Средство для лечения хронического эндометрита на этапе реабилитации Российский патент 2018 года по МПК A61K36/73 A61K36/28 A61K36/45 A61P15/00 

Средство для лечения хронического эндометрита на этапе реабилитации.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для лечения хронического эндометрита на этапе реабилитации.

Фармакотерапия при лечении хронического эндометрита на этапе реабилитации использует различные группы лекарств (витамины, метаболическая терапия, курсы нестероидных противовоспалительных препаратов и прочее). Однако особое место среди них занимают лекарственные средства, различные по структуре и механизму действия, но обладающие комплексным воздействием на репродуктивную систему.

Несмотря на фундаментальные открытия последних лет в области лечения пациенток с хроническим эндометритом на первом этапе лечения (комплексная антибактериальная и противовоспалительная терапия) аспекты второго этапа (реабилитации) остаются актуальной проблемой современной гинекологии. Учитывая длительность и дороговизну стандартных методик реабилитации (физиотерапия, санаторно-курортное лечение), сегодня актуальна разработка новых препаратов для лечения хронического эндометрита (этап реабилитации) с использованием лекарственных растений, произрастающих на территории России.

Известен, растительный сбор, применяемый для лечения гинекологических заболеваний на этапе реабилитации. Растительный сбор «Анастасия» (патент на изобретение №:2371194, Россия), обладающий противовоспалительным и антимикробным действиями. Сбор содержит измельченную сухую траву (грушанка круглолистная, ортилия однобокая и курильский чай в соотношении 2:2:6). Растительный сбор повышает эффективность лечения, способствует уменьшению воспалительных изменений, снижает продолжительность и интенсивность болевых ощущений и, кроме того, расширяет арсенал средств растительного происхождения. Применяют сбор в виде водного настоя (1 фильтр пакетик на 200 мл воды) по 100 мл настоя во время еды 1-2 раза в день. Продолжительность приема составляет 4 недели. После этого необходимо сделать перерыв на 7-10 дней. Терапевтический эффект наблюдается после 3-4 курсов приема фиточая, т.е через 5-6 месяцев лечения.

Недостатком известного сбора является то, что он не уменьшает поствоспалительные изменения в эндометрии (очаги фиброза, склероза или кальциноза) и не нормализует его морфо-функциональное состояние (отсутствие лейкоцитарной инфильтрации, полноценное восстановление эндометрия и способность к секреторной трансформации). Таким образом, его применение носит вспомогательный характер при лечении хронического эндометрита на этапе реабилитации.

Наиболее близким по достигаемому техническому результату (прототипом) является витаминизированный фитокомплекс «Ортилида» (Патент на изобретение №2317713, Россия), который используют при заболеваниях женской половой сферы. Витаминизированный фитокомплекс выполнен в виде двух раздельно по времени принимаемых твердых препаративных форм. При этом первая твердая препаративная форма содержит траву ортилии однобокой, траву и корни сабельника болотного, корневища и корни девясила, корневища и корни копеечника чайного, сухой экстракт тысячелистника, витамины В₁, В₆ при соответствующем соотношении компонентов. Вторая твердая препаративная форма содержит траву ортилии однобокой, цветки календулы, траву горца птичьего, корни лопуха, траву душицы, сухой экстракт зверобоя, витамин С, Е.

Однако недостатком прототипа является также отсутствие влияния на нормализацию морфоструктуры эндометрия, поэтому вышеописанный витаминизированный фитокомплекс относится к профилактическим средствам и не может быть использован в качестве самостоятельной терапии на этапе реабилитации при лечении хронического эндометрита.

Авторами предлагается средство для лечения хронического эндометрита на этапе реабилитации (для коррекции пост воспалительных изменений при отсутствии инфекционного агента), полученное на основе сбора лекарственного растительного сырья: травы ортилии однобокой, соцветий календулы лекарственной, травы лабазника обыкновенного, взятых в соотношении 3:1:1., при применении которого дополнительной терапии (метаболической, физиотерапии и прочее) не требуется.

Техническим результатом заявляемого изобретения является расширение ассортимента растительных препаратов, применяемых для лечения пациенток с хроническим эндометритом на этапе реабилитации.

Технический результат достигается путем получения, предложенным способом средства для лечения хронического эндометрита, обладающего противовоспалительными и сосудорасширяющими свойствами.

Эффективность применения заявленного экстракта проиллюстрирована фигурами 1-5 в виде фотографий.

На фигуре 1 представлен образец эндометрия здоровой белой беспородной крысы на 31-ые сутки опыта при 200-кратном увеличении. Окраска гематоксилин-эозином.

На фигуре 2 представлен образец эндометрия белой беспородной крысы второй группы сравнения (экспериментальный эндометрит без лечения) на 3-й сутки опыта при 200-кратном увеличении. Окраска гематоксилин-эозином.

На фигуре 3 приведен образец эндометрия белой беспородной крысы основной группы (лечение, заявленным средством на 31-ые сутки) при 200-кратном увеличении. Окраска гематоксилином и эозином.

На фигуре 4 приведен образец эндометрия маточного рога белой беспородной крысы первой группы сравнения (лечение нимесулидом) на 17-ые сутки опыта при 200-кратном увеличении. Окраска гематоксилином и эозином.

На фигуре 5 представлен образец эндометрия белой беспородной крысы первой группы сравнения (лечения нимесулидом), на 31-ые сутки опыта при 200-кратном увеличении. Окраска гематоксилином и эозином.

Процесс экстракции состоял из нагрева экстрагента, предварительного экстрагирования сырья в обогреваемой камере экстрагентом, пропитки сырья экстрагентом и экстрагирования сырья в вакуум-импульсном режиме циклами, включающими нагрев горячим газовым теплоносителем и создание вакуума в камере в режиме скоростного вакуум-импульсного воздействия со ступенчатым многократным снижением давления с атмосферного до давления не более 0,01 МПа, а затем с предыдущим давлением не более 0,0001 МПа с последующей выдержкой под вакуумом до стабилизации температуры смеси и сбросом вакуума в конце цикла подачей в камеру экстрагирования нагретого газового теплоносителя, причем нагрев сырья осуществляют до температуры, не превышающей 39°С.

Для экстрагирования применялся сухой сбор, состоящий из трех частей травы ортилии однобокой (Orthilia secundase L. House), одной части соцветий календулы лекарственной (Calendula officinalis L.), одной части травы лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris Moench.).

Трава ортилии однобокой обладает уникальным составом: иридоиды, гидрохинон, арбутин, метиларбутин, кумарины, танниды, дубильные вещества, флавоноиды, витамин С, органические кислоты: виннокаменная и лимонная, а также микроэлементы: железо, медь, цинк, марганец и титан. Иридоиды обладают антиоксидантными, противовирусными, гепатопротекторными, желчегонными, гипогликемическими, болеутоляющими, антимутагенными, противоопухолевыми, иммуномодулирующими и слабительным действиями. Арбутин обуславливает антимикробное действие в почках и мочеточниках. Кумарины - сильные антикоагулянты (угнетающие активность свертывающей системы крови). Танниды уменьшают кровоточивость, при взаимодействии с белками крови они способствуют ее свертыванию. Флавоноиды обладают противовоспалительным, желчегонным, диуретическим действием, оказывают седативное действие. Укрепляют стенки капилляров. В терапевтической практике сапонины используются как отхаркивающие, мочегонные, тонизирующие средства. При легком раздражающем действии сапонинов на слизистую желудка происходит усиление секреции всех желез. Разжижает вагинальный секрет, этот эффект важен при лечении бесплодия.

Противопоказания к применению травы ортилии однобокой: гастрит; индивидуальная непереносимость; беременность и кормление грудью.

В соцветиях календулы лекарственной содержатся каротиноиды и флавоноиды (каротин, ликопин, виолаксантин, цитраксантин, рубиксантин, флавоксантин, флавохром), полисахариды, полифенолы, смолы (около 3,4%), слизь (2,5%), азотсодержащие слизи (1,5%), органические кислоты (яблочная, аскорбиновая и следы салициловой). Экспериментальными исследованиями установлено, что препараты календулы обладают успокаивающим действием на центральную нервную систему, снижают рефлекторную возбудимость. Доказаны бактерицидные свойства календулы в отношении ряда возбудителей (особенно стафилококков и стрептококков). Кроме этого отвары и настои календулы обладают выраженным мочегонным действием, а также хорошо помогают при воспалении мочевого пузыря. [Орловская Т.В., Ушакова Л.С., Маринина Т.Ф. Изучение плодов календулы лекарственной с целью создания лекарственных средств // Современные проблемы науки и образования. 2013. №4. С. 343.]

Противопоказания к применению соцветий календулы лекарственной - гиперчувствительность к компонентам соцветий календулы лекарственной.

Лабазник обыкновенный содержит аскорбиновую кислоту, следы кумаринов, фенольные соединения, фенолгликозиды, дубильные вещества, флавоноиды, халконы, фенолкарбоновые кислоты (кофейную и эллаговую), катехины, ароматические соединения (ванилин, метилсалицилат, салициловый альдегид), стероиды, камфору и высшие жирные кислоты. Лабазник обладает сосудоукрепляющим, противовоспалительным, успокоительным и нейропротекторным и актопротекторным действием [Чехани Н.Р., Павлова Л.А., Козин С.В., Теселкин Ю.О. Оценка химического состава и специфического фармакологического действия нового актопротекторного средства // Бутлеровские сообщения. 2014. Т. 38. №4. С. 58-62.]

Противопоказания к применению лабазника обыкновенного -индивидуальная неприменимость, беременность, кормление грудью.

Основной проблемой реабилитации при хроническом эндометрите является сложность воздействия на поствоспалительные изменения эндометрия (склероз, фиброз, кальциноз) и нормализация морфо-функционального строения эндометрия. Авторами предлагается средство из лекарственных растений для лечения хронического эндометрита на этапе реабилитации, обладающее противовоспалительным и сосудорасширяющим свойствами, как вариант доступной и удобной в приеме реабилитационной терапии. Заявляемое средство получают из сухого сбора, содержащего три части ортилии однобокой (Orthilia secundase L. House), одну часть календулы лекарственной (Calendula officinalis L.), одну часть лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris Moench.). Экстрагирование проводится методикой вакуумно-импульсной экстрактракции и концентрации. Сухой сбор, измельченностью до 8 мм заливают экстрагентом (вода), нагретым до 60°С в соотношении 1:6 и настаивают под вакуумом в течение 8 часов без поддержания исходного значения температуры. Далее эстрагент сливается и добавляется примерно такой же объем чистого экстрагента нагретого до температуры 60°С, и ведется экстрагирование вакуумно-импульсным методом в течение 2 часов с принудительной циркуляцией экстрагента.

В итоге общее соотношение сырья: воды - 1:13 (с учетом воды для настаивания) экстракты объединяют и фильтруют. Далее полученное извлечение упаривают и высушивают, полученный сухой экстракт измельчают.

Для подтверждения эффективности заявляемого средства был проведен эксперимент, для которого были использованы 90 самок белых беспородных крыс, в возрасте двух месяцев, средней массой 202,5 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария на обычном пищевом рационе и свободном доступе к воде и пище, без присутствия самцов, что гарантировало у них фазу покоя эстрального цикла. После карантина 10 дней у 70 из 90 самок был вызван эндометрит, путем однократного внутриматочного введения водного раствора формалина 2% -0,1 мл. Далее самки были выдержаны 1 эстральный цикл, для формирования ответной реакции эндометрия и приближения модели к хроническому эндометриту. После этого все крысы были разделены на четыре группы.

Группа контроля - 20 здоровых крыс без экспериментального эндометрита, были забиты по десять штук на третьи и 31-ые сутки опыта.

Основная опытная группа - 20 крыс, которым после создания и формирования экспериментального эндометрита внутрижелудочно вводили полученный экстракт, разведенный в теплой дистированной воде 1:5 по 1 мл один раз в день в течение 21-их суток. Крысы основной группы были умерщвлены по десять штук на 17-ые и 31-ые сутки опыта.

Первая группа сравнения - 20 крыс, которым после создания и формирования экспериментального эндометрита внутрижелудочно вводили нимесулид - 0,8 мг в 1 мл воды 1 раз в день в течение 14 дней. Крысы первой группы сравнения были забиты аналогично крысам основной группы.

Вторая группа сравнения - 30 крыс с экспериментальным эндометритом, которые не получали никакого лечения. Десять крыс были умерщвлены на третьи сутки опыта для подтверждения модели острого экспериментального эндометрита. Остальные крысы были умерщвлены также как в основной и первой группе сравнения на 17-ые и 31-ые сутки опыта. Все крысы были умерщвлены методом кранио-цервикальной декапитации под эфирным наркозом. У всех умерщвленных крыс, забирался материал - матка, фиксировался в нейтральном 10% формалине и проводился по классической методике изготовления гистологических препаратов с окраской гематоксилином и эозином.

У крыс контрольной группы (без экспериментального эндометрита) отмечалась стабильно нормальная активность, оцениваемая по реакции на пишу. Крысы этой группы значимо прибавили в весе к концу опыта (215,0±2,23 и 232,0±3,17 г; р≤0.01). Они были умерщвлены по 10 штук на третьи и на 31-ые сутки опыта для гистологического сравнения состояния их эндометрия с таковым у крыс основной группы и групп сравнения. Эндометрий крыс в фазе покоя имел нормальное строение, как на третьи, так и 31-ые сутки опыта. Интактный эндометрий маточного рога крысы имел нечеткое разделение на функциональный и базальный слои и занимал 2/3 всей толщины матки, был выстлан однослойным призматическим эпителием с удлиненными гиперхромными ядрами. В волокнистой строме присутствовали мезенхимальные веретенообразные и лимфоцитоподобные клетки. Прямые маточные железы в строме расположены редко. Эпителий желез однорядный цилиндрический с округлыми ядрами (фиг. 1). У крыс контрольной группы без экспериментального эндометрита отмечалась стабильно нормальная активность, оцениваемая по реакции на пищу. Крысы этой группы значимо прибавили в весе к концу опыта (212,0±2,23 и 237,0±3,17 г; р≤0.01). Они были забиты по 10 штук на третьи и на 31-ые сутки опыта для гистологического сравнения состояния их эндометрия с таковым у крыс основной группы и групп сравнения. Эндометрий крыс в фазе покоя имел нормальное строение, как на третьи, так и 31-ые сутки опыта, (фиг. 1).

Крысы, не получавшие лечения экспериментального эндометрита (вторая группа сравнения), имели стабильно сниженную активность и на момент секции в конце опыта имели значимую убыль средней массы тела от исходной (202,0±2,26 и 185,0±3,27; р≤0.01). На третьи сутки после введения формалина модель экспериментального эндометрита подтверждена гистологическими данными. Поверхностный эпителий эндометрия и эндометриальных желез по всему периметру поврежден: наблюдается его дистрофия и некроз. Под поврежденным поверхностным эпителием в строме определялся воспалительный инфильтрат, состоящий преимущественно из нейтрофильных и эозинофильных лейкоцитов. Единичные лейкоциты встречались в более глубоких слоях стромы (базальный слой). Строма отечна (фиг. 2). На 17-ые сутки опыта в эндометрии крыс наблюдалась очаговая эпителизация эндометрия. Регенерирующий эпителий уплощен, эпителий желез не восстановился. Воспалительный инфильтрат располагался диффузно по всему эндометрию. В инфильтрате появились моноцитарные макрофаги. Отмечалась повышенная клеточность стромы. Синусоидные капилляры резко расширены, эндотелий капилляров набухший. На 31-ые сутки опыта изменился состав воспалительного инфильтрата в эндометрии крыс: в большом количестве определялись макрофаги, эозинофилы, появились лимфоцитоподобные клетки стромы эндометрия. Воспалительная инфильтрация определялась не только в базальном слое эндометрия, но и во внутреннем мышечном слое матки, что характерно для хронизации процесса в эндометрии.

Крысы основной группы, получавшие для лечения экспериментального эндометрита средство, полученное авторами, имели стабильно нормальную активность и вес на протяжении всего опыта. У всех крыс, умерщвленных на 17-ые и 31-ые сутки, строение эндометрия соответствовало норме. Отмечено полное восстановление поверхностного цилиндрического эпителия эндометрия и желез, структуры трубчатых желез. В результате эксперимента выявлено местное сосудорасширяющее свойство средства, которое не характерно для отвара ортилии однобокой, отвара календулы и отвара лабазника (исследования проведены ранее и опубликованы). Сосудорасширяющее действие доказано гистологически выраженым полнокровием артериол эндометрия и аретрий в сосудистом и надсосудистом слоях мышечной оболочки. (фиг. 3)

Крысы первой группы сравнения, получавшие для лечения экспериментального эндометрита нимесулид на протяжении всего опыта, имели стабильно нормальную активность. На момент секции в конце эксперимента данные крысы не имели значимой прибавки средней массы тела от исходной массы (212,0±2,10 и 210,0±2,88; р≥0.05). На 17 день опыта у всех крыс этой группы наступила полная эпителизация поверхности эндометрия, восстановилась структура трубчатых желез. Произошла элиминация клеток воспалительного инфильтрата в функциональном слое эндометрия, но в базальном и частично внутреннем мышечном слое сохранялась инфильтрация эозинофилами. (Фиг. 4) У крыс этой группы на 31-ые сутки опыта отмечалась вялость и снижение активности. Лейкоцитарная инфильтрация вокруг желез, найденная в 30% случаев (6 крыс), возможно, связана с вторичной инфекцией (Фиг. 5). Таким образом на 31-ые сутки опыта при лечении экспериментального эндометрита нимесулидом происходит полная регенерация эпителиальных структур, но остается воспалительная инфильтрация в базальном слое.

Таким образом, заявляемое средство обладает противовоспалительным и сосудорасширяющим свойствами, приводящими к уменьшению поствоспалительных изменений и восстановлению морфо-функционального строения эндометрия через 21 день (3 эстральных цикла) и имеет следующие преимущества перед известным: высокая биодоступность, отсутствие в конечном продукте неидентичного для организма экстрагента (спирта этилового), создание более стабильной формы экстракционного препарата (сухой экстракт) для дальнейшего использования в производстве технологически более совершенных лекарственных форм.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству для лечения хронического эндометрита. Средство для лечения хронического эндометрита на этапе реабилитации, полученное из сбора растительного сырья: травы ортилии однобокой, соцветий календулы лекарственной, травы лабазника обыкновенного, взятых в определенном соотношении, при этом сухой измельченный сбор заливают экстрагентом – нагретой водой, настаивают под вакуумом, экстракт сливают и добавляют такое же количество нагретого экстрагента, экстрагируют вакуумно-импульсным методом с принудительной циркуляцией экстрагента, после чего полученные экстракты объединяют, фильтруют, упаривают и высушивают при определенных условиях. Вышеописанное средство эффективно для лечения хронического эндометрита на этапе реабилитации, обладает выраженным противовоспалительным и сосудорасширяющим действием. 5 ил.

Средство для лечения хронического эндометрита на этапе реабилитации, полученное из сбора растительного сырья: травы ортилии однобокой, соцветий календулы лекарственной, травы лабазника обыкновенного, взятых в соотношении, в частях, 3:1:1 соответственно, при этом сухой сбор, измельченный до 8 мм, заливают экстрагентом - водой, нагретой до 60°С, в соотношении 1:6, настаивают под вакуумом в течение 8 ч без поддержания исходной температуры, экстракт сливают и добавляют такое же количество экстрагента, нагретого до температуры 60°С, экстрагируют вакуумно-импульсным методом в течение 2 ч с принудительной циркуляцией экстрагента, после чего полученные экстракты объединяют, фильтруют, упаривают и высушивают.