Изобретение относится к области медицины, в частности, экспериментальной медицины и стоматологии и может быть использовано для изучения этиологии и патогенеза пародонтита.
Воспалительные заболевания пародонта остаются одной из наиболее актуальных проблем современной стоматологии. В настоящее время наблюдается увеличение числа больных с воспалением тканей пародонта с преобладанием в их структуре генерализованных форм гингивита и пародонтита [1]. По данным ВОЗ более 80% населения в возрасте от 60 лет и старше страдают воспалительными и воспалительно-деструктивными заболеваниями пародонта, приводящими к потере зубов, появлению очагов хронической инфекции в полости рта, микробной сенсибилизации и другим расстройствам [2].
Заболевание особенно опасно в пожилом возрасте, на фоне снижения общего иммунитета и реактивности организма, зачастую при прогрессирующей потере плотности костной ткани.
Для практического использования новых передовых методов терапии и новых препаратов при лечении пародонтита требуется отработка всех параметров внедряемых средств в эксперименте на живых организмах.
Наиболее эффективными показали себя экспериментальные модели пародонтита, воспроизведенные на животных [3].
Известен способ моделирования пародонтита, согласно которому экспериментальным животным - крысам, вводят хлористый аммоний в дозе 3,5-4,5 мг на 1 г массы тела один раз в сутки в течение не менее 30 дней [4].
Преимущества способа: быстрое получение искомой модели пародонтита.
Недостатком известного способа является то, что пародонтит моделируется метаболическим ацидозом, что дает недостаточно полную морфологическую картину моделируемой патологии, в этиологии которого ведущее место занимает острое или хроническое воспаление. Кроме этого, процесс моделирования требует ежедневных введений в пищу строго дозированного количества хлористого аммония.
Известен способ получения модели воспаления пародонта у крыс, вызванного острой механической травмой мягких тканей десны, в котором авторы под легким эфирным наркозом вводили крысам металлический крючок так, чтобы животные не могли его уронить, с губной стороны параллельно зубному ряду на глубину 1,5 мм в зубодесневую борозду в области верхних резцов [5].
Преимущества метода: простота выполнения.
Недостатком известного способа является его ненадежность и повышенная травматичность, поскольку крепление крючка в десне ничем не фиксируется и может быть нарушено животным.
Известен способ получения модели пародонтита, принятый в качестве прототипа, включающий помещение половозрелых крыс в общую клетку площадью 0,018 м на особь, в котором перед помещением в клетку под эфирным наркозом, используя стоматологический цемент, создают искусственную зубную бляшку вокруг шейки верхних и нижних резцов с шероховатой поверхностью, заходящую под десну на 0,1-0,5 мм, при этом в процессе моделирования животные получают кашицеобразную пищу [6].
Преимущества метода: сочетанное воздействие эмоционального стресса, использование механического раздражителя (стоматологический цемент) и кашицеобразной пищи, способствующей, как известно, формированию микробной бляшки на поверхности зубов и десен, относительно короткий процесс моделирования пародонтита (не более месяца).
Недостатком способа получения модели пародонтита по методу прототипа является его высокая трудоемкость, операционная травма краевой десны, сложность, обусловленная использованием специального цемента и необходимостью формирования искусственных зубных бляшек в полости рта животных для создания модели воспалительного процесса. Проявления воспаления десен, полученное с помощью методики прототипа, не типичны по своим морфологическим свойствам для пародонтита у человека.
Поставлена задача: разработать простой и надежный способ получения модели хронического пародонтита у крыс, исключающий операционную травму пародонта, обеспечивающий повышение достоверности патологического процесса, путем моделирования у подопытных животных воспаления пародонта, сходного по патоморфологическим проявлениям с пародонтитом у человека.
Поставленная задача решена за счет сочетания воздействия местных и общих факторов на фоне изменения реактивности организма, что полностью соответствует современному взгляду на этиологию пародонтита.
В заявляемом способе получения экспериментальной модели пародонтита путем воздействия эмоциональным стрессом на экспериментальных животных, например, половозрелых крыс, за счет помещения 10-11 особей в клетку при площади 0,018 м2/особь, в отличие от прототипа перед помещением в клетку каждой экспериментальной особи под общей анестезией на фоне внутрибрюшинного тиопенталового наркоза из расчета 0,1 мл 5% тиопентала натрия на 100 грамм веса животного, создают дисбактериоз ротовой полости путем внутримышечного введения линкомицина гидрохлорида дозой 30 мг 100 грамм веса животного и локального поражения десен и тканей преддверия рта аппликацией суспензии пчелиного яда в дозе 2 мг на 100 грамм веса животного. Для ускорения моделирования дополнительно к стандартному рациону питания крыс добавляют подсолнечное масло (2 мл на одного животного), которое нагревают в присутствии 2% сульфата меди в течение 24 часов до достижения перекисного числа выше 40 ед.
Аппликации проводятся в двух участках преддверия рта между нижней губой и резцами нижней челюсти и между молярами верхней и нижней челюстей и щекой справа.
Заявляемый способ создания экспериментального пародонтита отличает простота выполнения, хорошая выживаемость подопытных животных, достоверность патологического воспалительного процесса тканей пародонта, сходного по патоморфологическим проявлениям с пародонтитом у человека.
Экспериментальные исследования выполнены на 140 белых половозрелых крысах массой 220-250 г, которые находились на стандартном пищевом и водном рационе в соответствии с санитарно-гигиеническими нормами. Опыты проводили с соблюдением Международных принципов Европейской конвенции о «Защите позвоночных животных, используемых для экспериментов и других научных целей» (Страсбург, 1986), «Общими этическими принципами экспериментов на животных» (Россия, 2011), в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики (Национальный стандарт «Принципы надлежащей лабораторной практики» ГОСТ Р 53434-2009) и положительным заключением этического комитета СтГМУ №32 от 12.02.2014. Исследование осуществлено в рамках Государственного задания Министерства здравоохранения Российской Федерации для ГБОУ ВПО «Ставропольский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации по осуществлению научных исследований и разработок по теме: «Стволовые клетки пульпы зуба в регенерации и иммуномодуляции» от 14.01.2014 №302/08 совместно с Всероссийским НИИ овцеводства и козоводства и Ставропольским государственным аграрным университетом (Ставрополь).
Все животные были разделены на 2 группы: основную и контрольную (по 70 животных в каждой группе).
В основной группе проводили моделирование экспериментального пародонтита по разработанному способу, в контрольной группе - по методу прототипа.
Пример 1 (основная группа): Брали 70 особей половозрелых крыс. Под внутрибрюшинным тиопенталовым наркозом из расчета 0,1 мл 5% тиопентала натрия на 100 грамм веса животного, создавали дисбактериоз ротовой полости путем внутримышечного введения линкомицина гидрохлорида дозой 30 мг 100 грамм веса животного. Затем проводили локальное поражение десен и тканей преддверия рта аппликацией суспензии пчелиного яда в дозе 2 мг на 100 грамм веса животного. Далее животных помещали в общую клетку при площади 0,018 м2 на особь. В течение всего времени моделирования к стандартному рациону питания крыс добавляли подсолнечное масло в количестве 2 мл на одного животного, которое нагревали в присутствии 2% сульфата меди в течение 24 часов до достижения перекисного числа выше 40 ед. Признаки воспаления десны в основной группе наблюдали на 3 день эксперимента. На 14-е сутки наблюдали отечность и цианоз десны, в области резцов наблюдали появление пародонтальных карманов глубиной до 2 мм, подвижность резцов 2-3 степени. На 21-е сутки рентгенологически определяли все признаки деструкции вершины межзубной перегородки, включая лизис последней.
При микроскопическом анализе гистологических препаратов визуально отмечено появление инфильтрата стадии установившегося воспаления на 14-е сутки, что соответствует острой фазе воспаления. Появление в поле зрения плазматических клеток выявлено также на 14-е сутки, а значительное их увеличение на 21-е сутки исследования.
На фиг. 1 изображен гистологический срез зубоальвеолярного сегмента экспериментального животного на 14-е сутки исследования, на котором в поле зрения видно большое количество плазматических клеток (до 40% от всех клеток экссудата), что подтверждает наличие острого воспалительного процесса.
На фиг. 2 изображен гистологический срез альвеолярного отростка экспериментального животного на 21-е сутки исследования, на котором видна фаза прогрессирующего воспаления, плазматические клетки составляют до 80% всех клеток экссудата.
Исследованная гистологическая картина свидетельствует о хронизации воспаления и активном вовлечении иммунных механизмов воспаления от 14-х к 21-м суткам эксперимента. Количество плазматических клеток нарастает пропорционально тяжести процесса и степени разрушения тканей. Глубокие поражения претерпевают сосуды пародонта, его кровоснабжение нарушается. Прогрессирует разрушение коллагеновых тканей элементов и активная резорбция кости.
Пример 2 (контрольная группа): Брали 70 особей половозрелых крыс.
Проводили формирование модели пародонтита по методу прототипа, включающее помещение половозрелых крыс в общую клетку площадью 0,018 м2 на особь, в котором перед помещением в клетку под эфирным наркозом, используя стоматологический цемент, создавали искусственную зубную бляшку вокруг шейки верхних и нижних резцов с шероховатой поверхностью, заходящую под десну на 0,1-0,5 мм. В течение всего времени моделирования животные получали кашицеобразную пищу, исключающую самоочищение зубов. Признаки начального воспаления десны (гингивита) в контрольной группе наблюдали на 20-30 день эксперимента. На 40-е сутки у части животных наблюдали отечность и цианоз десны, в области резцов наблюдали появление пародонтальных карманов глубиной 1-2 мм, появление подвижности резцов первой степени. Рентгенологических признаков деструкции вершины межзубной перегородки не установлено.
Поражение пародонта у животных контрольной группы (прототип) наблюдается лишь через 30-40 дней после начала эксперимента, однако воспалительный процесс носит характер гингивита (начальное воспаление десен) и не позволяет добиться полноценной картины пародонтита (воспаление всех тканей пародонта, подвижность зубов 2-3 степени, деструкция вершин межзубных перегородок).
Таким образом, при использовании разработанного способа моделирования экспериментального пародонтита создается изолированное поражение пародонта у каждого животного, не отягощенное какой-либо другой патологией и имеющее в своей основе как местные (локальное поражение десен, диета), так и общие (стресс) патогенетические факторы. По своим патоморфологическим проявлениям моделируемое у животных основной группы поражение аналогично картине пародонтита у человека и воспроизводится с высокой степенью надежности.
Разработанный способ позволяет изучать вопросы этиологии и патогенеза пародонтита, что является необходимым для разработки профилактических мероприятий и лечения указанной патологии.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СТОМАТОЛОГИЧЕСКИЙ ГЕЛЬ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ПАРОДОНТИТА | 2017 |
|
RU2703530C2 |
СПОСОБ СОЗДАНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ОСТЕОПОРОЗА | 2017 |
|
RU2676658C1 |
Способ экспериментального моделирования пародонтита | 2016 |
|
RU2625295C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОДЕЛИ ПАРОДОНТИТА | 2003 |
|
RU2252009C2 |
СПОСОБ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ ПАРОДОНТИТА | 2010 |
|
RU2433485C1 |
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПАРОДОНТИТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ | 2017 |
|
RU2699497C2 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОДЕЛИ ХРОНИЧЕСКОГО ПАРОДОНТИТА У КРЫС | 2014 |
|
RU2545923C1 |
СПОСОБ СОЗДАНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ПЕРИИМПЛАНТИТА | 2019 |
|
RU2730970C1 |
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПАРОДОНТИТА НА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ | 2023 |
|
RU2808048C1 |
Способ моделирования рецессии десны | 2022 |
|
RU2791563C1 |
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной стоматологии, и может быть использовано для получения экспериментальной модели пародонтита. Помещают половозрелых крыс в общую клетку площадью 0,018 м2 на особь. Перед помещением в клетку каждому животному под наркозом внутримышечно вводят линкомицина гидрохлорид дозой 30 мг на 100 г веса. Производят аппликацию суспензии пчелиного яда в области десен и преддверия рта в дозе 2 мг на 100 г веса животного. При этом для ускорения моделирования дополнительно к стандартному рациону питания крыс добавляют 2 мл подсолнечного масла на одного животного, которое нагревают в присутствии 2% сульфата меди в течение 24 часов до достижения перекисного числа выше 40 ед. Способ позволяет просто и надежно получить экспериментальную модель пародонтита, повысить достоверность создания патологического процесса воспаления пародонта, сходного по патоморфологическим проявлениям с пародонтитом у человека, за счет наиболее оптимального комплекса мероприятий. 2 ил., 2 пр.
Способ получения экспериментальной модели пародонтита, включающий помещение половозрелых крыс в общую клетку площадью 0,018 м2 на особь, отличающийся тем, что перед помещением в клетку каждому животному под наркозом внутримышечно вводят линкомицина гидрохлорид дозой 30 мг на 100 г веса, производят аппликацию суспензии пчелиного яда в области десен и преддверия рта в дозе 2 мг на 100 г веса животного, при этом для ускорения моделирования дополнительно к стандартному рациону питания крыс добавляют 2 мл подсолнечного масла на одного животного, которое нагревают в присутствии 2% сульфата меди в течение 24 часов до достижения перекисного числа выше 40 ед.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОДЕЛИ ПАРОДОНТИТА | 2003 |
|
RU2252009C2 |
СПОСОБ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО МОДЕЛИРОВАНИЯ ПАРОДОНТИТА | 2010 |
|
RU2433485C1 |
Приспособление для сшивания бумаг | 1929 |
|
SU15182A1 |
JP 2011109951 A, 09.06.2011 | |||
БЫКОВА Н.И | |||
Показатели клеточного и гуморального иммунитета при экспериментальном воспалении тканей пародонта | |||
Приспособление для точного наложения листов бумаги при снятии оттисков | 1922 |
|
SU6A1 |
AIUSHIEVA S et al | |||
Phytofilm Khastaplen use in case of experimental parodontitis modelling | |||
Stomatologiia (Mosk) | |||
Колосоуборка | 1923 |
|
SU2009A1 |
GEORGES E | |||
Periodontitis | |||
Original model in human pathology/ Inf Dent | |||
Механизм для сообщения поршню рабочего цилиндра возвратно-поступательного движения | 1918 |
|
SU1989A1 |
Авторы
Даты
2019-01-09—Публикация
2017-10-09—Подача