Способ исследования повышения антибиотикочувствительности патогенной и условно-патогенной микрофлоры in vitro молочнокислой кормовой добавкой, содержащей культуру микроорганизмов Propionobacterium freundenreichii shermanii Ac-103 Российский патент 2018 года по МПК A61K35/74 C12Q1/00 

Описание патента на изобретение RU2646799C2

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано в лабораторной работе при изучении антибиотикочувствительности микроорганизмов.

Известен «Препарат для профилактики и лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта "ТоксиБиоВит"» (патент РФ №2475254, кл. A61K 35/74 от 13.12.2011) и способ его применения, включающий введение в организм веществ, тормозящих развитие патогенной микрофлоры, стимулирующих ферментную активность и антиоксидантную защиту, а также обладающих широким спектром микроэлементов и стимулирующих развитие полезных микроорганизмов, а именно метаболитов микроорганизмов Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Halobacterium halobium, иммобилизованных на активном носителе, представляющем собой смесь глауконита с клеточными оболочками пивных дрожжей Saccharomyces cerevisiae.

К недостаткам известного способа является отсутствие данных по росту антибиотикочувствительности к конкретному виду антибактериального вещества, а также отсутствие данных по росту показателей зон задержки роста тест-культуры до и после контакта с испытуемым супернатантом (надосадочная жидкость) культуры пробиотика.

Ближайшим техническим решением к данному изобретению, принятым за прототип, является способ оценки антибиотикочувствительности микроорганизмов, описанный в методических указаниях «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» (МУК №4.2.1890-04, 2004 г.), способ включает выращивание культуры тест-штамма микроорганизма на мясопептонном бульоне (МПБ) в течение 18-20 ч при Т=37,0±0,5°С, с последующим инкубированием на мясопептонном агаре (МПА) с дисками, пропитанными различными видами антибактериальных препаратов в течение 18-20 ч при Т=37,0±0,5°С.

Задача изобретения - расширение арсенала способов повышения антибиотикочувствительности микроорганизмов in vitro. Технический результат изобретения состоит в реализации этого назначения.

Решение задачи состоит в том, что способ повышения антибиотикочувствительности условно-патогенной микрофлоры in vitro молочнокислой кормовой добавкой, содержащей культуру микроорганизмов Propionobacterium freundenreichii shermanii Ас-103, включает использование молочнокислой кормовой добавки, содержащей культуру микроорганизмов Propionobacterium freundenreichii shermanii Ас-103 полученного в разные сроки культивирования в 1, 10, 20, 30 день. Согласно изобретению, к 0,5 мл мясо-пептонного бульона (МПБ) добавляют 0,5 мл супернатанта пробиотика, после чего вносят 0,5 мл МПБ суточной культуры условно-патогенной микрофлоры, полученный раствор инкубируют 18-24 ч при Т=37,0±0,5°С, после чего проводят определение антибиотикочувствительности микроорганизмов на мясо-пептонном агаре (МПА) с 24 видами антибактериальных препаратов дискодиффузионным методом.

Пример 1. Анализ изменения зоны задержки роста микроорганизмов при определении антибиотикочувствительности после контакта с супернатантом пробиотической культуры разных сроков культивирования показал разную чувствительность у исследуемых представителей условно-патогенной микрофлоры. Так, наибольший рост антибиотикочувствительности микроорганизмов отмечается после культивирования с десяти и тридцати дневными культурами (табл. 1).

Р<0,05

Рост антибиотикочувствительности Е. cloaceae 200, St. albus АТСС 25923, S. enteritidis 182, E.coli ATCC 25222, Pr. vulgaris 192, Kl. pneumonia 71 после контакта с Propionobacterium freundenreichii shermanii Ac-103 первого дня культивирования составил от 11,4 до 62,5%, десятого дня - от 20,7 до 96%, двадцатого дня от 34 до 44,2% и тридцатого дня от 53,1 до 77,7% соответственно.

Наибольшее увеличение антибиотикочувствительности (на 96%) отмечено у Е. cloaceae 200 после контакта с десятидневной молочно-кислой кормовой добавкой, содержащей культуру микроорганизмов Propionobacterium freundenreichii shermanii Ас-103.

Пример 2. Установлено, что на протяжении всего эксперимента, супернатант Propionobacterium freundenreichii shermanii Ac-103 разного срока культивирования, вызывает устойчивый рост количества антибактериальных препаратов, к которым чувствительны изучаемые штаммы условно-патогенной микрофлоры. Кроме того, увеличение срока инкубирования пробиотика совпадает со снижением количества малочувствительных препаратов у штаммов условно-патогенной микрофлоры (табл. 2).

Примечание: количество препаратов, к которым микрофлора устойчива - У, малочувствительна - М, чувствительна - Ч.

Похожие патенты RU2646799C2

название год авторы номер документа
Способ исследования повышения антибиотикочувствительности условно-патогенной микрофлоры in vitro молочнокислой кормовой добавкой, содержащей культуру микроорганизмов Lactobacillus acidophilus LA-5 2016
  • Шкиль Николай Николаевич
  • Филатова Екатерина Владимировна
  • Шкиль Николай Алексеевич
  • Швыдков Александр Николаевич
  • Чебаков Владимир Прокопьевич
  • Мотовилов Олег Константинович
  • Углов Владимир Александрович
RU2647761C2
СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОВЫШЕНИЯ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ УСЛОВНО-ПАТОГЕННОЙ МИКРОФЛОРЫ IN VITRO МОЛОЧНОКИСЛОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКОЙ, СОДЕРЖАЩЕЙ КУЛЬТУРУ МИКРООРГАНИЗМОВ STREPTOCOCCUS TERMOPHILUS TH-4 2017
  • Шкиль Николай Николаевич
  • Филатова Екатерина Владимировна
  • Шкиль Николай Алексеевич
  • Швыдков Александр Николаевич
  • Чебаков Владимир Прокопьевич
  • Мотовилов Олег Константинович
  • Углов Владимир Александрович
RU2678447C2
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ УСЛОВНО-ПАТОГЕННОЙ МИКРОФЛОРЫ МОЛОЧНОКИСЛОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКОЙ, СОДЕРЖАЩЕЙ КУЛЬТУРУ МИКРООРГАНИЗМОВ Bifidobacter longum Б-41 in vitro 2014
  • Шкиль Николай Николаевич
  • Филатова Екатерина Владимировна
  • Шкиль Николай Алексеевич
  • Швыдков Александр Николаевич
  • Чебаков Владимир Прокопьевич
RU2562590C1
Кормовая комплексная биологически активная добавка для животных и птиц 2019
  • Зозуля Юрий Викторович
  • Рожков Олег Александрович
  • Уваров Иван Павлович
  • Геворгиз Руслан Георгиевич
RU2708161C1
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ УСЛОВНО-ПАТОГЕННОЙ МИКРОФЛОРЫ ПРЕПАРАТОМ СЕРЕБРА АРГОВИТ in vitro 2013
  • Шкиль Николай Николаевич
  • Шкиль Николай Алексеевич
RU2567332C2
Кормовая добавка для сельскохозяйственных животных и птиц 2022
  • Потехина Рамзия Мухаметовна
  • Плотникова Эдие Миначетдиновна
  • Насыбуллина Жанна Равилевна
  • Милованкин Дмитрий Игоревич
  • Тремасова Анна Михайловна
  • Тарасова Евгения Юрьевна
RU2808208C1
Способ повышения бактерицидной активности окситетрациклина 2019
  • Шкиль Николай Николаевич
  • Шкиль Николай Алексеевич
  • Нефедова Екатерина Владимировна
  • Бурмистров Василий Александрович
  • Лазарева Марина Викторовна
  • Ларина Ольга Николаевна
  • Тимофеева Марина Александровна
RU2721909C1
ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА "БАКТИСТАТИН" 2005
  • Волков Михаил Юрьевич
  • Васильев Петр Геннадиевич
  • Воробейчиков Евгений Владимирович
  • Синица Александр Владимирович
  • Рогожин Александр Зотович
  • Котельников Роман Вячеславович
RU2287335C1
БУФЕРНАЯ СМЕСЬ ДЛЯ СТАБИЛИЗАЦИИ РУБЦА КРС С ДРОЖЖАМИ KLUYVEROMYCES MARXIANUS 2021
  • Фертикова Дарья Михайловна
  • Кислякова Елена Муллануровна
  • Селезнева Наталья Васильевна
  • Фертиков Вадим Олегович
RU2789871C2
Способ получения биопрепарата для коррекции метаболизма у поросят-сосунов 2020
  • Попов Виктор Сергеевич
  • Воробьева Нелли Васильевна
  • Свазлян Гаяне Агасовна
  • Наумов Николай Михайлович
RU2758880C1

Реферат патента 2018 года Способ исследования повышения антибиотикочувствительности патогенной и условно-патогенной микрофлоры in vitro молочнокислой кормовой добавкой, содержащей культуру микроорганизмов Propionobacterium freundenreichii shermanii Ac-103

Способ повышения антибиотикочувствительности Ent. cloaceae 200, St. albus АТСС 25923, S. enteritidisl82, E.coli ATCC 25222, Pr. Vulgaris 192, Kl. pneumonia 71 in vitro включат использование молочнокислой кормовой добавки, содержащей культуру микроорганизмов Propionobacterium freundenreichii shermanii Ас-103, полученную в разные сроки культивирования в 1, 10, 20, 30 день, при этом к 0,5 мл мясо-пептонного бульона (МПБ) добавляют 0,5 мл супернатанта пробиотика, после чего вносят 0,5 мл МПБ суточной культуры условно-патогенной микрофлоры, полученный раствор инкубируют 18-24 ч при Т=37,0±0,5°С, затем проводят определение антибиотикочувствительности микроорганизмов на МПА с 24 видами антибактериальных препаратов дискодиффузионным методом. Использование способа позволяет повысить антибиотикочувствительность in vitro различных условно-патогенных микроорганизмов. 2 табл.

Формула изобретения RU 2 646 799 C2

Способ исследования повышения антибиотикочувствительности Ent. cloaceae 200, St. albus АТСС 25923, S. enteritidisl82, E.coli ATCC 25222, Pr. Vulgaris 192, Kl. pneumonia 71 in vitro молочнокислой кормовой добавкой, содержащей культуру микроорганизмов Propionobacterium freundenreichii shermanii Ас-103, включающий использование молочнокислой кормовой добавки, содержащей культуру микроорганизмов Propionobacterium freundenreichii shermanii Ас-103, полученную в разные сроки культивирования в 1, 10, 20, 30 день, при этом к 0,5 мл мясо-пептонного бульона (МПБ) добавляют 0,5 мл супернатанта пробиотика, после чего вносят 0,5 мл МПБ суточной культуры условно-патогенной микрофлоры, полученный раствор инкубируют 18-24 ч при Т=37,0±0,5°С, затем проводят определение антибиотикочувствительности микроорганизмов на МПА с 24 видами антибактериальных препаратов дискодиффузионным методом.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2018 года RU2646799C2

Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам
Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды 1921
  • Богач Б.И.
SU4A1
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ УСЛОВНО-ПАТОГЕННОЙ МИКРОФЛОРЫ МОЛОЧНОКИСЛОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКОЙ, СОДЕРЖАЩЕЙ КУЛЬТУРУ МИКРООРГАНИЗМОВ Bifidobacter longum Б-41 in vitro 2014
  • Шкиль Николай Николаевич
  • Филатова Екатерина Владимировна
  • Шкиль Николай Алексеевич
  • Швыдков Александр Николаевич
  • Чебаков Владимир Прокопьевич
RU2562590C1
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ УСЛОВНО-ПАТОГЕННОЙ МИКРОФЛОРЫ ПРЕПАРАТОМ СЕРЕБРА АРГОВИТ in vitro 2013
  • Шкиль Николай Николаевич
  • Шкиль Николай Алексеевич
RU2567332C2
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ 1991
  • Щедрин В.И.
  • Лямкин Г.И.
  • Базиков И.А.
RU2045576C1
СПОСОБ ИНДИВИДУАЛЬНОГО ПОДБОРА ПРЕПАРАТОВ, СОДЕРЖАЩИХ ПРОБИОТИЧЕСКИЕ ШТАММЫ ЛАКТОБАКТЕРИЙ ДЛЯ ЭФФЕКТИВНОЙ ИНТРАВАГИНАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ 2012
  • Кремлева Елена Александровна
  • Черкасов Сергей Викторович
  • Бухарин Олег Валерьевич
RU2500411C2

RU 2 646 799 C2

Авторы

Шкиль Николай Николаевич

Филатова Екатерина Владимировна

Шкиль Николай Алексеевич

Швыдков Александр Николаевич

Чебаков Владимир Прокопьевич

Мотовилов Олег Константинович

Углов Владимир Александрович

Даты

2018-03-07Публикация

2016-05-26Подача