КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА, СОДЕРЖАЩАЯ МОНОАЦЕТИЛДИАЦИЛГЛИЦЕРИНОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ АКТИВНОГО ИНГРЕДИЕНТА Российский патент 2018 года по МПК A61K31/22 A61K8/92 A61P17/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Данное изобретение относится к фармацевтической композиции, к композиции функционального продукта лечебного питания, к композиции квазимедикамента и к косметической композиции для предотвращения или лечения атопического дерматита или для улучшения состояния индивидов с этим заболеванием, содержащим в качестве активного ингредиента моноацетилдиацилглицерин.

Уровень техники

Атопический дерматит - воспалительное заболевание кожи, сопровождающееся зудом, с хроническим рецидивирующим течением. Это заболевание часто встречается у детей, включая грудных; характерные для него сухость кожи, зуд и экзема нередко наблюдаются также у членов семьи больных. Типичные симптомы атопического дерматита отмечаются на кистях рук, волосистой части головы, на лице, шее, локтях, коленях и в других местах тела; в пораженных участках кожа становится сухой, чешется, раздражается и шелушится. Из-за зуда больной может так расчесывать эти места, что происходит лихенизация: кожа становится утолщенной, грубой на ощупь, кожный рисунок резко выражен. Непосредственная причина возникновения атопического дерматита остается неясной. Поэтому постоянно ведутся исследования этого заболевания. Обычно для лечения атопического дерматита предлагаются такие средства, как церамиды, линолевая кислота, растительное или минеральное масло, стероидные препараты (например, гидрокортизон), антибактериальные и противовоспалительные агенты. Однако стероидные соединения могут подавлять процессы роста в коже или вызывать побочные эффекты, что ведет к негативным проявлениям, а пероксид мочевины может вызывать жжение и аллергическую реакцию. Антибиотики и антигистаминные препараты также обладают нежелательными побочными эффектами, в частности длительное применение антибиотиков приводит к развитию устойчивости бактерий и к фотосенсибилизации кожи. Некоторые из указанных средств могут взывать телеангиэктазии и/или утолщение и разрастание рогового слоя кожи. В последнее время для облегчения атопического дерматита часто назначается гамма-линоленовая кислота, но она легко окисляется. Помимо низкой стабильности это средство имеет тот недостаток, что довольно сильно раздражает кожу, так что при чувствительной коже его применение затруднительно.

Из оленьих рогов выделены вещества, обозначаемые ЕС-18, которые представляют собой моноацетилдиглицеридные соединения. Известно, что ЕС-18 повышает выживаемость подопытных животных с экспериментальным сепсисом при перевязке и проколе слепой кишки и не обладает токсичностью при проверке по стандарту надлежащей лабораторной практики (GLP). Однако действие моноацетилдиацилглицеринов, включая ЕС-18, при атопическом дерматите не известно и не описано. Поэтому авторы данного изобретения поставили своей целью найти вещество для предотвращения или лечения атопического дерматита на основе природного материала или нового соединения и обнаружили, что моноацетилдиацилглицерины подавляют секрецию интерлейкина-4 (IL-4) и иммуноглобулина Е (IgE) и могут быть использованы для предотвращения или лечения этого заболевания.

Раскрытие изобретения

Задачи изобретения

Цель данного изобретения - предложить фармацевтическую композицию, композицию функционального продукта лечебного питания, косметическую композицию и композицию квазимедикамента для предотвращения или лечения атопического дерматита или улучшения состояния индивида, страдающего этим заболеванием.

Другая целью данного изобретения - предложить способ предотвращения или лечения атопического дерматита, включающий этап введения фармацевтической композиции по данному изобретению индивиду, страдающему атопическим дерматитом или подверженному риску его возникновения.

Техническое решение

В примере для достижения указанных выше и других целей данным изобретением предлагается фармацевтическая композиция для предотвращения или лечения атопического дерматита, содержащая в качестве активного ингредиента моноацетилдиацилглицерин, представленный формулой 1,

где R1 и R2 независимо друг от друга представляют жирнокислотную группу из 14-20 атомов углерода.

Говоря конкретно, фармацевтическая композиция для предотвращения или лечения атопического дерматита по данному изобретению включает моноацетилдиацилглицерин, представленный формулой 1. По данному изобретению термин «моноацетилдиацилглицерин» означает производное глицерина, в котором имеются одна ацетильная группа и две ацильных группы; в настоящем документе такое соединение также обозначается MADG.

В моноацетилдиацилглицеринах, описываемых формулой 1, R1 и R2 независимо друг от друга представляют остаток жирной кислоты из 14-20 атомов углерода. Термин «остаток жирной кислоты» относится к ацильной группе, образовавшейся в результате возникновения эфирной связи при взаимодействии жирной кислоты и спирта. Примеры R1 и R2, не имеющие ограничительного характера, включают пальмитоил, олеоил, линолеоил, линоленоил, стеароил, миристоил, арахидоноил и др. Предпочтительные комбинации R1 и R2 (R1/R2) включают олеоил/пальмитоил, пальмитоил/олеоил, пальмитоил/линолеоил, пальмитоил/линоленоил, пальмитоил/арахидоноил, пальмитоил/стеароил, пальмитоил/пальмитоил, олеоил/стеароил, линолеоил/пальмитоил, линолеоил/стеароил, стеароил/линолеоил, стеароил/олеоил, миристоил/линолеоил, миристоил/олеоил и др. В отношении оптической активности моноацетилдиацилглицерины, описываемые формулой 1, могут быть в (R)-форме, (S)-форме или в виде рацемической смеси и могут включать свои стереоизомеры.

В одном из воплощений данного изобретения моноацетилдиацилглицерин является соединением, представленным формулой 2.

Соединение, представленное формулой 2, - это 1-пальмитоил-2-линолеоил-3-ацетилглицерин (PLAG), который в настоящем документе иногда называется "ЕС-18". В соединении, описываемом формулой 2, R1 и R2 представляют пальмитоил и линолеоил соответственно.

Моноацетилдиацилглицерины можно выделить из природного источника - рогов оленей или же их можно получить синтетическими методами, известными в органической химии (см. зарегистрированные патенты Кореи №10-0789323). Конкретно, проделывается следующее. Материал оленьих рогов экстрагируют гексаном, затем остаток экстрагируют хлороформом и хлороформ удаляют, получая экстракт. Объем растворителей для экстракции берется таким, чтобы экстрагируемый материал был полностью погружен в растворитель, но не более. Как правило, на 1 кг оленьих рогов берут около 4-5 литров гексана и/или хлороформа (сказанное здесь не имеет ограничительного характера). Полученные этим способом экстракты далее фракционируют и очищают путем хроматографии на колонках с силикагелем и тонкослойной хроматографии, в результате чего выделяют моноацетилдиацилглицерин по данному изобретению. Растворитель для экстракции выбирают (не ограничиваясь перечисленным здесь) из хлороформа/метилового спирта, гексана/этилацетата/уксусной кислоты.

Способ химического синтеза для получения моноацетилдиацилглицеринов описан в зарегистрированных патентах Кореи №10-0789323. В частности, этот способ включает (а) этап получения соединения вида 1-R1-3-защитная группа-глицерин путем присоединения защитной группы в положении 3 1-R1-глицерина; (b) этап получения соединения вида 1-R1-2-R2-3-защитная группа-глицерин путем введения R2 в положение 2 соединения 1-R1-2-R2-3-защитная группа-глицерин; и (с) этап получения желаемого соединения - моноацетилдиацилглицерина - путем проведения реакции депротекции и одновременно реакции ацетилирования соединения 1-R1-2-R2-3-защитная группа-глицерин. При необходимости полученный моноацетилдиацилглицерин можно далее очистить. Или же моноацетилдиацилглицерины можно получить путем кислотного разложения (ацетолиза) фосфатидилхолина; сказанное здесь не имеет ограничительного характера. В объем данного изобретения входят также стереоизомеры соединений, описываемых формулой (1).

В данном изобретении показано, что моноацетилдиацилглицерины ослабляют секрецию IL-4 и IgE, и, таким образом, их можно с успехом использовать для предотвращения или лечения атопического дерматита.

В настоящем документе термин «предотвращение/профилактика» относится к мероприятиям, подавляющим или задерживающим возникновение атопического дерматита путем введения фармацевтической композиции по данному изобретению. Термин «лечение» означает любые мероприятия для ослабления симптомов атопического дерматита или улучшения состоянии больного путем введения композиции по данному изобретению. В контексте данного изобретения термин «атопический дерматит» означает хроническое рецидивирующее воспалительное заболевание кожи, сопровождающееся зудом, сухостью кожи и экземой, являющимися характерными проявлениями этого заболевания. При наличии выраженных поражений тканей, обусловленных атопическим дерматитом, наблюдается значительное повышение уровня иммуноглобулина Ε (IgE) в сыворотке крови, что, по-видимому, является признаком атопического дерматита. Помимо этого признака, при диагностике и определении степени тяжести атомического дерматита используется субъективная оценка патологических изменений пораженных тканей и воспаленной кожи. Хотя точная причина атопического дерматита до сих пор не вполне понятна, сообщалось, что в развитии этого заболевания участвуют иммунологические и не иммунологические механизмы с генетической предрасположенностью. Экзогенный атопический дерматит, на который приходится большинство случаев атопического дерматита, вызывается иммунологическими механизмами, связанными с IgE. Неоднократно сообщалось о том, что при экзогенном атопическом дерматите имеют значение не немедленный иммунный ответ на конкретный антиген, а иммунологическая реакция замедленного типа, обусловленная аномальными Т-клетками. Также недавно сообщалось о том, что причиной атопии являются цитокины, продуцируемые клетками Th2, например IL-4, который индуцирует образование IgE В-клетками (JS Kang et al., Inhibition of atopic dermatitis by topical application of silymarin in NC/Nga mice. Int. Immunopharm. (2008) 8:1475-1480). На фиг. 1 представлена схема, поясняющая возникновение атопии. На ней показано, что в поддержании должного равновесия при иммунном ответе ключевую роль играют клетки Тh1 (Т_H1) и Th2 (Т_H2), а когда активность Тh1 и Th2 клеток выходит за рамки этого равновесия, может возникнуть атопия.

В примерах данного изобретения получены данные об уровнях IL-4 и IgE у животных с экспериментальным атопическим дерматитом, вызванным 2,4-динитро-1-хлорбензолом (DNCB), показывающие, что у подопытных животных, получавших ЕС-18, указанные уровни значительно ниже, чем у контрольных особей, получавших оливковое масло (см. примеры 1 и 2). Это свидетельствует, что моноацетилдиацилглицерины эффективны при лечении атопического дерматита.

В состав фармацевтической композиции по данному изобретению, содержащей моноацетилдиацилглицерины, могут также входить обычно используемые фармацевтически приемлемые носители, разбавители или иные эксципиенты. Количество моноацетилдиацилглицеринов в фармацевтической композиции по данному изобретению может варьировать в широких пределах без каких-либо специфических ограничений; конкретно говоря, содержание моноацетилдиацилглицеринов в фармацевтической композиции по данному изобретению составляет от 0,0001% до 100,0% (масса/масса), предпочтительно от 0,001% до 50% (масса/масса), более предпочтительно от 0,01% до 20% (масса/масса) относительно общего количества композиции.

Фармацевтическая композиция по данному изобретению может быть представлена различными лекарственными формами для перорального и не перорального введения, например какой-либо лекарственной формой, выбираемой из группы, состоящей из таблеток, болюсов, порошков, гранул, капсул (например, мягких или жестких желатиновых капсул), эмульсий, суспензий, сиропов, эмульгируемых концентратов, стерилизованных водных растворов, неводных растворов, лиофилизованных препаратов, суппозиториев и др. При составлении композиции по данному изобретению могут использоваться обычно применяемые разбавители или иные эксципиенты, например наполнители, объемообразующие агенты, связующие вещества, увлажняющие агенты, дезинтегрирующие агенты и поверхностно-активные вещества. Твердые препараты для перорального применения по данному изобретению включают таблетки, болюсы, порошки, гранулы, капсулы и проч.; эти твердые препараты могут быть получены путем смешивания одного или более активных компонентов и по меньшей мере одного из таких эксципиентов, как крахмал, карбонат кальция, сахароза, лактоза, желатин и др. Помимо указанных эксципиентов, можно использовать агенты, улучшающие скольжение, например стеарат магния и тальк. Жидкие препараты по данному изобретению для перорального применения включают эмульсии, суспензии, сиропы и проч.; они могут также содержать обычно используемые разбавители, например воду и жидкий парафин, или различные агенты - увлажняющие, подслащивающие, ароматизирующие и консервирующие. Препараты для неперорального применения включают стерилизованные водные растворы, неводные растворы, лиофилизованные препараты, суппозитории и проч.; растворители для таких растворов включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла (например, оливковое масло) и эфиры для инъекций с помощью шприца, например этилолеат.Материалы для основы суппозиториев включают витепсол, макрогол, твин (Tween-61), масло какао, лаурин и глицериножелатин.

Композиция по данному изобретению вводится в организм в фармацевтически эффективном количестве. Термин «фармацевтически эффективное количество» в настоящем документе употребляется применительно к такому количеству препарата, которое достаточно для достижения желаемого результата при лечебных мероприятиях. Фармацевтически эффективное количество определяется соответственно типу, возрасту и полу индивида, характеру заболевания и степени его тяжести, активности взятого препарата, чувствительности к нему данного индивида, времени, продолжительности и пути введения препарата пациенту, скорости его выведения из организма и другим критериям, известным в области медицины. Композиция по данному изобретению может вводиться в организм в отдельности или же одновременно либо последовательно с другими лекарственными средствами; введение может быть однократным или многократным. В свете всех указанных выше факторов важно дозировать количество композиции так, чтобы достигался максимально возможный лечебный эффект при минимальных побочных явлениях или их отсутствии; дозировку композиции по данному изобретению вполне может определить специалист в данной области техники. Предпочтительное количество композиции по данному изобретению может варьировать соответственно состоянию индивида, его массе тела, степени тяжести заболевания, характеру препарата, пути и продолжительности введения. Нужное суммарное количество композиции, вводимое за сутки, определяет врач - специалист в соответствующей области медицины; обычно оно составляет от 0,001 мг/кг массы тела до 1000 мг/кг, предпочтительно от 0,05 мг/кг до 200 мг/кг, более предпочтительно от 0,1 мг/кг до 100 мг/кг; это количество вводится в один прием или в несколько приемов на протяжении суток. Композицию по данному изобретению можно вводить любому индивиду, которому требуется подавление ракового заболевания крови или метастазирования рака. Например, композицию по данному изобретению можно вводить не только людям, но и животным (в частности, млекопитающим), например обезьянам, собакам, кошкам, кроликам, морским свинкам, крысам, мышам, коровам, овцам, свиньям, козам и др. Композицию по данному изобретению можно вводить в организм различными обычно применяемыми для введения лекарственных средств способами, например перорально или ректально, внутривенно, внутримышечно, подкожно или интрацеребрально.

В другом аспекте данного изобретения предлагается функциональный продукт лечебного питания для предотвращения атопического дерматита или улучшения состояния страдающего этим заболеванием индивида, содержащий в качестве активного ингредиента моноацетилдиацилглицерин, описываемый формулой 1,

где R1 и R2 независимо друг от друга представляют (не ограничиваясь указанным здесь) жирнокислотную группу из 14-20 атомов углерода.

Для предотвращения атопического дерматита или улучшения состояния страдающего этим заболеванием индивида моноацетилдиацилглицерины по данному изобретению можно включать в функциональные продукты лечебного питания. Эти соединения и атопический дерматит подробно описаны ранее. Термин «улучшение» означает любые изменения, ослабляющие симптомы атопического дерматита или положительным для состояния индивида, у которого имеется или подозревается это заболевание, образом влияющие на его проявления.

В составе функционального продукта лечебного питания композиция по данному изобретению может присутствовать сама по себе или вместе с другим активным компонентом. Количество соединений по данному изобретению в составе функционального продукта лечебного питания определяют соответственно предполагаемому применению этого продукта. Как правило, при изготовлении функционального продукта (в том числе напитка) лечебного питания композиция по данному изобретению включается в его состав в количестве менее чем 15 массовых долей, предпочтительно менее 10 массовых долей. В случае продолжительного использования функционального продукта лечебного питания с целью влияния на здоровье индивида количество композиции по данному изобретению в нем может быть меньше, чем указанные выше значения. Но поскольку активный компонент композиции по данному изобретению не вызывает никаких негативных явлений, ее количество в составе функционального продукта лечебного питания может быть больше указанного выше. Функциональный продукт лечебного питания, содержащий композицию по данному изобретению, может быть каким-либо из обычных пищевых продуктов или напитков. Конкретные примеры включают мясные продукты, колбасные изделия, хлеб, шоколад, конфеты, чипсы и подобные продукты, печенье, пиццу, лапшу быстрого приготовления, макаронные изделия, жевательную резинку, мороженое, молочные продукты, супы, прохладительные безалкогольные напитки, чай, алкогольные напитки, витаминные комплексные препараты и др. При необходимости пищевые продукты по данному изобретению включают также корм для животных.

В том случае когда функциональный продукт лечебного питания является напитком, он может включать обычно используемые в напитках подсластители, ароматизирующие агенты или природные углеводы. Примеры природных углеводов, которые могут входить в состав функциональных продуктов лечебного питания по данному изобретению, включают моносахариды, например глюкозу и фруктозу; дисахариды, например мальтозу и сахарозу; полисахариды, например декстрин и циклодекстрин; сахарные спирты, например ксилит, сорбит и эритрит. Предпочтительное количество природных углеводов в составе напитка по данному изобретению может широко варьировать без особых ограничений; обычно оно составляет от 0,01 до 0, 04 г, более предпочтительно от 0,02 до 0,03 г на 100 мл напитка. Примеры подсластителей включают природные агенты, например тауматин и экстракт стевии, и искусственные вещества, например сахарин и аспартам. Помимо указанных выше компонентов функциональный продукт лечебного питания по данному изобретению может также включать различные питательные добавки, витамины, электролиты, ароматизирующие агенты, красители, пектиновые кислоты и их соли, альгиновую кислоту и ее соли, органические кислоты, защитные коллоиды, загустители, агенты для подведения рН, стабилизирующие агенты, консерванты, глицерин, спирт, соки и др.

В другом аспекте данного изобретения предлагаются композиции квазимедикаментов для предотвращения атопического дерматита или улучшения состояния страдающего им индивида, которые содержат моноацетилдиацилглицерины, описываемые формулой 1, в качестве активного компонента,

где R1 и R2 независимо друг от друга представляют (не ограничиваясь указанным здесь) жирнокислотную группу из 14-20 атомов углерода.

Для предотвращения атопического дерматита или улучшения состояния страдающего им индивида моноацетилдиацилглицерины по данному изобретению можно включать в состав композиций квазимедикаментов. Моноацетилдиацилглицерины и атопический дерматит подробно описаны ранее.

Термин «квазимедикамент» означает продукт из следующих категорий: (а) волокна, резиновые и подобные им продукты, используемые с целью лечения, облегчения или предотвращения заболеваний человека или животных; (b) продукты, не являющиеся механизмами или предметами оборудования, оказывающие незначительное или непрямое воздействие на человеческий организм; и (с) препараты, используемые для стерилизации, уничтожения насекомых-вредителей и сходных целей, чтобы предотвратить передачу заразных заболеваний между индивидами. Однако термин «квазимедикамент» не включает (а) продукты, используемые для целей диагностики, медицинского ухода, облегчения состояния больного, лечения или предотвращения заболеваний людей или животных, исключая устройства, механизмы и предметы оборудования; или (b) продукты, не являющиеся устройствами, механизмами или предметами оборудования, используемые для целей достижения фармакологического эффекта в отношении структур или функций организма человека или животных. Квазимедикаменты включают препараты наружного применения для кожи и продукты для личной гигиены. Композиция квазимедикамента по данному изобретению для предотвращения атопического дерматита или улучшения состояния страдающего им индивида может состоять из одних только моноацетилдиацилглицеринов в чистом виде, или же она может включать моноацетилдиацилглицерин и другие ингредиенты, обычно используемые в квазимедикаментах. Количество моноацетилдиацилглицерина в композиции квазимедикамента определяется соответственно предполагаемому применению данного продукта. Препараты наружного применения для кожи, в состав которых могут входить соединения по данному изобретению, включают, например, мази, лосьоны, разбрызгиваемые препараты, наклейки/пластыри, кремы, порошки/присыпки, суспензии и гели, не ограничиваясь перечисленным здесь.

В другом аспекте данного изобретения предлагаются косметические композиции для предотвращения атопического дерматита или улучшения состояния страдающего им индивида, которые содержат моноацетилдиацилглицерины, описываемые формулой 1, в качестве активного компонента,

где R1 и R2 независимо друг от друга представляют (не ограничиваясь указанным здесь) жирнокислотную группу из 14-20 атомов углерода.

Для предотвращения атопического дерматита или улучшения состояния страдающего им индивида моноацетилдиацилглицерины по данному изобретению можно включать в состав косметических композиций. Моноацетилдиацилглицерины и атопический дерматит подробно описаны ранее. Косметические композиции для предотвращения атопического дерматита или улучшения состояния страдающего им индивида содержат моноацетилдиацилглицерины в в количестве от 0,001 до 50% (масса/масса), более предпочтительно от 0,01 до 20% (масса/масса), наиболее предпочтительно от 0,1 до 10% (масса/масса) относительно общего количества композиции (указанные здесь значения не имеют ограничительного характера).

Также косметические композиции по данному изобретению могут содержать (не ограничиваясь перечисленным здесь) компоненты, обычно дополняющие активный ингредиент, например такие традиционно используемые дополнительные компоненты, как антиоксиданты, стабилизирующие агенты, солюбилизирующие агенты, витамины, пигменты, ароматизаторы и носители.

Косметические композиции по данному изобретению могут быть представлены различными формами, например растворами, местно применяемыми мазями, кремами, пенами, питательными, смягчающими и иными лосьонами, масками, тониками, основами под макияж, эссенциями, мылом, жидкими очищающими средствами, солнцезащитными кремами и маслами, суспензиями, эмульсиями, пастами, гелями, порошками, очищающими средствами с поверхностно-активными компонентами, маслами, тональным кремом-пудрой, жидким тональным кремом, тональным кремом на восковой основе, пластырями/наклейками и разбрызгиваемыми/аэрозольными препаратами (перечисленное здесь не имеет ограничительного характера). Также косметическая композиция по данному изобретению может включать один или более косметически приемлемых носителей, которые объединяются с обычно используемыми в косметических композициях для кожи химическими агентами, например маслами, водой, поверхностно-активными веществами, увлажняющими агентами, низшими спиртами, загустителями, хелатирующими агентами, красителями, консервантами, отдушками (перечисленное здесь не имеет ограничительного характера).

Какой именно косметический химически приемлемый носитель берется для косметической композиции по данному изобретению, зависит от ее состава.

Если косметическая композиция по данному изобретению представлена мазью, пастой, кремом или гелем, то в качестве носителя могут использоваться животные жиры, растительные масла, воск, парафин, крахмал, трагакантовая камедь, производные целлюлозы, полиэтиленгликоль, силикон, бентонит, диоксид кремния, тальк, окись цинка или смеси указанных веществ. Если косметическая композиция по данному изобретению представлена порошком или разбрызгиваемым препаратом, то в качестве носителя могут использоваться лактоза, тальк, диоксид кремния, гидроксид алюминия, кальция chamber Kate, полиамидный порошок или смеси указанных веществ. В частности, в случае разбрызгиваемых/аэрозольных форм в состав композиции может быть включен еще и пропеллент, например хлорфторуглерод, пропан/бутан или диметиловый эфир. Если косметическая композиция по данному изобретению представлена раствором или эмульсией, в качестве носителя используется растворитель, солюбилизирующий агент или эмульгирующий агент, например вода, этиловый спирт, изопропанол, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3- и бутилгликоль. В частности, можно использовать хлопковое масло, арахисовое масло, кукурузное масло, рапсовое масло, оливковое масло, касторовое масло, кунжутное масло, эфиры глицерина и алифатических кислот, эфиры полиэтиленгликоля и жирных кислот или эфиры сорбитана и жирных кислот. Если косметическая композиция по данному изобретению представлена суспензией, то в качестве носителя используются жидкие разбавители, например вода, этиловый спирт или пропиленгликоль, этоксилированный изостеариловый спирт; суспендирующие агенты, например полиоксиэтиленовые эфиры на основе сорбита и эфиры полиоксиэтиленсорбитана, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар или трагакантовая камедь и др. Если косметическая композиция по данному изобретению представлена мылом, то в качестве носителя используются соли щелочных металлов и жирных кислот, соли полуэфиров жирных кислот, жирные кислоты белок гидролизата, изетионаты, производные ланолина, жирные спирты, растительные масла, глицерин, сахар и др. Если косметическая композиция по данному изобретению представлена очищающим средством, содержащим поверхностно-активные вещества, то в качестве носителя используются сульфаты алифатических спиртов, сульфоэфиры алифатических спиртов, моноэфиры сульфосукцината, изетионаты, производные имидазолиния, метилтаураты, саркозинаты, сульфоэфиры амидов жирных кислот, амидоалкилбетаины, алифатические спирты, глицериды жирных кислот, диэтаноламиды жирных кислот, растительные масла, производные ланолина или этоксилированные эфиры глицерина и жирных кислот и др.

В другом аспекте данного изобретения предлагается способ для предотвращения или лечения атопического дерматита, включающий этап введения фармацевтической композиции по данному изобретению индивиду, у которого имеется или подозревается атопический дерматит.

Понятие «индивид, у которого имеется или подозревается атопический дерматит» включает не только животных и людей, страдающих атопическим дерматитом, но и тех, у которых возможно его развитие. Индивидов, у которых имеется или подозревается атопический дерматит, можно эффективно лечить путем введения фармацевтической композиции, содержащей композицию по данному изобретению или ее фармацевтически приемлемые соли. Атопический дерматит описан ранее. Термин «введение» означает, что фармацевтическая композиция по данному изобретению каким-либо образом попадает в организм индивида, у которого имеется или подозревается атопический дерматит. Путь введения может быть любым - пероральным или не пероральным. В частности, фармацевтическую композицию по данному изобретению можно вводить в организм чрескожно при местном применении, но этот пример не имеет ограничительного характера.

Способ лечения ракового заболевания крови по данному изобретению включает этап введения в организм эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей моноацетилдиацилглицерины, описываемые формулой I, нуждающемуся в том индивиду. Сколько нужно вводить препарата суммарно за сутки, определяет врач; как правило, это количество составляет от 0,001 мг/кг массы тела пациента до около 1000 мг/кг, предпочтительно от около 0,05 до около 200 мг/кг, более предпочтительно от около 0,1 до около 100 мг/кг. Эту суточную дозу вводят в один прием (один раз в сутки) или в несколько приемов на протяжении суток. Впрочем, конкретное терапевтически эффективное количество моноацетилдиацилглицеринов для данного индивида варьирует в зависимости от характера и степени выраженности реакции его организма, состава композиции, в том числе от присутствия в ней других активных агентов, возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола и питания индивида, времени и пути введения препарата, соотношения компонентов в композиции, продолжительности лечения, других препаратов, используемых в сочетании или одновременно с данным в ходе лечения, и различных иных факторов, известных в области медицины.

Полезный эффект изобретения

Моноацетилдиацилглицерины по данному изобретению эффективно подавляют экспрессию IL-4 и IgE, не обладая побочными эффектами, свойственными существующим на сегодняшний день средствам для лечения атопического дерматита, не токсичны и оказывают выраженное терапевтическое действие. Таким образом, эти соединения можно с успехом использовать для предотвращения или лечения атопического дерматита и облегчения состояния больного.

Краткое описание иллюстраций

Фигура 1 представляет схематическое изображение причин атопии.

Фигура 2 представляет диаграмму, иллюстрирующую уровень экспрессии IL-4 у мышей за период до двух недель после введения ЕС-18.

Фигура 3 представляет диаграмму, иллюстрирующую уровень экспрессии IgE у мышей за период до двух недель после введения ЕС-18.

Фигура 4 - фотографии, демонстрирующие выраженность атопического заболевания на протяжении трех недель у мышей, которым вводили ЕС-18, и у контрольных особей, получавших только оливковое масло.

Фигура 5 - график, демонстрирующий изменение уровня экспрессии цитокина, продуцируемого клетками Th2 (IL-4), у здоровых людей в результате введения ЕС-18 на протяжении 4 недель.

Фигура 6 - график, демонстрирующий изменение уровня экспрессии цитокина, продуцируемого клетками Th1 (IFN-γ), у здоровых людей в результате введения ЕС-18 на протяжении 4 недель.

Фигура 7 - фотографии, демонстрирующие изменение проявлений атопии у индивида с ярко выраженными симптомами атопического заболевания после введения ЕС-18.

Фигура 8 - фотографии, демонстрирующие изменение проявлений атопии у индивида со слабо выраженными симптомами атопического заболевания после введения ЕС-18.

Осуществление изобретения

Ниже данное изобретение описывается подробнее на примерах и с помощью прилагаемых иллюстраций, которые представлены для лучшего понимания изобретения и не должны ограничивать объем данного изобретения. Приведенные в дальнейшем тексте соотношения и доли в процентах даются по массе, если не оговорено иного.

Пример. Индукция атопического дерматита динитрохлорбензолом

Мышам линии Balb/c возрастом 7 недель удаляли шерсть на спине и, чтобы вызвать атопию, делали в этом месте аппликации 2,4-динитро-1-хлорбензола (DNCB; Sigma Aldrich), разведенного до концентрации 0,2% растворителем, которым служила смесь оливкового масла и ацетона (1:4). В течение первой недели 200 мкл разведенного DNCB наносили 7 раз подряд, а начиная со второй недели - раз в два дня.

Экспериментальный пример 1. Подавление экспрессии IL-4 под действием ЕС-18

Мышам вводили перорально смесь ЕС-18 и оливкового масла в первую неделю 7 раз (один раз в сутки) по 100 мкл за один прием в дозе 2 мг на одну особь, затем еще 11 раз также по 100 мкл за один прием, но в дозе 1 мг на одну особь; всего получалось 18 введений. Для определения IL-4, у животных брали кровь из ретроорбитального венозного синуса по общепринятой методике перед указанным введением и через 1, 2 и 3 недели после (всего четыре раза); кровь собирали пастеровской пипеткой (Hilgenberg). Набирали 350 мкл крови в пробирку для микроцентрифуги (Eppendorf), центрифугировали, чтобы отделить сыворотку и в ней определяли IL-4 методом твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). В качестве иммобилизованных антител использовали мышиные антитела против IL-4 (BD bioscience), которые разводили физиологическим раствором, забуференным фосфатом (IX PBS) до концентрации 2 мкг/мл и наносили на 96-луночный планшет (Thermo) по 200 мкл на лунку, оставляли на ночь и промывали буферным раствором для промывания, в котором 0,05%-ный твин (Tween 20) был разбавлен 1X PBS. После трехкратного промывания добавляли по 200 мкл на лунку 1%-ный бычий сывороточный альбумин (BSA) и блокирующий буферный раствор, оставляли на 1 час при комнатной температуре и промывали еще три раза в тех же условиях. Затем в лунки вносили по 100 мкл сыворотки, полученной от подопытных мышей, и давали реакции протекать в течение 2 часов при комнатной температуре, после чего промывали пять раз в тех же условиях. После промывания в лунки вносили по 100 мкл детектирующих антител (1:500), конъюгированных с пероксидазой хрена (HRP; 1:250), разведенных 1%-ным BSA, и оставляли на 1 час при комнатной температуре. Затем промывали семь раз и прибавляли в лунки по 100 мкл раствора субстрата и наблюдали за развитием окраски в темноте. Когда развитие окраски завершалось, реакцию останавливали добавлением раствора H₂SO₄ (2N+DW) в количестве 100 мкл на лунку и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм с помощью микропланшетного ридера для ELISA. Сравнение полученных уровней IL-4 (брали среднее из четырех измерении), наблюдавшихся через 1 неделю после введения ЕС-18 и через 2 недели, показало, что в контрольной группе мышей, которые получали только оливковое масло, уровень IL-4 снизился на 50%v, а в той группе, в которой животным вводили ЕС-18, уровень IL-4 снизился на 80%. Таким образом, было подтверждено, что образование IL-4 при атопической индукции быстро слабеет под влиянием ЕС-18 (см. фиг. 2).

Экспериментальный пример 2. Подавление экспрессии IgE под действием ЕС-18

Уровни экспрессии IgE определяли, используя сыворотку крови мышей, методом ELISA, как описано в Экспериментальном примере 1. Для иммуноферментного анализа в качестве иммобилизованных антител брали мышиные антитела против IgE (BD bioscience), которые разводили 1X PBS до концентрации 2 мкг/мл и наносили на 96-луночный планшет (Thermo) по 200 мкл на лунку, оставляли на 12 часов и промывали буферным раствором для промывания, в котором 0,05%-ный твин (Tween 20) был разбавлен 1X PBS. После трехкратного промывания добавляли по 200 мкл на лунку 1%-ный бычий сывороточный альбумин (BSA) и блокирующий буферный раствор, оставляли на 1 час при комнатной температуре, после чего промывали окончательно. Затем в лунки вносили по 100 мкл сыворотки, полученной от подопытных мышей, и давали реакции протекать в течение 1 часа при комнатной температуре, после чего отмывали не прореагировавший IgE в тех же условиях. После промывания в лунки вносили по 100 мкл детектирующих антител (BD bioscience), разведенных 1%-ным BSA до концентрации 2 мкг/мл, и оставляли на 1 час при комнатной температуре. Затем промывали шесть раз и прибавляли в лунки по 100 мкл смеси стрептавидин-HRP (Thermo) с 1%-ным BSA в соотношении 1:10 000. Инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре, промывали шесть раз, прибавляли в каждую лунку субстрат и наблюдали за развитием окраски в темноте. Когда развитие окраски завершалось, реакцию останавливали добавлением раствора H₂SO₄ (2N+DW) в количестве 50 мкл на лунку и измеряли оптическую плотность при длине волны 450 нм. Сравнение полученных уровней IgE, наблюдавшихся через 1 неделю после введения ЕС-18 и через 2 недели, показало, что в контрольной группе мышей, которые получали только оливковое масло, уровень IgE снизился на 22%, а в той группе, в которой животным вводили ЕС-18, уровень IgE снизился на 50% (см. фиг. 3).

Экспериментальный пример 3. Визуальное наблюдение улучшения состояния при атопии под действием ЕС-18

Для создания модели атопического заболевания в лабораторных условиях применяли индукцию контактной гиперчувствительности (CHS) путем сенсибилизации 2,4-динитро-1-хлорбензололм (DNCB). Для этого разводили DNCB растворителем, который представлял собой смесь ацетона и оливкового масла в соотношении 4:1, до концентрации 0,2%, и смазывали этим раствором мышам кожу; опытным путем режим воздействия подбирали так, что выраженные проявления искусственно вызванной атопии можно было наблюдать через две недели после смазывания. Для определения степени выраженности атопического заболевания оценивали возникшие изменения кожи (покраснение/геморрагические явления, шелушение/сухость, отек, экскориации/эрозия) по четырехбалльной шкале (0 - отсутствие данного признака, 1 - признак слабо выражен, 2 - признак умеренно выражен, 3 - признак ярко выражен), и затем подсчитывали итоговый индекс от нуля до 12. В контрольной группе мышей и в группе, в которой животные получали ЕС-18, выраженные проявления атопического заболевания (индекс по визуальной оценке 10) достигалась через две недели после смазывания DNCB. В дальнейшем, чтобы поддерживать это состояние, смазывание DNCB делали раз в два дня.

На фиг. 4 представлены фотографии, демонстрирующие степень атопического заболевания на протяжении трех недель у мышей, получавших ЕС-18, и у особей контрольной группы, которым вводили только оливковое масло. Как иллюстрирует фиг. 4, у животных контрольной группы индекс выраженности проявлений атопического заболевания по визуальной оценке составлял через одну неделю «3», через две недели «10» и через три недели «6». А в группе, в которой животные получали ЕС-18, индекс выраженности проявлений атопического заболевания по визуальной оценке составлял через одну неделю «1», через две недели «8» и через три недели «3». Эти данные доказывают терапевтическую эффективность ЕС-18 в отношении поражений, связанных с атопическим дерматитом. В самом деле, через две недели после смазывания DNCB у мышей контрольной группы индекс выраженности проявлений атопического заболевания по визуальной оценке составлял «10», а у особей, получавших ЕС-18, держался на уровне «8». Это свидетельствует о том, что ЕС-18 подавляет проявления атопического заболевания. Также по визуальной оценке спустя три недели после смазывания DNCB в группе мышей, которым постоянно вводили ЕС-18, наблюдалось более быстрое лечение атопического заболевания и выздоровление, чем в контрольной группе: у животных, получавших ЕС-18, индекс выраженности проявлений атопического заболевания снижался с «8» до «3», а у контрольных особей - с «10» до «6».

Экспериментальный пример 4. Экспрессия интерлейкина-4 и гамма-интерферона после введения ЕС-18

Здоровым людям (36 человек) в течение четырех недель вводили ЕС-18. До этого и после этого у испытуемых брали кровь, выделяли лимфоциты и инкубировали их с конканавалином-А (Con-Α). Для определения цитокинов, а именно интерлейкина-4 (IL-4) и гамма-интерферона (IFN-γ), которые отделяли от лимфоцитов (Т-клеток), активированных конканавалином-А, культуральную среду инкубировали в течение 42 часов и хранили в замороженном виде. Очищенные антитела против цитокина, который нужно было определить (иммобилизуемые антитела), наносили на планшет (Nunc-Immuno Module, PolySorp) в количестве 0,2 мкг на лунку и оставляли на ночь при температуре 4°С. После тщательного промывания обрабатывали блокирующим буферным раствором (1%-ный бычий сывороточный альбумин) в течение 1 часа для подавления неспецифичного связывания. После промывания лунок в них вносили среду, в которой культивировались клетки, и оставляли на 2 часа для взаимодействия антител с антигеном. Прибавляли детектирующие антитела, связанные с пероксидазой или биотином, и оставляли при комнатной температуре на 1 час, после чего промывали. В случае антител, связанных с пероксидазой, сразу прибавляли субстрат - 3,3',5,5'-тетраметилбензидин (ТМВ). В случае антител, связанных с биотином, прибавляли стрептавидин-пероксидазу хрена (SAv-HRP), давали реакции протекать в течение 30 минут, затем промывали и тогда прибавляли ТМВ. Приблизительно через 10-30 минут в лунки вносили раствор для остановки реакции и измеряли поглощение при длине волны 450-570 с помощью автоматического микропланшетного ридера (Molecular Devices, шт. Калифорния, США). Так же, как описано выше, строили стандартную кривую зависимости поглощения от концентрации цитокина и количество цитокина в образце рассчитывали, подставляя значение поглощения образца. Рассчитанные таким образом изменения количества цитокинов и статистическая значимость полученных данных (Р<0,05) представлены в приведенной ниже таблице 1 и на фиг. 5-6.

Фиг. 5 представляет график, демонстрирующий уровень экспрессии цитокина, продуцируемого клетками Th2 (IL-4) в случае, когда здоровым индивидам в течение 4 недель вводили ЕС-18. Как видно на фиг. 5, у здоровых людей в результате введения ЕС-18 в течение 4 недель уровень экспрессии цитокина, продуцируемого клетками Th2 (IL-4), снижался. Фиг. 6 представляет график, демонстрирующий уровень экспрессии цитокина, продуцируемого клетками Th1 (IFN-γ) в случае, когда здоровым индивидам в течение 4 недель вводили ЕС-18. Как видно на фиг. 6, у здоровых людей в результате введения ЕС-18 в течение 4 недель изменения уровня экспрессии цитокина, продуцируемого клетками Тh1 (IFN-γ), не были однотипными.

Экспериментальный пример 5. Ослабление симптомов атопии у индивидов с атопическим заболеванием

Индивидам с выраженными симптомами атопического заболевания в течение двух недель ежедневно вводили ЕС-18 в дозе 500 мг/сут; изменение проявлений атопии иллюстрируется фиг. 7. Индивиду со слабо выраженной кожной сыпью ЕС-18 вводили каждый день в дозе 500 мг/сут в течение 2 суток; изменение проявлений заболевания иллюстрируется фиг. 8. Таким образом, как демонстрируют фиг. 7 и 8, подтверждается, что при введении ЕС-1 индивидам с атопическим заболеванием его проявления ослабевают.

Из приведенного выше описания специалистам в данной области техники понятно, что данное изобретение может быть воплощено и в других конкретных вариантах без отклонения от технической сущности или существенных признаков изобретения. Поэтому описанные выше примеры следует рассматривать как во всех отношениях иллюстративные и не имеющие ограничительного характера. Объем данного изобретения следует считать включающим все варианты в диапазоне, определяемом приведенным выше описанием и прилагаемой формулой изобретения, а не набором конкретных примеров; также в объем данного изобретения входят все модификации, проистекающие из эквивалентных вариантов.

Промышленная применимость

Моноацетилдиацилглицерины по данному изобретению можно использовать для изготовления фармацевтических композиций, композиций функциональных продуктов лечебного питания, композиций квазимедикаментов и косметических композиций для предотвращения или лечения атопического дерматита или улучшения состояния индивидов, страдающих этим заболеванием.

Изобретения относятся к химико-фармацевтической промышленности и представляют собой: фармацевтическую композицию, композицию функционального продукта лечебного питания, композицию квазимедикамента для предотвращения или лечения атопического дерматита, содержащие в качестве активного ингредиента моноацетилдиацилглицерин формулы 2,

Изобретение также включает в себя способ предотвращения или лечения атопического дерматита, включающий введение пациенту, не являющемуся человеком, любой из композиций, описанных выше. Моноацетилдиацилглицерины по данному изобретению эффективно подавляют секрецию IL-4 и IgE, не обладая побочными эффектами, они не токсичны и оказывают выраженное терапевтическое действие. 4 н. и 2 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл., 5 пр.

1. Фармацевтическая композиция для предотвращения или лечения атопического дерматита, содержащая в качестве активного ингредиента моноацетилдиацилглицерин формулы 2,

2. Композиция по п. 1, в которой моноацетилдиацилглицерин является природным веществом, выделенным из оленьих рогов.

3. Композиция по п. 1, в которой моноацетилдиацилглицерин ослабляет секрецию IgE.

4. Композиция функционального продукта лечебного питания для предотвращения атопического дерматита, содержащая в качестве активного ингредиента моноацетилдиацилглицерин формулы 2:

5. Композиция квази-медикамента для предотвращения или лечения атопического дерматита, содержащая в качестве активного ингредиента моноацетилдиацилглицерин, формулы 2:

6. Способ предотвращения или лечения атопического дерматита, включающий введение пациенту, не являющемуся человеком, композиции по любому из пп. 1-5.