ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ФОСФОЛИПИДА В ТАКОЙ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ Российский патент 2018 года по МПК A61K31/683 A61K31/192 A61K31/196 A61K47/44 A61K9/10 

Изобретение относится к фармацевтической композиции для применения для человека и животных с родовым понятием пункта 1 формулы изобретения.

Фармацевтические композиции для применения для человека и животных, содержащие по меньшей мере один системно и/или локально действующий, местно наносимый активный ингредиент, известны уже в течение длительного времени.

Например, в EP0704206A описывается такая фармацевтическая композиция, которая представлена в виде жидкости и которую можно распылять местно в виде капель. Также, такая фармацевтическая композиция известна из DE102010027315, где она представлена в виде жидкости и наносится местно у человека и животных в виде пены, при этом обе известные композиции вместе включают фосфолипид, содержащий фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 60% по весу относительно общего содержания фосфолипида. Содержание масла этого фосфолипида не определено количественно ни в EP0704206, ни в DE102010027315A. Хотя в EP0704206 упоминается концентрация 9% по весу остальных не уточненных обычных сопутствующих липидов для описанного там фосфолипидного гелеобразующего средства, в нем не говорится о том, как определяются эти сопутствующие липиды, в то время как в DE102010027315A1 действительно описываются масляные компоненты, но также не объясняется, как эти масляные компоненты анализируют количественно.

Целью настоящего изобретения является обеспечение фармацевтической композиции современного уровня техники с особенно высокой способностью к проникновению у фармацевтически активных ингредиентов.

Эта цель решается в соответствии с настоящим изобретением с помощью композиции с характерными признаками пункта 1 формулы изобретения.

Краткое описание чертежей:

на фигуре 1 показана экспериментальная установка для сравнительного определения скорости проникновения активного ингредиента;

на фигуре 2 показаны результаты проникновения активного ингредиента кетопрофена в акцепторную среду в зависимости от концентрации масла фосфолипида; и

на фигуре 3 показаны результаты проникновения активного ингредиента диклофенака-натрия в акцепторную среду в зависимости от концентрации масла фосфолипида.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению, которая применяется для местного нанесения у человека и животных, содержит по меньшей мере один системно и/или местно действующий, местно наносимый фармацевтический активный ингредиент, который впоследствии называется активным ингредиентом. Кроме того, композиция по настоящему изобретению содержит по меньшей мере один фосфолипид, который улучшает транспорт активного ингредиента через клеточную мембрану при местном нанесении композиции по настоящему изобретению, при этом фосфолипид содержит фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 60% по весу относительно общего веса фосфолипида (сухой вес). Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению обеспечивается при такой жидкой консистенции, что ее можно распылять в виде капель или тумана (аэрозоля), или ее можно наносить местно в виде пены с помощью подходящих традиционных аппликаторов, например, с помощью аппликатора, описанного в DE102010027315A1, который производится и распространяется компанией Rexam/Airspray (www.rexamairspray.com) под маркой «M3 Minischäumer» (M3 мини-вспениватель), или с помощью подходящих аппликаторов, которые производятся и распространяются компанией Calmar/MeadWestvaco (Keltec), при этом содержание DE102010027315 включается в раскрытие настоящей заявки. В соответствии с настоящим изобретением в заявленной композиции содержится такой фосфолипид, который, помимо по меньшей мере 60% по весу фосфатидилхолина, содержит также масло в концентрации максимум 7,5% по весу и, в частности, масло в концентрации от 7,5% по весу и до 2% по весу относительно сухого общего веса фосфолипида. При этом, данное масло, которое включено в фосфолипид в композиции по настоящему изобретению, количественно определяется в соответствии с аналитическими способами, описываемыми после самого начала примеров под заголовком «Количественное определение масла, содержащегося в фосфолипидах».

Композиция по настоящему изобретению демонстрирует ряд преимуществ. Так, во-первых отмечается, что композиция по настоящему изобретению обладает улучшенной фармацевтической эффективностью, которая сводится к тому, что ускоренное проникновение и, в частности, ускоренное прохождение системно и/или местно действующего фармацевтического активного ингредиента достигается выбором описанного ранее конкретного фосфолипида, который характеризуется с одной стороны минимальной концентрацией фосфатидилхолина 60% по весу, а с другой стороны ограниченной концентрацией масла максимум 7,5% по весу и, в частности, концентрацией масла от 7,5% по весу до 2% по весу, так что данные активные ингредиенты могут достичь определенного участка-мишени, соответственно, при более высоких концентрациях и/или быстрее во время местного нанесения фармацевтической композиции. Кроме того, можно было наблюдать, что улучшение устойчивости при хранении композиции по настоящему изобретению обусловлено ограничением концентрации масла в фосфолипидах, присутствующих в композиции по настоящему изобретению, что является следствием того, что такие масла, обычно присутствующие в фосфолипидах, имеют высокую концентрацию ненасыщенных двойных связей с относительно высокой чувствительностью к окислению при хранении в атмосфере воздуха. В случае если такие процессы окисления происходят все чаще, в соответствии с предположениями изобретателя настоящей заявки, они могут приводить к тому, что могут появляться нежелательные продукты окисления, которые, в свою очередь, катализируют и/или приводят к ускоренному распаду активного ингредиента и/или фосфолипида, что может приводить к сниженной устойчивости при хранении и/или сниженной фармацевтической эффективности. Если происходят ранее описанные процессы окисления масла, присутствующего в фосфолипиде, и если эти продукты разложения масла приводят к разложению фосфолипида или катализируют подобное, то уже низкие следовые количества продуктов разложения фосфолипида приводят к появлению неприятного и нежелательного запаха, который становится все сильнее, чем дольше композиция по настоящему изобретению хранится после первого применения. Такое появление запаха удерживает пациента от применения композиции по настоящему изобретению в том объеме, который показан или необходим с медицинской точки зрения.

По утверждению изобретателя, вышеупомянутые ускоренные прохождение и проникновение композиции по настоящему изобретению снижаются вследствие того, что в масле содержатся преимущественно свободные жирные кислоты, стеролы, моно- и диглицериды, триглицериды, токоферолы и/или сложные эфиры жирных кислот, а также аналогичные субстанции, которые могут отрицательным образом влиять на проникновение и/или прохождение активного ингредиента.

В частности, если композиция по настоящему изобретению содержит такой фосфолипид, который включает масло в концентрации максимум 5,8% по весу и, в частности, масло в концентрации от 5,8% по весу до 2% по весу, преимущества, описанные ранее в связи с композицией по настоящему изобретению, дополнительно усиливаются.

Даже более явное улучшение преимуществ возникает в композиции по настоящему изобретению в том случае, если она содержит такой фосфолипид, в котором масло составляет менее 4,8% по весу и, в частности, от 2% по весу до 4,8% по весу.

Как описывается ранее в связи с композицией по настоящему изобретению, композиция по настоящему изобретению содержит по меньшей мере один фосфолипид, при этом предпочтительно применяется смесь фосфолипидов, которая, помимо фосфатидилхолина в качестве основного компонента, содержит лизофосфатидилхолин, фосфатидную кислоту, фосфатидилэтаноламин и/или фосфатидилинозитол.

Кроме того, применяемый в настоящем описании термин «и/или» охватывает аддитивно, а также альтернативно этим самым связанные отдельные элементы перечня, так что эти элементы представляются необязательно связанными с «и» и, соответственно, с «или». Более того, термины, применяемые в единственном числе, конечно, также включают множественное число.

К тому же, отмечается, что применяемый в настоящем описании термин фосфолипид охватывает, разумеется, не только единичный фосфолипид, но также смесь фосфолипидов, при этом фосфолипид и, соответственно, фосфолипидная смесь могут быть природного или синтетического происхождения.

Таким образом, большей частью, любой фосфолипид может содержаться в композиции по настоящему изобретению, когда этот фосфолипид содержит фосфатидилхолин в вышеупомянутой минимальной концентрации по меньшей мере 60% по весу, а также масло в максимальной концентрации, описанных ранее в связи с композицией по настоящему изобретению. Следовательно, также настоящим описанием охватываются такие варианты осуществления композиции по настоящему изобретению, в которых фосфолипид и, соответственно, фосфолипидная смесь, присутствующие в композиции по настоящему изобретению, представляет собой синтетический фосфолипид и, соответственно, синтетическую фосфолипидную смесь. Предпочтительно, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит такой фосфолипид и, соответственно, фосфолипидную смесь, которая выделена из растительных компонентов, в частности, из семян зерновых культур и/или семян с высоким содержанием масла и, предпочтительно, из соевых бобов или из подсолнечника.

В другом варианте осуществления фармацевтической композиции по настоящему изобретению она содержит такой фосфолипид, концентрация фосфатидилхолина в котором составляет по меньшей мере 75% по весу, при этом особенно предпочтительная структура композиции по настоящему изобретению включает такой фосфолипид, в котором концентрация фосфатидилхолина составляет 78,1% по весу ± 3% по весу. Вышеописанные величины концентрации фосфатидилхолина относятся к общему сухому весу фосфолипида.

В описании композиции по настоящему изобретению выше неоднократно упоминается то, что фосфолипид также может представлять собой фосфолипидную смесь. В частности, фосфолипид, присутствующий в композиции по настоящему изобретению, включает лизофосфатидилхолин в концентрации менее 5,6% по весу, предпочтительно в концентрации от 5,5% по весу до 1,5% по весу, фосфатидилэтаноламин в концентрации менее 5,2% по весу, предпочтительно в концентрации от 5,1% по весу до 2,3% по весу и фосфатидную кислоту в концентрации менее 2,9% по весу, предпочтительно в концентрации от 2,5% по весу до 0,9% по весу, каждая из которых относительно общей концентрации фосфолипида. Кроме того, в композиции по настоящему изобретению могут присутствовать гликофосфолипиды, в частности лизофосфолипиды, предпочтительно в низких концентрациях, что означает концентрации в диапазоне от приблизительно 1% по весу до 2% по весу.

Предпочтительно композиция по настоящему изобретению доступна в виде жидкой композиции перед ее нанесением, при этом она наносится в виде тумана, капель или пены. При этом, композиция по настоящему изобретению содержит тогда органический или неорганический растворитель, в зависимости от желаемой и/или требуемой для конкретного применения вязкости, при этом в композиции по настоящему изобретению содержатся вода в качестве неорганического растворителя и физиологический безопасный растворитель в качестве органического растворителя.

«Вода» в рамках настоящего описания включает все водные системы, которые являются физиологически безопасными и законно признанными, и, помимо дистиллированной воды, деионизированной воды и воды высокой очистки, также охватывает такие водные системы, которые содержат подходящую буферную систему для коррекции значения pH или которые также содержат соли, в частности поваренную соль.

Композиция по настоящему изобретению содержит, помимо воды или в дополнение к воде, в качестве предпочтительного органического, физиологически безопасного растворителя по меньшей мере один спирт, в частности, этанол, изопропиловый спирт, один или несколько гликолей и/или глицерин. При применении этанола, концентрация этанола в композиции по настоящему изобретению в общем ограничена, таким образом предпочтение отдается концентрации 8% по весу и, в частности, концентрации от 2% по весу до 6% по весу, каждая относительно общего веса композиции по настоящему изобретению.

Подходящие гликоли, которые предполагается применять в качестве органического растворителя в композиции по настоящему изобретению в конкретных вариантах осуществления, выбирают из группы, включающей пропиленгликоль, бутиленгликоль, пентиленгликоль и гексиленгликоль.

В дополнительном варианте осуществления обеспечивается, что композиция по настоящему изобретению содержит смесь растворителей, полученную из воды и по меньшей мере одного спирта, предпочтительно изопропилового спирта.

В зависимости от желаемой и/или требуемой для конкретного применения вязкости концентрация неорганического и/или органического растворителя в композиции по настоящему изобретению варьирует. В жидкой композиции, концентрация воды составляет от 50% по весу до 95% по весу, в частности, от 55% по весу до 75% по весу, и концентрация по меньшей мере одного органического растворителя, предпочтительно спирта, составляет от 5% по весу до 50% по весу, в частности от 8% по весу до 25% по весу.

Что касается по меньшей мере одного фармацевтического активного ингредиента, присутствующего в композиции по настоящему изобретению, отмечается, что фармацевтический активный ингредиент представляет собой таковой, обладающий локальной и/или системной фармацевтической эффективностью во время местного нанесения. Активный ингредиент, присутствующий в композиции по настоящему изобретению, в частности, выбирают из группы, которая включает местные анестетики, противоаллергические средства, наружные средства, активные ингредиенты против гриппозных инфекций и простудных заболеваний, активные ингредиенты для лечения нейропатий, активные ингредиенты для лечения нарушения кровообращения, химиотерапевтические лекарственные средства, хинин, противогрибковые средства, антибиотики, талидомид, серотонин, эйкозаноиды, аналгезирующие средства, противосудорожные средства, нестероидные противоревматические средства, лейкотриены, ингибиторы лейкотриена, андрогены, антиандрогены, кортикоиды, антагонисты опиатных рецепторов, вещества, ингибирующие свертывание крови, ингибиторы агрегации тромбоцитов, антагонисты гистамина, регуляторные и ферментативно действующие пептиды и белки, нуклеиновые кислоты (одно– и двухцепочечная ДНК, одно– и двухцепочечная РНК, мяРНК, олигонуклеотиды ДНК, олигонуклеотиды РНК) и олигопептиды, противозудные средства, противодиабетические средства, простагландины, ингибиторы синтеза простагландина, вещества, оказывающие противовирусное или вирусостатическое действие, вещества, оказывающие антимикробное действие, активные ингредиенты против прионов, иммуносупрессорные средства, гормоны, активные ингредиенты для лечения бородавок и ран, в частности, хронических ран, витамины, экстракты из растений или эссенции экстрактов из растений, психотропные лекарственные средства, активные ингредиенты, которые воздействуют на сон, аналептические средства, средства для наркоза, миорелаксанты, противоэпилептические средства, противопаркинсонические средства, противорвотные средства, противопаразитарные средства, ингредиенты, действующие на ганглии, ингредиенты, действующие на симпатическую нервную систему, ингредиенты, действующие на парасимпатическую нервную систему, лекарственные средства, оказывающие антибактериальное действие, антагонисты кальция, сердечно-сосудистые средства, противоастматические средства, противокашлевые средства, отхаркивающие средства, средства, действующие на печень, мочегонные средства, холеретики, дезинфектанты, микроэлементы, противоинфекционные средства, цитостатические средства, антиметаболиты, антагонисты гормонов, иммуномодуляторы, а также производные и соли вышеупомянутых активных ингредиентов.

В композиции по настоящему изобретению концентрация активного ингредиента варьирует в зависимости от конкретного активного ингредиента и вида местного нанесения, и составляет от 0,01% по весу до 15% по весу относительно общего веса композиции по настоящему изобретению.

В частности, подходящие варианты осуществления, которые отличаются особенно высокой фармацевтической эффективностью при местном нанесении, содержат аналгезирующее средство в качестве по меньшей мере одного фармацевтического активного ингредиента, которое выбрано из группы, состоящей из диклофенака, кетопрофена и ибупрофена.

Если в ранее описанном варианте осуществления в качестве активного ингредиента выбран диклофенак, тогда композиция по настоящему изобретению преимущественно содержит производное диклофенака и, предпочтительно, соль щелочного металла диклофенака, в частности, он присутствует в композиции по настоящему изобретению в виде натриевой соли.

В случае местно наносимого действия по настоящему изобретению, которое содержит диклофенак в качестве активного ингредиента, хорошие результаты можно достичь тем, что диклофенак и, в частности, соль щелочного металла диклофенака и, предпочтительно, натриевая соль диклофенака, присутствуют в композиции в концентрации от 0,1% по весу до 10% по весу, предпочтительно в концентрации от 1% по весу до 6% по весу и, в частности, в концентрации от 2% по весу до 4 % по весу.

Однако если другой вариант осуществления композиции по настоящему изобретению содержит кетопрофен в качестве по меньшей мере одного активного ингредиента, то концентрация кетопрофена в композиции по настоящему изобретению варьирует от 5% по весу до 15% по весу, предпочтительно от 8% по весу до 12% по весу.

Что касается концентрации фосфолипида, который содержится в композиции по настоящему изобретению, в целом, отмечается, что эта концентрация зависит, в частности, от типа заболевания, которое следует лечить местно и/или системно композицией по настоящему изобретению, и вида нанесения, которое выбирают, будь то туман, капли или пена. В частности, путем варьирования концентрации по меньшей мере одного фосфолипида, присутствующего в композиции по настоящему изобретению, также можно варьировать вязкость жидкой композиции, так чтобы в соответствии с этим можно было устанавливать желаемый размер капель тумана или капель, или также с помощью концентрации фосфолипида можно варьировать характер пены. Композиция по настоящему изобретению предпочтительно содержит по меньшей мере один фосфолипид в концентрации от 0,5% по весу до 20% по весу, в частности, в концентрации от 5% по весу до 13% по весу.

Специальный вариант ранее описанных вариантов осуществления композиции по настоящему изобретению, дополнительно содержит, в частности, по меньшей мере одно комплексообразующее средство, предпочтительно этилентетрауксусную кислоту, по меньшей мере одно буферное средство, в частности, фосфатный буфер, по меньшей мере один антиоксидант, предпочтительно пальмитоиласкорбиновую кислоту, по меньшей мере одно отдушку и/или одно ароматизирующее вещество.

Применяемый в настоящем тексте термин «местный» включает любое ограниченное наружное нанесение композиции по настоящему изобретению, в частности, нанесение на поверхность кожи человека и животного. При этом термин кожа охватывает не только соответственно пораженные части кожи, но также и здоровые части кожи, а также любые доступные поверхности тела человека и животного, на которых может применяться композиция по настоящему изобретению для локального нанесения и/или системного применения, помимо кожи или волосистой части кожи головы как таковых, в частности, такие как ногти, волосы, зубы, копыта или слизистые оболочки рта, носа, влагалища или крайней плоти, части уха и, в частности, внутренние части уха, часть выходного отверстия кишечника и прямая кишка, части глаз, в частности, часть под веком, как например, конъюнктива, роговица и слезный мешок.

Настоящее изобретение дополнительно нацелено на применение по меньшей мере одного фосфолипида в качестве усилителя проникновения и/или прохождения в фармацевтической композиции, описываемой ранее в качестве фармацевтической композиции по настоящему изобретению, применяемой у человека и животных, содержащей по меньшей мере один системно и/или локально действующий местно наносимый активный ингредиент. Для транспорта этого активного ингредиента через клеточные мембраны применение по настоящему изобретению характеризуется тем, что фосфолипид, содержащий фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 60% по весу относительно фосфолипида, дополнительно содержит масло в концентрации от максимум 7,5% по весу 2% по весу. При этом данная фармацевтическая композиция имеет такую жидкую консистенцию, что ее можно разбрызгивать в виде капель или пены.

Аналогичное или идентичное применение по настоящему изобретению охватывает все преимущества, описываемые выше в связи с фармацевтической композицией по настоящему изобретению, поэтому, чтобы избежать повторов, на них явно делается ссылка. В частности, следует подчеркнуть, что было показано, что концентрация масла оказывает значительное влияние на характер прохождения и проникновения по меньшей мере одного активного ингредиента. Применяемый для местного нанесения активный ингредиент быстрее транспортируется в или через соответствующий барьер, предпочтительно через кожу, волосистую часть кожи головы, покров, ногти, волосы, зубы, копыта, слизистую оболочку рта, носа, влагалища или крайней плоти, через части уха, часть выходного отверстия кишечника и прямую кишку, часть глаз, в частности, часть под веком.

При этом улучшение в повышенном проникновении и/или прохождении определяется как наибольшее, если концентрация масла в фосфолипиде составляет от 7,5% по весу до 2% по весу, предпочтительно от 5,8% по весу до 2% по весу и, в частности, от 4% по весу до 2% по весу, как это четко подробно показано на фигурах 2 и 3 из примеров.

Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения предполагает, таим образом, что фосфолипид представляет собой смесь фосфолипидов, которая помимо фосфатидилхолина дополнительно содержит, лизофосфатидилхолин, фосфатидную кислоту, фосфатидилэтаноламин и/или фосфатидилинозитол.

Предпочтительно, фосфолипид, наносимый при применении по настоящему изобретению, представляет собой такой фосфолипид, который выделен из растительных компонентов, в частности, из семян зерновых культур и/или семян с высоким содержанием масла и, предпочтительно, из бобов сои или из подсолнечника.

В частности, когда для применения по настоящему изобретению фосфолипид содержит фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 75% по весу, вышеописанное усиление характера прохождения и проникновения дополнительно увеличивается, при этом эта концентрация и нижеследующие концентрации относятся к сухому весу соответствующего фосфолипида.

Особенно целесообразно, если фосфолипид в применении по настоящему изобретению содержит лизофосфатидилхолин в концентрации менее 5,6% по весу, фосфатидилэтаноламин в концентрации менее 5,2% по весу и фосфатидную кислоту в концентрации менее 2,9% по весу.

В частности, фосфолипид в применении по настоящему изобретению содержит такое масло, которое включает свободные жирные кислоты, стеролы, моно- и диглицериды, триглицериды, токоферол и/или сложные эфиры жирных кислот.

Преимущественные варианты осуществления композиции по настоящему изобретению и применения по настоящему изобретению описаны в зависимых пунктах формулы изобретения.

Далее композиция по настоящему изобретению и применение по настоящему изобретению будут уточнены посредством примеров в сочетании с фигурами.

Количественное определение масла, содержащегося в фосфолипиде

Фосфолипид, который следует проанализировать, взвешивают, растворяют в от приблизительно 15 мл до 20 мл диэтилового эфира и разделяют количественно на хроматографической колонке, как описывается далее, с применением в качестве элюента от приблизительно 130 мл до 150 мл диэтилового эфира. Весь эфирный элюат собирают в предварительно взвешенную круглодонную колбу. Затем собранный элюат на основе диэтилового эфира перегоняют в ротационном выпарном аппарате под вакуумом и круглодонную колбу с присутствующими в ней маслами снова взвешивают после охлаждения воздухом в стандартной атмосфере, при этом не содержащие масла фосфолипиды поглощаются в колонке адсорбентом и остаются там. На основании этого рассчитывают процентную долю масла, содержащегося в фосфолипиде, по следующей формуле:

E = вес образца, отобранного из исходного вещества фосфолипида [г];

LK = собственный вес круглодонной колбы [г];

R = вновь измеренный вес круглодонной колбы после выпаривания диэтилового эфира и хранения при стандартной атмосфере [г];

Ö = процентное содержание масла в исходном веществе фосфолипида [%].

Ранее указанные значения веса в граммах определяли на аналитических весах с точностью 0,0001 г, при этом исходное вещество фосфолипида, которое следует проанализировать, точно взвешивают при величине приблизительно 1 г.

Подготовку колонок осуществляют следующим образом.

Силикагель, применяемый в качестве адсорбента (силикагель 60, 0,063–0,2 мм, например, производитель: Merck, номер товара 7754), предварительно доводят до постоянного содержания воды 14,3% по весу. С этой целью содержание воды в конкретном применяемом силикагеле заранее определяют титрованием по Карлу Фишеру и добавляют недостающее количество воды для получения содержания воды 14,3% по весу. В обработанном таким образом силикагеле содержание воды определяют вновь титрованием по Карлу Фишеру с тем, чтобы удостовериться, что содержание воды в силикагеле составляет 14,3% по весу.

30 г силикагеля, который довели до содержания воды 14,3% по весу, суспендируют в диэтиловом эфире и вносят в хроматографическую колонку, диаметр которой составляет 25 мм. Избыток эфира сливают из колонки, чтобы остался слой эфира выше адсорбента на 1 см. На подготовленную таким образом колонку наносят образец, который следует проанализировать, и производят разделение, как это описывается вначале.

Все применяемые в этом анализе растворители имеют чистоту – ч.д.а.

Получение фосфолипида с различным содержанием масла

Описанный ранее аналитический и гравиметрический способ количественного определения содержания масла модифицировали таким образом, что описанное разделение масла с помощью колоночной хроматографии теперь применили в качестве препаративного разделения с помощью колоночной хроматографии для получения нижеописанных фосфолипидов, которые обозначили как фосфолипид 1-5, отличающихся содержанием масла.

Тем самым, это осуществляли следующим образом:

4500 г силикагеля, содержание воды в котором доведено до 14,3% по весу, суспендируют в диэтиловом эфире и вносят в препаративную хроматографическую колонку, при этом содержание воды в силикагеле доводят и контролируют, как описано ранее в связи с количественным определением содержания масла в фосфолипиде. Избыток эфира сливают из колонки, чтобы остался слой эфира выше адсорбента на 1 см. На таким образом подготовленную колонку наносят образец фосфолипида, который следует разделить и который растворен в приблизительно 2,5 л диэтилового эфира (вес отобранного образца приблизительно 150 г), и разделяют так, как это описано вначале в связи с количественным определением масла. Собранный элюат на основе диэтилового эфира перегоняют под вакуумом, при этом экстрагируя таким образом выделенное масло. При этом можно выделить приблизительно 140 г масла.

Адсорбент, нагруженный свободным от масла фосфолипидом, извлекли из препаративной колонки и тщательно удалили диэтиловый эфир.

Высушенный таким образом абсорбент экстрагировали несколько раз смесью хлороформа и метанола (2:1, об./об.), при этом экстракты не содержащего масло фосфолипида объединяли. После тщательного отделения смеси растворителей выделенный таким образом сухой фосфолипид взвешивали, с последующим получением пяти аналогичных относительно фосфолипида концентрированных образцов, и растворяли в этаноле. Масло, экстрагированное ранее при разделении диэтиловым эфиром, добавили к каждому из пяти растворов фосфолипида в этаноле в заданных количествах (2% по весу, 4% по весу, 5,8% по весу, 7,5% по весу, 9% по весу), при этом масло также предварительно растворили в этаноле. После интенсивного перемешивания каждого не содержащего масла фосфолипида с маслом этанол удаляли, при этом получали следующие определенные количественно фосфолипиды 1-5, при этом эти фосфолипиды 1-5 применили для получения вариантов осуществления 1-10.

Таким образом, у пяти различных образцов фосфолипида показано следующее содержание масла:

фосфолипид 1, содержание масла 7,5% по весу;
фосфолипид 2, содержание масла 5,8% по весу;
фосфолипид 3, содержание масла 4% по весу;
фосфолипид 4, содержание масла 2% по весу; и
фосфолипид 5, содержание масла 9% по весу.

Все пять фосфолипидов (фосфолипид 1-5) содержат:

фосфатидилхолин в концентрации 76±3% по весу;
лизофосфатидилхолин в концентрации ≤ 6% по весу;
фосфатидиламин в концентрации ≤ 6% по весу; и
фосфатидную кислоту в концентрации ≤ 6% по весу,
при этом эти данные относительно сухого веса фосфолипида.

Кроме того, для всех фосфолипидов показано кислотное число менее 10, а также перекисное число менее 10.

Следующие примеры 1-10 получили при применении ранее описанных фосфолипидов 1-5.

Соответственно, каждый из примеров 1-5 содержит 10% по весу кетопрофена в качестве фармацевтического активного ингредиента и каждый из примеров 6-10 содержит 4% по весу диклофенака-натрия в качестве фармацевтического активного ингредиента.

Кроме того, каждый из примеров 1-5 содержит 59,48% по весу воды, 10% по весу пропиленгликоля, 8% по весу изопропилового спирта, 0,25% по весу натрия дигидрофосфата дигидрата, 0,57% по весу динатрия фосфата додекагидрата, 1,55% по весу раствора натрия гидроксида и 0,15% по весу масла мяты перечной.

Примеры 1-5 отличаются только тем, что хотя у них в действительности одинаковые количества ранее описанного и установленного фосфолипида, а именно 10% по весу, при этом предусматриваются ранее перечисленные фосфолипиды 1-5, отличающиеся концентрацией масла, указываемой ниже:

пример 1 содержит 10% по весу фосфолипида 1 (содержание масла 7,5% по весу);

пример 2 содержит 10% по весу фосфолипида 2 (содержание масла 5,8% по весу);

пример 3 содержит 10% по весу фосфолипида 3 (содержание масла 4% по весу);

пример 4 содержит 10% по весу фосфолипида 4 (содержание масла 2% по весу);

пример 5 содержит 10% по весу фосфолипида 5 (содержание масла 9% по весу).

Из вышеперечисленных 10% по весу фосфолипидов 1-5 каждый содержит 7,5% по весу фосфолипида 1-5 и 2,5% по весу абсолютного этанола.

Кроме того, каждый из примеров 6-10 содержит 56,38% по весу воды, 15% по весу пропиленгликоля, 10,25% по весу изопропилового спирта, 0,12% по весу натрия дигидрофосфата дигидрата, 0,20% по весу масла мяты перечной, 0,66% по весу динатрия фосфата додекагидрата, 0,04% по весу динатрия эдетата, 0,02% по весу пальмитоиласкорбиновой кислоты.

Примеры 6-10 отличаются только тем, что хотя у них в действительности одинаковые количества ранее описанного фосфолипида, а именно 13,33% по весу, при этом предусматриваются ранее перечисленные фосфолипиды 1-5, отличающиеся концентрацией масла:

пример 6 содержит 13,33% по весу фосфолипида 1 (содержание масла 7,5% по весу);

пример 7 содержит 13,33% по весу фосфолипида 2 (содержание масла 5,8% по весу);

пример 8 содержит 13,33% по весу фосфолипида 3 (содержание масла 4% по весу);

пример 9 содержит 13,33% по весу фосфолипида 4 (содержание масла 2% по весу);

пример 10 содержит 13,33% по весу фосфолипида 5 (содержание масла 9% по весу).

Среди вышеперечисленных 13,33% по весу фосфолипидов 1-5 каждый содержит 9,998% по весу фосфолипида 1-5 и 3,332% по весу абсолютного этанола.

Для всех примеров 1-5, содержащих кетопрофен в качестве активного ингредиента, применяли одинаковый способ приготовления. Таким образом, кетопрофен, пропиленгликоль и изопропиловый спирт смешивали в емкости для смешивания, при этом данный процесс смешивания осуществляли в присутствии азота или аргона.

Вместе смешивали приблизительно 90% по весу количества натрия дигидрофосфата, а также раствор динатрия фосфата и натрия гидроксида.

В предварительно полученную первую смесь добавили конкретный фосфолипид (фосфолипид 1-5) при температуре от 20°C до 25°C, а затем перемешивали, пока не получился прозрачный желтоватый раствор. Затем к этому прозрачному желтоватому раствору добавили предварительно смешанный буферный раствор, которые описан ранее как второй, при этом растворы перемешивали при температуре максимум 30°C (в присутствии аргона или азота) до получения гомогенного раствора, к которому добавили остальной буферный раствор и масло мяты перечной и значение рН которого довели до величины 7,3-7,5.

Для всех примеров 6-10, содержащих диклофенак-натрий в качестве активного ингредиента, применяли одинаковый способ приготовления. Таким образом, приблизительно 90% по весу воды (очищенная вода) смешали с динатрия фосфатом, натрия дигидрофосфатом и натрия эдетатом при температуре от 25°C и до 30°C и с частотой вращения 600 оборотов в минуту. Полученный таким образом раствор охладили до 20°C - 25°C.

Во второй емкости для смешивания смешали пропиленгликоль, изопропиловый спирт и конкретный фосфолипид (фосфолипид 1-5) при тщательном перемешивании до образования гомогенного раствора. В данную смесь при продолжении перемешивания добавили аскорбилпальмитат и диклофенак-натрий. Приготовленный таким образом гомогенный раствор перемешивали до получения прозрачного раствора, к которому затем, при постоянном перемешивании, добавили масло мяты перечной. После измерения значения pH, его довели до значения pH 7,4-7,6 посредством добавления натрия гидроксида или разведенной соляной кислоты. Во время приготовления температуру сохраняли постоянной от 20°C до 30°C.

Исследование проникновения ранее описанных примеров 1-10

Описанная в последовательном порядке модель in situ, показанная на фигуре 1, особенно подходит для сравнительного определения скорости проникновения. В основе этой модели лежит опыт многих экспериментов in vivo на поросятах и на испытуемых добровольцах. Она была разработана с учетом наиболее значимых условий in vivo и ее уже можно было испытать несколько раз, так как ее валидировали согласно соответствующим исследованиям in vivo на испытуемых добровольцах.

В экспериментальной установке для определения проникновения, показанной на фигуре 1, 90 мл акцепторной среды 13, которая покрыта ниже образца кожи, который следует исследовать, металлической решеткой 12, нагревают до 35°C и непрерывно перемещают посредством насоса 1 с 1000 мл/ч. Камера проникновения 5, которая заполнена акцепторной средой 13, имеет объем 50 мл, компенсирующий резервуар 3 для отбора образца и трубки 4 имеют общий объем 40 мл. Просвет может заполняться различными физиологическими растворами для кожи. На выбор акцепторной среды влияет растворимость активного ингредиента и его верификация.

Для активного ингредиента кетопрофена выбрали раствор фосфатного буфера с pH 7,4, а для активного ингредиента диклофенака-натрия выбрали раствор фосфатного буфера с pH 8,0. При выборе акцепторной среды учитывали установочные условия для конкретного активного ингредиента.

Камеру 5 заполнили без пузырей таким образом, чтобы могло происходить полное и устойчивое омывание ткани снизу. Площадь нанесения 7 составляет 28,3 см². Отбор образцов осуществляли с промежутками при помощи отбора вручную из циркулирующей среды с последующим автоматически сбором образцов для ВЭЖХ. Продолжительность эксперимента ограничивали до 8 часов, при этом определенные подходящие образцы акцепторной среды отбирали и анализировали в начальной точке, после 30 минут, одного часа, двух часов, четырех часов, шести часов и 8 часов.

Из-за расположения потока воздуха, скорости потока индуцируемого нагретого воздуха и вихревого движения на участке кожи роговой слой не увлажняется в используемой экспериментальной установке, показанной на фигуре 1. Таким образом, проводится циркуляция воздуха, которая предусматривает подачу воздуха 300 мл воздуха/минута при 23°C через канал 8, нагнетание в колпак 9, который расположен над участком нанесения 7, и в котором вентилятор 10 обеспечивает вихревое движение воздуха, и обратные воздушные каналы 11 для возврата воздуха.

Конкретный образец кожи, который следует исследовать, поместили на металлическую решетку 12, накрыли колпаком 9 (без окклюзии), обеспечили циркуляцию потока воздуха, который закручивается при помощи вентилятора 10. На образец кожи, помещенный на металлическую решетку 12, воздействовали конкретной композицией, при этом способ измерения для определения проникновения описывается далее. Для поддержания постоянной температуры воздуха и температуры акцепторной среды применялся регулятор температуры 2, который обозначен только схематически, поскольку колпак 6 накрывает конструкцию для измерения, главным образом, для предотвращения загрязнений.

Эксперименты in situ осуществляли с изолированной кожей живота человека от различных доноров. Возраст доноров составил от 40 до 50 лет. Исследования проводили с удаленной хирургическим путем кожей живота человека. Размер лоскутов кожи, которые были доступны, варьировал. Предполагается выполнение четырех тестов на каждом лоскуте кожи человека.

Участок нанесения, доступный для нанесения, составлял 28,3 см². Кожу отбирали свежей, транспортировали в сухом состоянии и охлаждали до 4°C. Эксперимент по проникновению начинали самое позднее через 2 часа. Кожу подготавливали путем отслаивания подкожной жировой ткани на приспособлении для отслаивания с настройкой глубины, и проверяли ее безупречное состояние с помощью испытания на герметичность в камере со средой путем промывания под давлением до и после исследования, а также под микроскопом. Толщина кожи (без жировой ткани) составляла 1 мм ± 0,1 мм. Макроскопически целостные образцы кожи, которые испытали на непроницаемость, переносили прямо в экспериментальное устройство, при этом образцы кожи фиксировали на решетке и доступные участки кондиционировали без окклюзии. Кондиционирование достигалось регуляцией температуры предварительного нагрева и нагреванием воздушных трубок, а также скоростью потока воздуха, который скользит над участком образца. Эти параметры поддерживались постоянными в течение одной серии испытаний. Образец кожи омывался снизу постоянной циркуляцией фосфатного буфера. Температуру образца кожи проверяли датчиками, а влажность контролировали корнеометром. Снабжение образца кожи происходило при помощи фосфатного буфера. В методах анализа учитывали возможное загрязнение кожи дезинфицирующим средством фенилртути боратом.

Жидкую композицию распределили равномерно на участок нанесения 28,3 см² при помощи микродозатора (закругленный наконечник). Через пять минут после первого нанесения распределение наносимой композиции повторили вновь.

При нанесении до 1 г композиции на участок нанесения 28,3 см² не отмечался излишек конкретной композиции на поверхности кожи в пределах участка нанесения.

Профили проникновения кетопрофена и диклофенака-натрия получили путем отбора образцов в двух повторностях после 0, 0,5, 1, 2, 4, 6 и 8 часов. Определение кетопрофена и диклофенака-натрия проходило непосредственно после взятия образцов автоматическим пробоотборником. Для оценки проникновения конкретного активного ингредиента его концентрацию определяли в акцепторной среде.

Следовательно, концентрацию кетопрофена определяли при помощи хроматографии под высоким давлением (колонка ВЭЖХ, Xterra RP 18 5 мкм, 4,6 x 150 мм – режим: изократический - поток: 1,0 мл.минута^-1, вещество потока: H₂O/CAN/KH₂PO₄, pH буфера 3,5 (55:43:2 (об./об./об.)), буфер: химические реагенты ч.д.а. + деионизированная вода; вещество потока не дегазировано) с применением УФ-детектора (УФ-детектор Waters Alliance 2795 c двухволновым детектором Waters 2487 при длине волны 254 нм).

Определение концентрации диклофенака-натрия также проходило при помощи хроматографии под высоким давлением с использованием УФ-детектора (система ВЭЖХ со следующими компонентами: насос ВЭЖХ Merck/Hitachi L-6200, (градиент на три компонента/градиент низкого давления), УФ-детектор Merck/Hitachi L-4000, двухлучевой прибор, предел измерения 195–380 нм, интегратор Merck/Hitachi D-2500, колонка ВЭЖХ: LiChrospher 100 (Merck), RP18 (5 мкм), длина 250 мм, система-картридж LiChroCART, вещество потока: метанол/цитратный буфер (3/1); вещество потока не дегазировано).

Результаты ранее описанного исследования проникновения для активного ингредиента кетопрофена обобщили ниже в таблице 1 и относящейся к ней фигуре 2, а результаты для активного ингредиента диклофенака-натрия обобщили ниже в таблице 2 и относящейся к ней фигуре 3.

Во всех анализах на образец кожи всегда наносили одинаковое ранее указанное количество композиции, которое соответствует концентрации активного ингредиента приблизительно 25 мг кетопрофена, и, соответственно, приблизительно 10 мг диклофенака-натрия. Представленные значения, в частности, соответствуют среднему значению четырех испытаний.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтическую композицию для применения для человека и животных по меньшей мере с одним системно и/или локально действующим местно наносимым активным ингредиентом и по меньшей мере с одним фосфолипидом, который содержит по меньшей мере фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 60% по весу относительно фосфолипида, при этом фосфолипид имеет природное происхождение, при этом композиция имеет такую жидкую консистенцию, что ее можно распылять в виде капель. Согласно изобретению композиция содержит такой фосфолипид, который улучшает транспорт активного ингредиента через клеточную мембрану и который помимо по меньшей мере 60% по весу фосфатидилхолина включает масляный компонент в концентрации от 2% по весу до 4,8% по весу, при этом масляный компонент содержит свободные жирные кислоты, стеролы, моно- и диглицериды, триглицериды, токоферол и/или сложные эфиры жирных кислот. Изобретение обеспечивает улучшение транспорта активного ингредиента через клеточную мембрану при местном нанесении и высокую способность проникновения. 2 н. и 25 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 10 пр.

1. Фармацевтическая композиция для применения для человека и животных по меньшей мере с одним системно и/или локально действующим местно наносимым активным ингредиентом и по меньшей мере с одним фосфолипидом, который содержит по меньшей мере фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 60% по весу относительно фосфолипида, при этом фосфолипид имеет природное происхождение, при этом композиция имеет такую жидкую консистенцию, что ее можно распылять в виде капель, отличающаяся тем, что композиция содержит такой фосфолипид, который улучшает транспорт активного ингредиента через клеточную мембрану и который помимо по меньшей мере 60% по весу фосфатидилхолина включает масляный компонент в концентрации от 2% по весу до 4,8% по весу, при этом масляный компонент содержит свободные жирные кислоты, стеролы, моно- и диглицериды, триглицериды, токоферол и/или сложные эфиры жирных кислот.

2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид представляет собой фосфолипидную смесь и помимо фосфатидилхолина дополнительно содержит лизофосфатидилхолин, фосфатидную кислоту, фосфатидилэтаноламин и/или фосфатидилинозитол.

3. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид, имеющий природное происхождение, представляет собой фосфолипид, который выделен из растительных компонентов, в частности из семян зерновых культур и/или семян с высоким содержанием масла и, предпочтительно, из соевых бобов или из подсолнечника.

4. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 75% по весу.

5. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит фосфатидилхолин в концентрации от 75,1% по весу до 81,1% по весу.

6. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит лизофосфатидилхолин в концентрации менее 5,6% по весу, фосфатидилэтаноламин в концентрации менее 5,2% по весу и фосфатидную кислоту в концентрации менее 2,9% по весу.

7. Фармацевтическая композиция по п. 6, отличающаяся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит лизофосфатидилхолин в концентрации от 1,5% по весу до 5,5% по весу, фосфатидилэтаноламин в концентрации от 2,3% по весу до 5,1% по весу и фосфатидную кислоту в концентрации от 0,9% по весу до 2,5% по весу.

8. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что дополнительно содержит неорганический или органический растворитель.

9. Фармацевтическая композиция по п. 8, отличающаяся тем, что содержит в качестве растворителя воду и/или спирт, в частности этанол, изопропиловый спирт, один или несколько гликолей и/или глицерин.

10. Фармацевтическая композиция по п. 9, отличающаяся тем, что содержит в качестве гликоля пропиленгликоль, бутиленгликоль, пентиленгликоль и/или гексиленгликоль.

11. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что дополнительно содержит смесь растворителей, включающую воду и по меньшей мере один спирт, предпочтительно изопропиловый спирт.

12. Фармацевтическая композиция по п. 11, отличающаяся тем, что концентрация воды в жидкой композиции варьирует от 50% по весу до 95% по весу, предпочтительно от 55% по весу до 75% по весу, и концентрация по меньшей мере одного спирта варьирует от 5% по весу до 50% по весу, предпочтительно от 8% по весу до 25% по весу.

13. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что по меньшей мере один активный ингредиент выбран из группы, включающей местные анестетики, противоаллергические средства, наружные средства, активные ингредиенты против гриппозных инфекций и простудных заболеваний, активные ингредиенты для лечения нейропатий, активные ингредиенты для лечения нарушения кровообращения, химиотерапевтические лекарственные средства, хинин, противогрибковые средства, антибиотики, талидомид, серотонин, эйкозаноиды, аналгезирующие средства, противосудорожные средства, нестероидные противоревматические средства, лейкотриены, ингибиторы лейкотриена, андрогены, антиандрогены, кортикоиды, антагонисты опиатных рецепторов, вещества, ингибирующие свертывание крови, ингибиторы агрегации тромбоцитов, антагонисты гистамина, регуляторные и ферментативно действующие пептиды и белки, одно- и двухцепочечную ДНК, одно- и двухцепочечную РНК, мяРНК, олигонуклеотиды ДНК, олигонуклеотиды РНК, олигопептиды, противозудные средства, противодиабетические средства, простагландины, ингибиторы синтеза простагландина, вещества, оказывающие противовирусное или вирусостатическое действие, вещества, оказывающие антимикробное действие, активные ингредиенты против прионов, иммуносупрессорные средства, гормоны, активные ингредиенты для лечения бородавок и ран, в частности хронических ран, витамины, экстракты из растений или эссенции экстрактов из растений, психотропные лекарственные средства, активные ингредиенты, которые воздействуют на сон, аналептические средства, средства для наркоза, миорелаксанты, противоэпилептические средства, противопаркинсонические средства, противорвотные средства, противопаразитарные средства, ингредиенты, действующие на ганглии, ингредиенты, действующие на симпатическую нервную систему, ингредиенты, действующие на парасимпатическую нервную систему, лекарственные средства, оказывающие антибактериальное действие, антагонисты кальция, сердечно-сосудистые средства, противоастматические средства, противокашлевые средства, отхаркивающие средства, средства для лечения заболеваний печени, мочегонные средства, холеретики, дезинфектанты, микроэлементы, противоинфекционные средства, цитостатические средства, антиметаболиты, антагонисты гормонов, иммуномодуляторы, а также производные и соли вышеупомянутых активных ингредиентов.

14. Фармацевтическая композиция по п. 13, отличающаяся тем, что аналгезирующее средство выбрано из группы, включающей диклофенак, кетопрофен и ибупрофен.

15. Фармацевтическая композиция по п. 14, отличающаяся тем, что в композиции аналгезирующее средство представляет собой диклофенак, и диклофенак присутствует в композиции в виде соли щелочного металла, в частности в виде натриевой соли.

16. Фармацевтическая композиция по п. 14 или 15, отличающаяся тем, что диклофенак содержится в композиции в концентрации от 0,1% по весу до 10% по весу, предпочтительно в концентрации от 1% по весу до 6% по весу.

17. Фармацевтическая композиция по п. 14, отличающаяся тем, что содержит кетопрофен в качестве по меньшей мере одного активного ингредиента, и концентрация кетопрофена в композиции варьирует от 5% по весу до 15% по весу, предпочтительно от 8% по весу до 12% по весу.

18. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что включает по меньшей мере один фосфолипид в концентрации от 0,5% по весу до 20% по весу, предпочтительно в концентрации от 5% по весу до 13% по весу.

19. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что дополнительно содержит комплексообразующее средство, в частности этилентетрауксусную кислоту, по меньшей мере одно буферное средство, в частности фосфатный буфер, по меньшей мере один антиоксидант, в частности пальмитоиласкорбиновую кислоту, по меньшей мере одну отдушку и/или ароматизирующее вещество.

20. Применение по меньшей мере одного фосфолипида в качестве усилителя проникновения и/или прохождения в фармацевтической композиции по одному из предыдущих пунктов, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид, имеющий природное происхождение, содержит по меньшей мере фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 60% по весу относительно указанного по меньшей мере одного фосфолипида, и указанный по меньшей мере один фосфолипид помимо по меньшей мере 60% по весу фосфатидилхолина содержит масляный компонент в концентрации от 2% по весу до 4,8% по весу, при этом масляный компонент содержит свободные жирные кислоты, стеролы, моно- и диглицериды, триглицериды, токоферол и/или сложные эфиры жирных кислот.

21. Применение по п. 20, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит указанный масляный компонент в концентрации от 2% по весу до 4% по весу.

22. Применение по п. 20, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид представляет собой смесь фосфолипидов и помимо фосфатидилхолина дополнительно содержит лизофосфатидилхолин, фосфатидную кислоту, фосфатидилэтаноламин и/или фосфатидилинозитол.

23. Применение по п. 20, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид представляет собой фосфолипид, который выделен из растительных компонентов, в частности из семян зерновых культур и/или семян с высоким содержанием масла и, предпочтительно, из соевых бобов или из подсолнечника.

24. Применение по п. 20, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит фосфатидилхолин в концентрации по меньшей мере 75% по весу.

25. Применение по п. 24, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит фосфатидилхолин в концентрации от 75,1% по весу до 81,1% по весу.

26. Применение по п. 20, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит лизофосфатидилхолин в концентрации менее 5,6% по весу, фосфатидилэтаноламин в концентрации менее 5,2% по весу и фосфатидную кислоту в концентрации менее 2,9% по весу.

27. Применение по п. 20, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один фосфолипид содержит лизофосфатидилхолин в концентрации от 1,5% по весу до 5,5% по весу, фосфатидилэтаноламин в концентрации от 2,3% по весу до 5,1% по весу и фосфатидную кислоту в концентрации от 0,9% по весу до 2,5% по весу.