, O. columbianum, O. quadrispinulatum, Trichuris spp., и т.п.. Неисключающие примеры анкилостом включают (например, Ancylostoma caninum, A.tubaeforme, A.braziliense, Uncinaria stenocephala, и т.п.); легочных нематод (например, Dictyocaulus viviparus и Metastrongylus spp); нематод (например, Thelazia spp.); паразитных свищей (например, Hypoderma bovis, H. lineatum, Dermatobia hominis); почечных гельминтов (например, Stephanurus dentatus); личинки мясных мух (например, Cochliomyia hominivorax (larvae); ворсинчатых нематод суперсемейства Filarioidea и семейства Onchocercidae. Неограничивающие примеры ворсинчатых нематод семейства Onchocercidae включают род Brugia spp.(т.е., B.malayi, В. pahangi, В. timori, и т.п.), Wuchereria spp. (i.e., W bancrofti, и т.п.), Dirofilaria spp.(i.e., D. immitis, D. ursi, D. tenuis, D.spectans, D. lutrae, и т.п.), Dipetalonema spp. (i.e., D. reconditum, D. repens, и т.п.), Onchocerca spp.(i.e., O. gibsoni, О. gutturosa, О. volvulus, и т.п.), Elaeophora spp. (i.e., E.bohml, E. elaphi, E. poeli, E. sagitta, E. schneideri, и т.п.), Mansonella spp.(i.e., M. ozzardi, M. perstans, и т.п.), и Loa spp.(i.e., L. loa). Неисключающие примеры цестод включают: Taenia saginata, T.solium, T. taeniaformis, Hymenolepsis nana, H.diminuta, Dipylidium caninum; Diphyllobothrium latum; Echinococcus spp., Mesocestoides spp., и Spirometra spp. Неисключающие примеры трематод включают: Paragonimus kellicotti, Alaria spp., Nanophyetus salmincola, Heterobiharzia Americana, Platynosomum fastosum, Schistosoma spp., и Fasciala spp.

Композиции в соответствии с данным изобретением могут быть введены способом, подходящим для предусмотренного конкретного применения, конкретного животного-хозяина, и массы животного-хозяина, подлежащего лечению, паразита или паразитов, степени инвазии и т.д., в соответствии со стандартом ветеринарной практики. Ветеринарный врач или специалист в данной области смогут определить дозировку, приемлемую для конкретного животного, которая может изменяться в зависимости от вида, возраста, массы, и ответа. Средние дозы являются примером среднего случая. Соответственно, более высокие или более низкие диапазоны дозировки могут быть оправданы, в зависимости от указанных выше факторов, и находятся в пределах объема настоящего изобретения.

Соединение в соответствии с данным изобретением, или комбинация подходящего соединения в соответствии с данным изобретением и по меньшей мере одного дополнительного ветеринарного агента, может быть непосредственно введено животному. Локальная среда, где обитает животное (например, постельные принадлежности, замкнутые пространства, и т.п.), также может быть обработана непосредственно или опосредованно (например, введение животному). Непосредственное введение животному включает контакт с кожей, мехом, или перьями субъектного животного соединения в соответствии с данным изобретением, или путем подачи (например, капсулы, таблетки, вкусовой матрицы, пищевые примеси, и т.п.) или инъекции. Соединение в соответствии с данным изобретением и его композиция, в том числе композиции, содержащее по меньшей мере, один другой биологический агент, имеют значение для лечения и контроля на различных этапах жизненного цикла насекомых и паразитов, включая яйца, нимфы, личинки, ювенильные и взрослые этапы.

Композиция в соответствии с данным изобретением может быть введена отдельно, как описано выше, или в комбинации с по меньшей мере одним другим дополнительным противопаразитарным средством для формирования многокомпонентного противопаразитарного агента, что формирует еще более широкий спектр препаратов фармацевтической и/или ветеринарной полезности. Таким образом, настоящее изобретение также предусматривает комбинированную ветеринарную композицию, содержащую эффективное количество соединения в соответствии с данным изобретением в комбинации с по меньшей мере одним другим дополнительным противопаразитарным средством и может дополнительно содержать по меньшей мере один ветеринарноприемлемый наполнитель, разбавитель, носитель или их смесь.

Ниже приведен список дополнительных ветеринарных агентов, вместе с которым соединение в соответствии с данным изобретением может быть использовано, предназначенный для иллюстрации возможных комбинаций, но не налагающий никаких ограничений. Неограничивающие примеры дополнительных ветеринарных средств включают: амитраз, арилпиразолы, амино ацетонитрил, глистогонные средства (например, альбендазол, камбендазол, дихлофос, фенбендазол, флубендазол, левамизол, мебендазол, монепантел, морантел, октадепсипептиды, окантел, оксфендазол, оксибендазол, парагерквамид, парбендазол, пиперазины, празиквантел, пирантел, тиабендазол, тетрамизол, триклабендазол, и т.п.), авермектины и их производные (например, абамектин, дорамектин, эмамектин, эприномектин, ивермектин, моксидектин, селамектин, мильбемицин, милбемициноксим, и т.п.), ДЭТА, демидитраз, диэтилкарбамазин, фипронил, регуляторы роста насекомых (например, луфенурон, новалурон, гидропрен, киноперн, метопрен, и т.п.), метафлумизон, никлозамид, нитенпирам, перметрин, пиретрины, пирипроксифен, спиносад, и т.п. В некоторых случаях комбинации соединения в соответствии с данным изобретением с по меньшей мере одним дополнительным ветеринарным агентом могут привести к большему, чем аддитивный эффект. Не ограничивающие примеры комбинаций включают, но не ограничиваются приведенным: соединение в соответствии с данным изобретением с пирантелом, соединение в соответствии с данным изобретением с макроциклическим лактоном, сочетание в соответствии с данным изобретением с макроциклическим лактоном и левамизолом, соединение в соответствии с данным изобретением с макроциклическим лактоном и пирантелом.

Ветеринарная композиция, применимая для животного, может быть упакована в различные формы в зависимости от метода, используемого для введения соединения в соответствии с данным изобретением или его комбинацией. Как правило, изделие распределено в контейнер, имеющий размещенную в нем ветеринарную композицию в соответствующей форме. Приемлемые контейнеры хорошо известны специалистам в данной области и включают такие материалы, как бутылки (пластик и стекло), саше, ампулы, пластиковые мешки, металлические цилиндры, и т.п. Контейнер может также включать защищенный от несанкционированного доступа сборку для предотвращения нежелательного доступа к содержимому упаковки. Кроме того, контейнер имеет нанесенную на него метку, которая описывает содержимое контейнера. Метка может также включать соответствующие предупреждения.

ПРИМЕРЫ

Приготовление 1: трет-бутил 5'-бром-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат

4-бром-2-(хлорометил)-1-йодобензол (500 г, 1,509 моль) растворяли в тетрагидрофуране (3750 мл) и охлаждали до -20°С. Добавляли при менее чем -15°С i-PrMgCl-LiCl (1,3М раствор в THF) (1275 мл, 1,66 моль). Реакционную смесь охлаждали до -20°С. Добавляли 3-оксо-азетидин-1-карбоновую кислоту, трет-бутиловый эфир (310 г, 1,81 моль), как раствор в тетрагидрофуране (750 мл). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 90 минут и затем перемешивали всю ночь. Добавляли 1М водный раствор лимонной кислоты (2 л), с последующим добавлением трет-бутилметилового эфира (2 л). Смесь встряхивали. Органическую фазу отделяли, высушивали над безводным сульфатом магния, фильтровали и выпаривали до сухого остатка с получением оранжевого масла. Масло растворяли в этаноле (2,5 л) и раствор разбавляли водой (1 л). Смесь оставляли при комнатной температуре на всю ночь. Полученные в результате кристаллы трет-бутил 5'-бром-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксил ата фильтровали при пониженном давлении и высушивали в вакууме при 50°С, выход 290 г. ¹Н ЯМР (CDCl₃) δ м.ч.: 1,49 (9Н, с), 4,15 (2Н, д), 4,34 (2Н, д), 5,11 (2Н, с), 7,38 (2Н, м), 7,56 (1Н, д).

Приготовление 2: трет-бутил 5'-ацетил-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат.

В сцинциляционную пробирку, содержащую 15 мл, этанола добавляли Pd(OAc)₂ (8,3 мг, 0,037 ммоль) и DPPP (31 мг, 0,073 ммоль). Реакционный сосуд продували газообразным азотом, закрывали крышкой, и нагревали до 60°С в течение 18 часов. К этому добавляли трет-бутил 5'-бром-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат (Приготовление 1, 250 мг, 0,74 ммоль) и триэтиламин (205 мкл, 1,5 ммоль) и смесь нагревали до 90°С в течение 5 минут. Затем добавляли бутилвиниловый эфир (190 мкл, 1,5 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 90°С в течение 4 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали и при комнатной температуре добавляли 1,0N HCl (2 мл) и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь нейтрализовали насыщенным NaHCO₃ и экстрагировали ЕtOАс. Органическую фазу высушивали (Na₂SO₄) и концентрировали в вакууме. Неочищенный материал хроматографировали (12 г Redi-Sep колонка), элюируя из 100% гексана в 35:65 ЕtOАс:гексан с получением промежуточного вещества (172 мг, 77%) в виде твердого вещества. ¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ м.ч.: 8,01 (1Н), 7,83 (1Н), 7,58 (1Н), 5,17 (2Н) 4,35 (2Н), 4,16 (2Н), 2,64 (3Н), 1,51 (9Н); m/z (Cl) 204 ([М+Н-100]⁺.

Приготовление 3: 1-(4-хлор-3,5-дифторфенил)-2,2,2-трифтороэтанон

4-бром-2-хлор-1,3-дифторбензол (2000 мг, 8,2 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в THF в N₂ и добавляли в течение приблизительно 1 минуты i-PrMgCl-LiCl (1,3М раствор в THF) - отмечали очень небольшой экзотермический эффект при -30°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут с последующим добавлением метил трифторацетата (1580 мг, 12,3 ммоль, 1,24 мл) в течение приблизительно 1 минуты - небольшой экзотермический эффект до -40°С. Растворители упаривали при пониженном давлении с получением желаемого продукта.1Н ЯМР (CDCl₃) δ м.ч.: 8,05 (с, 2Н).

Приготовление 4: трет-бутил 5'-(3-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-4,4,4-трифторбут-2-эноил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат

1-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-2,2,2-трифторэтанон (Приготовление 3, 59,4 г, 227 ммоль) и трет-бутил 5'-ацетил-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат (Приготовление 2, 60,0 г, 198 ммоль) смешивали в 1:1 смеси толуола и трифторметилбензола (250 мл) в 1 л трехгорлой колбе. Одно горло было оснащено модифицированной короткой насадкой Дина-Старка с холодильником сверху, а другое - входом для тока азота очень низкой интенсивности (ввод азота отключали в начале реакции). Реакционную смесь нагревали до 110°С. Исходный материал быстро растворялся и затем добавляли Cs₂CO₃ (5 г, 16 ммоль). Наблюдали интенсивное вспенивание и подключали ток азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, опустошая ловушку Дина-Старка по мере необходимости. ВЭЖХ-МС показывала приблизительно 75% прогресс. Еще 1 грамм Cs₂CO₃ добавляли к неочищенной смеси и реакционную смесь перемешивали еще 1 час.

ВЭЖХ-МС показывает >95% превращение. Неочищенную реакционную смесь затем выливали в 500 мл ТВМЕ и фильтровали через 2" твердый слой кремнезема. Растворители удаляли в вакууме, и полученную в результате коричневую смолу повторно растворяли в 1:1 смеси ТВМЕ:гексан, фильтровали через 5 дюймовый слой кременезема и элюировали 2 л того же самого раствора. Органические растворы концентрировали до сухого остатка. Твердые вещества растворяли в 95:5 смеси горячего гептана:ТВМЕ (с.а. 250 мл). Затем раствор медленно охлаждали до 0°С при перемешивании и вносили затравку из предыдущих партий. Через 30 минут образовалось бежевое твердое вещество. Суспензию оставляли перемешиваться при 0°С в течение 2 часов. Бледно-бежевое твердое вещество фильтровали (90 г, 83% выход), показывали >99% чистоту при помощи ВЭЖХ, и 85:15 соотношении изомеров с двойной связью. Оставшиеся промывные растворы концентрировали в масло (с.а. 30 грамм) и очищали на силикагельном картриджном фильтре. (400 г, 10- 100% ТВМЕ в гексане над 12CV, 100 мл/минута, -254 нм). Еще 13 грамм материала выделяли. Аналитический метод: Xbridge phenyl колонка (250 мм × 3,0 мм); 70%-100% в течение 25 минут, метанол 0,1% TFA в воде с 0,1% TFA, -254 нм: 16,019 минут (84,5% основной изомер) и 16,439 минут (14.9%, второстепенный изомер). ЖХ-МС метод: Xbridge С18 колонка; 90% - 100% ацетонитрил/метанол 1:1 вода; [546] МС+ ~4,970 минут, 254 нм (один пик).

Приготовление 5: Хиральный - трет-бутил 5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат

Раствор (Z)-трет-бутил 5'-(3-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-4,4,4-трифторбут-2-еноил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилата (Приготовление 4, 1.0 г, 1,83 ммоль) в дихлорэтане (8 мл) был охлажден до -2°С. Катализатор, (2S)-1-(акридин-9-илметил)-2-((Р)-гидрокси(6-метоксихинолин-4-ил)метил)-5-винилхинкулидин-1-ый бромид (180 мг, 0,37 ммоль) добавляли и перемешали до растворения. В отдельной колбе 10N водный гидроксид натрия (0,42 мл) охлаждали до 5°С и добавляли 50 мас. % водный гидроксиламин (254 мг, 3,84 ммоль) и перемешивали в течение 10 минут. Этот основный раствор добавляли однократно в раствор реакционной смеси. Полученный в результате раствор перемешивали при 0°С в течение 1 часа. Реакционую смесь промывали водой (2×10 мл). Раствор концентрировали до объема 3мл и затем добавляли 15 мл метил трет-бутилового эфира и гетерогенную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 минут. Осажденный катализатор удаляли фильтрованием. Органический раствор в этот момент содержал 90:10 смесь изоксазолиновых энантиомеров. Органические растворы концентрировали до объема 3 мл и продукт оставляли медленно кристаллизоваться при температуре окружающей среды и затем охлаждали до 0°С. Продукт выделяли фильтрованием с получением 910 мг (89%) белых кристаллов. Кристаллизация в общем приводила к увеличению энантиомерной чистоты так что процентное содержание активного изомера составляло >95%. Хиральная ЖХ: Chiralpak AD 250×3,0 мм колонка, 70:30 гексакэтанол (0,2% диэтиламина), 1,0 мл/минута, 260 нм детекция. Времена удерживания: 5,4 минут и 12,4 минут. ¹Н ЯМР, 600 МГц (CDCl₃) δ м.ч.: 7,70 (д, 1Н), 7,60 (м, 4Н), 5,18 (с, 2Н), 4,36 (д, 2Н), 4,15 (м, 3Н), 3,72 (д, 1Н), 1,55 (с, 9Н). m/z 462 ([М+Н]-Вос). Звездочка (*) обозначает хиральный центр.

Приготовление 6: Хиральный - 5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран] гидрохлорид

Хиральный - трет-бутил 5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат

Приготовление 5 (1,1 г, 2,0 ммоль) растворяли в метаноле (50 мл). Добавляли метанольный раствор HCl (5 мл 1,25М раствора) и реакционную смесь нагревали до 65°С в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали в вакууме с получением твердого промежуточного вещества (980 мг, 100%). 1Н ЯМР, 300 МГц (d6-DMSO) δ м.ч.: 9,86 (1Н), 9,45 (1Н), 8,14 (1Н), 7,82 (3Н), 7,70 (1Н), 5,15 (2Н), 4,41-4,30 (6Н); m/z (Cl) 461 [М+Н] (свободный амин). Звездочка (*) обозначает хиральный центр.

Приготовление 7: Хиральный-5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран] паратолуолсульфонат

Хиральный - трет-бутил 5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат (Приготовление 29, 162 г, 289 ммоль) растворяли в этаноле (1800 мл) и воде (200 мл), добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (113 г, 577 ммоль) и раствор нагревали до 75°С в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до 20°С и ее фильтровали с выделением продукта. Продукт высушивали с получением 167,4 г (92%) белого порошка. ¹Н ЯМР, 600МГц (d₆-DMSO) δ м.ч.: 8,98 (ш с, 2Н), 7,92 (д, 1Н), 7,80 (м, 3Н), 7,70 (с, 1Н), 7,50 (д, 2Н), 7,15 (д, 2Н), 5,15 (с, 2Н), 4,40 (м, 6Н), 2,25 (с, 3Н); m/z (Cl) 461 [М+Н] (свободный амин). Звездочка (*) означает хиральный центр.

Приготовление 8. Хиральный-5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]бензол сульфонат

Хиральный - трет-бутил 5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-карбоксилат (Приготовление 5, 80 г, 140 ммоль) растворяли в этаноле (280 мл). Добавляли бензолсульфоновую кислоту (28,5 г, 178 ммоль) и раствор нагревали до 62°С в течение 30 минут. Реакционную смесь охлаждали до 5°С и ее фильтровали с выделением продукта. Продукт высушивали с получением 81 г (92%) белого порошка. ¹Н ЯМР, 600МГц (d₆-DMSO) δ м.ч.: 9,10 (ш с, 1Н), 8,90 (ш с, 1Н) 7,95 (д, 1Н), 7,82 (м, 3Н), 7,70 (с, 1Н), 7,62 (д, 2Н), 7,34 (м, 3Н), 5,13 (с, 2Н), 4,35 (м, 6Н); m/z (Cl) 461 [М+Н] (свободный амин). Звездочка (*) обозначает хиральный центр.

Пример 1: 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон

Соль п-толуолсульфоновой кислоты и хирального-5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофурана] (Приготовление 7, 157 г, 248 ммоль) перемешивали как суспензию в метил трет-бутиловом эфире (700 мл) при температуре окружающей среды. К ней добавляли 0.5N водный гидроксид натрия (600 мл, 300 ммоль) и смесь перемешивали в течение 15 минут, после чего два слоя становились прозрачными. Водный слой отделяли и органические вещества промывали насыщенным солевым раствором (200 мл) и высушивали сульфатом натрия (5 грамм). Органические вещества фильтровали для удаления твердых веществ.

В отдельной колбе, 43,2 г (297 ммоль) 2-метансульфонилуксусной кислоты растворяли в DMF (300 мл) при температуре окружающей среды. К раствору порциями в течение 15 минут добавляли карбонилдиимидазол (45,1 г, 271 ммоль) для контроля пенообразования. После добавления, раствор перемешивали в течение 15 минут при температуре окружающей среды. Указанный выше эфирный раствор амина добавляли одной порцией в данную реакционную смесь. Полученный в результате раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 минут. Добавляли воду (800 мл) для гашения реакционной смеси.

После перемешивания в течение минут, водный слой осаждался и его удаляли. Органический слой перемешивали при температуре окружающей среды в течение одного часа. За это время, рацемат осаждался из реакционной смеси. Смесь затем фильтровали вспомогательный фильтр (Celite 545) для удаления рацемического материала. Сульфонамид, оставшийся в растворе, превышал 99% одного изомера (т.е., с). Органический раствор промывали дважды водой (2×1 л) и концентрировали до практически белого твердого вещества, (109,5 гм, 76%). Остаточный цвет может быть удален путем растворения материала в этаноле, перемешивания с 10 мас% древесным углем (Darco G-60), фильтрования и концентрирования до твердого вещества. Звездочка (*) обозначает хиральный центр.

Альтернативно, безилатная соль хирального 5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофурана] сочетали с метансульфонилуксусной кислотой при помощи н-пропилфосфониевого ангидрида через упрощенный одностадийный процесс вместо CDI двухстадийного способа. Триэтиламин (0,825 г, 1,3 экв.) добавляли по каплям в течение 1 минуты при приблизительно 18-22°С к метансульфонилуксусной кислоте (0,615 г, 1,3 экв.) и хиральному-5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофурану] (Приготовление 8, 2,1 г, 3.39 ммоль) в 9,3 мл этилацетата (EtOAc). Дополнительную воронку промывали 0,5 мл ЕtOАс и полученную в результате смесь перемешивали в течение минимум 2 часов и охлаждали до <10°С. К этой смеси, по каплям в течение 15 минут при <10°С добавляли 50% н-пропилфосфониевый ангидрид в ЕtOАс (4,31 3г, 2,0экв). Дополнительную воронку затем промывали 1,5 мл ЕtOАс. Реакционную смесь нагревали до 35°С и перемешивали всю ночь. (ВЭЖХ >97% с <1% исходным материалом). В реакционную смесь добавляли 1,0 г целитного фильтра и фильтровали через 1 г целитный слой в 15 мл воронке из шероховатой стеклянной фритты и промывали 4 мл ЕtOАс (2х). В процессе хиральной ВЭЖХ было 98,8% S-энантиомера и 1,2% R-энантиомера; ВЭЖХ >97%.

Фильтрат промывали 4 мл воды (3х), 4 мл 10% NH₄Cl, 4 мл воды и органический слой концентрировали до аморфной S формы 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона (пена, 70-80% выход). ¹Н ЯМР, 600МГц (d₆-CDCl₃) δ м.ч.: 7,65 (м, 5Н), 5,19 (ш с, 2Н), 4,70 (м, 2Н), 4,48 (д, 1Н), 4,38 (д, 1Н), 4,12 (д, 1Н), 3,90 (д, 2Н), 3,72 (д, 1Н), 3,23 (с, 3Н); m/z (Cl) 581 [М+Н].

Пример 2: Получение кристаллической Формы А 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона - Кристаллизация аморфного S-энантиомера изначально, зародыши кристаллической Формы А были получены растворением 100 мг и 200 мг аморфной S формы 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона в метаноле при комнатной температуре. Небольшую аликвоту данного раствора помещали в незакрытую 4-мл стеклянную бутылочку. 4-мл стеклянную бутылочку помещали внутрь большой 20-мл желтой бутылочки, содержащей несколько мл диизопропилового эфира и затем 20 мл бутылочку закрывали. Пары растворителя оставляли испаряться/диффундировать в течение периода 5 дней, за это время образовывалось твердое вещество. Исследование твердых веществ методом микроскопии в поляризованном свете выявило высоко двулучепреломляющие кристаллические частицы. Анализ при помощи высокотемпературной микроскопии показал точку плавления от 130 до 170°С. Дополнительное исследование подтвердило Форму А (например, зародыши кристалла).

Кристаллическая Форма А может быть получена путем загрузки 15,4 грамм аморфного S-энантиомера, описанного выше, растворенного в 92 мл этанола и 7,7 мл этилацетата, в предварительно нагретый 1 л реактор с кожухом, оснащенный механической мешалкой, температурным зондом/датчиком, программируемым кристаллизатором, азотной подушкой, и охлаждаемым водой верхним холодильником. Затем, 54 мл н-гептана добавляли. Полученную в результате систему нагревали до 60°С и получали раствор. Раствор охлаждали до 45°С в течение 15 минут, и получали мутный или молочный раствор, без каких-либо признаков образования кристаллических твердых веществ. 308 мг кристаллической Формы А, которые были смолоты вручную пестиком и ступкой, затем добавляли. Зародыши оставались в реакторе. Систему выдерживали при 45°С, затем содержимое реактора охлаждали до 30°С при 1,5°С в час линейно, а затем охлаждали до 10°С в течение трех часов линейно, а затем выдерживали при 10°С в течение 4,5 часов. В результате получали белую, поддающуюся перемешиванию, суспензию. Суспензию охлаждали до 0-1°С в течение 20 минут и выдерживали на всю ночь (приблизительно 23 часов) при 0-1°С. Содержимое реактора переносят на фильтр из спеченного стекла и прилагают вакуум до появления твердого фильтрата. Фильтрат промывают на фильтре приблизительно 40 мл 60% н-гептана/40% этанола, денатурированного 0,5% толуола. Фильтрат дополнительно промывают приблизительно 300 мл н-гептана. Фильтрат высушивали на воздухе путем вакуумирования в течение приблизительно 1 часа, а затем фильтрат высушивали дополнительно в вакуумной печи на всю ночь при 40°С. Полученные в результате 9,26 грамм Формы А А 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон подтверждены ДСК.

Альтернативно, кристаллическая Форма А может быть получена путем загрузки 4 грамм аморфного S-энантиомера (выделенного при помощи ротора в пену) в 50-мл MultiMax реактор, оснащенный нагревающей/охлаждающей рубашкой, механической мешалкой, термопарой и диспергатором. Добавления 24 мл смеси растворителей, состоящей из 60 об% этанола (денатурированного 0,5 об% толуола), 35% гептана, и 5% этилацетата. Нагревания смеси до 60°С с образованием прозрачного раствора. Охлаждения до 45°С в течение 20 минут, добавления 20 мл затравки кристаллической Формы А (приблизительно 40 мг). Затравки остаются в реакционном сосуде. Выдерживания в течение 2 часов при 45°С, охлаждения при 20°С в течение 12,5 часов (приблизительно 2°С/час) линейно, выдерживания при 20°С при добавлении гептана (16 мл) в течение 1 часа с использованием диспергатора. В этот момент образуется белая суспензия. Затем выдерживали в течение 1 часа при 20°С, и затем охлаждали до -10°С в течение 10 часов и выдерживали при -10°С в течение 3 часов. Фильтровали полученную в результате суспензию на предварительно охлажденный фильтр из спеченного стекла и промывали 10 мл 80% гептана/20% этанола (денатурированного 0,5 об% толуола), предварительно охлажденного до приблизительно 0°С. Высушивали фильтрат в вакуумной печи в течение 2,5 дней при 30°С, абсолютном давлении приблизительно 150-160 торр при продувании азотом. Полученные в результате 3,45 грамм Формы А 1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, полученные на фильтре, подтверждены ДСК.

Альтернативно, кристаллическая Форма А может быть получена загрузкой аморфной S формы в бутылочку, содержащую приблизительно 18 мл диизопропилового эфира, 1,1 мл метанола и затравки Формы А. Реакционную смесь перемешивали. Реакционную смесь нагревали и охлаждали от 40°С до 2°с, при охлаждении в течение приблизительно 4 часов и нагревании в течение приблизительно 1 часа, для шести циклов нагреваний и охлаждений. Реакционную смесь выдерживали при приблизительно 1°С в течение 1 дня. Смесь повторно нагревали от 1°С до 55°С и затем охлаждали до приблизительно 25°С в течение периода приблизительно 3,3 часов (приблизительно 200 минут), и затем снова охлаждали до приблизительно ГС в течение периода приблизительно 1 час. Смесь выдерживали при комнатной температуре в течение приблизительно 24 часов и охлаждали до приблизительно 1°С в течение приблизительно 30 минут. Реакционную смесь выдерживали при 1°С в течение нескольких часов. Твердые вещества переносили в воронку из спеченного стекла и промывали циклогексаном. Твердые вещества высушивали в вакууме.

Пример 3: Получение кристаллической формы (R)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанон - кристаллизация аморфного R-энантиомера.

Кристаллическая форма может быть получена добавлением 50 мг аморфного R-энантиомера, описанного выше, в 20 мл стеклянную бутылочку с диэтиловым эфиром. Пробу нагревали и обрабатывали ультразвуком в ультразвуковой ванне в течение приблизительно 1 часа. Аморфные твердые вещества растворялись при нагревании/обработке ультразвуком, и затем твердые вещества, как наблюдали, выпадали в осадок из раствора. Исследование твердых веществ при помощи микроскопии в поляризованном свете обнаружило очень мелкие частицы, что может быть свидетельством двулучепреломления (индикатор кристалличности). Суспензию удаляли из 20 мл стеклянной бутылочки и помещали в 15 мл герметично закрытую трубку Пито с PTFE (Teflon™)-покрытой магнитной мешалкой. Эту пробирку нагревали и охлаждали от 60°С до -10°С повторно в течение приблизительно 20 часов, всего в течение 5 циклов нагревания/охлаждения, нагревания в течение приблизительно 1 часа, охлаждения в течение приблизительно 3 часов, при магнитном перемешивании. Исследование полученной в результате суспензии при помощи микроскопии в поляризованном свете выявило гораздо больше кристаллов, чем ранее циклы нагревания/охлаждения. Небольшую аликвоту полученных в результате твердых веществ выделяли из суспензии фильтрованием, высушивали при 30°С в вакууме при приблизительно 160 торр абсолютного давления всю ночь, и анализировали при помощи PXRD, с получением дифрактограммы, аналогичной Форме А. Твердые вещества также анализировали ДСК, и они проявляли широкую точку плавления при приблизительно 146°С (пик эндотермы).

Методы анализа ВЭЖХ

Хиральная ВЭЖХ сульфонамидных энантиомеров приблизительно (90/10 (S/R)): Chiralpak ΙΑ колонка (250×3,0 мм), изократический 50/50 метил трет-бутиловый эфир/этанол с 0,2% диэтиламином, скорость потока 1,0 мл/минута, детектирование при 260 нм. Времена удержания: 8,5 минут (S энантиомер) и 16,5 минут (R энантиомер). Выделенное твердое вещество составляет приблизительно 99% S и приблизительно 1% или менее инактивного изомера (R). Дополнительно энантиомерное обогащение может быть получено путем перемешивания в МТВЕ (например) и фильтрования любых твердых веществ, которые образуются. Продукт был идентичен энантиомеру рацемата элюированного первым в препаративных условиях хиральной SFC, как описано выше. ¹Н ЯМР, 600МГц (d₆-DMSO): 7,88 (д, 2Н), 7,82 (д, 1Н), 7,73 (м, 2Н), 5,18 (с, 2Н), 4,62 (дд, 2Н), 4,42 (дд, 2Н), 4,28 (м, 4Н), 3,20 (с, 3Н); m/z (Cl) 582 [М+Н].

Метод дополнительного хирального ВЭЖХ анализа:

Chiracel AD-3R, 150×4,6 мм, 3 микрон колонка. Скорость потока составляет 1,5 мл в минуту с использовнием изократической смеси растворителей 75:25 метанол:ацетонитрил. Температура колонки 40°С. Детектирование при 260 нм. Времена элюирования составляют: S-изомер (4,0 минут), R-изомер (7,8 минут). Время пропускания 15 минут.

Метод ВЭЖХ анализа для S-изомера:

АСЕ Excel 2 C18-AR, 150×4,6 мм колонка. Температура колонки 50°С. Детектирование при 260 нм. Скорость потока составляет 1,5 мл в минуту. Подвижная фаза А: 0,1% трифторуксусная кислота в воде. Подвижная фаза В: 0,1% TFA в ацетонитриле. Пропускание при градиенте: изначальное время 45% В, 4,5 минут 55% В, 20 минут 100% В. Время элюирования S-изомера составляет 9,8 минут.

Изобретение относится к кристаллической форме А (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона. Технический результат: получена кристаллическая форма А (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, а также ветеринарная композиция и описан способ лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, которое нуждается в этом. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 5 табл., 1 сх., 3 пр.

1. Кристаллическая Форма А (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона, проявляющая по меньшей мере одно из следующих свойств:

a) рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83 и 20,07;

b) рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83 и 20,07, и дополнительно содержащую, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°), выбранный из группы, состоящей из пиков при приблизительно 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 21,42, 22,03, 22,54, 23,62 и 28,42;

c) рентгеновскую дифракторамму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83, и 20,07, и дополнительно содержащую, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 21,42, 22,54 и 28,42;

d) рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83, 20,07, 21,42, 22,54 и 28,42;

e) термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии, имеющую одну преобладающую эндотерму при приблизительно 145,53°С при скорости сканирования 10°С в минуту, по сути, как показано на Фиг. 3.1; и

f) термограмму дифференциальной сканирующей калориметри, имеющую одну преобладающую эндотерму в диапазоне от 144,01 до 146,92°С при скорости сканирования 10°С в минуту, по сути, как показано на Фиг. 3.2.

2. Кристаллическая форма по п. 1, которая демонстрирует

(i) по меньшей мере, одну из следующих рентгеновских дифрактограм, выбранных из:

a) рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83 и 20,07;

b) рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83 и 20,07, и дополнительно содержащую, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 21,42, 22,54 и 28,42;

c) рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83, 20,07, 21,42 и 28,42; и

(ii) термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии,

имеющую одну преобладающую эндотерму при приблизительно 145,53°С при скорости сканирования 10°С в минуту, по сути, как показано на Фиг. 3.1 или термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии, имеющую одну преобладающую эндотерму в диапазоне 144,01-146,92°С при скорости сканирования 10°С в минуту, по сути, как показано на Фиг. 3.2.

3. Кристаллическая форма по п. 1, которая демонстрирует следующие свойства:

a) рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83 и 20,07, и дополнительно содержащую, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 21,42, 22,03, 22,54, 23,62 и 28,42; и дополнительно включает

b) инфракрасный спектр с преобразованием Фурье в 1800 - 600 см^-1 диапазоне, по сути, как показано на Фиг. 2.

4. Кристаллическая форма по п. 1, которая демонстрирует следующие свойства:

a) рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83 и 20,07, и дополнительно содержащую, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 4,70, 9,39, 14,10, 15,70, 19,12, 20,97, 21,42, 22,03, 22,54, 23,62 и 28,42; и

b) термограмму дифференциальной сканирующей калориметри, имеющую одну преобладающую эндотерму при приблизительно 145,53°С при скорости сканирования 10°С в минуту, по сути, как показано на Фиг. 3.1 или термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии, имеющую одну преобладающую эндотерму в диапазоне 144,01-146,92°С при скорости сканирования 10°С в минуту, по сути, как показано на Фиг. 3.2.

5. Кристаллическая форма по п. 1, которая демонстрирует рентгеновскую дифрактограмму, имеющую характеристические пики, выраженные в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 17,18, 18,83, 20,07, и дополнительно содержащую, по меньшей мере, один дополнительный пик дифракции, выраженный в градусах 2θ (±0,2°) при приблизительно 21,42, 22,54 и 28,42.

6. Кристаллическая форма по п. 1, отличающаяся тем, что демонстрирует термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии, имеющую одну преобладающую эндотерму при приблизительно 145,53°С при скорости сканирования 10°С в минуту, по сути, как показано на Фиг. 3.1, или термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии, имеющую одну преобладающую эндотерму в диапазоне 144,01-146,92°С при скорости сканирования 10°С в минуту, по сути, как показано на Фиг. 3.2.

7. Ветеринарная композиция, имеющая противопаразитарные свойства, которая содержит терапевтически эффективное количество кристаллической Формы А по пункту 1 и ветеринарно приемлемый наполнитель, разбавитель, носитель или их смесь.

8. Способ лечения паразитарной инфекции или заражения паразитами у животного, включающий введение животному, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества кристаллической Формы А по пункту 1.

9. Способ по п. 8, где животное является домашним животным или сельскохозяйственным животным и введение является пероральным, местным или инъекционным.

10. Способ получения кристаллической Формы А по пункту 1, включающий:

a) загрузку аморфного твердого (S)-1-(5'-(5-(3,5-дихлоро-4-фторфенил)-5-(трифторметил)-4,5-дигидроизоксазол-3-ил)-3'Н-спиро[азетидин-3,1'-изобензофуран]-1-ил)-2-(метилсульфонил)этанона в растворитель;

b) нагревание смеси до приблизительно 60°С;

c) охлаждение смеси до приблизительно 45°С;

d) добавление кристаллической затравки Формы А и выдерживание при приблизительно 45°С;

e) медленное охлаждение смеси; и

f) фильтрование, промывание и высушивание твердых веществ.

11. Способ по п. 10, где растворитель содержит приблизительно 60% этанола, приблизительно 5% этилацетата и приблизительно 35% н-гептана или их смесь.

12. Способ по п. 11, где смесь охлаждают от приблизительно 60°С до приблизительно 45°С в течение приблизительно 15-20 минут, добавляют кристаллическую затравку Формы А, выдерживают смесь при 45°С в течение приблизительно 2 часов и затем линейно охлаждают до 10°С, и выдерживают при 10°С в течение приблизительно 4,5 часов, охлаждают дополнительно до 0-1°С и выдерживают при 0-1°С в течение приблизительно 23 часов с получением суспензии.

13. Способ в соответствии с п. 12, отличающийся тем, что суспензию фильтруют в вакууме и твердые вещества промывают раствором, содержащим н-гептан и этанол, и твердые вещества высушивают дополнительно в вакууме с получением в результате Формы А.